CN1176698C - 一种脑梗塞后遗症药物的制作方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种脑梗塞后遗症药物的制作方法及中药合剂，该合剂采用黑木耳混合液态发酵中生成的富含菌丝的发酵滤过液和菊花，丝瓜络的有效成份淬取液配比制成的合剂，对脑血栓后遗症的治疗，防止复发，以及降血液粘稠度和血脂五项指标有显著的治疗作用，同时亦是血管的营养剂。

Description

一种脑梗塞后遗症药物的制作方法

技术领域

本发明属于一种脑梗塞后遗症药物的制作方法，方法涉及合剂的组配方案以及有效成份的加工方法。

背景技术

心脑血管疫病已成为危胁人生命的主要疾病种类。随着物质文明的提高，人类生活水平改善和饮食的高脂、高蛋白质方向发展，心脑血管造成人类死亡的比率也越来越高。分析其原因是人体内血液粘稠度指标升高所致，往往最后导至血流不畅，脑部严重缺血，以至形成血栓，威胁人的生命。现有的西药物多以溶栓，减少血液粘稠度为主。现有中药中降低血液胆固醇及甘油三酯有效品种很多如“丹参滴丸”，有很好的预防和脑血栓急性愈后的治疗作用。无论是中药，西药，其药性作用单一，作用明显但不持久。也就是说其作用只能暂时解决血液中异常指标的恶劣状态，并不能彻底改善血液内超标指数再度恶化。其它辅助性作用更谈不到。能够有效地降低血中胆固醇，甘油三酯等成份指标，并在有效降低血液粘稠度的同时，又起到营养软化血管，补充血管壁营养成份，防止血液中血脂和甘油三酯的增长起到有益预防作用的综合性疗效显著的营养型药物，目前尚不多见。

发明内容

本发明的目的是提供一种具有明显降低血液粘稠度，血清比粘度和纤维蛋白原，对血液凝固有一定抑制作用，同时又对血管壁软化营养作用显著的一种生物与中草药合剂的制作方法。使其能对脑血栓的治疗及愈后恢复功能有特别效果。

本发明的关键是借助微生物制品中的有效成分与中草药性的配伍互补达到本发明的确定的目标。其微生物选取的菌种是黑木耳(学名：Auricularia auricular)(编号：AS5.452，保藏单位：中科院微生物研究所)有效成分为木耳多糖，终极产品载体为黑木耳菌丝体。中草药配伍所采用的是菊花和丝瓜络。

经专利权人多年来的研究，黑木耳菌丝体在发酵罐中。湿重达60-80％时，其木耳多糖的有效含量足以产生明显的药效。这种药效在对小白鼠做的药理实验中可以得出以下结论：6.5-7克/公斤的注入量可使血小板聚散反应产生，表现出对ADP的明显抑制性。对照组实验中，对血浆比粘度，血清比粘度纤维蛋白质指标改善统计学意义明显。对高脂饲料大白鼠中胆固醇和甘油三酯增长有明显抑制作用。血栓形成对比试验效果表明，木耳多糖对血栓形成的速度和大小有显著影响。

以上的药理研究决定本发明中以含黑木耳菌丝体湿重或密度为60-80％的黑木耳发酵滤过液为基料，配比所选取的可以强化疗效的菊花、丝瓜络浸出液进行配伍可以有效地强化木耳多糖的药用效果，进一步成份化验证明，黑木耳混合液体发酵所生成的滤过液中除去含木耳多糖，还含有极其丰富的氨基酸种类达21项之多，以及很多有利于软化和营养血管的微量元素，所以采取以上原料所进行基本配伍可以很好地实现本发明的目的。

