CN117137130A - 一种双蛋白高营养配方食品制剂及其制备方法与应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及乳剂型特医食品领域，尤其是一种双蛋白高营养配方食品制剂及其制备方法与应用，现提出如下方案，其包括：步骤一，将乳清蛋白和谷类蛋白与碳水化合物加入纯水中，剪切混匀，再加入矿物质元素、水溶性维生素、胆碱、肌醇、牛磺酸、左旋肉碱，剪切混匀，溶解后为水相溶液；步骤二，将油溶性维生素加入到液体脂肪中，剪切混匀，溶解后为油相溶液；将油相溶液与水相溶液混合并定容，剪切混匀，得到混合溶液，保持混合溶液的pH为6.9‑7.2；步骤三，对混合溶液进行高压均质处理，得到乳剂，将乳剂密封灭菌得到食品制剂。本发明降低血清中的总IgE和特异性IgE水平，降低了IgE的结合能力，降低了肝脏中TC、TG的含量，适用于易过敏性体质的人群使用。

Description

一种双蛋白高营养配方食品制剂及其制备方法与应用
技术领域
本发明涉及乳剂型特医食品领域，尤其是一种双蛋白高营养配方食品制剂及其制备方法与应用。
背景技术
特殊医学用途配方食品(以下简称“特医食品”)是为满足进食受限、消化吸收障碍、代谢紊乱或特定疾病状态人群对营养素或膳食的特殊需要，专门加工配制而成的一类配方食品；该类产品必须在医生或临床营养师指导下，单独食用或与其他食品配合食用。特医食品能够改善患者营养不良状态。其具有的免疫调控、减轻氧化应激、维护胃肠道功能与结构、降低炎症反应、促进伤口愈合等功能；特医食品基质可以分为粉剂和乳剂，相比于粉剂，乳剂使用简单，但开发难度大，乳剂产品可直接食用，也能管饲，便于临床应用，同时易于为患者提供精准营养，市场使用率更高，产品需求率高。
申请号为CN202211463905.3公开的“一种乳清蛋白-豆类蛋白共稳定的全营养特殊医学用途配方食品乳剂及其制备方法”提出的配方食品乳剂，虽然通过巧妙地添加未水解的豆类蛋白，优化乳清蛋白与豆类蛋白的含量及配比，得出一种具有良好稳定性的双蛋白共稳定体系，有效解决了离子诱导及热诱导引起的乳清蛋白乳液失稳凝胶化而无法流动的问题，但是其并不能满足代谢缓慢的人群对加快体内胆固醇或脂肪代谢的特殊需要；
为此，本发明提出了一种双蛋白高营养配方食品制剂及其制备方法与应用。
发明内容
为解决现有技术中的问题，本发明提出了一种双蛋白高营养配方食品制剂及其制备方法与应用。
谷类蛋白是目前最丰富、价格最低的蛋白质来源；不同种类蛋白质的氨基酸组成和结构特点都不同，功能性质也各不相同；其中，小米蛋白相比于一些常见的过敏原如麦麸和大豆，小米蛋白的过敏原性较低；大米蛋白中的蛋白质经过消化酶的作用，可以迅速分解为小分子量的氨基酸，有利于人体对其进行吸收和利用；黑米蛋白中的抗氧化物质可以帮助抵抗自由基的损害，减轻氧化应激对身体的影响；这有助于提高免疫力、延缓衰老和预防慢性疾病；玉米醇溶蛋白亲水和疏水基团分区明显，含有一定量的极性氨基酸；小麦蛋白中的醇溶蛋白和其他蛋白通常又以交联形式存在，使其在稳定乳液方面颇有难度；荞麦蛋白中球蛋白占据了较大比重，在盐溶液中有较好的分散性；燕麦蛋白中富含可溶性纤维和不可溶性纤维，有助于促进消化系统的健康。
为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：
本发明第一方面提出一种双蛋白高营养配方食品制剂，包括如下组分：乳清蛋白、谷类蛋白、脂肪、碳水化合物、维生素、矿物质元素、胆碱、肌醇、牛磺酸、左旋肉碱。
胆碱、肌醇、牛磺酸、左旋肉碱为营养强化剂。
在一些实施例中，所述乳清蛋白为分离乳清蛋白，谷类蛋白包括小米蛋白、大米蛋白、黑米蛋白、玉米醇溶蛋白、小麦蛋白、荞麦蛋白、燕麦蛋白中的至少一种。
优选的，谷类蛋白为大米蛋白。
在一些实施例中，所述维生素包括水溶性纤维素和油溶性纤维素；
所述水溶性维生素包括维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、烟酸、叶酸、泛酸、维生素C和生物素；
所述油溶性维生素包括维生素A、维生素D、维生素E、维生素K1。
在一些实施例中，所述矿物质元素包括钠、钾、铜、镁、铁、锌、锰、钙、磷、碘、氯和硒。
在一些实施例中，每100mL制剂包括如下组分含量：
分离乳清蛋白3.9-8.0g、谷类蛋白1.3-2.0g、脂肪2.8-5.0g、碳水化合物8.9-20.0g、维生素A 45.0-100.0μg RE、维生素D1.7-5.0μg、维生素E 0.8-20.0mgα-TE、维生素K1 6.0-30.0μg、维生素B1 0.2-0.75mg、维生素B2 0.12-1.2mg、维生素B6 0.11-0.95mg、维生素B12 0.055-2.1μg、烟酸0.22-22.3mg、叶酸8.3-50μg、泛酸0.5-8.3mg、维生素C 6.9-45mg、生物素2-10μg、钠26-232mg、钾73-287mg、铜30-160μg、镁10-140mg、铁0.1-4.2mg、锌0.88-4.5mg、锰3.0-170μg、钙59-299mg、磷27.9-66.9mg、碘8.4-50.8μg、氯17-345mg、硒11.8-20.1μg、胆碱20.1-39.4mg、肌醇6.02-28.9mg、牛磺酸2.8-5.9mg、左旋肉碱1.1-3.9mg。
