CN117898418A - 一种对新冠病毒损伤有辅助保护作用的食物及其应用 - Google Patents
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- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
Abstract
本发明公开了一种对新型冠状病毒损伤有辅助保护作用的食物与应用,所述的食物含有溶菌酶或包含溶菌酶的组合。本发明的溶菌酶或其组合可以有助于改善/缓解新型冠状病毒引起的相关症状,具有重要的社会效益和良好的应用前景。
Description
本申请是分案申请;原申请的申请号为“CN202080004305.3”,申请日为2020年12月04日,发明名称为“一种抗新冠病毒感染的药物、食物与应用”。
技术领域
本发明涉及食品领域,具体涉及一种对SARS-CoV-2损伤或症状有辅助保护作用的食物,及其应用。
背景技术
新型冠状病毒(SARS-CoV-2)是属于冠状病毒科的一种新病毒,与SARS病毒有一定相似性,但也存在明显区别,特别是在病毒基因序列、无症状携带者、临床症状、组织病理学等方面。SARS-CoV-2通过其刺突蛋白(S蛋白)与人血管紧张素转化酶2(ACE2)结合,介导病毒入侵宿主细胞。
随着对SARS-CoV-2的研究日渐深入,研究人员发现,除了肺部是SARS-CoV-2的靶器官外,SARS-CoV-2还攻击人体的免疫系统、泌尿系统、心血管系统、消化系统,甚至是神经系统。
如果能够提供一种对机体基本无害又对SARS-CoV-2相关症状或损伤有辅助保护作用的食物,无疑具有巨大的社会效益。
发明内容
本发明的目的之一是提供一组溶菌酶在制备食物中的应用。为了实现该目的,本发明所采取的技术方案是:
溶菌酶或包含溶菌酶的组合在制备对新型冠状病毒SARS-CoV-2损伤有辅助保护作用的食物中的应用。
溶菌酶或包含溶菌酶的组合在制备有助于改善/缓解SARS-CoV-2引起的相关症状的食物中的应用。
在一些实例中,所述的SARS-CoV-2损伤包括呼吸系统、消化系统、泌尿系统、生殖系统、心血管系统中一个或多个系统的SARS-CoV-2相关损伤。例如肺部、上呼吸道、下呼吸道、胃、肠道、肝脏、肾脏、睾丸、胎盘、心脏等组织或器官。优选呼吸系统和/或消化系统,例如肺部或/和肠道。
在一些实例中,所述的SARS-CoV-2损伤包括新型冠状病毒SARS-CoV-2核酸检测呈阳性。
在一些实例中,所述的SARS-CoV-2核酸检测可以基于标本展开;所述的标本包括呼吸道标本和/或消化道标本。在一些实例中,所述的呼吸道标本可以是上呼吸道标本或下呼吸道标本。在一些实例中,所述的上呼吸道标本可以是口咽拭子、鼻咽拭子等;在一些实例中,所述的下呼吸道标本可以是呼吸道吸取物、支气管灌洗液、肺泡灌洗液、深咳痰液等。在一些实例中,所述的消化道标本可以采集自食管、胃、小肠(例如十二指肠、回肠)、大肠(例如结肠、直肠)、肛管或粪便;具体来说,例如肛拭子、直肠拭子等。在一些实例中,只有消化道标本的SARS-CoV-2核酸检测呈阳性;在另一些实例中,消化道标本与呼吸道标本的SARS-CoV-2核酸检测均呈阳性。
在一些实例中,所述的SARS-CoV-2引起的相关症状是由于SARS-CoV-2所导致的。