下面进一步说明脉康合剂配伍的方法和比例：

a、选取混合发酵罐中含菌丝体的湿重或密度达60-80％的滤过液1000个体积单位为标准。

b、在121℃，1.5个大气压加热加压裂解加工并浓缩为850-950体积单位，

c、取重量相当于8-10体积单位对应水菊花和丝瓜络，加40-50倍的水煎煮并浓缩淬取液其体积为90-100个体积单位，

d、将两种含有效成份的液体混合成为脉康合剂，然后分装，清毒，包装成为成品。

下面根据给出的工艺操作实施例进一步说明脉康合剂是如何制作成功的。

具体实施方式

本发明的技术关键在于所配比的合剂中黑木耳多糖含量要达到规定的标准，而这一标准的实现完全取决于采取混合液体发酵罐中黑木耳菌丝体浓度。培育发酵最终结果要实现滤过发酵液中菌丝体的浓度或湿重要达到60-80％，实现这一指标的具体方法是：

选取菌种，所选用的即是食用黑木耳菌(学名称为Auriculariaauricular具体可选用在中科院微生物所保存的菌种编号为AS5.452号)种，选新肥状的菌种做培养菌种。

通过试管斜面，摇瓶转移，液体种子罐三级种子培养最后制成定容发酵罐1/10体积的液体种子罐内实现液体菌种的培育。

将液体菌种引入发酵罐中发酵培养60-70小时。

2、在发酵罐中滤过液中菌丝体浓度或湿重达60-80％时完成发酵，过滤后获取滤过液。滤去发酵罐中的固体残渣将滤过液加温至121℃，加压1.5个大气压促进菌丝体断开，分裂变小，并经进一步过滤浓缩去除10％的水份及杂物，成为脉康合剂的配伍原料。

在培养种子和实行菌丝体繁殖时均要采用培养基，所采用的培养基碳氮比基本上是18-22∶1，但基本配比上略有区别：试管斜面培养采取的是固态混合物，具体由以下原材料组成(重量组份比)

蛋白质    麸皮    葡萄糖    土豆粉    琼脂

1份       4-6份   1-2份     15-20份   1-3份

采取摇瓶或种子罐、发酵罐所用的混合配比的液体培养基具体实施例如下：(重量组份百分比)

实施例	玉米面	麸子	蔗糖	葡萄糖	酵母粉	豆粉	硫酸镁	磷酸二氢钾	花生油	水
											1	1	1.5	0.5	1.5	0.3	0.3	0.05	0.15	0.3	余量
2	1.2	2	1	1	0.4	0.35	0.06	0.18	0.3	余量
											3	1.3	2.2	1	0.8	0.4	0.4	0.08	0.2	0.35	余量
4	1.5	2.5	2	0.5	0.5	0.5	0.1	0.2	0.4	余量

利用发酵罐和种子罐进行发酵育种工作时由于体积已放大，例如液体种子罐可采用75升种子罐，发酵罐可采用750升-1000升发酵罐。所以为使得菌种扩散均匀，以及反应条件一致，亦使得菌丝生长过程得到充足的氧和营养成份，所以加以搅拌，通气和温度气压控制。使其工艺条件有利于菌丝体的快速生长。这个反应中发酵基本碳氮比C∶N＝18-22∶1，温度控制在26℃-31℃之间，并时刻注视大罐温升不超31℃，搅拌速度为180-200转/分。温度超过28℃可考虑送风降温，发酵罐内接种时液体菌种内菌丝体含量应达40克/100毫升以上，发酵罐内发酵时间为60-70小时，最终指标为滤过液内菌丝体湿重或密度达60-80％。

加工菊花和丝瓜络粹取有效成份的具体方法是按对等的菊花和丝瓜络重量取得基料，如1000毫升的木耳菌丝体发酵滤过液，取8-10克的菊花和对等丝瓜络经处理(121℃、1.5气压浓缩)成为900毫升的浓缩液。然后洗净、浸泡透，加10×50＝500毫升水煎煮，最后滤去药渣后剩下90-100毫升的浓缩淬取液。

将900毫升浓缩黑木耳菌丝体滤过液和100毫升的菊花、丝瓜络煎煮浓缩液混配在一起，然后再分装成四瓶(250毫升一瓶)就制成四瓶脉康合剂。

经过相应的药性，药理试验，黑木耳菌丝体中的有效药用成份木耳多糖的降低血脂、降低血液粘稠度，血清粘稠度，血纤维蛋的原得到了进一步的检证，由于有效中药成份的加入，木耳多糖阻止血栓形成的时间和血栓形成的大小进一步改善加强，这说明本合剂所采用的配伍取得了相当好的强化疗效作用。

