CN117179234B - 一种即食方便的食品组合物及其制备方法 - Google Patents

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CN117179234B CN202311476781.7A CN202311476781A CN117179234B CN 117179234 B CN117179234 B CN 117179234B CN 202311476781 A CN202311476781 A CN 202311476781A CN 117179234 B CN117179234 B CN 117179234B
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Abstract

本发明属于营养食品技术领域,具体公开一种即食方便的食品组合物及其制备方法。该食品组合物按重量份数计,包括膨化大米粉35‑55份、麦芽糊精10‑15份、植物脂肪粉5‑10份、鹰嘴豆蛋白5‑10份,浓缩乳清蛋白5‑10份、大豆分离蛋白5‑10份、全脂乳粉3‑5份、聚葡萄糖3‑5份、鸡全蛋粉3‑5份、异麦芽酮糖醇2‑4份、玉米粉1‑3份、燕麦粉1‑3份、复合矿物质1‑2份、氯化钾0.05‑0.15份、食用盐0.05‑0.1份、芝麻粉0.5‑2份、番茄粉0.5‑2份、南瓜粉0.5‑2份、胡萝卜粉0.5‑2份、复合维生素0.2‑0.4份。该食品组合物能提高消化吸收率,促进肠道有益菌群增殖。

Description

一种即食方便的食品组合物及其制备方法
技术领域
本发明属于营养食品技术领域,具体来说,涉及一种即食方便的食品组合物及其制备方法。
背景技术
肠道是消化和吸收的主要场所,肠道亚健康对生活造成很大影响。一些在平时状态下无明显状况的患者,疾病状态下会凸显出肠道疾病,如剖宫产手术、腹部手术、老年人群等。一般来说,造成患者肠道不适的原因通常有以下几方面:腹部手术和药物治疗使胃肠蠕动减少,麻醉药物本身对胃肠道功能有一定的抑制作用,止痛和镇静类药物含有的药物成分引起患者便秘;肠道内细菌于肠腔内发酵,容易产生过多气体,引起患者腹胀,抗生素长期使用易引起肠道菌群失调;消化系统退行性变化,小肠茸毛变短,吸收面积减小,胰腺逐渐萎缩,间质纤维结缔组织增生,小肠黏膜上皮细胞和刷状缘损害使小肠吸收不良等。肠道不适会引起营养摄入不足,又会进一步导致肠道功能退化。如今老年人群营养与健康状况面临严峻挑战,患病后尤其是住院患者的营养不足高发,会导致疾病负担沉重。
现有技术中报道多种营养组合物,用以满足人们的营养需求。例如专利申请CN113662196A公开了一种用于改善肠道健康的营养组合物,涉及婴幼儿营养组合物,具体的是涉及一种能够改善婴幼儿肠道健康和/或改善婴幼儿肠道耐受性和/或减少婴幼儿湿疹发生的营养组合物、婴幼儿配方食品。婴幼儿营养组合物包括低聚半乳糖、1,3-二油酸-2-棕榈酸甘油三酯、水解乳清蛋白及其他营养成分。但是该营养组合物只适合婴幼儿,并不适合各种场景、各种人群的使用。再比如专利申请CN108294110A公开了一种含多种微量营养素的辅食营养补充品配方,包括以下成分(按质量百分比):大豆粉20-30%、全脂乳粉15-25%、干酪素10-20%、乳糖7-10%、乳清粉6-9%、碳酸钙5-8%、葡萄糖酸锌4-7%、盐酸硫胺3-6%和核黄素2-5%,其余为叶酸;该配方营养价值高,有助于儿童正常发育,提高儿童免疫力,有利于健康成长。但是该配方中使用大豆粉和乳糖,能够引起胀气和腹泻,对于疾病患者肠道耐受性差的特殊时期,可能会加重患者的肠道功能,进一步加重患者的疾病。
肠道生态系统与日常的饮食成分有关,并且肠道生态系统中各微生物群中的相互作用都是非常复杂的。因此,当前需要一种能够适用各种人群和场景、提高消化吸收率、促进肠道有益菌群增殖的即食方便食品组合物。
发明内容
为了解决上述技术问题,本发明提供了一种即食方便的食品组合物及其制备方法,能够适用各种人群和场景,能够提高消化吸收、促进肠道有益菌群增值,兼顾营养成分的全面性和均衡性。
