CN117322329B - 一种珠芽魔芋的培养方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及珠芽魔芋培养技术领域。本发明提供了一种珠芽魔芋的培养方法，包括如下步骤：(1)将珠芽魔芋叶面球茎接种到丛生芽诱导培养基中培养，得到不定芽；(2)将不定芽转接到继代增殖培养基中培养，得到继代苗；(3)将继代苗转接至生根培养基中培养，得到珠芽魔芋幼苗。本发明的培养方法能够显著提高珠芽魔芋的丛生芽数量，提高繁殖系数。能够在短时间内获取大量珠芽魔芋幼苗，幼苗的成活率达90％以上。
Description
技术领域
本发明涉及珠芽魔芋培养技术领域，尤其涉及一种珠芽魔芋的培养方法。
背景技术
珠芽魔芋是天南星科魔芋属多年生宿根草本植物，种植时主要采用林下套种。一般选择交通方便、土层深厚、荫蔽度在40～75％橡胶林地上种植。这既充分利用了林下土地资源，提高复种指数及土地产出率，又省去了魔芋种植的土地租金及以往橡胶林的除草、施肥等林间管理环节，大大降低了生产成本。同时套种魔芋起到保水、增肥作用，增加了生物多样性，改善橡胶林物种单一的现状，有利于橡胶生长。特别是当前橡胶价格低迷的情况下，通过示范带动种植，可实现农民增产增收，有利于保障天然橡胶保护区建设的落实。
胶园林下套种魔芋产业飞速发展对优质珠芽魔芋种源需求旺盛，然而目前芋种匮乏、供应不足，优良芋种难求，难以满足市场的需求。因此，提供大量优质的种苗成为目前的瓶颈。
发明内容
本发明的目的在于提供种珠芽魔芋的培养方法，提供大量优质的种苗。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种珠芽魔芋的培养方法，包括如下步骤：
(1)将珠芽魔芋叶面球茎接种到丛生芽诱导培养基中培养，得到不定芽；
(2)将不定芽转接到继代增殖培养基中培养，得到继代苗；
(3)将继代苗转接至生根培养基中培养，得到珠芽魔芋幼苗。
作为优选，所述珠芽魔芋叶面球茎使用前消毒并切块。
作为优选，所述消毒的方法为0.1～0.3％的次氯酸钠消毒8～12min或0.08～0.12％的氧化汞消毒7～10min，所述珠芽魔芋叶面球茎切块后的大小为0.8～1.2cm×0.8～1.2cm×0.8～1.2cm。
作为优选，所述丛生芽诱导培养基的配方为：MS培养基+28～32g/L蔗糖+5～9g/L琼脂+0.4～0.6mg/LNAA+0.5～0.7mg/LZT。
作为优选，所述继代增殖培养基的配方为：MS培养基+28～32g/L蔗糖+5～9g/L琼脂+0.4～0.6mg/LTDZ+0.08～0.12mg/LNAA+0.8～1.2mg/L6-BA或MS培养基+28～32g/L蔗糖+5～9g/L琼脂+0.5～0.8mg/LKT+0.08～0.12mg/L NAA+0.8～1.2mg/L6-BA。
作为优选，所述生根培养基的配方为：1/2MS培养基+28～32g/L蔗糖+5～9g/L琼脂+0.08～0.12mg/LIBA+0.15～0.25mg/LKT+0.08～0.12mg/L NAA+0.5～1mg/LPVP。
作为优选，步骤(1)～(3)中所述培养的条件独立的为：温度24～28℃，光照时间8～12h/d，光照强度1800～2200Lx，光源种类为红光60～75％+蓝光25～40％。
作为优选，所述珠芽魔芋幼苗在根长为4～6cm时可以进行炼苗和移栽。
本发明提供了一种珠芽魔芋的培养方法，包括如下步骤：(1)将珠芽魔芋叶面球茎接种到丛生芽诱导培养基中培养，得到不定芽；(2)将不定芽转接到继代增殖培养基中培养，得到继代苗；(3)将继代苗转接至生根培养基中培养，得到珠芽魔芋幼苗。本发明的培养方法能够显著提高珠芽魔芋的丛生芽数量，提高繁殖系数。能够在短时间内获取大量珠芽魔芋幼苗，幼苗的成活率达90％以上。
具体实施方式
本发明提供了一种珠芽魔芋的培养方法，包括如下步骤：
(1)将珠芽魔芋叶面球茎接种到丛生芽诱导培养基中培养，得到不定芽；
(2)将不定芽转接到继代增殖培养基中培养，得到继代苗；
(3)将继代苗转接至生根培养基中培养，得到珠芽魔芋幼苗。
在本发明中，所述珠芽魔芋叶面球茎使用前优选消毒并切块。
