CN117599108A - 一种改善睑缘炎症状的长效眼用制剂 - Google Patents

Abstract

本发明涉及药物制剂领域，具体涉及一种改善睑缘炎症状的长效眼用制剂。制剂包括治疗有效量的两种活性成分组合，以及一种或多种离子敏感型聚合物或其复配体系，通过特殊的双腔体给药瓶，来治疗由蠕形螨引起的睑缘炎症状。优化了现有技术中对于由蠕形螨引起的睑缘炎的治疗方式；且制备工艺简单便捷，成本较低，易于大规模生产，克服了传统眼用制剂的局限性，延长药物在眼部的滞留时间，提高生物利用度，同时降低患者使用的负担，增加用药依从性。

Description

一种改善睑缘炎症状的长效眼用制剂

技术领域

本发明涉及药物制剂领域，具体涉及一种可改善睑缘炎症状的长效眼用制剂。

背景技术

蠕形螨于1842年在耳垢中首次被发现，于1967年发现蠕形螨是导致睑缘炎的因素之一，1984年国内首次报道了蠕形螨感染眼睫毛的具体情况。蠕形螨是一种常见的永久性的小型寄生螨，寄生于人体眼部的蠕形螨有两种，具体为寄居于睫毛毛囊的毛囊蠕形螨，和寄居于睫毛相关皮脂腺、睑板腺的皮脂蠕形螨。蠕形螨的寄生的生命周期有5个阶段，整个生命周期较短，15天左右。因其生命周期较短，所以雌雄间的交配在感染过程中起着不可忽视的影响，蠕形螨以皮肤角质形成的细胞和皮脂分泌物为食，交配常于夜间在毛囊口中进行，繁殖程度在得到充足的食物供给之后达到顶峰，并且在此期间面部的蠕形螨也会传播到眼部，加重眼部感染的程度。

毛囊蠕形螨以毛囊上皮细胞与代谢产物为食，导致毛囊扩张、增生、过度角质化、在睫毛根部形成鳞屑，引起睫毛脱落、倒睫、乱睫等，上述症状被称为前部睑缘炎；皮脂蠕形螨寄居在睑板腺及其开口区，引起睑板腺口堵塞，导致睑板腺功能障碍，进而影响泪膜稳定性。有学者认为，由皮脂蠕形螨寄引起的睑板腺功能障碍，是导致干眼症形成的原因之一。除干眼症之外，睑板腺功能障碍还可引起睑板腺囊肿，并且皮脂蠕形螨形成的螨体外部覆盖了对眼部存在异物感的坚硬外骨骼，可由此引起肉芽肿性反应，进而导致霰粒肿。上述症状被称为后部睑缘炎；当蠕形螨引起的睑缘的炎症扩散到结膜时会引发的睑结膜炎；并且由蠕形螨感染引起的倒睫造成角膜上皮点状缺失，长此以往会形成角膜溃疡，可能会引起角膜炎。除了蠕形螨本身的致病之外，虫体还可作为其他病菌的媒介。典型临床表现为眼痒、眼异物感、眼干、睑缘充血、鳞屑及睫毛根部袖套状分泌物等。疾病对睑缘的破坏较大，且容易反复发作，导致脂质分泌减少，泪膜稳定性下降，进而引发各种疾病。

蠕形螨的传播途径主要是直接接触感染蠕形螨者的皮肤或间接接被蠕形螨附着的衣物、毛巾以及含有蠕形螨的灰尘等来感染人体，与个人卫生状况、皮脂分泌情况、以及化妆品的使用也有着密切关系，当宿主免疫力低下时，蠕形螨发病率将提高。由于其传播途径广泛，且寄生的多数时间不发病，与宿主个人卫生习惯和自身免疫力，关联密切，因此可以得出结论，由蠕形螨引起的人体疾病无法根治。

针对上述情况，开发一种用于改善由蠕形螨引起的睑缘炎治疗症状的制剂是十分有必要的。眼睛是人体重要且敏感的器官，目前最常见的局部治疗眼部疾病的剂型主要是滴眼液，但眼部特殊的组织结构使得药物很难在靶点达到理想的治疗浓度，例如瞬目反射(BR)、泪液稀释，鼻泪管引流等，使得药物生物利用度通常低于5%，并且，常规眼药水通常需要一天多次给药，多次给药往往意味着给药的便捷性很差，并且据不完全统计一部分人在使用滴眼液时，由于眼部敏感通常会产生紧张情绪，导致给药失败，此种情形再加上需要每天多次给药的条件，往往会引发患者的依从性问题，进而影响疾病的治疗效果。

