CN117157320A - 沙眼衣原体抗原性多肽及其用于疫苗目的的用途 - Google Patents

Abstract

衣原体是细胞内细菌病原体，是造成各种感染的原因。发明人已经建立了针对沙眼衣原体候选疫苗。特别是，发明人通过在线软件(NetMHC‑4.0和NetMHCII‑2.3)和肽结合预测软件对这些蛋白的氨基酸序列进行计算机模拟分析，绘制出预测的MHC‑I和‑II表位图，从而识别出在候选疫苗中应包含的特异性表位。还利用在线软件(BepiPred‑2.0和Discotope)绘制出B细胞表位图。最后，发明人产生一些特异性CD40或Langerin抗体，其包含一个或多个已确定的本发明的表位，适用于疫苗目的。因此，本发明涉及沙眼衣原体(Ct)抗原性多肽以及其用于疫苗目的的用途。

Description

沙眼衣原体抗原性多肽及其用于疫苗目的的用途

技术领域

本发明属于医学领域，特别是疫苗学领域。

背景技术

衣原体是细胞内细菌病原体，是造成各种感染的原因。例如，沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis)是人的性传播疾病和眼部感染(沙眼)的病原体。据估计，全世界有9200万人性感染沙眼衣原体。因为沙眼衣原体泌尿生殖系统感染的患病率高，并且是异位妊娠和不孕不育的危险因素，所以引起公共卫生关注。除此之外，已显示沙眼衣原体感染会促进HIV的传播，并作为HPV诱导的宫颈癌的协同因素。未经治疗的沙眼衣原体生殖系统感染的持续时间可以延长，并且在最初12个月内通常无法完全清除。从人体研究中可以知道，产生了一定程度的针对生殖器再感染的保护性免疫，尽管它表现为充其量是部分的。抗生素疗法有效地控制感染；然而，无症状病例的高患病率表明，只有开发出有效的衣原体疫苗，才能设想可持续地控制疾病。

MOMP在人和动物中具有高免疫原性，因此已作为疫苗候选物进行了非常详细的研究，既作为天然纯化的蛋白质进行重组研究，也作为DNA疫苗。主要是VS4作为免疫原引起了兴趣，因为显示该区域含有嵌入可变区中的高度保守的物种特异性表位。重要地，VS4区中的该保守表位可以引发广泛的交叉反应性免疫反应，其能够中和多种血清型，其中包括最流行的D、E和F。使用MOMP肽时缺乏保护的原因可以有很多；包括靶向抗原呈递细胞的效率低，但很可能反映出疫苗分子的免疫原性不足以用作疫苗。

发明内容

本发明由权利要求限定。具体地，本发明涉及沙眼衣原体(Ct)抗原性多肽以及其作为疫苗目的的用途。

具体实施方式

定义

如本文所用，术语“受试者”或“需要其的受试者”旨在指人或非人哺乳动物。通常患者感染了或可能感染沙眼衣原体。

如本文所用，术语“沙眼衣原体”具有其在本领域中的一般含义，是指作为人的性传播疾病和眼部感染(沙眼)的病原体的细菌，其可以以各种方式表现，包括：沙眼、性病淋巴肉芽肿、非淋菌性尿道炎、宫颈炎、输卵管炎、盆腔炎性疾病。沙眼衣原体是失明的最常见感染性原因，也是最常见的性传播细菌。

如本文所用，术语“无症状的”是指没有经历衣原体感染的可检测症状的受试者。如本文所用，术语“有症状的”是指经历了衣原体感染的可检测症状的受试者。衣原体感染的症状包括但不限于：排尿时疼痛、阴道分泌物异常、腹部或骨盆疼痛、性交时疼痛、性交后出血、女性月经间出血以及排尿时疼痛、阴茎尖端的白色、混浊或水样分泌物、尿道(将尿液排出体外的管道)灼热或瘙痒、或男性睾丸疼痛。

如本文所用，术语“多肽”、“肽”和“蛋白质”在本文中可互换使用，以指任何长度的氨基酸的聚合物。这些术语还涵盖已被修饰(例如二硫键形成、糖基化、脂化、磷酸化或与标记成分缀合)的氨基酸聚合物。在基因疗法的上下文中讨论时，多肽是指各自完整的多肽，或其任何片段或基因工程衍生物(其保留了完整蛋白质的所需生化功能)。

如本文所用，术语“多核苷酸”是指任何长度的核苷酸(包括脱氧核糖核苷酸或核糖核苷酸、或其类似物)的聚合形式。多核苷酸可以包含修饰的核苷酸(如甲基化的核苷酸和核苷酸类似物)，并且可以被非核苷酸成分中断。如果存在修饰，可以在聚合物组装之前或之后赋予对核苷酸结构的修饰。如本文所用，术语多核苷酸可互换地指双链和单链分子。除非另有说明或要求，否则本文描述的本发明的多核苷酸的任何实施方案既涵盖双链形式，也涵盖已知或预测构成双链形式的两种互补单链形式中的每一种。

如本文所用，表述“源自”是指其中第一成分(例如第一多肽)或来自该第一成分的信息用于分离、获得或制造不同的第二成分(例如不同于第一多肽的第二多肽)的过程。

如本文所用，术语“编码”是指多核苷酸中核苷酸的特定序列(例如，基因、cDNA或mRNA)的固有特性，在生物过程中作为用于合成其它聚合物和大分子的模板，具有确定的核苷酸序列(例如，rRNA、tRNA和mRNA)或确定的氨基酸序列和由其产生的生物学特性。因此，如果在细胞或其他生物系统中，与基因对应的mRNA的转录和翻译产生蛋白质，则该基因、cDNA或RNA编码该蛋白质。编码链(其核苷酸序列与mRNA序列相同，通常在序列表中提供)和非编码链(用作基因或cDNA转录的模板)两者都可以称为编码该蛋白质或该基因或cDNA的其它产物。除非另有说明，否则“编码氨基酸序列的核苷酸序列”包括所有互为简并版本且编码相同氨基酸序列的核苷酸序列。短语“编码蛋白质或RNA的核苷酸序列”也可以包括内含子，以至于编码该蛋白质的核苷酸序列在某些版本中可以含有内含子。

如本文所用，术语“载体”、“克隆载体”和“表达载体”是指可以将DNA或RNA序列(例如，外源基因)引入宿主细胞从而转化宿主并促进所引入序列的表达(例如，转录和翻译)的载体。

如本文所用，术语“启动子/调节序列”是指由细胞的合成机制或引入的合成机制识别的核酸序列(如，例如，DNA序列)，该识别是启动多核苷酸序列的特异性转录所需的，从而允许表达与启动子/调节序列可操作连接的基因产物。在一些例子中，该序列可以是核心启动子序列，在其它例子中，该序列还可以包括增强子序列和表达基因产物所需的其它调节元件。例如，启动子/调节序列可以是以组织特异性方式表达基因产物的序列。

如本文所用，术语“可操作连接”或“转录控制”是指调节序列与异源核酸序列之间的功能连接，其导致异源核酸的表达。例如，当第一核酸序列与第二核酸序列处于功能关系时，第一核酸序列与第二核酸序列可操作连接。例如，如果启动子影响编码序列的转录或表达，则启动子与编码序列可操作连接。可操作连接的DNA序列可以彼此连续，例如，在需要连接两个蛋白质编码区域时位于同一阅读框中。

如本文所用，术语“转化”是指将“外来的”(即外在的或细胞外的)基因、DNA或RNA序列引入宿主细胞，以便宿主细胞将表达引入的基因或序列以产生所需的物质(通常是由引入的基因或序列编码的蛋白质或酶)。接收并表达引入的DNA或RNA的宿主细胞被“转化”。

如本文所用，术语“表达系统”是指宿主细胞和相容载体在适当条件下，例如用于表达由载体携带并引入宿主细胞的外来DNA编码的蛋白质。

如本文所用，两个序列之间的“百分比同一性”是序列共有的相同位置数的函数(即，％同一性＝相同位置数/位置总数×100)，同时考虑了空位的数量和每个空位的长度，需要引入这些空位以实现两个序列的最佳比对。可以使用数学算法完成序列的比对和两个序列之间百分比同一性的确定，如下所述。可以使用Needleman和Wunsch算法确定两个氨基酸序列之间的百分比同一性(Needleman,Saul B.&Wunsch,Christian D.(1970)."Ageneral method applicable to the search for similarities in the amino acidsequence of two proteins".Journal of Molecular Biology.48(3):443-53.)。也可以使用例如EMBOSS Needle(成对比对；可在www.ebi.ac.uk获得)等算法来确定两个核苷酸或氨基酸序列之间的百分比同一性。例如，EMBOSS Needle可以与BLOSUM62矩阵一起使用，“空位开放罚分(gap open penalty)”为10，“空位扩展罚分(gap extend penalty)”为0.5，“末端空位罚分(end gap penalty)”为假，“末端空位开放罚分(end gap open penalty)”为10，并且“末端空位扩展罚分(end gap extend penalty)”为0.5。通常，“百分比同一性”是匹配位置数除以比对位置数并乘以100的函数。例如，如果在比对后，两个比对序列之间10个序列位置中有6个相同，则同一性为60％。通常在进行分析的查询序列的全长上确定％同一性。具有相同初级氨基酸序列或核酸序列的两个分子是相同的，无论任何化学和/或生物修饰如何。根据本发明，第一氨基酸序列与第二氨基酸序列具有至少80％同一性是指第一序列与第二氨基酸序列具有80；81；82；83；84；85；86；87；88；89；90；91；92；93；94；95；96；97；98；99或100％的同一性。根据本发明，第一氨基酸序列与第二氨基酸序列具有至少90％同一性是指第一序列与第二氨基酸序列具有90；91；92；93；94；95；96；97；98；99或100％的同一性。

如本文所用，术语“缀合”或可互换的“缀合多肽”旨在表示由一种或多种多肽共价连接而形成的复合或嵌合分子。术语“共价连接”或“缀合”是指多肽和非肽部分彼此直接共价连接，或通过中间部分(如桥、间隔子或连接部分)彼此间接共价连接。一种特别的缀合物是融合蛋白。

如本文所用，术语“融合蛋白”表示通过连接源自不同蛋白质的两种或更多种多肽而产生的蛋白质。特别是，可以通过重组DNA技术产生融合蛋白，其通常用于生物学研究或疗法。也可以通过化学共价缀合产生融合蛋白，在融合蛋白的多肽部分之间有或没有接头。在融合蛋白中，两种或更多种多肽直接融合或通过接头融合。

如本文所用，术语“直接”是指第一个多肽N-末端的第一个氨基酸与第二个多肽C-末端的最后一个氨基酸融合。这种直接融合可以自然发生，如以下所述：(Vigneron等人，Science 2004，PMID 15001714)，(Warren等人，Science 2006，PMID 16960008)，(Berkers等人，J.Immunol.2015a，PMID 26401000)，(Berkers等人，J.Immunol.2015b，PMID26401003)，(Delong等人，Science 2016，PMID 26912858)，(Liepe等人，Science 2016，PMID 27846572)，(Babon等人，Nat.Med.2016，PMID 27798614)。