通过进一步的毒理试验证明，在加大人体临床药量60倍情况下，对试验动物的饮食，粪便，毛质活动特性，体重增长均不见明显影响，各组试验动物血常规(白细胞，红细胞数量，血小板、网织红细胞、血色素)均在正常生理范围之内，各对照组白鼠的肝肾功能均在正常范围，其它脏器经长期应用观察均未发现异常，可见本合剂无毒副作用。

本合剂通了过进一步急性毒理实验。

以上述黑木耳菌丝体浓度标准制成的脉康合剂按人体剂量80毫升/日为标准，折合100毫升/日最大剂量给试验的白鼠灌胃：8:00，12:00连续二次，白鼠无异常表现。17:00第三次白鼠表现安静少动，30分钟后恢复正常，分析原因是胃涨所致。七日内饮食、粪便、毛色、呼吸活动均正常，多次试验亦无死亡发生，临床给出剂量人体最大忍耐量105毫升/公斤，可见药性安全。

脉康合剂的药效试验。

疗效标准：

(一)脑梗塞后遗症

神经缺损按卫生部发布制定的《中药新药临床研究指导原则》有关中风病疗效评定标准(即尼莫地平法[(治疗前积分-治疗后积分)/治疗前积分]*100％

显效：中医症状积分药后较药前下降2/3以上，神经缺损积分下降≥50％。

有效：中药症状积分下降1/3-2/3，神经缺损积分下降≥20％

无效：中药症状下降＜1/3，神经缺损积分下降＜20％。

(二)高脂血症

血脂参照卫生部试行了《15类药物临床研究指导原则(试行)》中有关调整血脂药物研究制定的标准。

显效：达以下任一项者，TC下降≥20，TG下降≥40％，HDL-C上升≥10mg/dl，AI下降≥20％。

有效：达以下任一项者，TC下降10-19％，TG下降20-39％，HDL-C上升4-9mg/dl，AI下降10-20％。

无效：未达到有效标准者：

恶化：达以下任一项者TC上升≥10％，TG上升≥10％，HDL-C下降≥4mg/dl，AI上升≥10％。

统计结果：

(一)梗塞后遗症

中药症状疗效评定

药后  显效  23例  有效68例  无效9例  总有效率91％

对照  显效  8例  有效21例  无效39  总有效率42.65％

神经功能缺损恢复疗效评定

组别	例数	显效％	有效％	无效	总有效
						治疗组	100	19(19％)	67(67％)	14(14％)	86％
对照组	68	9(13.24％)	23(33.82％)	36(52.94％)	47.06％

对血流变学指标的影响

组别	例数	全血比粘度	血浆比粘度	全血近原粘度
					治疗组药前治疗组药后	100100	5.88±1.025.02±1.44	2.43±0.541.94±0.38	8.24±1.847.32±1.65
对照组药前对照组药后	6868	5.02±1.594.98±1.33	1.96±0.781.82±0.65	8.05±1.757.64±1.49

P＜0.05 p＜0.01

对纤维蛋白质、细胞压积、红细胞电泳时间的影响

组别	例数	红细胞压积	纤维蛋白质mg％	红细胞电泳时间
					治疗组药前治疗组药后	100100	43.24±4.2644.85±3.58	348.47±72.68312.56±69.59	23.19±3.5621.57±4.48
对照组药前对照组药后	6868	45.37±5.8543.64±6.15	389.88±84.06341.72±76.37	23.84±4.2622.53±3.87

