CN117442534B - 一种金花葵提取物及其制备方法与在制备护肤品中的应用 - Google Patents

一种金花葵提取物及其制备方法与在制备护肤品中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种金花葵提取物及其制备方法与在制备护肤品中的应用。所述的金花葵提取物的制备方法，其包含如下步骤：取金花葵干花蕾，粉碎后加入醇/水混合溶液，升温至40～60℃进行负压提取1～2h，得提取液，将提取液浓缩干燥后得金花葵醇/水提取物，取金花葵醇/水提取物即得所述的金花葵提取物。研究表明，由本发明所述的金花葵提取物具有弹性蛋白酶抑制作用；因此，将本发明所述的金花葵提取物用于制备具有弹性蛋白酶抑制作用的药物或护肤品具有重要的应用价值。由于本发明所述的金花葵提取物具有弹性蛋白酶抑制作用，因此，进一步将其作为有效成分用于制备具有紧致皮肤、祛皱以及抗衰老作用的药物或护肤品具有重要的应用前景。

Description

一种金花葵提取物及其制备方法与在制备护肤品中的应用
技术领域
本发明涉及天然产物技术领域，具体涉及一种金花葵提取物及其制备方法与在制备护肤品中的应用。
背景技术
弹性纤维由弹性蛋白和微原纤维构成，位于真皮网状层内，其排列与胶原纤维平行或斜行，在网状层下部较多，使皮肤具有弹性。然而，紫外照射以及环境污染等因素会促进体内弹性蛋白酶的产生；弹性蛋白酶会降解弹性蛋白，从而导致皮肤的松弛、衰老以及皱纹的产生。因此，抑制弹性蛋白酶的产生可以缓解皮肤的松弛、衰老以及皱纹的产生等问题。
金花葵(Hibiscus manihot L.)，是锦葵科秋葵属一年生或多年生草本；其全草可入药，具有清热解毒、散瘀消肿、利尿消肿、补肾壮阳等作用。但是现有技术并未有报道金花葵具有弹性蛋白酶抑制作用。因此，以金花葵干花蕾为原料，从中开发出具有弹性蛋白酶抑制作用的金花葵提取物具有重要的应用价值。
发明内容
为了克服现有技术中存在的至少之一的技术问题，本发明提供了一种金花葵提取物的制备方法。
本发明的技术方案如下：
一种金花葵提取物的制备方法，其包含如下步骤：取金花葵干花蕾，粉碎后加入醇/水混合溶液，升温至40～60℃进行负压提取1～2h，得提取液，将提取液浓缩干燥后得金花葵醇/水提取物，取金花葵醇/水提取物即得所述的金花葵提取物；
所述的醇/水混合溶液中的醇的体积分数为50％～80％。
发明人在研究中发现，通过本发明所述方法制备得到的金花葵提取物具有弹性蛋白酶抑制作用。
优选地，述的醇为甲醇或乙醇。
优选地，金花葵干花蕾与醇/水混合溶液的用量比为1kg:10～20L。
最优选地，金花葵干花蕾与醇/水混合溶液的用量比为1kg:15L。
优选地，所述的负压提取的真空度为0.04～0.07MPa。
优选地，所述的金花葵提取物的制备方法，还包括如下步骤：
将金花葵醇/水提取物上大孔树脂柱，先用体积分数为25～27％的乙醇水溶液洗脱除杂；接着再用体积分数为46～48％的乙醇水溶液洗脱，收集体积分数为46～48％的乙醇水溶液洗脱下来的洗脱液，浓缩干燥后得金花葵大孔树脂洗脱部位；取金花葵大孔树脂洗脱部位即得所述的金花葵提取物。
最优选地，将金花葵醇/水提取物上大孔树脂柱，先用体积分数为26％的乙醇水溶液洗脱除杂；接着再用体积分数为47％的乙醇水溶液洗脱，收集体积分数为47％的乙醇水溶液洗脱下来的洗脱液，浓缩干燥后得金花葵大孔树脂洗脱部位；取金花葵大孔树脂洗脱部位即得所述的金花葵提取物。
发明人在研究中发现，将金花葵醇/水提取物进一步通过本发明上述大孔树脂柱洗脱条件制备得到的金花葵大孔树脂洗脱部位，其弹性蛋白酶抑制作用要进一步显著高于金花葵醇/水提取物。
