CN117384246A

CN117384246A - 一种多肽及含该多肽的水凝胶、其制备方法与应用

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Publication number: CN117384246A
Application number: CN202311687491.7A
Authority: CN
Inventors: 李蓉; 秦训思
Original assignee: Peking University Third Hospital Peking University Third Clinical Medical College
Current assignee: Peking University Third Hospital Peking University Third Clinical Medical College
Priority date: 2023-12-11
Filing date: 2023-12-11
Publication date: 2024-01-12
Anticipated expiration: 2043-12-11
Also published as: CN117384246B

Abstract

本发明涉及生物医学及新型药物开发领域，具体为一种多肽及含该多肽的水凝胶、其制备方法及其应用。本发明中的多肽具有全新结构，且能够通过简单的方法形成稳定、具有抗氧化作用的水凝胶，并可进一步搭载雌激素类药物、外泌体等活性治疗成分，从而能够用于制备治疗子宫内膜损伤或子宫内膜衰老的药物。

Description

一种多肽及含该多肽的水凝胶、其制备方法与应用

技术领域

本发明涉及生物医学及新型药物开发领域，更具体为一种多肽水凝胶的制备方法及其应用。

背景技术

子宫是妊娠建立与维持的必要器官，由子宫内膜损伤引起的子宫性不孕变得越来越常见，以及子宫内膜衰老引起的子宫内膜容受性下降，这都严重影响女性生殖健康，造成不孕。子宫内膜损伤包括各种子宫内膜疾病，如宫腔粘连(IUAs)，宫腔粘连是子宫内膜损伤的最常见形式，人工流产、剖宫产、刮宫、宫内感染、子宫疾病介入及放化疗等都可能导致难以逆转的子宫内膜损伤，表现为反复流产、月经减少、闭经、胎盘增生等多种临床表现，临床表征为子宫内膜薄、宫腔粘。子宫内膜衰老则包含病理性和生理性内膜衰老，临床表现子宫内膜容受性下降，子宫内膜纤维化以及伴有衰老氧化损伤，目前常用的治疗方法有内膜微刺激、大剂量雌激素刺激、生长激素宫腔灌注等，另外针对子宫腔粘连分离术后预防再粘连的主要应用包括宫腔放置球囊支架、或使用透明质酸钠等。

然而上述手段均不能满足临床治疗需求，手术治疗对轻度或中度宫腔粘连患者有效，对重度患者无效。雌激素治疗虽然能够刺激子宫内膜的再生和再上皮化，但仍存在一些问题，比如没有标准剂量或方案。因此，现有的策略很难有效地修复子宫内膜，临床上迫切需求开发一种有效的治疗方法来减少子宫内膜损伤，缓解内膜纤维化和提高子宫内膜容受性，避免宫腔粘连及复发，进而改善临床妊娠结局。

目前已有应用间充质干细胞来源外泌体治疗内膜损伤治的应用研究。外泌体是细胞主动分泌的直径为40-150nm囊泡样小体，可携带多种蛋白质、mRNA以及miRNA，参与细胞通讯、细胞迁移、血管新生和肿瘤细胞生长等过程。外泌体不仅含有干细胞特有的活性成分，而且具有靶向性投递、化学性质稳定、安全性高等优点，为干细胞治疗薄型子宫内膜的提供新的更安全方便的方法。因此，需要提供能够用于递送外泌体、适用于治疗子宫内膜损伤的递送系统。

发明内容

子宫液/腔的湿润程度是局部给药及维持药物起效的必要条件，向子宫内膜给药时，必须考虑药物在子宫内膜皱褶的有效粘附，这是药物进入组织的保证。本申请的发明人经过潜心研究获得了一种新的多肽结构，所述多肽不仅具有两亲性质、能够有效与子宫内膜进行粘附，并具有快速剪切减薄和可逆物理交联的特性，可形成水凝胶状态，从而通过原位注射、原位喷涂等方式进行局部应用，作为子宫内膜治疗药物的载体使用。同时，该多肽形成的水凝胶能够有助于外泌体保存，可用于递送治疗用外泌体。此外，该多肽本身也具有显著的抗氧化作用，能够有效清除子宫中衰老诱导的活性氧，进一步提高对子宫内膜的修复功能。

