CN117126267A - 一种利用碱法从盐渍海蜇皮中制备胶原蛋白的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及胶原蛋白制备技术领域，且公开了一种利用碱法从盐渍海蜇皮中制备胶原蛋白的方法，包括以下工作步骤：S1：脱盐；S2：除杂；S3：匀浆；S4：碱反应；S5：离心；S6：盐析；S7：透析；S8：冷冻干燥。盐渍海蜇皮经脱盐、除杂、匀浆、碱反应提取后得到胶原蛋白粗提取液，粗液经离心后固液分离，取上清液进一步进行盐析、透析、冷冻干燥，得到纯化后的非变性胶原蛋白产品，本发明得到的产品为白色固体，具有胶原蛋白特有的紫外峰，制备过程中所用试剂只有氢氧化钠和乙酸，成本低，废液易于处理，产品可广泛用于食品、保健品、化妆品、饲料等领域。
Description
技术领域
本发明涉及胶原蛋白制备技术领域，尤其涉及一种利用碱法从盐渍海蜇皮中制备胶原蛋白的方法。
背景技术
胶原蛋白广泛存在于生物体中，是一种生物高分子蛋白，也是哺乳动物体内含量最多，分布最广的功能性蛋白。胶原蛋白常用的提取方法有酸法、碱法、盐法和酶法，其中酸法和酶法是公认的提取胶原蛋白比较常用和有效的方法。
碱法提取胶原蛋白是利用一定浓度的碱在一定的外界条件下经多次溶胀，提取得到胶原蛋白。常用的处理剂有氢氧化钠、碳酸钠、石灰等。但碱法提取存在容易破坏胶原蛋白的三股螺旋结构，引起肽键的水解，含羟基、疏基的氨基酸被破坏，产生D、L-型氨基酸消旋混合物的风险、提取率低等问题，因此，特别是利用碱法提取海蜇中胶原蛋白的发展进度缓慢。
为此，我们提出一种利用碱法从盐渍海蜇皮中制备胶原蛋白的方法。
发明内容
本发明主要是解决上述现有技术所存在的技术问题，提供一种利用碱法从盐渍海蜇皮中制备胶原蛋白的方法。
为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案，一种利用碱法从盐渍海蜇皮中制备胶原蛋白的方法，包括以下工作步骤：
S1：脱盐，将盐渍海蜇皮按照W:V＝1:500比例进行流水冲洗，取一定体积浸泡液，滴加硝酸银至无白色浑浊即为脱盐成功；
S2：除杂，取脱盐后的样品，按照W:V＝1:6(脱盐前质量)比例加入氢氧化钠溶液，进行浸泡，将碱处理好的样品洗至中性，沥干水分，备用；
S3：匀浆，将上述样品进行匀浆处理，至样品无结块，呈胶状；
S4：碱反应，加入氢氧化钠溶液，进行浸泡；
S5：离心，在4℃下用高速冷冻离心机10000r离心60min，保留上清液；
S6：盐析，取上清液加入2mol/L～3mol/L的NaCl溶液进行盐析，在4℃下静置24h，4℃条件下用高速冷冻离心机10000r离心60min，取沉淀；
S7：透析，将沉淀复溶于0.1mol/L冰乙酸中，将其置于透析液体积15～20倍的0.05mol/L乙酸溶液中透析36h，再置于去离子水中透析48h；
S8：冷冻干燥，透析液经冷冻干燥得到胶原蛋白冻干品。
作为对上述方案的进一步限定，所述S1中的流水冲洗时间为5h。
作为对上述方案的进一步限定，所述S2中除杂所用氢氧化钠溶液浓度为0.1mol/L。
作为对上述方案的进一步限定，所述S2中的浸泡温度为4℃，浸泡时间为24h-48h。
作为对上述方案的进一步限定，所述S2中的除杂过程在每隔24h更换一次氢氧化钠溶液。
作为对上述方案的进一步限定，所述S4中碱反应所用氢氧化钠溶液浓度为0.05mol/L，浸泡温度为4℃，浸泡时间为24h。
有益效果
本发明提供了一种利用碱法从盐渍海蜇皮中制备胶原蛋白的方法。具备以下有益效果：