为了实现上述目的,本发明采用以下技术方案:
一方面,本发明提供了一种即食方便的食品组合物,按重量份数计,包括以下组分:膨化大米粉35-55份、麦芽糊精10-15份、植物脂肪粉5-10份、鹰嘴豆蛋白5-10份,浓缩乳清蛋白5-10份、大豆分离蛋白5-10份、全脂乳粉3-5份、聚葡萄糖3-5份、鸡全蛋粉3-5份、异麦芽酮糖醇2-4份、玉米粉1-3份、燕麦粉1-3份、复合矿物质1-2份、氯化钾0.05-0.15份、食用盐0.05-0.1份、芝麻粉0.5-2份、番茄粉0.5-2份、南瓜粉0.5-2份、胡萝卜粉0.5-2份、复合维生素0.2-0.4份。
具体地,所述复合维生素包括:醋酸视黄酯(醋酸维生素A)、胆钙化醇(维生素D3)、dl-α-醋酸生育酚(维生素E)、L-抗坏血酸(维生素C)、盐酸硫胺素(维生素B1)、核黄素(维生素B2)、盐酸吡哆醇(维生素B6)、氰钴胺(维生素B12)、烟酸和叶酸(碟酰谷氨酸)。
优选地,所述膨化大米粉、浓缩乳清蛋白和鹰嘴豆蛋白的重量比为40-52:5-10:5-8。
进一步优选地,所述膨化大米粉、浓缩乳清蛋白和鹰嘴豆蛋白的重量比为40-52:5-10:8。
最优选地,所述膨化大米粉、浓缩乳清蛋白和鹰嘴豆蛋白的重量比为45:8:8。
本发明还提供了一种所述即食方便的食品组合物的制备方法,包括以下步骤:
S1、大米粉膨化处理:对大米进行炒制、粉碎、拌粉、挤压膨化和灭菌处理,得到膨化大米粉;
S2、取配方量的玉米粉、燕麦粉、复合矿物质、氯化钾、食用盐、芝麻粉、番茄粉、南瓜粉、胡萝卜粉和复合维生素粉碎过筛后进行预混,之后加入经过粉碎过筛的、配方量的膨化大米粉、麦芽糊精、植物脂肪粉、鹰嘴豆蛋白,浓缩乳清蛋白、大豆分离蛋白、全脂乳粉、聚葡萄糖、鸡全蛋粉和异麦芽酮糖醇进行总混,即得所述的食品组合物。
优选地,步骤S1所述炒制的条件为:温度140℃-180℃,转速15-25 r/min,时间10-25 min。
优选地,步骤S1所述拌粉的步骤为:向炒制并粉碎后的大米中加水,搅拌30-45min进行拌粉。
优选地,步骤S1所述挤压膨化的条件为:Ⅰ区温度50℃-60℃,Ⅱ区温度60℃-70℃,Ⅲ区温度140℃-160℃,Ⅳ区温度160℃-180℃,下料转速14-22 r/min,主机转速800-1200r/min。
优选地,步骤S2所述预混的转速为8-10 r/min,时间为10-20min;步骤S2所述总混的时间为5-10min。
另一方面,本发明提供了一种上述的食品组合物或上述制备方法制备得到的食品组合物在制备功能性食品中的应用。
本发明还提供了一种功能性食品,包含上述的食品组合物。
本发明的有益效果为:
本发明的食品组合物能够促进肠胃蠕动,提高消化能力;能够作为一种肠内营养制剂,按照每日膳食营养素参考摄入量要求,兼顾营养成分的全面性、均衡性;本发明的食品组合物使用方便,且制备工艺简单,安全性能高,能够满足各种人群和场景,尤其能够满足咀嚼、消化功能障碍的人群及围手术期患者等特殊人群的饮食需求。
具体实施方式
以下实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以对本发明进行若干改进和修饰,这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。对所公开的实施例的下述说明,使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的,本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下,在其它实施例中实现。因此,本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例中,而是可以应用于符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的更宽的范围。虽然在本发明的实施或测试中可以使用与本发明中所述相似或等价的任何方法和材料,本文在此处列举优选的方法和材料。