在一些实施例中，所述碳水化合物包括麦芽糊精、结晶果糖、葡萄糖浆、白砂糖中的至少一种；
所述脂肪包括中链甘油三酯、低芥酸菜籽油、葵花籽油、大豆油、菜籽油、亚麻籽油、玉米油、大豆油、椰子油中的至少一种。
在一些实施例中，所述矿物质元素以无机盐和/或有机盐的形式添加在制剂中，所述无机盐的无机酸根离子包括氯离子、硫酸根离子、碳酸根离子和/或磷酸根离子；所述有机盐的有机酸根离子包括柠檬酸根离子、乳酸根离子、海藻酸根离子、苹果酸根离子和/或葡萄糖酸根离子。
优选的，钾以氯化钾、碘酸钾的形式使用，钙以磷酸氢钙、碳酸钙形式使用，钠以亚硒酸钠形式使用，铜以硫酸铜形式使用，镁以硫酸镁的形式使用，铁以l硫酸亚铁形式使用，锌以柠檬酸锌形式使用、锰以硫酸锰形式使用，硒以亚硒酸钠形式使用。
本发明第二方面提出上述双蛋白高营养配方食品制剂的制备方法，包括如下步骤：
步骤一，将乳清蛋白和谷类蛋白与碳水化合物加入65℃纯水中，剪切混匀，9000r·min-1转速下剪切30min，再加入矿物质元素、水溶性维生素、胆碱、肌醇、牛磺酸、左旋肉碱，剪切混匀，剪切5min，溶解后为水相溶液；
步骤二，将油溶性维生素加入到65℃液体脂肪中，剪切混匀，9000r·min-1转速下剪切30min，溶解后为油相溶液；将油相溶液与水相溶液混合并定容，剪切混匀，9000r·min-1转速下剪切30min，得到混合溶液，保持混合溶液的pH为6.9-7.2；
步骤三，对混合溶液进行高压均质处理，均质条件为200bar压力下均质2次，500bar压力下均质2次，得到乳剂，将乳剂密封后置于121℃条件下灭菌20min得到食品制剂。
本发明第三方面提出上述双蛋白高营养配方食品制剂在用于降低免疫球蛋白IgE含量和/或过敏反应的食品中的应用。
优选的，上述双蛋白高营养配方食品制剂的蛋白质基质为分离乳清蛋白和大米蛋白。
本发明第四方面提出上述双蛋白高营养配方食品制剂在用于加速代谢肝脏中胆固醇和/或甘油三脂的食品中的应用。
本发明的有益效果：
1、本发明提供的方法制备得到的食品制剂，口感好、浊度和稳定系数小，体系的稳定性高、鼻饲管残留率低，尤其是乳清蛋白+大米蛋白的食品制剂的各性状最优，适用于鼻饲患者引用；
2、本发明发现以分离乳清蛋白与大米蛋白的为基质的食品制剂形成的复合物改变了蛋白质的结构和性质，特定蛋白质抗原表位被掩埋或改变，从而降低血清中的总IgE和特异性IgE水平，降低了IgE的结合能力，因而可以显著降低血清中过敏因素的抗体水平，适用于易过敏性体质的人群使用；
3、本发明发现以分离乳清蛋白与大米蛋白的为基质的食品制剂可显著的降低血清中组胺水平，以降低过敏反应带来的不利影响；
4、本发明提供的方法制备得到的食品制剂可促进体内TC(胆固醇)、TG(甘油三脂)的排泄，在一定程度上降低肝脏中TC、TG的含量，起到了保护肝脏的作用，尤其是以分离乳清蛋白和大米蛋白为基质的食品制剂效果更优。
附图说明
图1为对比例3的食品制剂的浊度及稳定系数图；
图2为对比例4的食品制剂的浊度及稳定系数图；
图3为实施例8、对比例1-2的食品制剂的浊度及稳定系数图；
图4为实施例8的食品制剂的表观粘度(a)、温-粘曲线(b)、粒径(c)及Zeta-电位(d)图。
图5为实施例1-7制备的食品制剂、空白对照组按照试验例2的实验方法得到的过敏小鼠血清中的总IgE含量图(A)以及特异性IgE的水平图(B)；
图6为实施例1-7制备的食品制剂、空白对照组按照试验例2的实验方法得到的过敏小鼠血清中组胺水平图；
图7为实施例1-7制备的食品制剂、空白对照组、对照组8喂养高胆固醇饲料按照试验例2的实验方法得到的过敏小鼠肝脏TC含量A图、TG含量B图；
图8为实施例1-7制备的食品制剂、空白对照组、对照组8喂养高胆固醇饲料按照试验例2的实验方法得到的过敏小鼠粪便中TC(胆固醇)含量图。
图9为实施例1-7制备的食品制剂、对照组8喂养高胆固醇饲料以及强化剂溶液对照组9按照试验例2、试验例3的实验方法得到的小鼠肝脏TC含量A图、TG含量B图。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
下述实施例中所用的试验材料和试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径获得。
实施例中未注明具体技术或条件者，均可以按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。
实施例1(分离乳清蛋白+小米蛋白)
将3.9g的分离乳清蛋白、1.3g的小米蛋白混合与8.9g麦芽糊精加入65℃的纯水中，9000r·min-1转速下剪切30min，再按照矿物质元素钠26mg、钾73mg、铜30μg、镁10mg、铁0.1mg、锌0.88mg、锰3.0μg、钙59mg、磷27.9mg、碘8.4μg、氯17mg、硒11.8μg加入相当量的矿物质盐(氯化钾、碘酸钾、碳酸钙、硫酸铜、硫酸镁、硫酸亚铁、柠檬酸锌、硫酸锰、亚硒酸钠)、水溶性维生素(维生素B1 0.2mg、维生素B2 0.12mg、维生素B6 0.11mg、维生素B12 0.055μg、烟酸0.22mg、叶酸8.3μg、泛酸0.5mg、维生素C 6.9mg、生物素2μg)、营养强化剂(胆碱20.1mg、肌醇6.02mg、牛磺酸2.8mg、左旋肉碱1.1mg)，剪切5min，溶解后为水相溶液；将油溶性维生素(维生素A 45.0μg RE、维生素D1.7μg、维生素E 0.8mgα-TE、维生素K1 6.0μg)加入65℃的2.8g葵花籽油中，在9000r·min-1转速下剪切30min，溶解后为油相溶液；将油相溶液与水相溶液混合并定容至100mL，再在9000r·min-1转速下剪切30min，得到混合溶液，混合溶液pH为6.9-7.2；对混合溶液进行高压均质处理，均质条件为200bar压力下均质2次，500bar压力下均质2次；将均质后的乳剂分装到玻璃瓶中，压盖密封后置于121℃条件下灭菌20min，得到食品制剂。