如本文所用，术语“接头”具有其在本领域中的一般含义，是指长度足以确保蛋白质形成适当的二级和三级结构的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述接头是肽接头，其包含至少一个但少于30个氨基酸，例如2-30个氨基酸，优选10-30个氨基酸，更优选15-30个氨基酸，仍更优选19-27个氨基酸，最优选20-26个氨基酸的肽接头。在一些实施方案中，接头具有2；3；4；5；6；7；8；9；10；11；12；13；14；15；16；17；18；19；20；21；22；23；24；25；26；27；28；29；30个氨基酸残基。通常，接头是那些允许化合物采用适当构象的接头。最合适的接头序列(1)将采用柔性的伸展构象，(2)将不会表现出发展可以与融合蛋白的功能结构域相互作用的有序二级结构的倾向，并且(3)将具有最小的可以促进与功能蛋白结构域相互作用的疏水或带电特性。

如本文所用，术语“抗体”是指免疫球蛋白分子和免疫球蛋白分子的免疫活性部分，即含有与抗原免疫特异性结合的抗原结合位点的分子。在啮齿动物和灵长类动物的天然抗体中，两条重链通过二硫键相互连接，每条重链通过二硫键与轻链连接。有两种轻链λ(1)和κ(k)。有五种主要的重链类别(或同种型)，其决定抗体分子的功能活性：IgM、IgD、IgG、IgA和IgE。每条链含有不同的序列结构域。在典型的IgG抗体中，轻链包括两个结构域，一个可变结构域(VL)和一个恒定结构域(CL)。重链包括四个结构域，一个可变结构域(VH)和三个恒定结构域(CH1、CH2和CH3，统称为CH)。轻链(VL)和重链(VH)两者的可变区决定与抗原的结合识别和特异性。轻链(CL)和(CH)重链的恒定区结构域赋予重要的生物学特性，如抗体链结合、分泌、经胎盘迁移、补体结合以及与Fc受体(FcR)的结合。Fv片段是免疫球蛋白Fab片段的N-末端部分，由一条轻链和一条重链的可变部分组成。抗体的特异性在于抗体结合位点和抗原决定簇之间的结构互补性。抗体结合位点由主要来自高变区或互补决定区(CDR)的残基组成。有时，来自非高变区或框架区(FR)的残基也可以参与抗体结合位点，或影响整体结构域结构从而影响结合位点。互补决定区或CDR是指共同定义天然免疫球蛋白结合位点的天然Fv区的结合亲和力和特异性的氨基酸序列。免疫球蛋白的轻链和重链各有三个CDR，分别命名为L-CDR1、L-CDR2、L-CDR3和H-CDR1、H-CDR2、H-CDR3。因此，抗原结合位点通常包括六个CDR，其包括来自重链和轻链V区中每个区域的CDR。框架区(FR)是指在CDR之间插入的氨基酸序列。据此，轻链和重链的可变区通常包括以下顺序的4个框架区和3个CDR：FR1-CDR1-FR2-CDR2-FR3-CDR3-FR4。根据Kabat等人设计的系统对抗体可变结构域中的残基进行常规编号。在Kabat等人，1987，Sequences of Proteins of ImmunologicalInterest，美国NIH美国卫生与公众服务部(Kabat等人，1992年，以下简称“Kabat等人”)中提出了该系统。Kabat残基名称并不总是与SEQ ID序列中氨基酸残基的线性编号直接对应。实际的线性氨基酸序列可以比严格的Kabat编号中含有更少或额外的氨基酸，对应于基本可变结构域结构的结构成分(无论是框架区还是互补决定区(CDR))的缩短或插入。对于给定抗体，可以通过比对抗体序列中的同源残基与“标准”Kabat编号序列来确定正确的Kabat残基编号。根据Kabat编号系统，重链可变结构域的CDR位于残基31-35(H-CDR1)、残基50-65(H-CDR2)和残基95-102(H-CDR3)。根据Kabat编号系统，轻链可变结构域的CDR位于残基24-34(L-CDR1)、残基50-56(L-CDR2)和残基89-97(L-CDR3)。对于下文描述的激动剂抗体，已使用来自www.bioinf.org.uk的CDR查找算法确定了CDR，见Antibodies页中标题为“How toidentify the CDRs by looking at a sequence”的小节。

如本文所用，术语“免疫球蛋白结构域”是指抗体链的球状区(例如，重链抗体链或轻链)，或基本上由这种球状区组成的多肽。

如本文所用，术语“Fc区”用于定义免疫球蛋白重链的C-末端区，包括天然序列Fc区和变化的Fc区。人IgG重链Fc区通常定义为包含从IgG抗体的C226位或P230位至羧基末端的氨基酸残基。Fc区的残基编号是Kabat的EU索引的编号。可以例如在抗体的生产或纯化过程中去除Fc区的C-末端赖氨酸(残基K447)。因此，本发明的抗体组合物可以包含去除所有K447残基的抗体群体、没有去除K447残基的抗体群体、以及具有和不具有K447残基的抗体混合物的抗体群体。

如本文所用，术语“嵌合抗体”是指包含非人抗体的VH结构域和VL结构域以及人抗体的CH结构域和CL结构域的抗体。在一些实施方案中，“嵌合抗体”是一种抗体分子，其中(a)恒定区(即重链和/或轻链)或其一部分被改变、替换或交换，使得抗原结合位点(可变区)与不同或改变的类别、效应子功能和/或物种的恒定区连接，或与向嵌合抗体赋予新特性的完全不同的分子连接；或(b)可变区或其一部分被改变、替换或交换为具有不同或改变的抗原特异性的可变区。嵌合抗体还包括灵长类动物化抗体，特别是人源化抗体。此外，嵌合抗体可以包含在受体抗体或供体抗体中不存在的残基。进行这些修改是为了进一步完善抗体性能。进一步的详细信息见Jones等人，Nature 321:522-525(1986)；Riechmann等人，Nature 332:323-329(1988)；和Presta，Curr.Op.Struct.Biol.2:593-596(1992)。(见美国专利号4,816,567；和Morrison等人,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,81:6851-6855(1984))。

如本文所用，术语“人源化抗体”包括具有鼠抗体的6个CDR但具有人源化框架区和恒定区的抗体。更具体地，如本文所用，术语“人源化抗体”可以包括其中源自另一种哺乳动物物种(如小鼠)种系的CDR序列已被移植至人框架序列上的抗体。

如本文所用，术语“人单克隆抗体”旨在包括具有源自人免疫球蛋白序列的可变区和恒定区的抗体。本发明的人抗体可以包括未由人免疫球蛋白序列编码的氨基酸残基(例如，通过体外随机或位点特异性诱变或通过体内体细胞突变而引入的突变)。然而，在一个实施方案中，如本文所用，术语“人单克隆抗体”不旨在包括其中源自另一种哺乳动物物种(如小鼠)种系的CDR序列已被移植至人框架序列上的抗体。

如本文所用，术语“免疫反应”是指免疫系统对宿主体内抗原的反应，其包括产生抗原特异性抗体和/或细胞毒性反应。对初始抗原暴露的免疫反应(初次免疫反应)通常在数天至两周的滞后期后可检测到；对同一抗原的后续刺激的免疫反应(二次免疫反应)比初次免疫反应的情况下更快。对转基因产物的免疫反应可以包括体液免疫反应(例如抗体反应)和细胞免疫反应(例如细胞溶解性T细胞反应)，其可以被由转基因编码的免疫原性产物引发。可以通过本领域已知的方法(例如通过测量抗体滴度)来测量免疫反应的水平。

如本文所用，术语“APC”或“抗原呈递细胞”表示能够激活T细胞的细胞，包括但不限于某些巨噬细胞、B细胞和树突状细胞。

如本文所用，术语“树突状细胞”或“DC”是指淋巴或非淋巴组织中存在的形态相似细胞类型的多样化群体的任何成员。这些细胞的特征在于其独特的形态、高水平的表面MHC-II类表达(Steinman等人，Ann.Rev.Immunol.9:271(1991)；其对此类细胞的描述通过引用并入本文)。

如本文所用，术语“CD40”具有其在本领域中的一般含义，是指人CD40多肽受体。在一些实施方案中，CD40是如UniProtKB-P25942(也称为人TNR5)所报道的人典型序列的亚型。

如本文所用，术语“CD40L”具有其在本领域中的一般含义，是指人CD40L多肽，例如，如UniProtKB-P25942所报道的，包括其CD40结合结构域SEQ ID NO：1。CD40L可以表达为可溶性多肽，是CD40受体的天然配体。

SEQ ID NO：1>CD40L结合结构域

如本文所用，术语“CD40激动剂抗体”旨在指在基于细胞的测定(如B细胞增殖测定)中，在没有CD40L的情况下增加CD40介导的信号传导活性的抗体。特别是，CD40激动剂抗体(i)其诱导B细胞增殖，如通过流式细胞术分析、或通过分析CFSE标记的细胞的复制稀释度所体外测量的；和/或(ii)诱导细胞因子(如IL-6、IL-12或IL-15)分泌，如通过树突状细胞激活测定所体外测量的。

如本文所用，术语“Langerin”具有其在本领域中的一般含义，是指人C型凝集素域家族4成员K多肽。在一些实施方案中，Langerin是如UniProtKB-Q9UJ71(也称为人CD207)所报道的人典型序列的亚型。

如本文所用，术语“治疗”既指预防性或预防治疗，也指治愈性或疾病修饰性治疗，包括治疗有感染疾病风险或疑似已感染疾病的患者以及生病或已被诊断为患有疾病或医疗状况的患者，并且包括抑制临床复发。可以将治疗施用于患有医疗疾患或最终可能获得该疾患的患者，以预防、治愈疾患或复发性疾患、延迟其发生、减轻其严重程度、或改善其一种或多种症状，或为了延长患者的生存期，使其超过在没有这种治疗的情况下的预期。“治疗方案”是指疾病的治疗模式，例如在疗法期间使用的给药模式。治疗方案可以包括诱导方案和维持方案。短语“诱导方案”或“诱导期”是指用于疾病初始治疗的治疗方案(或治疗方案的一部分)。诱导方案的一般目标是在治疗方案的初始阶段向患者提供高水平的药物。诱导方案可以(部分或全部)采用“负荷方案”，其可以包括施用比医生在维持方案期间会使用的剂量更大的药物，比医生在维持方案期间会施用药物更频繁地施用药物，或两者。短语“维持方案”或“维持期”是指用于在疾病治疗期间维持患者的治疗方案(或治疗方案的一部分)，例如使患者长时间(数月或数年)保持缓解。维持方案可以采用连续疗法(例如，定期施用药物，例如每周、每月、每年等)或间歇疗法(例如，间断治疗、间歇治疗、在复发时治疗、或在达到特定预定标准[例如疼痛、疾病表现等]后治疗)。

