CN117899009A

CN117899009A - 含有抗tigit抗体的配制品及其使用方法

Info

Publication number: CN117899009A
Application number: CN202311335683.1A
Authority: CN
Inventors: 靳孝庆; 顾苏芳; 季宇; 沈健; 徐凯; 李金美; 吴俊�; 张媛媛; 狄爱俊; 邱波
Original assignee: Baiji Shenzhou Suzhou Biotechnology Co ltd
Current assignee: Baiji Shenzhou Suzhou Biotechnology Co ltd
Priority date: 2022-10-17
Filing date: 2023-10-16
Publication date: 2024-04-19

Abstract

本发明总体上涉及针对具有Ig和ITIM结构域的T细胞免疫受体(TIGIT)的抗体或其抗原结合片段的药物配制品的领域。本发明的药物配制品在经受应力条件、加速和长期储存后展现出相当程度的抗TIGIT抗体稳定性。还提供了制备这样的抗体配制品的方法和使用这样的抗体配制品的方法。

Description

含有抗TIGIT抗体的配制品及其使用方法

技术领域

本文披露了稳定的配制品，其包含与具有Ig和ITIM结构域的T细胞免疫受体(TIGIT)结合的抗体或其抗原结合片段。本文还披露了制备这些配制品以及用本披露的配制品治疗癌症的方法。

背景技术

TIGIT是近年来新发现的具有免疫抑制作用的共刺激分子。TIGIT主要在T细胞和NK细胞中表达，并通过ITIM区直接抑制T细胞和NK细胞对肿瘤细胞的杀伤作用。与抑制性受体CTLA4和PD-1类似，TIGIT在自身免疫中也起着重要作用，因此TIGIT已成为另一个极具潜力的免疫疗法靶标。

单克隆抗体药物通过静脉内注射或皮下注射。抗体在储存、运输和使用过程中会由于物理和化学不稳定性而降解和/或聚集，导致生物活性降低和免疫原性增加。物理不稳定性包括抗体的变性、聚集和/或沉淀。化学不稳定性来自脱酰胺、异构化、氧化或水解。为了改善这些方面，一些抗体配制品添加了额外的稳定剂、抗氧化剂、防腐剂等来提高抗体的稳定性，但引入过多的赋形剂增加了患者发生输液反应的机会。因此，抗体的适当配制品可以使抗体物理和化学稳定。

发明内容

本发明提供了抗TIGIT抗体药物配制品。

一种药物配制品，其包含：

约5mg/mL至约200mg/mL的抗TIGIT抗体或其抗原结合片段；

约5mM至约50mM配制品缓冲液，该配制品缓冲液提供约5.0至约7.0的pH；

约30mM至约300mM稳定剂；

约0.01mg/ml至约1mg/ml非离子型表面活性剂。

该配制品，其中该抗TIGIT抗体或其抗原结合片段包含重链可变区和轻链可变区，该重链可变区包含SEQ ID NO:1的HCDR1(重链互补决定区1)、SEQ ID NO:2的HCDR2和SEQID NO:3的HCDR3，该轻链可变区包含：SEQ ID NO:4的LCDR1(轻链互补决定区1)、SEQ IDNO:5的LCDR2和SEQ ID NO:6的LCDR3。

该配制品，其中该抗TIGIT抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8。

该配制品，其中该配制品缓冲液选自由以下组成的组：组氨酸、乙酸盐、柠檬酸盐、琥珀酸盐、磷酸盐、组氨酸和乙酸的混合物、或组氨酸和柠檬酸的混合物。

该配制品，其中该配制品缓冲液是组氨酸。

该配制品，其中组氨酸缓冲液的浓度是10mM至30mM。

该配制品，其中该配制品包含20mM组氨酸缓冲液。

该配制品，其中pH的范围为pH 5.2-6.2。

该配制品，其中该稳定剂选自由以下组成的组：海藻糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、麦芽糖、右旋糖酐、(2-羟丙基)-b-环糊精、氯化钠、氯化镁、氯化钙、硫酸钠、磷酸二氢钠或磷酸氢二钠。

该配制品，其中该稳定剂是海藻糖。

该配制品，其中该海藻糖浓度是50mM至280mM。

该配制品，其中该海藻糖浓度是150mM至250mM。

该配制品，其中该稳定剂是蔗糖。

该配制品，其中该蔗糖浓度是50mM至280mM。

该配制品，其中该蔗糖浓度是150mM至250mM。

该配制品，其中该非离子型表面活性剂选自由以下组成的组：聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯80或泊洛沙姆188。

该配制品，其中聚山梨醇酯20的浓度是0.1mg/ml至0.8mg/ml。

该配制品，其中聚山梨醇酯20浓度是0.2mg/ml至0.6mg/ml。

该配制品，其中聚山梨醇酯80的浓度是0.1mg/ml至0.8mg/ml。

该配制品，其中聚山梨醇酯80浓度是0.2mg/ml至0.6mg/ml。

该配制品，其中泊洛沙姆188的浓度是0.1mg/ml至0.8mg/ml。

该配制品，其中泊洛沙姆188浓度是0.2mg/ml至0.6mg/ml。

该配制品，其中该配制品包含30mM乙酸-乙酸钠、240mM蔗糖和0.2mg/ml聚山梨醇酯80，pH为pH 5.5。

该配制品，其中该配制品包含20mM组氨酸-组氨酸HCl、240mM海藻糖和0.2mg/ml聚山梨醇酯20，pH为pH 5.8。

该配制品，其中该配制品包含20mM组氨酸-组氨酸HCl、70mM NaCl、80mM海藻糖和0.8mg/ml聚山梨醇酯20，pH为pH 6.0。

该配制品，其中该抗TIGIT抗体或其抗原结合片段的浓度是约10mg/mL至150mg/mL。

一种制备抗体配制品的方法，该方法包括：

a.将抗TIGIT抗体交换到约5mM至约50mM缓冲液中，该缓冲液提供约5.0至约7.0的pH；

b.将(a)的抗体配制品浓缩至抗体浓度为约5-200mg/mL；

c.将非离子型表面活性剂添加至(c)的抗体配制品中以获得表面活性剂浓度不低于0.01mg/ml的抗体配制品；

d.将稳定剂添加至该抗体中以获得稳定剂浓度不低于30mM的抗体配制品，其中该抗TIGIT抗体包含重链可变区和轻链可变区，该重链可变区包含SEQ ID NO:1的HCDR1(重链互补决定区1)、SEQ ID NO:2的HCDR2和SEQ ID NO:3的HCDR3，该轻链可变区包含：SEQ IDNO:4的LCDR1(轻链互补决定区1)、SEQ ID NO:5的LCDR2和SEQ ID NO:6的LCDR3。