为实现上述效果，本发明首先提供一种能够形成水凝胶的多肽，多肽结构由亲水性的胶原结合肽序列(LRELHLNNN)、抗氧化基团R及疏水基团X组成，其结构如下所示：

式（I）

所述疏水基团X为C₄-C₄₀的碳链，优选C₆-C₃₀，例如C₆、C₈、C₁₀、C₁₂、C₁₄、C₁₆、C₁₈、C₂₀、C₂₂、C₂₄、C₂₆、C₂₈、C₂₀，其中更优选C₁₂-C₁₈，例如C₁₂、C₁₄、C₁₆、C₁₈。

优选地，X为CH₃-（CH₂）_n-，n为3-39的整数，优选地，n为5-20的整数，优选地，n为5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20。

所述抗氧化基团R包括：谷胱甘肽、半胱氨酸、半胱氨酸二聚体、谷胱甘肽二聚体、以及硒代半胱氨酸及其二聚体、硒蛋白、抗坏血酸（Vc），以及维生素类抗氧化化学基团。

优选地，本发明的多肽具有如下结构：

；

其中，n为3-39的整数，优选地，n为5-20的整数，优选地，n为5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20。

进一步地，作为示例性化合物，本发明的多肽可为如下结构：

；

。

本申请发明人令人惊讶地发现，本发明的多肽单体具有优异的亲水性，在适宜pH环境下的水溶液中能够自发结合形成超分子细丝。如果进一步遇到组织液或分泌液，在生理上盐离子条件驱动下，细丝可进一步快速物理缠结形成水凝胶，也就是喷洒在组织上即可以形成凝胶。也可以将水溶解状态下的多肽与缓冲盐溶液混合，模拟遇到组织液或分泌液的情况，从而人工制备水凝胶。设计的水凝胶由胶原结合肽序列(LRELHLNNN)组成，该序列对I型胶原具有高亲和力使得本申请的水凝胶能够有效粘附子宫内膜，起到封闭创面、避免宫腔粘连及复发，改善子宫内膜微环境，促进子宫内膜再生与修复的效果。

因此，本申请进一步提供一种水凝胶，该水凝胶包括前述的多肽以及盐溶液，所述盐溶液包括如下所述的一种或多种：生理盐水、PB缓冲液、PBS缓冲液、Tris-HCl溶液、MOPS缓冲液、HEPES缓冲液。此外，所述盐溶液还可以为包括如下任意一种或多种盐的水溶液：MX，或者，所述盐溶液为如下盐的水溶液：MX，其中M为阳离子，X为阴离子；优选地，所述M为碱金属阳离子，更优选为锂离子（Li⁺）、钠离子（Na⁺）、钾离子（K⁺）、钙离子（Ca⁺）；优选地，所述阴离子为卤素离子和酸根离子，更优选为氟离子（F^-）、氯离子（Cl^-）、溴离子（Br^-）、碘离子（I^-）、硫酸根离子（SO₄ ^2-）、磷酸根离子（PO₄ ^3-）。

所述盐溶液进一步包括如下所述的一种或多种：1×PBS缓冲液、10×PBS缓冲液。

本申请前述的水凝胶中，其中所述多肽配制为水溶液，所述水溶液的摩尔浓度为1至4 mM。按体积比，所述水凝胶中，所述多肽水溶液与所述盐溶液具有100:1-1:10的比例，更具体地，所述多肽水溶液与所述盐溶液的比例为10:1-1:10，更优选多肽水溶液与所述盐溶液的比例为9:1-1:9，更优选9:1、8:1、7:1、6:1、5:1、4:1、3:1、2:1、1:1。

经过流变学检测，发现本申请的多肽水凝胶具有较好打G’(储能模量)和G’’ (损耗模量)，且随时间变化下，能够保持G’(储能模量)>G’’ (损耗模量)，表明体为类固体稳定的凝胶态。

此外，经过活性测试，发现本清的多肽水凝胶本身具有抗氧化活性，能够有效清除超氧自由基，可单独作为局部应用的活性成分，制备用于修复子宫内膜损伤的组合物。

更进一步地，本申请的水凝胶中还可以进一步包含其他活性成分，所述活性成分包括已知能够用于如下物质的一种或多种：天然雌激素、合成雌激素、天然孕激素、合成孕激素、外泌体；优选地，所述活性成分为如下物质的一种或多种：雌二醇、雌酮、雌三醇、炔雌醇、戊酸雌二醇、苯甲酸雌二醇、炔雌甲醚、炔雌醚、妊马雌酮、戊炔雌醇、已烯雌酚、已烷雌酚、氯三芳乙烯、黄体酮、地屈孕酮、醋酸甲羟孕酮、甲地孕酮、氯地孕酮、羟孕酮已酸酯、炔孕酮、炔诺酮、双醋炔诺醇、炔诺孕酮、屈螺酮、醋酸环丙孕酮、烯丙雌醇、氧孕烯酮、间充质干细胞来源外泌体、子宫内膜来源外泌体。