在一些实例中,所述的SARS-CoV-2引起的相关症状选自免疫系统症状、呼吸系统症状、消化系统症状、泌尿系统症状、生殖系统症状、心血管系统症状、神经系统症状中的一种或多种。在一些实例中,所述的SARS-CoV-2引起相关的症状包括一种以上的症状,例如呼吸系统症状和消化系统症状。
在一些实例中,所述的免疫系统症状选自发热。
在一些实例中,所述的消化系统症状选自肠道屏障功能损伤或消化功能障碍。在一些实例中,所述的消化系统症状可以是腹泻、恶心、呕吐、厌食、腹痛、消化道出血、便秘和胀气中的一种或多种。
在一些实例中,所述的呼吸系统症状选自气道阻力增加、呼气量下降、呼吸窘迫等。
在一些实例中,所述包含溶菌酶的组合中还包括甘草酸或其盐。例如甘草酸单铵和/或甘草酸二钾。
在一些实例中,所述组合中溶菌酶和甘草酸或其盐的重量比为100:1至1:100,优选100:1至2:1,更优选100:1至5:1,进一步优选100:1至10:1。在一些优选方案中,二者可产生显著的协同作用。
在一些实例中,所述组合中的溶菌酶和甘草酸或其盐可以通过各种方式进行组合。可以以各自独立存在于不同食品中的方式进行组合,例如组合包装、联合使用等方式;也可以以共同存在于同一食品中的方式进行组合,例如复合食品的方式等。
本发明提供的溶菌酶或包含溶菌酶的组合还可以和其他可用于预防或治疗SARS-CoV-2相关的疾病或症状的成分联用或制成复方产品,这些成分既可以是具有抗SARS-CoV-2潜力的活性成分,也可以是能够对症治疗所述疾病或症状的活性成分。
在一些实例中,所述的其他可用于预防或治疗SARS-CoV-2相关的疾病或症状的成分可以包括其他可用于预防或治疗新型冠状病毒感染引起的肺炎的成分,也可以包括其他可用于预防或治疗消化系统疾病或症状的成分。在一些实例中,所述的其他可用于预防或治疗新型冠状病毒感染引起的肺炎的成分选自干扰素、奥司他韦或其盐、洛匹那韦、利托那韦、法匹拉韦、利巴韦林、瑞德西韦、氯喹或其盐、羟基氯喹或其盐、阿比多尔或其盐、白介素抑制剂、肿瘤坏死因子抑制剂、两面神激酶抑制剂、糖皮质激素、蛋白酶抑制剂、肠道微生态调节剂中的一种或多种。在一些实例中,所述蛋白酶抑制剂可以选自乌司他丁、西维来司他、萘莫司他或氨甲环酸。在一些实例中,所述白介素抑制剂可以选自托珠单抗。在一些实例中,所述肿瘤坏死因子抑制剂可以选自阿达木单抗、英夫利昔单抗或依那西普。在一些实例中,所述两面神激酶抑制剂可以选择托法替尼或巴瑞克替尼。在一些实例中,所述肠道微生态调节剂可以选自益生元或益生菌。在一些实例中,所述的其他可用于预防或治疗消化系统疾病或症状的成分选自肠道微生态调节剂、胃肠黏膜保护剂、止吐药、止泻药、促胃肠动力药、解痉药、抗消化性溃疡药和助消化药中的一种或多种。
在一些实例中,所述组合中溶菌酶可以与甘草酸或其盐、其他可用于预防或治疗新型冠状病毒感染引起的肺炎的成分和其他可用于预防或治疗消化系统疾病或症状的成分中的至少一种通过各种方式进行组合。在一些实施例中,溶菌酶与甘草酸或其他成分可以以分别存在于不同产品中的方式进行组合(例如组合包装);在另一些实例中,溶菌酶与甘草酸或其他成分也可以以共同存在于同一产品中的方式进行组合(例如复方产品)。
在一些实例中,所述的食物为保健食品或特殊医学用途食品。
在一些实例中,所述的食物中还包括食物上适用的添加剂。在一些实例中,所述的添加剂可以是防腐剂、着色剂、调味剂、香料、保鲜剂、抗氧化剂、乳化剂、粘稠剂、碳水化合物、脂肪、维生素、氨基酸、微量元素、蛋白质等等。