一种用于治疗有需要的人类患者的癌症的方法，该方法包括施用有效量的如权利要求1所述的抗TIGIT抗体配制品。

该方法，其中以约200mg至约2400mg的剂量施用该抗TIGIT抗体配制品。

该方法，其中每三周一次施用该抗TIGIT抗体配制品。

该方法，其中将至少一种其他治疗剂施用于该人类患者，该其他治疗剂选自由以下组成的组：泽布替尼、帕米帕利、替雷利珠单抗、抗LAG3抗体、第二抗TIGIT抗体、抗4-1BB抗体、抗OX40抗体、抗TIM-3抗体、CD40激动剂、TLR激动剂、CAR-T细胞、或化学治疗剂。

在一些实施例中，抗体配制品包含抗TIGIT抗体或其抗原结合片段、配制品缓冲液、稳定剂和非离子型表面活性剂。在一些实施例中，配制品缓冲液提供在5.0和7.0之间的pH范围。在一些实施例中，抗体配制品在冻融和热应力后是稳定的。

在一些实施例中，抗体配制品可以包含在约10mg/mL至约40mg/mL之间的抗TIGIT抗体或其抗原结合片段、配制品缓冲液、稳定剂和非离子型表面活性剂，或基本上由其组成，并且pH范围为5.2至6.2。在一些实施例中，抗体配制品在应力条件、加速和长期储存下是稳定的。

在一些实施例中，配制品缓冲液选自由以下组成的组：组氨酸、乙酸盐、柠檬酸盐、琥珀酸盐、磷酸盐、组氨酸和乙酸的混合物、组氨酸和柠檬酸的混合物或它们的任何组合。在一些实施例中，配制品缓冲液可以是组氨酸缓冲液。在一些实施例中，组氨酸缓冲液的浓度是约10mM至约30mM。在一些实施例中，组氨酸缓冲液的浓度是约20mM组氨酸。

在一些实施例中，稳定剂选自由以下组成的组：海藻糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、麦芽糖、右旋糖酐、(2-羟丙基)-b-环糊精、氯化钠、氯化镁、氯化钙、硫酸钠、磷酸二氢钠或磷酸氢二钠。在一些实施例中，稳定剂可以是海藻糖。在一些实施例中，海藻糖是a,a-海藻糖二水合物。在其他实施例中，稳定剂可以是蔗糖。在一些实施例中，稳定剂的浓度可以是约30mM至约300mM。在一些实施例中，稳定剂的浓度可以是约50mM至约280mM，优选地约150mM、约170mM、约190mM、约210mM、约230mM或约250mM。

在一些实施例中，非离子型表面活性剂选自由以下组成的组：聚山梨醇酯80(PS80)、聚山梨醇酯20(PS20)或泊洛沙姆188(P188)。在一些实施例中，非离子型表面活性剂的浓度可以是约0.1mg/ml至约0.8mg/ml。在一些实施例中，非离子型表面活性剂的浓度是约0.2mg/ml、约0.3mg/ml、约0.4mg/ml、约0.5mg/ml、约0.6mg/ml。在一些实施例中，非离子型表面活性剂是聚山梨醇酯20。在一些实施例中，非离子型表面活性剂是聚山梨醇酯80。在一些实施例中，非离子型表面活性剂是泊洛沙姆188。

在一些实施例中，抗体配制品基本上由以下组成：约10mg/mL、约20mg/mL、约30mg/mL、约40mg/mL、约50mg/mL、约60mg/mL、约70mg/mL、约80mg/mL、约90mg/mL、约100mg/mL、约110mg/mL、约120mg/mL、约130mg/mL、约140mg/mL、约150mg/mL的抗TIGIT抗体或其抗原结合片段，约20mM组氨酸缓冲液，约240mM a,a-海藻糖二水合物或蔗糖，约0.2mg/ml至约0.6mg/ml聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80或泊洛沙姆188，并且该抗体配制品的pH为5.8±0.4。

本文还提供了制备稳定的抗TIGIT抗体配制品的方法，该方法包括：将抗TIGIT抗体交换到约5mM至约50mM缓冲液中，该缓冲液提供约5.0至约7.0的pH；将该抗体配制品浓缩为5-200mg/mL；将稳定剂添加至该抗体中以获得稳定剂浓度不低于30mM的抗体配制品；添加非离子型表面活性剂以获得表面活性剂浓度不低于0.001％(w/v)的抗体配制品。

本文还提供了减少患有癌症的人类患者的癌症生长的方法，该方法包括向该患者施用有效量的如本文所述的抗体配制品。

本文提供了减少人类患者的癌症生长的方法，该方法包括向该患者施用有效量的如本文所述的抗体配制品。

在一些实施例中，抗体配制品的抗体浓度在约200mg至2400mg之间。在另一个实施例中，抗体配制品的抗体浓度为约200mg、约300mg、约400mg、约500mg、约600mg、约700mg、约800mg、约900mg、约1000mg、约1100mg、约1200mg、约1300mg、约1400mg、约1500mg、约1600mg、约1700mg、约1800mg、约1900mg、约2000mg、约2100mg、约2200mg、约2300mg或约2400mg。在一些实施例中，每三周一次施用抗体配制品。在一些实施例中，抗体配制品为约400mg至1200mg，并且每三周施用一次。

在一些实施例中，本披露提供了用抗TIGIT皮下抗体配制品与另一治疗剂的组合治疗癌症的方法。该另一治疗剂是例如泽布替尼、帕米帕利、替雷利珠单抗(BGB-A317)、抗LAG3抗体、第二抗TIGIT抗体、抗4-1BB抗体、抗OX40抗体、抗TIM-3抗体、CD40激动剂、TLR激动剂、CAR-T细胞、或化学治疗剂。

