CN117899143A - 藏边大黄提取物及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种藏边大黄提取物的制备方法,包括以下步骤:S1、向藏边大黄粉末中加入β‑葡萄糖苷酶,再加入低共熔溶剂,搅拌酶解,得到酶解液,其中,所述低共熔溶剂包括甜菜碱、乳酸、水的混合物;S2、将酶解液过滤,得到滤渣和酶解溶液;S3、将滤渣依次用纯水、低共熔溶剂浸提,并过滤得到浸提液;S4、将浸提液和酶解溶液混合均匀后,经干燥并灭菌得到藏边大黄提取物固体。本发明通过同时加入由甜菜碱和乳酸组成的低共熔溶剂和β‑葡萄糖苷酶,即可实现藏边大黄的酶解和提取,提高了藏边大黄中有效成分蒽醌类、二苯乙烯类和鞣质类化合物的提取率。

Description

藏边大黄提取物及其制备方法
技术领域
本发明涉及藏药有效成分提取技术领域。更具体地说,本发明涉及一种藏边大黄提取物及其制备方法。
背景技术
藏边大黄的化学成分主要有蒽醌类、二苯乙烯类和鞣质类化合物,其中,蒽醌类化合物,如大黄素、大黄素甲醚和大黄酚,其具有明显的抗菌消炎、免疫调节、抗衰老以及抗肿瘤等作用;二苯乙烯类化合物含量较高,而具有二苯乙烯母核或其聚合物的一类物质总称为芪类化合物,它具有广泛的生物活性,除早已知道的抗菌作用,近年来又发现有降血脂,降血糖,保肝、扩张毛细血管改善微循环、扩张冠状血管及降压等作用。
申请号为201110124226.9的现有技术公开了一种藏边大黄提取物及其制备方法,是藏边大黄依次经乙醇渗漉浸提与乙醇洗脱的提取物,此方法的提取时间长,提取率低,有效成分含量低等问题,且采用乙醇进行提取,易燃易爆对环境造成负担,且该方法分多步进行,费时费力,增加成本。
因此,如何设计藏边大黄提取物的制备方法,以解决上述技术缺陷是值得深思的。
发明内容
本发明的一个目的是解决至少上述问题,并提供至少后面将说明的优点。
为了实现根据本发明的这些目的和其它优点,提供了一种藏边大黄提取物的制备方法,包括以下步骤:
S1、向藏边大黄粉末中加入β-葡萄糖苷酶,再加入低共熔溶剂,搅拌酶解,得到酶解液,其中,所述低共熔溶剂包括甜菜碱、乳酸、水的混合物;
S2、将酶解液过滤,得到滤渣和酶解溶液;
S3、将滤渣依次用纯水、低共熔溶剂浸提,并过滤得到浸提液;
S4、将浸提液和酶解溶液混合均匀后,经干燥并灭菌得到藏边大黄提取物固体。
优选的是,步骤S1和步骤S3中的所述低共熔溶剂的pH值为5~6,所述低共熔溶剂中的甜菜碱与乳酸按摩尔比1:1~10混合,其中,向甜菜碱和乳酸混合物中加水调节所述低共熔溶剂的pH值。
优选的是,所述β-葡萄糖苷酶与所述藏边大黄粉末的质量比为1~5:100。
优选的是,所述藏边大黄粉末与所述低共熔溶剂的固液质量比为1:20~100。
优选的是,所述搅拌酶解的时间为0.5~1.5h。
优选的是,所述搅拌酶解的温度为35~50℃。
优选的是,步骤S3中的浸提的具体操作包括:
向过滤后的滤渣中加入体积比为1~1.5倍的纯水,混合搅拌10~30min,然后通过离心机离心,得到浸提酶解溶液,重复两次,收集浸提酶解溶液;
向浸提后的干渣中加入体积比为3~6倍的低共熔溶剂再次干渣浸提,搅拌0.5~1h,重复两次,离心并收集浸提干渣液;
将收集到的浸提酶解溶液和浸提干渣液合并,得到浸提液。
优选的是,所述干渣浸提搅拌的温度为20~75℃。
优选的是,在进行步骤S1前,还包括:
A1、筛选新鲜藏边大黄生药,用水清洗干净,并晾干;
A2、将晾干的藏边大黄粉碎,得到藏边大黄粉末。
提供一种所述的方法制备得到的藏边大黄提取物。
本发明至少包括以下有益效果:本发明采用同时加入由甜菜碱和乳酸组成的低共熔溶剂和β-葡萄糖苷酶,即可实现藏边大黄的酶解和提取,简化了工艺,提高了藏边大黄中有效成分蒽醌类、二苯乙烯类和鞣质类化合物的提取率。
本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现,部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
