CN117285438A - 含氮链状化合物、其制备方法、包含其的组合物和应用 - Google Patents
含氮链状化合物、其制备方法、包含其的组合物和应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN117285438A CN117285438A CN202311016482.5A CN202311016482A CN117285438A CN 117285438 A CN117285438 A CN 117285438A CN 202311016482 A CN202311016482 A CN 202311016482A CN 117285438 A CN117285438 A CN 117285438A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- butyl
- alkyl
- sec
- isobutyl
- propyl
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 77
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 37
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 28
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 27
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims abstract description 86
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 20
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims abstract description 19
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims abstract description 19
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims abstract description 19
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 17
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 claims abstract description 7
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 90
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 82
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 67
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 57
- 125000000959 isobutyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 claims description 57
- 125000004108 n-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 57
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 57
- 125000004123 n-propyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 56
- 125000002914 sec-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 claims description 56
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 claims description 55
- -1 amino, hydroxy Chemical group 0.000 claims description 52
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 claims description 46
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 39
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 36
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 34
- 238000006482 condensation reaction Methods 0.000 claims description 26
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 25
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 claims description 22
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 claims description 21
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims description 21
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 claims description 21
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 claims description 21
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 claims description 21
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 claims description 20
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 claims description 20
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 20
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 claims description 17
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 17
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 17
- 125000006374 C2-C10 alkenyl group Chemical group 0.000 claims description 16
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 claims description 14
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 claims description 14
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 14
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 claims description 13
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 claims description 13
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 claims description 13
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 claims description 13
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 claims description 13
- 239000011630 iodine Substances 0.000 claims description 13
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 claims description 13
- 229950004354 phosphorylcholine Drugs 0.000 claims description 13
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 12
- 125000004213 tert-butoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C(O*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 12
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 9
- NRJAVPSFFCBXDT-HUESYALOSA-N 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCC NRJAVPSFFCBXDT-HUESYALOSA-N 0.000 claims description 8
- 125000000882 C2-C6 alkenyl group Chemical group 0.000 claims description 8
- 239000002585 base Substances 0.000 claims description 8
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 claims description 8
- 239000004055 small Interfering RNA Substances 0.000 claims description 8
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 claims description 7
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 7
- PYJNAPOPMIJKJZ-UHFFFAOYSA-N phosphorylcholine chloride Chemical compound [Cl-].C[N+](C)(C)CCOP(O)(O)=O PYJNAPOPMIJKJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N (22E)-(24xi)-24-methylcholesta-5,22-dien-3beta-ol Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)C=CC(C)C(C)C)C1(C)CC2 OILXMJHPFNGGTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims description 5
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 claims description 5
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 claims description 5
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 claims description 5
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 7-Dehydrostigmasterol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)C=CC(CC)C(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 OQMZNAMGEHIHNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims description 4
- LGJMUZUPVCAVPU-UHFFFAOYSA-N beta-Sitostanol Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 LGJMUZUPVCAVPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- NLQLSVXGSXCXFE-UHFFFAOYSA-N sitosterol Natural products CC=C(/CCC(C)C1CC2C3=CCC4C(C)C(O)CCC4(C)C3CCC2(C)C1)C(C)C NLQLSVXGSXCXFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 4
- GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N α-tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2O[C@@](CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-IEOSBIPESA-N 0.000 claims description 4
- 125000004178 (C1-C4) alkyl group Chemical group 0.000 claims description 3
- 108091028075 Circular RNA Proteins 0.000 claims description 3
- 108090000331 Firefly luciferases Proteins 0.000 claims description 3