附图说明

图1A-C示出了5个冻融循环条件(图中表示为“5FT”)下不同pH和缓冲液对稳定性的结果。图1A是亚可见颗粒数据，图1B是浊度数据，图1C是SEC单体％数据。

图2A-C示出了5个冻融循环条件(图中表示为“5FT”)下不同蛋白质浓度对稳定性的结果。图2A是亚可见颗粒数据，图2B是浊度数据，图2C是SEC单体％数据。

图3A-E示出了以下不同应力条件下不同表面活性剂对稳定性的结果：3个冻融循环(图中表示为“3FT”)、振荡2天(图中表示为“Shake 2D”)、光稳定性2周(图中表示为“Photo 2W”)和使配制品在37℃下保持4周的热应力(图中表示为“37C4W”)。图3A是亚可见颗粒数据，图3B是浊度数据，图3C是SEC单体％数据，图3D是IEC主峰％数据，图3E是CE-SDS(NR)完整峰％数据。

图4A-C示出了以下应力条件下的稳定性结果：使抗体配制品在40℃下保持2周的热应力(图中表示为“40C2W”)、配制品在2周时的光稳定性(图中表示为“Photo 2W”)、冻融(图中表示为“6FT”)。图4A是亚可见颗粒数据，图4B是SEC单体％数据，图4C是IEC主峰％数据。

图5A-D示出了25℃下稳定性数据的结果。图5A是亚可见颗粒数据，图5B是SEC单体％数据，图5C是IEC主峰％数据，图5D是CE-SDS(NR)完整峰％数据。

图6A-D示出了5℃±3℃下稳定性数据的结果，图6A是亚可见颗粒数据，图6B是SEC单体％数据，图6C是IEC主峰％数据，图6D是CE-SDS(NR)完整峰％数据。

具体实施方式

定义

除非在本文件的其他地方特别定义，否则本文所用的所有其他技术和科学术语具有本领域的普通技术人员通常理解的含义。

如本文(包括所附权利要求)所用，除非上下文另外明确说明，否则例如“一个/一种(a，an)”和“该”的单数形式的词语包括它们对应的复数指代。

除非上下文另外明确说明，否则术语“或”用于意指术语“和/或”并且与之互换使用。

贯穿本说明书和以下权利要求，除非上下文另有要求，否则词语“包含(comprise)”以及变化形式如“包含(comprises)”和“包含(comprising)”将理解为隐含包括所陈述的氨基酸序列、DNA序列、其步骤或组，但不排除任何其他氨基酸序列、DNA序列、步骤。当在本文中使用时，术语“包含”可以用术语“含有(containing)”、“包括(including)”、或有时用“具有(having)”取代。

本文中的术语“施用(administration/administering)”和“治疗(treating/treatment)”，当应用于动物、人、实验受试者、细胞、组织、器官或生物流体时，意指外源性药物、治疗剂、诊断剂、或抗体配制品与该动物、人、受试者、细胞、组织、器官、或生物流体接触。细胞的处理涵盖试剂与细胞的接触以及试剂与流体的接触，其中流体与细胞接触。术语“施用”和“治疗”也指体外和离体处理，例如，通过试剂、诊断剂、结合化合物或通过另一种细胞对细胞进行处理。本文的术语“受试者”包括任何生物体，优选动物，更优选哺乳动物(例如大鼠、小鼠、狗、猫、兔)，并且最优选人。在一方面，治疗任何疾病或障碍是指改善该疾病或障碍(即，减缓或阻止或减少疾病或其至少一种临床症状的发展)。在另一方面，“治疗(treat，treating或treatment)”是指缓解或改善至少一个身体参数，包括患者可能无法辨别的那些。在又另一方面，“治疗(treat，treating或treatment)”是指在身体上(例如，可辨别症状的稳定化)、在生理上(例如，身体参数的稳定化)或两者上调节疾病或障碍。

如本文所用，“受试者”是哺乳动物，例如，啮齿动物或灵长类动物，优选高等灵长类动物，例如人(例如患有本文所述的障碍或处于患有本文所述的障碍的风险的患者)。

如本文所用，术语“治疗有效量”是指当施用于受试者以治疗疾病、或疾病或障碍的至少一种临床症状时，足以影响该疾病、障碍或症状的治疗的抗TIGIT抗体的量。“治疗有效量”可以随药剂，疾病，障碍，和/或疾病或障碍的症状，疾病、障碍、和/或疾病或障碍的症状的严重程度，待治疗的受试者的年龄，和/或待治疗的受试者的体重而变化。在任何给定情况下的合适量对于本领域技术人员而言是显而易见的，或者可以通过常规实验确定。在组合疗法的情况下，“治疗有效量”是指用于有效治疗疾病、障碍或病症的组合对象的总量。在本披露的一些实施例中，受试者是人。

本文术语“抗体”以最广义使用并且特别地涵盖抗体(包括全长单克隆抗体)和抗体片段，只要它们识别抗原，例如TIGIT。抗体通常是单特异性的，但是还可以描述为不同特异性的、异特异性的、或多特异性的。抗体分子通过特异性结合位点与抗原上的特定性抗原决定簇或表位结合。

本文中的术语“单克隆抗体”或“mAb”或“Mab”是指基本上同质的抗体的群体，即，除了可能少量存在的可能天然发生的突变外，该群体中包含的抗体分子在氨基酸序列上是相同的。相比之下，常规(多克隆)抗体制剂典型地包括在其可变结构域中具有不同氨基酸序列的多种不同抗体，特别地其互补决定区(CDR)，它们通常对不同的表位具有特异性。修饰语“单克隆”指示获得自基本上同质的抗体群体的抗体的特征并且不应理解为要求通过任何特定方法产生抗体。可以通过本领域技术人员已知的方法获得单克隆抗体(mAb)。参见，例如Kohler G等人,Nature[自然]1975 256:495-497；美国专利号4,376,110；AusubelFM等人,CURRENT PROTOCOLS IN MOLECULAR BIOLOGY[分子生物学现代方法]1992；HarlowE等人,ANTIBODIES:A LABORATORY MANUAL[抗体：实验室手册],Cold spring HarborLaboratory[冷泉港实验室]1988；以及Colligan JE等人,CURRENT PROTOCOLS INIMMUNOLOGY[免疫学现代方法]1993。本文披露的单克隆抗体可以是任何免疫球蛋白类别(包括IgG、IgM、IgD、IgE、IgA)，及其任何亚类。产生单克隆抗体的杂交瘤可以在体外或在体内培养。高效价的单克隆抗体可以通过体内产生获得，其中将来自单个杂交瘤的细胞腹膜内注射到小鼠(如原始引发的Balb/c小鼠)中，以产生含有高浓度所需单克隆抗体的腹水。可以使用本领域技术人员熟知的柱色谱方法从这样的腹水，或从培养上清液中纯化同种型IgM或IgG的单克隆抗体。