按体积比与质量比，所述水凝胶与所述活性成分的比例为：

对于天然雌激素、合成雌激素、天然孕激素、合成孕激素：每1L水凝胶搭载0.01-10g天然雌激素、合成雌激素、天然孕激素、合成孕激素；

对于外泌体：每1L水凝胶搭载0.01g-10克外泌体。

本发明还提供一种水凝胶的制备方法，为如以下（一）或（二）的方法，

（一）包括如下步骤：

将本申请前述多肽溶解在溶剂中，所述溶剂为如下的一种或多种：二甲基亚砜（DMSO）、N,N-二甲基甲酰胺（DMF）、二甲基乙酰胺（DMAc）、六氟-2-丙醇(HFIP)；

蒸干溶剂，干燥；

用水溶解，获得多肽浓度为1至4 mM的水溶液；

调整溶液的pH值，使其最终pH值为7.0-8.0之间，优选7.2-7.8之间，更优选7.4-7.6之间；

取调节pH后的水溶液，与盐溶液混合，形成水凝胶。

（二）包括如下步骤：

将多肽溶解在溶剂中，所述溶剂为如下的一种或多种：二甲基亚砜（DMSO）、N,N-二甲基甲酰胺（DMF）、二甲基乙酰胺（DMAc）、六氟-2-丙醇(HFIP)；

蒸干溶剂，干燥，获得干燥；

用水溶解，获得多肽浓度为1至4 mM的水溶液；

取调节pH后的水溶液，加入盐溶液溶解的前述活性成分，混匀，形成搭载活性成分的水凝胶。

本发明还提供前述的多肽或前述水凝胶、搭载活性成分的水凝胶的应用，所述应用为制备治疗子宫内膜损伤或子宫内膜衰老的药物。

本发明的有益效果在于：

1.本发明首次披露一种全新结构的多肽，任何现有技术均未披露具有相同结构的多肽，也没有披露类似结构、具有类似活性的多肽。

2.本发明中的多肽能够在适宜的环境下、通过极为简单的步骤形成稳定的水凝胶，且水凝胶亲水性优异。除了与生理盐水、PBS等盐溶液可形成凝胶外，本发明的发明人令人惊异地发现，所述多肽的溶液喷洒至器官组织表面，即能够在器官组织表面盐离子相互作用触发凝胶形成，且设计多肽结构时考虑了胶原蛋白结合肽链，能够进一步提高多肽及其形成的水凝胶在不同器官湿表面的黏附效果，可以实现多组织器官的喷洒凝胶。经过试验验证，本申请中的多肽形成凝胶后能够有效粘附子宫内膜，起到封闭创面、避免宫腔粘连及复发、维持局部湿度、改善子宫内膜微环境，促进恢复的效果、提高子宫内膜容受性。

3.本发明的多肽本身还具有清除超氧自由基的作用，能够进行组织氧化损伤修复，进一步强化对子宫内膜等器官表面的修复作用。

4.本发明中的人子宫内膜类器官来源外泌体，具有低免疫原性、高耐受性、高通透性、可靶向改造等特性，并且携带亲本细胞的内容物包括核酸、蛋白质和脂质在内的多种生物活性分子，能够靶向细胞，更好的促进子宫内膜再生修复，提供子宫内膜容受性。

5.本发明的多肽制备的水凝胶能够有效搭载雌激素类药物以及外泌体，并且具有良好、稳定的释放效果，也适合作为药物载体使用，适合向不同组织器官病灶处直接递送活性成分尤其针对子宫内膜则可以进行递送活性成分等有效促进子宫腔的再生修复，进而改善临床妊娠结局、修复子宫内膜损伤、改善子宫内膜纤维化、延缓子宫内膜衰老的效果。

附图说明

图1为本发明的多肽DT-1的质谱图；

图2为本发明的多肽DT-1在水溶液中自发形成的超分子细丝在透射电镜下的观察到的形态，其中a为多肽水溶液超分子细丝状态，b为经过雾化喷洒的多肽水溶液超分子细丝状态；