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 108091027967 Small hairpin RNA Proteins 0.000 claims description 3
- 108020004566 Transfer RNA Proteins 0.000 claims description 3
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims description 3
- 108091070501 miRNA Proteins 0.000 claims description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims description 3
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 claims description 3
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 claims description 3
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 3
- KZJWDPNRJALLNS-VPUBHVLGSA-N (-)-beta-Sitosterol Natural products O[C@@H]1CC=2[C@@](C)([C@@H]3[C@H]([C@H]4[C@@](C)([C@H]([C@H](CC[C@@H](C(C)C)CC)C)CC4)CC3)CC=2)CC1 KZJWDPNRJALLNS-VPUBHVLGSA-N 0.000 claims description 2
- CSVWWLUMXNHWSU-UHFFFAOYSA-N (22E)-(24xi)-24-ethyl-5alpha-cholest-22-en-3beta-ol Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)C=CC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 CSVWWLUMXNHWSU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- RQOCXCFLRBRBCS-UHFFFAOYSA-N (22E)-cholesta-5,7,22-trien-3beta-ol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)C=CCC(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 RQOCXCFLRBRBCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- WCGUUGGRBIKTOS-GPOJBZKASA-N (3beta)-3-hydroxyurs-12-en-28-oic acid Chemical compound C1C[C@H](O)C(C)(C)[C@@H]2CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@@]5(C(O)=O)CC[C@@H](C)[C@H](C)[C@H]5C4=CC[C@@H]3[C@]21C WCGUUGGRBIKTOS-GPOJBZKASA-N 0.000 claims description 2
- HKJAWHYHRVVDHK-UHFFFAOYSA-N 15,16,17-trihydroxyhentriacontane-14,18-dione Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC(=O)C(O)C(O)C(O)C(=O)CCCCCCCCCCCCC HKJAWHYHRVVDHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- KLEXDBGYSOIREE-UHFFFAOYSA-N 24xi-n-propylcholesterol Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCC(CCC)C(C)C)C1(C)CC2 KLEXDBGYSOIREE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- OILXMJHPFNGGTO-NRHJOKMGSA-N Brassicasterol Natural products O[C@@H]1CC=2[C@@](C)([C@@H]3[C@H]([C@H]4[C@](C)([C@H]([C@@H](/C=C/[C@H](C(C)C)C)C)CC4)CC3)CC=2)CC1 OILXMJHPFNGGTO-NRHJOKMGSA-N 0.000 claims description 2
- SGNBVLSWZMBQTH-FGAXOLDCSA-N Campesterol Natural products O[C@@H]1CC=2[C@@](C)([C@@H]3[C@H]([C@H]4[C@@](C)([C@H]([C@H](CC[C@H](C(C)C)C)C)CC4)CC3)CC=2)CC1 SGNBVLSWZMBQTH-FGAXOLDCSA-N 0.000 claims description 2
- LPZCCMIISIBREI-MTFRKTCUSA-N Citrostadienol Natural products CC=C(CC[C@@H](C)[C@H]1CC[C@H]2C3=CC[C@H]4[C@H](C)[C@@H](O)CC[C@]4(C)[C@H]3CC[C@]12C)C(C)C LPZCCMIISIBREI-MTFRKTCUSA-N 0.000 claims description 2
- ARVGMISWLZPBCH-UHFFFAOYSA-N Dehydro-beta-sitosterol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)CCC(CC)C(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 ARVGMISWLZPBCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- DNVPQKQSNYMLRS-NXVQYWJNSA-N Ergosterol Natural products CC(C)[C@@H](C)C=C[C@H](C)[C@H]1CC[C@H]2C3=CC=C4C[C@@H](O)CC[C@]4(C)[C@@H]3CC[C@]12C DNVPQKQSNYMLRS-NXVQYWJNSA-N 0.000 claims description 2
- 241000233866 Fungi Species 0.000 claims description 2
- JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylethanolamin Natural products NCCOP(O)(=O)OCC(O)CO JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- BTEISVKTSQLKST-UHFFFAOYSA-N Haliclonasterol Natural products CC(C=CC(C)C(C)(C)C)C1CCC2C3=CC=C4CC(O)CCC4(C)C3CCC12C BTEISVKTSQLKST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 claims description 2
- OILXMJHPFNGGTO-ZRUUVFCLSA-N UNPD197407 Natural products C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)C=C[C@H](C)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 OILXMJHPFNGGTO-ZRUUVFCLSA-N 0.000 claims description 2
- HZYXFRGVBOPPNZ-UHFFFAOYSA-N UNPD88870 Natural products C1C=C2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)=CCC(CC)C(C)C)C1(C)CC2 HZYXFRGVBOPPNZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229940087168 alpha tocopherol Drugs 0.000 claims description 2
- MJVXAPPOFPTTCA-UHFFFAOYSA-N beta-Sistosterol Natural products CCC(CCC(C)C1CCC2C3CC=C4C(C)C(O)CCC4(C)C3CCC12C)C(C)C MJVXAPPOFPTTCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- NJKOMDUNNDKEAI-UHFFFAOYSA-N beta-sitosterol Natural products CCC(CCC(C)C1CCC2(C)C3CC=C4CC(O)CCC4C3CCC12C)C(C)C NJKOMDUNNDKEAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- OILXMJHPFNGGTO-ZAUYPBDWSA-N brassicasterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)/C=C/[C@H](C)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 OILXMJHPFNGGTO-ZAUYPBDWSA-N 0.000 claims description 2
- 235000004420 brassicasterol Nutrition 0.000 claims description 2
- SGNBVLSWZMBQTH-PODYLUTMSA-N campesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CC[C@@H](C)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 SGNBVLSWZMBQTH-PODYLUTMSA-N 0.000 claims description 2
- 235000000431 campesterol Nutrition 0.000 claims description 2
- 150000001783 ceramides Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000001982 diacylglycerols Chemical class 0.000 claims description 2
- 125000005265 dialkylamine group Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000001985 dialkylglycerols Chemical class 0.000 claims description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 claims description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 claims description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 2
- DNVPQKQSNYMLRS-SOWFXMKYSA-N ergosterol Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@H](CC[C@]3([C@H]([C@H](C)/C=C/[C@@H](C)C(C)C)CC[C@H]33)C)C3=CC=C21 DNVPQKQSNYMLRS-SOWFXMKYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 2
- XGVJWXAYKUHDOO-UHFFFAOYSA-N galanthidine Natural products C1CN2CC3=CC=4OCOC=4C=C3C3C2C1=CC(O)C3O XGVJWXAYKUHDOO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 150000008282 halocarbons Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000001183 hydrocarbyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- XGVJWXAYKUHDOO-DANNLKNASA-N lycorine Chemical compound C1CN2CC3=CC=4OCOC=4C=C3[C@H]3[C@H]2C1=C[C@H](O)[C@H]3O XGVJWXAYKUHDOO-DANNLKNASA-N 0.000 claims description 2
- KQAOMBGKIWRWNA-UHFFFAOYSA-N lycorine Natural products OC1C=C2CCN3C2C(C1O)c4cc5OCOc5cc34 KQAOMBGKIWRWNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims description 2
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000008103 phosphatidic acids Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 claims description 2
- KZJWDPNRJALLNS-VJSFXXLFSA-N sitosterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CC[C@@H](CC)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 KZJWDPNRJALLNS-VJSFXXLFSA-N 0.000 claims description 2