除非另外定义,本文中使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同意义。本发明中的%无特殊说明均表示质量百分比。
本发明部分原料的购买信息如下:
植物脂肪粉:购自山东天骄生物技术股份有限公司,型号K50-4;
复合矿物质:购自上海励成营养科技有限公司,型号为力得维B-210205-Vit;
复合维生素:购自上海励成营养科技有限公司,型号为力得维B-210205-Min;
黏蛋白:购自SIGMA-ALDRICH,CO,货号SLCL4724;
胆盐:购自上海麦克林生化科技有限公司,货号C14772040;
Cysteine HCl :购自北京奥博星生物技术有限责任公司,货号03-09。
实施例1
一种即食方便的食品组合物,按重量份数计,由以下组分组成:膨化大米粉45份、麦芽糊精12份、植物脂肪粉8份、鹰嘴豆蛋白8份,浓缩乳清蛋白8份、大豆分离蛋白6份、全脂乳粉4份、聚葡萄糖4份、鸡全蛋粉4份、异麦芽酮糖醇3份、玉米粉2份、燕麦粉2份、复合矿物质1.5份、氯化钾0.1份、食用盐0.08份、芝麻粉1份、番茄粉1份、南瓜粉1.5份、胡萝卜粉1份、复合维生素0.3份。
一种即食方便的食品组合物的制备工艺为:
1.大米粉膨化处理
(1)大米炒制:将滚筒炒锅加热至180 ℃,放入约占容器2/3体积的大米,滚筒转速约15 r/min,炒制时间约10 min,直至大米有焦香气、焦黄色、无碳化;放出滚筒炒锅物料,自然晾干。
(2)大米粉碎:将晾干的炒制大米进行粉碎,制成100目大米粉。
(3)拌粉:将大米粉逐渐加入饮用水,用搅拌机混合30 min,形成混合粉料;
(4)挤压膨化:将混合粉料送入挤压膨化机,挤压膨化螺杆机温度控制Ⅰ区温度设定值50 ℃、Ⅱ区设定值60 ℃,温度Ⅲ区设定值140 ℃,、Ⅳ区温度设定值160 ℃;下料转速控制在14 rpm/min;主机转速控制在800 rpm/min。
(5)微波干燥灭菌:微波干燥灭菌机根据工艺文件开启微波发生器,保持微波未端出口温度50 ℃,干燥后物料含水量小于2wt%。
2.其他组分进入紫外隧道进行杀菌处理。
3.称量、粉碎、配料:将配方量的各组分进行粉碎处理,过100目筛。
4.预混合:将用量比较少的玉米粉、燕麦粉、复合矿物质、氯化钾、食用盐、芝麻粉、番茄粉、南瓜粉、胡萝卜粉和复合维生素预先混合,三维摆动混和机转速调至8 r/min,按生产指令单混合10 min。
5.总混合:核对所投原料,按照料重量从多到少依次投入快速混合机进行混合(投料时混合机保持低速运转状态),投完料后高速运转混和5 min。
6.包装即得成品。
实施例2
一种即食方便的食品组合物,按重量份数计,由以下组分组成:膨化大米粉52份、麦芽糊精10份、植物脂肪粉5份、鹰嘴豆蛋白5份,浓缩乳清蛋白5份、大豆分离蛋白5份、全脂乳粉3份、聚葡萄糖3份、鸡全蛋粉3份、异麦芽酮糖醇2份、玉米粉1份、燕麦粉1份、复合矿物质1份、氯化钾0.05份、食用盐0.05份、芝麻粉0.5份、番茄粉0.5份、南瓜粉0.5份、胡萝卜粉0.5份、复合维生素0.2份。
1.大米粉膨化处理
(1)大米炒制:将滚筒炒锅加热至140 ℃,放入约占容器2/3体积的大米,滚筒转速约25 r/min,炒制时间约25 min,直至大米有焦香气、焦黄色、无碳化;放出滚筒炒锅物料,自然晾干。
(2)大米粉碎:将晾干的炒制大米进行粉碎,制成100目大米粉。
(3)拌粉:将大米粉逐渐加入饮用水,用搅拌机混合45 min,形成混合粉料;
(4)挤压膨化:将混合粉料送入挤压膨化机,挤压膨化螺杆机温度控制Ⅰ区温度设定值60 ℃、Ⅱ区设定值70 ℃、温度Ⅲ区设定值160 ℃、Ⅳ区温度设定值180℃;下料转速控制在22 rpm/min;主机转速控制在1200 rpm/min。
(5)微波干燥灭菌:微波干燥灭菌机根据工艺文件开启微波发生器,保持微波未端出口温度70℃,干燥后物料含水量小于2wt%。
2.其他原料拆包,进入紫外隧道进行杀菌处理。
称量、粉碎、配料:将配方量的各组分进行粉碎处理,过100目筛。