本发明的目的之二是提供一组食物,为了实现该目的,本发明所采取的技术方案是:
一种食物,所述食物中含有溶菌酶或包括溶菌酶的组合,所述食物对SARS-CoV-2损伤有辅助保护作用,或有助于改善/缓解SARS-CoV-2引起的相关症状。
在一些实例中,所述SARS-CoV-2损伤如本发明目的之一“溶菌酶在制备食物中的应用”部分中所述。
在一些实例中,所述SARS-CoV-2引起的相关症状如本发明目的之一“溶菌酶在制备食物中的应用”部分中所述。
在一些实例中,所述食物中还含有甘草酸或其盐。例如甘草酸单铵和/或甘草酸二钾。
在一些实例中,所述食物中的溶菌酶和甘草酸或其盐的重量比可以是100:1至1:100,优选100:1至2:1,更优选100:1至5:1,进一步优选100:1至10:1。在一些优选方案中,二者可产生显著的协同作用。在一些实例中,所述食物中的溶菌酶与甘草酸或其盐,均可以通过各种方式进行组合,具体的组合方式如本发明目的之一“溶菌酶在制备食物中的应用”部分中所述。
在一些实例中,所述的食物为保健食品或特殊医学用途食品。
在一些实例中,所述食物中含有食物上适用的添加剂。在一些实例中,所述的添加剂可以是防腐剂、着色剂、调味剂、香料、保鲜剂、抗氧化剂、乳化剂、粘稠剂、碳水化合物、脂肪、维生素、氨基酸、微量元素、蛋白质等等。
本发明的目的之三是提供一组方法,为了实现所述目的,本发明所采取的技术方案是:
一种辅助保护SARS-CoV-2损伤或改善/缓解SARS-CoV-2引起的相关症状的方法,包括向所需要的对象给予食物,所述食物包括有效量的溶菌酶或包括溶菌酶的组合。
一种减少SARS-CoV-2损伤的方法,包括向所需要的对象给予食物,所述食物包括有效量的溶菌酶或包括溶菌酶的组合。
在一些实例中,所述SARS-CoV-2损伤如本发明目的之一“溶菌酶在制备食物中的应用”部分中所述。
在一些实例中,所述SARS-CoV-2引起的相关症状如本发明目的之一“溶菌酶在制备食物中的应用”部分中所述。
在一些实例中,所述的食物中还含有甘草酸或其盐。例如甘草酸单铵和/或甘草酸二钾。
在一些实例中,所述食物中溶菌酶和甘草酸或其盐的重量比为100:1至1:100,优选100:1至2:1,更优选100:1至5:1,进一步优选100:1至10:1。在一些优选方案中,二者可产生显著的协同作用。
在一些实施例中,所述对象经SARS-CoV-2核酸检测呈阳性。
在一些实例中,所述食物中的溶菌酶与甘草酸或其盐,均可以通过各种方式进行组合,具体的组合方式如本发明目的之一“溶菌酶在制备食物中的应用”部分中所述。
在一些实例中,所述的食物为保健食品或特殊医学用途食品。
在一些实例中,所述食物可以以不同的方式进行给予,例如可以是口服给予、鼻饲给予、注射给予、吸入给予等。
在一些实例中,所述食物中含有食物上适用的添加剂。在一些实例中,所述的添加剂可以是防腐剂、着色剂、调味剂、香料、保鲜剂、抗氧化剂、乳化剂、粘稠剂、碳水化合物、脂肪、维生素、氨基酸、微量元素、蛋白质等等。
在一些实例中,所述溶菌酶的每日用量可以是0.5g至20g。
本发明的有益效果是:
1.本发明的溶菌酶或其组合可以有效抑制SARS-CoV-2导致的细胞损伤,抑制SARS-CoV-2引起的炎症反应,加速SARS-CoV-2在体内的清除,缩短排毒时间,加快体内SARS-CoV-2核酸检测转阴速度(包括消化道标本),有效预防、降低SARS-CoV-2传播风险。