实施例2(分离乳清蛋白+大米蛋白)
将3.9g的分离乳清蛋白、1.3g的大米蛋白混合与8.9g麦芽糊精加入65℃的纯水中，9000r·min-1转速下剪切30min，再按照矿物质元素钠26mg、钾73mg、铜30μg、镁10mg、铁0.1mg、锌0.88mg、锰3.0μg、钙59mg、磷27.9mg、碘8.4μg、氯17mg、硒11.8μg加入相当量的矿物质盐(氯化钾、碘酸钾、碳酸钙、硫酸铜、硫酸镁、硫酸亚铁、柠檬酸锌、硫酸锰、亚硒酸钠)、水溶性维生素(维生素B1 0.2mg、维生素B2 0.12mg、维生素B6 0.11mg、维生素B12 0.055μg、烟酸0.22mg、叶酸8.3μg、泛酸0.5mg、维生素C 6.9mg、生物素2μg)、营养强化剂(胆碱20.1mg、肌醇6.02mg、牛磺酸2.8mg、左旋肉碱1.1mg)，剪切5min，溶解后为水相溶液；将油溶性维生素(维生素A 45.0μg RE、维生素D1.7μg、维生素E 0.8mgα-TE、维生素K1 6.0μg)加入65℃的2.8g葵花籽油中，在9000r·min-1转速下剪切30min，溶解后为油相溶液；将油相溶液与水相溶液混合并定容至100mL，再在9000r·min-1转速下剪切30min，得到混合溶液，混合溶液pH为6.9-7.2；对混合溶液进行高压均质处理，均质条件为200bar压力下均质2次，500bar压力下均质2次；将均质后的乳剂分装到玻璃瓶中，压盖密封后置于121℃条件下灭菌20min，得到食品制剂。
实施例3(分离乳清蛋白+黑米蛋白)
将3.9g的分离乳清蛋白、1.3g的黑米蛋白混合与8.9g麦芽糊精加入65℃的纯水中，9000r·min-1转速下剪切30min，再按照矿物质元素钠26mg、钾73mg、铜30μg、镁10mg、铁0.1mg、锌0.88mg、锰3.0μg、钙59mg、磷27.9mg、碘8.4μg、氯17mg、硒11.8μg加入相当量的矿物质盐(氯化钾、碘酸钾、碳酸钙、硫酸铜、硫酸镁、硫酸亚铁、柠檬酸锌、硫酸锰、亚硒酸钠)、水溶性维生素(维生素B1 0.2mg、维生素B2 0.12mg、维生素B6 0.11mg、维生素B12 0.055μg、烟酸0.22mg、叶酸8.3μg、泛酸0.5mg、维生素C 6.9mg、生物素2μg)、营养强化剂(胆碱20.1mg、肌醇6.02mg、牛磺酸2.8mg、左旋肉碱1.1mg)，剪切5min，溶解后为水相溶液；将油溶性维生素(维生素A 45.0μg RE、维生素D1.7μg、维生素E 0.8mgα-TE、维生素K1 6.0μg)加入65℃的2.8g葵花籽油中，在9000r·min-1转速下剪切30min，溶解后为油相溶液；将油相溶液与水相溶液混合并定容至100mL，再在9000r·min-1转速下剪切30min，得到混合溶液，混合溶液pH为6.9-7.2；对混合溶液进行高压均质处理，均质条件为200bar压力下均质2次，500bar压力下均质2次；将均质后的乳剂分装到玻璃瓶中，压盖密封后置于121℃条件下灭菌20min，得到食品制剂。
实施例4(分离乳清蛋白+玉米醇溶蛋白)
将3.9g的分离乳清蛋白、1.3g的玉米醇溶蛋白混合与8.9g麦芽糊精加入65℃的纯水中，9000r·min-1转速下剪切30min，再按照矿物质元素钠26mg、钾73mg、铜30μg、镁10mg、铁0.1mg、锌0.88mg、锰3.0μg、钙59mg、磷27.9mg、碘8.4μg、氯17mg、硒11.8μg加入相当量的矿物质盐(氯化钾、碘酸钾、碳酸钙、硫酸铜、硫酸镁、硫酸亚铁、柠檬酸锌、硫酸锰、亚硒酸钠)、水溶性维生素(维生素B1 0.2mg、维生素B2 0.12mg、维生素B6 0.11mg、维生素B12 0.055μg、烟酸0.22mg、叶酸8.3μg、泛酸0.5mg、维生素C 6.9mg、生物素2μg)、营养强化剂(胆碱20.1mg、肌醇6.02mg、牛磺酸2.8mg、左旋肉碱1.1mg)，剪切5min，溶解后为水相溶液；将油溶性维生素(维生素A 45.0μg RE、维生素D1.7μg、维生素E 0.8mgα-TE、维生素K1 6.0μg)加入65℃的2.8g葵花籽油中，在9000r·min-1转速下剪切30min，溶解后为油相溶液；将油相溶液与水相溶液混合并定容至100mL，再在9000r·min-1转速下剪切30min，得到混合溶液，混合溶液pH为6.9-7.2；对混合溶液进行高压均质处理，均质条件为200bar压力下均质2次，500bar压力下均质2次；将均质后的乳剂分装到玻璃瓶中，压盖密封后置于121℃条件下灭菌20min，得到食品制剂。
实施例5(分离乳清蛋白+小麦蛋白)
