CN117467571A - 一种降解烟嘧磺隆的芽孢杆菌及应用 - Google Patents

一种降解烟嘧磺隆的芽孢杆菌及应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及微生物技术领域,尤其涉及一种降解烟嘧磺隆的芽孢杆菌及应用。本发明提供的芽孢杆菌R22对于烟嘧磺隆有明显的降解作用,可以降解高浓度烟嘧磺隆,降解速率快,降解率高,对于土壤和水体中的烟嘧磺隆都具有较好的降解效果。

Description

一种降解烟嘧磺隆的芽孢杆菌及应用
技术领域
本发明涉及微生物技术领域,尤其涉及一种降解烟嘧磺隆的芽孢杆菌及应用。
背景技术
在农业生产中,作物产量的增加与农药的贡献密切相关,除草剂约占农药总使用量的47%。烟嘧磺隆作为其中一种磺酰脲类除草剂在玉米种植中起到关键的作用。
烟嘧磺隆又叫玉米乐,化学名为[2-(4,6-二甲氧基嘧啶-2-嘧啶基氨基甲酰胺基磺酰)-N,N-二甲基烟酰胺],结构式如图10所示。
烟嘧磺隆主要通过抑制乙酰乳酸合成酶的活性进而使杂草细胞无法合成一些必需氨基酸,有丝分裂无法正常完成。从而达到杀死杂草的目的,其具有选择性高、安全性好等特点广受农民喜爱。
烟嘧磺隆虽然可以有效去除杂草,提高玉米等农作物的产量,但是近年来人们发现虽然烟嘧磺隆对农田土壤并无直接毒害作用,但是由于长期使用,烟嘧磺隆在土壤中会大量积累,这将导致后茬作物的减产。另外烟嘧磺隆具有溶于水的特性,因此有可能伴随降雨流入地下水和地表水,污染水源进而危害水生动物和人们的身体健康。
在自然条件下烟嘧磺隆主要有三种降解方式,其中光降解一般只发生在土壤的表层,具有很大的局限性,而化学水解则主要发生在酸性和中性条件下,在碱性条件下无法发挥作用。而微生物降解速率快、降解途径多、降解效率高,近年来正逐步成为农药降解研究的主要方向。
发明内容
本发明提供一种降解烟嘧磺隆的芽孢杆菌及应用,该菌对于烟嘧磺隆有明显的降解作用,并通过探究其在不同条件下降解率的变化,从而为之后应用于土壤和水体中的烟嘧磺隆降解提供了物质基础。
本发明提供一种芽孢杆菌(Bacillus sp.)R22,其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCCNo.27961,保藏单位地址为:北京市朝阳区北辰西路1号院3号;保藏日期为2023年7月18日。
根据所述的芽孢杆菌R22,所述芽孢杆菌R22的16S rRNA基因序列如SEQ ID NO.1所示。
本发明还提供一种微生物制剂,包含所述的芽孢杆菌R22的菌体、菌粉、菌悬液、发酵产物、发酵液、发酵液提取物中的一种或多种。
本发明还提供所述的微生物制剂的制备方法,所述制备方法包括培养所述芽孢杆菌R22的步骤。
根据所述的微生物制剂的制备方法,培养所述芽孢杆菌R22在28-32℃、pH7.0-7.5条件下进行,优选在29-31℃、pH7.2-7.4条件下进行,进一步优选在30℃、pH7.3条件下进行。
优选的,利用R2A培养基培养所述芽孢杆菌R22。
优选的,1L R2A培养基含有酵母粉0.4-0.6g、蛋白胨0.4-0.6g、酸水解酪蛋白0.4-0.6g、葡萄糖0.4-0.6g、可溶性淀粉0.4-0.6g、磷酸氢二钾0.2-0.4g、七水硫酸镁0.04-0.06g和丙酮酸钠0.28-0.32g,优选余量为水,进一步优选为蒸馏水,pH=7.0-7.5。
进一步优选的、1L R2A培养基含有酵母粉0.5g、蛋白胨0.5g、酸水解酪蛋白0.5g、葡萄糖0.5g、可溶性淀粉0.5g、磷酸氢二钾0.3g、七水硫酸镁0.05g和丙酮酸钠0.3g,pH=7.2。
本发明还提供所述的芽孢杆菌R22、或所述的微生物制剂在以下任一项或几项中的应用:
(1)制备降解磺酰脲类除草剂产品;
(2)降解磺酰脲类除草剂。
优选的,降解土壤与水体中的磺酰脲类除草剂。
优选的,所述磺酰脲类除草剂为烟嘧磺隆、甲嘧磺隆、单嘧磺隆、苄嘧磺隆、噻吩磺隆、苯磺隆、甲磺隆、绿磺隆或甲基二磺隆中的一种或几种。