在本发明中，所述消毒的方法优选为0.1～0.3％的次氯酸钠消毒8～12min或0.08～0.12％的氧化汞消毒3～7min，进一步优选为0.2％的次氯酸钠消毒10min或0.1％的氧化汞消毒5min。
在本发明中，所述珠芽魔芋叶面球茎切块后的大小优选为0.8～1.2cm×0.8～1.2cm×0.8～1.2cm，进一步优选为1cm×1cm×1cm。
在本发明中，所述丛生芽诱导培养基的配方优选为：MS培养基+28～32g/L蔗糖+5～9g/L琼脂+0.4～0.6mg/LNAA+0.5～0.7mg/LZT，进一步优选为MS培养基+30g/L蔗糖+4g/L琼脂+0.5mg/LNAA+0.6mg/LZT。
在本发明中，所述继代增殖培养基的配方优选为：MS培养基+28～32g/L蔗糖+5～9g/L琼脂+0.4～0.6mg/LKT+0.08～0.12mg/LNAA+0.8～1.2mg/L6-BA或MS培养基+28～32g/L蔗糖+5～9g/L琼脂+0.5～0.8mg/LKT+0.08～0.12mg/L NAA+0.8～1.2mg/L6-BA，进一步优选为MS培养基+30g/L蔗糖+7g/L琼脂+0.5mg/LKT+0.1mg/LNAA+1.0mg/L6-BA或MS培养基+30g/L蔗糖+7g/L琼脂+0.6～0.7mg/LKT+0.1mg/LNAA+1.0mg/L6-BA。
在本发明中，两个继代增殖培养基交替使用。
在本发明中，所述生根培养基的配方优选为：1/2MS培养基+28～32g/L蔗糖+5～9g/L琼脂+0.08～0.12mg/LIBA+0.15～0.25mg/LKT+0.08～0.12mg/L NAA+0.5～1mg/LPVP，进一步优选为1/2MS培养基+30g/L蔗糖+7g/L琼脂+0.1mg/LIBA+0.2mg/LKT+0.1mg/LNAA+0.7～0.8mg/LPVP。
在本发明中，步骤(1)～(3)中所述培养的条件独立的优选为：温度24～28℃，光照时间8～12h/d，光照强度1800～2200Lx，光源种类为红光60～75％+蓝光25～40％，进一步优选为温度26℃，光照时间20h/d，光照强度2000Lx，光源种类为红光70％+蓝光30％。
在本发明中，所述珠芽魔芋幼苗在根长优选为4～6cm时可以进行炼苗和移栽，进一步优选为5cm。
下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
一种珠芽魔芋的培养方法：
(1)将珠芽魔芋叶面球茎用自来水冲洗30min，在70％酒精中浸泡15s后用无菌水浸洗5min，用0.1％的次氯酸钠消毒8min后再用0.08％的氧化汞消毒7min，将消毒后的珠芽魔芋叶面球茎切成0.8cm×1.2cm×0.8cm的小块，备用；
(2)将珠芽魔芋叶面球茎小块接种到丛生芽诱导培养基(MS培养基+28g/L蔗糖+5g/L琼脂+0.6mg/LNAA+0.7mg/LZT)中，在温度24℃，光照时间12h/d，光照强度2200Lx，光源种类为红光60％+蓝光40％条件下培养，得到不定芽；
(3)将不定芽转接到继代增殖培养基(MS培养基+28g/L蔗糖+9g/L琼脂+0.6mg/LKT+0.08mg/LNAA+1.2mg/L6-BA)中，在温度28℃，光照时间12h/d，光照强度2200Lx，光源种类为红光60％+蓝光40％条件下培养，得到继代苗；
(4)将继代苗转接至生根培养基(1/2MS培养基+28g/L蔗糖+5g/L琼脂+0.12mg/LIBA+0.25mg/LKT+0.12mg/LNAA+0.5mg/LPVP)中，在温度24℃，光照时间8h/d，光照强度1800Lx，光源种类为红光75％+蓝光25％条件下培养，得到珠芽魔芋幼苗；
(5)在珠芽魔芋幼苗根长达到4cm时，进行炼苗和移栽。
实施例2
一种珠芽魔芋的培养方法：
(1)将珠芽魔芋叶面球茎用自来水冲洗30min，在70％酒精中浸泡15s后用无菌水浸洗5min，用0.3％的次氯酸钠消毒12min后再用0.12％的氧化汞消毒3min，将消毒后的珠芽魔芋叶面球茎切成1.2cm×0.8cm×1.2cm的小块，备用；