现有技术中，通常采用不同浓度茶树油治疗由蠕形螨引起的睑缘炎症状，在南昌大学附属眼科医院公开的一项研究中，通过记录与统计2017-2019年期间就诊的蠕形蜻感染所致的120例睑缘炎患者的临床资料数据可以得知，茶树油具有治疗蠕形螨症状的功能，且茶树油的治疗效果与其浓度之间为正比关系。

但这项研究中的治疗方法存在一个缺陷，即对于茶树油的浓度控制，现有文献试验指使用15%浓度以上的茶树油可以有效的杀灭蠕形螨，但10%浓度的茶树油就会灼烧眼睛，损伤角膜，在上述试验的过程中，采用20%与25%浓度的实验分组，均产生了不同的不良反应，因此市面上的茶树油试剂浓度通常不会超过5%，进而导致其除螨效率大打折扣。

在武汉艾格眼科医院公开的一项研究中，对283例蠕形螨性睑缘炎患者使用了，三种不同的方式进行治疗研究，通过记录与统计的数据可以得知，实验人员将患者分为三组，分别是使用优化强脉冲光治疗的A组；使用茶树油眼贴治疗的B组，以及,使用优化强脉冲光联合茶树油眼贴治疗的C组。实验结果表面C组，即采用优化强脉冲光联合茶树油眼贴治疗方式的患者，其睑缘炎症状得到了明显的改善。

虽然这项研究在治疗方面存在一定突破，但由于蠕形螨传播途径广泛，寄生的多数时间不发病，且与宿主个人卫生习惯和自身免疫力关联密切，因此患者通常不会在症状出现的初期就进行积极的治疗，并且采用优化强脉冲光的治疗方法，存在一定的经济成本，对于患者来说是一份压力，这种情况会导致一些处于患病初期的患者产生治疗的抵抗情绪，进而使病情加重。

现有技术中公开了一种将茶树油与甲硝唑联用院内制剂，具体是，先使用5%茶树油再使用棉签蘸取甲硝唑注射液均匀擦拭睫毛及脸缘，实验结果证明其是有效的，由蠕形螨引起的睑缘炎症状得到了改善。但由于结膜囊内的容量非常小，对于每次给药的剂量存在限制，滴眼液进入到结膜囊内，可以通过泪小点进入泪小管、泪囊、鼻泪管，经过下鼻甲进入到鼻腔以及咽喉壁，所以在使用的过程中，患者往往会反应口苦的问题，又因为是院内制剂，因此该治疗方法无疑是是不利于制剂的推广与使用的。

中国专利2022104012873中公开了一种甲硝唑眼用凝胶制剂，用于治疗螨虫与棘阿米巴原虫引起的眼部感染，但其存在传统眼用制剂的缺陷，即药物在眼部驻留时间短、稳定性差，易被泪液影响进而导致生物利用率低，治疗周期长，每日需要多次给药，患者依从性差的问题。

目前国内外研究的新型制剂，如膏剂、混悬剂、植入剂等，虽然不同程度的延长了滞留时间，但仍存在一些缺点，以凡士林作为基质的眼膏剂，油腻感强，使用后容易造成视力模糊；目前临床上患者对于植入剂的依从性较差，上述改进方式依旧不能有效解决传统眼用制剂的缺陷。

中国专利021095035中公开了一种以泊洛沙姆188和泊洛沙姆407作为温度敏感型基质的眼用制剂，权利要求书中提及活性成分选自抗青光眼药物；抗生素药物；抗菌药物；抗病毒药物中的一种或复方，但没有实施例支持相关药物与温敏基质相结合的具体处方，现有技术人员无法根据说明书内容对其技术进行复现，存在技术障碍。说明书的内容无法证明相关药物与温度敏感型基质进行联合使用的效果，或因其无法设计具有可实施性制剂处方，又或者在制备方面存在工艺难度，上述几点正是原位制剂研发中存在的技术难题。

因此，开发一种可有效改善睑缘炎症状并克服传统制剂缺陷的长效眼用制剂是十分有必要的。

发明内容

发明人仔细研读并尝试将现有技术中的治疗剂茶树油与甲硝唑组合，再配以温度敏感型的原位凝胶基质，形成复方原位凝胶制剂，以解决上述问题，但是在多次试验的过程中，由于茶树油本身的性质问题，无法筛选出令人满意的制剂处方，但将两种药物分开给药的形式，仅出现在院内的制剂的处方中，也无法让患者自行使用。

经过发明人不断的尝试与优化之后，决定使用一种在授权专利CN219271598U中保护的双腔体复合眼药水给药瓶结构进行给药，将茶树油单独放置在一侧的腔体内，这样便克服了其不稳定的性质问题。为了更好的阐述本申请的技术方案，将上述实用新型的部分内容引入本申请。