该一种利用碱法从盐渍海蜇皮中制备胶原蛋白的方法，具备成本低、便于操作、绿色环保等优点，首次验证了利用碱法制备盐渍海蜇皮中胶原蛋白的可行性。
附图说明
图1为本发明工艺流程图；
图2为本发明产品示意图；
图3为本发明海蜇胶原蛋白的近紫外扫描图谱。
具体实施方式
请参阅图1-3，一种利用碱法从盐渍海蜇皮中制备胶原蛋白的方法，包括以下工作步骤：
S1：脱盐，将盐渍海蜇皮按照W:V＝1:500，流水冲洗5h，取一定体积浸泡液，滴加硝酸银至无白色浑浊即为脱盐成功；
S2：除杂，取脱盐后的样品，按照W:V＝1:6(脱盐前质量)比例加入0.1mol/L的氢氧化钠溶液，在4℃下浸泡24h～48h，每隔24h更换一次氢氧化钠溶液，将碱处理好的样品洗至中性，沥干水分，备用。
S3：匀浆，将上述样品进行匀浆处理，至样品无结块，呈胶状；
S4：碱反应，加入0.05mol/L的氢氧化钠溶液，在4℃下浸泡24h；
S5：离心，在4℃下用高速冷冻离心机10000r离心60min，保留上清液。
S6：盐析，取上清液加入2mol/L～3mol/L的NaCl溶液进行盐析，在4℃下静置24h，4℃条件下用高速冷冻离心机10000r离心60min，取沉淀；
S7：透析，将沉淀复溶于0.1mol/L冰乙酸中，将其置于透析液体积15～20倍的0.05mol/L乙酸溶液中透析36h，再置于去离子水中透析48h；
S8：冷冻干燥，透析液经冷冻干燥得到胶原蛋白冻干品。
以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。
Claims (6)
1.一种利用碱法从盐渍海蜇皮中制备胶原蛋白的方法，其特征在于，包括以下工作步骤：
S1：脱盐，将盐渍海蜇皮按照W:V＝1:500比例进行流水冲洗，取一定体积浸泡液，滴加硝酸银至无白色浑浊即为脱盐成功；
S2：除杂，取脱盐后的样品，按照W:V＝1:6(脱盐前质量)比例加入氢氧化钠溶液，进行浸泡，将碱处理好的样品洗至中性，沥干水分，备用；
S3：匀浆，将上述样品进行匀浆处理，至样品无结块，呈胶状；
S4：碱反应，加入氢氧化钠溶液，进行浸泡；
S5：离心，在4℃下用高速冷冻离心机10000r离心60min，保留上清液；
S6：盐析，取上清液加入2mol/L～3mol/L的NaCl溶液进行盐析，在4℃下静置24h，4℃条件下用高速冷冻离心机10000r离心60min，取沉淀；
S7：透析，将沉淀复溶于0.1mol/L冰乙酸中，将其置于透析液体积15～20倍的0.05mol/L乙酸溶液中透析36h，再置于去离子水中透析48h；
S8：冷冻干燥，透析液经冷冻干燥得到胶原蛋白冻干品。
2.根据权利要求1所述的一种利用碱法从盐渍海蜇皮中制备胶原蛋白的方法，其特征在于：所述S1中的流水冲洗时间为5h。
3.根据权利要求1所述的一种利用碱法从盐渍海蜇皮中制备胶原蛋白的方法，其特征在于：所述S2中除杂所用氢氧化钠溶液浓度为0.1mol/L。
4.根据权利要求1所述的一种利用碱法从盐渍海蜇皮中制备胶原蛋白的方法，其特征在于：所述S2中的浸泡温度为4℃，浸泡时间为24h-48h。
5.根据权利要求1所述的一种利用碱法从盐渍海蜇皮中制备胶原蛋白的方法，其特征在于：所述S2中的除杂过程在每隔24h更换一次氢氧化钠溶液。
6.根据权利要求1所述的一种利用碱法从盐渍海蜇皮中制备胶原蛋白的
方法，其特征在于：所述S4中碱反应所用氢氧化钠溶液浓度为0.05mol/L，
浸泡温度为4℃，浸泡时间为24h。
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