CN117243833A - 一种超分子酒石酸溶剂在制备活性分子促渗透载体中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种超分子酒石酸溶剂在制备活性分子促渗透载体中的应用，所述超分子酒石酸溶剂由甜菜碱与酒石酸反应得到。本发明创造性地开发了一种既能将活性分子递送到皮肤深层发挥作用，又不会对皮肤产生刺激等不良影响的递送载体，即是由甜菜碱与酒石酸反应得到的超分子酒石酸溶剂，该超分子酒石酸溶剂具有良好的皮肤促渗透作用，且安全温和，为活性分子的高效递送和在化妆品中的应用提供了新的思路和策略，这也是超分子酒石酸溶剂的一项新应用。

Description

一种超分子酒石酸溶剂在制备活性分子促渗透载体中的应用

技术领域

本发明属于化妆品技术领域，涉及一种超分子酒石酸溶剂在制备活性分子促渗透载体中的应用，具体涉及一种超分子酒石酸溶剂在制备活性分子促渗透载体中的应用以及一种超分子改性活性肽。

背景技术

肽是α-氨基酸以肽键连接在一起而形成的化合物，它也是蛋白质水解的中间产物。化妆品中应用的肽多数为二肽至十肽之间的小分子肽。肽与生物体内别的物质相比，最大特点是具有极强的活性和多样性。肽在生物体的生长、发育和代谢中起着重要的作用，在皮肤自然老化和护理过程中也起着关键的调控作用。比如说，常见的化妆品肽如：棕榈酰五肽-4：刺激胶原蛋白、弹力纤维和透明质酸生成，提高肌肤的含水量和锁水度；乙酰基六肽-8：是一种神经递质抑制类胜肽，抗皱活性高，可使肌肉收缩减弱，防止皱纹形成。活性肽化合物相较于大分子蛋白，因其分子量较小，会比较容易经皮递送。

其中的蓝铜胜肽，是人类最早发现的具有美容作用的多肽，由三个氨基酸及一个铜离子所组成的微肽。蓝铜胜肽能够进入皮肤肌底，在抗老、促进胶原蛋白合成、修护皮肤、抗炎修红、抗氧化提亮等方面都有卓越的功效。同时，蓝铜胜肽为人体本身含有成分，温和无刺激，适合任何皮肤。但是蓝铜胜肽最大的缺陷在于它的不稳定性，容易被氧化，释放铜离子，失去作用，导致其递送率不高。

虽然活性肽具有多种出色的生物活性，因其自身的分子量小的原因，较之其他蛋白类等大分子物质容易被皮肤吸收，但因其的不稳定性和排他性，以至于难以发挥其特有的功效。因此，开发一种既能将活性肽递送到皮肤深层发挥作用，又不会对皮肤产生刺激等不良影响的递送载体具有非常重要的应用价值。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种超分子酒石酸溶剂在制备活性分子促渗透载体中的应用，具体提供一种超分子酒石酸溶剂在制备活性分子促渗透载体中的应用以及一种超分子改性活性肽。该超分子酒石酸溶剂可以作为递送载体将活性分子递送到皮肤深层发挥作用，又不会对皮肤产生刺激。

为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：

第一方面，本发明提供一种超分子酒石酸溶剂在制备活性分子促渗透载体中的应用，所述超分子酒石酸溶剂由甜菜碱与酒石酸反应得到。

本发明创造性地开发了一种既能将活性分子递送到皮肤深层发挥作用，又不会对皮肤产生刺激等不良影响的递送载体，即是由甜菜碱与酒石酸反应得到的超分子酒石酸溶剂，该超分子酒石酸溶剂具有良好的皮肤促渗透作用，且安全温和，为活性分子的高效递送和在化妆品中的应用提供了新的思路和策略，这也是超分子酒石酸溶剂的一项新应用。

较之其他体系中氢键受体，本发明中使用的甜菜碱是一种广泛存在于动植物中的物质，是代谢的中间体，有着重要的生理功能，是很高的生物兼容性，同时是两性离子，极易溶于水，性质稳定。例如，典型的氢键受体肉碱，被证明会增加与心脑血管疾病风险相关物质的产生有关，同时在成年人当中会形成剂量依赖。较之其他体系中氢键供体，本发明中使用的酒石酸存在于多种植物中，是葡萄酒中主要的有机酸之一，同时其酸性较强，构建的超分子构型更加稳定。