预混合:将用量比较少的玉米粉、燕麦粉、复合矿物质、氯化钾、食用盐、芝麻粉、番茄粉、南瓜粉、胡萝卜粉和复合维生素预先混合,三维摆动混和机转速调至10 r/min,按生产指令单混合20 min。
总混合:核对所投原料,按照料重量从多到少依次投入快速混合机进行混合(投料时混合机保持低速运转状态),投完料后高速运转混和10min。
包装即得成品。
实施例3
一种即食方便的食品组合物,按重量份数计,由以下组分组成:膨化大米粉55份、麦芽糊精15份、植物脂肪粉10份、鹰嘴豆蛋白10份,浓缩乳清蛋白10份、大豆分离蛋白10份、全脂乳粉5份、聚葡萄糖5份、鸡全蛋粉5份、异麦芽酮糖醇4份、玉米粉3份、燕麦粉3份、复合矿物质2份、氯化钾0.15份、食用盐0.1份、芝麻粉2份、番茄粉2份、南瓜粉2份、胡萝卜粉2份、复合维生素0.4份。
一种即食方便的食品组合物的制备工艺为:
1.大米粉膨化处理
(1)大米炒制:将滚筒炒锅加热至180 ℃,放入约占容器2/3体积的大米,滚筒转速约15 r/min,炒制时间约10 min,直至大米有焦香气、焦黄色、无碳化;放出滚筒炒锅物料,自然晾干。
(2)大米粉碎:将晾干的炒制大米进行粉碎,制成100目大米粉。
(3)拌粉:将大米粉逐渐加入饮用水,用搅拌机混合30 min,形成混合粉料;
(4)挤压膨化:将混合粉料送入挤压膨化机,挤压膨化螺杆机温度控制Ⅰ区温度设定值50 ℃、Ⅱ区设定值60 ℃,温度Ⅲ区设定值140 ℃,、Ⅳ区温度设定值160 ℃;下料转速控制在14 rpm/min;主机转速控制在800 rpm/min。
(5)微波干燥灭菌:微波干燥灭菌机根据工艺文件开启微波发生器,保持微波未端出口温度50 ℃,干燥后物料含水量小于2wt%。
2.其他组分进入紫外隧道进行杀菌处理。
3.称量、粉碎、配料:将配方量的各组分进行粉碎处理,过100目筛。
4.预混合:将用量比较少的玉米粉、燕麦粉、复合矿物质、氯化钾、食用盐、芝麻粉、番茄粉、南瓜粉、胡萝卜粉和复合维生素预先混合,三维摆动混和机转速调至8 r/min,按生产指令单混合10 min。
5.总混合:核对所投原料,按照料重量从多到少依次投入快速混合机进行混合(投料时混合机保持低速运转状态),投完料后高速运转混和5 min。
6.包装即得成品。
实施例4
一种即食方便的食品组合物,按重量份数计,由以下组分组成:膨化大米粉55份、麦芽糊精10份、植物脂肪粉5份、鹰嘴豆蛋白5份,浓缩乳清蛋白5份、大豆分离蛋白5份、全脂乳粉3份、聚葡萄糖3份、鸡全蛋粉3份、异麦芽酮糖醇2份、玉米粉1份、燕麦粉1份、复合矿物质1份、氯化钾0.05份、食用盐0.05份、芝麻粉0.5份、番茄粉0.5份、南瓜粉0.5份、胡萝卜粉0.5份、复合维生素0.2份。
一种即食方便的食品组合物的制备工艺为:
1.大米粉膨化处理
(1)大米炒制:将滚筒炒锅加热至180 ℃,放入约占容器2/3体积的大米,滚筒转速约15 r/min,炒制时间约10 min,直至大米有焦香气、焦黄色、无碳化;放出滚筒炒锅物料,自然晾干。
(2)大米粉碎:将晾干的炒制大米进行粉碎,制成100目大米粉。
(3)拌粉:将大米粉逐渐加入饮用水,用搅拌机混合30 min,形成混合粉料;
(4)挤压膨化:将混合粉料送入挤压膨化机,挤压膨化螺杆机温度控制Ⅰ区温度设定值50 ℃、Ⅱ区设定值60 ℃,温度Ⅲ区设定值140 ℃,、Ⅳ区温度设定值160 ℃;下料转速控制在14 rpm/min;主机转速控制在800 rpm/min。
(5)微波干燥灭菌:微波干燥灭菌机根据工艺文件开启微波发生器,保持微波未端出口温度50 ℃,干燥后物料含水量小于2wt%。
2.其他组分进入紫外隧道进行杀菌处理。
3.称量、粉碎、配料:将配方量的各组分进行粉碎处理,过100目筛。
4.预混合:将用量比较少的玉米粉、燕麦粉、复合矿物质、氯化钾、食用盐、芝麻粉、番茄粉、南瓜粉、胡萝卜粉和复合维生素预先混合,三维摆动混和机转速调至8 r/min,按生产指令单混合10 min。
5.总混合:核对所投原料,按照料重量从多到少依次投入快速混合机进行混合(投料时混合机保持低速运转状态),投完料后高速运转混和5 min。
6.包装即得成品。
对比例1