进一步优选的,所述磺酰脲类除草剂为烟嘧磺隆。
本发明还提供一种降解磺酰脲类除草剂的方法,利用所述的芽孢杆菌R22、或所述的微生物制剂;
优选的,所述磺酰脲类除草剂为烟嘧磺隆、甲嘧磺隆、单嘧磺隆、苄嘧磺隆、噻吩磺隆、苯磺隆、甲磺隆、绿磺隆或甲基二磺隆中的一种或几种。
进一步优选的,所述磺酰脲类除草剂为烟嘧磺隆。
根据所述降解磺酰脲类除草剂的方法,利用MSG培养基,1LMSG培养基配方含有:磷酸二氢钾0.4-0.6g、十二水合磷酸氢二钠0.9-1.1g、七水硫酸镁0.18-0.22g、氯化铵1.0-1.3g、葡萄糖0.9-1.1g、微量元素1.8-2.2mL和维生素1.8-2.2mL,优选余量为水,进一步优选为蒸馏水,pH=7.2-7.5;
1L微量元素含有:磷酸氢二钾4.5-5.5g、硫酸镁2.3-2.7g、氯化钠2.3-2.7g、硫酸亚铁0.04-0.06g和硫酸锰0.04-0.06g,优选余量为水,进一步优选为蒸馏水。
优选的,所述1L MSG培养基配方含有:磷酸二氢钾0.5g、十二水合磷酸氢二钠1g、七水硫酸镁0.2g、氯化铵1.1g、葡萄糖1g、微量元素2mL和维生素2mL,pH=7.3;
1L微量元素含有:磷酸氢二钾5g、硫酸镁2.5g、氯化钠2.5g、硫酸亚铁0.05g和硫酸锰0.05g。
根据所述降解磺酰脲类除草剂的方法,所述的芽孢杆菌R22、或所述的微生物制剂的使用环境的温度为20-45℃;优选为25-35℃;进一步优选为30℃;
和/或,所述的芽孢杆菌R22或所述的微生物制剂的使用环境的pH值为4.5-7.5;优选为4-7;进一步优选为6.9-7.1,更优选为7。
根据所述降解磺酰脲类除草剂的方法,所述磺酰脲类除草剂的浓度为500mg/L以下;优选为350mg/L以下;进一步优选为250mg/L以下。
本发明提供的芽孢杆菌R22对于烟嘧磺隆有明显的降解作用,可以降解高浓度烟嘧磺隆,降解速率快,降解率高,对于土壤和水体中的烟嘧磺隆都具有较好的降解效果。
附图说明
为了更清楚地说明本发明或现有技术中的技术方案,下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作一简单地介绍。
图1是本发明提供的芽孢杆菌R22菌落形态。
图2是本发明提供的芽孢杆菌R22菌体形态电镜图片。
图3是本发明提供的芽孢杆菌R22与相近模式菌株的系统发育进化树。
图4是本发明实施例2提供的芽孢杆菌R22芽孢杆菌菌落形态。
图5是本发明实施例3提供的R22烟嘧磺隆降解曲线。
图6是本发明实施例4提供的温度对R22降解烟嘧磺隆的影响。
图7是本发明实施例4提供的pH对R22降解烟嘧磺隆的影响。
图8是本发明实施例4提供的底物浓度对R22降解烟嘧磺隆的影响。
图9是本发明实施例5提供的接种和未接种(无菌对照)R2210d后土壤中烟嘧磺隆降解率。
图10是本发明烟嘧磺隆的结构式。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将结合本发明中的附图,对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
本发明的目的是提供一种烟嘧磺隆降解菌及其在土壤和水体中修复的应用。所述菌株是吉林四平梨树玉米大豆黑土示范区的黑土样品中分离筛选得到的,所述菌株对烟嘧磺隆具有明显的降解作用,为修复土壤中的烟嘧磺隆污染提供了物质基础。
本发明提供的烟嘧磺隆降解菌株分类命名为:芽孢杆菌Bacillussp.R22,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC;地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号),保藏编号为:CGMCC No.27961。
所述烟嘧磺隆降解菌的16S rRNA基因序列如Seq_16S_Bacillussp.(SEQ IDNO.1)所示,其长度为1433bp。
>Seq_16S_Bacillus sp.