2.本发明的溶菌酶或其组合可以有助于改善SARS-CoV-2引起的气道阻塞和呼气量下降。
3.本发明的溶菌酶或其组合可以有效缓解消化系统症状,改善肠道屏障功能,加速消化道标本SARS-CoV-2核酸检测转阴,缩短症状持续时间,对于SARS-CoV-2消化系统损伤具有良好的辅助保护效果。
4.本发明的溶菌酶或其组合安全性高,在SARS-CoV-2潜伏期辅助保护细胞与机体免受病毒攻击与损伤,遏制SARS-CoV-2在体内的复制,降低SARS-CoV-2感染率;有助于症状不典型的人群(尤其是暂未被确诊的人群,如较为隐匿的SARS-CoV-2消化系统感染人群)及时获得帮助,降低无症状者的病毒传播风险。
具体实施方式
下面用具体实施方式对本发明进行详述。应该理解,具体实施方式部分的内容是属于阐释性的,而非限制性的,即不是对本发明内容的任何限制。
定义:
“溶菌酶”:即lysozyme。本发明的溶菌酶,可以是来源于动物、植物、微生物的溶菌酶,或者是天然溶菌酶的重组物。例如可以是鸡蛋清溶菌酶、人溶菌酶、重组人溶菌酶、噬菌体溶菌酶等。本发明中的溶菌酶包括其盐,例如盐酸盐、氯化物、硫酸盐或氨基酸盐等。溶菌酶最早是由弗莱明发现的一种广泛存在于生物体内的内源性酶。溶菌酶已在世界范围内被批准作为食用。在美国被认定为可以安全使用的物质。WHO、欧洲多国、日本和中国允许其作为食物添加剂使用。
“新型冠状病毒”即SARS-CoV-2,属于冠状病毒科中的一种新病毒。
肠溶制剂:肠溶制剂是指在胃中不释放或是几乎不释放功效成分,而进入肠中,在肠道的某些部位能大部分或全部释放功效成分的制剂。人体的肠道包括小肠和大肠,其中小肠又分为十二指肠、空肠、回肠,大肠又分为盲肠、结肠、直肠。消化道的不同部位具有不同的pH值,例如胃中pH值约1-3,小肠中pH值约4-7,大肠中pH值约7-8。通过选用pH依赖性降解材料作为制剂辅料,可以制备得到在消化道特定部位定向释放功效成分的制剂,例如小肠肠溶制剂或大肠肠溶制剂。具体可以包括十二指肠肠溶制剂、空肠肠溶制剂、回肠肠溶制剂、盲肠肠溶制剂、结肠肠溶制剂或者直肠肠溶制剂等。
下面用实施例对本发明进行进一步阐述,但并非限制本发明的方案和效果。
实施例1:溶菌酶在SARS-CoV-2相关人群中的应用
溶菌酶含片、溶菌酶肠溶片等产品,这些产品在治疗疾病中起到了积极作用。
有9名新型冠状病毒感染引起的肺炎新确诊者服用了所述的溶菌酶含片和/或溶菌酶肠溶片,服用剂量范围为每日0.5g-2g,每日基本坚持服用,结果仅有1名转化为重症,另外8名均为轻症且随后痊愈。经计算重症转化率为11.1%。
有3名人员,疫情期间在高风险的地区居住和出差,坚持每天服用溶菌酶含片和/或溶菌酶肠溶片,用量为每日1g-1.5g,返回复工期间经过核酸检测未发现感染SARS-CoV-2,感染率0%。
据报道,新型冠状病毒感染引起的肺炎患者中的重症和危重症患者的比例高达18.5%,当转化为重症和危重症之后,死亡率更可接近50%。经过对比发现,服用溶菌酶制剂可大幅降低重症率,进而降低了死亡率,对于防治新型冠状病毒引起的疾病具有非常积极的作用。另外溶菌酶制剂对于SARS-CoV-2高感染风险人群还起到了预防感染的作用。
实施例2:溶菌酶抗SARS-CoV-2的体外试验
用非洲绿猴肾细胞研究了溶菌酶抗SARS-CoV-2的效果。
受试物:溶菌酶、甘草酸单铵。
细胞:非洲绿猴肾细胞(Vero E6细胞)。
病毒:SARS-CoV-2,由广州海关技术中心保存,使用的滴度为100TCID50。