将3.9g的分离乳清蛋白、1.3g的小麦蛋白混合与8.9g麦芽糊精加入65℃的纯水中，9000r·min-1转速下剪切30min，再按照矿物质元素钠26mg、钾73mg、铜30μg、镁10mg、铁0.1mg、锌0.88mg、锰3.0μg、钙59mg、磷27.9mg、碘8.4μg、氯17mg、硒11.8μg加入相当量的矿物质盐(氯化钾、碘酸钾、碳酸钙、硫酸铜、硫酸镁、硫酸亚铁、柠檬酸锌、硫酸锰、亚硒酸钠)、水溶性维生素(维生素B1 0.2mg、维生素B2 0.12mg、维生素B6 0.11mg、维生素B12 0.055μg、烟酸0.22mg、叶酸8.3μg、泛酸0.5mg、维生素C 6.9mg、生物素2μg)、营养强化剂(胆碱20.1mg、肌醇6.02mg、牛磺酸2.8mg、左旋肉碱1.1mg)，剪切5min，溶解后为水相溶液；将油溶性维生素(维生素A 45.0μg RE、维生素D1.7μg、维生素E 0.8mgα-TE、维生素K1 6.0μg)加入65℃的2.8g葵花籽油中，在9000r·min-1转速下剪切30min，溶解后为油相溶液；将油相溶液与水相溶液混合并定容至100mL，再在9000r·min-1转速下剪切30min，得到混合溶液，混合溶液pH为6.9-7.2；对混合溶液进行高压均质处理，均质条件为200bar压力下均质2次，500bar压力下均质2次；将均质后的乳剂分装到玻璃瓶中，压盖密封后置于121℃条件下灭菌20min，得到食品制剂。
实施例6(分离乳清蛋白+荞麦蛋白)
将3.9g的分离乳清蛋白、1.3g的荞麦蛋白混合与8.9g麦芽糊精加入65℃的纯水中，9000r·min-1转速下剪切30min，再按照矿物质元素钠26mg、钾73mg、铜30μg、镁10mg、铁0.1mg、锌0.88mg、锰3.0μg、钙59mg、磷27.9mg、碘8.4μg、氯17mg、硒11.8μg加入相当量的矿物质盐(氯化钾、碘酸钾、碳酸钙、硫酸铜、硫酸镁、硫酸亚铁、柠檬酸锌、硫酸锰、亚硒酸钠)、水溶性维生素(维生素B1 0.2mg、维生素B2 0.12mg、维生素B6 0.11mg、维生素B12 0.055μg、烟酸0.22mg、叶酸8.3μg、泛酸0.5mg、维生素C 6.9mg、生物素2μg)、营养强化剂(胆碱20.1mg、肌醇6.02mg、牛磺酸2.8mg、左旋肉碱1.1mg)，剪切5min，溶解后为水相溶液；将油溶性维生素(维生素A 45.0μg RE、维生素D1.7μg、维生素E 0.8mgα-TE、维生素K1 6.0μg)加入65℃的2.8g葵花籽油中，在9000r·min-1转速下剪切30min，溶解后为油相溶液；将油相溶液与水相溶液混合并定容至100mL，再在9000r·min-1转速下剪切30min，得到混合溶液，混合溶液pH为6.9-7.2；对混合溶液进行高压均质处理，均质条件为200bar压力下均质2次，500bar压力下均质2次；将均质后的乳剂分装到玻璃瓶中，压盖密封后置于121℃条件下灭菌20min，得到食品制剂。
实施例7(分离乳清蛋白+燕麦蛋白)
将3.9g的分离乳清蛋白、1.3g的燕麦蛋白混合与8.9g麦芽糊精加入65℃的纯水中，9000r·min-1转速下剪切30min，再按照矿物质元素钠26mg、钾73mg、铜30μg、镁10mg、铁0.1mg、锌0.88mg、锰3.0μg、钙59mg、磷27.9mg、碘8.4μg、氯17mg、硒11.8μg加入相当量的矿物质盐(氯化钾、碘酸钾、碳酸钙、硫酸铜、硫酸镁、硫酸亚铁、柠檬酸锌、硫酸锰、亚硒酸钠)、水溶性维生素(维生素B1 0.2mg、维生素B2 0.12mg、维生素B6 0.11mg、维生素B12 0.055μg、烟酸0.22mg、叶酸8.3μg、泛酸0.5mg、维生素C 6.9mg、生物素2μg)、营养强化剂(胆碱20.1mg、肌醇6.02mg、牛磺酸2.8mg、左旋肉碱1.1mg)，剪切5min，溶解后为水相溶液；将油溶性维生素(维生素A 45.0μg RE、维生素D1.7μg、维生素E 0.8mgα-TE、维生素K1 6.0μg)加入65℃的2.8g葵花籽油中，在9000r·min-1转速下剪切30min，溶解后为油相溶液；将油相溶液与水相溶液混合并定容至100mL，再在9000r·min-1转速下剪切30min，得到混合溶液，混合溶液pH为6.9-7.2；对混合溶液进行高压均质处理，均质条件为200bar压力下均质2次，500bar压力下均质2次；将均质后的乳剂分装到玻璃瓶中，压盖密封后置于121℃条件下灭菌20min，得到食品制剂。
实施例8(分离乳清蛋白+大米蛋白按照2：1含量混合)
将4g的分离乳清蛋白、2g的大米蛋白混合与8.9g麦芽糊精加入65℃的纯水中，9000r·min-1转速下剪切30min，再按照矿物质元素钠26mg、钾73mg、铜30μg、镁10mg、铁0.1mg、锌0.88mg、锰3.0μg、钙59mg、磷27.9mg、碘8.4μg、氯17mg、硒11.8μg加入相当量的矿物质盐(氯化钾、碘酸钾、碳酸钙、硫酸铜、硫酸镁、硫酸亚铁、柠檬酸锌、硫酸锰、亚硒酸钠)、水溶性维生素(维生素B1 0.2mg、维生素B2 0.12mg、维生素B6 0.11mg、维生素B12 0.055μg、烟酸0.22mg、叶酸8.3μg、泛酸0.5mg、维生素C 6.9mg、生物素2μg)、营养强化剂(胆碱20.1mg、肌醇6.02mg、牛磺酸2.8mg、左旋肉碱1.1mg)，剪切5min，溶解后为水相溶液；将油溶性维生素(维生素A 45.0μg RE、维生素D1.7μg、维生素E 0.8mgα-TE、维生素K1 6.0μg)加入65℃的2.8g葵花籽油中，在9000r·min-1转速下剪切30min，溶解后为油相溶液；将油相溶液与水相溶液混合并定容至100mL，再在9000r·min-1转速下剪切30min，得到混合溶液，混合溶液pH为6.9-7.2；对混合溶液进行高压均质处理，均质条件为200bar压力下均质2次，500bar压力下均质2次；将均质后的乳剂分装到玻璃瓶中，压盖密封后置于121℃条件下灭菌20min，得到食品制剂。