所述菌株在R2A固体培养基上培养1天后,表型特征为:菌落平坦,边缘粗糙,无光泽且呈颗粒状,具有白色或奶油色的特点,细胞为单细胞杆状,生长温度为20-40℃,pH4-8。电镜观察下菌体为杆状,单个或成对排列。
与所述烟嘧磺隆降解菌株序列最相似的模式菌株为:Bacillus thuringiensisIAM 12077T,16S rRNA序列全长相似度为99.79%。选取与之相近的芽孢杆菌模式菌株的16S rRNA基因序列构建系统进化树,进化树见图3。序列相似度和进化关系证明其为芽孢杆菌属中的一个成员。
1L富集培养基(MSG)含有:磷酸二氢钾0.5g,十二水合磷酸氢二钠1g,七水硫酸镁0.2g,氯化铵1.1g,葡萄糖1g,烟嘧磺隆200mg,微量元素2mL,维生素2mL,余量为蒸馏水;pH=7.3。1L微量元素含有:磷酸氢二钾5g,硫酸镁2.5g,氯化钠2.5g,硫酸亚铁0.05g,硫酸锰0.05 0g,余量为蒸馏水。
1L R2A固体培养基含有:酵母粉0.5g,蛋白胨0.5g,酸水解酪蛋白0.5g,葡萄糖0.5g,可溶性淀粉0.5g,磷酸氢二钾0.3g,七水硫酸镁0.05g,丙酮酸钠0.3g,琼脂15g,余量为蒸馏水;pH=7.2。
本发明中的烟嘧磺隆降解菌在烟嘧磺隆浓度为100mg/L的MSG培养基中10天可达到70%以上的降解率,可以大大降低烟嘧磺隆在土壤或水体富集的程度,且生长速度较快,使用成本低,可以大规模快速的投入使用,有利于保护环境安全。
实施例1:烟嘧磺隆降解菌R22的分离和筛选
采集来自四平梨树县的玉米大豆种植区的黑土样品5g加入烟嘧磺隆浓度为30mg/L的100mL烟嘧磺隆富集培养基,于30℃、150rpm富集培养。每隔两周以10%(体积分数)的转接量转接到添加烟嘧磺隆的新鲜基础无机盐培养基(BSM)中,连续富集,烟嘧磺隆浓度依次为50mg/L、80mg/L、100mg/L,经过梯度稀释后选择合适的梯度涂布在添加烟嘧磺隆的R2A、BSM及MSG等固体培养基上,挑选出平板上形态单一的单菌落进一步纯化培养。
上述1L微生物富集培养基(MSG)含有:磷酸二氢钾0.5g,十二水合磷酸氢二钠1g,七水硫酸镁0.2g,氯化铵1.1g,葡萄糖1g,烟嘧磺隆200mg,微量元素2mL,维生素2mL,余量为蒸馏水;pH=7.3。微量元素(1L):磷酸氢二钾5g,硫酸镁2.5g,氯化钠2.5g,硫酸亚铁0.05g,硫酸锰0.050g,余量为蒸馏水。
上述1L R2A固体培养基含有:酵母粉0.5g,蛋白胨0.5g,酸水解酪蛋白0.5g,葡萄糖0.5g,可溶性淀粉0.5g,磷酸氢二钾0.3g,七水硫酸镁0.05g,丙酮酸钠0.3g,琼脂15g,余量为水;pH=7.2。
上述1L基础无机盐固体培养基(BSM)含有:磷酸二氢钾0.5g,十二水合磷酸氢二钠1g,七水硫酸镁0.2g,氯化铵1.1g,微量元素2mL,维生素2mL,琼脂15g,余量为蒸馏水;pH=7.3。1L微量元素含有:磷酸氢二钾5g,硫酸镁2.5g,氯化钠2.5g,硫酸亚铁0.05g,硫酸锰0.05 0g,琼脂15g,余量为蒸馏水。
上述1L微生物富集固体培养基(MSG)含有:磷酸二氢钾0.5g,十二水合磷酸氢二钠1g,七水硫酸镁0.2g,氯化铵1.1g,葡萄糖1g,烟嘧磺隆200mg,微量元素2mL,维生素2mL,琼脂15g,余量为蒸馏水;pH=7.3。微量元素(1L):磷酸氢二钾5g,硫酸镁2.5g,氯化钠2.5g,硫酸亚铁0.05g,硫酸锰0.050g,余量为蒸馏水。