通常，基本抗体结构单元包含四聚体。每个四聚体包括两对相同的多肽链，每对具有一条“轻链”(约25kDa)和一条“重链”(约50-70kDa)。每条链的氨基末端部分包括主要负责抗原识别的约100至110或更多氨基酸的可变区。重链的羧基末端部分可以定义为主要负责效应子功能的恒定区。典型地，人轻链被归类为κ和λ轻链。此外，人重链典型地归类为α、δ、ε、γ或μ，并且分别将抗体的同种型定义为IgA、IgD、IgE、IgG和IgM。在轻链和重链内，可变区和恒定区通过约12个或更多个氨基酸的“J”区连接，重链还包括约10个以上氨基酸的“D”区。

每个轻链/重链(VL/VH)对的可变区形成抗体结合位点。因此，一般而言，完整抗体具有两个结合位点。除了双功能或双特异性抗体外，一般而言两个结合位点是相同的。

典型地，重链和轻链的可变结构域包含三个高变区，也称为“互补决定区(CDR)”，其位于相对保守的框架区(FR)之间。CDR通常由框架区对齐，使得能够结合特异性表位。一般而言，从N末端到C末端，轻链和重链可变结构域两者按顺序都包含FR-1(或FR1)、CDR-1(或CDR1)、FR-2(FR2)、CDR-2(CDR2)、FR-3(或FR3)、CDR-3(CDR3)和FR-4(或FR4)。通常，每个结构域的氨基酸分配符合免疫学上感兴趣的蛋白质序列的定义，Kabat等人,NationalInstitutes of Health[美国国立卫生研究院],贝塞斯达,马里兰州；第5版；NIH公开号91-3242(1991)；Kabat(1978)Adv.Prot.Chem.[蛋白质化学进展]32:1-75；Kabat等人,(1977)J.Biol.Chem.[生物化学杂志]252:6609-6616；Chothia等人,(1987)J Mol.Biol.[分子生物学杂志]196:901-917或Chothia等人,(1989)Nature[自然]342:878-883。

术语“高变区”意指抗体中负责抗原结合的氨基酸残基。高变区包含来自“CDR”(即，轻链可变结构域中的VL-CDR1、VL-CDR2和VL-CDR3以及重链可变结构域中的VH-CDR1、VH-CDR2和VH-CDR3)的氨基酸残基。参见Kabat等人,(1991)Sequences of Proteins ofImmunological Interest[免疫学上感兴趣的蛋白质序列],第5版Public Health Service[公共卫生署],National Institutes of Health[美国国立卫生研究院],贝塞斯达,马里兰州(通过序列定义抗体的CDR区)；还参见Chothia和Lesk(1987)J.Mol.Biol.[分子生物学杂志]196:901-917(通过结构定义抗体的CDR区)。术语“框架”或“FR”残基意指除了本文定义为CDR残基的高变区残基之外的那些可变结构域残基。

除非另外说明，“抗体片段”或“抗原结合片段”意指抗体的抗原结合片段，即保留与全长抗体结合的抗原特异性结合的能力的抗体片段，例如保留一个或多个CDR区的片段。抗原结合片段的实例包括但不限于Fab、Fab'、F(ab')2和Fv片段；双抗体；线性抗体；单链抗体分子，例如，单链Fv(ScFv)；纳米抗体以及从抗体片段形成的多特异性抗体。

与特定靶蛋白特异性结合的抗体也被描述为与特定靶蛋白特异性结合。这意指与其他蛋白质相比，抗体表现出优先结合靶蛋白，但这种特异性不需要绝对的结合特异性。如果抗体的结合决定了样品中靶蛋白的存在，例如，没有产生不希望的结果，如假阳性，则抗体被认为是对其预期靶标为“特异性的”。可用于本发明的抗体或其结合片段将以比非靶蛋白的亲和力高至少两倍，优选高至少10倍，更优选高至少20倍，和最优选高至少100倍的亲和力结合至靶蛋白。将本文的抗体称作与包含给定氨基酸序列的多肽特异性结合。

本文中的术语“人抗体”意指仅包含人免疫球蛋白蛋白质序列的抗体。如果在小鼠、小鼠细胞或源自小鼠细胞的杂交瘤中产生，人抗体可以含有鼠碳水化合物链。类似地，“小鼠抗体”或“大鼠抗体”意指分别仅包含小鼠或大鼠免疫球蛋白蛋白质序列的抗体。

术语“人源化抗体”意指含有来自非人(例如鼠)抗体以及人抗体的序列的抗体形式。这样的抗体含有源自非人免疫球蛋白的最小序列。通常，人源化抗体将包含基本上至少一个、并且典型地两个可变结构域的全部，其高变环的全部或基本上全部对应于非人免疫球蛋白的那些，并且FR区的全部或基本上全部是人免疫球蛋白序列的那些。人源化抗体还将任选地包含免疫球蛋白恒定区(Fc)的至少一部分，典型地是人免疫球蛋白的至少一部分。当有必要区分人源化抗体与亲本啮齿动物抗体时，将前缀“hum”、“hu”、“Hu”或“h”添加到抗体克隆名称中。人源化形式的啮齿动物抗体会通常包含亲本啮齿动物抗体的相同CDR序列，但是可包括某些氨基酸取代以增加亲和力，增加人源化抗体的稳定性，或出于其他原因。

本申请的抗体在治疗癌症中具有潜在治疗用途。本文的术语“癌症”或“肿瘤”意指或描述哺乳动物的特征典型地为细胞生长失调的生理病症。癌症的实例包括但不限于肺癌(包括小细胞肺癌、或非小细胞肺癌)、肾上腺癌、肝癌、胃癌、宫颈癌、黑色素瘤、肾癌、乳腺癌、结直肠癌、白血病、膀胱癌、骨癌、脑癌、子宫内膜癌、头颈癌、淋巴瘤、卵巢癌、皮肤癌、甲状腺瘤、或癌症的转移性病变。

此外，本申请的抗体在控制病毒感染和其他人类疾病中具有潜在的治疗用途，这些疾病在机理上涉及免疫耐受或“耗尽”。在本申请的上下文中，术语“耗尽”是指导致免疫细胞对癌症或慢性病毒感染的反应能力减弱的过程。