培养:无菌96孔培养板,每孔加入100μL浓度为2×105cells/mL的Vero E6细胞,37℃培养24小时。培养板按孔分为空白对照组、病毒对照组、溶菌酶低剂量组、溶菌酶中剂量组、溶菌酶高剂量组、甘草酸单铵低剂量组、甘草酸单铵高剂量组,每组3孔。除空白对照组之外,各组中均加入100TCID50病毒液100μL/孔,37℃下5%CO2培养箱吸附2小时后,弃去培养板中细胞培养液。
加样:按剂量将受试样品溶液加入到下列各组的孔中:溶菌酶低剂量组(500μg/mL)、溶菌酶中剂量组(1000μg/mL)、溶菌酶高剂量组(2000μg/mL)、甘草酸单铵低剂量组(1000μg/mL)、甘草酸单铵高剂量组(2000μg/mL),每孔100μL。之后在37℃下孵育4天。
观测细胞病变:孵育完后在光学显微镜下观察细胞病变(CPE)。细胞出现的病变程度按以下6级标准记录:“-”无病变出现,“±”为细胞病变少于10%,“+”为细胞病变约25%,“++”为细胞病变约50%,“+++”为约75%的细胞出现病变,“++++”为75%以上病变。用CCK8试剂盒和酶标仪测定各孔OD值,计算各组受试样品对病毒导致的细胞病变的抑制率。抑制率=(As-Av)/(Ac-Av);其中:As为各受试样品组OD值;Av病毒对照组OD值;Ac空白对照组OD值。抑制率越高说明效果越好。
结果:试验的主要结果列于表1。试验结果表明溶菌酶可显著抑制SARS-CoV-2所致细胞病变。甘草酸盐对SARS-CoV-2抑制作用较弱。
表1:溶菌酶对SARS-CoV-2所致细胞病变的抑制率
受试样品(浓度) | 抑制率(%) |
溶菌酶(500μg/mL) | 15.00±8.66 |
溶菌酶(1000μg/mL) | 46.67±15.28 |
溶菌酶(2000μg/mL) | 78.33±2.89 |
甘草酸单铵(1000μg/mL) | 23.35±5.43 |
甘草酸单铵(2000μg/mL) | 29.42±7.16 |
实施例3:含溶菌酶的组合抗SARS-CoV-2以及SARS-CoV-2引起的炎症的体外试验
研究含溶菌酶的组合对SARS-CoV-2引起的细胞病变的抑制作用,以及对SARS-CoV-2引起的炎症的抑制效果。
受试物、细胞、病毒等均与实施例2相同。
培养板分组和加样剂量为:空白对照组、病毒对照组、溶菌酶组(350μg/ml)、溶菌酶甘草酸单铵I组(100μg/ml+1μg/ml)、溶菌酶甘草酸单铵II组(100μg/ml+5μg/ml)、溶菌酶甘草酸单铵III组(100μg/ml+10μg/ml)、溶菌酶甘草酸单铵IV组(100μg/ml+50μg/ml)。
观测细胞病变方法与实施例2相同,试验结果见表2。另外,收集无病变细胞,提取RNA,用定量PCR法测定TNF-α、IL-6等炎性因子的相对表达水平,试验结果见表3。
表2:含溶菌酶的组合对SARS-CoV-2所致细胞病变的抑制作用
受试样品(浓度) | 抑制率(%) |
溶菌酶(350μg/ml) | 6.67±1.56 |
溶菌酶+甘草酸单铵(100μg/ml+1μg/ml) | 38.20±8.11## |
溶菌酶+甘草酸单铵(100μg/ml+5μg/ml) | 49.32±9.45## |
溶菌酶+甘草酸单铵(100μg/ml+10μg/ml) | 23.68±4.31## |
溶菌酶+甘草酸单铵(100μg/ml+50μg/ml) | 8.20±2.27 |