如本文所用，术语“药物组合物”是指本文所述的组合物或其药学上可接受的盐，与其它试剂(如载体和/或赋形剂)。如本文所提供的药物组合物通常包含药学上可接受的载体。

如本文所用，术语“药学上可接受的载体”包括任何和所有溶剂、稀释剂或其它液体载体、分散剂或悬浮助剂、表面活性剂、等渗剂、增稠剂或乳化剂、防腐剂、固体粘合剂、润滑剂等，以适合所需的特定剂型。Remington'sPharmaceutical-Sciences，第十六版，E.W.Martin(Mack Publishing Co.,Easton,Pa.,1980)公开了用于配制药物组合物的各种载体和制备其的已知技术。

如本文所用，术语“接种疫苗”是指但不限于，在受试者中引发针对特定抗原的免疫反应的过程。

如本文所用，术语“疫苗组合物”旨在指可以施用于人或动物以诱导免疫系统反应的组合物；该免疫系统反应可以导致激活某些细胞，特别是APC、T淋巴细胞和B淋巴细胞。

如本文所用，术语“抗原”是指如果经处理并由MHC分子呈递，则能够被抗体或T细胞受体(TCR)特异性结合的分子。抗原另外能够被免疫系统识别和/或能够诱导体液免疫反应和/或细胞免疫反应，导致激活B淋巴细胞和/或T淋巴细胞。抗原可以具有一个或多个表位或抗原位点(B表位和T表位)。

如本文所用，术语“佐剂”是指在施用于受试者或动物时可以诱导和/或增强针对抗原的免疫反应的化合物。它也旨在指通常起到加速、延长对特定抗原的特异性免疫反应或增强其质量的作用的物质。在本发明的上下文中，术语“佐剂”是指一种化合物，其既通过影响先天免疫反应的瞬时反应来增强先天免疫反应，也通过抗原呈递细胞(APC)尤其是树突状细胞(DC)的激活和成熟来增强适应性免疫反应的更长期的作用。

如本文所用，表述“治疗有效量”是指本发明活性成分的足够的量，其以适用于医学治疗的合理的益处/风险比诱导免疫反应。

本发明的Ct抗原性多肽

本发明的第一个目的涉及沙眼衣原体(Ct)抗原性多肽，其包含：

-具有与SEQ ID NO：2所示的氨基酸具有至少90％同一性的氨基酸序列的VS4双多肽，或

-具有与SEQ ID NO：3所示的氨基酸具有至少90％同一性的氨基酸序列的YchM多肽，或

-具有与SEQ ID NO：4所示的氨基酸具有至少90％同一性的氨基酸序列的PgP3多肽，或

-具有与SEQ ID NO：5所示的氨基酸具有至少90％同一性的氨基酸序列的PmPG多肽，或

-具有与SEQ ID NO：6所示的氨基酸具有至少90％同一性的氨基酸序列的NqrC多肽。

SEQ ID NO：2VS4双

SEQ ID NO：3YchM抗原

SEQ ID NO：4PgP3抗原

SEQ ID NO：5PmPG抗原

SEQ ID NO：6NqrC抗原

在一些实施方案中，沙眼衣原体(Ct)抗原性多肽包含或由以下组成：

-具有如SEQ ID NO：2所示的氨基酸的VS4双多肽，或

-具有如SEQ ID NO：3所示的氨基酸的YchM多肽，或

-具有如SEQ ID NO：4所示的氨基酸的PgP3多肽，或

-具有如SEQ ID NO：5所示的氨基酸的PmPG多肽，或

-具有如SEQ ID NO：6所示的氨基酸的NqrC多肽。

本发明的Ct抗原性融合蛋白

本发明的进一步目的涉及Ct抗原性融合蛋白，其包含本发明的一个更多个Ct抗原性多肽；

在一些实施方案中，本发明的Ct抗原性融合蛋白包含两个或更多个本发明的Ct抗原性多肽。

在一些实施方案中，本发明的Ct抗原性融合蛋白包含1、2、3、4或5个本发明的Ct抗原性多肽。

在一些实施方案中，本发明的Ct抗原性多肽彼此直接融合，或通过接头融合。

在一些实施方案中，接头选自FlexV1、f1、f2、f3或f4，如下所述。

在一些实施方案中，接头选自SEQ ID NO：7(FlexV1)、SEQ ID NO：8(f1)、SEQ IDNO：9(f2)、SEQ ID NO：10(f3)和SEQ ID NO：11(f4)。

在一些实施方案中，本发明的Ct抗原性融合蛋白具有式(Ag-L)n，其中Ag代表本发明的Ct抗原性多肽，L代表本发明的接头，n代表1至5的整数。

在一些实施方案中，所述融合蛋白以所述顺序包含VS4双抗原性多肽、PmpG抗原性多肽、PgP3抗原性多肽、YchM抗原性多肽以及NqrC抗原性多肽。

在一些实施方案中，本发明的Ct抗原性融合蛋白具有式VS4双–f1-PmpG-f2-PgP3-f3-YchM-f4-NqrC，由如SEQ ID NO：12所示的氨基酸序列组成。

SEQ ID NO：12>融合蛋白VS4双–f1-PmpG-f2-PgP3-f3-YchM-f4-NqrC

生产本发明的Ct抗原性多肽和融合蛋白的方法

可以通过本领域本身已知的任何技术生产本发明的Ct抗原性多肽和Ct抗原性融合蛋白，所述技术例如，但不限于单独的或组合的任何化学、生物、遗传或酶技术。知道所需序列的氨基酸序列后，本领域技术人员可以容易地通过用于生产多肽的标准技术来生产所述多肽。例如，可以使用众所周知的固相方法合成肽，优选使用市售的肽合成仪(如，加利福尼亚州，Foste市Applied Biosystems生产的肽合成仪)，并遵循制造商的说明。可替选的，可以通过如本领域现在公知的重组DNA技术来合成本发明的多肽和融合蛋白。例如，在将编码所需(多)肽的DNA序列掺入表达载体并将此类载体引入将表达所需多肽的合适的真核或原核宿主中后，可以获得作为DNA表达产物的这些片段，之后可以使用公知的技术从所述宿主中分离它们。

本发明的抗体：

本发明的进一步目的涉及针对抗原呈递细胞的表面抗原的抗体，其中重链和/或轻链与本发明的Ct抗原性融合蛋白缀合或融合。

在一些实施方案中，抗体的重链与本发明的Ct抗原性融合蛋白缀合或融合。

在一些实施方案中，抗体的轻链与本发明的Ct抗原性融合蛋白缀合或融合。

在一些实施方案中，抗体的重链和轻链都与本发明的Ct抗原性融合蛋白缀合或融合。

在一些实施方案中，所述抗体是IgG抗体，优选IgG1或IgG4抗体，或甚至更优选IgG4抗体。

在一些实施方案中，所述抗体是嵌合抗体，特别是嵌合小鼠/人抗体。

在一些实施方案中，所述抗体是人源化抗体。

可以基于如上所述制备的鼠单克隆抗体的序列来制备嵌合抗体或人源化抗体。可以使用标准分子生物学技术从感兴趣的鼠杂交瘤获得编码重链和轻链免疫球蛋白的DNA并进行工程化以容纳非鼠(例如人)免疫球蛋白序列。例如，为了产生嵌合抗体，可以使用本领域已知的方法将鼠可变区与人恒定区连接(参见例如Cabilly等人的美国专利号4,816,567)。为了产生人源化抗体，可以使用本领域已知的方法将鼠CDR区域插入人框架中。参见，例如Winter的美国专利号5,225,539和Queen等人的美国专利号5,530,101；5,585,089；5,693,762和6,180,370。

在一些实施方案中，所述抗体是人抗体。在一些实施方案中，可以使用携带部分人免疫系统而不是小鼠系统的转基因或转染色体小鼠来鉴定人抗体。这些转基因和转染色体小鼠分别包括本文称为HuMAb小鼠和KM小鼠的小鼠，并且在本文中统称为“人Ig小鼠”。HuMAb(Medarex,Inc.)含有编码未重排的人重链(μ链和γ链)和K轻链免疫球蛋白序列的人免疫球蛋白基因微座位(miniloci)，以及使内源性μ链和K链基因座失活的靶向突变(参见例如Lonberg等人，1994Nature 368(6474):856-859)。在一些实施方案中，可以使用在转基因和转染色体上携带人免疫球蛋白序列的小鼠(如携带人重链转基因和人轻链转染色体的小鼠)来产生人抗体。此类小鼠在本文中称为“KM小鼠”，详细描述于Ishida等人的PCT公布WO 02/43478中。

在一些实施方案中，所述抗体对专职APC的细胞表面标志物具有特异性。所述抗体可以对另一种专职APC(如B细胞或巨噬细胞)的细胞表面标志物具有特异性。

在一些实施方案中，所述抗体选自特异性结合以下各项的抗体：DC免疫受体(DCIR)、MHC I类、MHC II类、CD1、CD2、CD3、CD4、CD8、CDllb、CD14、CD15、CD16、CD19、CD20、CD29、CD31、CD40、CD43、CD44、CD45、CD54、CD56、CD57、CD58、CD83、CD86、CMRF-44、CMRF-56、DCIR、DC-ASPGR、CLEC-6、CD40、BDCA-2、MARCO、DEC-205、甘露糖受体、Langerin、DECTIN-1、B7-1、B7-2、IFN-γ受体和IL-2受体、ICAM-1、Fey受体、LOX-1和ASPGR。

在一些实施方案中，所述抗体对CD40具有特异性。

在一些实施方案中，抗CD40抗体源自12E12抗体，并且包含：

-包含互补决定区CDR1H、CDR2H和CDR3H的重链，所述CDR1H具有氨基酸序列GFTFSDYYMY(SEQ ID NO：13)，所述CDR2H具有氨基酸序列YINSGGGSTYYPDTVKG(SEQ ID NO：14)，所述CDR3H具有氨基酸序列RGLPFHAMDY(SEQ ID NO：15)，

-和包含互补决定区CDR1L、CDR2L和CDR3L的轻链，所述CDR1L具有氨基酸序列SASQGISNYLN(SEQ ID NO：16)，所述CDR2L具有氨基酸序列YTSILHS(SEQ ID NO：17)，所述CDR3L具有氨基酸序列QQFNKLPPT(SEQ ID NO：18)。

在一些实施方案中，抗CD40抗体源自11B6抗体，并且包含：

-包含互补决定区CDR1H、CDR2H和CDR3H的重链，所述CDR1H具有氨基酸序列GYSFTGYYMH(SEQ ID NO：19)，所述CDR2H具有氨基酸序列RINPYNGATSYNQNFKD(SEQ ID NO：20)，所述CDR3H具有氨基酸序列EDYVY(SEQ ID NO：21)，和

-包含互补决定区CDR1L、CDR2L和CDR3L的轻链，所述CDR1L具有氨基酸序列RSSQSLVHSNGNTYLH(SEQ ID NO：22)，所述CDR2L具有氨基酸序列KVSNRFS(SEQ ID NO：23)，所述CDR3L具有氨基酸序列SQSTHVPWT(SEQ ID NO：24)。