抗TIGIT抗体

本披露提供了抗TIGIT抗体及其配制品。例如，欧司珀利单抗(BGB-A1217)是披露于PCT专利号WO 2019/129261的具有在下表1中提供的序列的抗TIGIT抗体。

表1.欧司珀利单抗(BGB-A1217)披露于WO 2019/129261中。

治疗方法

本披露的抗体或抗原结合片段可用于多种应用，包括但不限于治疗TIGIT相关障碍或疾病的方法。在一方面，TIGIT相关障碍或疾病是癌症。

在一方面，本披露提供了治疗癌症的方法。在某些方面，该方法包括向有需要的患者施用有效量的抗TIGIT抗体或抗原结合片段。癌症可包括但不限于肺癌(包括小细胞肺癌、或非小细胞肺癌)、肾上腺癌、肝癌、胃癌、宫颈癌、黑色素瘤、肾癌、乳腺癌、结直肠癌、白血病、膀胱癌、骨癌、脑癌、子宫内膜癌、头颈癌、淋巴瘤、卵巢癌、皮肤癌、甲状腺瘤、或癌症的转移性病变。

本发明的抗体或抗原结合片段可以通过任何合适的方式施用，包括肠胃外、肺内和鼻内，并且如果需要用于局部治疗、病灶内施用。肠胃外输注包括肌内、静脉内、动脉内、腹膜内或皮下施用。给药可以通过任何合适的途径，例如通过注射，如静脉内或皮下注射，这部分取决于施用是短暂的还是长期的。本文考虑了多种给药方案，包括但不限于单次施用或在不同时间点的多次施用、推注施用、和脉冲输注。

抗TIGIT抗体或抗原结合片段能以符合良好医学实践的方式配制、给药和施用。关于这点要考虑的因素包括治疗的特定障碍、治疗的特定哺乳动物、个体患者的临床病症、障碍的起因、药剂的递送位点、施用方法、施用方案、和医疗从业者已知的其他因素。抗体不需要但任选地与目前用于预防或治疗所研究的障碍的一种或多种药剂一起配制。这样的其他药剂的有效量取决于配制品中存在的抗体的量、障碍或治疗的类型、以及上文讨论的其他因素。这些通常以与如本文所述相同的剂量和施用途径使用，或以本文所述剂量的约1％至99％使用，或以经验/临床确定为合适的任何剂量和任何途径使用。

为预防或治疗疾病，本发明的抗体或抗原结合片段的合适的剂量将取决于待治疗的疾病的类型、抗体的类型、疾病的严重程度和病程、施用抗体是用于预防还是治疗目的、先前疗法、患者的临床病史和对抗体的应答、以及主治医生的判断。抗体适当地以一次或经一系列治疗施用于患者。取决于疾病的类型和严重程度，约200mg-2400mg的抗体可以是用于向患者施用的初始剂量，无论是例如通过一次或多次分开施用，还是通过连续输注。取决于上述因素，一个典型的日剂量的范围可以为约200mg-2400mg的抗体或更多。对于几天或更长时间内的重复施用，取决于病症，治疗通常会持续直到出现疾病症状的期望抑制。这样的剂量可以间歇地施用，例如每周、每两周或每三周。施用初始较高负载剂量，随后施用一个或多个较低剂量。但是，其他剂量方案可能是有用的。通过常规技术和测定可以容易地监测该疗法的进展。

药物组合物和配制品

还提供了包含抗TIGIT抗体或其抗原结合片段或包含编码抗TIGIT抗体或抗原结合片段的序列的多核苷酸的组合物，包括药物配制品。在某些实施例中，组合物包含与TIGIT结合的一种或多种抗体或抗原结合片段，或包含编码与TIGIT结合的一种或多种抗体或抗原结合片段的序列的一种或多种多核苷酸。这些组合物还可包含合适的载剂，如本领域熟知的药学上可接受的赋形剂(包括缓冲液)。

通过将具有所需纯度的这样的抗体或抗原结合片段与一种或多种任选的药学上可接受的载剂混合来制备本文所述的抗TIGIT抗体或抗原结合片段的药物配制品，呈冻干配制品或水溶液的形式。药学上可接受的载剂通常在所采用的剂量和浓度下对接受者无毒，并且包括但不限于：缓冲液，如磷酸盐、柠檬酸盐、和其他有机酸；抗氧化剂，包括抗坏血酸和甲硫氨酸；防腐剂(如十八烷基二甲基苄基氯化铵；氯化六甲双铵；苯扎氯铵；苄索氯铵；苯酚、丁醇或苯甲醇；对羟基苯甲酸烷基酯，如对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯；儿茶酚；间苯二酚；环己醇；3-戊醇；和间甲酚)；低分子量(少于约10个残基)的多肽；蛋白质，如血清白蛋白、明胶或免疫球蛋白；亲水性聚合物，如聚乙烯吡咯烷酮；氨基酸，如甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、组氨酸、精氨酸或赖氨酸；单糖、二糖和其他碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合剂，如EDTA；糖，如蔗糖、甘露醇、海藻糖或山梨醇；成盐反离子，如钠；金属络合物(例如Zn-蛋白络合物)；和/或非离子型表面活性剂，如聚乙二醇(PEG)。

可以制备缓释制剂。缓释制剂的合适实例包括含有该抗体的固体疏水性聚合物的半透性基质，这些基质为成形制品的形式，例如膜或微胶囊。

用于体内施用的配制品通常是无菌的。无菌性可以例如通过无菌过滤膜过滤而容易地实现。

实例

实例和某些实施例的描述应被视为是说明性的，而非限制由权利要求所限定的本发明。如将容易理解的，在不脱离如权利要求书所阐述的本发明的情况下，可以使用上文阐述的特征的许多变化和组合。所有这样的变化都旨在包括在本发明的范围之内。引用的所有参考文献都通过引用以其全文并入本文。

分析方法

该方法部分提供了在以下实例1-4中所用方法的总结。

SEC-HPLC

在Waters^TMHPLC系统上通过尺寸排阻色谱法(SEC)分析可溶性聚集体和片段的形成。使用等度梯度在维持在37℃±5℃下的TSK gel Super SW^TMmAb HR，7.8×300mm柱上根据分子大小分离蛋白质。洗脱分子量物质并通过215nm处的UV吸收进行检测。聚集体、单体和片段的分布经由标准品和样品的峰面积来定量。