优选地，所述甜菜碱与酒石酸的摩尔比为1:6-6:1，例如1:6、1:5、1:4、1:3、1:2、1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1等，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。

优选地，所述超分子酒石酸溶剂的制备方法包括：将甜菜碱与酒石酸分别溶于溶剂中，在搅拌状态下将酒石酸溶液滴入甜菜碱溶液中，反应，除去溶剂，即得。

本发明所涉及的超分子酒石酸溶剂的制备方法简单易操作，且适合大规模化的工业生产。其按照下述具体工艺参数进行制备时，得到的产物具有更稳定和更显著的促渗透作用。

优选地，所述反应在惰性气体保护下进行，所述惰性气体包括氩气、氦气或氮气。

优选地，所述反应在20-80℃(例如20℃、30℃、40℃、50℃、60℃、70℃、80℃等)水浴中进行5-24h(例如5h、10h、15h、18h、20h、24h等)；该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。

优选地，所述除去溶剂的方式为真空干燥。

优选地，所述活性分子包括活性肽和/或胶原蛋白。

优选地，所述活性肽包括蓝铜肽、棕榈酰五肽-4、乙酰基六肽-8、棕榈酰五肽-3、棕榈酰三肽-1、棕榈酰六肽等。

第二方面，本发明提供一种超分子改性活性肽，所述超分子改性活性肽包括超分子酒石酸溶剂和包裹其中的活性肽，所述超分子酒石酸溶剂由甜菜碱与酒石酸反应得到。

本发明所涉及的超分子改性活性肽能够克服活性肽经皮递送效率低下、生物利用率低的问题，能够将活性肽顺利递送到皮肤深层，提高生物利用度，且其具有良好的生物安全性和稳定性，为活性肽在化妆品领域的广阔应用提供了简单且成本低廉的有效手段。

优选地，所述超分子改性活性肽由包括如下的制备方法制得：

将活性肽滴入超分子酒石酸溶剂中，混合，即得。

优选地，所述混合在搅拌状态15-40℃(例如15℃、18℃、20℃、25℃、30℃、40℃等)下进行1-20h(例如1h、4h、6h、8h、10h、15h、20h等)；该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。

优选地，所述混合在惰性气体保护下进行，所述惰性气体包括氩气、氦气或氮气。

第三方面，本发明提供如第二方面所述的超分子改性活性肽在制备化妆品中的应用。

相对于现有技术，本发明具有以下有益效果：

本发明创造性地开发了一种既能将活性分子递送到皮肤深层发挥作用，又不会对皮肤产生刺激等不良影响的递送载体，即是由甜菜碱与酒石酸反应得到的超分子酒石酸溶剂，该超分子酒石酸溶剂具有良好的皮肤促渗透作用，且安全温和，为活性分子的高效递送和在化妆品中的应用提供了新的思路和策略，这也是超分子酒石酸溶剂的一项新应用。

附图说明

图1是超分子酒石酸溶剂、甜菜碱和酒石酸的红外光谱分析图；

图2是超分子酒石酸溶剂、活性肽和超分子改性活性肽的抗氧化性能评价结果图；

图3是超分子酒石酸溶剂、活性肽的透皮性能评价结果图。

具体实施方式

下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了，所述实施例仅仅是帮助理解本发明，不应视为对本发明的具体限制。

下述涉及的活性肽(蓝铜肽)购自于深圳市萱嘉生物科技有限公司。其他原料均通过普通的市售途径购买获得。

实施例1

本实施例提供一种超分子酒石酸溶剂和一种超分子改性活性肽，制备方法如下：

(1)称取0.01mol的甜菜碱溶于水中，并另称取0.01mol的酒石酸溶于水中，将酒石酸溶液混合均匀后转移至滴液漏斗中，在25℃搅拌状态下逐滴滴入甜菜碱溶液中，滴加完毕后，在氮气保护下转移到30℃水浴中反应24h，反应结束后真空干燥12h去除水，得到超分子酒石酸溶剂。对得到的超分子酒石酸溶剂、甜菜碱和酒石酸分别进行红外光谱分析，结果如图1所示。