解决了上述问题之后，发明人将现有技术中公开温度敏感型凝胶基质与甲硝唑形成凝胶制剂，将其放入双腔体复合给药瓶的一侧，将其与在另一侧的茶树油一同施用在患病部位，但在试验的过程中发现温度敏感型的甲硝唑凝胶存在一个严重的缺陷，由于温度敏感型凝胶基质泊洛沙姆的特殊性，导致其由液态相变为固态需要一定的时间，不利于给药使用，为解决上述问题，发明人进行了不断的筛选与研究，最终放弃了温度敏感型凝胶基质，在研究原位凝胶技术时发明人偶然发现，采用离子敏感型原位凝胶基质，可改善上述问题，基质中含有离子敏感聚合物，通过溶液状态给药，在与角膜前泪膜接触后可迅速形成凝胶，在实验过程中，出乎意料的发现，当具有离子敏感型凝胶基质的甲硝唑组分，与泪液结合发生形变时，可以同时保留茶树油与甲硝唑两种治疗成分，并且无需对施用环境中的温度条件与pH条件进行严格的控制。

本发明通过下述方案实现。

一种可改善睑缘炎症状的长效眼用制剂，包括治疗有效量的两种活性成分组合、一种或多种离子敏感型聚合物或其复配体系，以及一种双腔体给药瓶，其特征在于：

活性成分1为甲硝唑；活性成分2为茶树油；通过双腔体给药瓶进行给药。

在一些实施方案中，眼用制剂用于治疗由蠕形螨引发的睑缘炎症状。

在一些实施方案中，甲硝唑以1-2%的量存在于制剂中；茶树油以5%的量存在于制剂中。

在一些实施方案中，包括甲硝唑的离子敏感型凝胶基质组分位于双腔体给药瓶的一侧腔体中；茶树油放置于另一侧腔体中。

在一些实施方案中，包括甲硝唑的离子敏感型凝胶基质的一侧腔体，不包括茶树油。

在一些实施方案中，包括茶树油的一侧腔体，不包括甲硝唑或其凝胶基质组分。

在一些实施方案中，离子敏感型聚合物为结冷胶、黄原胶、海藻酸盐中的一种或多种或其复配体系。

在一些实施方案中，离子敏感型聚合物中结冷胶具体可选，高酰基结冷胶或脱乙酰基结冷胶。

在一些实施方案中，离子敏感型聚合物中复配体系可为结冷胶-黄原胶、结冷胶-卡波姆、结冷胶-羟丙甲纤维素、海藻酸盐-脱乙酰基结冷胶、脱乙酰基结冷胶-黄原胶，或其他复配体系。

在一些实施方案中，离子敏感型聚合物中复配体系优选，脱乙酰基结冷胶-黄原胶复配体系，或海藻酸钠-脱乙酰基结冷胶复配体系。

在一些实施方案中，发现黄原胶可以使给药过程的舒适度提高，减少甲硝唑与茶树油联用的刺激。

在一些实施方案中，发现脱乙酰基结冷胶-黄原胶复配体系与单一脱乙酰基结冷胶体系相比，脱乙酰基结冷胶-黄原胶复配体系的胶凝性、内聚性和持水力具有明显优势。

在一些实施方案中，复方组合物还可包括渗透压调节剂。

在一些实施方案中，渗透压调节剂不能为氯化钠。

有益效果：1、优化了现有技术中对于由蠕形螨引起的睑缘炎的治疗方式；2、离子敏感型甲硝唑原位凝胶组分的制备工艺简单便捷，成本较低，易于大规模生产；3、通过特殊的双腔体给药瓶，同时施用甲硝唑与茶树油两种活性成分，取得了意想不到的治疗效果。4、克服了传统眼用制剂的局限性，延长药物在眼部的滞留时间，提高生物利用度，同时降低患者使用的负担，增加用药依从性。

附图说明

图1为实施例2中眼睑部位被蠕形螨侵染的症状1。

图2为实施例2中眼睑部位被蠕形螨侵染的症状2。

图3为实施例2中眼睑部位被蠕形螨侵染的症状3。

图4为实施例2中眼睑部位在施用甲硝唑之后的改善。

图5为实施例4中双腔体眼部溶液给药瓶的主视图。

图6为实施例4中双腔体眼部溶液给药瓶的正视图。

图7为实施例4中双腔体眼部溶液给药瓶瓶帽的正视图。

图8为实施例4中双腔体眼部溶液给药瓶的俯视图。

图9为普通甲硝唑溶液制剂与甲硝唑离子敏感型原位凝胶制剂的药物释放结果对比。

附图中，1为出液口a；2为出液口b；3为瓶口（带螺纹）；4为瓶身；5为挤压垫；6为瓶身分隔板；7为瓶口分隔板；11为固定器；12为瓶盖（带螺纹）；13为出液口b盖帽；14为出液口a盖帽。