在一些实施方案中，抗CD40抗体源自12B4抗体，并且包含：

-包含互补决定区CDR1H、CDR2H和CDR3H的重链，所述CDR1H具有氨基酸序列GYTFTDYVLH(SEQ ID NO：25)，所述CDR2H具有氨基酸序列YINPYNDGTKYNEKFKG(SEQ ID NO：26)，所述CDR3H具有氨基酸序列GYPAYSGYAMDY(SEQ ID NO：27)，和

-包含互补决定区CDR1L、CDR2L和CDR3L的轻链，所述CDR1L具有氨基酸序列RASQDISNYLN(SEQ ID NO：28)，所述CDR2L具有氨基酸序列YTSRLHS(SEQ ID NO：29)，所述CDR3L具有氨基酸序列HHGNTLPWT(SEQ ID NO：30)。

在一些实施方案中，抗CD40抗体选自如表A中所述的选定的mAb1、mAb2、mAb3、mAb4、mAb5和mAb6。

在一些实施方案中，抗CD40抗体选自：

-包含具有如SEQ ID NO：31所示的氨基酸序列的重链和具有如SEQ ID NO：32所示的氨基酸序列的轻链的抗CD40抗体(mAb1)；

-包含具有如SEQ ID NO：33所示的氨基酸序列的重链和具有如SEQ ID NO：32所示的氨基酸序列的轻链的抗CD40抗体(mAb2)；

-包含具有如SEQ ID NO：34所示的氨基酸序列的重链和具有如SEQ ID NO：35所示的氨基酸序列的轻链的抗CD40抗体(mAb3)；

-包含具有如SEQ ID NO：36所示的氨基酸序列的重链和具有如SEQ ID NO：37所示的氨基酸序列的轻链的抗CD40抗体(mAb4)；

-包含具有如SEQ ID NO：38所示的氨基酸序列的重链和具有如SEQ ID NO：39所示的氨基酸序列的轻链的抗CD40抗体(mAb5)；和

-包含具有如SEQ ID NO：40所示的氨基酸序列的重链和具有如SEQ ID NO：41所示的氨基酸序列的轻链的抗CD40抗体(mAb6)。

表A：CD40抗体

SEQ ID NO：31(人源化11B6的可变重链区(VH)(v2)的氨基酸序列)

SEQ ID NO：32(人源化11B6 VL的可变轻链(VL)Vk(v2)的氨基酸序列)

SEQ ID NO：33(人源化11B6的可变重链区VH(v3)的氨基酸序列)

SEQ ID NO：34(mAb3(12B4)的VH氨基酸序列)

SEQ ID NO：35(mAb3(12B4)的VL氨基酸序列)

SEQ ID NO：36(mAb4(24A3 HC)的VH氨基酸序列)

SEQ ID NO：37(mAb4(24A3 KC)的VL氨基酸序列)

SEQ ID NO：38(mAb5的VH氨基酸序列)

SEQ ID NO：39(mAb5的VL氨基酸序列)

SEQ ID NO：40(mAb6(12E12 H3人源化HC)的VH氨基酸序列)

SEQ ID NO：41(mAb6(人源化K2 12E12)的VL氨基酸序列)

在一些实施方案中，抗CD40抗体是CD40激动剂抗体。CD40激动剂抗体描述于WO2010/009346、WO2010/104747和WO2010/104749中。其它正在开发的抗CD40激动剂抗体包括：Pfizer开发的全人IgG2 CD40激动剂抗体CP-870,893。其以3.48×10-10M的KD与CD40结合，但不阻断CD40L的结合(参见，例如美国专利号7,338,660)；和Seattle Genetics从小鼠抗体克隆S2C6开发的人源化IgG1抗体SGN-40，S2C6是使用人膀胱癌细胞系作为免疫原产生的。SGN-40以1.0×10^-9M的KD与CD40结合，并通过增强CD40和CD40L之间的相互作用而起作用，从而表现出部分激动剂作用(Francisco J A等人,Cancer Res,60:3225-31,2000)。甚至更特别地，所述CD40激动剂抗体选自如表A中所述的选定的mAb1、mAb2、mAb3、mAb4、mAb5和mAb6。

在一些实施方案中，所述CD40激动剂抗体的重链或轻链(即，未与Ct抗原性融合蛋白缀合或融合的链)与CD40L的CD40结合结构域(SEQ ID NO：1)缀合或融合。

在一些实施方案中，CD40L的CD40结合结构域与所述CD40激动剂抗体的轻链或重链的C-末端融合，任选地通过接头融合，所述接头优选如下文所述的FlexV1接头。

在一些实施方案中，本发明的抗体由CD40激动剂抗体组成，其中所述抗体的重链与Ct抗原性融合蛋白融合或缀合，轻链与CD40L的CD40结合结构域(SEQ ID NO：1)缀合或融合。

在一些实施方案中，所述抗体对Langerin具有特异性。在一些实施方案中，所述抗体源自具有ATCC登录号PTA-9852的抗体15B10。在一些实施方案中，所述抗体源自具有ATCC登录号PTA-9853的抗体2G3。在一些实施方案中，所述抗体源自如WO2011032161中所述的抗体91E7、37C1或4C7。

在一些实施方案中，抗Langerin抗体包含重链和轻链，所述重链包含15B10抗体的互补决定区CDR1H、CDR2H和CDR3H，所述轻链包含15B10抗体的互补决定区CDR1L、CDR2L和CDR3L。

在一些实施方案中，抗Langerin抗体包含重链和轻链，所述重链包含2G3抗体的互补决定区CDR1H、CDR2H和CDR3H，所述轻链包含2G3抗体的互补决定区CDR1L、CDR2L和CDR3L。

在一些实施方案中，抗Langerin抗体包含重链和轻链，所述重链包含4C7抗体的互补决定区CDR1H、CDR2H和CDR3H，所述轻链包含4C7抗体的互补决定区CDR1L、CDR2L和CDR3L。

在一些实施方案中，抗体选自如表B中所述的选定的mAb7、mAb8、mAb9。

在一些实施方案中，抗体选自：

-包含具有如SEQ ID NO：42所示的氨基酸序列的重链和具有如SEQ ID NO：43所示的氨基酸序列的轻链的抗体(mAb7)；

-包含具有如SEQ ID NO：44所示的氨基酸序列的重链和具有如SEQ ID NO：45所示的氨基酸序列的轻链的抗体(mAb8)；和

-包含具有如SEQ ID NO：46所示的氨基酸序列的重链和具有如SEQ ID NO：47所示的氨基酸序列的轻链的抗CD40抗体(mAb9)。

SEQ ID NO：42(15B10的可变重链区(VH)的氨基酸序列)

SEQ ID NO：43(15B10的可变轻链(VL)的氨基酸序列)

SEQ ID NO：44(2G3的可变重链区(VH)的氨基酸序列)

SEQ ID NO：45(2G3的可变轻链(VL)的氨基酸序列)

SEQ ID NO：46(4C7的可变重链区(VH)的氨基酸序列)

SEQ ID NO：47(4C7的可变轻链(VL)的氨基酸序列)

可以通过本领域本身已知的任何技术生产本发明的抗体，所述技术例如但不限于单独的或组合的任何化学、生物、遗传或酶技术。知道所需序列的氨基酸序列后，本领域技术人员可以容易地通过用于生产多肽的标准技术来生产所述多肽。例如，可以通过如本领域现在公知的重组DNA技术来合成本发明的抗体。例如，在将编码所需(多)肽的DNA序列掺入表达载体并将此类载体引入将表达所需多肽的合适的真核或原核宿主中后，可以获得作为DNA表达产物的这些片段，之后可以使用公知的技术从所述宿主中分离它们。

抗体的重链和/或轻链通过其C-末端与Ct抗原性融合蛋白缀合或融合。在一些实施方案中，抗体的重链和/或轻链与Ct抗原性融合蛋白的N-末端融合。

在一些实施方案中，通过使用化学偶联将抗体的重链和/或轻链与Ct抗原性融合蛋白缀合。本领域已知数种方法用于使抗体与其缀合物部分附着或缀合。已用于将部分与抗体缀合的接头类型的例子包括但不限于腙类、硫醚类、酯类、二硫化物类和含肽的接头(如缬氨酸-瓜氨酸接头)。可以选择的接头例如对溶酶体隔室内的低pH值切割敏感，或对蛋白酶切割敏感，所述蛋白酶如在肿瘤组织中优选表达的蛋白酶，如组织蛋白酶(例如组织蛋白酶B、C、D)。特别是用于缀合多肽的技术是本领域公知的(参见例如Arnon等人，“Monoclonal Antibodies For Immunotargeting Of Drugs In Cancer Therapy”,Monoclonal Antibodies And Cancer Therapy(Reisfeld等人编辑，Alan R.Liss,Inc.,1985)；Hellstrom等人，“Antibodies For Drug Delivery”,Controlled Drug Delivery(Robinson等人编辑，Marcel Deiker,Inc.,第二版,1987)；Thorpe,“Antibody CarriersOf Cytotoxic Agents In Cancer Therapy:A Review”,Monoclonal Antibodies'84:Biological And Clinical Applications(Pinchera等人编辑，1985)；“Analysis,Results,and Future Prospective of the Therapeutic Use of RadiolabeledAntibody In Cancer Therapy”,Monoclonal Antibodies For Cancer Detection AndTherapy(Baldwin等人编辑，Academic Press,1985)；和Thorpe等人，1982,Immunol.Rev.62:119-58；还参见例如PCT公布WO 89/12624。)通常，肽分别通过N-羟基琥珀酰亚胺酯或马来酰亚胺官能团与抗体上的赖氨酸或半胱氨酸残基共价连接。已报道了使用工程化半胱氨酸进行缀合或掺入非天然氨基酸的方法会改善缀合物的均一性(Axup,J.Y.,Bajjuri,K.M.,Ritland,M.,Hutchins,B.M.,Kim,C.H.,Kazane,S.A.,Halder,R.,Forsyth,J.S.,Santidrian,A.F.,Stafin,K.等人.(2012).Synthesis of site-specificantibody-drug conjugates using unnatural amino acids.Proc.Natl.Acad.Sci.USA109,16101-16106.；Junutula,J.R.,Flagella,K.M.,Graham,R.A.,Parsons,K.L.,Ha,E.,Raab,H.,Bhakta,S.,Nguyen,T.,Dugger,D.L.,Li,G.等人.(2010).Engineered thio-trastuzumab-DM1 conjugate with an improved therapeutic index to target humanepidermal growth factor receptor 2-positive breast cancer.Clin.Cancer Res.16,4769-4778)。Junutula等人(Nat Biotechnol.2008；26:925-32)开发了基于半胱氨酸的位点特异性缀合，称为“THIOMAB”(TDC)，据称与常规缀合方法相比，其显示出改进的治疗指数。还正在探索与已掺入抗体中的非天然氨基酸的缀合用于ADC；然而，该方法的普遍性尚未确定(Axup等人，2012)。特别是，本领域技术人员还可以设想用含酰基供体谷氨酰胺的标签(例如，含有Gin的肽标签或Q-标签)或通过多肽工程化(例如，通过多肽上的氨基酸缺失、插入、取代或突变)而具有反应性的内源性谷氨酰胺进行工程化的含Fc多肽。然后，谷氨酰胺转移酶可以与胺供体剂(例如包含反应性胺或与其连接的小分子)共价交联，以形成稳定且均质的工程化的含Fc多肽缀合物群体，所述胺供体剂通过含酰基供体谷氨酰胺的标签或可及的/暴露的/反应性的内源性谷氨酰胺与所述含Fc多肽位点特异性地缀合(WO2012059882)。