注:各受试物组合组与溶菌酶组相比,p<0.05(#),p<0.01(##)。
表3:含溶菌酶的组合对SARS-CoV-2诱导的细胞炎性因子表达的影响
注:各受试物组与病毒对照组相比,p<0.05(*),p<0.01(**)。各受试物组合组与溶菌酶组相比,p<0.05(#),p<0.01(##)。
从表2和表3可以看出,溶菌酶和含溶菌酶的受试物组合对SARS-CoV-2所致细胞病变有较好的抑制作用,并且可使SARS-CoV-2所致的细胞炎性因子升高得到显著降低。与单独的溶菌酶相比,受试物组合的效果明显更好,表现为抑制率明显提高、炎性因子水平明显降低,以及受试物用量大幅减少。提示甘草酸盐对溶菌酶的强大增效作用,特别是甘草酸盐的用量较少时增效作用更好。
实施例4:溶菌酶及其组合物对吸入烟雾豚鼠的气道阻力和肺功能的影响
烟熏模型是慢性阻塞性肺病的经典动物造模方法。动物长期吸入烟雾后会出现黏液分泌增加、气道阻塞、肺功能下降等。本试验借用该造模方法评估溶菌酶对气道阻塞的影响。
1、受试物
溶菌酶、甘草酸单铵、甘草酸单钾。
2、动物及分组
雄性Hartley豚鼠,体重400-500g,随机分组,空白组、模型组、溶菌酶口服组(200mg/kg)、溶菌酶吸入组(2mg/kg)、溶菌酶+甘草酸单铵吸入组(2mg/kg+0.1mg/kg)、溶菌酶+甘草酸单钾口服I组(200mg/kg+20mg/kg)、溶菌酶+甘草酸单钾口服II组(200mg/kg+40mg/kg),每组8只动物。
3、造模
使用仅经口鼻吸入的烟雾暴露系统,将除空白组外的各组动物暴露于香烟烟雾中,使动物每天在40分钟内吸入5根香烟的烟雾,每周暴露5天,持续12周。
4、受试样品配制和给予
用于吸入给予的溶菌酶和甘草酸单铵分别粉碎成颗粒<10μm的粉末。用于口服给予的溶菌酶和甘草酸单钾分别溶于生理盐水中。
除空白组和模型组以外的各组动物从造模开始后的第8周开始给予受试样品,每天1次,持续给予4周。吸入给予组采用口鼻吸入暴露系统给予受试样品,口服给予组采用灌胃给予受试样品。空白组和模型组每日灌胃生理盐水。
5、测试
样品给予完成后进行气道阻力测量和100毫秒呼气容积测量。
将动物置于双室体积描记系统(double chamber plethysmography)中,等动物安静10分钟后,测定特殊气道阻力(specific airway resistance,sRaw)。动物肌内注射氯胺酮进行麻醉后,向气管中插入导管,使用肺功能检测系统测量动物的100毫秒呼气容积(force dexpiratory volume in 100ms,FEV100)。
6、试验结果和评价
动物气道阻力和100毫秒呼气容积的测量结果如表4所示。
表4:溶菌酶及其组合物对动物气道阻力和100毫秒呼气容积的影响
注:各给予受试样品组与模型组相比,p<0.05(*),p<0.01(**)。口服组合组与溶菌酶口服组相比,p<0.05(#),p<0.01(##)。吸入组合组与溶菌酶吸入组相比,p<0.05(&),p<0.01(&&)。
本试验通过长期吸入烟雾造成动物肺部气道阻力显著增加以及肺功能显著下降(呼气容积减少)。从试验结果看出,给予受试样品各组不同程度地减少了动物肺部气道阻力、增加了呼气容积。通过将受试物组合组与单独的溶菌酶组进行比较发现,甘草酸类物质增强了溶菌酶的效果,特别是当甘草酸类物质用量较少时,增效效果显著。
