CN1055688C - 提取含紫杉醇干膏的方法 - Google Patents
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Abstract
一种提取含紫杉醇干膏的方法包括：将红豆杉茎皮或叶粉碎、渗浸、减压浓缩提取，所述的渗浸溶剂为95%乙醇与氯仿的混合液；由液压浓缩得到的深绿色浸膏经水稀释后以石灰水调pH值至7.5-8.0，沉淀、过滤，滤液以混合多氯代烷或氯仿提取，减压浓缩干燥得到含紫杉醇干膏。本方法以简单沉淀去除杂质80%，而紫杉醇及相关成分不受影响，提高过柱前被分离成分的含量，减少过柱次数，干膏的紫杉醇含量高。
Description
本发明涉及一种从西藏红豆杉叶或茎皮中提取紫杉醇的方法，特别是一种从西藏红豆杉叶或茎皮中提取紫杉醇干膏的方法。
紫杉醇是目前世界上发现的最有效的抗癌物质之一。国外人工合成紫杉醇的价格是从天然提取的数百倍，目前国内外主要是从红豆杉属植物中提取及组织培养来获得紫杉醇。在天然提取的方法中，关键是提取分离方法，但由于紫杉醇在植物中化学性质不稳定，在植物中含量低，因此较中草药成分的提取分离难度大。
据极道，我国主要有红豆杉属红豆杉4个和一个变种，它们是西藏红豆杉(Tasus wallichiann Zucc)，云南红豆杉(T、yumaneusis chenget L.k.Fu)红豆杉(T.chinensis(Pilger)Rehd)，东北红豆杉(T.cuspidata sieh et zucc)和南方红豆杉(美丽红豆杉)(T.chinensis varmairer(Lemee et levl)cheng et L.K.Fu)。
上述种属珍贵植物，为了不破坏成树，保护资源，一般都是从叶或枝叶中提取，但枝叶中紫杉醇含量比树皮低。
已有的从红豆杉茎叶中提取紫杉醇的方法是：粉碎，溶剂浸提，浸出液浓缩得深绿色膏状物，溶剂提取，硅胶柱层析后得粗产品。再经重结晶纯化和柱层析分离获紫杉醇。
上述方法中，在柱层分离时，至少要1-2个柱分离用梯度洗脱，梯度洗脱所用溶剂量较大，而样品被分离成分含量越低，分离也麻烦，在柱分离的每个流分均要用薄层层析监测成分后，待合并再分离。因此，有必要提高过柱前被分离成分含量，减少过柱次数，提高过柱质量。另外，用已有的提取方法所获得的紫杉醇总量较低。
本发明目的是提供一种提取含紫杉醇干膏的方法，其工艺简单，操作方便，干膏的得率高。
为达到上述目的，本发明采用以下技术方案，这种提取含紫杉醇干膏的方法包括：将红豆杉茎皮或叶粉碎、渗浸减压浓缩提取，其特征在于：所述的渗浸溶剂为95％乙醇与氯仿的混合液：由减压浓缩得到的深绿色浸膏经水稀释后以石灰水调PH值至7.5-8.0，沉淀、过滤，滤液以混合多氯代烷或氯仿提取，减压浓缩干燥得到含紫杉醇干膏。
上述稀释用水的量与浸膏量比为0.5-1.5∶1，最好控制在1∶1(体积比)，所述的提取用溶剂可以是混合多氯代烷氯仿
以下结合流程框图和实施例对本发明作详细说明：
图1：本发明流程框图
图1中，以红豆杉的茎皮或叶为原料，原料经粉碎1得粗粉，粗粉经渗浸2，渗浸采用混合溶剂，可采用95％乙醇与氯仿的混合液，渗浸液经减压浓缩3得到深绿色浸膏，加水稀释后加石灰水调PH值到7.5-8.0，经沉淀过滤4，并洗涤沉淀至无色，以氯仿提取5，经减压浓缩、干燥6，得到含紫杉醇干膏。
实施例1：
取西藏红豆杉干叶5kg，粉碎，用95％乙醇与氯仿(85∶15)渗浸，渗浸液重量为样品重量的5倍，减压浓缩得深绿色浓渗液，加水约1倍量(体积/体积)，加石灰水调PH值到7.5-8.0，待沉淀后，过滤，洗涤沉淀至无色，氯仿提取，减压浓缩、干燥，得100g浅黄绿色干膏，HPLC(高效液相色谱仪)测定含紫杉醇1.6％。含10-去乙酰巴卡丁III28％。
实施例2
取西藏红豆杉茎皮，采用实施例1的方法，制得紫杉醇干膏。HPLC测定紫杉醇含量3.3％。
实施例1与实施例2提取紫杉醇结果比较见表1
表1
| 叶 | 皮 | |
| 样 品 重 | 5000g | 5000g |
| 干 膏 重 | 100g | 80g |
| 干膏含紫杉醇 | 1.6％ | 3.3％ |
| 紫杉醇应得率 | 3.2/万 | 5.3/万 |
本发明优点：用简单的沉淀除杂质方法事先除去大部分杂质，提高过柱前被分离成分的含量，减少过柱次数，也不受过柱分离量的限制。经试验此步沉淀可除去约80％的杂质，而紫杉醇及相关成分如巴卡丁III(baccatin III)、10-去乙酰巴卡丁III(10-deacetly baccatinIII)等不受影响，本工艺简单方便，而且紫杉醇粗品中的紫杉醇含量较其他方法高，例如：可达1.6％，(以干叶原料)茎皮原料其紫杉醇含量3.3％。
Claims (3)
1、一种提取含紫杉醇干膏的方法，它包括：将红豆杉茎皮或叶粉碎、渗浸减压浓缩提取，其特征在于：所述的渗浸溶剂为95％乙醇与氯仿的混合液；由减压浓缩得到的深绿色浸膏经水稀释后以石灰水调PH值至7.5-8.0，沉淀、过滤，滤液以混合多氯代烷或氯仿提取，减压浓缩干燥得到含紫杉醇干膏。
2、根据权利要求1所述的提取含紫杉醇干膏的方法，其特征在于：所述深绿色浸膏以水稀释时，加水量∶浸膏量＝0.5-1.5∶1体积比。
3、根据权利要求1所述的提取含紫杉醇干膏的方法，其特征在于：以水稀释时，加水量∶浸膏量＝1∶1体积比。
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| CN1182740A CN1182740A (zh) | 1998-05-27 |
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1996
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