(2)在氮气氛围下，将上述超分子酒石酸溶剂溶于水后滴入0.01mg活性肽，在25℃下搅拌4h，浓缩干燥6h，即可得到超分子改性活性肽。

实施例2

本实施例提供一种超分子酒石酸溶剂和一种超分子改性活性肽，制备方法如下：

(1)称取0.01mol的甜菜碱溶于水中，并另称取0.03mol的酒石酸溶于水中，将所述酒石酸溶液混合均匀后转移至滴液漏斗中，在25℃搅拌状态下逐滴滴入甜菜碱溶液中，滴加完毕后，在氩气保护下转移到40℃水浴中反应18h，反应结束后真空干燥24h去除水，得到超分子酒石酸溶剂。

(2)在氩气氛围下，将上述超分子酒石酸溶剂溶于水后滴入0.01mg活性肽，在35℃下搅拌6h，浓缩干燥6h，即可得到超分子改性活性肽。

实施例3

本实施例提供一种超分子酒石酸溶剂和一种超分子改性活性肽，制备方法如下：

(1)称取0.01mol的甜菜碱溶于水中，并另称取0.06mol的酒石酸溶于水中，将所述酒石酸溶液混合均匀后转移至滴液漏斗中，在25℃搅拌状态下逐滴滴入甜菜碱溶液中，滴加完毕后，在氩气保护下转移到50℃水浴中反应12h，反应结束后真空干燥24h去除水，得到超分子酒石酸溶剂。

(2)在氩气氛围下，将上述超分子酒石酸溶剂溶于水后滴入0.01mg活性肽，在20℃下搅拌15h，浓缩干燥6h，即可得到超分子改性活性肽。

实施例4

本实施例提供一种超分子酒石酸溶剂和一种超分子改性活性肽，制备方法如下：

(1)称取0.03mol的甜菜碱溶于水中，并另称取0.01mol的酒石酸溶于水中，将所述酒石酸溶液混合均匀后转移至滴液漏斗中，在25℃搅拌状态下逐滴滴入甜菜碱溶液中，滴加完毕后，在氩气保护下转移到60℃水浴中反应5h，反应结束后真空干燥24h去除水，得到超分子酒石酸溶剂。

(2)在氩气氛围下，将上述超分子酒石酸溶剂溶于水后滴入0.01mg活性肽，在30℃下搅拌8h，浓缩干燥6h，即可得到超分子改性活性肽。

实施例5

本实施例提供一种超分子酒石酸溶剂和一种超分子改性活性肽，制备方法如下：

(1)称取0.06mol的甜菜碱溶于水中，并另称取0.01mol的酒石酸溶于水中，将所述酒石酸溶液混合均匀后转移至滴液漏斗中，在25℃搅拌状态下逐滴滴入甜菜碱溶液中，滴加完毕后，在氩气保护下转移到20℃水浴中反应24h，反应结束后真空干燥24h去除水，得到超分子酒石酸溶剂。

(2)在氩气氛围下，将上述超分子酒石酸溶剂溶于水后滴入0.01mg活性肽，在25℃下搅拌10h，浓缩干燥6h，即可得到超分子改性活性肽。

对比例1

本对比例提供单纯的超分子酒石酸溶剂，其制备方法如下：

称取0.01mol的甜菜碱溶于水中，并另称取0.01mol的酒石酸溶于水中，将酒石酸溶液混合均匀后转移至滴液漏斗中，在25℃搅拌状态下逐滴滴入甜菜碱溶液中，滴加完毕后，在氮气保护下转移到30℃水浴中反应24h，反应结束后真空干燥12h去除水，得到超分子酒石酸溶剂。

对比例2

本对比例提供单纯的活性肽。

测试例1

抗氧化测试：

对实施例1和对比例1-2制得的样品进行抗氧化测试，具体方法为：

实验仪器及试剂：

主要仪器：分光光度计SpectronicGENESYS-5，美国Thermo公司。

溶液配制：首先取DPPH 1mg溶于约20mL无水乙醇中，超声5min，充分振摇，使上下各部分均匀。取1mL该DPPH溶液，在517nm处测A值，使A＝1.2-1.3之间；再配制各样品溶液：将实施例1和对比例1-2的样品分别用无水乙醇稀释，配制浓度梯度相同的系列样品溶液。