在一些实施方案中，如US20160031988A1和US20120039916A1中所述，抗体的重链和/或轻链通过锚定结构域(dockerin domain)或多个结构域与Ct抗原性融合蛋白缀合，以允许与黏着素(cohesin)融合蛋白非共价偶联。在一些实施方案中，重链和/或轻链通过锚定结构域与黏着素融合蛋白缀合，所述黏着素融合蛋白由如SEQ ID NO：48所示氨基酸序列组成。

SEQ ID NO：48>黏着素融合蛋白

在一些实施方案中，抗体的重链和/或轻链与Ct抗原性融合蛋白融合。在一些实施方案中，Ct抗原性融合蛋白与重链和/或轻链直接融合或通过接头融合。在一些实施方案中，Ct抗原性融合蛋白具有式VS4双-f1-PmpG-f2-PgP3-f3-YchM-f4-NqrC，由如SEQ ID NO：12所示的氨基酸序列组成，所述Ct抗原性融合蛋白与抗体的重链和/或轻链直接融合或通过接头融合。在一些实施方案中，Ct抗原性融合蛋白具有式VS4双-f1-PmpG-f2-PgP3-f3-YchM-f4-NqrC，由如SEQ ID NO：12所示的氨基酸序列组成，所述Ct抗原性融合蛋白与抗体的重链直接融合或通过接头融合。在一些实施方案中，接头是如SEQ ID NO：7所示的FlexV1接头。

本发明的核酸、载体和宿主细胞：

本发明的进一步目的涉及编码本发明的Ct抗原性多肽的核酸。

本发明的进一步目的涉及编码本发明的Ct抗原性融合蛋白的核酸。

本发明的进一步目的涉及编码抗体的重链和/或轻链的核酸，所述抗体针对与本发明的Ct抗原融合蛋白融合的抗原呈递细胞的表面抗原。

通常，所述核酸是DNA或RNA分子，其可以包含于任何合适的载体(如质粒、黏粒、游离体、人造染色体、噬菌体或病毒载体)中。

因此，本发明的进一步目的涉及包含本发明的核酸的载体。

此类载体可以包含调节元件(如启动子、增强子、终止子等)，以在施用于受试者时引起或直接表达所述抗体。用于动物细胞表达载体的启动子和增强子的示例包括SV40的早期启动子和增强子、莫洛尼小鼠白血病病毒的LTR启动子和增强子、免疫球蛋白H链的启动子和增强子等。可以使用任何动物细胞表达载体，只要可以插入并表达编码人抗体C区的基因即可。合适的载体的示例包括pAGE107、pAGE103、pHSG274、pKCR、pSG1βd2-4等。质粒的其它示例包括包含复制起点的复制质粒，或整合质粒，例如，pUC、pcDNA、pBR等。病毒载体的其它示例包括腺病毒载体、逆转录病毒载体、疱疹病毒载体和AAV载体。可以通过本领域已知的技术生产此类重组病毒，如通过转染包装细胞或通过瞬时转染辅助质粒或病毒来进行。病毒包装细胞的典型示例包括PA317细胞、PsiCRIP细胞、GPenv+细胞、293细胞等。可以在例如WO 95/14785、WO 96/22378、US 5,882,877、US 6,013,516、US 4,861,719、US 5,278,056和WO 94/19478中找到用于生产此类复制缺陷重组病毒的详细方案。

本发明的进一步目的涉及已用根据本发明所述的核酸和/或载体转染、感染或转化的宿主细胞。

本发明的核酸可以用于在合适的表达系统中生产本发明的多肽。常见的表达系统包括大肠杆菌(E.coli)宿主细胞和质粒载体、昆虫宿主细胞和杆状病毒载体、以及哺乳动物宿主细胞和载体。宿主细胞的其它示例包括但不限于原核细胞(如细菌)和真核细胞(如酵母细胞、哺乳动物细胞、昆虫细胞、植物细胞等)。具体的示例包括大肠杆菌、克鲁维酵母属酵母或酵母属酵母。哺乳动物宿主细胞包括中国仓鼠卵巢(CHO细胞)，包括dhfr-CHO细胞(如Urlaub和Chasin，1980中所述)与DHFR可选标记物一起使用、CHOK1 dhfr+细胞系、NSO骨髓瘤细胞、COS细胞和SP2细胞，例如GS CHO细胞系与GS Xceed^TM基因表达系统(Lonza)一起使用，或HEK细胞。

本发明还涉及一种生产表达根据本发明所述的多肽的重组宿主细胞的方法，所述方法包括以下步骤：(i)将如上所述的重组核酸或载体体外或离体引入感受态宿主细胞中，(ii)体外或离体培养获得的重组宿主细胞，以及(iii)任选地，选择表达和/或分泌所述抗体的细胞。此类重组宿主细胞可以用于生产本发明的多肽。

因此，如本文所公开的宿主细胞特别适合用于生产本发明的多肽。实际上，当将重组表达引入哺乳动物宿主细胞时，通过将宿主细胞培养足以在宿主细胞中表达多肽的一段时间，并且任选地将多肽分泌至宿主细胞生长的培养介质中来生产多肽。例如，可以在多肽分泌后使用标准蛋白质纯化方法从培养介质中回收并纯化多肽。

药物组合物和疫苗组合物：

如本文所述的Ct抗原性多肽、Ct抗原性融合蛋白以及抗体可以作为一种或多种药物组合物的一部分施用。除非任何常规载体介质与Ct抗原性多肽、Ct抗原性融合蛋白以及抗体不相容，如通过产生任何不希望的生物效应或另外地以有害的方式与药物组合物的任何其它成分发生相互作用，否则认为其使用是在本发明的保护范围内。可以用作药学上可接受的载体的材料的一些示例包括但不限于：糖类，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉类，如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素及其衍生物，如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和乙酸纤维素；粉状黄蓍胶；麦芽；明胶；滑石；赋形剂，如可可脂和栓剂蜡；油类，如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；二醇类，如丙二醇；酯类，如油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂，如氢氧化镁和氢氧化铝；海藻酸；无热原水；等渗盐水；林格氏溶液；根据配方师的判断，以下各项也可以存在于组合物中：乙醇和磷酸盐缓冲溶液，以及其它无毒且相容的润滑剂(如十二烷基硫酸钠和硬脂酸镁)，以及着色剂、脱模剂、包衣剂、甜味剂、调味剂和增香剂、防腐剂和抗氧化剂。

如本文所述的Ct抗原性多肽、Ct抗原性融合蛋白以及抗体特别适用于制备疫苗组合物。

因此，本发明的进一步的目的涉及疫苗组合物，其包含本发明的一个或多个Ct抗原性多肽、一个或多个Ct抗原性融合蛋白或一个或多个抗体。

在一些实施方案中，本发明的疫苗组合物包含佐剂。在一些实施方案中，所述佐剂是明矾。在一些实施方案中，所述佐剂是不完全弗氏佐剂(IFA)或其它油基佐剂，其在30-70％之间，优选在40-60％之间，更优选在45-55％重量/重量比(w/w)之间存在。在一些实施方案中，本发明的疫苗组合物包含至少一种Toll样受体(TLR)激动剂，其选自TLR1、TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR6、TLR7和TLR8激动剂。

治疗方法：

如本文所述的药物组合物或疫苗组合物特别适合用于诱导针对沙眼衣原体的免疫反应，因此可以用于疫苗目的。

因此，本发明的进一步目的涉及一种用于为需要其的受试者接种针对沙眼衣原体的疫苗的方法，所述方法包括施用治疗有效量的本发明的药物组合物或疫苗组合物。

在一些实施方案中，如本文所述的疫苗组合物特别适合用于治疗沙眼。

在一些实施方案中，所述受试者可以是人或任何其他(例如鸟类和哺乳动物)易受衣原体感染的动物(例如，家养动物，如猫和狗；牲畜和农场动物，如马、牛、猪、鸡等)。所述受试者通常是哺乳动物，包括非灵长类动物(例如骆驼、驴、斑马、牛、猪、马、山羊、绵羊、猫、狗、大鼠和小鼠)和灵长类动物(例如猴、黑猩猩和人)。在一些实施方案中，所述受试者是非人动物。在一些实施方案中，所述受试者是农场动物或宠物。在一些实施方案中，所述受试者是人。在一些实施方案中，所述受试者是人的婴儿。在一些实施方案中，所述受试者是人的儿童。在一些实施方案中，所述受试者是成年人。在一些实施方案中，所述受试者是老年人。在一些实施方案中，所述受试者是人的早产儿。

在一些实施方案中，所述受试者可以是有症状的或无症状的。

通常，以治疗有效量将本发明的活性成分(即，药物组合物或疫苗组合物)施用于受试者。将理解的是，本发明的化合物和组合物的每日总用量将由主治医师在合理的医学判断范围内决定。任何特定受试者的特定治疗有效剂量水平将取决于多种因素，包括：所治疗的疾患和疾患的严重程度；所采用的特定化合物的活性；所采用的特定组合物，受试者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；所采用的特定化合物的施用时间、施用途径和排泄率；治疗的持续时间；与所采用的特定多肽组合使用或同时使用的药物；以及医学领域公知的类似因素。例如，化合物的剂量开始时低于达到所需治疗效果所需的水平，并逐渐增加剂量直至达到所需效果，这完全在本领域技术的范围内。然而，产品的每日剂量可以在很宽的范围内变化，每名成人每天0.01至1000mg。特别是，组合物含有0.01、0.05、0.1、0.5、1.0、2.5、5.0、10.0、15.0、25.0、50.0、100、250和500mg活性成分，用于对症调整待治疗受试者的剂量。药物通常含有约0.01mg至约500mg的活性成分，特别是1mg至约100mg的活性成分。通常以每天0.0002mg/kg至约20mg/kg体重，尤其是每天约0.001mg/kg至7mg/kg体重的剂量水平供应有效量的药物。

可以通过任何施用途径将如本文所述的药物组合物或疫苗组合物施用于受试者，特别是通过口服施用、鼻腔施用、直肠施用、局部施用、口腔(例如，舌下)施用、肠胃外(例如，皮下、肌肉内、皮内或静脉内)施用和透皮施用，尽管在任何给定情况下最合适的途径将取决于所治疗病症的性质和严重程度以及正在使用的特定活性物质的性质。