P＜0.05 p＜0.01

小结：药前后两组对照中医症状效评定有显著性差异，

神经功能缺损恢复疗效评定，两组有显著性差异，

血液变学指的影响，治疗组药后，全血比粘度，血浆比粘度，全血还原粘度，红细胞压积，纤维蛋白质，红细胞电泳时间均有显著降低。

高脂血症

两组疗效比较

组别	例数	显效	有效	无效	总有效率
						治疗组	50	15(30％)	24(48％)	11(22％)	39(78％)
对照组	50	8(26.6％)	15(50％)	7(233.33％)	23(76.67％)

对TC、TG、HDL-C、AI的变化

组别	例数	TC	TG	HDL-C	AI
						治疗组	50	184.53±18.64	170.56±14.49	39.54±2.73	4.29±1.02
对照组	50	165.61±15.72	163.92±11.38	39.99±2.57	3.83±0.84

 P＜0.05 p＜0.01

小结：两组对比有显著性差异

药后TC、TG、AI均下降，经统计学处理有显著性差异；HDL-C有所上升，但无显著差异。

通过以上的各项试验证明，脉康合剂做为一种新型微生物中草药合剂，对降低血脂五项中的相当高脂症指标有十分明显作用，进一步的分析证明脉康合剂中还包含有丰富的氨基酸和血管营养中所必需的稀有元素，所以该合剂可以适应在脑血栓急性期的辅助治疗，对急性期后的后遗症恢复和防止复发有明显的治疗预防作用。

Claims (5)

1、一种脑梗塞后遗症药物的制作方法，其特征在于该药药物由含黑木耳菌丝体的发酵滤过液和菊花、丝瓜络煎煮淬取液混配而成，具体方法如下：

a、选取黑木耳健康菌种，采取斜面菌种培育，摇床液体育种，种子罐液体菌种三级菌种培育出液体菌种，再将液体菌种引入发酵罐发酵60-70小时，待菌丝体生长浓度或湿重比达60-80％时停止发酵，过滤发酵液中的固体残渣，获得菌丝体湿重达60-80％的黑木耳发酵滤过液1000体积单位，

b、在121℃、1.5个大气压下将以上滤过液热解浓缩至850-950个体积单位，并进一步过滤浓缩去除10％的水份及杂物，

c、选取重量相当8-10个体积单位水的菊花和丝瓜络，加40-50倍重量的水煎煮，使其浓缩生成90-100个体积单位的提取液，

d、然后将两种液体混合，

e、然后分瓶，包装，消毒成为成品。

2、根据权利要求1所说的脑梗塞后遗症药物的制作方法，其特征在于以上所说的发酵或育种过程中所掌握的工艺条件是，发酵温度23-26℃，环境压力为0.05+10％MPA，培养基C/N比为18-22∶1，接种量为：斜面按种6-10mg/100ml，摇瓶按种0.05-0.1％湿重比，种子罐或发酵罐按种5-10％湿重比。

3、根据权利要求1所说的脑梗塞后遗症药物的制作方法，其特征在于采用的发酵或育种培养基料的配方如下；

a、斜面培养基的重量组份：

蛋白质          1份，

麸皮            4-6份，

葡萄糖          1-2份

土豆粉          15-20份，

琼脂            1-3份，

b、固液混合培养基重量百分比：

玉米面      1-1.5，      花  生  油     0.3-0.4，

麸  皮      1.5-2.5，    硫  酸  镁     0.05-0.1，

蔗  糖      1.5-2，      磷酸二氢钾     0.15-0.2，

酵  母      0.3-0.5，    豆      粉     0.3-0.5，

水          余量。

4、根据权利要求1所说的脑梗塞后遗症药物的制作方法，其特征在于在罐内发酵生产时应加入搅拌和通风条件，搅拌速度为180-200转/分，通入空气的压力为0.12-0.75MPA，通入空气温度为26-31℃。

5、根据权利要求1所说的脑梗塞后遗症药物的制作方法，其特征在于加工提取菊花和丝瓜络有效成份淬取液可采取以下步骤：

①按对等的重量配比菊花和丝瓜络，

②漂洗，浸泡，

③加上种药总重40-50倍给水煎煮，

④煎煮蒸发自然浓缩至原加水量的20％即得到中间提取液。