具体实施方式

本领域技术人员应当理解的是，这些实施例仅仅用于解释本发明的技术原理，并非旨在限制本发明的保护范围。

实施例1：凝胶基质（复配体系）的浓度筛选

模拟泪液配制：2.18gNa2CO3，6.78gNaCl，0.042gCaCl2·2H2O，1.38gKCl溶于1L水中，为防止CaCl2与Na2CO3反应，析出沉淀，可将其分开配制后缓慢混合，调节溶液的pH为7.3。

结冷胶的制备：取适量去乙酰结冷胶加入去离子水，在90℃水浴加热，磁力搅拌的条件下，制备去乙酰结冷胶水溶液。

黄原胶的制备：取适量黄原胶加入去离子水，在90℃水浴加热30min，制备黄原胶水溶液。

去乙酰结冷胶溶液浓度筛选：配制0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.6%、0.7%、0.8%的去乙酰结冷胶溶液，分别测定其在室温（25℃）和眼部生理条件下（34℃）的黏度变化，按照去乙酰结冷胶溶液：模拟泪液=25:7的比例混合，在34℃条件下测定去乙酰结冷胶凝胶的黏度，测定条件为2号转子，12r/min，并观察胶凝情况，结果如下表所示。

表1不同浓度去乙酰结冷胶溶液的凝胶能力

浓度（%）	0.2	0.3	0.4	0.5	0.6	0.7	0.8
								凝胶能力	溶液	弱凝胶	弱凝胶	弱凝胶	凝胶	凝胶	凝胶

表2不同浓度去乙酰结冷胶溶液的黏度（mPa.s）

浓度（%）	0.2	0.3	0.4	0.5	0.6	0.7	0.8
								室温（25℃）	7.50	10.00	12.60	63.50	601.00	1301.00	2105.00
眼部温度（34℃）	2.30	5.10	7.15	10.10	10.55	12.50	15.00
								泪液混合（34℃）	11.30	66.35	530.10	916.20	1755.20	2398.00	/

“/”代表超出量程范围。

黄原胶溶液浓度筛选：配制0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%的黄原胶溶液，分别测定其在室温（25℃）和眼部生理条件下（34℃）的黏度变化，测定条件为2号转子，12r/min，并观察胶凝情况，结果如下表所示。

表3不同浓度黄原胶溶液的凝胶能力

浓度（%）	0.1	0.2	0.3	0.4	0.5
						凝胶能力	溶液	溶液	溶液	黏稠溶液	黏稠溶液

表4不同浓度黄原胶溶液的黏度（mPa.s）

浓度（%）	0.1	0.2	0.3	0.4	0.5
						室温（25℃）	135.00	322.00	541.00	800.00	932.00
眼部温度（34℃）	123.00	272.00	500.00	781.00	1106.00

结论：在25℃温度下，去乙酰结冷胶溶液的黏度随浓度的增加而增大，而在34℃条件下测定的不同浓度的去乙酰结冷胶溶液之间的黏度变化不大；同一浓度的去乙酰结冷胶溶液在室温条件下的黏度明显大于34℃条件下的黏度；此外，去乙酰结冷胶溶液与STF模拟泪液（25:7）混合后，其黏度明显增加，说明在泪液中阳离子的作用下，去乙酰结冷胶溶液会产生相变，形成凝胶。黄原胶溶液对在不同温度下的黏度变化不大，在单独存在的条件下，不会与STF中的离子产生作用而形成凝胶，它主要是作为生物粘附剂。

去乙酰结冷胶-黄原胶凝胶基质体系的优势为：1、提高制剂的黏膜粘附性；2、增加相变后形成的凝胶的稳定性和黏弹性。考虑到离子敏感型原位凝胶的可滴性，需要满足在室温条件下黏度较低，在与眼部泪液接触后能快速形成适宜黏度的凝胶。因此，凝胶基质（复配体系）中的去乙酰结冷胶的浓度范围为0.4%-0.6%，黄原胶的浓度范围为0.1%-0.3%。

实施例2：针对蠕形螨睑缘炎的治疗试验

一项前瞻性的临床试验：包括睑缘炎、角膜炎患者共10例，年龄23岁~78岁，平均年龄（48.7±13.7）岁，病程1个月~4年，平均（2.11±0.54）年。通过眼部常规检查患者常规测视力，裂隙灯显微镜下依次检查双眼的眼睑皮肤、睫毛体及睫毛根部，睑缘，睑板腺形态及开口，球结膜，角膜等。并进行睫毛采样、蠕形螨镜检、角膜荧光素钠染色等检查。通过睫毛蠕形螨显微镜检查睫毛抽样镜检方法，在裂隙灯显微镜下优先选择带有鳞屑或袖套样物的睫毛，上睑2根，下睑1根，一般单眼采集3~4根。将拔下的睫毛置于载玻片上，袖套样多的睫毛则将1滴0.9%氯化钠溶液缓慢滴于盖玻片的侧缘。采用浓度为0.9%的氯化钠溶液缓慢向玻片内扩散，观察整个过程，记录睫毛上的蠕形螨总数。通过甲硝唑溶液和5%茶树油联合擦拭方法。采用上述治疗5d~10d后，10例患者结膜充血，不适症状消失，睑缘充血、肥厚明显好转，睫毛变清洁，部分患者鳞屑或袖套样物消失。