IEC-HPLC

使用离子交换色谱(IEC)IEC-HPLC方法，通过阳离子交换色谱评估电荷变体。HPLC系统(沃特世公司(Waters))配备有37℃±5℃的Thermo MabPac SCX-10^TM分析柱(4×250mm)。以1.0mL/min的恒定流速进行梯度NaCl洗脱，并在280nm处获得UV信号。对IEC-HPLC色谱图中的峰进行积分，并且计算每个峰的峰面积百分比。

CE-SDS(NR)

使用PA800 Plus^TM(贝克曼公司(Beckman))通过毛细管凝胶电泳(CE)方法确定样品的纯度。将样品用十二烷基硫酸钠(SDS)变性，并在填充有凝胶的毛细管中根据大小进行分离，该凝胶充当筛分介质。在非还原(NR)样品中，添加烷基化剂N-乙基马来酰亚胺(NEM)以避免样品制剂诱导的任何片段化，并确保主IgG峰保持完整。电动注射样品，并且使用UV检测器通过200nm处的UV吸光度检测移动的蛋白。非还原样品的可报告值是IgG主峰的时间校正面积百分比(TCA)％。

蛋白质浓度

在UV 280nm处测定蛋白质浓度。

Tm和Tagg

使用Uncle^TM(Unchained Labs公司)确定稳定性，该方法组合了3种不同的测量模式-荧光、静态光散射(SLS)和动态光散射(DLS)。进行SLS和固有荧光分别确定配制品的起始聚集温度(Tagg)和熔融温度(Tm)。

浊度

使用激光波长为635nm的NEPHELOstar plus^TM进行浊度测试。将样品放入96孔板中，并通过NEPHELOstar plus^TM读取浊度。

可见颗粒

使用约2000勒克斯的白色荧光灯在黑色背景和白色背景上检查可见颗粒。将小瓶在检查下轻轻旋转，并且在每个背景下检查不少于10秒钟。总检查时间为约20秒。

亚可见颗粒

使用微流成像(MFI，Micro-Flow Imaging^TM5200，普诺森公司(ProteinSimple))分析亚可见颗粒。在每次样品分析之前进行水冲洗，以确保背景计数适合测试。报告了平均累积计数/mL。

实例1：pH和缓冲液对抗TIGIT抗体配制品稳定性的影响

为了确定抗体在不同pH和缓冲液中的稳定性，用10kDa MWCO透析盒将欧司珀利单抗透析到不同的缓冲液中，并制备成如表2所列的配制品。将这些配制品通过Millex^TMGP0.22mm PES 33mm过滤器过滤，并且填充到2mL即用型玻璃小瓶中。为了评估对抗体稳定性的影响，用来自Unchained Labs公司的Uncle^TM测试这些抗体样品的Tm和Tagg，数据如表2所示。此外，将这些抗体样品置于冻融中五个循环(图2中表示为“5FT”)。作为对照，在其初始时间点测定这些抗体样品，图1A-C中表示为T0。通过SEC-HPLC测量所有样品的亚可见颗粒、浊度和纯度。结果在图1A-C中以图形显示。

表2.抗TIGIT抗体在不同pH和缓冲液中的Tm、Tagg

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注：N/A表示在测试中未发现Tm1。

由表2可知，所有配制品的Tm1均高于65℃，Tm2均高于75℃，Tagg均高于70℃，这是良好的稳定性指示。在不含稳定剂和表面活性剂的配制品中，在五个冻融循环后，亚可见颗粒和浊度增加，而在含有稳定剂和表面活性剂的抗体配制品中，没有明显增加。所有这些配制品在五个冻融循环后均未显示出明显变化，且SEC单体含量不低于95％。综合而言，亚可见颗粒数据(图1A)、浊度数据(图1B)和SEC-HPLC数据(图1C)表明，欧司珀利单抗抗体在pH5.0-7.0的含有稳定剂和表面活性剂的不同缓冲液中的配制品中是稳定的。

实例2：蛋白质浓度对抗TIGIT抗体配制品稳定性的影响

为了研究欧司珀利单抗抗体蛋白质浓度对欧司珀利单抗抗体配制品稳定性的影响，在冻融条件下进行了应力研究。对于F11-F13，使用30kDa Amicon Ultra^TM离心过滤器生成高浓度的欧司珀利单抗，以产生浓缩储备溶液。将该储备溶液透析到30mM乙酸-乙酸钠缓冲液中，然后用于产生表3中列出的配制品。对于F14，通过使用30kDa Amicon Ultra^TM离心过滤器生成欧司珀利单抗的浓缩储备溶液，然后将该浓缩储备溶液透析到20mM组氨酸-组氨酸HCl缓冲液中，然后调节成表3中的F14配制品。使用0.22mm PES注射器过滤器过滤每个配制溶液，并将它们置于冻融应力条件下。为了评估对抗体稳定性的影响，用来自Unchained Labs公司的Uncle^TM测试这些抗体样品的Tm和Tagg，并且数据如表3所示。

表3.具有不同蛋白质浓度的抗TIGIT抗体的Tm和Tagg

注：N/A表示在测试中未发现Tm1。

由表3可知，所有配制品的Tm1均高于65℃，Tm2均高于75℃，并且Tagg均高于70℃，这是良好的稳定性指示。在冻融稳定性研究中，与零时间点(T0)样品相比，亚可见颗粒略有增加，尤其是对于小于10μm的亚可见颗粒。然而，亚可见颗粒的总数仍然很低，尤其是对于大于10μm的亚可见颗粒。从浊度数据来看，浊度随蛋白质浓度的增加而增加，但五个冻融循环后没有明显变化，表明欧司珀利单抗抗体对于这些配制品是稳定的。从SEC-HPLC数据来看，在五个冻融循环后，SEC单体没有明显变化，并且所有样品的SEC单体均大于95％，表明这些欧司珀利单抗抗体浓度为10-150mg/ml的配制品不易聚集或形成颗粒。结合图3A-C中所示的数据，所有测试的配制品在10mg/ml至150mg/ml的欧司珀利单抗抗体蛋白质浓度范围内都是稳定的。

实例3表面活性剂对抗TIGIT抗体配制品稳定性的影响

本实验研究了不同表面活性剂对欧司珀利单抗抗体配制品稳定性的影响。在本研究中，将欧司珀利单抗通过透析缓冲液交换到20mM组氨酸-组氨酸HCl缓冲液(pH 5.8)中，然后用不同的表面活性剂调节以形成表4中列出的配制品。使用0.22mm PES注射器过滤器过滤每个配制溶液，并将它们置于应力条件下。