将通过以下附图和实施例进一步说明本发明。然而，这些实施例和附图不应以任何方式解释为限制本发明的范围。

附图说明

图1.产生的第一多表位衣原体DC疫苗的示意图。从文献和我们的计算机模拟分析中选择的来自沙眼衣原体的抗原与αCD40 mAb的重链融合，同时添加了柔性的间隔子以改善其合成和/或分泌。

图2:αCD40疫苗构建体导致沙眼衣原体Ct-5pp特异性记忆T细胞的体外扩增。用与Ct-5pp抗原相关的αCD40 mAb或作为不相关对照的Ebola GP(EBOV)刺激4名供体的PBMC，然后在第9天用与Ct-5pp重叠的肽池重新刺激。图中显示了培养10天后，产生任何测试的细胞因子的CD4+T细胞的百分比。

具体实施方式

实施例1

我们通过在线软件和肽结合预测软件对MOMP VS4、YchM、PgP3、PmPG和NqrC蛋白的氨基酸序列进行计算机模拟分析，绘制出预测的MHC-I和MHC-II表位图，从而识别出在针对沙眼衣原体的候选疫苗中应包含的特异性表位。这五种蛋白质分别使用NetMHC 4.0(https://services.healthtech.dtu.dk/service.php？NetMHC-4.0)和NetMHCII 2.3(https://services.healthtech.dtu.dk/service.php？NetMHCII-2.3)、MHC-I类和MHC-II类/肽结合预测软件进行分析。线性B细胞表位使用BepiPred 2.0(https:// services.healthtech.dtu.dk/service.php？BepiPred-2.0)预测。根据上述方法，我们识别了以下感兴趣的表位：

SEQ ID NO：2VS4双

SEQ ID NO：3YchM抗原

SEQ ID NO：4PgP3抗原

SEQ ID NO：5PmPG抗原

SEQ ID NO：6NqrC抗原

实施例2：

根据图1制备SEQ ID NO：12的多表位蛋白，并将其与抗CD40抗体缀合。冷冻保存衣原体感染个体的PBMC。解冻后，将细胞培养在补充有10％人血清(SAB，Jacques boys)的RPMI中，静置过夜。然后，在10nM aCD40.Ct-5pp或不相关抗原存在下培养细胞。未受刺激或受SEB(10ng/ul)刺激的细胞分别作为阴性和阳性对照。在培养的第2天和第5天，用IL-2(100U/mL)补充以更新介质。第7天，更新介质，将细胞静置24小时，不添加任何细胞因子。第8天，在存在溴苯蝶啶A(5ug/ml)的情况下，用覆盖多表位衣原体构建体的每个抗原的重叠肽池刺激细胞。随后，对细胞进行表型标记物(CD3、CD4、CD8)染色，检测细胞在肽刺激过程中细胞因子的胞内合成(IFNg、TNFa、MIP-1b、IL-2、IL-4、IL-13、IL-10)。使用BD LSRII流式细胞仪，通过流式细胞术评估PFA固定细胞的荧光。随后用FlowJo软件(Tristar)分析数据。结果描绘于图2中。

参考文献：

在整个本申请中，各种参考文献描述了本发明所属领域的情况。这些参考文献的公开在此通过引用并入本公开。

序列表

<110> Inserm

<120> 沙眼衣原体抗原性多肽及其用于疫苗目的的用途

<130> BIO205 LEVY / MC

<160> 48

<170> PatentIn version 3.3

<210> 1

<211> 149

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CD40L结合结构域

<400> 1

Met Gln Lys Gly Asp Gln Asn Pro Gln Ile Ala Ala His Val Ile Ser

1 5 10 15

Glu Ala Ser Ser Lys Thr Thr Ser Val Leu Gln Trp Ala Glu Lys Gly

20 25 30

Tyr Tyr Thr Met Ser Asn Asn Leu Val Thr Leu Glu Asn Gly Lys Gln

35 40 45

Leu Thr Val Lys Arg Gln Gly Leu Tyr Tyr Ile Tyr Ala Gln Val Thr

50 55 60

Phe Cys Ser Asn Arg Glu Ala Ser Ser Gln Ala Pro Phe Ile Ala Ser

65 70 75 80

Leu Cys Leu Lys Ser Pro Gly Arg Phe Glu Arg Ile Leu Leu Arg Ala

85 90 95

Ala Asn Thr His Ser Ser Ala Lys Pro Cys Gly Gln Gln Ser Ile His

100 105 110

Leu Gly Gly Val Phe Glu Leu Gln Pro Gly Ala Ser Val Phe Val Asn

115 120 125

Val Thr Asp Pro Ser Gln Val Ser His Gly Thr Gly Phe Thr Ser Phe

130 135 140

Gly Leu Leu Lys Leu

145

<210> 2

<211> 30

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> VS4双抗原

<400> 2

Ala Ser Ile Asp Tyr His Glu Trp Gln Ala Ser Leu Ala Leu Ser Tyr

1 5 10 15

Arg Leu Asn Met Phe Thr Pro Tyr Ile Gly Val Lys Trp Ser

20 25 30

<210> 3

<211> 30

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> YchM抗原

<400> 3

Glu Lys Pro Pro Lys Ile Phe Ile Leu Cys Met Thr Arg Val Pro Thr

1 5 10 15

Ile Asp Ala Ser Ala Met His Ala Leu Glu Glu Phe Phe Leu

20 25 30

<210> 4

<211> 30

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> PgP3抗原

<400> 4

Gly Lys Phe Thr Val Thr Pro Lys Ser Ser Gly Ser Met Phe Leu Val

1 5 10 15

Ser Ala Asp Ile Ile Ala Ser Arg Met Glu Gly Gly Val Val

20 25 30

<210> 5

<211> 30

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> PmPG抗原

<400> 5

Pro Ala Ala Asn Gln Leu Ile Thr Leu Ser Asn Leu His Leu Ser Leu

1 5 10 15

Ser Ser Leu Leu Ala Asn Asn Ala Val Thr Asn Pro Pro Thr

20 25 30

<210> 6

<211> 30

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> NqrC抗原

<400> 6

Cys Asn Gly Val Thr Glu Ser Phe Ser His Ser Leu Ala Pro Tyr Arg

1 5 10 15

Ala Leu Leu Thr Phe Phe Ala Asn Ser Lys Pro Ser Gly Glu

20 25 30

<210> 7

<211> 27

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 接头

<400> 7

Gln Thr Pro Thr Asn Thr Ile Ser Val Thr Pro Thr Asn Asn Ser Thr

1 5 10 15

Pro Thr Asn Asn Ser Asn Pro Lys Pro Asn Pro

20 25

<210> 8

<211> 25

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 接头

<400> 8

Ser Ser Val Ser Pro Thr Thr Ser Val His Pro Thr Pro Thr Ser Val

1 5 10 15

Pro Pro Thr Pro Thr Lys Ser Ser Pro

20 25

<210> 9

<211> 25

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 接头

<400> 9

Pro Thr Ser Thr Pro Ala Asp Ser Ser Thr Ile Thr Pro Thr Ala Thr

1 5 10 15

Pro Thr Ala Thr Pro Thr Ile Lys Gly

20 25

<210> 10

<211> 25

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 接头

<400> 10

Thr Val Thr Pro Thr Ala Thr Ala Thr Pro Ser Ala Ile Val Thr Thr

1 5 10 15

Ile Thr Pro Thr Ala Thr Thr Lys Pro

20 25

<210> 11

<211> 25

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 接头

<400> 11

Thr Asn Gly Ser Ile Thr Val Ala Ala Thr Ala Pro Thr Val Thr Pro

1 5 10 15

Thr Val Asn Ala Thr Pro Ser Ala Ala

20 25

<210> 12

<211> 250

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 融合蛋白

<400> 12

Ala Ser Ile Asp Tyr His Glu Trp Gln Ala Ser Leu Ala Leu Ser Tyr

1 5 10 15

Arg Leu Asn Met Phe Thr Pro Tyr Ile Gly Val Lys Trp Ser Ser Ser

20 25 30

Val Ser Pro Thr Thr Ser Val His Pro Thr Pro Thr Ser Val Pro Pro

35 40 45

Thr Pro Thr Lys Ser Ser Pro Pro Ala Ala Asn Gln Leu Ile Thr Leu

50 55 60

Ser Asn Leu His Leu Ser Leu Ser Ser Leu Leu Ala Asn Asn Ala Val

65 70 75 80

Thr Asn Pro Pro Thr Pro Thr Ser Thr Pro Ala Asp Ser Ser Thr Ile

85 90 95

Thr Pro Thr Ala Thr Pro Thr Ala Thr Pro Thr Ile Lys Gly Gly Lys

100 105 110

Phe Thr Val Thr Pro Lys Ser Ser Gly Ser Met Phe Leu Val Ser Ala

115 120 125

Asp Ile Ile Ala Ser Arg Met Glu Gly Gly Val Val Thr Val Thr Pro

130 135 140

Thr Ala Thr Ala Thr Pro Ser Ala Ile Val Thr Thr Ile Thr Pro Thr

145 150 155 160

Ala Thr Thr Lys Pro Glu Lys Pro Pro Lys Ile Phe Ile Leu Cys Met

165 170 175

Thr Arg Val Pro Thr Ile Asp Ala Ser Ala Met His Ala Leu Glu Glu

180 185 190

Phe Phe Leu Thr Asn Gly Ser Ile Thr Val Ala Ala Thr Ala Pro Thr

195 200 205

Val Thr Pro Thr Val Asn Ala Thr Pro Ser Ala Ala Cys Asn Gly Val

210 215 220

Thr Glu Ser Phe Ser His Ser Leu Ala Pro Tyr Arg Ala Leu Leu Thr

225 230 235 240

Phe Phe Ala Asn Ser Lys Pro Ser Gly Glu

245 250

<210> 13

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> H-CDR1

<400> 13

Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr Tyr Met Tyr

1 5 10

<210> 14

<211> 17

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> H-CDR2

<400> 14

Tyr Ile Asn Ser Gly Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Pro Asp Thr Val Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 15

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> H-CDR3

<400> 15

Arg Gly Leu Pro Phe His Ala Met Asp Tyr

1 5 10

<210> 16

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> L-CDR1

<400> 16

Ser Ala Ser Gln Gly Ile Ser Asn Tyr Leu Asn

1 5 10

<210> 17

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> L-CDR2

<400> 17

Tyr Thr Ser Ile Leu His Ser

1 5

<210> 18

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> L-CDR3

<400> 18

Gln Gln Phe Asn Lys Leu Pro Pro Thr

1 5

<210> 19

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> H-CDR1

<400> 19

Gly Tyr Ser Phe Thr Gly Tyr Tyr Met His

1 5 10

<210> 20

<211> 17

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> H-CDR2

<400> 20

Arg Ile Asn Pro Tyr Asn Gly Ala Thr Ser Tyr Asn Gln Asn Phe Lys

1 5 10 15

Asp

<210> 21

<211> 5

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> H-CDR3

<400> 21

Glu Asp Tyr Val Tyr

1 5

<210> 22

<211> 16

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> L-CDR1

<400> 22

Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr Leu His

1 5 10 15

<210> 23

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> L-CDR2

<400> 23

Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser

1 5

<210> 24

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> L-CDR3

<400> 24

Ser Gln Ser Thr His Val Pro Trp Thr

1 5

<210> 25

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> H-CDR1

<400> 25

Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Val Leu His

1 5 10

<210> 26

<211> 17

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> H-CDR2

<400> 26

Tyr Ile Asn Pro Tyr Asn Asp Gly Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe Lys