图3为本发明的多肽DT-1不同状态下的宏观形态，其中a为多肽水溶液，具有可自由流动性，b为在多肽水溶液中添加10xPBS后形成的不再流动的水凝胶；

图4为实施例1制备的水凝胶随时间变化的流变学曲线；

图5为实施例1制备的水凝胶清除超氧自由基的效果检测；

图6为实施例5培养的人子宫内膜类器官的显微镜下形态；

图7为实施例5获得的人子宫内膜类器官来源外泌体的透射电镜下的形态，图中比例尺为200nm；

图8为对实施例5获得的外泌体采用蛋白免疫印迹鉴定标记蛋白表达Alix、CD63和CD9的结果；

图9为实施例6制备的加载子宫内膜类器官来源外泌体的水凝胶释放外泌体效率检测；

图10为实施例7子宫胚胎着床试验结果，其中左图是各组损伤子宫胚胎着床数量统计分析，右图为各组小鼠新生情况；

图11为对不同组别子宫损伤小鼠子宫内膜CD31免疫荧光染色、Masson染色结果，其中上面一排是CD31免疫荧光染色，下面一排为Masson染色结果；

图12为对不同组别子宫损伤小鼠子宫内膜CD31蛋白表达、Masson染色结果的统计分析，其中左图是CD31蛋白表达情况统计分析，右图为Masson染色程度统计分析。

具体实施方式

下面将结合本发明的实施例，对本发明进行清楚、完整地描述，在本发明的描述中，需要说明的是，实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。

实施例1多肽及多肽水凝胶的制备

（1）多肽合成

采用标准的9-氟酰甲氧羰基固相肽合成技术合成如下结构的多肽DT-1，具体由合成服务供应商按照提供的结构完成，交付时为冻干粉末状态。

经第三方结构测试，确认多肽结构为Dec-Glu-ome-Cys-Gly-Leu-Arg-Glu-Leu-His-Leu-Asn-Asn-Asn-CONH₂，也即如下结构，与目标结构相符。

DT-1

产物质谱图如图1所示，可进一步验证化合物结构。

（2）凝胶组装

将冻干的多肽粉末溶解在六氟-2-丙醇(HFIP)中，以破坏纯化或冻干过程中可能形成的任何预组装结构。

随后进行涡旋和超声处理5分钟，以促进溶解和均质。

将HFIP蒸发，并在真空下干燥样品过夜，以确保完全去除残留的HFIP。

干燥后，用超纯水对样品进行溶解，可通过涡流以辅助溶解，最终配置多肽浓度约1至4 mM之间。

添加盐酸（0.1 M HCl）和氢氧化钠（0.1 M NaOH）调整溶液的pH值，使其最终pH值为7.4。

在80°C水浴中加热1小时，以促进溶解，然后在室温下冷却过夜。

如图2中的a所示，本申请中的多肽在水溶液中自发形成的超分子细丝，在透射电镜下可观察到细丝形态。如图2中的b所示，经过雾化喷洒的多肽水溶液同样自发形成超分子细丝，投射电镜下可观察到细丝形态。

取900μL多肽溶液，与100μL的10xPBS溶液（按照本领域已知的10xPBS配方配置）混合，形成水凝胶。

如图3中的a所示，加入10xPBS溶液之前，多肽水溶液为溶液状，具有可自由流动性，而加入10xPBS溶液后，如图3中的b所示，产物为不再流动的水凝胶形态。

实施例2多种结构多肽及水凝胶的制备

继续采用标准的9-氟酰甲氧羰基固相肽合成技术合成如下结构的多肽合成如下结构的多肽DT-2~DT-21，由合成服务供应商按照提供的结构完成。

DT-2

DT-3

DT-4

DT-5

DT-6

DT-7

DT-8

DT-9

DT-10

DT-11

DT-12

DT-13

DT-14

DT-15

DT-16

/>

DT-17

DT-18

DT-19

DT-20

DT-21

采用实施例1或2中制备的多肽，按照表1所示成分配比，分别制备不同配比的水凝胶，表明本发明中具有不同具体结构的多肽普遍能够由体液/组织液-盐离子驱动形成凝胶，尤其是在组织液和体液存在下就可以自发形成凝胶，适合体内、体外不同方式应用：

表1 不同组成的凝胶配方

实施例3水凝胶性能测试

取实施例1制备的水凝胶，验证获得的多态水凝胶的状态、性质。

方法：利用奥地利Anton Paar公司的旋转流变仪（型号：MCR92）测试样品的流变特性。取适量样品置于样品台上，测试转子的型号为平行板50mm，间隙设置1mm，测试温度25℃，应变1%，频率1Hz。