发明人在研究中还发现，本发明的大孔树脂柱的洗脱条件十分关键，金花葵醇/水提取物在其它大孔树脂柱洗脱条件下制备得到的金花葵大孔树脂洗脱部位，其弹性蛋白酶抑制作用与金花葵醇/水提取物相比，并不能得到进一步的显著提高；金花葵醇/水提取物只有进一步在本发明所述大孔树脂柱洗脱条件下制备得到的金花葵大孔树脂洗脱部位，其弹性蛋白酶抑制作用与金花葵醇/水提取物相比，才能得到进一步的显著提高。
优选地，体积分数为25～27％的乙醇水溶液的用量为3～5倍柱体积；体积分数为46～48％的乙醇水溶液的用量为6～9倍柱体积。
最优选地，体积分数为25～27％的乙醇水溶液的用量为4倍柱体积；体积分数为46～48％的乙醇水溶液的用量为8倍柱体积。
优选地，所述的大孔树脂柱为D101型大孔树脂柱。
优选地，所述的制备方法进一步还包括如下步骤：将金花葵大孔树脂洗脱部位上硅胶柱，先用体积比为1000:110～130的正庚烷和乙酸乙酯组成的混合有机溶剂进行洗脱除杂；接着再用体积比为1000:230～250的正庚烷和乙酸乙酯组成的混合有机溶剂进行洗脱，收集体积比为1000:230～250的正庚烷和乙酸乙酯组成的混合有机溶剂洗脱下来的洗脱液，浓缩干燥后得金花葵硅胶洗脱部位；取金花葵硅胶洗脱部位即得所述的金花葵提取物。
最优选地，所述的制备方法进一步还包括如下步骤：将金花葵大孔树脂洗脱部位上硅胶柱，先用体积比为1000:115的正庚烷和乙酸乙酯组成的混合有机溶剂进行洗脱除杂；接着再用体积比为1000:240的正庚烷和乙酸乙酯组成的混合有机溶剂进行洗脱，收集体积比为1000:240的正庚烷和乙酸乙酯组成的混合有机溶剂洗脱下来的洗脱液，浓缩干燥后得金花葵硅胶洗脱部位；取金花葵硅胶洗脱部位即得所述的金花葵提取物。
优选地，体积比为1000:110～130的正庚烷和乙酸乙酯组成的混合有机溶剂的用量为2～4倍柱体积；体积比为1000:230～250的正庚烷和乙酸乙酯组成的混合有机溶剂的用量为3～5倍柱体积。
发明人在研究中发现，将金花葵大孔树脂洗脱部位进一步通过本发明上述硅胶柱洗脱条件制备得到的金花葵硅胶洗脱部位，其弹性蛋白酶抑制作用要进一步大幅高于金花葵大孔树脂洗脱部位。
发明人在研究中还发现，本发明的硅胶柱的洗脱条件十分关键，金花葵大孔树脂洗脱部位在其它硅胶柱洗脱条件下制备得到的金花葵硅胶洗脱部位，其弹性蛋白酶抑制作用与金花葵大孔树脂洗脱部位相比，并不能得到进一步的提高或大幅提高；金花葵大孔树脂洗脱部位只有进一步在本发明所述硅胶柱洗脱条件下制备得到的金花葵硅胶洗脱部位，其弹性蛋白酶抑制作用与金花葵大孔树脂洗脱部位相比，才能得到进一步的大幅提高。
本发明还提供了一种由上述制备方法制备得到的金花葵提取物。
本发明还提供了一种上述金花葵提取物在制备具有弹性蛋白酶抑制作用的产品中的应用。
优选地，所述的产品为药物或护肤品。
本发明还提供了一种上述金花葵提取物在制备护肤品中的应用。
优选地，所述的护肤品为具有弹性蛋白酶抑制作用的护肤品。
优选地，所述的护肤品为具有紧致皮肤、祛皱和/或抗衰老作用的护肤品。
有益效果：本发明提供了一种全新的金花葵提取物的制备方法；研究表明，由本发明所述的金花葵提取物具有弹性蛋白酶抑制作用；因此，将本发明所述的金花葵提取物用于制备具有弹性蛋白酶抑制作用的药物或护肤品具有重要的应用价值。
由于本发明所述的金花葵提取物具有弹性蛋白酶抑制作用，因此，进一步将其作为有效成分用于制备具有紧致皮肤、祛皱以及抗衰老作用的药物或护肤品具有重要的应用前景。
具体实施方式