表4.具有不同表面活性剂的配制品组合物

通过使配制品经受在-70℃下冷冻然后在环境温度下解冻的三个循环(图3A-E中表示为“3FT”)来进行冻融研究。为了研究配制品的高温稳定性和光稳定性，将欧司珀利单抗抗体配制品在37℃稳定室中储存4周(表和图中表示为“37C4W”)，或者放置在光照不低于120万勒克斯小时的光稳定室中2周(图中表示为“photo 2W”)。通过使配制品经受800rpm的振荡条件2天(图中表示为“shake2D”)来进行机械应力研究。通过亚可见颗粒、浊度、SEC(纯度)、IEC(电荷谱)和CE-SDS(NR)(纯度)评估配制品。作为对照，将样品在其初始时间点(图中表示为T0)进行分析。

如图3A-B所示，欧司珀利单抗配制品F15、F16和F17在三个冻融循环、振荡2天、光稳定性2周和在37℃保持4周的条件下，亚可见颗粒和浊度没有明显增加。这些数据表明，这些配制品中的欧司珀利单抗不易聚集或形成颗粒。应注意，与含有聚山梨醇酯20和聚山梨醇酯80的配制品相比，含有泊洛沙姆188的抗体配制品F17显示出更少的亚可见颗粒和浊度。如图3C-E所示，配制品F15、F16和F17在三个冻融循环、振荡2天和在37℃保持4周的条件下，SEC、IEC、CE-SDS(NR)没有明显变化。在光稳定性条件下2周应力测试的条件下，F15、F16和F17配制品的SEC、IEC、CE-SDS(NR)的纯度与初始时间点(T0)相比没有明显变化。考虑到这些稳定性数据，聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯80和泊洛沙姆188有助于配制品中的欧司珀利单抗抗体稳定性。

实例4.抗TIGIT抗体配制品的稳定性

在表5中列出的各种配制品中评估欧司珀利单抗抗体的稳定性。所有配制品均在pH范围为5.2至6.2的20mM组氨酸-组氨酸HCl缓冲液中制备。将浓度为240mM的海藻糖用作稳定剂和张力调节剂。表面活性剂为聚山梨醇酯20，浓度为0.2mg/ml。将欧司珀利单抗抗体通过透析缓冲液交换到具有不同pH(pH 5.2、5.5、5.8、6.0、6.2)的20mM组氨酸-组氨酸HCl缓冲液中，以生成预期pH的欧司珀利单抗储备溶液，并使用20mg/ml的欧司珀利单抗抗体浓度。使用0.22mm PES注射器过滤器过滤每个配制溶液，并将它们置于稳定性研究中，如表6所示。

表5.在稳定性研究中使用的配制品组合物

表6.配制品稳定性研究方案

通过使样品经受在-70℃下冷冻并在环境温度下解冻的六个循环(表7中表示为“6FT”)来进行冻融研究。为了确定配制品的高温稳定性和光稳定性的影响，将样品在40℃稳定室中储存2周(表和图中表示为“40C 2W”)，或者放置在光照不低于120万勒克斯小时的光稳定室中2周(表7中表示为“photo 2W”)。还进行了25℃下的加速稳定性研究和5℃±3℃下的长期稳定性研究(表8和表9中表示为“25C”和“5C”)。通过可见颗粒、亚可见颗粒、SEC(纯度)、IEC(电荷谱)和CE-SDS(NR)(纯度)评估配制品。作为对照，将样品在其初始时间点(表示为T0)进行分析。这些结果在表7-9和图4-6中提供。

从表7中的可见颗粒数据来看，所有配制品在六个冻融循环中都是澄清的，并且对于在40℃下2周测试和光稳定性测试的配制品，没有观察到可见颗粒。从图4A中的亚可见颗粒数据来看，所有配制品在六个冻融循环、40℃下2周和光稳定性中都是稳定的，其中亚可见颗粒没有明显增加。从图4B中的SEC数据来看，所有配制品在六个冻融循环下都是稳定的，单体纯度在40℃下2周略有下降，并且在光稳定性中略有下降。从图4C中的IEC数据来看，所有配制品在六个冻融循环下都是稳定的，主峰在40℃下2周略有下降，并且在光稳定性中略有下降。

表7.配制品F18、F19、F20、F21和F22在特定应力条件下的可见颗粒测定

保持在25℃的欧司珀利单抗配制品的稳定性数据示于表8和图5中。所有配制品在25℃下储存6个月时都是澄清的，没有观察到可见颗粒。从图5A中的亚可见颗粒数据来看，所有配制品在25℃下6个月是稳定的，亚可见颗粒没有增加。从图5B中的SEC数据来看，单体％随时间略有下降，但在25℃下6个月的最长终点仍保持在95％以上。这表明配制品将通过95％ SEC标准(单克隆抗体的通用规范)。从图5C中的IEC数据来看，主峰％随时间下降，但在25℃6个月的条件下仍保持在40％以上。从图5D中的CE-SDS(NR)数据来看，完整峰％随时间下降，但在25℃下6个月测量时仍保持在94％以上。

表8.配制品F18、F19、F20、F21和F22在25℃下的可见颗粒结果

配制品	T＝0	25C 1M	25C 2M	25C 3M	25C 6M
						F18	澄清	澄清	澄清	澄清	澄清
F19	澄清	澄清	澄清	澄清	澄清
						F20	澄清	澄清	澄清	澄清	澄清
F21	澄清	澄清	澄清	澄清	澄清
						F22	澄清	澄清	澄清	澄清	澄清

在5℃±3℃下储存不同时间点的欧司珀利单抗抗体配制品的长期稳定性如表9和图6所示。所有配制品在5℃±3℃下储存24个月时都是澄清，没有观察到可见颗粒。从图6A中的亚可见颗粒数据来看，所有配制品在5℃±3℃下24个月是稳定的，亚可见颗粒没有增加。从图6B中所示的SEC数据来看，单体％随时间略有下降，但在5℃±3℃在24个月时间点下仍保持97％。同样，这表明本文披露的配制品将通过95％ SEC标准(单克隆抗体的通用规范)。从图6C中的IEC数据来看，主峰％在5℃±3℃下24个月没有随时间变化。从图6D中的CE-SDS(NR)数据来看，完整峰％随时间略有下降，但在5℃±3℃下24个月仍保持在96％以上。