另一项研究Wacker, T.; Lang, G. (2014). Demodex folliculorum:Diagnostik und Therapie im klinischen Alltag. Klinische Monatsblätter fürAugenheilkunde, 231(3), 241–245，其调查研究了使用治疗有效量的甲硝唑来治疗蠕形螨的试验，通过引用将其并入本申请。试验前眼睑部位被蠕形螨侵染的症状如图1-图3所示，施用甲硝唑之后的效果如图4所示，由蠕形螨导致毛囊扩张、增生、过度角质化、在睫毛根部形成鳞屑，引起睫毛脱落、倒睫、乱睫等，睑缘炎症状得到了改善。上述研究结果表明使用1-2%的甲硝唑制剂可以有效改善由蠕形螨引起的睑缘炎症状。

上述两组试验结果表明，使用治疗有效量的甲硝唑制剂可以有效改善由蠕形螨引起的睑缘炎症状，并且，若将甲硝唑制剂与一定比例的茶树油联合施用，可使症状改善的效果更为明显。

实施例3：甲硝唑离子敏感型原位凝胶处方筛选

为保证离子敏感型眼用凝胶在室温条件下（25℃）具有良好的流动性，其黏度应低于1500mPa.s，在与STF混合后（25:7，34℃），为保证其能够在眼部达到良好的滞留效果，所形成的凝胶的黏度不得低于2500mPa.s。通过预实验得知，溶液对凝胶基质的黏度产生，通过星点设计-效应面法，对凝胶基质在室温（25℃）条件下和与泪液混合后（34℃）条件进行试验，最终确定所选用的凝胶组合的用量范围为0.50-0.60%的去乙酰结冷胶和0.20-0.25%的黄原胶。

辅料的筛选：常规的渗透压调节剂包括氯化钠和甘露醇，因于氯化钠中的阳离子会促使制剂中的去乙酰结冷胶由溶液转变成凝胶态，因此选择2.5%（w/v）的甘露醇来调节制剂的渗透压；pH调节剂选择Tris溶液，将溶液pH调至7.0-7.5之间。

制剂处方构成情况如下表所示。

表5甲硝唑离子敏感型原位凝胶处方

成分	用量
		甲硝唑	1、1.5、1.75、2%
去乙酰结冷胶	0.5、0.55、0.6%
		黄原胶	0.2、0.25%
甘露醇	2.5%
		Tris溶液	适量（将pH调至7.0-7.5）

注射用水加至100ml。

制备工艺：（1）按处方量称取甲硝唑，加入适量灭菌去离子水，超声溶解，再称取处方量甘露醇加入至甲硝唑溶液中，使其混合均匀，用2%的Tris溶液调节PH至上述范围内；（2）称取处方量的结冷胶（去乙酰结冷胶）和黄原胶，加入灭菌去离子水，用量为用水的总重量的75%，在90℃条件下，水浴搅拌30min，冷却至室温备用；在无菌条件下，将步骤（1）和（2）的产物合并，再用2%Tris溶液将混合液的pH调整至上述范围内，补充余量的注射用水，超声20min使混合均匀，分装，灭菌，即得所述的甲硝唑离子敏感型原位凝胶。

该实施例提供了24种不同的甲硝唑离子敏感型原位凝胶制剂。

实施例4：双腔体眼部溶液给药瓶

双腔体眼部溶液给药瓶的结构如图5-图8所示，其特征在于：可以同时储存两种治疗剂，且两种治疗剂互相独立；可以同时施用两种治疗剂；瓶身为椭圆柱体；瓶身上具有挤压垫；瓶盖处的螺纹与瓶口处的螺纹相匹配。

瓶身内有橡胶材质的分隔板对两种治疗剂进行分隔；瓶口处有橡胶材质的分隔板对两种治疗剂进行分隔。其中瓶身处的挤压垫上具有条纹形状的凸起，可以使按压瓶身更加的便捷。

瓶身内有橡胶材质的分隔板与瓶身处的挤压垫中间位置的夹角为90度，瓶内橡胶材质的分隔板与瓶身的挤压垫互为垂直的状态。

瓶口处有a、b两个出液口，分别对应两种治疗剂的给药部分。

瓶盖处有与瓶口处a、b两个出液口相对应的橡胶材质的凸起盖帽，可以保障a、b出液口的密封性。与瓶口处a、b出液口相对应的凸起盖帽，独立于瓶盖，不与瓶盖一起旋转。使用的过程为，现将瓶盖处a、b部分的凸起与瓶口处的a、b出液口相对应，之后旋紧瓶盖。