以下结合具体实施例来进一步解释本发明，但实施例对本发明不做任何形式的限定。
实施例1金花葵提取物的制备
取干燥的金花葵干花蕾，粉碎后加入醇/水混合溶液，升温至50℃进行负压(真空度为0.06MPa)提取1.5h，得提取液，将提取液浓缩干燥后得金花葵醇/水提取物；取金花葵醇/水提取物即得所述的金花葵提取物；
金花葵干花蕾与醇/水混合溶液的用量比为1kg:15L；所述的醇/水混合溶液中的醇的体积分数为70％；所述的醇为乙醇。
实施例2金花葵提取物的制备
(1)取干燥的金花葵干花蕾，粉碎后加入醇/水混合溶液，升温至50℃进行负压(真空度为0.06MPa)提取1.5h，得提取液，将提取液浓缩干燥后得金花葵醇/水提取物；金花葵干花蕾与醇/水混合溶液的用量比为1kg:15L；所述的醇/水混合溶液中的醇的体积分数为70％；所述的醇为乙醇；
(2)将金花葵醇/水提取物上D101型大孔树脂柱(大孔树脂柱中的填料的重量为金花葵醇/水提取物重量的35倍)，先用4倍柱体积的体积分数为26％的乙醇水溶液洗脱除杂；接着再用8倍柱体积的体积分数为47％的乙醇水溶液洗脱，收集体积分数为47％的乙醇水溶液洗脱下来的洗脱液，浓缩干燥后得金花葵大孔树脂洗脱部位；取金花葵大孔树脂洗脱部位即得所述的金花葵提取物。
实施例3金花葵提取物的制备
(1)取干燥的金花葵干花蕾，粉碎后加入醇/水混合溶液，升温至50℃进行负压(真空度为0.06MPa)提取1.5h，得提取液，将提取液浓缩干燥后得金花葵醇/水提取物；金花葵干花蕾与醇/水混合溶液的用量比为1kg:15L；所述的醇/水混合溶液中的醇的体积分数为70％；所述的醇为乙醇；
(2)将金花葵醇/水提取物上D101型大孔树脂柱(大孔树脂柱中的填料的重量为金花葵醇/水提取物重量的35倍)，先用4倍柱体积的体积分数为26％的乙醇水溶液洗脱除杂；接着再用8倍柱体积的体积分数为47％的乙醇水溶液洗脱，收集体积分数为47％的乙醇水溶液洗脱下来的洗脱液，浓缩干燥后得金花葵大孔树脂洗脱部位；
(3)将金花葵大孔树脂洗脱部位上硅胶柱(硅胶柱中采用的是200-300目的硅胶，其中硅胶的重量为金花葵大孔树脂洗脱部位重量的30倍)，先用3倍柱体积的体积比为1000:115的正庚烷和乙酸乙酯组成的混合有机溶剂进行洗脱除杂；接着再用4倍柱体积的体积比为1000:240的正庚烷和乙酸乙酯组成的混合有机溶剂进行洗脱，收集体积比为1000:240的正庚烷和乙酸乙酯组成的混合有机溶剂洗脱下来的洗脱液，浓缩干燥后得金花葵硅胶洗脱部位；取金花葵硅胶洗脱部位即得所述的金花葵提取物。
对比例1金花葵提取物的制备
(1)取干燥的金花葵干花蕾，粉碎后加入醇/水混合溶液，升温至50℃进行负压(真空度为0.06MPa)提取1.5h，得提取液，将提取液浓缩干燥后得金花葵醇/水提取物；金花葵干花蕾与醇/水混合溶液的用量比为1kg:15L；所述的醇/水混合溶液中的醇的体积分数为70％；所述的醇为乙醇；
(2)将金花葵醇/水提取物上D101型大孔树脂柱(大孔树脂柱中的填料的重量为金花葵醇/水提取物重量的35倍)，先用4倍柱体积的体积分数为10％的乙醇水溶液洗脱除杂；接着再用8倍柱体积的体积分数为30％的乙醇水溶液洗脱，收集体积分数为30％的乙醇水溶液洗脱下来的洗脱液，浓缩干燥后得金花葵大孔树脂洗脱部位；取金花葵大孔树脂洗脱部位即得所述的金花葵提取物。
对比例2金花葵提取物的制备
(1)取干燥的金花葵干花蕾，粉碎后加入醇/水混合溶液，升温至50℃进行负压(真空度为0.06MPa)提取1.5h，得提取液，将提取液浓缩干燥后得金花葵醇/水提取物；金花葵干花蕾与醇/水混合溶液的用量比为1kg:15L；所述的醇/水混合溶液中的醇的体积分数为70％；所述的醇为乙醇；