- 235000015500 sitosterol Nutrition 0.000 claims description 2
- 229950005143 sitosterol Drugs 0.000 claims description 2
- HCXVJBMSMIARIN-PHZDYDNGSA-N stigmasterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)/C=C/[C@@H](CC)C(C)C)[C@@]1(C)CC2 HCXVJBMSMIARIN-PHZDYDNGSA-N 0.000 claims description 2
- 235000016831 stigmasterol Nutrition 0.000 claims description 2
- 229940032091 stigmasterol Drugs 0.000 claims description 2
- BFDNMXAIBMJLBB-UHFFFAOYSA-N stigmasterol Natural products CCC(C=CC(C)C1CCCC2C3CC=C4CC(O)CCC4(C)C3CCC12C)C(C)C BFDNMXAIBMJLBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960000984 tocofersolan Drugs 0.000 claims description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- PLSAJKYPRJGMHO-UHFFFAOYSA-N ursolic acid Natural products CC1CCC2(CCC3(C)C(C=CC4C5(C)CCC(O)C(C)(C)C5CCC34C)C2C1C)C(=O)O PLSAJKYPRJGMHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229940096998 ursolic acid Drugs 0.000 claims description 2
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000002076 α-tocopherol Substances 0.000 claims description 2
- 235000004835 α-tocopherol Nutrition 0.000 claims description 2
- 125000003161 (C1-C6) alkylene group Chemical group 0.000 claims 1
- ULOIAOPTGWSNHU-UHFFFAOYSA-N 2-butyl radical Chemical compound C[CH]CC ULOIAOPTGWSNHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 108091032917 Transfer-messenger RNA Proteins 0.000 claims 1
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 claims 1
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 claims 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 abstract description 2
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 abstract 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 abstract 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 26
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 18
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 1-Ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide Substances CCN=C=NCCCN(C)C LMDZBCPBFSXMTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 11
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 11
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000000047 product Substances 0.000 description 10
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 9
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 8
- 229960000549 4-dimethylaminophenol Drugs 0.000 description 7
- 239000007821 HATU Substances 0.000 description 7
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 7
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 7
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 6
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 5
- JHBKBRLRYPYBLP-UHFFFAOYSA-N tert-butyl n-(1,3-dihydroxypropan-2-yl)carbamate Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)NC(CO)CO JHBKBRLRYPYBLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- JTNKXYWGZCNBCH-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propanoic acid;hydron;chloride Chemical compound Cl.CN(C)CCC(O)=O JTNKXYWGZCNBCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000235648 Pichia Species 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- FKASAVXZZLJTNX-UHFFFAOYSA-N 2-(dimethylamino)acetic acid;hydrochloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC(O)=O FKASAVXZZLJTNX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RDTALXUBMCLWBB-UHFFFAOYSA-N 4-(dimethylamino)butanoic acid;hydron;chloride Chemical compound Cl.CN(C)CCCC(O)=O RDTALXUBMCLWBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000021355 Stearic acid Nutrition 0.000 description 3
- MVEAAGBEUOMFRX-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;hydrochloride Chemical compound Cl.CCOC(C)=O MVEAAGBEUOMFRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O QIQXTHQIDYTFRH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N octadecanoic acid Natural products CCCCCCCC(C)CCCCCCCCC(O)=O OQCDKBAXFALNLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical class O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000008117 stearic acid Substances 0.000 description 3
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 2
- MLQBTMWHIOYKKC-KTKRTIGZSA-N (z)-octadec-9-enoyl chloride Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(Cl)=O MLQBTMWHIOYKKC-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 2
- VQNDBXJTIJKJPV-UHFFFAOYSA-N 2h-triazolo[4,5-b]pyridine Chemical compound C1=CC=NC2=NNN=C21 VQNDBXJTIJKJPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OXOWTLDONRGYOT-UHFFFAOYSA-N 4-(dimethylamino)butanoic acid Chemical compound CN(C)CCCC(O)=O OXOWTLDONRGYOT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 2
- 229940067621 aminobutyrate Drugs 0.000 description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 2
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 2
- DEZRYPDIMOWBDS-UHFFFAOYSA-N dcm dichloromethane Chemical compound ClCCl.ClCCl DEZRYPDIMOWBDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 2
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 2
- 239000012442 inert solvent Substances 0.000 description 2
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 2
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M potassium benzoate Chemical compound [K+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 XAEFZNCEHLXOMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000013381 RNA quantification Methods 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical class [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- NRLNQCOGCKAESA-KWXKLSQISA-N [(6z,9z,28z,31z)-heptatriaconta-6,9,28,31-tetraen-19-yl] 4-(dimethylamino)butanoate Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCCC(OC(=O)CCCN(C)C)CCCCCCCC\C=C/C\C=C/CCCCC NRLNQCOGCKAESA-KWXKLSQISA-N 0.000 description 1
- YUWBVKYVJWNVLE-UHFFFAOYSA-N [N].[P] Chemical compound [N].[P] YUWBVKYVJWNVLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000218 acetic acid group Chemical group C(C)(=O)* 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 150000001263 acyl chlorides Chemical class 0.000 description 1
- 238000000246 agarose gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N alumane Chemical class [AlH3] AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 150000001621 bismuth Chemical class 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- CREMABGTGYGIQB-UHFFFAOYSA-N carbon carbon Chemical compound C.C CREMABGTGYGIQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011203 carbon fibre reinforced carbon Substances 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 239000007979 citrate buffer Substances 0.000 description 1