附图说明
图1为本发明的制备工艺流程图;
图2是本发明的检测蒽醌类化合物含量测定的标准曲线;
图3是本发明的检测二苯乙烯类化合物含量测定的标准曲线;
图4是本发明的检测鞣质类化合物含量测定的标准曲线。
具体实施方式
下面结合附图对本发明做进一步的详细说明,以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
需要说明的是,下述实施方案中所述实验方法,如无特殊说明,均为常规方法,所述试剂和材料,如无特殊说明,均可从商业途径获得。
纤维素酶、果胶酶、β-葡萄糖苷酶等药品均购买至市面,其中,β-葡萄糖苷酶是从微生物中提取所得。
一、蒽醌类化合物的测定方法
蒽醌类化合物主要检测化合物中的总蒽醌含量,主要检测方法如下:
本申请采用紫外分光光度法,以醋酸镁的甲醇溶液为显色剂,通过比色测定蒽醌类化合物(总蒽醌)的含量。
1.1配制显色剂
称取0.4g醋酸镁,用甲醇溶解配制成0.6%的醋酸镁甲醇溶液,充分摇匀待用。
1.2总蒽醌标准曲线的制备
精密称取1,8-二羟基蒽醌10.2mg,用甲醇溶解并定容为25mL的标准液。精密吸取标准液20、40、80、160、200、300、400μL于10mL容量瓶中,加入0.6%醋酸镁甲醇溶液定容至10mL,充分摇匀后与510nm处测定吸收度,以0.6%醋酸镁甲醇液做空白对照,测定结果如下表1所示:
表1总蒽醌的标准曲线
标准液(μL) 0 20 40 80 160 200 300 400
浓度(mg/L) 0 0.816 1.632 3.264 6.528 8.160 12.240 16.320
吸收度A 0 0.037 0.069 0.141 0.267 0.323 0.532 0.721
以浓度(mg/L)为横坐标,以吸光度A为纵坐标制得如图2所示的标准曲线,其线性回归方程为y=0.043x-0.008,R2=0.996。
二、二苯乙烯类化合物的测定方法
二苯乙烯类化合物主要测定二苯乙烯苷的含量,主要检测方法如下:
本申请采用高效液相色谱,以2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷为对照品,测定二苯乙烯苷的含量。
2.1色谱条件
C18色谱柱,流动相乙腈-水(21:79),检测波长320nm,流速1.0mL min-1,柱温30℃。
2.2二苯乙烯苷标准曲线的制备
精密称取2.03mg 2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品置25mL容量瓶中,用50%乙醇溶解并定容,摇匀,用0.45μm微孔滤膜滤过,得对照品溶液,分别精密吸取对照品溶液0μL、2.5μL、5.0μL、7.5μL、10.0μL、12.5μL进样,测定峰面积,计算色谱峰面积,测定结果如下表2所示:
表2二苯乙烯苷的标准曲线
样品量 0.0μL 2.5μL 5.0μL 7.5μL 10.0μL 12.5μL
峰面积 0 45003 93214 139187 176325 216987
以样品量为横坐标,以峰面积为纵坐标制得如图3所示的标准曲线,其线性回归方程为y=17427x+2866,R2=0.998。
三、鞣质类化合物的测定方法
鞣质类化合物主要测定鞣质的含量,主要检测方法如下:
本申请采用紫外分光光度法,以没食子酸为对照品,通过磷钼钨酸比色测定鞣质类化合物的含量。
3.1对照品溶液的制备
精密称取没食子酸对照品50mg,置100mL的棕色量瓶中,加水溶液并稀释至刻度,精密量取2.5mL,置25mL棕色量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,即得对照品溶液(每1mL中含没食子酸0.05mg)。
3.2没食子酸标准曲线的制备