(2)将金花葵醇/水提取物上D101型大孔树脂柱(大孔树脂柱中的填料的重量为金花葵醇/水提取物重量的35倍)，先用4倍柱体积的体积分数为40％的乙醇水溶液洗脱除杂；接着再用8倍柱体积的体积分数为60％的乙醇水溶液洗脱，收集体积分数为60％的乙醇水溶液洗脱下来的洗脱液，浓缩干燥后得金花葵大孔树脂洗脱部位；取金花葵大孔树脂洗脱部位即得所述的金花葵提取物。
对比例3金花葵提取物的制备
(1)取干燥的金花葵干花蕾，粉碎后加入醇/水混合溶液，升温至50℃进行负压(真空度为0.06MPa)提取1.5h，得提取液，将提取液浓缩干燥后得金花葵醇/水提取物；金花葵干花蕾与醇/水混合溶液的用量比为1kg:15L；所述的醇/水混合溶液中的醇的体积分数为70％；所述的醇为乙醇；
(2)将金花葵醇/水提取物上D101型大孔树脂柱(大孔树脂柱中的填料的重量为金花葵醇/水提取物重量的35倍)，先用4倍柱体积的体积分数为26％的乙醇水溶液洗脱除杂；接着再用8倍柱体积的体积分数为47％的乙醇水溶液洗脱，收集体积分数为47％的乙醇水溶液洗脱下来的洗脱液，浓缩干燥后得金花葵大孔树脂洗脱部位；
(3)将金花葵大孔树脂洗脱部位上硅胶柱(硅胶柱中采用的是200-300目的硅胶，其中硅胶的重量为金花葵大孔树脂洗脱部位重量的30倍)，先用3倍柱体积的体积比为1000:50的正庚烷和乙酸乙酯组成的混合有机溶剂进行洗脱除杂；接着再用4倍柱体积的体积比为1000:150的正庚烷和乙酸乙酯组成的混合有机溶剂进行洗脱，收集体积比为1000:150的正庚烷和乙酸乙酯组成的混合有机溶剂洗脱下来的洗脱液，浓缩干燥后得金花葵硅胶洗脱部位；取金花葵硅胶洗脱部位即得所述的金花葵提取物。
对比例4金花葵提取物的制备
(1)取干燥的金花葵干花蕾，粉碎后加入醇/水混合溶液，升温至50℃进行负压(真空度为0.06MPa)提取1.5h，得提取液，将提取液浓缩干燥后得金花葵醇/水提取物；金花葵干花蕾与醇/水混合溶液的用量比为1kg:15L；所述的醇/水混合溶液中的醇的体积分数为70％；所述的醇为乙醇；
(2)将金花葵醇/水提取物上D101型大孔树脂柱(大孔树脂柱中的填料的重量为金花葵醇/水提取物重量的35倍)，先用4倍柱体积的体积分数为26％的乙醇水溶液洗脱除杂；接着再用8倍柱体积的体积分数为47％的乙醇水溶液洗脱，收集体积分数为47％的乙醇水溶液洗脱下来的洗脱液，浓缩干燥后得金花葵大孔树脂洗脱部位；
(3)将金花葵大孔树脂洗脱部位上硅胶柱(硅胶柱中采用的是200-300目的硅胶，其中硅胶的重量为金花葵大孔树脂洗脱部位重量的30倍)，先用3倍柱体积的体积比为1000:250的正庚烷和乙酸乙酯组成的混合有机溶剂进行洗脱除杂；接着再用4倍柱体积的体积比为1000:400的正庚烷和乙酸乙酯组成的混合有机溶剂进行洗脱，收集体积比为1000:400的正庚烷和乙酸乙酯组成的混合有机溶剂洗脱下来的洗脱液，浓缩干燥后得金花葵硅胶洗脱部位；取金花葵硅胶洗脱部位即得所述的金花葵提取物。
实验例1
分别将实施例1～3以及对比例1～4制备得到的金花葵提取物溶于DMSO中，配制成10mg/mL的待测样品溶液备用；称取弹性蛋白酶10mg，加入pH为8.4的硼酸盐缓冲液100ml配制成弹性蛋白酶溶液备用；取刚果红弹性蛋白20mg，加入pH为8.4的硼酸盐缓冲液10ml配制成底物溶液备用。