实施例5:溶菌酶及其组合对脂多糖诱导的小鼠肠道屏障功能障碍的保护作用
脂多糖可引发动物肠道功能受损。本实验研究了溶菌酶及其组合对脂多糖诱导的小鼠肠道屏障功能障碍的保护作用。
受试物:溶菌酶、甘草酸单铵、甘草酸二钾。
试验动物:雄性清洁级C57BL/6小鼠,体重20-25g。
动物分组和受试样品给予:动物随机分为:空白组、模型组、溶菌酶组(100mg/kg)、溶菌酶+甘草酸单铵A组(100mg/kg+2mg/kg)、溶菌酶+甘草酸单铵B组(100mg/kg+10mg/kg)、溶菌酶+甘草酸单铵C组(100mg/kg+20mg/kg)、溶菌酶+甘草酸二钾组(100mg/kg+2mg/kg),每组8只动物。各受试样品组每日分别按剂量灌胃给予受试样品,空白组和模型组给与生理盐水。连续给予30天。
造模:完成受试样品的给予后,除空白组外的各组动物腹腔注射脂多糖15mg/kg,空白组注射生理盐水。注射完成后动物禁食12小时。
肠道通透性测定:各组动物灌胃600mg/kg的FITC-葡聚糖(溶于磷酸盐缓冲液中),4小时后眼球取血,用荧光光谱法(激发波长480nm,发射波长520nm)测定血清中FITC-葡聚糖的含量,结果见表5。
肠道组织紧密连接蛋白表达测定:动物处死后,取空肠组织样品,提取RNA,用定量PCR法检测组织中Occludin蛋白、Claudin-1蛋白的相对表达水平,结果见表6。
表5:溶菌酶及其组合对肠道通透性的影响
注:各受试样品组与模型组相比,p<0.05(*),p<0.01(**)。各受试样品组合组与溶菌酶组相比,p<0.05(#),p<0.01(##)。
表6:溶菌酶及其组合对肠道组织紧密连接蛋白表达的影响
注:各受试样品组与模型组相比,p<0.05(*),p<0.01(**)。各受试样品组合组与溶菌酶组相比,p<0.05(#),p<0.01(##)。
本实验研究了溶菌酶及其组合物对脂多糖诱导的小鼠肠道屏障功能障碍的保护作用。模型组注射脂多糖后,发现与空白组相比血清葡聚糖含量显著升高,说明大量葡聚糖通过肠道入血,即肠道通透性增加;模型组肠道中两种紧密连接蛋白的表达下降,进一步说明肠道屏障功能受损。本实验发现溶菌酶及其组合物能显著降低脂多糖诱导的肠道通透性升高,显著增加肠道组织紧密连接蛋白的表达,对肠道屏障功能障碍具有明显的保护作用;还发现受试物组合组的效果明显优于单独使用溶菌酶。
实施例6:溶菌酶在SARS-CoV-2肠道感染人群中的应用
10例处于恢复期的新型冠状病毒感染引起的肺炎患者,呼吸道标本SARS-CoV-2核酸检测呈阴性,无呼吸道症状,但粪便样本经SARS-CoV-2核酸检测呈阳性,属于肠道感染者,接受医学观察。其中7例伴有腹泻、腹痛、胀气等消化道症状,3例无明显消化道症状。每日服用实施例1所述的溶菌酶肠溶片4-6g,与同一批进行观察的其他呼吸道标本经SARS-CoV-2核酸检测呈阴性、但粪便样本经SARS-CoV-2核酸检测呈阳性患者(其中包括出现消化道症状的患者)相比,观察到服用溶菌酶的患者消化道症状更快消失,并提前3天以上实现肠道标本SARS-CoV-2核酸检测转阴。
经对比研究发现,溶菌酶制剂可以加速SARS-CoV-2在患者体内的清除,缩短病毒排毒时间,改善SARS-CoV-2导致的消化道症状,加快患者的消化道标本病毒核酸检测转阴速度。