将上述分离纯化的单菌落接种到5mL R2A培养基中培养48小时后,于6000r/min离心3分钟,倒去上清液,用2mL无菌PBS重悬,仍6000r/min离心3分钟,按此法冲洗2两遍后,用2mL MSG培养基重悬,并吸取1mL加入烟嘧磺隆浓度为100mg/L的MSG培养基中,于30℃、150rmp振荡培养7天后,运用高效液相色谱法测定其降解效果,找到菌株R22具有降解烟嘧磺隆的功能。
液相色谱具体条件为:Agilent 1200高效液相色谱;SPC18反相柱(5μm x 4.6mm x150mm);流动相:乙腈:0.2%乙酸梯度变化,程序如下表;流速:1mL/min。检测波长:254nm。
实施例2:烟嘧磺隆降解菌R22的鉴定
表型特征:将菌株R22接种于R2A平板,30℃生长1天,菌落平坦,边缘粗糙,无光泽且干燥,白色或奶油色,革兰氏阳性,细胞大小1.0-1.5×5.0-6.5μm,生长温度为20-38℃,pH为4-8。
基于16S rRNA序列的系统进化鉴定:将菌株R22接种于R2A培养基中,30℃摇床培养1天,取2μl菌液作为模板,以细菌通用引物27F和1492R进行PCR扩增,采用康为世纪生物科技公司的2×Es Taq Master Mix预混液,PCR反应体系为30μl,具体为:菌液2μl,27F引物1μl,1492R引物1μl,2×Es Taq Master Mix15μl,ddH2O。反应程序为:94℃5min,94℃30s,55℃30s,72℃60s,循环30次,72℃5min。将纯化后的PCR产物送往天一辉远生物科技有限公司测序,将获得的DNA序列上传至EZBioCloud数据库进行序列比对,得到与比对序列相似性最高的已知序列和标准菌株序列。经过分析发现与比对序列相似性最高的是芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis),相似度为99.79%。说明本发明分离到的降解菌属于芽孢杆菌属。
实施例3:本发明芽孢杆菌对液体培养基中烟嘧磺隆的降解效率
将分离纯化的菌株R22接种到5mL R2A培养基中培养48小时后,于6000r/min离心3分钟,倒去上清液,用2mL无菌PBS重悬,仍6000r/min离心3分钟,按此法冲洗2两遍后,用2mLMSG培养基重悬,并吸取1mL加入烟嘧磺隆浓度为100mg/L的MSG培养基中,于30℃、150rmp振荡培养10天后,运用高效液相色谱法检测其降解率,降解率可以达到70%。具体降解曲线图5所示。
实施例4:菌株R22降解烟嘧磺隆最适条件的研究
为了探究不同条件下菌株R22对烟嘧磺隆降解率的影响,以便找到菌株R22降解烟嘧磺隆的最适条件。具体方法为:在烟嘧磺隆浓度为100mg/L的MSG培养基中,1L培养基配方为:磷酸二氢钾0.5g,十二水合磷酸氢二钠1g,七水硫酸镁0.2g,氯化铵1.1g,葡萄糖1g,烟嘧磺隆200mg,微量元素2mL,维生素2mL,pH=7.3,余量为蒸馏水。微量元素(1L):磷酸氢二钾5g,硫酸镁2.5g,氯化钠2.5g,硫酸亚铁0.05g,硫酸锰0.050g,余量为蒸馏水。按照5%的接种量接种菌株R22于培养基中,温度分别为20℃、25℃、30℃、35℃、40℃,150rmp摇床培养,10天后利用高效液相色谱法测定其降解率。结果如图6所示,R22降解率随温度升高先升高,并在30℃达到最大值76.25%,然后开始随温度升高逐渐降低,40℃时,降解率为36.2%。