取0.1mL三羟甲基氨基甲烷缓冲液、50μL弹性蛋白酶溶液以及50μL待测样品溶液于96孔板中，放置在25℃预温育20min；加入底物溶液50μL；继续于25℃温育60min后，用酶标仪测定495nm处的吸光值，得样品孔吸光值T。取0.1mL三羟甲基氨基甲烷缓冲液和50μL弹性蛋白酶溶液以及50μL溶剂DMSO(不含待测样品)于96孔板中，放置在25℃预温育20min；加入底物溶液50μL；继续于25℃温育60min后，用酶标仪测定495nm处的吸光值，得对照孔吸光值C。最后根据如下公式计算弹性蛋白酶抑制率，测试结果见表1；
弹性蛋白酶抑制率(％)＝[1-(样品孔吸光值T/对照孔吸光值C)]×100％。
表1.本发明金花葵提取物弹性蛋白酶抑制作用实验结果
弹性蛋白酶抑制率
实施例1制备得到的金花葵提取物 56.1％
实施例2制备得到的金花葵提取物 70.8％
实施例3制备得到的金花葵提取物 98.5％
对比例1制备得到的金花葵提取物 57.3％
对比例2制备得到的金花葵提取物 60.4％
对比例3制备得到的金花葵提取物 75.4％
对比例4制备得到的金花葵提取物 64.1％
从表1实验结果可以看出，实施例1制备得到的金花葵提取物其具有56.1％的弹性蛋白酶抑制率；这说明：采用本发明所述方法制备得到的金花葵醇/水提取物，其具有弹性蛋白酶抑制作用。
从表1实验结果中还可以看出，实施例2制备得到的金花葵提取物，其弹性蛋白酶抑制率要显著高于实施例1制备得到的金花葵提取物；这说明：将金花葵醇/水提取物进一步通过本发明上述大孔树脂柱洗脱条件制备得到的金花葵大孔树脂洗脱部位，其弹性蛋白酶抑制作用要进一步显著高于金花葵醇/水提取物。
从表1实验结果中还可以看出，对比例1和2制备得到的金花葵提取物，其弹性蛋白酶抑制率与实施例1制备得到的金花葵提取物相比，并未得到显著的提高；其提高程度要显著小于实施例2制备得到的金花葵提取物；这说明：本发明的大孔树脂柱的洗脱条件十分关键，金花葵醇/水提取物在其它大孔树脂柱洗脱条件下制备得到的金花葵大孔树脂洗脱部位，其弹性蛋白酶抑制作用与金花葵醇/水提取物相比，并不能得到进一步的显著提高；金花葵醇/水提取物只有进一步在本发明所述大孔树脂柱洗脱条件下制备得到的金花葵大孔树脂洗脱部位，其弹性蛋白酶抑制作用与金花葵醇/水提取物相比，才能得到进一步的显著提高。
从表1实验结果中还可以看出，实施例3制备得到的金花葵提取物，其弹性蛋白酶抑制率要进一步大幅高于实施例2制备得到的金花葵提取物；这说明：将金花葵大孔树脂洗脱部位进一步通过本发明上述硅胶柱洗脱条件制备得到的金花葵硅胶洗脱部位，其弹性蛋白酶抑制作用要进一步大幅高于金花葵大孔树脂洗脱部位。
从表1实验结果中还可以看出，对比例3和4制备得到的金花葵提取物，其弹性蛋白酶抑制率与实施例2制备得到的金花葵提取物相比，并未得到进一步的大幅提高，甚至还有所降低；这说明本发明的硅胶柱的洗脱条件十分关键，在不同硅胶柱洗脱条件下制备得到的金花葵硅胶洗脱部位，其中的有效成分的种类和含量是完全不同的，从而造成了其对弹性蛋白酶的抑制作用也是完全不同的；上述实验结果表明：金花葵大孔树脂洗脱部位在其它硅胶柱洗脱条件下制备得到的金花葵硅胶洗脱部位，其弹性蛋白酶抑制作用与金花葵大孔树脂洗脱部位相比，并不能得到进一步的提高或大幅提高；金花葵大孔树脂洗脱部位只有进一步在本发明所述硅胶柱洗脱条件下制备得到的金花葵硅胶洗脱部位，其弹性蛋白酶抑制作用与金花葵大孔树脂洗脱部位相比，才能得到进一步的大幅提高。
实施例4金花葵提取物的制备
取干燥的金花葵干花蕾，粉碎后加入醇/水混合溶液，升温至50℃进行负压(真空度为0.06MPa)提取1.5h，得提取液，将提取液浓缩回收乙醇至无醇味，得浓缩液；往浓缩液中加入丁二醇复配，得复配液；将复配液冷冻过夜，过滤，得澄清透明棕色提取液即所述的金花葵提取物；最后进行分装，入库。