- 238000003501 co-culture Methods 0.000 description 1
- 239000012230 colorless oil Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 125000000113 cyclohexyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 1
- 238000002296 dynamic light scattering Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 1
- VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N methane Natural products C VNWKTOKETHGBQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001280 n-hexyl group Chemical group C(CCCCC)* 0.000 description 1
- 125000000740 n-pentyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000006053 organic reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 239000012466 permeate Substances 0.000 description 1
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 229940126586 small molecule drug Drugs 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 125000000391 vinyl group Chemical group [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
- A61K31/713—Double-stranded nucleic acids or oligonucleotides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
- A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
- A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
- A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
- A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
- A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
- A61K9/5107—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/5123—Organic compounds, e.g. fats, sugars
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C219/00—Compounds containing amino and esterified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton
- C07C219/02—Compounds containing amino and esterified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having esterified hydroxy groups and amino groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C231/00—Preparation of carboxylic acid amides
- C07C231/02—Preparation of carboxylic acid amides from carboxylic acids or from esters, anhydrides, or halides thereof by reaction with ammonia or amines
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C237/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups
- C07C237/02—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
- C07C237/04—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
- C07C237/08—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to an acyclic carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by singly-bound oxygen atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C237/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups
- C07C237/02—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
- C07C237/04—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
- C07C237/12—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to an acyclic carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by carboxyl groups
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Optics & Photonics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Hematology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Nanotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明公开了一种含氮链状化合物、其制备方法、包含其的组合物和应用。本发明提供了一种如式I所示的含氮链状化合物或其药学上可接受的盐。本发明的如式I所示的含氮链状化合物可用于制备脂质载体。制备脂质载体能够包载核酸药物，可用于将核酸预防剂和/或治疗剂递送至哺乳动物细胞及器官并发挥作用。
Description
技术领域
本发明涉及一种含氮链状化合物、其制备方法、包含其的组合物和应用。
背景技术
核酸药物为现今基础和应用研究的一个重要方向。核酸药物可用于对病毒及细菌感染性疾病、肿瘤、代谢性疾病等的预防和/或治疗，其生产成本更低且周期更短，有利于快速开发个性化药物。然而，核酸为荷负电的大分子，难以透过细胞膜，同时核酸稳定性不佳，通过开发各种核酸包装和递送系统可一定程度上克服核酸药物的不稳定性，提高其递送效率。
脂质纳米颗粒已被证明可用作递送生物活性物质(如小分子药物、蛋白质和核酸)进入细胞和/或细胞内区室的载体。通过设计及优化脂质纳米颗粒中的各组分的种类和用量，从而优化核酸药物递送系统对于提高核酸药物预防及治疗的功效具重要意义，尤其是可用于递送RNA预防剂和/或治疗剂的脂质化合物以及相关的方法和组合物。
发明内容
本发明旨在提供一种新的可用于递送核酸药物的可电离脂质化合物，增加可电离脂质化合物的种类及核酸预防剂和/或治疗剂递送载体的选择。为解决以上技术问题，本发明提供了一种含氮链状化合物、其制备方法、包含其的组合物和应用。本发明的组合物可用于高效递送核酸药物。
本发明的技术方案如下：
本发明提供了一种如式I所示的含氮链状化合物或其药学上可接受的盐，
其中，A1为A2为/>
Y为C1-C6的亚烷基；
m为0-4的整数；
n为0-4的整数；
R1为H、未取代或被1个、2个或3个R1-1取代的C1-C6的烷基或
各个R1-1独立地为氨基、羟基、C1-C6的烷基、C1-C6的烷氧基、
R1-1-1为C1-C6的烷基；R1-1-2为C1-C6的烷基；R1-1-3为C1-C6的烷基；
R1-2为C1-C6的烷基；
R2为H、未取代或被1个、2个或3个R2-1取代的C1-C6的烷基或
各个R2-1独立地为氨基、羟基、C1-C6的烷基、C1-C6的烷氧基、
R2-1-1为C1-C6的烷基；R2-1-2为C1-C6的烷基；R2-1-3为C1-C6的烷基；
R2-2为C1-C6的烷基；
R3为未取代或被1个、2个或3个R3-1取代的C6-C20的烷基、未取代或被1个、2个或3个R3-2取代的C6-C20的烯基；
各个R3-1独立地为C1-C6的烷基、氨基、羟基、卤素、C1-C6的烷氧基、C2-C10的烯基、
R3-1-1为C1-C6的烷基；R3-1-2为C1-C6的烷基；R3-1-3为C1-C6的烷基；
各个R3-2独立地为C1-C6的烷基、氨基、羟基、卤素、C1-C6的烷氧基、C2-C10的烯基、
R3-2-1为C1-C6的烷基；
R3-2-2为C1-C6的烷基；
R3-2-3为C1-C6的烷基；
R4为未取代或被1个、2个或3个R4-1取代的C6-C20的烷基、未取代或被1个、2个或3个R4-2取代的C6-C20的烯基；
各个R4-1独立地为C1-C6的烷基、氨基、羟基、卤素、C1-C6的烷氧基、C2-C10的烯基、
R4-1-1为C1-C6的烷基；R4-1-2为C1-C6的烷基；R4-1-3为C1-C6的烷基；
各个R4-2独立地为C1-C6的烷基、氨基、羟基、卤素、C1-C6的烷氧基、C2-C10的烯基、
R4-2-1为C1-C6的烷基；R4-2-2为C1-C6的烷基；R4-2-3为C1-C6的烷基。
某一优选方案中，所述如式I所示的化合物或其药学上可接受的盐中，某些基团的定义可如下所述，其他基团的定义可如其他任一方案所述(以下简称“某一优选方案中”)：m为0或1。
某一优选方案中，n为0或1。
某一优选方案中，Y中，所述C1-C6的亚烷基可为
例如/>
某一优选方案中，R1中，所述C1-C6的烷基可为C1-C4的烷基，优选为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基；例如甲基。
某一优选方案中，R1-1中，所述C1-C6的烷基可为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基。
某一优选方案中，R1-1中，所述C1-C6的烷氧基可为C1-C4的烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基或叔丁氧基。
某一优选方案中，R1-1-1中，所述C1-C6的烷基可为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基。
某一优选方案中，R1-1-2中，所述C1-C6的烷基可为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基。
某一优选方案中，R1-1-3中，所述C1-C6的烷基可为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基。
某一优选方案中，R1-2中，所述C1-C6的烷基可为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基。
某一优选方案中，R2中，所述C1-C6的烷基可为C1-C4的烷基，优选为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基；例如甲基。
某一优选方案中，R2-1中，所述C1-C6的烷基可为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基。
某一优选方案中，R2-1中，所述C1-C6的烷氧基可为C1-C4的烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基或叔丁氧基。
某一优选方案中，R2-1-1中，所述C1-C6的烷基可为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基。
某一优选方案中，R2-1-2中，所述C1-C6的烷基可为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基。
某一优选方案中，R2-1-3中，所述C1-C6的烷基可为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基。
某一优选方案中，R2-2中，所述C1-C6的烷基可为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基。
某一优选方案中，R3中，所述C6-C20的烷基可为C10-C18的烷基，还可为C15-C18的烷基，优选为直链烷基，例如
某一优选方案中，R3中，所述C6-C20的烯基可为C10-C18的烯基，优选为C15-C18的烯基，更优选为直链烯基；所述C6-C20的烯基可含有1到4个双键，例如
某一优选方案中，R3-1中，所述C1-C6的烷基可为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基。
某一优选方案中，R3-1中，所述C1-C6的烷氧基可为C1-C4的烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基或叔丁氧基。
某一优选方案中，R3-1中，所述卤素可为氟、氯、溴或碘。
某一优选方案中，R3-1中，所述C2-C10的烯基可为C2-C6的烯基，优选为直链烯基。
某一优选方案中，R3-1-1中，所述C1-C6的烷基可为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基。