一种即食方便的食品组合物,按重量份数计,由以下组分组成:膨化大米粉45份、麦芽糊精12份、植物脂肪粉8份、分离乳清蛋白8份、大豆分离蛋白14份、全脂乳粉4份、聚葡萄糖4份、鸡全蛋粉4份、异麦芽酮糖醇3份、玉米粉2份、燕麦粉2份、复合矿物质1.5份、氯化钾0.1份、食用盐0.08份、芝麻粉1份、番茄粉1份、南瓜粉1.5份、胡萝卜粉1份、复合维生素0.3份。
制备工艺与实施例1相同。
对比例2
一种即食方便的食品组合物,按重量份数计,由以下组分组成:膨化大米粉34份、麦芽糊精12份、植物脂肪粉8份、鹰嘴豆蛋白12份,浓缩乳清蛋白15份、大豆分离蛋白6份、全脂乳粉4份、聚葡萄糖4份、鸡全蛋粉4份、异麦芽酮糖醇3份、玉米粉2份、燕麦粉2份、复合矿物质1.5份、氯化钾0.1份、食用盐0.08份、芝麻粉1份、番茄粉1份、南瓜粉1.5份、胡萝卜粉1份、复合维生素0.3份。
制备工艺与实施例1相同。
对比例3
一种即食方便的食品组合物,按重量份数计,由以下组分组成:膨化大米粉45份、麦芽糊精16份、植物脂肪粉12份、鹰嘴豆蛋白8份,浓缩乳清蛋白8份、大豆分离蛋白6份、全脂乳粉4份、聚葡萄糖6份、鸡全蛋粉6份、异麦芽酮糖醇3份、玉米粉2份、燕麦粉2份、复合矿物质1.5份、氯化钾0.1份、食用盐0.08份、芝麻粉1份、番茄粉1份、南瓜粉1.5份、胡萝卜粉1份、复合维生素0.3份。
制备工艺与实施例1相同。
对比例4
一种即食方便的食品组合物,按重量份数计,由以下组分组成:膨化大米粉45份、麦芽糊精8份、植物脂肪粉4份、鹰嘴豆蛋白8份,分离乳清蛋白8份、大豆分离蛋白6份、全脂乳粉4份、聚葡萄糖2份、鸡全蛋粉2份、异麦芽酮糖醇3份、玉米粉2份、燕麦粉2份、复合矿物质1.5份、氯化钾0.1份、食用盐0.08份、芝麻粉1份、番茄粉1份、南瓜粉1.5份、胡萝卜粉1份、复合维生素0.3份。
制备工艺与实施例1相同。
对比例5
一种即食方便的食品组合物,按重量份数计,由以下组分组成:膨化大米粉45份、麦芽糊精12份、植物脂肪粉8份、鹰嘴豆蛋白8份,浓缩乳清蛋白8份、大豆分离蛋白6份、全脂乳粉4份、聚葡萄糖4份、鸡全蛋粉4份、异麦芽酮糖醇3份、玉米粉2份、燕麦粉2份、复合矿物质1.5份、氯化钾0.1份、食用盐0.08份、芝麻粉1份、番茄粉1份、南瓜粉1.5份、胡萝卜粉1份、复合维生素0.3份。
一种即食方便的食品组合物的制备工艺为:
1.大米粉膨化处理
(1)大米炒制:将滚筒炒锅加热至200 ℃,放入约占容器2/3体积的大米,滚筒转速约15 r/min,炒制时间约10 min,直至大米有焦香气、焦黄色、无碳化;放出滚筒炒锅物料,自然晾干。
(2)大米粉碎:将晾干的炒制大米进行粉碎,制成100目大米粉。
(3)拌粉:将大米粉逐渐加入饮用水,用搅拌机混合30 min,形成混合粉料;
(4)挤压膨化:将混合粉料送入挤压膨化机,挤压膨化螺杆机温度控制Ⅰ区温度设定值40 ℃、Ⅱ区设定值60 ℃、温度Ⅲ区设定值120 ℃、Ⅳ区温度设定值150 ℃;下料转速控制在14 rpm/min;主机转速控制在800 rpm/min。
(5)微波干燥灭菌:微波干燥灭菌机根据工艺文件开启微波发生器,保持微波未端出口温度50 ℃,干燥后物料含水量小于2wt%。
2.其他组分进入紫外隧道进行杀菌处理。
3.称量、粉碎、配料:将配方量的各组分进行粉碎处理,过100目筛。
4.预混合:将用量比较少的玉米粉、燕麦粉、复合矿物质、氯化钾、食用盐、芝麻粉、番茄粉、南瓜粉、胡萝卜粉和复合维生素预先混合,三维摆动混和机转速调至8 r/min,按生产指令单混合10 min。
5.总混合:核对所投原料,按照料重量从多到少依次投入快速混合机进行混合(投料时混合机保持低速运转状态),投完料后高速运转混和5 min。
6.包装即得成品。
效果例1 即食方便食品组合物对肠道菌群的影响
1.发酵培养基(1L)制备
NaCl 0.1 g,K2HPO40.04 g,KH2PO40.04 g,MgSO40.01 g,CaCl20.01 g,NaHCO32 g,蛋白胨2.5 g,酵母提取物4 g,葡萄糖0.4 g,黏蛋白2 g,胆盐0.5 g,Cysteine HCl 0.46g,Tween-80 2 ml,混合后调至pH 7.0(0.5M HCl),121° C高压湿热灭菌,15 min,冷却后4℃保存备用。