对比例1(分离乳清蛋白+大米蛋白按照1：1含量混合)
将4g的分离乳清蛋白、4g的大米蛋白混合与8.9g麦芽糊精加入65℃的纯水中，9000r·min-1转速下剪切30min，再按照矿物质元素钠26mg、钾73mg、铜30μg、镁10mg、铁0.1mg、锌0.88mg、锰3.0μg、钙59mg、磷27.9mg、碘8.4μg、氯17mg、硒11.8μg加入相当量的矿物质盐(氯化钾、碘酸钾、碳酸钙、硫酸铜、硫酸镁、硫酸亚铁、柠檬酸锌、硫酸锰、亚硒酸钠)、水溶性维生素(维生素B1 0.2mg、维生素B2 0.12mg、维生素B6 0.11mg、维生素B12 0.055μg、烟酸0.22mg、叶酸8.3μg、泛酸0.5mg、维生素C 6.9mg、生物素2μg)、营养强化剂(胆碱20.1mg、肌醇6.02mg、牛磺酸2.8mg、左旋肉碱1.1mg)，剪切5min，溶解后为水相溶液；将油溶性维生素(维生素A 45.0μg RE、维生素D1.7μg、维生素E 0.8mgα-TE、维生素K1 6.0μg)加入65℃的2.8g葵花籽油中，在9000r·min-1转速下剪切30min，溶解后为油相溶液；将油相溶液与水相溶液混合并定容至100mL，再在9000r·min-1转速下剪切30min，得到混合溶液，混合溶液pH为6.9-7.2；对混合溶液进行高压均质处理，均质条件为200bar压力下均质2次，500bar压力下均质2次；将均质后的乳剂分装到玻璃瓶中，压盖密封后置于121℃条件下灭菌20min，得到食品制剂。
对比例2(分离乳清蛋白+大米蛋白按照1：2含量混合)
将4g的分离乳清蛋白、8g的大米蛋白混合与8.9g麦芽糊精加入65℃的纯水中，9000r·min-1转速下剪切30min，再按照矿物质元素钠26mg、钾73mg、铜30μg、镁10mg、铁0.1mg、锌0.88mg、锰3.0μg、钙59mg、磷27.9mg、碘8.4μg、氯17mg、硒11.8μg加入相当量的矿物质盐(氯化钾、碘酸钾、碳酸钙、硫酸铜、硫酸镁、硫酸亚铁、柠檬酸锌、硫酸锰、亚硒酸钠)、水溶性维生素(维生素B1 0.2mg、维生素B2 0.12mg、维生素B6 0.11mg、维生素B12 0.055μg、烟酸0.22mg、叶酸8.3μg、泛酸0.5mg、维生素C 6.9mg、生物素2μg)、营养强化剂(胆碱20.1mg、肌醇6.02mg、牛磺酸2.8mg、左旋肉碱1.1mg)，剪切5min，溶解后为水相溶液；将油溶性维生素(维生素A 45.0μg RE、维生素D1.7μg、维生素E 0.8mgα-TE、维生素K1 6.0μg)加入65℃的2.8g葵花籽油中，在9000r·min-1转速下剪切30min，溶解后为油相溶液；将油相溶液与水相溶液混合并定容至100mL，再在9000r·min-1转速下剪切30min，得到混合溶液，混合溶液pH为6.9-7.2；对混合溶液进行高压均质处理，均质条件为200bar压力下均质2次，500bar压力下均质2次；将均质后的乳剂分装到玻璃瓶中，压盖密封后置于121℃条件下灭菌20min，得到食品制剂。
对比例3(蛋白质只有分离乳清蛋白，没有谷类蛋白)
保持和对比例2的制备方法以及其他物质的含量相同，不添加谷类蛋白，分别按照分离乳清蛋白含量4g、5g、6g、7g、8g制备食品制剂。
对比例4(蛋白质只有谷类蛋白，没有分离乳清蛋白)
保持和对比例2的制备方法以及其他物质的含量相同，不添加分离乳清蛋白，谷类蛋白含量为5g，分别按照小米蛋白、大米蛋白、黑米蛋白、玉米醇溶蛋白、小麦蛋白、荞麦蛋白、燕麦蛋白制备食品制剂。
试验例1
实施例和对比例中，食品制剂的理化性质的测定方法如下：
1.静态剪切流动性的测定
准确移取2mL乳液样品于流变仪样品台上，使用直径60mm的夹具进行测定，具体测定参数如下：测量温度(25±1)℃，板间间隙为1mm。记录表观粘度在剪切速率为0.01-100rad/s范围内变化情况。
2.不同温度下的黏度变化测定
以5℃/min的速率从25℃升温至60℃，在此温度下持续扫描30min，测定时使用油封，确保参数在线性粘弹范围内。选用直径为60mm的夹具，板间间隙为1mm，应变范围设定为0.5％(在线性粘弹区内)。
3.粒径测定
将样品混合均匀后取10μL样品，用配置好的磷酸盐缓冲液(1.0mol/LPH7.0)稀释1000倍，混合均匀后使用移液枪将样品缓慢注入样品池中，避免产生气泡，用盖子将样品池封好。
4.Zeta-电位测定
采用Malvern Nano ZS测定样品的Zeta-电位，He-Ne作为激光器。电位测定条件：聚苯乙烯池，一对0.45cm2铂电极，间距为0.4cm。测定温度为25℃，平衡时间为1min，测定样品的Zeta-电位变化。
5.稳定系数测定