(2)将珠芽魔芋叶面球茎小块接种到丛生芽诱导培养基(MS培养基+32g/L蔗糖+9g/L琼脂+0.4mg/LNAA+0.5mg/LZT)中，在温度28℃，光照时间8h/d，光照强度1800Lx，光源种类为红光75％+蓝光25％条件下培养，得到不定芽；
(3)将不定芽转接到继代增殖培养基(MS培养基+32g/L蔗糖+5g/L琼脂+0.4mg/LKT+0.12mg/LNAA+0.8mg/L6-BA)中，在温度24℃，光照时间8h/d，光照强度1800Lx，光源种类为红光75％+蓝光25％条件下培养，得到继代苗；
(4)将继代苗转接至生根培养基(1/2MS培养基+32g/L蔗糖+9g/L琼脂+0.08mg/LIBA+0.15mg/LKT+0.08mg/LNAA+1mg/LPVP)中，在温度28℃，光照时间12h/d，光照强度2200Lx，光源种类为红光60％+蓝光40％条件下培养，得到珠芽魔芋幼苗；
(5)在珠芽魔芋幼苗根长达到6cm时，进行炼苗和移栽。
实施例3
一种珠芽魔芋的培养方法：
(1)将珠芽魔芋叶面球茎用自来水冲洗30min，在70％酒精中浸泡15s后用无菌水浸洗5min，用0.2％的次氯酸钠消毒10min后再用0.10％的氧化汞消毒5min，将消毒后的珠芽魔芋叶面球茎切成1.0cm×1.0cm×1.0cm的小块，备用；
(2)将珠芽魔芋叶面球茎小块接种到丛生芽诱导培养基(MS培养基+30g/L蔗糖+7g/L琼脂+0.5mg/LNAA+0.6mg/LZT)中，在温度26℃，光照时间10h/d，光照强度2000Lx，光源种类为红光70％+蓝光30％条件下培养，得到不定芽；
(3)将不定芽转接到继代增殖培养基(MS培养基+30g/L蔗糖+7g/L琼脂+0.5mg/LKT+0.10mg/LNAA+1.0mg/L6-BA)中，在温度26℃，光照时间10h/d，光照强度2000Lx，光源种类为红光65％+蓝光35％条件下培养，得到继代苗；
(4)将继代苗转接至生根培养基(1/2MS培养基+30g/L蔗糖+7g/L琼脂+0.1mg/LIBA+0.2mg/LKT+0.1mg/LNAA+0.7mg/LPVP)中，在温度26℃，光照时间10h/d，光照强度2000Lx，光源种类为红光65％+蓝光35％条件下培养，得到珠芽魔芋幼苗；
(5)在珠芽魔芋幼苗根长达到5cm时，进行炼苗和移栽。
对比例1
一种珠芽魔芋的培养方法：
(1)将珠芽魔芋叶面球茎用自来水冲洗30min，在70％酒精中浸泡15s后用无菌水浸洗5min，用0.2％的次氯酸钠消毒10min后再用0.10％的氧化汞消毒5min，将消毒后的珠芽魔芋叶面球茎切成1.0cm×1.0cm×1.0cm的小块，备用；
(2)将珠芽魔芋叶面球茎小块接种到丛生芽诱导培养基(MS培养基+30g/L蔗糖+7g/L琼脂+0.5mg/LNAA)中，在温度26℃，光照时间10h/d，光照强度2000Lx，光源种类为红光70％+蓝光30％条件下培养，得到不定芽；
(3)将不定芽转接到继代增殖培养基(MS培养基+30g/L蔗糖+7g/L琼脂+0.10mg/LNAA)中，在温度26℃，光照时间10h/d，光照强度2000Lx，光源种类为红光65％+蓝光35％条件下培养，得到继代苗；
(4)将继代苗转接至生根培养基(1/2MS培养基+30g/L蔗糖+7g/L琼脂+0.1mg/LNAA+0.7mg/LPVP)中，在温度26℃，光照时间10h/d，光照强度2000Lx，光源种类为红光65％+蓝光35％条件下培养，得到珠芽魔芋幼苗；
(5)在珠芽魔芋幼苗根长达到5cm时，进行炼苗和移栽。
对比例2
一种珠芽魔芋的培养方法：
(1)将珠芽魔芋叶面球茎用自来水冲洗30min，在70％酒精中浸泡15s后用无菌水浸洗5min，用0.2％的次氯酸钠消毒10min后再用0.10％的氧化汞消毒5min，将消毒后的珠芽魔芋叶面球茎切成1.0cm×1.0cm×1.0cm的小块，备用；
(2)将珠芽魔芋叶面球茎小块接种到丛生芽诱导培养基(MS培养基+30g/L蔗糖+7g/L琼脂+0.5mg/LNAA+0.6mg/LZT)中，在温度26℃，光照时间10h/d，光照强度2000Lx，光源种类为白光的条件下培养，得到不定芽；