精密量取对照品溶液0.5mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL,分别置25mL棕色量瓶中,各加入磷钼钨酸试液1.0mL,分别加水11.5mL、11mL、10mL、9mL、8mL、7mL,用29%碳酸钠溶液稀释至刻度,摇匀,放置30min以相应的试剂为空白,参照紫外可见分光光度法,在760nm的波长处测定其吸光度,如下表3所示:
表3没食子酸的标准曲线
浓度(mg/L) 0 1 2 4 6 8 10
吸收度A 0.000 0.048 0.093 0.169 0.262 0.352 0.484
以浓度(mg/L)为横坐标,以吸光度A为纵坐标制得如图4所示的标准曲线,其线性回归方程为y=0.046x-0.005,R2=0.993。
<实施例1>
藏边大黄提取物的制备方法,包括以下步骤:
A1、筛选新鲜藏边大黄生药,用水清洗干净,并晾干;
A2、将晾干的藏边大黄粉碎,得到藏边大黄粉末;
S1、向10g的藏边大黄粉末中加入0.1g的β-葡萄糖苷酶(20万U/g),再加入200g甜菜碱:乳酸按摩尔比1:1混合pH值为6的低共熔溶剂,35℃下搅拌1h,得到酶解液,其中,向甜菜碱和乳酸的混合物中添加水使低共熔溶剂的pH值为6;
S2、将酶解液过滤,得到滤渣和酶解溶液;
S3、向过滤后的滤渣中加入体积比为1倍的纯水,混合搅拌20min,然后通过离心机离心,得到浸提酶解溶液,重复两次,收集浸提酶解溶液;
向浸提后的干渣中加入体积比为3倍的低共熔溶剂再次干渣浸提,50℃加热搅拌1h,重复两次,离心并收集浸提干渣液;
将收集到的浸提酶解溶液和浸提干渣液合并,得到浸提液;
S4、将浸提液和酶解溶液混合均匀,经干燥并灭菌得到藏边大黄提取物固体。
<实施例2>
藏边大黄提取物的制备方法,包括以下步骤:
A1、筛选新鲜藏边大黄生药,用水清洗干净,并晾干;
A2、将晾干的藏边大黄粉碎,得到藏边大黄粉末;
S1、向10g的藏边大黄粉末中加入0.3g的β-葡萄糖苷酶(20万U/g),再加入600g甜菜碱:乳酸按摩尔比1:5混合pH值为5.5的低共熔溶剂,45℃下搅拌1h,得到酶解液,其中,向甜菜碱和乳酸的混合物中添加水使低共熔溶剂的pH值为5.5;
S2、将酶解液过滤,得到滤渣和酶解溶液;
S3、向过滤后的滤渣中加入体积比为1.2倍的纯水,混合搅拌20min,然后通过离心机离心,得到浸提酶解溶液,重复两次,收集浸提酶解溶液;
向浸提后的干渣中加入体积比为4.5倍的低共熔溶剂再次干渣浸提,50℃加热搅拌1h,重复两次,离心并收集浸提干渣液;
将收集到的浸提酶解溶液和浸提干渣液合并,得到浸提液;
S4、将浸提液和酶解溶液混合均匀,经干燥并灭菌得到藏边大黄提取物固体。
<实施例3>
藏边大黄提取物的制备方法,包括以下步骤:
A1、筛选新鲜藏边大黄生药,用水清洗干净,并晾干;
A2、将晾干的藏边大黄粉碎,得到藏边大黄粉末;
S1、向10g的藏边大黄粉末中加入0.5g的β-葡萄糖苷酶(20万U/g),再加入1000g甜菜碱:乳酸按摩尔比1:10混合pH值为5的低共熔溶剂,50℃下搅拌1h,得到酶解液,其中,向甜菜碱和乳酸的混合物中添加水使低共熔溶剂的pH值为5;
S2、将酶解液过滤,得到滤渣和酶解溶液;
S3、向过滤后的滤渣中加入体积比为1.5倍的纯水,混合搅拌20min,然后通过离心机离心,得到浸提酶解溶液,重复两次,收集浸提酶解溶液;
向浸提后的干渣中加入体积比为6倍的低共熔溶剂再次干渣浸提,50℃加热搅拌1h,重复两次,离心并收集浸提干渣液;
将收集到的浸提酶解溶液和浸提干渣液合并,得到浸提液;
S4、将浸提液和酶解溶液混合均匀,经干燥并灭菌得到藏边大黄提取物固体。
<空白组>
采用水提法制备藏边大黄提取物,包括以下步骤:
A1、筛选新鲜藏边大黄生药,用水清洗干净,并晾干;
A2、将晾干的藏边大黄粉碎,得到藏边大黄粉末;
S1、向10g的藏边大黄粉末中加入1000g水,50℃下搅拌提取1h后,得到混合提取液;