取乳液10mL置于离心管中，2000r·min-1离心15min后，从中部取乳液50μL，加入装有5mL0.1％SDS的试管中振荡混匀，在500nm处测定其吸光度(At)。取50μL未离心的乳剂样品，同法操作，测定吸光度(A0)，按式计算稳定系数KE。稳定系数越小，稳定性越好。
式中：A0为离心前乳剂稀释液的吸光度；At为离心后乳剂稀释液的吸光度
6.浊度测定
取乳液50μL，加入装有5mL0.1％SDS的试管中振荡混匀，在660nm处测得的吸光度。浊度用660nm下的吸光值A660表示。浊度越小，稳定性越好。
7.鼻饲管残留率的测定
取50.00mL样品转入输液瓶中，冷却至室温后，用一次性输液器模拟临床肠内营养支持的重力滴注法进行滴注，流速控制在100-150mL/h，待营养液全部滴注完毕后，称量鼻饲管内壁粘附物的重量计算营养液的残留率。
8.感官评定
募集25名健康的志愿者对乳剂进行感官评价。将样品置于清洁的白瓷盘中，在光线充足而柔和的环境中用目测法观察粉体的色泽。另外将20.00mL样品倒入品尝杯中中，嗅其气味，观察其状态，品尝其滋味等。样品采用随机编码，常温下进行品评，每次鉴评完一个样品后需用纯净水漱口，再进行下一个样品的鉴评。感官评定表参考QB4221-2011标准制定，具体如表1所示，评价总分以四项累计之和计。
表1评分标准
表2，对实施例1-7乳剂进行性能测试包括鼻饲残留率和感官评定
注：1：乳清蛋白+小米蛋白；2：乳清蛋白+大米蛋白；3：乳清蛋白+黑米蛋白；4：乳清蛋白+玉米醇溶蛋白；5：乳清蛋白+小麦蛋白；6：乳清蛋白+荞麦蛋白；7：乳清蛋白+燕麦蛋白。
根据患者的疾病类型和病理生理状态不同，临床患者服用乳剂型全营养特医食品的途径可以分为直接口服、通过鼻饲管或胃肠造瘘管管饲两种途径。在保证产品营养充足、均衡的前提下，产品的口感风味是影响其临床应用的重要因素。从表2可以看出，实施例2的乳清蛋白+大米蛋白制备得到的食品制剂，其感官评分显著高于其他配方种类(p＞0.05)，其鼻饲管残留率最低；实施例7制备乳剂以在模拟鼻饲管喂养过程在营养管中的残留量显著高于其他配方种类(p＞0.05)。
由图1可知，随着分离乳清蛋白添加量的增加，其浊度和稳定系数均呈先下降后上升的趋势。当添加量为5-6g·L-1时，浊度和稳定系数值最小，体系的稳定性最好。当添加量少于5g·L-1或超过6g·L-1时，可能会有蛋白质与乳化剂聚合物发生竞争性吸附，从而能够显著降低体系的表面张力，降低乳剂的稳定性。
由图2可知，小米蛋白、大米蛋白和黑米蛋白的浊度明显小于玉米醇溶蛋白、小麦蛋白、荞麦蛋白和燕麦蛋白；大米蛋白、玉米醇溶蛋白、小麦蛋白明显小于其他蛋白。
由图3可知，随着混合蛋白比例的增加，分离乳清蛋白与大米蛋白比例为2：1时，浊度和稳定系数值最小，体系的稳定性最好。
由图4(a)实施例8的食品制剂的表观粘度随剪切速率变化图可知，在较低的剪切速率下水溶液流动曲线呈现出明显的牛顿平台，粘度降低迅速，而在较高的剪切速率下粘度降低缓慢，呈现出剪切变稀的性质。由图4(b)实施例8的食品制剂的粘度随温度变化图，由图可知低温下时，随温度的升高，粘度下降，主要因为温度的升高增加了溶液分子的动能，溶液分子运动加快，同时溶液的体积也因为升温而膨胀，使得溶液分子距离加大，相互吸引力减弱，高温下时，食品已经凝胶，导致粘度增加。
图4(c)和4(d)实施例8的食品制剂的粒径分布和电位图，由图可知食品制剂的粒径为240.9nm，Zeta-电位为-33.02mV，食品制剂的稳定性很高，Zeta-电位是分散体系稳定性的重要指标，zeta-电位的绝对值越大代表分散相稳定性越高。
试验例2
1.验证以分离乳清蛋白与大米蛋白为基质的食品制剂功效的体内实验设计：
过敏反应试验组：SPF级雌性Balb/c小鼠(5-6周龄)购自维通利华实验动物技术公司。所有小鼠在无病原体环境中饲养，12h光照/黑暗循环，温度和相对湿度分别维持在24±2℃和50-70％，并给予不含谷类的鼠粮和水，适应一周后开始实验。将64只小鼠随机分为8组(8只/组)。简单地说，在第0、7、14和21天，各组小鼠分别灌胃20mg实施例1-7制备的食品制剂和10μg霍乱毒素佐剂(Choleratoxin，CT)的混合溶液200μL。空白对照组小鼠灌胃相同剂量的PBS溶液(磷酸盐缓冲溶液，含有10μg CT)。第28天，小鼠灌胃0.4mL80mg食品制剂，对照组灌胃0.4mLPBS溶液。采集组织和血液用于以下生物标志物检测。部分血液样本2500×g离心10min，收集血清。部分血液样本加入到含肝素的离心管中摇匀后，2500×g离心10min，收集血浆。血清及血浆保存在-20℃直至实验。
TC、TG含量试验组：SPF级雌性Balb/c小鼠(5-6周龄)购自维通利华实验动物技术公司。所有小鼠在无病原体环境中饲养，12h光照/黑暗循环，温度和相对湿度分别维持在24±2℃和50-70％，并给予不含谷类的鼠粮和水，适应一周后开始实验。将64只小鼠随机分为8组(8只/组)。简单地说，在第0、7、14和21天，1-7组小鼠分别喂养0.2mL实施例1-7制备的食品制剂和10g高胆固醇饲料，对照组8喂养0.2mL生理盐水和10g高胆固醇饲料。空白对照组小鼠喂养相同剂量的生理盐水和基础饲料。采集组织和血液用于以下生物标志物检测。部分血液样本2500×g离心10min，收集血清。部分血液样本加入到含肝素的离心管中摇匀后，2500×g离心10min，收集血浆。血清及血浆保存在-20℃直至实验。