综上所述,本发明的溶菌酶及其组合可有效抑制SARS-CoV-2导致的细胞损伤、抑制SARS-CoV-2诱导的炎性因子表达,加速病毒在体内的清除,缩短排毒时间,加快SARS-CoV-2核酸检测转阴速度;缓解消化道症状,改善肠道屏障功能障碍,改善肺部气道阻塞,增加呼气容积,可降低SARS-CoV-2感染率和新型冠状病毒感染引起的肺炎重症转化率。根据目前认识表明,SARS-CoV-2可能导致多种症状,前期病毒载量很高,呼吸系统方面在中后期具有非常明显的呼吸窘迫症状,免疫系统方面可能引起严重的细胞因子风暴,消化系统方面可导致肠道屏障功能障碍进而导致相关人群持续和继发感染、康复困难、传染性增加,重症患者死亡率高等,因此本发明的溶菌酶及其组合有望通过多种方式辅助保护SARS-CoV-2相关损伤;并且由于其安全性好,用量剂量可加大,有望成为一种改善/缓解SARS-CoV-2引起的相关症状的较好选择。同时,随着研究的深入,发现SARS-CoV-2在消化道中的活跃与存在时间长,可早于症状出现,消化道标本甚至在呼吸道标本核酸检测转阴后仍为阳性。SARS-CoV-2的传染率高、潜伏期长、隐蔽性强、连续间隔短、病毒排毒时间长,本发明的溶菌酶及其组合可有望为存在SARS-CoV-2损伤(包括消化系统损伤)但症状不典型的人群及时提供帮助,缩短出现消化道症状人群的症状持续时间,并有效预防SARS-CoV-2的传播,具有良好的应用前景。
Claims (11)
1.溶菌酶或包括溶菌酶的组合在制备食物中的应用,其特征在于:所述的食物是对新型冠状病毒损伤有辅助保护作用的食物,或有助于改善/缓解新型冠状病毒引起的相关症状的食物。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:所述的食物是保健食品或特殊医学用途食品。
3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:所述组合中还含有甘草酸或其盐。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于:所述的组合中的溶菌酶和甘草酸或其盐分别存在于不同食品中,或者共同存在于同一食品中。
5.根据权利要求4所述的应用,其特征在于:所述组合中溶菌酶和甘草酸或其盐的重量比为100:1至1:100,优选100:1至2:1,更优选100:1至5:1,进一步优选100:1至10:1。
6.一种食物,其特征在于:所述的食物中含有溶菌酶或包括溶菌酶的组合,所述食物对新型冠状病毒损伤有辅助保护作用,或有助于改善/缓解新型冠状病毒引起的相关症状。
7.根据权利要求6所述的食物,其特征在于:所述组合中还含有甘草酸或其盐。
8.根据权利要求7所述的食物,其特征在于:所述组合中溶菌酶和甘草酸或其盐的重量比为100:1至1:100,优选100:1至2:1,更优选100:1至5:1,进一步优选100:1至10:1。
9.一种减少新型冠状病毒损伤或改善/缓解新型冠状病毒引起的相关症状的方法,其特征在于:包括向所需要的对象给予食物,所述食物包括有效量的溶菌酶或包括溶菌酶的组合。
10.根据权利要求9所述的方法,所述的组合中还包括甘草酸或其盐。
11.根据权利要求10所述的方法,所述的组合中溶菌酶和甘草酸或其盐的重量比为100:1至1:100,优选100:1至2:1,更优选100:1至5:1,进一步优选100:1至10:1。
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