金花葵干花蕾与醇/水混合溶液的用量比为1kg:15L；所述的醇/水混合溶液中的醇的体积分数为70％；所述的醇为乙醇；丁二醇的用量占复配液体积的40％。
本发明通过将提取液与丁二醇复配得到的提取物，由于其为液体状态，在化妆品中生产过程中无需另外进行配制，即可进行使用，提高了计量的准确性，简化了生产步骤，有利于提高生产质量和效率。

Claims (9)

1.一种金花葵提取物的制备方法，其特征在于，包含如下步骤：
取金花葵干花蕾，粉碎后加入醇/水混合溶液，升温至40～60℃进行负压提取1～2h，得提取液，将提取液浓缩干燥后得金花葵醇/水提取物；所述的醇/水混合溶液中的醇的体积分数为50％～80％；
将金花葵醇/水提取物上大孔树脂柱，先用体积分数为25～27％的乙醇水溶液洗脱除杂；接着再用体积分数为46～48％的乙醇水溶液洗脱，收集体积分数为46～48％的乙醇水溶液洗脱下来的洗脱液，浓缩干燥后得金花葵大孔树脂洗脱部位；
将金花葵大孔树脂洗脱部位上硅胶柱，先用体积比为1000:110～130的正庚烷和乙酸乙酯组成的混合有机溶剂进行洗脱除杂；接着再用体积比为1000:230～250的正庚烷和乙酸乙酯组成的混合有机溶剂进行洗脱，收集体积比为1000:230～250的正庚烷和乙酸乙酯组成的混合有机溶剂洗脱下来的洗脱液，浓缩干燥后得金花葵硅胶洗脱部位；取金花葵硅胶洗脱部位即得所述的金花葵提取物。
2.根据权利要求1所述的金花葵提取物的制备方法，其特征在于，所述的醇为甲醇或乙醇。
3.根据权利要求1所述的金花葵提取物的制备方法，其特征在于，金花葵干花蕾与醇/水混合溶液的用量比为1kg:10～20L。
4.根据权利要求3所述的金花葵提取物的制备方法，其特征在于，金花葵干花蕾与醇/水混合溶液的用量比为1kg:15L。
5.根据权利要求1所述的金花葵提取物的制备方法，其特征在于，进一步还包括如下步骤：
将金花葵醇/水提取物上大孔树脂柱，先用体积分数为26％的乙醇水溶液洗脱除杂；接着再用体积分数为47％的乙醇水溶液洗脱，收集体积分数为47％的乙醇水溶液洗脱下来的洗脱液，浓缩干燥后得金花葵大孔树脂洗脱部位；取金花葵大孔树脂洗脱部位即得所述的金花葵提取物。
6.根据权利要求1所述的金花葵提取物的制备方法，其特征在于，体积分数为25～27％的乙醇水溶液的用量为3～5倍柱体积；体积分数为46～48％的乙醇水溶液的用量为6～9倍柱体积。
7.权利要求1～6任一项所述的制备方法制备得到的金花葵提取物。
8.权利要求7所述的金花葵提取物在制备具有弹性蛋白酶抑制作用的产品中的应用。
9.权利要求7所述的金花葵提取物在制备护肤品中的应用。
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Citations (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101260133A (zh) * 2008-04-17 2008-09-10 中国科学院新疆理化技术研究所 从棉花花瓣中制备金丝桃苷和异槲皮素的方法
CN104814987A (zh) * 2015-05-18 2015-08-05 天津工业大学 一种从菜芙蓉中提取总黄酮的方法
CN105853287A (zh) * 2016-05-03 2016-08-17 广州暨南生物医药研究开发基地有限公司 一种金花葵保湿精华液及其制备方法