2.血清中总IgE及特异性IgE含量的检测
小鼠血清中总免疫球蛋白IgE含量通过小鼠IgE ELISA试剂盒进行测定，具体操作步骤参照试剂盒说明书。而小鼠血清中特异性IgE的含量采用间接ELISA法进行检测[109,110]。将各组样品分别(1μg，100μL)包被在96孔微孔板，4℃过夜。孵育结束后，所有孔加入PBST洗涤3次，用1.5％明胶封闭，37℃封闭1h。重复洗涤三次后，加入稀释的小鼠血清(1:20)在4℃孵育过夜，重复洗涤三次。所有孔均加入辣根过氧化物酶(HorseRadishPeroxidase，HRP,100μL)标记的兔抗小鼠IgE溶液，37℃孵育2h，每孔加入100μLTMB显色，37℃避光孵育30min。然后将终止液(50μL4MH2SO4)加入到所有孔中，在450nm处用spectraMaxregiD3测量吸光度并记录，最终结果以OD值表示。
3.血浆中组胺含量的检测
小鼠血浆中组胺含量通过小鼠组胺ELISA试剂盒进行测定，具体操作步骤参照试剂盒说明书。
4.肝脏中TC(胆固醇)、TG(甘油三脂)的测定
取冷冻保藏的肝脏0.1g以1：9的体积比加入生理盐水，用匀浆器匀浆，充分混匀后在10000r/min离心2min，吸取上清液，用试剂盒测定血清中的TC、TG含量。
5.粪便中TC(胆固醇)的测定
取冷冻保藏的粪便0.1g以1：9的体积比加入生理盐水，用匀浆器匀浆，充分混匀后在10000r/min离心2min，吸取上清液，利用试剂盒测定粪便中TC含量。
见图5，过敏反应试验组中过敏小鼠血清总IgE抗体和特异性IgE抗体水平如图A-B所示，不同字母表示组间差异显著(P<0.05)，图5A可以看出，实施例1、实施例3-7的食品制剂均不同程度的增高了小鼠血清总IgE抗体和特异性IgE抗体水平，而实施例2(分离乳清蛋白+大米蛋白)的食品制剂喂养的小鼠血清中的总IgE和特异性IgE抗体水平均显著低于其他样品组(P<0.05)。更重要的是，实施例2(分离乳清蛋白+大米蛋白)的食品制剂喂养的小鼠血清中的总IgE和特异性IgE水平与空白对照组无显著差异。因此，实施例2(分离乳清蛋白+大米蛋白)的食品制剂可以显著降低小鼠血清中过敏因素的抗体水平；经分析得：大米蛋白具有低过敏性和抗肿瘤活性，生物效价高、氨基酸组成符合WHO/FAO推荐的理想模式，易被消化吸收，不易引发免疫系统的过敏反应。此外大米蛋白和分离乳清蛋白结合后形成的复合物可能改变了蛋白质的结构和性质，特定蛋白质抗原表位被掩埋或改变，从而降低IgE的结合能力。
见图6，过敏反应试验组中过敏小鼠血浆中的组胺水平，不同字母表示组间差异显著(P<0.05)。与空白组相比，实施例2(分离乳清蛋白+大米蛋白)的食品制剂喂养的小鼠血清中组胺水平与空白组无显著差异(P<0.05)，其他样品组小鼠组胺水平显著升高(P<0.05)。因此，实施例2(分离乳清蛋白+大米蛋白)的食品制剂可显著降低过敏小鼠的组胺水平，以降低过敏反应带来的不利影响。
见图7，不同字母表示组间差异显著(P<0.05)，TC、TG含量试验组中的小鼠肝脏TC、TG含量如图7A、B所示，对照组8的TC、TG含量显著高于空白对照组(P<0.05)，实施例2(分离乳清蛋白+大米蛋白)的食品制剂喂养的小鼠的TC含量显著低于样品1、3、4、5、6、7(P<0.05)，说明给小鼠灌胃实施例2(分离乳清蛋白+大米蛋白)的食品制剂可在一定程度上降低肝脏中TC、TG的含量，起到了保护肝脏的作用。
见图8，不同字母表示组间差异显著(P<0.05)，小鼠粪便胆固醇(TC)含量如图所示。从各组小鼠粪便的TC含量可知，对照组8的粪便TC含量明显高于空白对照组组(P＜0.05)，实施例1-7的食品制剂对应的1、2、3、4、5、6、7组小鼠粪便的TC含量明显高于空白对照组和对照组8(P＜0.05)，实施例2(分离乳清蛋白+大米蛋白)的食品制剂显著高于样品1、3、4、5、6、7组(P＜0.05)，这说明通过饮食摄入的过多胆固醇中有部分不能代谢而被排出体外，小鼠灌喂实施例1-7的食品制剂可促进小鼠体内胆固醇的排泄，尤其是实施例2以分离乳清蛋白和大米蛋白为基质的食品制剂效果更优。
试验例3
验证单独喂食营养强化剂(胆碱、肌醇、牛磺酸、左旋肉碱)，小鼠体内的TC、TG含量值。
配置强化剂溶液，将胆碱20.1mg、肌醇6.02mg、牛磺酸2.8mg、左旋肉碱1.1mg溶解在纯水中配置成100mL的强化剂溶液。
设置强化剂溶液对照组9：SPF级雌性Balb/c小鼠(5-6周龄)购自维通利华实验动物技术公司。所有小鼠在无病原体环境中饲养，12h光照/黑暗循环，温度和相对湿度分别维持在24±2℃和50-70％，并给予不含谷类的鼠粮和水，适应一周后开始实验。将8只小鼠，在第0、7、14和21天，分别喂养0.2mL强化剂溶液和10g高胆固醇饲料。采集组织和血液用于以下生物标志物检测。部分血液样本2500×g离心10min，收集血清。部分血液样本加入到含肝素的离心管中摇匀后，2500×g离心10min，收集血浆。血清及血浆保存在-20℃直至实验。按照试验例2中4、5的方法检测肝脏中TC(胆固醇)、TG(甘油三脂)的含量，将结果与TC、TG含量试验组中的喂食实施例1-7的食品制剂的小鼠以及对照组8喂养高胆固醇饲料作对比。