1 5 10 15

Gly

<210> 27

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> H-CDR3

<400> 27

Gly Tyr Pro Ala Tyr Ser Gly Tyr Ala Met Asp Tyr

1 5 10

<210> 28

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> L-CDR1

<400> 28

Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr Leu Asn

1 5 10

<210> 29

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> L-CDR2

<400> 29

Tyr Thr Ser Arg Leu His Ser

1 5

<210> 30

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> L-CDR3

<400> 30

His His Gly Asn Thr Leu Pro Trp Thr

1 5

<210> 31

<211> 116

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> VH结构域

<400> 31

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Gly Tyr

20 25 30

Tyr Met His Trp Val Lys Gln Ala His Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Arg Ile Asn Pro Tyr Asn Gly Ala Thr Ser Tyr Asn Gln Asn Phe

50 55 60

Lys Asp Arg Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Glu Asp Tyr Val Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val

100 105 110

Ser Ser Ala Ser

115

<210> 32

<211> 108

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> VL结构域

<400> 32

Asp Val Val Met Thr Gln Ser Pro Leu Ser Leu Pro Val Thr Leu Gly

1 5 10 15

Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser

20 25 30

Asn Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Arg Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Val Gly Val Tyr Phe Cys Ser Gln Ser

85 90 95

Thr His Val Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys

100 105

<210> 33

<211> 116

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> VH结构域

<400> 33

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Gly Tyr

20 25 30

Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Arg Ile Asn Pro Tyr Asn Gly Ala Thr Ser Tyr Asn Gln Asn Phe

50 55 60

Lys Asp Arg Val Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Glu Asp Tyr Val Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val

100 105 110

Ser Ser Ala Ser

115

<210> 34

<211> 123

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> VH结构域

<400> 34

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr

20 25 30

Val Leu His Trp Val Lys Gln Lys Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Tyr Ile Asn Pro Tyr Asn Asp Gly Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ser Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gly Tyr Pro Ala Tyr Ser Gly Tyr Ala Met Asp Tyr Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Ser

115 120

<210> 35

<211> 103

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> VL结构域

<400> 35

Asp Ile Gln Met Thr Gln Thr Thr Ser Ser Leu Ser Ala Ser Leu Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asp Gly Thr Val Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Tyr Thr Ser Arg Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Asn Leu Glu Gln

65 70 75 80

Glu Asp Ile Ala Thr Tyr Phe Cys His His Gly Asn Thr Leu Pro Trp

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys

100

<210> 36

<211> 121

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> VH结构域

<400> 36

Asp Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Asp Leu Val Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Ser Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Thr Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Asp

20 25 30

Tyr Ser Trp His Trp Ile Arg Gln Phe Pro Gly Asn Lys Leu Glu Trp

35 40 45

Met Gly Tyr Ile Tyr Tyr Ser Gly Ser Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu

50 55 60

Lys Ser Arg Ile Ser Ile Thr Arg Asp Thr Ser Lys Asn Gln Phe Phe

65 70 75 80

Leu Gln Leu Asn Ser Val Thr Thr Glu Asp Ser Ala Thr Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg Phe Tyr Tyr Gly Tyr Ser Phe Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser Ala Ser

115 120

<210> 37

<211> 102

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> VL结构域

<400> 37

Gln Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Phe Met Ser Ala Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Lys Val Thr Met Thr Cys Ser Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met

20 25 30

His Trp Tyr Gln Gln Lys Ser Gly Thr Ser Pro Lys Arg Trp Ile Tyr

35 40 45

Asp Thr Ser Lys Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Ser Met Glu Ala Glu

65 70 75 80

Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr

85 90 95

Phe Gly Ala Gly Thr Lys

100

<210> 38

<211> 128

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> VH结构域

<400> 38

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Tyr

20 25 30

Tyr Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Asn Pro Asp Ser Gly Gly Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Arg Asp Thr Ser Ile Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Asn Arg Leu Arg Ser Asp Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asp Gln Pro Leu Gly Tyr Cys Thr Asn Gly Val Cys Ser Tyr

100 105 110

Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser

115 120 125

<210> 39

<211> 103

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> VL结构域

<400> 39

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Tyr Ser Trp

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Asn Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Thr Ala Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ala Asn Ile Phe Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys

100

<210> 40

<211> 121

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> VH结构域

<400> 40

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Thr Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asp Tyr

20 25 30

Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Tyr Ile Asn Ser Gly Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Pro Asp Thr Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Thr Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Arg Gly Leu Pro Phe His Ala Met Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser

115 120

<210> 41

<211> 103

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> VL结构域

<400> 41

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Ser Ala Ser Gln Gly Ile Ser Asn Tyr

20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Val Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Tyr Thr Ser Ile Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Phe Asn Lys Leu Pro Pro

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys

100

<210> 42

<211> 119

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> VH结构域

<400> 42

Gln Val Gln Leu Arg Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr

20 25 30

Val Ile Ser Trp Val Lys Gln Arg Thr Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Asp Ile Tyr Pro Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Tyr Asn Glu Asn Phe

50 55 60

Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Thr Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Thr Tyr Tyr Asn Tyr Pro Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu

100 105 110

Val Thr Val Ser Ala Ala Ser

115

<210> 43

<211> 108

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> VL结构域

<400> 43

Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Arg Leu Gly

1 5 10 15

Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Ser

20 25 30

Asn Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asn Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Leu Tyr Phe Cys Ser Gln Ser

85 90 95

Thr His Val Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys

100 105

<210> 44

<211> 119

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> VH结构域

<400> 44

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Lys Gly

1 5 10 15

Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Leu Thr Phe Asn Ile Tyr

20 25 30

Ala Met Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Arg Ile Arg Asn Lys Ser Asn Asn Tyr Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp

50 55 60

Ser Val Lys Asp Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Gln Ser Leu

65 70 75 80

Leu Tyr Leu Gln Met Asn Asn Leu Lys Thr Glu Asp Thr Ala Met Tyr

85 90 95

Tyr Cys Val Gly Arg Asp Trp Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu

100 105 110

Val Thr Val Ser Ala Ala Ser

115

<210> 45

<211> 105

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> VL结构域

<400> 45

Gln Ala Val Val Thr Gln Glu Ser Ala Leu Thr Thr Ser Pro Gly Glu

1 5 10 15

Thr Val Thr Leu Thr Cys Arg Ser Ser Thr Gly Ala Val Thr Thr Ser

20 25 30

Asn Tyr Ala Asn Trp Val Gln Glu Lys Pro Asp His Leu Phe Thr Gly

35 40 45

Leu Ile Gly Gly Thr Asn Asn Arg Val Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe

50 55 60

Ser Gly Ser Leu Ile Gly Asp Lys Ala Ala Leu Thr Ile Thr Gly Ala

65 70 75 80

Gln Thr Glu Asp Glu Ala Ile Tyr Phe Cys Ala Leu Trp Tyr Ser Asn

85 90 95

His Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys

100 105

<210> 46

<211> 124

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 重链

<400> 46

Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Ile Asp His

20 25 30

Asp Met His Trp Val Gln Gln Thr Pro Val Tyr Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Ala Ile Asp Pro Glu Thr Gly Asp Thr Gly Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Lys Ala Ile Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ser Arg Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Thr Ile Pro Phe Tyr Tyr Ser Asn Tyr Ser Pro Phe Ala Tyr Trp Gly