结果：如图4所示，水凝胶随时间变化的流变学数据，G’(储能模量)>G’’ (损耗模量)，证明受试样品为凝胶态。

实施例4水凝胶抗氧化活性测试

取实施例1制备的水凝胶，以清除自由基效率为考察指标，测试水凝胶的抗氧化活性。

方法：利用电子顺磁共振技术（德国Bruker公司，型号：A300-10/12），选取二甲基吡啶N-氧化物（DMPO）作为超氧化物检测的诱捕剂，进行分析清除超氧自由基。配置浓度为10mM的黄嘌呤溶液和浓度为1U/ml的黄嘌呤氧化酶溶液，取100微升黄嘌呤溶液和100微升黄嘌呤氧化酶溶液，再加入20微升DMPO和180多肽水凝胶溶液，反应孵育10min后取样测试，另一组则为自由基生成对照组。

结果：如图5所示，本申请水凝胶具有清除超氧自由基的效果。

实施例5外泌体的制备

利用类器官旋转生物反应器、Matrigel基质胶，对人子宫内膜类器官进行培养和传代分化，获得稳定生长的子宫内膜类器官如图6所示，收集并纯化培养基中的外泌体。

将收集到的外泌体培养基4摄氏度下2000rpm离心15分钟，收集上清液，去除离心管底部有死亡的细胞或细胞碎片。用滤器（0.22μm）过滤上步骤中初步分离的上清。提前打开超速离心机预冷到４摄氏度，将配重好的超离管放入离心机，两次110000ｘg离心90分钟，去除上清液，加入50μl无菌的预冷的PBS，并用加样枪轻轻吹打使沉淀重悬溶解后加入一新的无菌EP管中，并做好标记。进行下一步实验或-80摄氏度保存。

如图7所示，获得的人子宫内膜类器官来源外泌体在透射电镜下形态正常，图中比例尺为200nm。

如图8所示，采用蛋白免疫印迹鉴定外泌体标记蛋白，可见该人子宫内膜来源的外泌体高表达Alix、CD63和CD9。上述表达结果验证了所述外泌体为子宫来源，以同源外泌体用于修复子宫内膜，相较于其他来源外泌体，能够执行更高安全性和生物相容性的再生能力，低免疫原性，尽可能降低排异风险，更好地促进内膜修复和再生。

实施例6水凝胶对外泌体的承载和释放效果

将加载外泌体的水凝胶浸泡至1ml PBS中，以2天作时间间隔，收集500µL上清液并补充等体积的PBS。用BCA试剂盒(Thermo Scientific)测定收集的上清液中游离中外泌体蛋白的含量，最绘制随时间变化的曲线。

如图9所示，本申请水凝胶具有承载和释放外泌体的良好效果。

实施例7搭载的外泌体水凝胶治疗子宫内膜损伤活性验证

（1）造模

采用单侧子宫损伤模型进行造模。选取8周龄的 C57BL/6 品系成年母鼠30只，随机分为五组，每组6只。其中四组小鼠在无菌环境下进行子宫手术：切开右侧子宫角下缘，用直径1.5 cm的金属刷刮拭子宫，形成子宫粘连损伤模型。同一动物的左侧子宫角不处理作为对照。一组小鼠不造模，作为正常对照组。

（2）给药

造模的四组小鼠分别给予单次子宫内注射如下物质：

模型组：200µL生理盐水；

多肽凝胶组（CPA）：200µL实施例1制备的多肽水凝胶，浓度为4mM；

外泌体组（HEO-exos）：200µL实施例5制备的经稀释的HEO-exos液，浓度为100µg/ml HEO-exos；

外泌体-水凝胶组（CPA@HEO-exos）：200µL 实施例6制备的搭载外泌体的水凝胶，其中每200µL水凝胶中含有20µg HEO-exos。

注射后连续三个发情周期后，小鼠与雄鼠合笼。经过小鼠见栓检查后，在怀孕10天左右对小鼠安乐死后进行解剖，分析子宫胚胎着床数量。

（3）结果

以下结果中，Sham代表正常组对照；Model代表单侧子宫损伤的小鼠，CPA-代表多肽水凝胶给药组； HEO-exos代表外泌体给药组；CPA@HEO-exos代表加载外泌体的水凝胶组。