见图9，小鼠肝脏TC、TG含量如图9A、B所示，强化剂溶液对照组9小鼠肝脏的TC、TG含量显著高于食用实施例1-7食品制剂的小鼠肝脏中TC、TG含量(P＜0.05)，但是其小于对照组8喂养高胆固醇饲料的小鼠肝脏中TC、TG含量，可看出强化剂提高了小鼠体内的TC、TG代谢速率，但是其提高TC、TG的代谢的效果不如实施例1-7的食品制剂，可见强化剂与本发明方法中的蛋白质以及其它物质起到了协同促进作用。
分析：营养强化剂如肌醇可以促进脂胆固醇的代谢、降低胆固醇，左旋肉碱具有降低血清总胆固醇和甘油三酯的作用。肌醇具有多个受体位点，可以与蛋白质分子表面带正电荷或带负电荷的氨基酸残基，如赖氨酸、谷氨酸等，形成相互吸引的电荷相互作用，从而促使肌醇与蛋白质结合，与此同时，肌醇分子中的氢键供体和受体位点可以与蛋白质分子中的氢键供体和受体位点形成氢键，这些氢键的形成可以增强肌醇与蛋白质之间的结合力，从而稳定二者的结合。左旋肉碱分子具有疏水性，而蛋白质分子中的疏水性氨基酸残基(如亮氨酸、异亮氨酸等)也具有疏水性。左旋肉碱与蛋白质中的疏水性氨基酸残基之间可以通过疏水作用相互吸引，从而促使左旋肉碱与蛋白质结合。避免了直接服用营养强化剂后，游离状态下的肌醇在体内易通过肌醇-磷酸化酶(IPK)酶的作用转化为肌醇磷酸酯，而肌醇磷酸酯在高剂量下可能会对肝脏产生负担，游离状态左旋肉碱可能导致肝脏脂肪堆积和肝脏损伤，过度甲基化可能干扰脂肪代谢和肝脏功能，导致脂肪在肝脏中的沉积，从而影响了肝脏的代谢功能。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种双蛋白高营养配方食品制剂，其特征在于：包括如下组分：乳清蛋白、谷类蛋白、脂肪、碳水化合物、维生素、矿物质元素、胆碱、肌醇、牛磺酸、左旋肉碱。
2.根据权利要求1所述的一种双蛋白高营养配方食品制剂，其特征在于，所述乳清蛋白为分离乳清蛋白，谷类蛋白包括小米蛋白、大米蛋白、黑米蛋白、玉米醇溶蛋白、小麦蛋白、荞麦蛋白、燕麦蛋白中的至少一种。
3.根据权利要求2所述的一种双蛋白高营养配方食品制剂，其特征在于，所述维生素包括水溶性纤维素和油溶性纤维素；
所述水溶性维生素包括维生素B1、维生素B2、维生素B6、维生素B12、烟酸、叶酸、泛酸、维生素C和生物素；
所述油溶性维生素包括维生素A、维生素D、维生素E、维生素K1。
4.根据权利要求3所述的一种双蛋白高营养配方食品制剂，其特征在于，所述矿物质元素包括钠、钾、铜、镁、铁、锌、锰、钙、磷、碘、氯和硒。
5.根据权利要求1所述的一种双蛋白高营养配方食品制剂，其特征在于，每100mL制剂包括如下组分含量：
分离乳清蛋白3.9-8.0g、谷类蛋白1.3-2.0g、脂肪2.8-5.0g、碳水化合物8.9-20.0g、维生素A 45.0-100.0μg RE、维生素D 1.7-5.0μg、维生素E 0.8-20.0 mg α-TE、维生素K16.0-30.0μg、维生素B1 0.2-0.75mg、维生素B2 0.12-1.2mg、维生素B6 0.11-0.95mg、维生素B12 0.055-2.1μg、烟酸0.22-22.3mg、叶酸8.3-50μg、泛酸0.5-8.3mg、维生素C 6.9-45mg、生物素2-10μg、钠26-232mg、钾73-287mg、铜30-160μg、镁10-140mg、铁0.1-4.2mg、锌0.88-4.5mg、锰3.0-170μg、钙59-299mg、磷27.9-66.9mg、碘8.4-50.8μg、氯17-345mg、硒11.8-20.1μg、胆碱20.1-39.4 mg、肌醇6.02-28.9mg、牛磺酸2.8-5.9 mg、左旋肉碱1.1-3.9 mg。
6.根据权利要求1所述的一种双蛋白高营养配方食品制剂，其特征在于，所述碳水化合物包括麦芽糊精、结晶果糖、葡萄糖浆、白砂糖中的至少一种；
所述脂肪包括中链甘油三酯、低芥酸菜籽油、葵花籽油、大豆油、菜籽油、亚麻籽油、玉米油、大豆油、椰子油中的至少一种。
7.根据权利要求4所述的一种双蛋白高营养配方食品制剂，其特征在于，所述矿物质元素以无机盐和/或有机盐的形式添加在制剂中，所述无机盐的无机酸根离子包括氯离子、硫酸根离子、碳酸根离子和/或磷酸根离子；所述有机盐的有机酸根离子包括柠檬酸根离子、乳酸根离子、海藻酸根离子、苹果酸根离子和/或葡萄糖酸根离子。
8.如权利要求1-7任一权利要求所述的一种双蛋白高营养配方食品制剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
步骤一，将乳清蛋白和谷类蛋白与碳水化合物加入纯水中，剪切混匀，再加入矿物质元素、水溶性维生素、胆碱、肌醇、牛磺酸、左旋肉碱，剪切混匀，溶解后为水相溶液；
步骤二，将油溶性维生素加入到液体脂肪中，剪切混匀，溶解后为油相溶液；将油相溶液与水相溶液混合并定容，剪切混匀，得到混合溶液，保持混合溶液的pH为6.9-7.2；
步骤三，对混合溶液进行高压均质处理，得到乳剂，将乳剂密封灭菌得到食品制剂。
9.如权利要求1-7任一权利要求所述的一种双蛋白高营养配方食品制剂在用于降低免疫球蛋白IgE含量和/或过敏反应的食品中的应用。
10.如权利要求1-7任一权利要求所述的一种双蛋白高营养配方食品制剂在
用于加速代谢肝脏中胆固醇和/或甘油三脂的食品中的应用。
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