2.粪便发酵液制备
采集新鲜粪便,加入pH 7.0无菌PBS缓冲液以1:9 (w/v)混合稀释,均质10 min,粪便混合液1000 rpm,离心10 min去除杂质,留取上层浑浊液为粪便发酵液备用。
3.体外模拟结肠发酵实验
(1)发酵:按照总发酵体系体积2:1的比例分别添加底物培养基、粪便发酵液,随后分别加入5 wt.%受试物(实施例1-4和对比例1-5的即食方便的食品组合物),于37° C,厌氧环境培养48 h;
(2)取样:于0、6、12、24 、48 h收取样品(5 mL),12000 rpm,离心10 min分离,沉淀用于菌群数量测定。
4.菌数量测定
(1)粪便基因组DNA提取:收集发酵液沉淀,利用粪便基因组DNA提取试剂盒(离心柱型)(北京金百特生物技术有限公司,货号:D213)提取发酵菌群gDNA
(2)菌种引物序列:
表1 肠道菌群扩展引物序列
(3)QPCR检测:
菌的质粒标准品可10倍梯度依次稀释,选择102-107copies/μl的稀释质粒进行绝对定量标准曲线绘制。
将提取的体外发酵液gDNA选用TB液稀释至1 ng/ μl,以测序成功的对应菌质粒标准品制作标准曲线,进行绝对定量qPCR检测。反应体系参照“Real-Time quantitative PCR试剂盒说明书”,采用20 uL的体系,选用60℃退火/延伸30 sec,45个循环扩增。
(4)数据处理:
以标准质粒的logcopies(DNA复制拷贝数的log值)为横坐标,cq值(荧光信号大于荧光阈值时PCR循环数)为纵坐标,生成标准曲线。
Bifidobacteriumy标准曲线y= -2.4804x+46.126 R²= 0.9674,R²= 0.9674;
Akkermansia muciniphila标准曲线y = -3.3887x+40.182,R²= 0.9981;
Lactobacillus gasseri标准曲线y = -2.8941x+35.814,R²=0.9804。
根据实施例1-4和对比例1-5在不同的发酵时间0h、6h、12h、24h、48h下的三组cq值求的平均值,依据标准曲线分别求得不同发酵时间下的logcopies。具体结果如表2、表3和表4所示。
表2 双歧杆菌的表达情况(Logcopies/uL)
注:同列中,数据上标不同小写字母表示差异显著(P<0.05),数据上标相同小写字母表示差异不显著(P>0.05)。
表3 嗜黏蛋白阿克曼菌的表达情况(Logcopies/uL)
注:同列中,数据上标不同小写字母表示差异显著(P<0.05),数据上标相同小写字母表示差异不显著(P>0.05)。
表4 格氏乳杆菌的表达情况(Logcopies/uL)
注:同列中,数据上标不同小写字母表示差异显著(P<0.05),数据上标相同小写字母表示差异不显著(P>0.05)。
乳酸菌是最常见的一类传统益生菌,可发酵碳水化合物产生乳酸,是调节人体肠道健康的功能性菌群,包括乳杆菌和双歧杆菌等。在已知的促进健康的菌群中,双歧杆菌代表了最主要的群体之一,其具有调节肠道功能、促进消化吸收、缓解过敏症状、生物学屏障功能以及调节免疫力等益生特性,通常被用作许多功能性食品中的益生菌成分;嗜黏蛋白阿克曼氏菌是一种人类肠道的正常菌群,许多证据表明其与肥胖、糖尿病、心血管疾病和低度炎症呈负相关,可以保护肠道上皮细胞及黏液层的完整性发挥代谢保护作用,在炎症反应过程中发挥抗炎作用;格氏乳杆菌是肠道、生殖道重要菌种之一,具有维持肠道健康、维持阴道健康、调节免疫、改善消化吸收以及产抗菌肽细菌素等益生特性,因其具有优良的益生特性,已应用于食品、医药等行业。
通过绝对定量PCR技术测定人体粪便中细菌数量的相对变化结果可知,双歧杆菌、嗜黏蛋白阿克曼氏菌和格氏乳杆菌在实施例1-4中的表达量普遍高于对比例1-5中的表达量,这说明实施例1-4能显著提高人体肠道中双歧杆菌、嗜黏蛋白阿克曼氏菌和格氏乳杆菌的数量。本发明的食品组合物能够促进肠道有益菌群增加,提高消化吸收。