使用时：将甲硝唑离子敏感型原位凝胶制剂放置于一侧腔体，将5%的茶树油放置另一侧腔体，瓶身中间有分离板保证两种治疗剂相互独立，使用的时候将瓶口对准眼部，手对挤压垫进行按压，使两种治疗液分别从a、b出液口流出，作用到眼部，由于在瓶口处有分隔板，所以治疗剂将在眼部汇合，不会相互污染。

在离子敏感型凝胶基质的作用下，在极短的时间内发现液态至固态的转变，同时保留两种活性成分。之后将瓶帽中的凸起对准a、b出液口，由于固定器的存在，所以a、b出液口独立于瓶盖，之后盖上瓶盖旋紧，以备下次使用。

实施例5：不含离子敏感型凝胶基质的甲硝唑溶液，与甲硝唑离子敏感型原位凝胶剂的体外释放对比试验

制备不含离子敏感型凝胶基质的制剂，处方如下表所示。

表6甲硝唑溶液处方

成分	用量
		甲硝唑	2%
甘露醇	2.5%
		Tris溶液	适量（将pH调至7.3）

加入注射用水至100ml，采用常规方式将其制备成甲硝唑溶液。

采用透析袋发对两种溶液制剂进行释放试验。

先把透析袋剪成10cm长度的小段，在大体积（500mL）的2%（W/V）的碳酸氢钠和1mmol/LEDTA·2Na(pH=8.0)中将透析袋煮沸10min，用去离子水彻底清洗透析袋。再将其放在500mL的1mmol/LEDTA.2Na(pH=8.0)中将之煮沸10min。冷却后，将其放于4℃冰箱保存备用。

以500mL人工泪液为释放介质，在透析袋中加入5g制剂，调节溶出仪转速50rpm，温度34℃。分别于0.5、1、2、4、6、8、10、12h时间点取样，每次取样5mL，同时补以5mLSTF。用硫酸显色法对样品进行处理并按溶出测定条件测定吸光度，计算累积释放百分率，绘制药物释放曲线。普通眼用制剂与离子敏感型原位凝胶制剂的结果对比如图9所示。

试验结果：从图9中的释药曲线可以看出，自制的普通甲硝唑溶液在4h已经释放完全，而甲硝唑离子敏感型原位凝胶制剂在12h才将近完全释放，在10h累积释放率达到了90%。通过对比可知，相比于普通眼用制剂，甲硝唑离子敏感型原位凝胶制剂具有良好的缓释效果。

上述结果结合本申请发明人在试验过程中的偶然发现，通过双腔体给药瓶，同时进行甲硝唑离子敏感型原位凝胶基质和5%茶树油的施用，其可与角膜前泪膜接触后可在3s内迅速形成凝胶，并同时保留茶树油与甲硝唑两种治疗成分。由此说明，通过双腔体给药瓶的给药方式，可以使得本申请的复合制剂具有与甲硝唑离子敏感型原位凝胶剂同样的缓释效果。

实施例6：甲硝唑离子敏感型原位凝胶的质量评估试验

性状和可见异物检测试验：本品为浅黄色，制备三批样品，置黑色背景板前平视观察其性状。并将其置于澄明度测试仪中，调节光照度至2000-3000LX，在白色和黑色背景下，手持样品瓶，观察药液中是否存在可见异物，检查结果如下表所示。

表7甲硝唑离子敏感型原位凝胶性状和可见异物检查

编号	1	2	3
				性状	浅黄色透明液体	浅黄色透明液体	浅黄色透明液体
可见异物	无	无	无

结果表明，甲硝唑离子敏感型原位凝胶的性状和可见异物符合标准要求。

黏度检测试验：平行制备三批离子敏感型原位凝胶制剂，利用旋转黏度计，在25℃条件下测定制剂黏度，在眼部生理温度（34℃）下测定制剂与模拟泪液混合后的凝胶黏度。样品平行测定三次，取平均值，检查结果如下表所示。由测定结果可知，三批制剂样品的黏度均符合要求。

表8甲硝唑离子敏感型原位凝胶黏度检测结果(Mean±SD，n=3)

编号	制剂黏度（mPa.s）	凝胶黏度（mPa.s）
			A	1004.6±7.1	2313.4±13.6
B	980.5±11.6	2287.4±13.1
			C	986.8±6.8	2295.7±17.3