某一优选方案中，R3-1-2中，所述C1-C6的烷基可为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基。
某一优选方案中，R3-1-3中，所述C1-C6的烷基可为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基。
某一优选方案中，R3-2中，所述卤素可为氟、氯、溴或碘。
某一优选方案中，R3-2中，所述C1-C6的烷基可为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基。
某一优选方案中，R3-2中，所述C1-C6的烷氧基可为C1-C4的烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基或叔丁氧基。
某一优选方案中，R3-2中，所述卤素可为氟、氯、溴或碘。
某一优选方案中，R3-2中，所述C2-C10的烯基可为C2-C6的烯基，优选为直链烯基。
某一优选方案中，R3-2-1中，所述C1-C6的烷基可为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基。
某一优选方案中，R3-2-2中，所述C1-C6的烷基可为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基。
某一优选方案中，R3-2-3中，所述C1-C6的烷基可为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基。
某一优选方案中，R4中，所述C6-C20的烷基可为C10-C18的烷基，还可为C15-C18的烷基，优选为直链烷基，例如
某一优选方案中，R4中，所述C6-C20的烯基可为C10-C18的烯基，优选为C15-C18的烯基，更优选为直链烯基；所述C6-C20的烯基可含有1到4个双键，例如
某一优选方案中，R4-1中，所述C1-C6的烷基可为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基。
某一优选方案中，R4-1中，所述C1-C6的烷氧基可为C1-C4的烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基或叔丁氧基。
某一优选方案中，R4-1中，所述卤素可为氟、氯、溴或碘。
某一优选方案中，R4-1中，所述C2-C10的烯基可为C2-C6的烯基，优选直链烯基。
某一优选方案中，R4-1-1中，所述C1-C6的烷基可为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基。
某一优选方案中，R4-1-2中，所述C1-C6的烷基可为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基。
某一优选方案中，R4-1-3中，所述C1-C6的烷基可为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基。
某一优选方案中，R4-2中，所述卤素可为氟、氯、溴或碘。
某一优选方案中，R4-2中，所述C1-C6的烷基可为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基。
某一优选方案中，R4-2中，所述C1-C6的烷氧基可为C1-C4的烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基或叔丁氧基。
某一优选方案中，R4-2中，所述卤素可为氟、氯、溴或碘。
某一优选方案中，R4-2中，所述C2-C10的烯基可为C2-C6的烯基，优选为直链烯基。
某一优选方案中，R4-2-1中，所述C1-C6的烷基可为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基。
某一优选方案中，R4-2-2中，所述C1-C6的烷基可为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基。
某一优选方案中，R4-2-3中，所述C1-C6的烷基可为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基。
某一优选方案中，所述如式I所示的含氮链状化合物为如式Ia、Ib、Ic、Id或Ie所示的化合物
某一优选方案中，A1为其中a与CH2相连，b与R3相连。
某一优选方案中，A2为其中a与CH2相连，b与R4相连。
某一优选方案中，m和n相同。
某一优选方案中，R1和R2相同。
某一优选方案中，R3和R4相同。
某一优选方案中，R1为C1-C4的烷基，例如甲基。
某一优选方案中，R2为C1-C4的烷基，例如甲基。
某一优选方案中，R3为C10-C18的烷基或C10-C18的烯基，优选为C15-C18的烷基或C15-C18的烯基，例如
某一优选方案中，R4为C10-C18的烷基或C10-C18的烯基，优选为C15-C18的烷基或C15-C18的烯基，例如
某一优选方案中，Y为C1-C4的亚烷基，例如
某一优选方案中，R1为C1-C4的烷基；R2为C1-C4的烷基；
R3为C10-C18的烷基或C10-C18的烯基；
R4为C10-C18的烷基或C10-C18的烯基；
Y为C1-C4的亚烷基。
某一优选方案中，R1为C1-C4的烷基；R2为C1-C4的烷基；
R3为C15-C18的烷基或C15-C18的烯基；
R4为C15-C18的烷基或C15-C18的烯基；
Y为C1-C4的亚烷基。
某一优选方案中，所述如式I所示的含氮链状化合物为如下任一化合物：
本发明还提供一种如式I所示的化合物的制备方法，其包括如下步骤：溶剂中，在碱和缩合剂的存在下，如式I-1所示的化合物与如式I-2所示的化合物进行如下式所示的缩合反应，即可；
其中，A1、A2、m、n、R1、R2、R3、R4和Y如前所述。
所述缩合反应中，所述如式I-2所示的化合物与所述如式I-1所示的化合物的摩尔比可为1：(1-1.2)，例如1:1或1:1.08。
所述缩合反应中，所述缩合剂为本领域常规的缩合剂，优选1-羟基苯并三唑(HOBT)、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDCI)和2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(HATU)中的一种或多种，例如“1-羟基苯并三唑和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐”或2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯。
所述缩合反应中，所述如式I-2所示的化合物与所述缩合剂的摩尔比为1:(1-3)，例如1:2.56、1:1.2或1:1.3。
所述缩合反应中，所述碱为本领域常规碱，优选有机碱，例如三乙胺或N,N-二异丙基乙胺(DIPEA)。
所述缩合反应中，所述如式I-2所示的化合物与所述碱的摩尔比可为1:(2-4)，例如1:3。
所述缩合反应中，所述溶剂为本领域常规有机溶剂，优选卤代烃类溶剂，例如二氯甲烷。
所述缩合反应中，所述如式I-2所示的化合物与所述溶剂的质量体积比可为30mg/mL-60mg/mL，例如50mg/mL或40mg/mL。
所述缩合反应中，所述缩合反应的反应温度为本领域常规反应温度，例如室温。
所述缩合反应中，所述缩合反应的反应时间为本领域常规反应时间，例如10h或≥12h。
所述缩合反应还可包括后处理，所述后处理步骤可为本领域常规的有机反应的后处理步骤，其可以包括以下步骤：稀释、萃取、溶液洗涤、水洗、干燥、浓缩、拌样和柱层析中的一种或多种。
本发明还提供一种脂质载体，其包括物质Z，所述物质Z为如前所述的如式I所示化合物或其药学可接受的盐。
某一优选方案中，所述脂质载体还包括稀释剂。所述稀释剂可为磷酸盐缓冲液或Tris缓冲液等。
某一优选方案中，所述脂质载体还包括磷脂。
某一优选方案中，所述磷脂可为本领域常规磷脂，其为两性辅助性分子，有助于脂质颗粒和细胞膜的融合。所述磷脂可为具有带电极性端和脂肪链非极性端的磷脂类分子，例如二硬脂酰基磷脂酰胆碱(DSPC)、二肉豆蔻酰磷酸胆碱(DMPC)、二油酰磷酸胆碱(DOPC)、棕榈酰磷酸胆碱(DPPC)、1,2-二硬脂酰磷酸胆碱(DSPC)、二十一烷酰磷酸胆碱(DUPC)或棕榈酰磷酸胆碱(POPC)等。
某一优选方案中，所述脂质载体还包括PEG脂质(聚乙二醇修饰的脂质)。
某一优选方案中，所述PEG脂质可为具有聚乙二醇亲水端修饰的脂质分子。所述PEG脂质优选选自PEG修饰的磷脂酰乙醇胺、PEG修饰的磷脂酸、PEG修饰的神经酰胺、PEG修饰的二烷基胺、PEG修饰的二酰基甘油和PEG修饰的二烷基甘油中的一种或多种，例如PEG修饰的二肉豆蔻酰甘油(DMG-PEG2000)等。
某一优选方案中，所述脂质载体还包括甾醇。
某一优选方案中，所述甾醇可为本领域常规甾醇，所述甾醇包括动物性、植物性或菌类甾醇。所述甾醇选自胆固醇、谷甾醇、麦角甾醇、菜油甾醇、豆甾醇、芸苔甾醇、番茄碱、熊果酸和α-生育酚中的一种或多种，例如胆固醇等。
某一优选方案中，所述脂质载体中，所述物质Z与甾醇的摩尔比为0.5～5:1，优选为0.5～3:1，例如0.6～2:1。
某一优选方案中，所述脂质载体中，所述物质Z与磷脂的摩尔比为1～15:1，优选为2～8:1，例如3～6:1。
某一优选方案中，所述脂质载体中，所述物质Z与PEG脂质的摩尔比为20～130:1，优选为20～80:1，例如20～40:1。
某一优选方案中，所述物质Z的摩尔含量约为30mol％至60mol％。
本发明中，摩尔含量的含义为某物质占脂质载体的总物质量的百分比，脂质载体中各组分的摩尔含量之和不超过100mol％。某一优选方案中，所述磷脂的摩尔含量约为0mol％至30mol％。
某一优选方案中，所述甾醇的摩尔含量约为15mol％至55mol％。
某一优选方案中，所述PEG脂质的摩尔含量约为0mol％至10mol％。
某一优选方案中，所述脂质载体由所述物质Z、所述稀释剂、所述磷脂、所述PEG脂质和所述甾醇组成。
本发明还提供一种脂质纳米颗粒，其包括治疗剂和/或预防剂以及前述脂质载体。
某一优选方案中，所述治疗剂和/或预防剂可为一种或两种及以上核酸。所述核酸可为本领域常规核酸。所述治疗剂和/或预防剂可为单链脱氧核糖核酸(DNA)、双链DNA、小干扰RNA(siRNA)、不对称双链小干扰RNA(aiRNA)、微小RNA(miRNA)、小发夹RNA(shRNA)、环状RNA(circRNA)、转运RNA(tRNA)、信使RNA(mRNA)和本领域已知的其他形式的核酸分子，优选为mRNA，例如萤火虫荧光素酶(Fluc)mRNA。
某一优选方案中，所述脂质纳米颗粒中氮磷比可为2:1～30:1，所述组合物的氮磷比是指一种或多种可电离脂质化合物中可电离氮原子的摩尔数与RNA中磷酸酯基的摩尔数的比率。优选为2:1～20:1，例如3:1～20:1，还例如3:1～16:1。
某一优选方案中，所述脂质纳米颗粒中，所述脂质载体与治疗剂和/或预防剂的质量比可为3～80:1，优选为10～50:1。
某一优选方案中，所述脂质纳米颗粒的粒径(平均粒径)可为10～250nm，例如为10～200nm，40～150nm，或50～250nm，或例如60～150nm。
某一优选方案中，所述脂质纳米颗粒中，所述脂质载体包裹所述治疗剂和/或预防剂。
本发明还提供一种组合物，其包括物质Z，所述物质Z为如前所述的如式I所示化合物或其药学可接受的盐。
某一优选方案中，所述组合物还包括稀释剂、磷脂、PEG脂质、甾醇和治疗剂和/或预防剂中的一种或多种。
某一优选方案中，所述组合物中，所述稀释剂、磷脂、PEG脂质、甾醇和治疗剂和/或预防剂如前所述。
某一优选方案中，所述组合物中，所述物质Z与所述稀释剂、磷脂、PEG脂质和甾醇中的一种或多种形成如前所述脂质载体。
某一优选方案中，所述组合物中，所述脂质载体与所述治疗剂和/或预防剂形成如前所述的脂质纳米颗粒。
某一优选方案中，所述组合物中，所述治疗剂和/或预防剂的包封率为至少50％，优选为至少为70％。
某一优选方案中，所述组合物中，所述组合物的多分散指数不高于0.5，例如不高于0.3。
如无特别说明，本发明所用术语具有如下含义：
术语“卤素”是指氟、氯、溴或碘。
术语“药学上可接受”是指相对无毒、安全、适合于患者使用。
术语“药学上可接受的盐”是指化合物与药学上可接受的酸或碱反应得到的盐。当化合物中含有相对酸性的官能团时，可以通过在合适的惰性溶剂中用足量的药学上可接受的碱与化合物接触的方式获得碱加成盐。药学上可接受的碱加成盐包括但不限于：钠盐、钾盐、钙盐、铝盐、镁盐、铋盐、铵盐等。当化合物中含有相对碱性的官能团时，可以通过在合适的惰性溶剂中用足量的药学上可接受的酸与化合物接触的方式获得酸加成盐。药学上可接受的酸加成盐包括但不限于：盐酸盐、硫酸盐、甲磺酸盐等。具体可参见Handbook ofPharmaceutical Salts:Properties,Selection,and Use(P.Heinrich Stahl,CamilleG.Wermuth,2011,2nd Revised Edition)。
结构片段中的是指该结构片段通过该位点与分子其余部分相连。例如，是指环己基。
基团末端的“-”是指该基团通过该位点与分子其余部分相连。例如，CH3-C(＝O)-是指乙酰基。
术语“烷基”是指具有指定碳原子数(例如，C1～C6)的、直链或支链的、饱和的一价烃基。烷基包括但不限于：甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、正己基等。
术语“亚烷基”为二价基团，其通过两个单键与分子其余部分相连，其余定义同术语“烷基”。
术语“烷氧基”是指基团RX-O-，RX的定义同术语“烷基”。烷氧基包括但不限于：甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基等。
术语“烯基”是指具有指定碳原子数(例如，C2～C20)的、直链或支链的、不饱和的一价烃基，其具有一个或多个(例如，1个、2个或3个)碳-碳sp2双键。烯基包括但不限于：乙烯基、 等。
在不违背本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本发明各较佳实例
本发明中，如无特殊说明，室温指20-30℃。
本发明所用试剂和原料均市售可得。
本发明的积极进步效果在于：本发明提供了一种如式I所示的含氮链状化合物，其结构新颖，其可用做制备脂质纳米颗粒。包含如式I所示的含氮链状化合物的脂质纳米颗粒相对于其他的含两个氮的链状化合物具有较低的多分散指数，可以高效的转运mRNA。
附图说明
图1为293FT细胞与各Fluc-mRNA LNP共培养24h后的化学发光强度。
具体实施方式
下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。
下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。
本申请实施例的试剂来源如下：
DCC：购自阿达玛斯试剂有限公司，货号：012041444，纯度：RG，99％；