S2、将混合提取液过滤,得到滤渣和滤液;
S3、向过滤后的滤渣中加入体积比为1.5倍的纯水,混合搅拌20min,然后通过离心机离心,得到浸提溶液,重复两次,收集浸提溶液;
向浸提后的干渣中加入体积比为6倍的水再次干渣浸提,50℃加热搅拌1h,重复两次,离心并收集浸提干渣液;
将收集到的浸提溶液和浸提干渣液合并,得到浸提液;
S4、将浸提液和滤液混合均匀,经干燥并灭菌得到藏边大黄提取物固体。
<对照组>
采用乙醇提取制备藏边大黄提取物,包括以下步骤:
A1、筛选新鲜藏边大黄生药,用水清洗干净,并晾干;
A2、将晾干的藏边大黄粉碎,得到藏边大黄粉末;
S1、向10g的藏边大黄粉末中加入12倍体积渗漉溶剂浸泡30h后填装入渗漉器加入渗漉溶剂进行渗漉提取,收集渗漉液;
渗漉提取条件:渗漉溶剂:80%乙醇;渗漉溶剂流速:7mL·min-1,常温;
S2、渗漉液洗脱:所得渗漉液缓慢加入大孔吸附树脂分离柱中,再用80%乙醇洗脱剂洗脱,收集洗脱液减压浓缩,浓缩、干燥并灭菌得到藏边大黄提取物固体。
四、藏边大黄提取物的含量测定
4.1藏边大黄提取物中的蒽醌类化合物含量测定
分别称取实施例1~3、空白组以及对照组的藏边大黄提取物固体10mg,参照1.2方法,用甲醇溶解并定容为10mL制备得到实施例1~3的藏边大黄提取物的样品溶液,吸取1mL于10mL容量瓶中,加入0.6%醋酸镁甲醇溶液定容至10mL,并于510nm处测定吸收度,并根据总蒽醌的标准曲线的回归方程计算得到对应浓度,再计算得到蒽醌类化合物质量,并通过蒽醌类化合物与藏边大黄提取物质量比计算含量,测定结果如下表4所示:
表4藏边大黄提取物的蒽醌类化合物含量测定
根据表4的数据可知,按照本发明的制备方法实施例1~3制备得到的藏边大黄中的蒽醌类化合物含量均高于空白组,而空白组的提取方法和现有的一般水提法相似,说明本发明的制备方法能够有效提高对藏边大黄中蒽醌类化合物的提取。
4.2藏边大黄提取物中的二苯乙烯类化合物含量测定
分别称取实施例1~3、空白组以及对照组的藏边大黄提取物固体10mg,参照2.2方法,用50%乙醇溶解并定容为10mL制备得到实施例1~3的藏边大黄提取物的样品溶液,分别进样10μL,测定峰面积,并根据二苯乙烯苷标准曲线的回归方程得到样品量,然后计算出实施例1~3中二苯乙烯类化合物的含量,结果下表5所示:
表5各组别藏边大黄提取物的二苯乙烯类化合物含量测定
组别 峰面积 样品量μL 二苯乙烯类化合物含量(%)
实施例1 93779.000 5.217 52.170
实施例2 99259.000 5.531 55.310
实施例3 106051.000 5.921 59.210
空白组 51873.000 2.807 28.070
对照组 53160.000 2.886 28.860
根据表5的数据可知,按照本发明的制备方法实施例1~3制备得到的藏边大黄中的二苯乙烯类化合物含量均高于空白组,而空白组的提取方法和现有的一般水提法相似,说明本发明的制备方法能够有效提高对藏边大黄中二苯乙烯类化合物的提取。
4.3藏边大黄提取物中的鞣质类化合物含量测定
分别称取实施例1~3、空白组以及对照组的藏边大黄提取物固体1g置100mL棕色量瓶中,加水50mL,放置过夜,超声处理10min,放冷,用水稀释至刻度,摇匀,静置(使固体物沉淀),滤过,弃去初滤液50mL,精密量取续滤液20mL,置100mL棕色量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,即得实施例1~3的供品溶液。
4.3.1总酚的测定
精密量取实施例1~3供品溶液1mL,置25mL棕色量瓶中,照标准曲线的制备项下的方法,自“加入磷钼钨酸试液1mL”起,加水10mL,用29%碳酸钠溶液稀释至刻度,摇匀,然后其测定吸光度,根据没食子酸标准曲线的回归方程得到对应浓度,计算出实施例1~3中的总酚含量,结果下表6所示:
表6各组别藏边大黄提取物的总酚含量测定