在烟嘧磺隆浓度为100mg/L的MSG培养基中,培养基配方为:磷酸二氢钾0.5g,十二水合磷酸氢二钠1g,七水硫酸镁0.2g,氯化铵1.1g,葡萄糖1g,烟嘧磺隆200mg,微量元素2mL,维生素2mL,余量为蒸馏水。微量元素(1L):磷酸氢二钾5g,硫酸镁2.5g,氯化钠2.5,硫酸亚铁0.05g,硫酸锰0.050g,余量为蒸馏水。按照5%的接种量接种菌株R22于培养基中,pH分别调制为5.0、6.0、7.0、8.0、9.0,在30℃下150rmp摇床培养,10天后利用高效液相色谱法测定其降解率。结果如图7所示,R22在pH酸性和中性条件下有较高的降解率,碱性条件下降解率极低。
在30℃,pH7的条件下,按照5%的接种量接种菌株R22于MSG培养基中,1L MSG培养基配方含有:磷酸二氢钾0.5g,十二水合磷酸氢二钠1g,七水硫酸镁0.2g,氯化铵1.1g,葡萄糖1g,烟嘧磺隆200mg,微量元素2mL,维生素2mL,余量为蒸馏水。微量元素(1L):磷酸氢二钾5g,硫酸镁2.5g,氯化钠2.5,硫酸亚铁0.05g,硫酸锰0.050g,余量为蒸馏水。分别将培养基中的烟嘧磺隆浓度配制为50mg/L、100mg/L、150mg/L、200mg/L、300mg/L,150rmp摇床培养,10天后利用高效液相色谱法测定其降解率,结果如图8所示,R22降解率随着初始底物浓度的增大而减少,在50mg/L有最高的降解率83.2%,300mg/L时,降解率为42.37%。
实施例5:烟嘧磺隆降解菌R22对土壤中烟嘧磺隆的降解
本实验使用的土壤为未遭受烟嘧磺隆污染过的土壤,pH值为7.6,将土壤过20目筛风干后备用,将10g/L的烟嘧磺隆加入土壤中并搅拌均匀,使得土壤中烟嘧磺隆浓度为100mg/kg土壤。分别准备灭菌和未灭菌土壤若干,在灭菌组中,按照40%的含水率接种OD600≈0.6的R22菌液于土壤中,另一组未灭菌土壤中接种等量的水。
未灭菌组按照灭菌组同样操作进行,在30℃下培养10天,测定土壤中烟嘧磺隆残留量。结果如图9所示,在灭菌土壤中接种R22后,10d时对烟嘧磺隆降解率为55.67%,而不接种菌株时为21.07%;在未灭菌土壤中接种R22后,10d时对烟嘧磺隆降解率为43.51%,而不接种菌株时为16.2%;比较得知接种外源菌株R22于土壤中可以明显提高烟嘧磺隆降解率。
最后应说明的是:以上实施例仅用以说明本发明的技术方案,而非对其限制;尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明,本领域的普通技术人员应当理解:其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分技术特征进行等同替换;而这些修改或者替换,并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。

Claims (10)

1.一种芽孢杆菌(Bacillus sp.)R22,其特征在于,其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.27961。
2.根据权利要求1所述的芽孢杆菌R22,其特征在于,所述芽孢杆菌R22的16S rRNA基因序列如SEQ ID NO.1所示。
3.一种微生物制剂,其特征在于,包含选自权利要求1或2所述的芽孢杆菌R22的菌体、菌粉、菌悬液、发酵产物、发酵液、发酵液提取物中的一种或多种。
4.权利要求3所述的微生物制剂的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括培养所述芽孢杆菌R22的步骤。