结果表明，三批甲硝唑离子敏感型原位凝胶制剂样品的黏度均符合要求。

pH检测试验：平行制备三批离子敏感型原位凝胶制剂，每批200mL，在相同环境下测定pH值样品平行测定三次，取平均值。在测定之前，应对pH计进行校准，保证测定结果的准确性。

表9甲硝唑离子敏感型原位凝胶pH测定结果(Mean±SD，n=3)

编号	甲	乙	丙
				pH值	7.29±0.01	7.31±0.01	7.30±0.01

结果表明，三批甲硝唑离子敏感型原位凝胶制剂样品的pH值均符合要求。

流变学检测试验：采用3号转子考察温度和转速对离子敏感型原位凝胶制剂黏度的影响。温度条件为10-40℃，转速条件为5、10、15、20、25、30rpm转速，根据眼部的生理状况，其通常情况下眼球每分钟的转动次数应在10-30之间，通过观察相应转速的制剂状态，离子敏感型原位凝胶制剂在25-35℃之间的黏度在500-850mpa.s，说明制剂在作用于眼部前，未形成凝胶之前，本身具有一定的黏度，相较于普通滴眼液，不会容易流失；且黏度低易于分布在眼球表面，而且不会造成眼部的不适感。

综上所述，通过对离子敏感型原位凝胶制剂的性状、可见异物、黏度、pH以及流变学的测定结果可知，该制剂为浅黄绿色透明液体，无可见异物，pH为7.3左右，处于眼部的生理pH范围内，流变学结果显示，该制剂为非牛顿流体，在与眼部接触的时候，能够快速的分散在眼部表面，形成适宜黏度的凝胶，进而增加在眼部的滞留效果。因此，离子敏感型原位凝胶制剂符合眼用制剂的质量要求。

实施例7：复合眼用制剂的眼部刺激性试验

设计Draize眼部刺激实验，评价通过双腔体给药瓶施用的复合制剂（甲硝唑离子敏感型原位凝胶剂与茶树油）对家兔眼睛的刺激性。选取健康家兔10只，雌雄各5只，观察并记录每只家兔给药前的眼部生理状况，确认其眼部角膜，虹膜等生理状况良好。在实验前及实验过程中，给予家兔正常的食物和水。实验采用自身对照法，将动物的左眼作为对照组，给予50µL的生理盐水；右眼作为实验组，给予50µL的复合眼用制剂。

单次给药试验：给予一次剂量的生理盐水或凝胶制剂，轻合眼睑约1s，以保证药液与局部有充分的接触，记录给药后1、6、12、24、48h角膜、虹膜、结膜以及其它组织所观察到的损伤情况，以Draize眼部刺激试验评分表示。

多次给药试验：连续给药1周以上后，继续观察7-14d，以Draize眼部刺激试验评分记录结果。

评估标准与结论：表10为评价标准表、表11为评价结果表。

表10德莱塞(Drauze)眼部刺激试验评分表

表11复合眼用制剂眼部刺激性评分结果

从表11的结果可以看出，单次给药实验和多次给药实验中，生理盐水对照组均未检测出任何的刺激症状；在单次给药的实验组，第1、2、8号家兔的角膜周围出现轻度充血，其他家兔无明显的刺激症状；在多次给药实验中，有5只家兔出现轻微的充血症状，按眼刺激性评价标准记录测定结果为1分；根据单次给药实验和多次给药实验结果计算受试物对眼刺激性的平均分值，其结果分别为0.3和0.5，均小于3。因此，通过双腔体给药瓶施用的复合制剂（甲硝唑离子敏感型原位凝胶剂与茶树油）对家兔眼睛无刺激，具有良好的生物相容性。

实施例8：甲硝唑离子敏感型原位凝胶的稳定性试验

离心试验：取适量甲硝唑离子敏感型原位凝胶置于离心管中，将其在4000rpm的转速条件下条件下离心10min、20min、30min观察外观性状的变化情况，结果如下表所示。

表12离子敏感型原位凝胶离心试验结果

离心时间（min）	颜色	是否分层
			15min	浅黄色	否
30min	浅黄色	否
			45min	浅黄色	否

高温试验：取适量甲硝唑离子敏感型原位凝胶放入灭菌的无色透明PET眼药水瓶中，置于60℃条件下，分别于0、5、10d取样，观察样品外观、并测定样品pH、含量、总杂的变化情况。若供试品含量低于规定限度则在40℃条件下同法进行试验。若60℃条件下无明显变化，则不再进行40℃试验，结果如下表所示。

表13甲硝唑离子敏感型原位凝胶在60℃条件下

时间（天）	pH	含量	总杂
				0天	7.35	100.12	0.70%
5天	7.29	99.63	1.25%
				10天	7.21	98.91	2.48%