表9.配制品F18、F19、F20、F21和F22在5℃±3℃下的可见颗粒结果

配制品

T＝0

5C 3M

5C 6M

5C 9M

5C 12M

5C 18M

5C 24M

F18

澄清

F19

澄清

F20

澄清

F21

澄清

F22

澄清

总之，这些结果表明，欧司珀利单抗抗体配制品F18、F19、F20、F21和F22在5℃±3℃和25℃下24个月是稳定的，并且在临床使用的可接受参数范围内。

Claims

1.一种药物配制品，其包含：

i.约5mg/mL至约200mg/mL的抗TIGIT抗体或其抗原结合片段；

ii.约5mM至约50mM配制品缓冲液，该配制品缓冲液提供约5.0至约7.0的pH；

iii.约30mM至约300mM稳定剂；

iv.约0.01mg/ml至约1mg/ml非离子型表面活性剂。

2.如权利要求1所述的配制品，其中该抗TIGIT抗体或其抗原结合片段包含重链可变区和轻链可变区，该重链可变区包含SEQ ID NO:1的HCDR1(重链互补决定区1)、SEQ ID NO:2的HCDR2和SEQ ID NO:3的HCDR3，该轻链可变区包含：SEQ ID NO:4的LCDR1(轻链互补决定区1)、SEQ ID NO:5的LCDR2和SEQ ID NO:6的LCDR3。

3.如权利要求1所述的配制品，其中该抗TIGIT抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8。

4.如权利要求1所述的配制品，其中该配制品缓冲液选自由以下组成的组：组氨酸、乙酸盐、柠檬酸盐、琥珀酸盐、磷酸盐、组氨酸和乙酸的混合物、或组氨酸和柠檬酸的混合物。

5.如权利要求4所述的配制品，其中该配制品缓冲液是组氨酸。

6.如权利要求5所述的配制品，其中组氨酸缓冲液的浓度是10mM至30mM。

7.如权利要求6所述的配制品，其中该配制品包含20mM组氨酸缓冲液。

8.如权利要求6或7所述的配制品，其中pH的范围为5.2-6.2。

9.如权利要求1至8中任一项所述的配制品，其中该稳定剂选自由以下组成的组：海藻糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、麦芽糖、右旋糖酐、(2-羟丙基)-b-环糊精、氯化钠、氯化镁、氯化钙、硫酸钠、磷酸二氢钠或磷酸氢二钠。

10.如权利要求9所述的配制品，其中该稳定剂是海藻糖。

11.如权利要求1至10中任一项所述的配制品，其中该海藻糖浓度是50mM至280mM。

12.如权利要求11所述的配制品，其中该海藻糖浓度是150mM至250mM。

13.如权利要求9所述的配制品，其中该稳定剂是蔗糖。

14.如权利要求13所述的配制品，其中该蔗糖浓度是50mM至280mM。

15.如权利要求14所述的配制品，其中该蔗糖浓度是150mM至250mM。

16.如权利要求1至15中任一项所述的配制品，其中该非离子型表面活性剂选自由以下组成的组：聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯80或泊洛沙姆188。

17.如权利要求16所述的配制品，其中聚山梨醇酯20的浓度是0.1mg/ml至0.8mg/ml。

18.如权利要求17所述的配制品，其中聚山梨醇酯20浓度是0.2mg/ml至0.6mg/ml。

19.如权利要求16所述的配制品，其中聚山梨醇酯80的浓度是0.1mg/ml至0.8mg/ml。

20.如权利要求19所述的配制品，其中聚山梨醇酯80浓度是0.2mg/ml至0.6mg/ml。

21.如权利要求16所述的配制品，其中泊洛沙姆188的浓度是0.1mg/ml至0.8mg/ml。

22.如权利要求21所述的配制品，其中泊洛沙姆188浓度是0.2mg/ml至0.6mg/ml。

23.如权利要求1所述的配制品，其中该配制品包含30mM乙酸-乙酸钠、240mM蔗糖和0.2mg/ml聚山梨醇酯80，pH为pH 5.5。

24.如权利要求1所述的配制品，其中该配制品包含20mM组氨酸-组氨酸HCl、240mM海藻糖和0.2mg/ml聚山梨醇酯20，pH为pH 5.8。

25.如权利要求1所述的配制品，其中该配制品包含20mM组氨酸-组氨酸HCl、70mMNaCl、80mM海藻糖和0.8mg/ml聚山梨醇酯20，pH为pH 6.0。

26.如权利要求1至25中任一项所述的配制品，其中该抗TIGIT抗体或其抗原结合片段的浓度是约10mg/mL至150mg/mL。

27.一种制备抗体配制品的方法，该方法包括：

b.将(a)的抗体配制品浓缩至抗体浓度为约5-200mg/mL；

d.将稳定剂添加至该抗体中以获得稳定剂浓度不低于30mM的抗体配制品，其中该抗TIGIT抗体包含

重链可变区和轻链可变区，该重链可变区包含SEQ ID NO:1的HCDR1(重链互补决定区1)、SEQ ID NO:2的HCDR2和SEQ ID NO:3的HCDR3，该轻链可变区包含：SEQ ID NO:4的LCDR1(轻链互补决定区1)、SEQ ID NO:5的LCDR2和SEQ ID NO:6的LCDR3。

28.如权利要求27所述的配制品，其中该抗TIGIT抗体或其抗原结合片段包含SEQ IDNO:7和SEQ ID NO:8。

29.一种用于治疗有需要的人类患者的癌症的方法，该方法包括施用有效量的如权利要求1所述的抗TIGIT抗体配制品。

30.如权利要求29所述的方法，其中以约200mg至约2400mg的剂量施用该抗TIGIT抗体配制品。

31.如权利要求30所述的方法，其中每三周一次施用该抗TIGIT抗体配制品。

32.如权利要求29所述的方法，其中将至少一种其他治疗剂施用于该人类患者，该其他治疗剂选自由以下组成的组：泽布替尼、帕米帕利、替雷利珠单抗、抗LAG3抗体、第二抗TIGIT抗体、抗4-1BB抗体、抗OX40抗体、抗TIM-3抗体、CD40激动剂、TLR激动剂、CAR-T细胞、或化学治疗剂。