组别 吸光度A 浓度(mg/L) 总酚含量(%)
实施例1 0.249 5.522 6.902
实施例2 0.262 5.804 7.255
实施例3 0.283 6.261 7.826
空白组 0.146 3.283 4.103
对照组 0.175 3.913 4.891
4.31不被吸收的多酚以及鞣质类化合物的测定
精密量取实施例1~3供品溶液1mL,加至已盛有干酪素0.6g的10mL具塞锥形瓶中,密塞,置30℃水浴中保温1h,时时振摇,取出,放冷,摇匀,滤过,弃去初滤液,精密量取续滤液1mL,置10mL棕色量瓶中,照标准曲线的制备项下的方法,自“加入磷钼钨酸试液1mL”,加水10mL,用29%碳酸钠溶液稀释至刻度,摇匀,然后其测定吸光度,根据没食子酸标准曲线的回归方程得到对应浓度,计算出实施例1~3中不被吸收的多酚的含量以及鞣质类化合物含量,其中,按鞣质含量=总酚量-不被吸附的多酚量公式计算鞣质的含量,结果如下表7所示:
表7各组别藏边大黄提取物的多酚以及鞣质类化合物含量测定
组别 吸光度A 浓度(mg/L) 多酚含量(%) 鞣质类化合物含量(%)
实施例1 0.102 2.326 2.326 4.576
实施例2 0.109 2.478 2.478 4.777
实施例3 0.113 2.565 2.565 5.261
空白组 0.059 1.391 1.391 2.712
对照组 0.0907 2.080 2.080 2.811
根据表6、7的数据可知,按照本发明的制备方法实施例1~3制备得到的藏边大黄中的鞣质类化合物含量均高于空白组,而空白组的提取方法和现有的一般水提法相似,说明本发明的制备方法能够有效提高对藏边大黄中鞣质类化合物的提取。
为便于直观分析藏边大黄提取物中有效成分的含量,综合统计表4、5、7中的数据,如下表8所示:
表8各组别藏边大黄提取物的有效成分含量
据表8数据可知,按照本发明的制备方法实施例1~3制备得到的藏边大黄中的有效成分含量均高于空白组相和对照组,说明本发明的制备方法在搅拌提取时间相差不大时,能够有效提高对藏边大黄中有效成分的提取。
<对比例1>
藏边大黄提取物的制备方法与实施例3相同,其中,不同的在于不加β-葡萄糖苷酶。
<对比例2>
藏边大黄提取物的制备方法与实施例3相同,其中,不同的在于,将β-葡萄糖苷酶替换为同等规格的纤维素酶。
<对比例3>
藏边大黄提取物的制备方法与实施例3相同,其中,不同的在于,将β-葡萄糖苷酶替换为同等规格的果胶酶。
参照4.1、4.2、4.3的方法分别测定对比例1~3中的有效成分蒽醌类化合物、二苯乙烯类化合物以及鞣质类化合物含量,结果如下表9所示:
表9各组别藏边大黄提取物的有效成分含量测定
组别 实施例3 对比例1 对比例2 对比例3
蒽醌类化合物含量(%) 5.907 3.216 3.682 3.495
二苯乙烯类化合物含量(%) 59.210 29.870 34.560 31.240
鞣质类化合物含量(%) 5.261 2.904 3.293 3.143
根据表9的数据可知,对比例1~3制备得到的藏边大黄的有效成分含量均低于实施例3,且对比例2制备得到的藏边大黄的有效成分含量依次大于对比例3、对比例1,说明在提取藏边大黄提取物过程中加入酶均能提高对藏边大黄中有效成分的提取,且β-葡萄糖苷酶提高的效果最好,可能是因为由甜菜碱和乳酸组成的低共熔溶剂可以有效保持β-葡萄糖苷酶的活性,有助于酶解藏边大黄生药,提高对藏边大黄中有效成分的提取。
<对比例4>
藏边大黄提取物的制备方法与实施例3相同,其中,不同的在于,在步骤S1中,将低共熔溶剂替换为等量的水。
<对比例5>
藏边大黄提取物的制备方法与实施例3相同,其中,不同的在于,在步骤S3中,将低共熔溶剂替换为等量的水。
参照4.1、4.2、4.3的方法分别测定对比例4~5中的蒽醌类化合物、二苯乙烯类化合物以及鞣质类化合物含量,结果如下表10所示:
表10各组别藏边大黄提取物的有效成分含量测定