效果例2 即食方便食品组合物对益生菌产酸能力的影响
1.培养基的配制
(1)活化培养基(MRS改良培养基):准确称取 蛋白胨10.0 g、牛肉膏7.5 g、酵母粉4.0 g、葡萄糖20.0 g、K2HPO4·7H2O 2.0 g、Na2HPO4·12H2O 2.0 g、柠檬酸三铵2.0 g、MgSO4·7H2O 0.2 g、MnSO4·4H2O 0.05 g和L-半胱氨酸0.8 g,准确量取吐温801.0 mL,将上述成分与1000 mL蒸馏水混合,加热煮沸溶解,调节pH值至6.2±0.2,每支试管分装10 mL后121 ℃高压蒸汽灭菌15 min备用。
(2)增殖培养基:将活化培养基中的葡萄糖分别用等质量浓度的实施例1-4、对比例1-5的食品组合物代替即为增殖培养基,其添加量均为1.5wt.%。配制方法:将未加葡萄糖的活化培养基分装至15 mL的发酵顶空瓶中,121 ℃高压蒸汽灭菌15 min。分别配制实施例1-4、对比例1-5的食品组合物高浓度母液(200 mg/mL),进行超声溶解,然后在超净工作台无菌操作下过0.45 μm滤膜后分别添加至灭菌培养基中。
2.菌种培养及指标测定
将动物双歧杆菌、植物乳杆菌和鼠李糖乳杆菌(具体菌种信息如下表所示)分别按1%的接种量(体积百分比)接入活化培养基中,充分震荡使菌体混合均匀,于厌氧条件下37℃培养24 h,连续培养两代得到菌种母液。将各菌种母液按1%的接种量(体积百分比)分别接入增殖培养基中,37 ℃厌氧培养。
表5 菌种信息
3.发酵液中代谢产物分析
在0、6、12、24、36 h取出发酵液,吸取2 mL发酵液于离心管中,添加2 mL 25%磷酸溶液,震荡,混匀,静置0.5 h后,过0.45 μm膜,注入进样瓶中,通过气相色谱分析其短链脂肪酸的产生情况。
4.气相色谱条件
载气为氮气,流速1.0 mL/min,进样口温度240 ℃,检测器温度240 ℃。始柱温90℃,保留0.5 min;以10 ℃/min升温至110 ℃,保留2 min;以6 ℃/min升温至130 ℃,保留0min;以10 ℃/min升温至200 ℃,保留5 min;以15 ℃/min升温至230 ℃,保留2 min;总时间23.83min。进样体积1 μL。
5.统计学分析
实验中所有发酵体系均设计2个生物学重复,每个指标均进行3个独立样本的测定,结果以“平均值±标准差”形式表示。分析不同发酵体系中的代谢产物时,各组间的显著性差异使用SPSS 22.0软件的单因素方差分析,并使用Duncan法进行多重比较,以P<0.05表示组间的差异显著。具体结果如表6所示。
表6 不同菌种代谢产物中乙酸及乳酸的最大产量
注:同列中,数据上标不同小写字母表示差异显著(P<0.05),数据上标相同小写字母表示差异不显著(P>0.05)。
益生菌是能在人体内定殖,可改变人体某一部位菌群组成的一类对人体有益的活性微生物。其可通过调节人体黏膜与系统免疫功能或通过调节人体肠道内菌群平衡,达到促进营养吸收、保持肠道健康的作用,从而产生有利于机体健康的单微生物或组成明确的混合微生物。乳酸菌是最常见的一类传统益生菌,可发酵碳水化合物产生乳酸,是调节人体肠道健康的功能性菌群,包括乳杆菌和双歧杆菌等。肠道益生菌常通过饮食进行干预。食物中的膳食纤维和益生元可被益生菌发酵产生有机酸和短链脂肪酸等代谢物,可作用于人体内的多个通路调控人体代谢。益生菌发酵产生的有机酸和短链脂肪酸具有降低肠道pH值、抑制有害菌的生长、促进肠道蠕动、增加肠道的动力性、维持肠道渗透压、促进肠道上皮细胞分化、改善肠道屏障、调节饱腹感信号等功能。
由表6结果可知,动物双歧杆菌、植物乳杆菌和鼠李糖乳杆菌在实施例1-4的作用下均有很强的产乙酸能力,实施例1-4的最大产量显著高于对比例1-5。且当膨化大米粉、浓缩乳清蛋白和鹰嘴豆蛋白的重量比为40-52:5-10:5-8时,食品组合物具有更优的产酸能力。
这说明本发明的食品组合物对动物双歧杆菌、植物乳杆菌和鼠李糖乳杆菌具有较好的增殖效果,动物双歧杆菌、植物乳杆菌和鼠李糖乳杆菌能够更好的、更有效的利用本发明食品组合物作为碳源,代谢产生乙酸、乳酸。