CN106109369A (zh) * 2016-06-21 2016-11-16 广州暨南生物医药研究开发基地有限公司 一种含有金花葵的抗皱组合物及其抗皱霜
CN106890126A (zh) * 2017-03-23 2017-06-27 兰宇玲 一种金花葵富硒酵素面膜的配方及其制备方法
CN107759648A (zh) * 2017-11-02 2018-03-06 北京理工大学 一种从金花葵中分离纯化金丝桃苷和异槲皮苷的方法
CN108524406A (zh) * 2018-07-21 2018-09-14 河南中立宝花茶有限公司 一种金花葵面膜及其制备方法
CN110590882A (zh) * 2019-09-16 2019-12-20 北京理工大学 一种从金花葵花中同时分离纯化6种黄酮化合物的方法
CN113616564A (zh) * 2021-07-21 2021-11-09 浙江宜格企业管理集团有限公司 一种从莲花中提取水溶性黄酮的方法
CN116712484A (zh) * 2023-07-03 2023-09-08 暨南大学 一种玫瑰花提取物及其制备方法与在制备具有神经氨酸酶抑制作用的药物中的应用
CN117018048A (zh) * 2023-10-07 2023-11-10 河北瑞龙生物科技有限公司 一种金花葵黄酮提取物及其制备方法

Patent Citations (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101260133A (zh) * 2008-04-17 2008-09-10 中国科学院新疆理化技术研究所 从棉花花瓣中制备金丝桃苷和异槲皮素的方法
CN104814987A (zh) * 2015-05-18 2015-08-05 天津工业大学 一种从菜芙蓉中提取总黄酮的方法
CN105853287A (zh) * 2016-05-03 2016-08-17 广州暨南生物医药研究开发基地有限公司 一种金花葵保湿精华液及其制备方法
CN106109369A (zh) * 2016-06-21 2016-11-16 广州暨南生物医药研究开发基地有限公司 一种含有金花葵的抗皱组合物及其抗皱霜
CN106890126A (zh) * 2017-03-23 2017-06-27 兰宇玲 一种金花葵富硒酵素面膜的配方及其制备方法
CN107759648A (zh) * 2017-11-02 2018-03-06 北京理工大学 一种从金花葵中分离纯化金丝桃苷和异槲皮苷的方法
CN108524406A (zh) * 2018-07-21 2018-09-14 河南中立宝花茶有限公司 一种金花葵面膜及其制备方法
CN110590882A (zh) * 2019-09-16 2019-12-20 北京理工大学 一种从金花葵花中同时分离纯化6种黄酮化合物的方法
CN113616564A (zh) * 2021-07-21 2021-11-09 浙江宜格企业管理集团有限公司 一种从莲花中提取水溶性黄酮的方法
CN116712484A (zh) * 2023-07-03 2023-09-08 暨南大学 一种玫瑰花提取物及其制备方法与在制备具有神经氨酸酶抑制作用的药物中的应用
CN117018048A (zh) * 2023-10-07 2023-11-10 河北瑞龙生物科技有限公司 一种金花葵黄酮提取物及其制备方法

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