组别 实施例3 对比例4 对比例5
蒽醌类化合物含量(%) 5.907 5.258 5.421
二苯乙烯类化合物含量(%) 59.210 47.250 57.920
鞣质类化合物含量(%) 5.261 3.827 5.018
根据表10的数据可知,对比例4、对比例5制备得到的藏边大黄的有效成分含量均低于实施例3,说明低共熔溶剂能够有效提高对藏边大黄中有效成分的提取,可能是因为由甜菜碱和乳酸组成的低共熔溶剂对藏边大黄中的有效成分(即蒽醌类化合物、二苯乙烯类化合物、鞣质类化合物)高度亲和,提高化合物的溶解度,从而提高对藏边大黄中有效成分的提取;而对比例5制备得到的藏边大黄的有效成分含量高于对比例4,说明低共熔溶剂能够有效提高对藏边大黄中有效成分的提取,但其效果不及低共熔溶剂与β-葡萄糖苷酶共同提取的效果,可能是因为由甜菜碱和乳酸组成的低共熔溶剂既可以有效保持β-葡萄糖苷酶的活性,有助于酶解藏边大黄生药,又能对藏边大黄中的有效成分高度亲和,提高化合物的溶解度,从而双向提高藏边大黄的有效成分的提取。
尽管本发明的实施方案已公开如上,但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用,它完全可以被适用于各种适合本发明的领域,对于熟悉本领域的人员而言,可容易地实现另外的修改,因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下,本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的图例。

Claims (10)

1.藏边大黄提取物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1、向藏边大黄粉末中加入β-葡萄糖苷酶,再加入低共熔溶剂,搅拌酶解,得到酶解液,其中,所述低共熔溶剂包括甜菜碱、乳酸、水的混合物;
S2、将酶解液过滤,得到滤渣和酶解溶液;
S3、将滤渣依次用纯水、低共熔溶剂浸提,并过滤得到浸提液;
S4、将浸提液和酶解溶液混合均匀后,经干燥并灭菌得到藏边大黄提取物固体。
2.如权利要求1所述的藏边大黄提取物的制备方法,其特征在于,步骤S1和步骤S3中的所述低共熔溶剂的pH值为5~6,所述低共熔溶剂中的甜菜碱与乳酸按摩尔比1:1~10混合,其中,向甜菜碱和乳酸混合物中加水调节所述低共熔溶剂的pH值。
3.如权利要求1所述的藏边大黄提取物的制备方法,其特征在于,所述β-葡萄糖苷酶与所述藏边大黄粉末的质量比为1~5:100。
4.如权利要求1所述的藏边大黄提取物的制备方法,其特征在于,所述藏边大黄粉末与所述低共熔溶剂的固液质量比为1:20~100。
5.如权利要求1所述的藏边大黄提取物的制备方法,其特征在于,所述搅拌酶解的时间为0.5~1.5h。
6.如权利要求1所述的藏边大黄提取物的制备方法,其特征在于,所述搅拌酶解的温度为35~50℃。
7.如权利要求1所述的藏边大黄提取物的制备方法,其特征在于,步骤S3中的浸提的具体操作包括:
向过滤后的滤渣中加入体积比为1~1.5倍的纯水,混合搅拌10~30min,然后通过离心机离心,得到浸提酶解溶液,重复两次,收集浸提酶解溶液;
向浸提后的干渣中加入体积比为3~6倍的低共熔溶剂再次干渣浸提,搅拌0.5~1h,重复两次,离心并收集浸提干渣液;
将收集到的浸提酶解溶液和浸提干渣液合并,得到浸提液。
8.如权利要求7所述的藏边大黄提取物及其制备方法,其特征在于,所述干渣浸提搅拌的温度为20~75℃。
9.如权利要求1所述的藏边大黄提取物及其制备方法,其特征在于,在进行步骤S1前,还包括:
A1、筛选新鲜藏边大黄生药,用水清洗干净,并晾干;
A2、将晾干的藏边大黄粉碎,得到藏边大黄粉末。
10.基于权利要求1~9任一项所述的方法制备得到的藏边大黄提取物。
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