且本发明的组合物对雌雄小鼠和大鼠经口急性毒性试验MTD>10.0g/kg.BW,属实际无毒级。30天喂养试验结果显示,本发明实施例的组合物以0.90g/kg.BW、1.80g/kg.BW、3.60g/kg.BW(相当于人体推荐量的25倍、50倍及100倍)重复灌胃给予SD大鼠,未见明显毒性靶器官及中毒反应。因此认为本试验安全剂量不低于3.60g/kg.BW,约相当于临床人用剂量的100倍(以体表面积计)。说明本发明实施例组合物的安全性较好。
以上是结合具体实施例对本发明进一步的描述,但这些实施例仅是范例性的,并不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是,在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换,但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。

Claims (10)

1.一种即食方便的食品组合物,其特征在于,按重量份数计,包括以下组分:膨化大米粉35-55份、麦芽糊精10-15份、植物脂肪粉5-10份、鹰嘴豆蛋白5-10份,浓缩乳清蛋白5-10份、大豆分离蛋白5-10份、全脂乳粉3-5份、聚葡萄糖3-5份、鸡全蛋粉3-5份、异麦芽酮糖醇2-4份、玉米粉1-3份、燕麦粉1-3份、复合矿物质1-2份、氯化钾0.05-0.15份、食用盐0.05-0.1份、芝麻粉0.5-2份、番茄粉0.5-2份、南瓜粉0.5-2份、胡萝卜粉0.5-2份、复合维生素0.2-0.4份。
2.根据权利要求1所述的食品组合物,其特征在于,所述膨化大米粉、浓缩乳清蛋白和鹰嘴豆蛋白的重量比为40-52:5-10:5-8。
3.根据权利要求2所述的食品组合物,其特征在于,所述膨化大米粉、浓缩乳清蛋白和鹰嘴豆蛋白的重量比为45:8:8。
4.权利要求1-3任一项所述食品组合物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1、大米粉膨化处理:对大米进行炒制、粉碎、拌粉、挤压膨化和灭菌处理,得到膨化大米粉;
S2、取配方量的玉米粉、燕麦粉、复合矿物质、氯化钾、食用盐、芝麻粉、番茄粉、南瓜粉、胡萝卜粉和复合维生素粉碎过筛后进行预混,之后加入经过粉碎过筛的、配方量的膨化大米粉、麦芽糊精、植物脂肪粉、鹰嘴豆蛋白,浓缩乳清蛋白、大豆分离蛋白、全脂乳粉、聚葡萄糖、鸡全蛋粉和异麦芽酮糖醇进行总混,即得所述的食品组合物。
5.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,步骤S1所述炒制的条件为:温度140℃-180℃,转速15-25 r/min,时间10-25 min。
6.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,步骤S1所述拌粉的步骤为:向炒制并粉碎后的大米中加水,搅拌30-45 min进行拌粉。
7.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,步骤S1所述挤压膨化的条件为:Ⅰ区温度50℃-60℃,Ⅱ区温度60℃-70℃,Ⅲ区温度140℃-160℃,Ⅳ区温度160℃-180℃,下料转速14-22 r/min,主机转速800-1200 r/min。
8.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,步骤S2所述预混的转速为8-10 r/min,时间为10-20min;步骤S2所述总混的时间为5-10min。
9.权利要求1-3任一项所述的食品组合物或权利要求4-8任一项所述制备方法制备得到的食品组合物在制备提高消化吸收、促进肠道有益菌群增殖的功能性食品中的应用。
10.一种功能性食品,其特征在于,包含权利要求1-3任一项所述的食品组合物。
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