如图10所示，其中左图是各组损伤子宫胚胎着床数量统计分析，右图为各组小鼠新生情况。从图10可见（图10中表示P<0.05，/>表示P<0.0001），与对照组相比，本申请制备的水凝胶、子宫内膜类器官来源的外泌体具有一定的恢复子宫内膜损伤作用，提高模型小鼠子宫胚胎着床率、新生小鼠数量，而搭载的子宫内膜类器官来源外泌体的水凝胶的效果更强。

CD31免疫荧光染色主要用于证明血管内皮细胞组织的存在，表明新血管生成，Masson染色是结缔组织染色中最经典的一种方法显示组织中纤维的主要方法之一，是评估子宫内膜纤维化的经典方法。如图11所示，经CD31免疫荧光染色验证，给予水凝胶、子宫内膜类器官来源的外泌体能够显著促进血管生成， Masson染色法则验证，给予本申请制备的水凝胶、子宫内膜类器官来源的外泌体能够显著减轻子宫内膜纤维化，具有有效缓解子宫内膜损伤以及衰老子宫内膜纤维化的功效。

对CD31荧光强度和Masson染色程度分别进行统计分析，结果如图12所示（图12中表示P<0.05，/>表示P<0.001）。

从CD31荧光强度差异来看，与模型组相比：本申请制备的水凝胶、子宫内膜类器官来源的外泌体以及搭载外泌体的水凝胶组CD31的表达均有升高，从统计角度再次表明上述组别处理后促进血管生成的作用，其中搭载外泌体的水凝胶组效果显著高于其他处理组，差异具有统计学意义。

从Masson染色差异来看，Masson染色则模型组色显著，表明模型组子宫纤维化，而本申请制备的水凝胶、子宫内膜类器官来源的外泌体以及搭载外泌体的水凝胶组Masson染色均有降低，表明子宫纤维化程度减轻，内膜损伤有所缓解，其中搭载外泌体的水凝胶组降低最为明显，差异具有统计学意义。

尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，但本领域的普通技术人员理解：可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。

Claims

1.一种多肽，其特征在于，所述多肽结构如下所示：

；其中，R为抗氧化基团，X为C₄-C₄₂饱和或不饱和碳链。

2.如权利要求1所述的多肽，其特征在于，所述多肽具有如下结构中的一种：

；

其中，n为3-39的整数。

3.一种水凝胶，其特征在于，所述水凝胶包括如下组分：

权利要求1或2任一项所述的多肽；

盐溶液。

4.如权利要求3所述的水凝胶，其特征在于，所述盐溶液包括如下所述的一种或多种：生理盐水、PB缓冲液、PBS缓冲液、Tris-HCl溶液、MOPS缓冲液、HEPES缓冲液；

或者，所述盐溶液为如下任意一种或多种盐的水溶液：MX，其中M为阳离子，X为阴离子。

5.如权利要求3所述的水凝胶，其特征在于，所述多肽配制为水溶液，所述水溶液中所述多肽的摩尔浓度为1至4 mM。

6.如权利要求5所述的水凝胶，其特征在于，按体积比，所述多肽水溶液与所述盐溶液的比例为100:1-1:10。

7.如权利要求3-6任一项所述的水凝胶，其特征在于，所述水凝胶中进一步包含活性成分，所述活性成分包括如下物质的一种或多种：天然雌激素、合成雌激素、天然孕激素、合成孕激素、外泌体。

8.如权利要求7所述的水凝胶，其特征在于，按体积比与质量比，所述水凝胶与所述活性成分的比例为：

天然雌激素、合成雌激素、天然孕激素、合成孕激素：每1L水凝胶搭载0.01-10g天然雌激素、合成雌激素、天然孕激素、合成孕激素；

外泌体：每1L水凝胶搭载0.01g-10克外泌体。

9.如权利要求3-8任一项所述的水凝胶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）将权利要求1或2任一项所述的多肽溶解在溶剂中，所述溶剂为如下的一种或多种：二甲基亚砜（DMSO）、N,N-二甲基甲酰胺（DMF）、二甲基乙酰胺（DMAc）、六氟-2-丙醇(HFIP)；

（2）蒸干溶剂，干燥；

（3）用水溶解，获得浓度为1至4 mM的多肽水溶液；

（4）调整溶液的pH值，使其最终pH值为7.0-8.0；

（5）取调节pH后的水溶液，与盐溶液混合形成水凝胶；或者，加入盐溶液溶解的活性成分混匀，形成搭载活性成分的水凝胶。

10.如权利要求1或2任一项所述的多肽或如权利要求3-8任一项所述的水凝胶的应用，其特征在于，所述应用为制备治疗子宫内膜损伤或子宫内膜衰老的药物。