DMAP：购自阿达玛斯试剂有限公司，货号：01271081，纯度：RG，99％；
DCM：购自上海泰坦科技股份有限公司，货号：01111853，纯度：AR，≥99.5％；
N-Boc丝氨醇：购自毕得医药科技股份有限公司，货号：BD227276，纯度：97％；
油酰氯：购自安耐吉化学，货号：W810227，纯度：89％；
TEA：购自易恩化学额技术有限公司，货号：R033479，纯度：GC，99.8％；
盐酸-乙酸乙酯溶液：购自南京盛必诚化工科技有限公司；
4-二甲基氨基丁酸盐酸盐：购自毕得医药科技股份有限公司，货号：BD3025，纯度：97％；
硬脂酸：购自上海麦克林生化科技股份有限公司；货号：S817778，纯度：98％；
三氟乙酸：购自上海麦克林生化科技股份有限公司；货号：T818778，纯度：AR，99％；
EDCI：购自上海迈瑞尔生化科技有限公司；货号：M38555，纯度：98％；
HOBt：购自江苏艾康生物医药研发有限公司；货号：AK-PC-03GAR4，纯度：99％；
HATU：购自南京肽业生物科技有限公司；货号：R40005；
DIPEA：购自易恩化学额技术有限公司，货号：R004066，纯度：99％；
3-二甲基氨基丙酸盐酸盐：购自毕得医药科技股份有限公司，货号：BD158063，纯度：97％；
N,N-二甲基甘氨酸盐酸盐：购自毕得医药科技股份有限公司，货号：BD2382，纯度：98％。
实施例1制备化合物GJX001
步骤1：GJX001-1的制备
/>
物料配比：
| 物料名称 | 分子量 | 投料比 | 投料量 | mmol |
| N-Boc丝氨醇 | 191 | 1eq | 3.8g | 20 |
| 油酰氯 | 300.91 | 2eq | 12g | 40 |
| DMAP | 122.17 | 0.25eq | 610mg | 5 |
| TEA | 101 | 2eq | 4g | 40 |
| 二氯甲烷 | - | - | 100mL | - |
操作过程：
反应瓶中加入N-Boc丝氨醇、TEA、DMAP和二氯甲烷，降温至0℃，滴加油酰氯，加完后升至室温搅拌反应2h。TLC(PE:EA＝6:1)显示反应完全。柱层析纯化，得12g无色油状物，收率为76％。
TLC情况：PE:EA＝6:1，Rf＝0.3。
步骤2：GJX001-2的制备
物料配比：
| 物料名称 | 分子量 | 投料量 | mmol |
| GJX001-1 | 720 | 2.6g | 3.6 |
| 盐酸-乙酸乙酯溶液(2M) | - | 26mL | - |
操作过程：
反应瓶中加入GJX001-1，然后加入盐酸-乙酸乙酯溶液(2M)，室温搅拌反应2h。TLC(PE:EA＝4:1)反应完全，蒸干溶剂，得2g无色油状物，收率为90％。
TLC情况：PE:EA＝1:1，Rf＝0.2。
步骤3：GJX001的制备
物料配比：
| 物料名称 | 分子量 | 投料比 | 投料量 | mmol |
| GJX001-2 | 620 | 1.0eq | 2g | 3.2 |
| 4-二甲基氨基丁酸盐酸盐 | 167.63 | 1.0eq | 0.54g | 3.2 |
| EDCI | 191.7 | 1.3eq | 0.8g | 4.1 |
| HOBt | 135 | 1.3eq | 0.56g | 4.1 |
| 三乙胺 | 101 | 3.0eq | 1g | 9.6 |
| DCM | - | - | 40mL | - |
操作过程：
反应瓶中加入GJX001-2、4-二甲基氨基丁酸盐酸盐、EDCI、HOBt、三乙胺和DCM，室温下反应12小时以上。次日，TLC(PE:EA＝1:1)显示反应完全，加60mL DCM稀释，100mL水洗一次，取有机相用无水硫酸钠干燥后浓缩，拌样。柱层析纯化，得1g无色油状物，收率为30％。
1HNMR(400MHz，CDCl3)δ：6.03(s，1H)，5.46-5.30(m，4H)，4.49(dd，1H)，4.31-4.05(m，4H)，2.43(t，4H)，2.32(d，6H)，2.24-2.17(m，2H)，2.09-1.98(m，8H)，1.87(dd，7H)，1.62(d，5H)，1.47-1.19(m，42H)，0.90(t，6H)。
LCMS：Rt：0.304-2.599min；MS m/z(ESI)：733.6[M]+。
实施例2制备化合物GJX002
步骤1：GJX002-1的制备
物料配比：
| 物料名称 | 分子量 | 投料比 | 投料量 | mmol |
| N-Boc丝氨醇 | 191 | 1eq | 1g | 5.23 |
| 硬脂酸 | 284 | 2.5eq | 3.72g | 13.1 |
| DCC | 206.33 | 2.5eq | 2.7g | 13.1 |
| DMAP | 122.17 | 0.1eq | 0.31g | 1.31 |
| 二氯甲烷 | - | - | 40mL | - |
操作过程：
反应瓶中加入N-Boc丝氨醇、硬脂酸、DCC、DMAP和二氯甲烷，室温搅拌反应2h。TLC(PE:EA＝4:1)反应完全，铺硅藻土过滤，滤液浓缩，拌样。柱层析纯化，得3.1g白色固体，收率为81.8％。
TLC情况：PE:EA＝4:1，Rf＝0.4。
步骤2：GJX002-2的制备
物料配比：
| 物料名称 | 分子量 | 投料比 | 投料量 | mmol |
| GJX002-1 | 724 | - | 2.5g | 3.45 |
| 三氟乙酸 | - | - | 10mL | - |
| 二氯甲烷 | - | - | 30mL | - |
操作过程：
反应瓶中加入GJX002-1，然后加入三氟乙酸和二氯甲烷的混合溶液，室温搅拌反应2h。TLC(PE:EA＝4:1)反应完全，加70ml二氯甲烷稀释，用100ml的饱和碳酸钠水溶液洗一次，100ml水洗一次，取有机相用无水硫酸钠干燥后浓缩，得2g白色固体即GJX002-2，收率为93％。
TLC情况：PE:EA＝1:1，Rf＝0.2。
步骤3：GJX002的制备
物料配比：
| 物料名称 | 分子量 | 投料比 | 投料量 | mmol |
| GJX002-2 | 624 | 1.0eq | 2g | 3.2 |
| 4-二甲基氨基丁酸盐酸盐 | 167.63 | 1.0eq | 0.54g | 3.2 |
| EDCI | 191.7 | 1.3eq | 0.8g | 4.1 |
| HOBt | 135 | 1.3eq | 0.56g | 4.1 |
| 三乙胺 | 101 | 3.0eq | 1g | 9.6 |
| DCM | - | - | 40mL | - |
操作过程：
反应瓶中加入GJX002-2、4-二甲基氨基丁酸盐酸盐、EDCI、HOBt、三乙胺和DCM，室温下反应12小时以上。次日，TLC(PE:EA＝1:1)原料GJX002-2反应完全，加60mL DCM稀释，100mL水洗一次，取有机相用无水硫酸钠干燥后浓缩，拌样。柱层析纯化：DCM:MeOH＝20:1，得700mg白色固体即GJX002，收率为30％。
1HNMR(400MHz，CDCl3)δ：7.08(d，1H)，4.51-4.41(m，1H)，4.19(dd，1H)，4.08(dd，2H)，2.30(q，6H)，2.24(s，6H)，1.78(dt，4H)，1.6(p，4H)，1.26(d，56H)，0.88(t，6H)。
LCMS：Rt：0.063-0.262min；MS m/z(ESI)：737.68[M]+。
实施例3制备化合物GJX003
步骤1：GJX003-1的制备
物料配比：
| 物料名称 | 分子量 | 投料比 | 投料量 | mmol |
| A | 280 | 2.1eq | 6.2g | 22.0 |
| B | 191 | 1eq | 2g | 10.5 |
| DCC | 206 | 2.1eq | 4.6g | 22.0 |
| DMAP | 122 | 0.2eq | 0.26g | 2.1 |
| DCM | - | - | 100mL | - |
操作过程：
反应瓶中加入A、B、DMAP、DCC以及DCM，室温搅拌8个小时。TLC(PE:EA＝20:1)显示原料A反应完全，过滤。然后，有机滤液中加入饱和的碳酸氢钠溶液搅拌30min，分液，用无水硫酸钠干燥有机相后浓缩，拌样。柱层析纯化，得3.6g产物，收率为45.5％。
1HNMR(400MHz，CDCl3)δ：5.45-5.27(m，8H)，4.78(d，1H)，4.18(d，3H)，4.07(s，2H)，2.78(t，4H)，2.32(t，4H)，2.06(q，8H)，1.70-1.59(m，4H)，1.46(s，9H)，1.38-1.26(m，29H)，0.90(t，6H)。
步骤2：GJX003-2的制备
物料配比：
操作过程：
将GJX003-1溶解到乙酸乙酯里面，然后再加入EA/HCl，混合溶液搅拌室温搅拌2个小时。TLC(PE:EA＝1:1)显示GJX003-1反应完全，旋干，没有纯化，直接投下一步。
1HNMR(400MHz，CDCl3)δ：8.84(s，3H)，5.44-5.31(m，8H)，4.51-4.33(m，4H)，3.85-3.75(m，1H)，2.79(t，4H)，2.46(t，4H)，2.08(dt，8H)，1.68-1.58(m，4H)，1.38-1.28(m，28H)，0.91(t，6H)。
步骤3：GJX003的制备
物料配比：
| 物料名称 | 分子量 | 投料比 | 投料量 | mmol |
| GJX003-2 | 615.9 | 1.0eq | 400mg | 0.647 |
| 4-二甲基氨基丁酸盐酸盐 | 167 | 1.1eq | 120mg | 0.712 |
| HATU | 378 | 1.2eq | 293mg | 0.777 |
| DIPEA | 129.9 | 3.0eq | 252mg | 1.94 |
| DCM | - | - | 10mL | - |
操作过程：
反应瓶中加入GJX003-2、4-二甲基氨基丁酸盐、HATU、DIPEA以及DCM，室温搅拌10个小时。TLC(DCM:CH3OH＝10:1)显示GJX003-2反应完全，向反应液中加入水(20mL),DCM萃取3次，再用饱和食盐水洗涤有机相2次，用无水硫酸钠干燥有机相后浓缩，拌样。柱层析纯化，得170mg产物，收率为36.0％。
1HNMR(400MHz，CDCl3)δ：5.47-5.29(m，5H)，4.47-4.11(m，8H)，3.73-3.62(m，2H)，3.18-3.04(m，4H)，2.83(s，6H)，2.77(d，2H)，2.58(d，2H)，2.42-2.30(m，5H)，2.19-1.97(m，9H)，1.45(d，4H)，1.39-1.25(m，31H)，0.93-0.85(m，6H)。
LCMS：Rt：0.187min；MS m/z(ESI)：729.6[M]+。
实施例4制备化合物GJX004
物料配比：
操作过程：
反应瓶中加入GJX002-2、3-二甲基氨基丙酸盐酸盐、EDCI、HOBt、三乙胺和二氯甲烷，室温下反应12小时以上。次日，TLC(PE:EA＝1:1)原料GJX002-2反应完全，加60mL DCM稀释，100mL水洗一次，取有机相用无水硫酸钠干燥后浓缩，拌样。柱层析纯化：DCM:MeOH＝20:1，得700mg白色固体即GJX004，收率为30％。
1HNMR(500MHz，CDCl3)δ：5.96(d，1H)，4.27-4.14(m，3H)，3.71-3.58(m，2H)，2.78(t，1H)，2.34(t，2H)，2.22-2.16(m，2H)，1.61(dd，6H)，1.37(s，1H)，1.27(d，62H)，0.88(t，6H)。
LCMS：Rt：0.063-0.195min；MS m/z(ESI)：723.66[M]+。
实施例5制备化合物GJX005
物料配比：
操作过程：
反应瓶中加入GJX001-2、3-二甲基氨基丙酸盐酸盐、EDCI、HOBt、三乙胺和二氯甲烷，室温下反应12小时以上。次日，TLC(PE:EA＝1:1)显示原料GJX001-2反应完全，加60mLDCM稀释，100mL水洗一次，取有机相用无水硫酸钠干燥后浓缩，拌样。柱层析纯化：DCM:MeOH＝20:1，得1g产物即GJX005，收率为38％。
1HNMR(400MHz，CDCl3)δ：8.89(d，1H)，5.41-5.329(m，4H)，4.51-4.41(m，1H)，4.13(ddd，4H)，2.54-2.48(m，2H)，2.38-2.28(m，6H)，2.25(s，6H)，2.08-1.95(m，8H)，1.62(s，4H)，1.28(d，40H)，0.88(t，6H)。
LCMS：Rt：0.500min；MS m/z(ESI)：719.6[M]+。
实施例6制备化合物GJX006
物料配比：
操作过程：
反应瓶中加入GJX003-2、3-二甲基氨基丙酸盐酸盐、HATU、DIPEA以及DCM，室温搅拌10个小时。TLC(EA:PE＝1:1)显示GJX003-2反应完全，向反应液中加入水(20mL)，DCM萃取3次，再用饱和食盐水洗涤有机相2次，用无水硫酸钠干燥有机相后浓缩，拌样。柱层析纯化，得70mg产物即GJX006，收率为14.4％。
1HNMR(400MHz，CDCl3)δ：5.43-5.27(m，8H)，4.33(s，1H)，4.18(d，4H)，3.18(q，2H)，2.86(s，6H)，2.77(t，4H)，2.34(t，4H)，2.04(q，8H)，1.60(s，4H)，1.38-1.22(m，32H)，0.89(t，6H)。
LCMS：Rt：0.260min；MS m/z(ESI)：715.6[M]+。
实施例7制备化合物GJX007
物料配比：
| 物料名称 | 分子量 | 投料比 | 投料量 | mmol |
| GJX002-2 | 624 | 1.0eq | 2g | 3.2 |
| N,N-二甲基甘氨酸盐酸盐 | 139.58 | 1.0eq | 0.45g | 3.2 |
| EDCI | 191.7 | 1.3eq | 0.8g | 4.1 |
| HOBt | 135 | 1.3eq | 0.56g | 4.1 |
| 三乙胺 | 101 | 3.0eq | 1g | 9.6 |
| DCM | - | - | 40mL | - |
操作过程：
反应瓶中加入GJX002-2、N,N-二甲基甘氨酸盐酸盐、EDCI、HOBt、三乙胺和DCM，室温下反应12小时以上。次日，TLC(PE:EA＝1:1)原料GJX002-2反应完全，加60mL DCM稀释，100mL水洗一次，取有机相用无水硫酸钠干燥后浓缩，拌样。柱层析纯化：DCM:MeOH＝20:1，得700mg白色固体即GJX007，收率为30％。
1HNMR(500MHz，CDCl3)δ：7.38(d，1H)，4.52-4.42(m，1H)，4.22-4.10(m，4H)，2.31(t，4H)，2.28(s，5H)，1.61(td，6H)，1.25(s，56H)，0.87(t，6H)。
LCMS：Rt：0.072-0.238min；MS m/z(ESI)：709.6[M]+。
实施例8制备化合物GJX008
物料配比：