100 105 110

Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala Ala Lys Ser

115 120

<210> 47

<211> 102

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 轻链

<400> 47

Gln Ile Val Leu Ser Gln Ser Pro Ala Ile Leu Ser Ala Ser Pro Gly

1 5 10 15

Glu Lys Val Thr Met Thr Cys Arg Ala Ser Ser Ser Val Ser Tyr Met

20 25 30

His Trp Tyr Gln Arg Lys Pro Gly Ser Ser Pro Lys Pro Trp Ile Tyr

35 40 45

Ala Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu

65 70 75 80

Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Ser Asn Pro Leu Thr

85 90 95

Phe Gly Ala Gly Thr Lys

100

<210> 48

<211> 486

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 黏着素融合蛋白

<400> 48

Met Asp Pro Lys Gly Ser Leu Ser Trp Arg Ile Leu Leu Phe Leu Ser

1 5 10 15

Leu Ala Phe Glu Leu Ser Tyr Gly Gly Leu Asn Asp Ile Phe Glu Ala

20 25 30

Gln Lys Ile Glu Trp His Glu Asp Asp Leu Asp Ala Val Arg Ile Lys

35 40 45

Val Asp Thr Val Asn Ala Lys Pro Gly Asp Thr Val Arg Ile Pro Val

50 55 60

Arg Phe Ser Gly Ile Pro Ser Lys Gly Ile Ala Asn Cys Asp Phe Val

65 70 75 80

Tyr Ser Tyr Asp Pro Asn Val Leu Glu Ile Ile Glu Ile Glu Pro Gly

85 90 95

Asp Ile Ile Val Asp Pro Asn Pro Asp Lys Ser Phe Asp Thr Ala Val

100 105 110

Tyr Pro Asp Arg Lys Ile Ile Val Phe Leu Phe Ala Glu Asp Ser Gly

115 120 125

Thr Gly Ala Tyr Ala Ile Thr Lys Asp Gly Val Phe Ala Thr Ile Val

130 135 140

Ala Lys Val Lys Glu Gly Ala Pro Asn Gly Leu Ser Val Ile Lys Phe

145 150 155 160

Val Glu Val Gly Gly Phe Ala Asn Asn Asp Leu Val Glu Gln Lys Thr

165 170 175

Gln Phe Phe Asp Gly Gly Val Asn Val Gly Asp Thr Thr Glu Pro Ala

180 185 190

Thr Pro Thr Thr Pro Val Thr Thr Pro Thr Thr Thr Asp Asp Leu Asp

195 200 205

Ala Gln Thr Pro Thr Asn Thr Ile Ser Val Thr Pro Thr Asn Asn Ser

210 215 220

Thr Pro Thr Asn Asn Ser Asn Pro Lys Pro Asn Pro Ala Ser Ile Asp

225 230 235 240

Tyr His Glu Trp Gln Ala Ser Leu Ala Leu Ser Tyr Arg Leu Asn Met

245 250 255

Phe Thr Pro Tyr Ile Gly Val Lys Trp Ser Ser Ser Val Ser Pro Thr

260 265 270

Thr Ser Val His Pro Thr Pro Thr Ser Val Pro Pro Thr Pro Thr Lys

275 280 285

Ser Ser Pro Pro Ala Ala Asn Gln Leu Ile Thr Leu Ser Asn Leu His

290 295 300

Leu Ser Leu Ser Ser Leu Leu Ala Asn Asn Ala Val Thr Asn Pro Pro

305 310 315 320

Thr Pro Thr Ser Thr Pro Ala Asp Ser Ser Thr Ile Thr Pro Thr Ala

325 330 335

Thr Pro Thr Ala Thr Pro Thr Ile Lys Gly Gly Lys Phe Thr Val Thr

340 345 350

Pro Lys Ser Ser Gly Ser Met Phe Leu Val Ser Ala Asp Ile Ile Ala

355 360 365

Ser Arg Met Glu Gly Gly Val Val Thr Val Thr Pro Thr Ala Thr Ala

370 375 380

Thr Pro Ser Ala Ile Val Thr Thr Ile Thr Pro Thr Ala Thr Thr Lys

385 390 395 400

Pro Glu Lys Pro Pro Lys Ile Phe Ile Leu Cys Met Thr Arg Val Pro

405 410 415

Thr Ile Asp Ala Ser Ala Met His Ala Leu Glu Glu Phe Phe Leu Thr

420 425 430

Asn Gly Ser Ile Thr Val Ala Ala Thr Ala Pro Thr Val Thr Pro Thr

435 440 445

Val Asn Ala Thr Pro Ser Ala Ala Cys Asn Gly Val Thr Glu Ser Phe

450 455 460

Ser His Ser Leu Ala Pro Tyr Arg Ala Leu Leu Thr Phe Phe Ala Asn

465 470 475 480

Ser Lys Pro Ser Gly Glu

485

Claims (33)

1.一种沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis)(Ct)抗原性多肽，其包含：

-具有与SEQ ID NO：2所示的氨基酸具有至少80％同一性的氨基酸序列的VS4双多肽，或

-具有与SEQ ID NO：3所示的氨基酸具有至少80％同一性的氨基酸序列的YchM多肽，或

-具有与SEQ ID NO：4所示的氨基酸具有至少80％同一性的氨基酸序列的PgP3多肽，或

-具有与SEQ ID NO：5所示的氨基酸具有至少80％同一性的氨基酸序列的PmPG多肽，或

-具有与SEQ ID NO：6所示的氨基酸具有至少80％同一性的氨基酸序列的NqrC多肽。

2.一种Ct抗原性融合蛋白，其包含一个或多个权利要求1所述的Ct抗原性多肽。

3.根据权利要求2所述的Ct抗原性融合蛋白，其包含1、2、3、4或5个权利要求1所述的Ct抗原性多肽。

4.根据权利要求3所述的Ct抗原性融合蛋白，其中所述Ct抗原性多肽彼此直接融合，或通过接头融合。

5.根据权利要求4所述的Ct抗原性融合蛋白，其中所述接头选自FlexV1、f1、f2、f3或f4。

6.根据权利要求2所述的Ct抗原性融合蛋白，其具有式(Ag-L)n，其中Ag代表权利要求1所述的Ct抗原性多肽，L代表接头，n代表1至5的整数。

7.根据权利要求2所述的Ct抗原性融合蛋白，其以所述顺序包含VS4双抗原性多肽、PmpG抗原性多肽、PgP3抗原性多肽、YchM抗原性多肽以及NqrC抗原性多肽。

8.根据权利要求2所述的Ct抗原性融合蛋白，其具有式VS4双–f1-PmpG-f2-PgP3-f3-YchM-f4-NqrC，由如SEQ ID NO：12所示的氨基酸序列组成。

9.一种针对抗原呈递细胞的表面抗原的抗体，其中重链和/或轻链与权利要求2所述的Ct抗原性融合蛋白缀合或融合。

10.根据权利要求9所述的抗体，其中所述抗体的重链与权利要求2所述的Ct抗原性融合蛋白缀合或融合。

11.根据权利要求9所述的抗体，其中所述抗体的轻链与权利要求2所述的Ct抗原性融合蛋白缀合或融合。

12.根据权利要求9所述的抗体，其中所述抗体的重链和轻链都与一个权利要求2所述的Ct抗原性融合蛋白缀合或融合。

13.根据权利要求9所述的抗体，其是IgG抗体，优选是IgG1或IgG4抗体，或甚至更优选是IgG4抗体。

14.根据权利要求9所述的抗体，其是嵌合抗体，特别是嵌合小鼠/人抗体或人源化抗体。

15.根据权利要求9所述的抗体，其选自特异性结合以下各项的抗体：DC免疫受体(DCIR)、MHC I类、MHC II类、CD1、CD2、CD3、CD4、CD8、CDl lb、CD14、CD15、CD16、CD19、CD20、CD29、CD31、CD40、CD43、CD44、CD45、CD54、CD56、CD57、CD58、CD83、CD86、CMRF-44、CMRF-56、DCIR、DC-ASPGR、CLEC-6、CD40、BDCA-2、MARCO、DEC-205、甘露糖受体、Langerin、DECTIN-1、B7-1、B7-2、IFN-？受体和IL-2受体、ICAM-1、Fey受体、LOX-1和ASPGR。

16.根据权利要求9所述的抗体，其特异于CD40。

17.根据权利要求16所述的抗体，其中所述抗体

-来源于12E12抗体并且包含：

ο包含互补决定区CDR1H、CDR2H和CDR3H的重链，所述CDR1H具有氨基酸序列GFTFSDYYMY(SEQ ID NO：13)，所述CDR2H具有氨基酸序列YINSGGGSTYYPDTVKG(SEQ ID NO：14)，所述CDR3H具有氨基酸序列RGLPFHAMDY(SEQ ID NO：15)，

ο和包含互补决定区CDR1L、CDR2L和CDR3L的轻链，所述CDR1L具有氨基酸序列SASQGISNYLN(SEQ ID NO：16)，所述CDR2L具有氨基酸序列YTSILHS(SEQ ID NO：17)，所述CDR3L具有氨基酸序列QQFNKLPPT(SEQ ID NO：18)。

-或来源于11B6抗体并且包含：

ο包含互补决定区CDR1H、CDR2H和CDR3H的重链，所述CDR1H具有氨基酸序列GYSFTGYYMH(SEQ ID NO：19)，所述CDR2H具有氨基酸序列RINPYNGATSYNQNFKD(SEQ ID NO：20)，所述CDR3H具有氨基酸序列EDYVY(SEQ ID NO：21)，和

ο包含互补决定区CDR1L、CDR2L和CDR3L的轻链，所述CDR1L具有氨基酸序列RSSQSLVHSNGNTYLH(SEQ ID NO：22)，所述CDR2L具有氨基酸序列KVSNRFS(SEQ ID NO：23)，所述CDR3L具有氨基酸序列SQSTHVPWT(SEQ ID NO：24)。

-或来源于12B4抗体并且包含：

ο包含互补决定区CDR1H、CDR2H和CDR3H的重链，所述CDR1H具有氨基酸序列GYTFTDYVLH(SEQ ID NO：25)，所述CDR2H具有氨基酸序列YINPYNDGTKYNEKFKG(SEQ ID NO：26)，所述CDR3H具有氨基酸序列GYPAYSGYAMDY(SEQ ID NO：27)，和

ο包含互补决定区CDR1L、CDR2L和CDR3L的轻链，所述CDR1L具有氨基酸序列RASQDISNYLN(SEQ ID NO：28)，所述CDR2L具有氨基酸序列YTSRLHS(SEQ ID NO：29)，所述CDR3L具有氨基酸序列HHGNTLPWT(SEQ ID NO：30)。

18.根据权利要求16所述的抗体，其中所述抗CD40抗体选自如表A中所述的选定的mAb1、mAb2、mAb3、mAb4、mAb5和mAb6。

19.根据权利要求16所述的抗体，其是CD40激动剂抗体。

20.根据权利要求19所述的抗体，其中所述CD40激动剂抗体的重链或轻链(即未与所述Ct抗原性融合蛋白缀合或融合的链)与CD40L的CD40结合结构域(SEQ ID NO：1)缀合或融合。

21.根据权利要求20所述的抗体，其中所述CD40L的CD40结合结构域与所述CD40激动剂抗体的轻链或重链的C-末端融合，任选地通过接头融合，优选通过所述FlexV1接头。

22.根据权利要求20所述的抗体，其中所述抗体的重链与Ct抗原性融合蛋白融合或缀合，所述轻链与CD40L的CD40结合结构域(SEQ ID NO：1)缀合或融合。

23.根据权利要求9所述的抗体，其特异于Langerin。

24.根据权利要求23所述的抗体，其包含

-含有15B10抗体的互补决定区CDR1H、CDR2H和CDR3H的重链以及含有15B10抗体的互补决定区CDR1L、CDR2L和CDR3L的轻链，或

-含有2G3抗体的互补决定区CDR1H、CDR2H和CDR3H的重链以及含有2G3抗体的互补决定区CDR1L、CDR2L和CDR3L的轻链，或

-含有4C7抗体的互补决定区CDR1H、CDR2H和CDR3H的重链以及含有4C7抗体的互补决定区CDR1L、CDR2L和CDR3L的轻链。

25.根据权利要求23所述的抗体，其选自如表B所述的所选mAb7、mAb8、mAb9。

26.根据权利要求9所述的抗体，其包含i)通过锚定结构域与黏着素融合蛋白缀合的重链和或轻链，所述黏着素融合蛋白由如SEQ ID NO：48所示氨基酸序列组成。

27.根据权利要求9所述的抗体，其中所述重链和/或所述轻链通过选自FlexV1、f1、f2、f3和f4的接头与权利要求2所述的Ct抗原性融合蛋白融合。

28.根据权利要求27所述的抗体，其中所述Ct抗原性融合蛋白具有式VS4双-f1-PmpG-f2-PgP3-f3-YchM-f4-NqrC并且由如SEQ ID NO：12所示的氨基酸序列组成，所述Ct抗原性融合蛋白与所述抗体的重链和/或轻链直接融合或通过接头融合。

29.一种核酸，其编码：

-权利要求1所述的Ct抗原性多肽，或

-权利要求9所述的Ct抗原性融合蛋白

-权利要求9所述的抗体的重链和/或轻链。

30.一种载体，其包含权利要求29所述的核酸。

31.一种宿主细胞，其已经被权利要求29所述的核酸和/或权利要求30所述的载体转染、感染或转化。

32.一种疫苗组合物，其包含：

-一种或多种权利要求1所述的沙眼衣原体多肽，或

-一种或多种权利要求9所述的Ct抗原性融合蛋白，或

-一种或多种权利要求9所述的抗体。

33.一种用于为需要其的受试者接种针对沙眼衣原体的疫苗的方法，其包括施用治疗有效量的：

-一种或多种权利要求1所述的沙眼衣原体多肽，或

-一种或多种权利要求2所述的Ct抗原性融合蛋白，或

-一种或多种权利要求9所述的抗体。