(3)将不定芽转接到继代增殖培养基(MS培养基+30g/L蔗糖+7g/L琼脂+0.5mg/LKT+0.10mg/LNAA+1.0mg/L6-BA)中，在温度26℃，光照时间10h/d，光照强度2000Lx，光源种类为白光的条件下培养，得到继代苗；
(4)将继代苗转接至生根培养基(1/2MS培养基+30g/L蔗糖+7g/L琼脂+0.1mg/LIBA+0.2mg/LKT+0.1mg/LNAA+0.7mg/LPVP)中，在温度26℃，光照时间10h/d，光照强度2000Lx，光源种类为白光的条件下培养，得到珠芽魔芋幼苗；
(5)在珠芽魔芋幼苗根长达到5cm时，进行炼苗和移栽。
试验例
按照实施例1～3和对比例1～2的方法分别进行珠芽魔芋培育，每组接种30个锥形瓶，每瓶5个珠芽魔芋叶面球茎小块，统计各组的丛生芽诱导率、丛生芽增殖系数、生根率和幼苗成活率，结果如表1所示。
表1
结论：对比例1～3的方法能够获得较好的培养效果，每个愈伤组织能够生长出5个左右的丛生芽，生根率高，幼苗的成活率达90％以上，对比例1的培养基经过调整后导致丛生芽诱导率、丛生芽增殖系数、生根率和幼苗成活率，对比例2的光照条件不同，导致生根率和幼苗成活率降低。
由以上实施例可知，本发明提供了一种珠芽魔芋的培养方法，包括如下步骤：(1)将珠芽魔芋叶面球茎接种到丛生芽诱导培养基中培养，得到不定芽；(2)将不定芽转接到继代增殖培养基中培养，得到继代苗；(3)将继代苗转接至生根培养基中培养，得到珠芽魔芋幼苗。本发明的培养方法能够显著提高珠芽魔芋的丛生芽数量，提高繁殖系数。能够在短时间内获取大量珠芽魔芋幼苗，幼苗的成活率达90％以上。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (4)
1.一种珠芽魔芋的培养方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)将珠芽魔芋叶面球茎接种到丛生芽诱导培养基中培养，得到不定芽；
(2)将不定芽转接到继代增殖培养基中培养，得到继代苗；
(3)将继代苗转接至生根培养基中培养，得到珠芽魔芋幼苗；
所述丛生芽诱导培养基的配方为：MS培养基+28～32g/L蔗糖+5～9g/L琼脂+0.4～0.6mg/LNAA+0.5～0.7mg/L ZT；
所述继代增殖培养基的配方为：
MS培养基+28～32g/L蔗糖+5～9g/L琼脂+0.4～0.6mg/L KT+0.08～0.12mg/LNAA+0.8～1.2mg/L 6-BA或MS培养基+28～32g/L蔗糖+5～9g/L琼脂+0.5～0.8mg/LKT+0.08～0.12mg/LNAA+0.8～1.2mg/L 6-BA；
所述生根培养基的配方为：1/2MS培养基+28～32g/L蔗糖+5～9g/L琼脂+0.08～0.12mg/LIBA+0.15～0.25mg/LKT+0.08～0.12mg/LNAA+0.5～1mg/LPVP；
步骤(1)～(3)中所述培养的条件独立的为：温度24～28℃，光照时间8～12h/d，光照强度1800～2200Lx，光源种类为红光60～75％+蓝光25～40％。
2.根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于，所述珠芽魔芋叶面球茎使用前消毒并切块。
3.根据权利要求2所述的培养方法，其特征在于，所述消毒的方法为0.1～0.3％的次氯酸钠消毒8～12min或0.08～0.12％的氧化汞消毒3～7min，所述珠芽魔芋叶面球茎切块后的大小为0.8～1.2cm×0.8～1.2cm×0.8～1.2cm。
4.根据权利要求1～3任意一项所述的培养方法，其特征在于，所述珠芽魔芋幼苗在根长为4～6cm时可以进行炼苗和移栽。
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Patent Citations (4)
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|---|---|---|---|---|
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