操作过程：
反应瓶中加入GJX001-2、N,N-二甲基甘氨酸盐酸盐、EDCI、HOBt、三乙胺和DCM，室温下反应12小时以上。次日，TLC(PE:EA＝1:1)显示原料GJX001-2反应完全，加60mL DCM稀释，100ml水洗一次，取有机相用无水硫酸钠干燥后浓缩，拌样。柱层析纯化：DCM:MeOH＝20:1，得1g产物即GJX008，收率为38％。
1HNMR(500MHz，CDCl3)δ：7.40(d，1H)，5.36(dt，4H)，4.49(dt，1H)，4.26-4.11(m，4H)，2.97(s，2H)，2.34(t，4H)，2.30(s，6H)，2.03(dt，8H)，1.37-1.25(m，44H)，0.90(t，6H)。
实施例9制备化合物GJX009
物料配比：
| 物料名称 | 分子量 | 投料比 | 投料量 | mmol |
| GJX003-2 | 615.9 | 1.0eq | 400mg | 0.645 |
| N,N-二甲基甘氨酸盐酸盐 | 139.6 | 1.2eq | 98mg | 0.70 |
| HATU | 378 | 1.3eq | 319mg | 0.845 |
| DIPEA | 129.9 | 3.0eq | 252mg | 1.94 |
| DCM | - | - | 10mL | - |
操作过程：
反应瓶中加入GJX003-2、N,N-二甲基甘氨酸、HATU、DIPEA以及DCM，室温搅拌10个小时。TLC(EA:PE＝1:1)显示GJX003-2反应完全，向反应液中加入水(20mL)，DCM萃取3次，再用饱和食盐水洗涤有机相2次，用无水硫酸钠干燥有机相后浓缩，拌样。柱层析纯化，得120mg产物即GJX009，收率为26.5％。
1HNMR(400MHz，CDCl3)δ：7.38(d，1H)，5.42-5.29(m，7H)，4.52-4.43(m，1H)，4.16(qd，4H)，2.95(s，2H)，2.77(t，4H)，2.35-2.26(m，9H)，2.05(q，7H)，1.60(d，8H)，1.38-1.26(m，27H)，0.86(t，6H)。
LCMS：Rt：0.546min；MS m/z(ESI)：701.6[M]+。
实施例10脂质纳米颗粒(LNP)的制备和检测
将系列可电离脂质化合物、二硬脂酰基磷脂酰胆碱(DSPC，日本精化株式会社，货号：S01005)、胆固醇(日本精化株式会社，货号：O01001)和二肉豆蔻酰甘油-聚乙二醇2000(DMG-PEG2000，国邦药业，货号：O02005)分别溶于乙醇溶液，继而依据一定的摩尔比例混合制得混合脂质的乙醇溶液(脂质总浓度为12.5mM)。将萤火虫荧光素酶(Fluc)mRNA在50mM柠檬酸盐缓冲液(pH 4.0)中稀释得到mRNA溶液。通过使用微流控装置以流速12mL/min、体积比1：3混合脂质的乙醇溶液和mRNA溶液，以可电离脂质与mRNA的氮磷比为3～15：1制备脂质纳米颗粒。经0.01M的磷酸盐缓冲液(PBS)透析12-24h除去乙醇。最后，脂质纳米颗粒溶液通过0.22μm无菌过滤器过滤，并经超滤浓缩(Amicon-Ultra，MWCO 10KDa)得到使用可电离脂质/DSPC/胆固醇/DMG-PEG2000包封Fluc mRNA的LNP制剂。D-Lin-MC3-DMA阳离子脂质(厂家ApexBio，货号：A8791)做阳性对照，其结构如下：
无特殊说明，可电离脂质/DSPC/胆固醇/DMG-PEG2000的摩尔比为50：10：38.5：1.5。使用Malvern Zetasizer Ultra(动态光散射法)测定各LNP的粒径大小及多分散指数(PDI)；使用Quant-it Ribogreen RNA定量测定试剂盒(ThermoFisher Scientific，货号：R11490)测定LNP的包封率，测试结果见表1。
在本领域中，PDI小于0.3，则说明该LNP制剂中纳米颗粒大小相对均匀；包封率用来说明LNP是否能有效包载mRNA，包封率高于70％，则说明该LNP可有效包载mRNA；琼脂糖凝胶电泳图中条带单一且明亮可说明mRNA结构完整。其中，PDI越趋于0越好，包封率越趋于100％越好。
表1各LNP的粒径、PDI及包封率
由表1可见，各LNP粒径介于60～120nm之间，PDI均小于0.3，包封率均高于80％。
实施例11LNP制剂的体外细胞实验
以每孔1万个293FT细胞铺在96孔板中，过夜培养至细胞贴壁。将实施例10中制备的Fluc-mRNA LNP制剂(按150ng mRNA/孔计)分别加入96孔板的细胞培养液中(替换为无抗生素、含10％胎牛血清(FBS)的DMEM培养基)(厂家：Gibco，货号：C11995500BT)，继续培养24h后弃去细胞上清，100μL细胞裂解液裂解细胞，加D-荧光素钾盐(PerkinElmer，货号：122799，终浓度1mM)和ATP(厂家：ApexBio，货号：C6931，终浓度2mM)，酶标仪检测化学发光强度，测试结果见图1(293FT细胞与各Fluc-mRNA LNP共培养24h后的化学发光强度(n＝2))。
由图1可见，D-Lin-MC3-DMA、GJX001、GJX003、GJX005及GJX006对应的Fluc-mRNALNP均可有效递送Fluc mRNA进入细胞并表达。
Claims (15)
1.一种如式I所示的含氮链状化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，
其中，A1为A2为/>
Y为C1-C6的亚烷基；
m为0-4的整数；
n为0-4的整数；
R1为H、未取代或被1个、2个或3个R1-1取代的C1-C6的烷基或
各个R1-1独立地为氨基、羟基、C1-C6的烷基、C1-C6的烷氧基、
R1-1-1为C1-C6的烷基；R1-1-2为C1-C6的烷基；R1-1-3为C1-C6的烷基；
R1-2为C1-C6的烷基；
R2为H、未取代或被1个、2个或3个R2-1取代的C1-C6的烷基或
各个R2-1独立地为氨基、羟基、C1-C6的烷基、C1-C6的烷氧基、
R2-1-1为C1-C6的烷基；R2-1-2为C1-C6的烷基；R2-1-3为C1-C6的烷基；
R2-2为C1-C6的烷基；
R3为未取代或被1个、2个或3个R3-1取代的C6-C20的烷基、未取代或被1个、2个或3个R3-2取代的C6-C20的烯基；
各个R3-1独立地为C1-C6的烷基、氨基、羟基、卤素、C1-C6的烷氧基、C2-C10的烯基、
R3-1-1为C1-C6的烷基；R3-1-2为C1-C6的烷基；R3-1-3为C1-C6的烷基；
各个R3-2独立地为C1-C6的烷基、氨基、羟基、卤素、C1-C6的烷氧基、C2-C10的烯基、
R3-2-1为C1-C6的烷基；R3-2-2为C1-C6的烷基；R3-2-3为C1-C6的烷基；
R4为未取代或被1个、2个或3个R4-1取代的C6-C20的烷基、未取代或被1个、2个或3个R4-2取代的C6-C20的烯基；
各个R4-1独立地为C1-C6的烷基、氨基、羟基、卤素、C1-C6的烷氧基、C2-C10的烯基、
R4-1-1为C1-C6的烷基；R4-1-2为C1-C6的烷基；R4-1-3为C1-C6的烷基；
各个R4-2独立地为C1-C6的烷基、氨基、羟基、卤素、C1-C6的烷氧基、C2-C10的烯基、
R4-2-1为C1-C6的烷基；R4-2-2为C1-C6的烷基；R4-2-3为C1-C6的烷基。
2.如权利要求1所述的如式I所示的含氮链状化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述如式I所示的含氮链状化合物满足如下条件中的一种或多种：
(1)m为0或1；
(2)n为0或1；
(3)Y中，所述C1-C6的亚烷基为 例如/>
(4)R1中，所述C1-C6的烷基为C1-C4的烷基，优选为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基；例如甲基；
(5)R1-1中，所述C1-C6的烷基为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基；
(6)R1-1中，所述C1-C6的烷氧基为C1-C4的烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基或叔丁氧基；
(7)R1-1-1中，所述C1-C6的烷基为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基；
(8)R1-1-2中，所述C1-C6的烷基为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基；
(9)R1-1-3中，所述C1-C6的烷基为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基；
(10)R1-2中，所述C1-C6的烷基为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基；
(11)R2中，所述C1-C6的烷基为C1-C4的烷基，优选为甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基；例如甲基；
(12)R2-1中，所述C1-C6的烷基为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基；
(13)R2-1中，所述C1-C6的烷氧基为C1-C4的烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基或叔丁氧基；
(14)R2-1-1中，所述C1-C6的烷基为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基；
(15)R2-1-2中，所述C1-C6的烷基为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基；
(16)R2-1-3中，所述C1-C6的烷基为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基；
(17)R2-2中，所述C1-C6的烷基为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基；
(18)R3中，所述C6-C20的烷基为C10-C18的烷基，优选C15-C18的烷基，更优选直链烷基，例如
(19)R3中，所述C6-C20的烯基为C10-C18的烯基，优选为C15-C18的烯基，更优选为直链烯基；所述C6-C20的烯基可含有1到4个双键，例如
(20)R3-1中，所述C1-C6的烷基为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基；
(21)R3-1中，所述C1-C6的烷氧基为C1-C4的烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基或叔丁氧基；
(22)R3-1中，所述卤素为氟、氯、溴或碘；
(23)R3-1中，所述C2-C10的烯基为C2-C6的烯基，优选为直链烯基；
(24)R3-1-1中，所述C1-C6的烷基为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基；
(25)R3-1-2中，所述C1-C6的烷基为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基；
(26)R3-1-3中，所述C1-C6的烷基为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基；
(27)R3-2中，所述卤素为氟、氯、溴或碘；
(28)R3-2中，所述C1-C6的烷基为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基；
(29)R3-2中，所述C1-C6的烷氧基为C1-C4的烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基或叔丁氧基；
(30)R3-2中，所述卤素为氟、氯、溴或碘；
(31)R3-2中，所述C2-C10的烯基为C2-C6的烯基，优选为直链烯基；
(32)R3-2-1中，所述C1-C6的烷基为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基；
(33)R3-2-2中，所述C1-C6的烷基为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基；
(34)R3-2-3中，所述C1-C6的烷基为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基；
(35)R4中，所述C6-C20的烷基为C10-C18的烷基，优选C15-C18的烷基，更优选直链烷基，例如
(36)R4中，所述C6-C20的烯基为C10-C18的烯基，优选为C15-C18的烯基，更优选为直链烯基；所述C6-C20的烯基可含有1到4个双键，例如
(37)R4-1中，所述C1-C6的烷基为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基；
(38)R4-1中，所述C1-C6的烷氧基为C1-C4的烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基或叔丁氧基；
(39)R4-1中，所述卤素为氟、氯、溴或碘；
(40)R4-1中，所述C2-C10的烯基为C2-C6的烯基，优选直链烯基；
(41)R4-1-1中，所述C1-C6的烷基为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基；
(42)R4-1-2中，所述C1-C6的烷基为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基；
(43)R4-1-3中，所述C1-C6的烷基为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基；
(44)R4-2中，所述卤素为氟、氯、溴或碘；
(45)R4-2中，所述C1-C6的烷基为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基；
(46)R4-2中，所述C1-C6的烷氧基为C1-C4的烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基或叔丁氧基；
(47)R4-2中，所述卤素为氟、氯、溴或碘；
(48)R4-2中，所述C2-C10的烯基为C2-C6的烯基，优选为直链烯基；
(49)R4-2-1中，所述C1-C6的烷基为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基；
(50)R4-2-2中，所述C1-C6的烷基为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基；