具体方法：各组试验加样体系如下表所示，将反应溶液摇匀后放置于37℃水浴加热15min后取出，用紫外-可见分光光度计测定溶液的吸光度值。

试剂	C1/mL	C2/mL	C3/mL
				DPPH溶液	2	2	0
样品溶液	0	2	2
				无水甲醇	2	0	2

DPPH自由基清除率的计算公式如下式所示：

DPPH自由基清除率＝1-(A2-A3)/A1×100％

式中，A1、A2、A3分别为C1、C2、C3的吸光度值。

结果如图2所示，由图可知，在相同浓度下，本发明的超分子改性活性肽比单纯的超分子酒石酸溶剂或单纯的蓝铜肽具有更好的抗氧化效果，这说明本发明所涉及的超分子酒石酸溶剂和蓝铜肽分别具有抗氧化作用，且超分子酒石酸溶剂和蓝铜肽在抗氧化性上还具有显著的协同增效作用。

测试例2

皮肤渗透测试：

对实施例1和对比例2制得的样品进行皮肤渗透测试，具体方法为：

以离体迷你香猪皮肤为模型，通过Franz扩散池，在32±0.1℃条件下，以350r/min进行体外皮肤渗透实验，检测活性肽在24h时的累积透皮量(μg/cm²)，以此评价各组样品的皮肤渗透性能。

结果如图3所示，由图可知，本发明所涉及的超分子酒石酸溶剂能够大幅度提高活性肽的经皮渗透量，其中活性肽在皮肤中的滞留量显著地大于活性肽单体水溶液。

测试例3

生物毒性评价试验：

将实施例1-5和对比例1制得的样品在紫外光下消毒。将1×10⁴对数生长期的NHF细胞接种于96孔板中。加入不同浓度(μg/mL)的各组样品溶液，孵育24h后，采用MTT法检测培养24h后的细胞活力(％)。结果如表1所示。

表1

组别

12.5μg/mL

25μg/mL

50μg/mL

100μg/mL

200μg/mL

400μg/mL

800μg/mL

实施例1

96.8％

97.2％

97.9％

99.1％

99.5％

97.2％

93.4％

实施例2

98.3％

98.4％

97.6％

97.9％

96.3％

97.2％

94.7％

实施例3

99.2％

96.2％

98.3％

98.8％

97.4％

96.2％

94.2％

实施例4

97.0％

97.9％

98.1％

97.7％

99.2％

98.2％

95.3％

实施例5

96.6％

97.1％

98.8％

97.5％

97.6％

97.3％

93.9％

对比例1

95.0％

95.6％

94.5％

95.1％

94.7％

95.2％

93.0％

由表1数据可知，本发明所涉及的超分子酒石酸溶剂和超分子改性活性肽均具有很好的生物安全性，温和无刺激。

申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的一种超分子酒石酸溶剂在制备活性分子促渗透载体中的应用，但本发明并不局限于上述实施例，即不意味着本发明必须依赖上述实施例才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。

以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种超分子酒石酸溶剂在制备活性分子促渗透载体中的应用，其特征在于，所述超分子酒石酸溶剂由甜菜碱与酒石酸反应得到。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述甜菜碱与酒石酸的摩尔比为1:6-6:1。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述超分子酒石酸溶剂的制备方法包括：将甜菜碱与酒石酸分别溶于溶剂中，在搅拌状态下将酒石酸溶液滴入甜菜碱溶液中，反应，除去溶剂，即得。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述反应在惰性气体保护下进行，所述惰性气体包括氩气、氦气或氮气；

优选地，所述反应在20-80℃水浴中进行5-24h；

优选地，所述除去溶剂的方式为真空干燥。

5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述活性分子包括活性肽和/或胶原蛋白。

6.一种超分子改性活性肽，其特征在于，所述超分子改性活性肽包括超分子酒石酸溶剂和包裹其中的活性肽，所述超分子酒石酸溶剂由甜菜碱与酒石酸反应得到。

7.根据权利要求6所述的超分子改性活性肽，其特征在于，所述超分子改性活性肽由包括如下的制备方法制得：

将活性肽滴入超分子酒石酸溶剂中，混合，即得。

8.根据权利要求7所述的超分子改性活性肽，其特征在于，所述混合在搅拌状态15-40℃下进行1-20h。

9.根据权利要求7所述的超分子改性活性肽，其特征在于，所述混合在惰性气体保护下进行，所述惰性气体包括氩气、氦气或氮气。

10.如权利要求6-9中任一项所述的超分子改性活性肽在制备化妆品中的应用。