表14甲硝唑离子敏感型原位凝胶在40℃条件下

时间（天）	pH	含量	总杂
				0天	7.33	100.12	0.70%
5天	7.29	99.72	1.02%
				10天	7.28	99.46	1.11%

从结果可知，甲硝唑原位凝胶制剂在温度为60℃的条件下，放置10d，pH值、含量均有所降低，杂质总量增加，制剂在40℃条件放置10d，pH值、含量均有所降低，杂质总量略有增加，但是均在限度范围内，从结果来看离子敏感型原位凝胶不易在高温环境长期储存。

低温试验：取适量甲硝唑离子敏感型原位凝胶放入灭菌的无色透明PET眼药水瓶中，置于4℃、-20℃条件下放置10d，观察样品外观、并测定样品pH、含量、总杂的变化情况，结果如下表所示。

表15甲硝唑离子敏感型原位凝胶在低温条件下的试验结果

温度（℃）	pH	含量	总杂
				4	7.32	99.98	0.83%
-20	7.29	99.89	0.77%

从结果可知，甲硝唑离子敏感型原位凝胶制剂在低温环境下比较稳定，pH值，含量以及杂质均无明显变化，在-20℃环境下存储的制剂会发生冻结置于室温下解冻后，能够恢复成液体状态，且黏度未发生明显变化。

光照试验：取适量甲硝唑离子敏感型原位凝胶放入灭菌的无色中性安瓿瓶中，置于4500±500LX条件下放置10d，分别于0、5、10d取样，观察样品外观、并测定样品pH、含量、总杂的变化情况，结果如下表所示。

表16甲硝唑离子敏感型原位凝胶低温条件试验结果

时间（天）	pH	含量	总杂
				0天	7.31	99.12	0.80%
5天	7.15	97.61	2.12%
				10天	7.07	96.16	2.98%

从结果可知，甲硝唑离子敏感型原位凝胶在光照条件不稳定，pH值、含量下降，杂质总量增加明显，因此，甲硝唑离子敏感型原位凝胶需要避光保存。又因，茶树油本身性质原因，同样需要避光阴凉保存，所以本申请所使用是的双腔体眼用给药瓶需要采用深色避光材质的外壁，或者在瓶身外侧，额外添加避光保护套。

至此，发明人已将技术方案中的原位凝胶基质筛选、具体的给药器具、复合制剂的治疗效果、复合眼用制剂的眼部刺激性试验、复合制剂的性质与评估过程表述清晰。

本发明意在提供一种全新的改善由蠕形螨引起的睑缘炎症状的复合制剂，打破了传统的技术偏见，优化了现有治疗方式，通过发明人提供的双腔体眼用给药瓶的使用，同时将甲硝唑与茶树油同时作用于患病部位，并且，在发明人研发的过程中，通过不断了试验发现了采用离子敏感型基质进而带来的意想不到效果，克服了现有技术，改善了使用泊洛沙姆的常规温敏凝胶思路，对凝胶化时间的问题进行探索与突破，在综合考虑药物性质与给药方式之后，最终得到了本发明，即一种用于改善由蠕形螨引起的睑缘炎症状，由甲硝唑离子敏感型原位凝胶剂和茶树油通过双腔体给药瓶共同组合而成的复合制剂。

需要注意的是，本申请中实施例的描述仅仅是对本发明技术方案的原理与应用的说明。本申请中对所示出的实施方案的细节的引用并非意图限制本身记载了被认为对本发明必不可少的那些特征的权利要求的范围。

Claims (6)

1.一种改善睑缘炎症状的长效眼用制剂，包括治疗有效量的两种活性成分组合、一种或多种离子敏感型聚合物或其复配体系，其特征在于：

A.活性成分1为甲硝唑，以1-2%的量存在于制剂中；

B.活性成分2为茶树油，以5%的量存在于制剂中；

C.离子敏感型复配体系为脱乙酰基结冷胶-黄原胶复配体系。

2.根据权利要求1所述的一种改善睑缘炎症状的长效眼用制剂，其特征在于，眼用制剂通过具有双腔体的给药瓶进行给药。

3.根据权利要求2所述的一种改善睑缘炎症状的通过具有双腔体的给药瓶进行给药的长效眼用制剂，其特征在于，茶树油单独放置于双腔体给药瓶的一侧腔体内。

4.根据权利要求1所述的一种改善睑缘炎症状的长效眼用制剂，其特征在于，眼用制剂用于治疗由蠕形螨引发的睑缘炎症状。

5.根据权利要求1所述的一种改善睑缘炎症状的长效眼用制剂，其特征在于，眼用制剂包括渗透压调节剂。

6.根据权利要求1所述的一种离子敏感型眼用原位凝胶制剂，其特征在于，眼用制剂中包括渗透压调节剂，所述渗透压调节剂不为氯化钠。