5.根据权利要求4所述的微生物制剂的制备方法,其特征在于,培养所述芽孢杆菌R22在28-32℃、pH7.0-7.5条件下进行,优选在29-31℃、pH7.2-7.4条件下进行,进一步优选在30℃、pH7.3条件下进行;
优选的,利用R2A培养基培养所述芽孢杆菌R22;
优选的,1L R2A培养基含有酵母粉0.4-0.6g、蛋白胨0.4-0.6g、酸水解酪蛋白0.4-0.6g、葡萄糖0.4-0.6g、可溶性淀粉0.4-0.6g、磷酸氢二钾0.2-0.4g、七水硫酸镁0.04-0.06g和丙酮酸钠0.28-0.32g,优选余量为水,进一步优选为蒸馏水,pH=7.0-7.5;
进一步优选的、1L R2A培养基含有酵母粉0.5g、蛋白胨0.5g、酸水解酪蛋白0.5g、葡萄糖0.5g、可溶性淀粉0.5g、磷酸氢二钾0.3g、七水硫酸镁0.05g和丙酮酸钠0.3g,pH=7.2。
6.权利要求1或2所述的芽孢杆菌R22、或权利要求3所述的微生物制剂在以下任一项或几项中的应用:
(1)制备降解磺酰脲类除草剂产品;
(2)降解磺酰脲类除草剂;
优选的,降解土壤与水体中的磺酰脲类除草剂;
优选的,所述磺酰脲类除草剂为烟嘧磺隆、甲嘧磺隆、单嘧磺隆、苄嘧磺隆、噻吩磺隆、苯磺隆、甲磺隆、绿磺隆或甲基二磺隆中的一种或几种;
进一步优选的,所述磺酰脲类除草剂为烟嘧磺隆。
7.一种降解磺酰脲类除草剂的方法,其特征在于,利用权利要求1或2所述的芽孢杆菌R22、或权利要求3所述的微生物制剂;
优选的,所述磺酰脲类除草剂为烟嘧磺隆、甲嘧磺隆、单嘧磺隆、苄嘧磺隆、噻吩磺隆、苯磺隆、甲磺隆、绿磺隆或甲基二磺隆中的一种或几种;
进一步优选的,所述磺酰脲类除草剂为烟嘧磺隆。
8.根据权利要求7所述降解磺酰脲类除草剂的方法,其特征在于,利用MSG培养基,1LMSG培养基配方含有:磷酸二氢钾0.4-0.6g、十二水合磷酸氢二钠0.9-1.1g、七水硫酸镁0.18-0.22g、氯化铵1.0-1.3g、葡萄糖0.9-1.1g、微量元素1.8-2.2mL和维生素1.8-2.2mL,优选余量为水,进一步优选为蒸馏水,pH=7.2-7.5;
1L微量元素含有:磷酸氢二钾4.5-5.5g、硫酸镁2.3-2.7g、氯化钠2.3-2.7g、硫酸亚铁0.04-0.06g和硫酸锰0.04-0.06g,优选余量为水,进一步优选为蒸馏水;
优选的,所述1L MSG培养基配方含有:磷酸二氢钾0.5g、十二水合磷酸氢二钠1g、七水硫酸镁0.2g、氯化铵1.1g、葡萄糖1g、微量元素2mL和维生素2mL,pH=7.3;
1L微量元素含有:磷酸氢二钾5g、硫酸镁2.5g、氯化钠2.5g、硫酸亚铁0.05g和硫酸锰0.05g。
9.根据权利要求7-8任一项所述降解磺酰脲类除草剂的方法,其特征在于,权利要求1或2所述的芽孢杆菌R22、或权利要求3所述的微生物制剂的使用环境的温度为20-45℃;优选为25-35℃;进一步优选为30℃;
和/或,权利要求1或2所述的芽孢杆菌R22、或权利要求3所述的微生物制剂的使用环境的pH值为4.5-7.5;优选为4-7;进一步优选为6.9-7.1,更优选为7。
10.根据权利要求7-8任一项所述降解磺酰脲类除草剂的方法,其特征在于,所述磺酰脲类除草剂的浓度为500mg/L以下;优选为350mg/L以下;进一步优选为250mg/L以下。
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