和(51)R4-2-3中，所述C1-C6的烷基为C1-C4的烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基或仲丁基。
3.如权利要求1所述的如式I所示的含氮链状化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述如式I所示的含氮链状化合物为如式Ia、Ib、Ic、Id或Ie所示的化合物
4.如权利要求1所述的如式I所示的含氮链状化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述如式I所示的含氮链状化合物满足如下条件中的一种或多种：
(1)m和n相同；
(2)R1和R2相同；
和(3)R3和R4相同。
5.如权利要求1所述的如式I所示的含氮链状化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述如式I所示的含氮链状化合物满足如下条件中的一种或多种：
(1)R1为C1-C4的烷基，例如甲基；
(2)R2为C1-C4的烷基，例如甲基；
(3)R3为C10-C18的烷基或C10-C18的烯基，优选为C15-C18的烷基或C15-C18的烯基，例如
(4)R4为C10-C18的烷基或C10-C18的烯基，优选为C15-C18的烷基或C15-C18的烯基，例如
(5)Y为C1-C4的亚烷基，例如
(6)A1为其中a与CH2相连，b与R3相连；
和(7)A2为其中a与CH2相连，b与R4相连；
较佳地，所述如式I所示的含氮链状化合物为方案1或方案2：
方案1、
R1为C1-C4的烷基；R2为C1-C4的烷基；
R3为C10-C18的烷基或C10-C18的烯基；
R4为C10-C18的烷基或C10-C18的烯基；
Y为C1-C4的亚烷基；
方案2、
R1为C1-C4的烷基；R2为C1-C4的烷基；
R3为C15-C18的烷基或C15-C18的烯基；
R4为C15-C18的烷基或C15-C18的烯基；
Y为C1-C4的亚烷基。
6.如权利要求1-5中任一项所述的如式I所示的含氮链状化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述如式I所示的含氮链状化合物满足如下条件中的一种或多种：
(1)Y为
(2)R1为甲基；
(3)R2为甲基；
(4)R3为
和(5)R4为
7.如权利要求1所述的如式I所示的含氮链状化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述如式I所示的含氮链状化合物为如下任一化合物：
8.一种如式I所示的含氮链状化合物的制备方法，其特征在于，其包括如下步骤：溶剂中，在碱和缩合剂的存在下，如式I-1所示的化合物与如式I-2所示的化合物进行如下式所示的缩合反应，即可；
其中，A1、A2、m、n、R1、R2、R3、R4和Y如权利要求1-7任一项所述；
较佳地，所述如式I所示的含氮链状化合物的制备方法满足如下条件中的一种或多种：
(1)所述缩合反应中，所述如式I-2所示的化合物与所述如式I-1所示的化合物的摩尔比为1：(1-1.2)，例如1:1或1:1.08；
(2)所述缩合反应中，所述缩合剂为1-羟基苯并三唑、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯中的一种或多种，例如“1-羟基苯并三唑和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐”或2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯；
(3)所述缩合反应中，所述如式I-2所示的化合物与所述缩合剂的摩尔比为1:(1-3)，例如1:2.56、1:1.2或1:1.3；
(4)所述缩合反应中，所述碱为有机碱，例如三乙胺或N,N-二异丙基乙胺；
(5)所述缩合反应中，所述如式I-2所示的化合物与所述碱的摩尔比为1:(2-4)，例如1:3；
(6)所述缩合反应中，所述溶剂为卤代烃类溶剂，例如二氯甲烷；
(7)所述缩合反应中，所述如式I-2所示的化合物与所述溶剂的质量体积比为30mg/mL-60mg/mL，例如50mg/mL或40mg/mL；
(8)所述缩合反应中，所述缩合反应的反应温度为室温；
(9)所述缩合反应中，所述缩合反应的反应时间为10h或≥12h；
和(10)所述缩合反应还包括后处理，所述后处理步骤包括以稀释、萃取、溶液洗涤、水洗、干燥、浓缩、拌样和柱层析中的一种或多种。
9.一种脂质载体，其特征在于，其包括物质Z，所述物质Z为如权利要求1-7任一项所述的如式I所示化合物或其药学可接受的盐。
10.如权利要求9所述的脂质载体，其特征在于，所述脂质载体满足如下条件中的一种或多种：
(1)所述脂质载体还包括稀释剂；
(2)所述脂质载体还包括磷脂；
(3)所述脂质载体还包括PEG脂质；
和(4)所述脂质载体还包括甾醇。
11.如权利要求10所述的脂质载体，其特征在于，所述脂质载体满足如下条件中的一种或多种：
(1)所述稀释剂为磷酸盐缓冲液或Tris缓冲液；
(2)所述磷脂为具有带电极性端和脂肪链非极性端的磷脂类分子，例如二硬脂酰基磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷酸胆碱、二油酰磷酸胆碱、棕榈酰磷酸胆碱、1,2-二硬脂酰磷酸胆碱、二十一烷酰磷酸胆碱或棕榈酰磷酸胆碱；
(3)所述PEG脂质为具有聚乙二醇亲水端修饰的脂质分子；较佳地，所述PEG脂质优选选自PEG修饰的磷脂酰乙醇胺、PEG修饰的磷脂酸、PEG修饰的神经酰胺、PEG修饰的二烷基胺、PEG修饰的二酰基甘油和PEG修饰的二烷基甘油中的一种或多种，例如所述PEG脂质为具PEG修饰的二肉豆蔻酰甘油；
(4)所述甾醇包括动物性、植物性或菌类甾醇；较佳地，所述甾醇选自胆固醇、谷甾醇、麦角甾醇、菜油甾醇、豆甾醇、芸苔甾醇、番茄碱、熊果酸和α-生育酚中的一种或多种，例如胆固醇；
(5)所述脂质载体中，所述物质Z与甾醇的摩尔比为0.5～5:1，优选为0.5～3:1，例如0.6～2:1；
(6)所述脂质载体中，所述物质Z与磷脂的摩尔比为1～15:1，优选为2～8:1，例如3～6:1；
(7)所述脂质载体中，所述物质Z与PEG脂质的摩尔比为20～130:1，优选为20～80:1，例如20～40:1；
(8)所述物质Z的摩尔含量为30mol％至60mol％；
(9)所述磷脂的摩尔含量为0mol％至30mol％；
(10)所述甾醇的摩尔含量为15mol％至55mol％；
和(11)所述PEG脂质的摩尔含量为0mol％至10mol％；
较佳地，所述脂质载体由所述物质Z、所述稀释剂、所述磷脂、所述PEG脂质和所述甾醇组成。
12.一种脂质纳米颗粒，其特征在于，其包括治疗剂和/或预防剂以及如权利要求9-11任一项所述的脂质载体。
13.如权利要求12所述的脂质纳米颗粒，其特征在于，所述脂质纳米颗粒满足如下条件中的一种或多种：
(1)所述治疗剂和/或预防剂为一种或两种及以上核酸；较佳地，所述治疗剂和/或预防剂为单链脱氧核糖核酸、双链DNA、小干扰RNA、不对称双链小干扰RNA、微小RNA、小发夹RNA、环状RNA、转运RNA或信使RNA，优选为mRNA，例如萤火虫荧光素酶mRNA；
(2)所述脂质纳米颗粒中氮磷比为2:1～30:1，优选为2:1～20:1，例如3:1～20:1，还例如3:1～16:1；
(3)所述脂质纳米颗粒中，所述脂质载体与治疗剂和/或预防剂的质量比为3～80:1，优选为10～50:1
(4)所述脂质纳米颗粒的粒径为10～250nm，例如为10～200nm，40～150nm，或50～250nm，或例如60～150nm；
和(5)所述脂质纳米颗粒中，所述脂质载体包裹所述治疗剂和/或预防剂。
14.一种组合物，其特征在于，其包括物质Z，所述物质Z为如权利要求1-7任一项所述的如式I所示化合物或其药学可接受的盐。
15.如权利要求14所述的组合物，其特征在于，所述组合物还包括稀释剂、磷脂、PEG脂质、甾醇和治疗剂和/或预防剂中的一种或多种；
较佳地，所述组合物中，所述稀释剂、磷脂、PEG脂质和甾醇如权利要求11所述；和/或，所述治疗剂和/或预防剂如权利要求13所述；
更佳地，所述组合物中，所述物质Z与所述稀释剂、磷脂、PEG脂质和甾醇中的一种或多种形成如权利要求9-11任一项所述的脂质载体；和/或，所述组合物中，所述治疗剂和/或预防剂的包封率为至少50％，优选为至少为70％；
还佳地，所述组合物中，所述脂质载体与所述治疗剂和/或预防剂形成如权利要求12或13所述的脂质纳米颗粒；和/或，所述组合物中，所述组合物的多分散指数为不高于0.5，例如不高于0.3。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2022109690929 | 2022-08-12 | ||
| CN202210969092 | 2022-08-12 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN117285438A true CN117285438A (zh) | 2023-12-26 |
Family
ID=89247019
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202311016482.5A Pending CN117285438A (zh) | 2022-08-12 | 2023-08-11 | 含氮链状化合物、其制备方法、包含其的组合物和应用 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN117285438A (zh) |
| WO (1) | WO2024032754A1 (zh) |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE19521412A1 (de) * | 1995-06-14 | 1996-12-19 | Boehringer Mannheim Gmbh | Neue kationische und polykationische Amphiphile, diese enthaltende Reagenzien und deren Verwendung |
| DE19631189A1 (de) * | 1996-08-02 | 1998-02-05 | Max Delbrueck Centrum | Neuartige kationische Amphiphile für den liposomalen Gentransfer |
| PT3313449T (pt) * | 2015-06-24 | 2020-10-30 | Nitto Denko Corp | Compostos ionizáveis e composições e suas utilizações |
-
2023
- 2023-08-11 CN CN202311016482.5A patent/CN117285438A/zh active Pending
- 2023-08-11 WO PCT/CN2023/112483 patent/WO2024032754A1/zh unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2024032754A1 (zh) | 2024-02-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP3558943B1 (en) | Ionizable cationic lipid for rna delivery | |
| EP3397614B1 (en) | Ionizable cationic lipid | |
| EP1830888B1 (en) | Lipid complexes coated with peg and their use | |
| WO2023133946A1 (zh) | 一种阳离子脂质化合物、包含其的组合物及用途 | |
| ES2561812T3 (es) | Composición para inhibir la expresión de un gen diana | |
| CN114213295B (zh) | 一种阳离子化合物、制备方法及其复合物和用途 | |
| JP7423518B2 (ja) | 生物学的活性分子を送達するための融合性化合物 | |
| AU2022219902A1 (en) | Polyoxazoline-lipid conjugates and lipid nanoparticles and pharmaceutical compositions including same | |
| JP5991966B2 (ja) | ｐＨ応答性ペプチドを含むナノ粒子 | |
| WO2024032753A1 (zh) | 含氮链状化合物、其制备方法、包含其的组合物和应用 | |
| CN108779063B (zh) | 用于递送生物活性物质至细胞的脂质和复合物 | |
| EP2802556B1 (en) | Lipopolyamines of spermine type for construction of liposomal transfection systems | |
| CN117285438A (zh) | 含氮链状化合物、其制备方法、包含其的组合物和应用 | |
| EP3153172A1 (en) | Ckap5-gene-silencing rnai pharmaceutical composition | |
| CA3214023A1 (en) | Dendritic architectures as nonviral vectors in gene delivery | |
| JP6388700B2 (ja) | 脂質粒子の製造法および脂質粒子を有する核酸送達キャリア | |
| EP3521270B1 (en) | Cationic lipid compound | |
| CN117534584A (zh) | 含氮链状化合物、制备方法、包含其的组合物和应用 | |
| CN117229160B (zh) | 三酯类阳离子脂质化合物、包含其的组合物及用途 | |
| WO2024067639A1 (zh) | 一种转染效率高的可电离脂质化合物及其应用 | |
| WO2016010111A1 (ja) | 脂質粒子の製造法および脂質粒子を有する核酸送達キャリア | |
| EP4368609A1 (en) | Cationic lipids and uses thereof | |
| CN117964514A (zh) | 可电离脂质化合物及其制备方法和应用 | |
| CN117486832A (zh) | 一种能够实现早期溶酶体逃逸的用于rna递送的阳离子脂质分子 | |
| CN117843712A (zh) | 一种小肽脂质纳米递送系统及其应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |