CN117120067A - 可用于处理和/或护理皮肤的女贞提取物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种用于从女贞的果实获得植物提取物的方法，该方法包括在特定条件下用亚临界水对女贞的果实进行提取。该植物提取物可用于对皮肤进行美容性、非治疗性处理和/或护理。

Description

可用于处理和/或护理皮肤的女贞提取物

技术领域

本发明涉及一种可用于处理和/或护理皮肤的植物提取物。该植物提取物是通过在特定条件下使用亚临界水提取女贞(Ligustrum lucidum)而获得的。本发明延伸至用于制备该植物提取物的方法、包含该植物提取物的组合物以及该植物提取物用于对皮肤进行美容性、非治疗性处理和/或护理的用途。

背景技术

皮肤是人体中最大的器官，并且持续需要足够量的氧气来执行其生物功能。皮肤中氧稳态的控制对于维持适当的水合水平、能量状态、细胞外基质的产生和皮肤的屏障功能是必需的[Straseski,J.A.等人“Oxygen deprivation inhibits basal keratinocyteproliferation in a model of human skin and induces regio-specific changes inthe distribution of epidermal adherens junction proteins,aquaporin-3,andglycogen”(2009)Wound and Repair Regeneration 17(4):606–616；Steinbrech,D.S.]。

氧通过以下两条途径递送到皮肤中：由大气氧从外部递送到表皮：以及通过血流向真皮供应氧。大气氧摄取是通过在表皮的几个上层(深度为0.25mm至0.4mm)中扩散而发生的。表皮的基底层保持在相对低或轻度的缺氧状态中，该缺氧状态受缺氧诱导因子(HIF)的表达而调节[Rosenberger,C.“Upregulation of Hypoxia-Inducible Factors inNormal and Psoriatic Skin”(2007)Journal of Investigative Dermatology.127,2445–2452]。通过皮肤微循环(其向皮肤供应氧合血红蛋白以满足其氧需求)从血流向真皮供应氧。该过程主要依赖于皮肤微血管的血管收缩/血管舒张活性。

HIF-感受器系统包括负责控制组织氧合的氧调节转录因子。HIF转录因子家族包括三种不同的同种型(HIF-1α、HIF-2α和HIF-3α)，它们在常氧(正常水平的氧)下被HIF脯氨酰羟化酶靶向降解。然而，缺氧组织条件稳定HIF因子，这些HIF因子结合至DNA中的缺氧反应元件(HRE)，从而导致参与改善氧向组织递送的基因的上调[Brahimi-Horn,M.C.“HIF ata glance”(2009).Journal of Cell Science 122,1055-1057]。这导致血管的血管舒张。

HIF-系统在血管舒张信号的产生中起重要作用，从而增加血流和对缺氧组织的氧供应。一氧化氮是我们身体中最著名的血管舒张剂，占皮肤主动血管舒张的30％至45％[Wong,BJ“Current concepts of active vasodilation in human skin”(2017)Temperature.4:1,41–59]。在表皮细胞中，一氧化氮的产生由诱导型一氧化氮合酶(iNOS)与精氨酸酶的活性之间的正确平衡来决定。两种酶受HIF-系统的不同分支控制：HIF-1α调节iNOS表达，而HIF-2α则控制精氨酸酶表达。两种酶竞争相同的底物，即L-精氨酸。根据HIF同种型表达水平的平衡，L-精氨酸被HIF-1α重定向至血管舒张信号传导产生或被HIF-2α重定向至尿素合成。[Cowburn,A.S.“HIF isoforms in the skin differentially regulatesystemic arterial pressure”(2013).Proceedings of the National Academy ofSciences110(43)；Andrew S Cowburn,A.S.“Cardiovascular adaptation to hypoxiaand the role of peripheral resistance”(2017).Elife.19；6]。最近，已经发现，生活在氧水平低的高海拔地区的藏族人群通过一种适应性机制已经优化了向其组织的氧递送。在缺氧条件下，藏族人群维持上调的HIF-1α同种型，以及特定同种型HIF-2α的下调。通过下调HIF-2α同种型降低该人群中精氨酸酶的活性，增加了L-精氨酸的生物利用度，其有利于血管舒张剂的产生[Peng,Y“Down-Regulation of EPAS1 Transcription and GeneticAdaptation of Tibetans to High-Altitude Hypoxia”(2017).Molecular Biology andEvolution.34(4):818–830；Song,D“Defective Tibetan PHD2 Binding to p23 LinksHigh Altitude Adaption to Altered Oxygen Sensing”(2014)The Journal ofbiological Chemistry.289:21,14656–14665]。

皮肤氧合随年龄而降低，从而导致苍白的容颜和皮肤衰老加速。这种作用在涉及皮肤氧合的机制失调的老年皮肤中更显著。特别地，血管舒张和血管收缩机制在衰老过程中发生改变。由于在衰老过程中精氨酸酶活性的增加和活性氧(ROS)的出现，存在血管舒张信号的衰减和血管收缩的增强[Holowatz,L.A.“Aging and the control of human skinblood Flow”(2011)Frontiers in Bioscience.15:718–739]。还已知HIF-1a功能的损伤加速表皮衰老[Rezvani,HR“Loss of epidermal hypoxia-inducible factor-1aaccelerates epidermal aging and affects re-epithelialization in human andmouse(2015).Journal of Cell Science.124,4172–4183]。

因此对旨在改善皮肤氧合的美容程序和实践的兴趣日益增长也就不足为奇了。对于改善皮肤氧合的处理，已经报道了诸如面部皮肤颜色改善、外观更健康[Stephen,ID.“Skin Blood Perfusion and Oxygenation Colour Affect Perceived Human Health”(2009).Plos One.4(4):e5083]、细纹减少和肤色更好[Diaz,D“-A UniqueThree-in-one Treatment of Exfoliation,Infusion,and Oxygenation via the BohrEffect and TriPollar^TMRadiofrequency for Skin Rejuvenation”(2017)Journal ofClinical and Aesthetic Dermatology.10(11):22–25]等有益效果。此外，HIF-1同种型的上调与皮肤年轻化策略相关[Pagani,A.“Skin Rejuvenation through HIF-1alphamodulation”(2018).Plastic and Reconstructive Surgery Advance.141(4):1]。

WO2012045974A2描述了一种来自旱金莲(Tropaeolum majus)的活性成分，其包括用于改善皮肤细胞的氧合的阿拉伯半乳聚糖。

US20180028437A1描述了褐藻类裙带菜(Undaria pinnatifida)配子体的亲脂性提取物作为用于人体皮肤的抗衰老剂的用途。

内源性活性氧(ROS)随着衰老而增加，并且能够容易地与一氧化氮反应，从而导致过氧亚硝酸盐的产生，过氧亚硝酸盐是一种具有高血管收缩和细胞毒性作用的活性分子[Holowatz,LA“Aging and the control of human skin blood Flow”(2011)Frontiersin Bioscience 15:718–739]。过氧亚硝酸盐可快速氧化一些关键的iNOS辅助因子，这导致iNOS活性的降低，并最终导致一氧化氮的产生。总之，用于增强皮肤中血管舒张信号的策略应当不仅依赖于一氧化氮的产生，而且还控制可能降低其功效或可能导致不期望的副作用的其他因素。

需要在改善皮肤氧合方面具有更高功效并且具有更少副作用的处理。

女贞，通常也称为大叶女贞(glossy privet)或中国女贞(Chinese privet)，是木犀科(Oleaceae)的常绿开花植株，原产于中国南半部并且在许多地方自然生长。女贞经常用作观赏树木，但是它已经在传统中药中广泛使用超过1000年，尤其是其果实部分。女贞的果实在传统中药中被称为女贞子，并且被认为可滋养肝肾，用于治疗耳鸣、眩晕以及腰膝酸软。

KR1896563B1描述了一种可用于滋润皮肤的化妆品组合物，其包含来自女贞叶的提取物。优选的提取溶剂是水、70％乙醇和丁二醇，优选的提取温度范围针对水为18℃至80℃，并且针对EtOH和丁二醇为18℃至40℃。

KR1901670B1描述了一种包含来自女贞的提取物的化妆品组合物，其用于保护皮肤免受细粉尘影响。在这些示例中，使用70％乙醇作为提取溶剂在室温下进行溶剂提取。

JP2013184942A描述了用于在护肤组合物中提供抗氧化活性、抑制DNA损伤和治疗皮肤衰老以及作为化妆品的女贞或日本女贞(Ligustrum japonicum)的提取物。提取物是从叶或果实中获得的。在该示例中，在室温下使用50％乙醇进行提取。

还将女贞作为一种潜在的抗皱化妆品成分进行了研究。在女贞提取物的三个部分(即，果实、茎和叶提取物)中，发现果实提取物含有最大量的熊果酸和齐墩果酸。来自果实的提取物是在50℃至60℃下用95％含水乙醇提取3小时而获得的[Yong Deog Hong,“Excellent Anti-aging Effects of Ursolic acid and Oleanolic acid Present inLigustrum lucidum”(2012)J.Soc.Cosmet.Scientists Korea第38卷，第2期，181-187]。

KR2100345B1描述了包含具有抗氧化、抗炎和抗皱活性的女贞提取物的化妆品组合物。在该示例中，在室温下使用70％乙醇进行提取。

需要发现新的天然来源的活性化合物，其可以增加皮肤的氧合，优选地具有低副作用。

本发明着手满足这些需求中的一些或所有需求并且解决以上确定的问题中的一些或所有问题。

发明内容

本发明基于可有利地在化妆品应用中起作用的新的植物提取物的发现。特别地，该提取物可用于皮肤的美容性非治疗性处理和/或护理，包括：改善和/或增加皮肤微循环或血管形成；改善或增加皮肤氧合；改善或增加皮肤红润度(自然红晕)；减少和/或预防皮肤衰老的症状；增加皮肤光滑度；和/或改善或增加皮肤光泽度和/或亮度。植物提取物是来自女贞的果实的提取物，并且可以通过使用亚临界水作为提取溶剂在特定条件下对女贞的果实进行固-液提取而获得。植物提取物可以以水性植物提取物或纯化的水性植物提取物的形式获得。

本发明的第一方面涉及一种用于从女贞的果实获得植物提取物的方法，该方法包括用亚临界水对女贞的果实进行提取，其中该提取包括使该果实与亚临界水在至少140℃的温度下和适于将该水维持在液态的压力下接触至少5分钟的时段以形成水性植物提取物的步骤。

在另一个方面，本发明提供了一种从女贞的果实获得的水性植物提取物。可以通过例如浓缩或干燥来纯化该水性植物提取物。本发明延伸至如此纯化的水性植物提取物。该水性植物提取物或纯化的水性植物提取物可/能够通过本发明第一方面的方法获得。

在另一个方面，本发明提供了一种包含该水性植物提取物和水混溶性有机溶剂的组合物，或一种包含纯化的水性植物提取物、水混溶性有机溶剂和任选的水的组合物。这些组合物中的每一种组合物可用作储备溶液，即其中储存有植物提取物并且在使用时(例如，在化妆品组合物中使用时)可稀释至较低浓度的溶液。

在另一个方面，本发明提供了一种化妆品组合物，其包含：该水性植物提取物、该纯化的水性植物提取物或前述组合物中的一种(包含该水性植物提取物或该纯化的水性植物提取物和水混溶性有机溶剂)；以及美容上可接受的赋形剂或成分。

在另一个方面，本发明提供了该水性植物提取物或纯化的水性植物提取物用于改善或增加皮肤微循环和/或血管形成的用途。

在另一个方面，本发明提供了水性植物提取物或纯化的水性植物提取物用于改善或增加皮肤氧合的用途。

在另一个方面，本发明提供了水性植物提取物或纯化的水性植物提取物用于改善皮肤红润度(自然红晕)的用途。

在另一个方面，本发明提供了水性植物提取物或纯化的水性植物提取物用于减少和/或预防皮肤衰老的症状的用途。

在另一个方面，本发明提供了该水性植物提取物或纯化的水性植物提取物用于增加皮肤光滑度的用途。

在另一个方面，本发明提供了该水性植物提取物或纯化的水性植物提取物用于改善或增加皮肤光泽度和/或亮度的用途。

在另一个方面，本发明提供了一种用于对皮肤进行美容性、非治疗性处理和/或护理的方法，该方法包括向皮肤局部施用有效量的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物。皮肤的美容性非治疗性处理和/或护理可以是：改善和/或增加皮肤微循环或血管形成；改善或增加皮肤氧合；改善或增加皮肤红润度(自然红晕)；减少和/或预防皮肤衰老的症状；增加皮肤光滑度；和/或改善或增加皮肤光泽度和/或亮度。

具体实施方式

定义

在本发明的上下文中，“皮肤”应理解为包括皮肤、从最上层或角质层到最下层或下皮层(包含两者)的层。这些层由不同类型的细胞构成，诸如角质形成细胞、成纤维细胞、黑素细胞、肥大细胞、神经元和/或脂肪细胞等。在本发明的上下文中，皮肤包含整个身体的皮肤，包含面部的皮肤(包含眼睛周围的皮肤)、颈圈、颈部、胸部、手臂、手、腿、脚、大腿、髋部、臀部、胃部、躯干和头皮。术语“皮肤”包括哺乳动物的皮肤并且包括人类皮肤。同样，术语“毛发、指甲和粘膜”包括哺乳动物(例如，人类)的毛发、指甲和粘膜。

术语“处理”如本文所用并且当其未伴随有限定性条件“美容性、非治疗性”时，是指治疗性方法，该治疗性方法包括涉及施用根据本发明的化合物以减轻或消除疾病或病症，或减少或消除与所述疾病或病症相关联的一种或多种症状的方法。术语“处理”当其未伴随有限定性条件“美容性、非治疗性”时还涵盖涉及减轻或消除疾病或病症的生理后果的疗法方法。

当术语“处理”和“护理”未伴随有限定性条件“美容性、非治疗性”时，其意指处理或护理的目的是改善或维持皮肤、毛发、指甲和/或粘膜的美学外观。具体地，处理的目的是改善皮肤、毛发、指甲和/或粘膜的美容性质，诸如例如且不限于水合水平、弹性、紧致度、光泽、色调或质地，这些特性会影响皮肤、毛发、指甲和/或粘膜的美学外观。术语“护理”在本说明书的上下文中是指维持皮肤、毛发、指甲和/或粘膜的性质。通过对健康受试者以及呈现出皮肤、毛发、指甲和/或粘膜的疾病和/或病症的受试者两者的皮肤、毛发、指甲和/或粘膜进行美容性处理和/或护理来改善或维持所述性质。

如本发明中所使用的，术语“预防”，是指本发明的化合物预防、推迟或阻碍疾病或病症的出现或发展，或预防、推迟或阻碍皮肤、粘膜和/或毛发的美容性质变化的能力。如本发明中所使用的，术语“预防”可与术语“抑制”互换，也就是说，其是指本发明的化合物抑制疾病或病症的出现或发展、或抑制皮肤、毛发、指甲和/或粘膜的美容性质变化的能力。

在本发明的上下文中，术语“衰老”是指皮肤由于固有的衰老过程(即慢性衰老)或环境因素(即，通过暴露于太阳(光衰老)或环境试剂(诸如烟草烟雾)、严寒或大风的极端气候条件、化学污染物或污染物)诱发的外在皮肤衰老过程而经历的变化。在本发明的上下文中，衰老包括所有外部可见和/或通过触摸可感知到的变化，诸如且不限于：皮肤的不连续发展，诸如皱纹、细纹、表情纹、妊娠纹、沟、不规则或粗糙；毛孔增大、水合丢失、弹性丢失、紧致度丢失、光滑度丢失、从变形恢复的能力的丢失、回弹性丢失；皮肤下垂，诸如脸颊下垂、眼睛下方出现眼袋或出现双下巴等；皮肤颜色变化，诸如斑纹、泛红、眼袋或色素沉着过度区出现，诸如老年斑或雀斑等；异常分化、角化过度、弹性组织变性、角化病、毛发丢失、橘皮皮肤、胶原蛋白结构丢失以及角质层、真皮、表皮、血管系统(例如，蜘蛛静脉或毛细血管扩张出现)或靠近皮肤的那些组织的其他组织学变化等。术语“光衰老”与由于皮肤长效暴露于导致皮肤永久衰老的紫外线照射的一组方法一起分组，并且其呈现了与衰老相同的物理特性，诸如且不限于松弛、下垂、颜色变化或色素沉着不规则、异常和/或过度角化。各种环境因素的总和，诸如暴露于烟草烟雾、暴露于污染以及气候条件(诸如严寒和/或大风)也会导致皮肤衰老。

如本文所用，术语“约”，例如当指可测量的值(诸如特定组分的量或重量或温度)时，是指指定量的±20％、±10％、±5％、±1％、±0.5％或特别是±0.1％的变化。

如本文所用，术语“包含”或“包括”(其是包含性的或开放式的并且不排除附加的未列举的元素或方法步骤)旨在以另选实施方案的形式涵盖短语“基本上由......组成”和“由......组成”，其中“由...组成”排除未指定的任何元素或步骤并且“基本上由...组成”允许包括不实质上影响所考虑的组合物或方法的本质或基本和新颖特征的附加的未列举的元素或步骤。

“植物提取物”应理解为是指从固/液提取中获得的产物，通过该固/液提取，植物部分(固体)中所含的植物化学化合物被溶剂溶解。植物提取物(botanical extract)在本文中也称为“植物提取物”(plant extract)。

用于从女贞的果实获得植物提取物的方法

在第一方面，本发明提供了一种用于从女贞的果实获得植物提取物的方法，该方法包括用亚临界水对女贞的果实进行提取，其中该提取包括使该果实与亚临界水在至少140℃的温度下和适于将该水维持在液态的压力下接触至少5分钟的时段以形成水性植物提取物的步骤。

该方法涉及从女贞的果实中进行固-液提取。女贞是一种来自木犀科的小乔木，原产于中国并被运送到世界各地的不同国家。女贞通常也称为阔叶女贞(broad-leafprivet)、中国女贞、大叶女贞、树女贞(tree privet)或蜡叶女贞(wax-leaf privet)。女贞的果实在中国也被称为女贞子。通常，将果实在成熟时收获，并干燥以供以后使用。

该方法可涉及提供女贞的果实的步骤，并且因此本发明提供了一种用于从女贞的果实获得植物提取物的方法，该方法包括：提供女贞的果实；以及用亚临界水对女贞的果实进行提取，其中该提取包括使该果实与亚临界水在至少140℃的温度下和适于将该水维持在液态的压力下接触至少5分钟的时段以形成水性植物提取物的步骤。

通常，女贞的果实呈干燥形式。可将果实干燥以使其更易于均质化、操作和储存。干燥果实或干燥形式的果实是指已经被干燥以具有小于10重量％水、小于5重量％水、小于2重量％水或小于1重量％水的水含量的果实。这可以通过例如AOAC官方方法AOAC 934.06-1934(1996)来测量。然而，也可以使用未经干燥的果实，诸如成熟果实。果实在本文中也被称为原材料。

通常，在提取中使用的干燥果实:亚临界水的比率(以g计的干燥果实重量:以mL计的亚临界水体积)在1:5g/mL至1:50g/mL、或1:10g/mL至1:30g/mL、或1:10g/mL至1:25g/mL、或1:15g/mL至20g/mL、或1:25g/mL至1:30g/mL的范围内。特别地，该比率为1:13g/mL、或1:15g/mL、或1:20g/mL、或1:22g/mL、或1:25g/mL、或1:27g/mL。

有利地，在提取前将果实磨碎或压碎。磨碎的果实可具有例如100pm至50mm范围内的粒度，平均粒度为0.5mm至5mm。更特别地，平均粒度为0.5mm至1mm。平均粒度可通过常规方法确定，诸如例如涉及筛分分析的那些方法。可使用本领域已知的任何合适的研磨/压碎技术来获得所需粒度的果实。

优选地，仅对女贞的果实进行提取，即不存在其他植物材料。可以将果实与中性材料混合，以使其更干燥和/或更多孔，以用于溶剂提取。合适的中性材料包括石墨烯、硅胶、C18树脂、硅藻土和中性氧化铝。特别合适的中性材料是硅藻土。

提取溶剂是亚临界水，其温度为至少140℃，并且保持在使其保持液态的压力下。亚临界水是在高于其100℃的天然沸点(即其在大气压下的沸点)的温度下通过压力保持为液态的水。亚临界水可具有高达其374℃的临界点温度的温度。亚临界水也被称为“加压低极性水”、“加压热水”或“压缩热水”。在压力下将水加热至高于其沸点的温度导致其关键性质诸如极性的改变。提取在可加压容器(通常为不锈钢容器)中进行。优选地，该方法中使用的唯一提取溶剂是亚临界水，即，在不存在任何其他有机或无机溶剂的情况下用亚临界水进行提取。

在提取期间，亚临界水需要处于至少140℃的温度下。亚临界水的温度可以为约140℃至约180℃、或约150℃至约175℃、或约155℃至约170℃、或约155℃至约165℃、或约160℃至约165℃。有利地，温度为约160℃。

在提取期间，可加压容器中的压力必须使得亚临界水维持在液态。实现这一点所需的压力将根据水的温度而变化。本领域技术人员将能够确定所需的压力。通常，压力范围为0.5MPa至20MPa。压力可以为至少约1Mpa。压力可以为约1MPa至约5MPa、或约1MPa至约2MPa。

使果实与亚临界水接触的步骤进行至少约5分钟的时段。该时段是果实与亚临界水接触的时间，无论水是静态的还是在果实上流动。该时段在本文中也称为提取时间。提取时间将例如根据所用果实和水的量而变化。通常，提取时间将从5分钟至约5小时变化。例如，提取时间可以为至少约15分钟、或至少约30分钟、或至少约1小时、或至少约2小时、或至少约3小时。

提取可以以分批模式(也称为“静态模式”)或以动态模式(也称为“流通”)进行。在分批模式下，将原材料(果实)分批暴露于(即接触)亚临界水。在分批模式下，所使用的亚临界水量是用于原材料样品的所有批次的亚临界水的总体积。在分批模式下，提取时间是在原材料样品的所有批次中原材料暴露于亚临界水的总时间。在动态模式下，原材料暴露于连续的水流。在动态模式下，所使用的亚临界水量是用于原材料样品的亚临界水的总体积。在动态模式下，提取时间是原材料暴露于用于原材料样品的亚临界水流的总时间。为了更快、更大规模地生产植物提取物，有利地，以动态模式进行提取。

当以分批模式获得提取物时，提取时间可以为约5分钟至45分钟、约5分钟至30分钟、或约10分钟至20分钟。提取时间可以为约15分钟。

当以动态模式获得提取物时，提取时间可以为约1小时至约5小时、或约2小时至约4小时。提取时间可以为约3小时至约3.5小时。在动态模式下，亚临界水的流速可以为约5mL/min至30mL/min。流速可以为约10mL/min至20mL/min、或约14mL/min至16mL/min。

在使果实与亚临界水接触的步骤中，将组分从果实中提取到亚临界水中。更具体地，将果实的组分溶解在亚临界水中，从而形成水性植物提取物。水性植物提取物的组成细节描述于以下标题为“从女贞获得的植物提取物”的部分中。该方法包括从水性植物提取物中分离果实(即任何未溶解的果实)的步骤。通常，该步骤是直接的并且简单地涉及从加压容器释放水性植物提取物，同时将果实保留在加压容器中。其他合适的分离技术是本领域已知的，并且包括例如过滤、沉降、倾析或离心。可使用孔径小于1000μm、或小于20μm、或小于10μm、或小于1μm、或小于0.1μm的过滤器进行过滤。过滤可以在连续过滤操作中进行，例如使用孔径逐渐减小的过滤器。可以将过滤后留下的残留物(未溶解的果实)与更多的提取溶剂再次接触。这种过滤-再接触步骤可以进行一次，或可以重复，例如重复1次至5次。优选地，在水性植物提取物冷却和沉淀出提取物组分之前进行分离。

在从果实中分离水性植物提取物后，可以将其纯化(以形成“纯化的水性植物提取物”)。在本发明的上下文中，“纯化”是指纯化、部分纯化和/或分馏。存在大量本领域熟知的用于纯化植物提取物的技术。一些非限制性示例包括固-液提取、液-液提取、固相提取(SPE)、膜过滤、超滤、透析、电泳、溶剂浓缩、离心、超速离心、具有或不具有高压的液相或气相色谱法(包括尺寸排阻、亲和等)、冻干、蒸发、用各种“载体”(包括PVPP、碳、抗体等)沉淀，或它们的各种组合。在一个实施方案中，将水性植物提取物浓缩，以形成水性植物提取物的浓缩物。另选地，将水性植物提取物干燥，以形成固体形式的植物提取物。可将水性植物提取物干燥以使其含有不超过10重量％的水、不超过5重量％的水、不超过2重量％的水或不超过1重量％的水。这可以通过例如水分含量确定AOAC(2000)来测量。合适的浓缩和/或干燥方法是本领域熟知的。示例包括但不限于减压蒸发、蒸发、减压蒸馏、蒸馏、烘箱干燥、晒干和冻干(即冷冻干燥)、喷雾干燥、雾化或流化床干燥机。可以在有或没有载体或其他赋形剂的情况下对水性植物提取物进行浓缩或干燥。

提取可以在本领域已知的允许亚临界水提取的任何系统中进行，并且包括系统，该系统包括间歇式提取器或连续式提取器。

从女贞获得的植物提取物

在一个方面，本发明提供了一种从女贞的果实获得的植物提取物。植物提取物可/能够通过用亚临界水提取而从女贞的果实获得，其中该提取包括使果实与亚临界水在至少140℃的温度下和适于将水维持在液态的压力下接触至少5分钟的时段的步骤。已经发现，在这些特定的提取条件下，可以获得新的植物提取物，并且令人惊讶地，这种提取物具有有利的美容性质。具体地，植物提取物可/能够通过上述标题为“用于从女贞的果实获得植物提取物的方法”的部分中描述的方法获得。植物提取物可以以水性植物提取物或纯化的水性植物提取物的形式获得。如本文所述的提取方法的细节可应用于或并入本文提供的植物提取物、水性植物提取物和/或纯化的水性植物提取物的定义中。

植物提取物可以呈水性植物提取物的形式。在本发明的方法中，用亚临界水提取包括使果实与亚临界水在至少140℃的温度下和适于将水维持在液态的压力下接触至少5分钟的时段以形成水性植物提取物的步骤。换句话说，该提取包括使果实与亚临界水接触至少5分钟的时段以形成水性植物提取物的步骤，其中该水处于至少140℃的温度和将其维持在液态的压力下。在该步骤期间，将组分从果实中提取到亚临界水中；具体地，将果实的组分溶解在亚临界水中，以形成水性植物提取物。从本质上讲，植物提取物就是所提取的组分(从果实中提取并溶解在亚临界水中的组分)。水性植物提取物是水性形式的植物提取物。水性植物提取物是包含植物提取物和水的组合物。当水是亚临界的时，所提取的组分保持溶解在水中，并且水性植物提取物是溶液。提取后，当水冷却并处于较低压力下时，所提取的组分可开始从溶液中沉淀出来。因此，所提取的组分可能会也可能不会完全溶解在水性植物提取物中。

在上述方法中，可以使水性植物提取物经受纯化步骤，以产生纯化的水性植物提取物。纯化的水性提取物可以是水性植物提取物的浓缩物或固体形式的植物提取物，诸如无定形固体、结晶或部分结晶固体，任选地呈粉末形式。

水性植物提取物或纯化的水性植物提取物可以包含橄榄苦苷、红景天苷和杨梅黄酮。水性植物提取物或纯化的水性植物提取物可以包含橄榄苦苷、红景天苷、杨梅黄酮和松柏醇。水性植物提取物或纯化的水性植物提取物可以包含橄榄苦苷、红景天苷、杨梅黄酮和芹菜素。水性植物提取物或纯化的水性植物提取物可以包含橄榄苦苷、红景天苷、杨梅黄酮、松柏醇和芹菜素。

水性植物提取物或纯化的水性植物提取物可以包含橄榄苦苷、红景天苷、杨梅黄酮和至少一种选自香草醛、3,4-二羟基苯甲酸、3,5-二羟基苯甲酸、4-羟基苯甲醛、4-羟基苯甲酸、咖啡酸、槲皮素、芥子醇、水杨酸、山奈酚和柚皮素的化合物。水性植物提取物或纯化的水性植物提取物可以包含橄榄苦苷、红景天苷、杨梅黄酮、香草醛、3,4-二羟基苯甲酸和/或3,5-二羟基苯甲酸、4-羟基苯甲酸、咖啡酸、芥子醇、水杨酸和山奈酚。水性植物提取物或纯化的水性植物提取物可以包含橄榄苦苷、红景天苷、杨梅黄酮、香草醛、3,4-二羟基苯甲酸、3,5-二羟基苯甲酸、4-羟基苯甲醛、4-羟基苯甲酸、咖啡酸、槲皮素、芥子醇、水杨酸、山奈酚和柚皮素。

水性植物提取物或纯化的水性植物提取物可以包含橄榄苦苷、红景天苷、杨梅黄酮和至少一种选自香草醛、4-羟基苯甲醛、4-羟基苯甲酸、槲皮素、芥子醇、水杨酸和柚皮素的化合物。水性植物提取物或纯化的水性植物提取物可以包含橄榄苦苷、红景天苷、杨梅黄酮、香草醛、4-羟基苯甲酸、芥子醇和水杨酸。水性植物提取物或纯化的水性植物提取物可以包含橄榄苦苷、红景天苷、杨梅黄酮、香草醛、4-羟基苯甲醛、4-羟基苯甲酸、槲皮素、芥子醇、水杨酸和柚皮素。

水性植物提取物或纯化的水性植物提取物可以包含橄榄苦苷、红景天苷、杨梅黄酮、香草醛、木犀草素-7-O-葡萄糖苷、3,4-二羟基苯甲酸和/或3,5-二羟基苯甲酸、4-羟基苯甲醛、4-羟基苯甲酸、香草酸、咖啡酸、阿魏酸、脱落酸、槲皮素、圣草酚、芥子醇、水杨酸、松柏醛、芹菜素-7-O-葡萄糖苷、肉桂酸、香豆酸、山奈酚、3,5-二羟基苯甲醛和柚皮素。

水性植物提取物或纯化的水性植物提取物可以包含橄榄苦苷、红景天苷、杨梅黄酮、松柏醇和至少一种选自香草醛、3,4-二羟基苯甲酸、3,5-二羟基苯甲酸、4-羟基苯甲醛、4-羟基苯甲酸、咖啡酸、槲皮素、芥子醇、水杨酸、山奈酚和柚皮素的化合物。水性植物提取物或纯化的水性植物提取物可以包含橄榄苦苷、红景天苷、杨梅黄酮、松柏醇、香草醛、3,4-二羟基苯甲酸和/或3,5-二羟基苯甲酸、4-羟基苯甲酸、咖啡酸、芥子醇、水杨酸和山奈酚。水性植物提取物或纯化的水性植物提取物可以包含橄榄苦苷、红景天苷、杨梅黄酮、松柏醇、香草醛、3,4-二羟基苯甲酸、3,5-二羟基苯甲酸、4-羟基苯甲醛、4-羟基苯甲酸、咖啡酸、槲皮素、芥子醇、水杨酸、山奈酚和柚皮素。

水性植物提取物或纯化的水性植物提取物可以包含橄榄苦苷、红景天苷、杨梅黄酮、松柏醇和至少一种选自香草醛、4-羟基苯甲醛、4-羟基苯甲酸、槲皮素、芥子醇、水杨酸和柚皮素的化合物。水性植物提取物或纯化的水性植物提取物可以包含橄榄苦苷、红景天苷、杨梅黄酮、松柏醇、香草醛、4-羟基苯甲酸、芥子醇和水杨酸。水性植物提取物或纯化的水性植物提取物可以包含橄榄苦苷、红景天苷、杨梅黄酮、松柏醇、香草醛、4-羟基苯甲醛、4-羟基苯甲酸、槲皮素、芥子醇、水杨酸和柚皮素。

水性植物提取物或纯化的水性植物提取物可以包含橄榄苦苷、红景天苷、杨梅黄酮、松柏醇、香草醛、木犀草素-7-O-葡萄糖苷、3,4-二羟基苯甲酸和/或3,5-二羟基苯甲酸、4-羟基苯甲醛、4-羟基苯甲酸、香草酸、咖啡酸、阿魏酸、脱落酸、槲皮素、圣草酚、芥子醇、水杨酸、松柏醛、芹菜素-7-O-葡萄糖苷、肉桂酸、香豆酸、山奈酚、3,5-二羟基苯甲醛和柚皮素。

水性植物提取物或纯化的水性植物提取物可以包含橄榄苦苷、红景天苷、杨梅黄酮、芹菜素和至少一种选自香草醛、3,4-二羟基苯甲酸、3,5-二羟基苯甲酸、4-羟基苯甲醛、4-羟基苯甲酸、咖啡酸、槲皮素、芥子醇、水杨酸、山奈酚和柚皮素的化合物。水性植物提取物或纯化的水性植物提取物可以包含橄榄苦苷、红景天苷、杨梅黄酮、芹菜素、香草醛、3,4-二羟基苯甲酸和/或3,5-二羟基苯甲酸、4-羟基苯甲酸、咖啡酸、芥子醇、水杨酸和山奈酚。水性植物提取物或纯化的水性植物提取物可以包含橄榄苦苷、红景天苷、杨梅黄酮、芹菜素、香草醛、3,4-二羟基苯甲酸、3,5-二羟基苯甲酸、4-羟基苯甲醛、4-羟基苯甲酸、咖啡酸、槲皮素、芥子醇、水杨酸、山奈酚和柚皮素。

水性植物提取物或纯化的水性植物提取物可以包含橄榄苦苷、红景天苷、杨梅黄酮、芹菜素和至少一种选自香草醛、4-羟基苯甲醛、4-羟基苯甲酸、槲皮素、芥子醇、水杨酸和柚皮素的化合物。水性植物提取物或纯化的水性植物提取物可以包含橄榄苦苷、红景天苷、杨梅黄酮、芹菜素、香草醛、4-羟基苯甲酸、芥子醇和水杨酸。水性植物提取物或纯化的水性植物提取物可以包含橄榄苦苷、红景天苷、杨梅黄酮、芹菜素、香草醛、4-羟基苯甲醛、4-羟基苯甲酸、槲皮素、芥子醇、水杨酸和柚皮素。

水性植物提取物或纯化的水性植物提取物可以包含橄榄苦苷、红景天苷、杨梅黄酮、芹菜素、香草醛、木犀草素-7-O-葡萄糖苷、3,4-二羟基苯甲酸和/或3,5-二羟基苯甲酸、4-羟基苯甲醛、4-羟基苯甲酸、香草酸、咖啡酸、阿魏酸、脱落酸、槲皮素、圣草酚、芥子醇、水杨酸、松柏醛、芹菜素-7-O-葡萄糖苷、肉桂酸、香豆酸、山奈酚、3,5-二羟基苯甲醛和柚皮素。

水性植物提取物或纯化的水性植物提取物可以包含橄榄苦苷、红景天苷、杨梅黄酮、松柏醇、芹菜素和至少一种选自香草醛、3,4-二羟基苯甲酸、3,5-二羟基苯甲酸、4-羟基苯甲醛、4-羟基苯甲酸、咖啡酸、槲皮素、芥子醇、水杨酸、山奈酚和柚皮素的化合物。水性植物提取物或纯化的水性植物提取物可以包含橄榄苦苷、红景天苷、杨梅黄酮、松柏醇、芹菜素、香草醛、3,4-二羟基苯甲酸和/或3,5-二羟基苯甲酸、4-羟基苯甲酸、咖啡酸、芥子醇、水杨酸和山奈酚。水性植物提取物或纯化的水性植物提取物可以包含橄榄苦苷、红景天苷、杨梅黄酮、松柏醇、芹菜素、香草醛、3,4-二羟基苯甲酸、3,5-二羟基苯甲酸、4-羟基苯甲醛、4-羟基苯甲酸、咖啡酸、槲皮素、芥子醇、水杨酸、山奈酚和柚皮素。

水性植物提取物或纯化的水性植物提取物可以包含橄榄苦苷、红景天苷、杨梅黄酮、松柏醇、芹菜素和至少一种选自香草醛、4-羟基苯甲醛、4-羟基苯甲酸、槲皮素、芥子醇、水杨酸和柚皮素的化合物。水性植物提取物或纯化的水性植物提取物可以包含橄榄苦苷、红景天苷、杨梅黄酮、松柏醇、芹菜素、香草醛、3,4-二羟基苯甲酸和/或3,5-二羟基苯甲酸、4-羟基苯甲酸、咖啡酸、芥子醇、水杨酸和山奈酚。水性植物提取物或纯化的水性植物提取物可以包含橄榄苦苷、红景天苷、杨梅黄酮、松柏醇、芹菜素、香草醛、3,4-二羟基苯甲酸、3,5-二羟基苯甲酸、4-羟基苯甲醛、4-羟基苯甲酸、咖啡酸、槲皮素、芥子醇、水杨酸、山奈酚和柚皮素。

水性植物提取物或纯化的水性植物提取物可以包含橄榄苦苷、红景天苷、杨梅黄酮、松柏醇、芹菜素、香草醛、木犀草素-7-O-葡萄糖苷、3,4-二羟基苯甲酸和/或3,5-二羟基苯甲酸、4-羟基苯甲醛、4-羟基苯甲酸、香草酸、咖啡酸、阿魏酸、脱落酸、槲皮素、圣草酚、芥子醇、水杨酸、松柏醛、芹菜素-7-O-葡萄糖苷、肉桂酸、香豆酸、山奈酚、3,5-二羟基苯甲醛和柚皮素。

储备溶液

如上所述，通过用亚临界水提取从女贞的果实获得的植物提取物可以呈水性形式，即呈水性植物提取物的形式。从果实中提取的组分可能会也可能不会完全溶解在水性植物提取物中。有利地，可以将水性植物提取物与水混溶性有机溶剂混合，以便将所提取的组分保持在溶液中。用于获得本发明的植物提取物的方法可以包括以下步骤：将如本文所定义的水性植物提取物与水混溶性有机溶剂混合。所得组合物包含水性植物提取物和水混溶性有机溶剂。例如，可向该组合物中添加水，以获得所需浓度的水混溶性溶剂。用于获得本发明的植物提取物的方法可以包括以下步骤：将如本文所定义的纯化的水性植物提取物与水混溶性有机溶剂以及任选的水混合。所得组合物包含纯化的水性植物提取物与水混溶性有机溶剂以及任选的水。纯化的水性植物提取物可以是水性植物提取物的浓缩物或固体形式的植物提取物。这些组合物在本文中也称为“储备溶液”。

水混溶性有机溶剂优选为美容上可接受的有机溶剂并且可以是多元醇。合适的多元醇包括二醇，其是含有两个醇官能团(-OH基团)的有机化合物，诸如：C2-C10脂肪族烃基二醇或三醇、甘油。C2-C10脂肪族烃基二醇包括每种异构体形式的C2-C10或C2-C8链烷二醇，并且其可以是取代的或未取代的。当被取代时，链烷二醇可以被独立地选自例如卤素、羟基、酯、硝基、氰基、卤代烷基、磺酰基和羰基的一个或多个取代基取代。水混溶性有机溶剂可选自：1,2-丙二醇、乙二醇、二乙二醇、丙二醇、二丙二醇、丁二醇、戊二醇、甘油或辛二醇，以及它们的混合物。特别地，多元醇是甘油(在本文中也称为甘油或丙三醇)。

包含水性植物提取物和多元醇以及任选的(额外的)水的组合物可具有基于组合物的总重量计为至少50重量％、或50重量％至90重量％、或50重量％至80重量％、或55重量％至80重量％的多元醇浓度。通常，余量由水性植物提取物和水构成。例如，组合物可以包含至多50重量％的水。优选地，多元醇是甘油。包含纯化的植物提取物和多元醇以及水的组合物可具有基于组合物的总重量计为至少50重量％、或50重量％至90重量％、或50重量％至80重量％、或55重量％至80重量％的多元醇浓度。通常，余量由纯化的植物提取物和水构成。例如，组合物可以包含至多50重量％的水。优选地，多元醇是甘油。

这些组合物可以包含约10ppm至100ppm、或约20ppm至80ppm、或30ppm至60ppm的多酚。特别地，包含水性植物提取物和多元醇以及任选的(额外的)水的组合物可以包含约10ppm至100ppm、或约20ppm至80ppm、或30ppm至60ppm的多酚。多酚是以多个酚单元为特征的有机化合物，并且包括类黄酮、酚酸、香豆素和二苯乙烯。

这些组合物包含水性植物提取物或纯化的水性植物提取物，并且因此将包含如上所述的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物的组分。

这些组合物可以包含约1ppm至约40ppm的橄榄苦苷、约1ppm至约40ppm的红景天苷和约0.1ppm至约3ppm的杨梅黄酮(3,5,7-三羟基-2-(3,4,5-三羟基苯基)色烯-4-酮)。橄榄苦苷可以以约10ppm至30ppm、或约12ppm至25ppm、或约20ppm至30ppm的量存在。红景天苷可以以约1ppm至约22ppm、或约10ppm至20ppm的量存在。杨梅黄酮可以以约0.2ppm至约2ppm、或约0.5ppm至约1.5ppm的量存在。

这些组合物可以另外包含约1ppm或2ppm至约25ppm的松柏醇(4-[(E)-3-羟基丙-1-烯基]-2-甲氧基苯酚)和/或约0.01ppm至约5ppm的芹菜素。松柏醇可以以约2ppm至约15ppm、或约4ppm至约9ppm的量存在。芹菜素可以以约0.05ppm至约3ppm、或约1ppm至约2.5ppm的量存在。

当存在于这些组合物中时，柚皮素可以以约0.001ppm至约0.01ppm柚皮素、或约0.001ppm至约0.02ppm、或约0.001ppm至约0.005ppm的量存在。

当存在于这些组合物中时，香草醛(4-羟基-3-甲氧基苯甲醛)可以以约0.05ppm至约2ppm、或约0.1ppm至约1ppm、或约0.2ppm至约0.5ppm的量存在。

当存在于这些组合物中时，4-羟基苯甲醛可以以约0.01ppm至约0.5ppm、或约0.02ppm至约0.2ppm、或约0.04ppm至约0.1ppm的量存在。

当存在于这些组合物中时，4-羟基苯甲酸可以以约0.1ppm至约1ppm、或约0.05ppm至约0.5ppm、或约0.1ppm至约0.3ppm的量存在。

当存在于这些组合物中时，槲皮素(2-(3,4-二羟基苯基)-3,5,7-三羟基色烯-4-酮)可以以约0.05ppm至约0.3ppm、或约0.01ppm至约0.15ppm、或约0.03ppm至约0.07ppm的量存在。

当存在于这些组合物中时，(4-[(E)-3-羟基丙-1-烯基]-2,6-二甲氧基苯酚)可以以约0.1ppm至约3ppm、或约0.2ppm至约2ppm、或约0.4ppm至约1ppm的量存在。

化妆品组合物

本发明的植物提取物可以通过引起植物提取物与受试者身体皮肤之间的接触的任何手段施用，并且可以呈含有植物提取物的组合物的形式。优选地，受试者是哺乳动物，更优选是人。

在另一个方面，本发明提供了一种化妆品组合物，其包含水性植物提取物、纯化的水性植物提取物或储备溶液，均如本文所定义，以及至少一种美容上可接受的赋形剂或佐剂。这些组合物可以通过本领域的技术人员已知的常规方式制备[“Harry’sCosmeticology”，第七版，(1982),Wilkinson J.B.,Moore R.J.编辑，Longman House,Essex,GB]。

化妆品组合物含有化妆品上有效量的应施用的本发明的植物提取物，以及其剂量，将取决于多种因素，包括年龄、患者的状态、待处理和/或护理的病状、病症或疾病的性质或严重性、施用的途径和频率以及待使用的化合物的具体性质。

术语“化妆品上有效量”应理解为意指无毒但足以提供所需效果的本发明的提取物的量。本发明的提取物或储备溶液以化妆品上有效浓度用于本发明的化妆品组合物中以实现所需效果；例如，相对于组合物的总重量的使用量为：0.00000001％(按重量计)至20％(按重量计)；0.000001％(按重量计)至15％(按重量计)、0.00001％(按重量计)至10％(按重量计)；或0.0001％(按重量计)至5％(按重量计)；或0.1％至4％(按重量计)；或1％至3％(按重量计)。例如，本发明的水性植物提取物或储备溶液在化妆品组合物中的存在量可以为：0.1％至4％(按重量计)；或1％至3％(按重量计)；或1.5％至2.5％(按重量计)；或2％(按重量计)。

根据本发明的提取物、储备溶液和组合物还可以掺入到与皮肤直接接触的织物、非织造织物以及医学装置中，从而由于身体湿度、皮肤的pH或身体温度，通过结合系统到织物、非织造织物或医学装置中的生物降解、或通过其与身体之间的摩擦来释放本发明的化合物。此外，本发明的化合物可以掺入到用于制造与身体直接接触的服装的织物和非织造织物中。

织物、非织造织物、服装、医学装置和用于将化合物固定到其的装置(其为以上描述的递送系统和/或缓释系统)等的示例可以在文献中找到并且是现有技术中已知的[Schaab C.K.(1986)HAPPI 1986年5月；Nelson G.,“Application ofmicroencapsulation in textiles”,(2002),Int.J.Pharm.,242(1-2),55-62；“Biofunctional Textiles and the Skin”(2006)Curr.Probl.Dermatol.第33卷，HiplerU.C.和Elsner P.编辑，S.Karger AG,Basel,Switzerland；Malcolm R.K.等人，“Controlled release of a model antibacterial drug from a novel self-lubricating silicone biomaterial”,(2004),J.Cont.Release,97(2),313-320]。优选的织物、非织造织物、服装和医疗装置是绷带、纱布、T恤衫、短袜、紧身衣、内衣、束腰带、手套、尿布、卫生巾、敷料、床单、擦拭巾、粘附贴剂、非粘附贴剂、封闭贴剂、微电贴剂和/或面罩。

如上所述，本发明延伸至掺入有提取物的织物、非织造织物和医疗装置。

本发明的化妆品组合物可以是用于局部或经皮施用的组合物，其任选地包括调配所需施用形式所必需的化妆品上或药学上可接受的赋形剂。

用于局部或经皮应用的组合物可以以任何固体、液体或半固体调配物形式制备，诸如且不限于乳膏、多重乳剂(诸如且不限于水包油和/或水包有机硅乳剂、油包水和/或有机硅乳剂、水/油/水或水/有机硅/水型乳剂以及油/水/油或有机硅/水/有机硅型乳剂)、无水组合物、水分散体、油、乳、香膏、泡沫、乳液、凝胶、乳膏凝胶、水醇溶液、水甘醇溶液、水凝胶、搽剂、浆液、肥皂、洗发水、护发素、精华液、多糖膜、软膏、摩丝、润发油、粉末、棒、笔以及喷雾剂或气雾剂(喷雾剂)，包括免洗和冲洗调配物。这些局部或透皮应用调配物可以使用本领域技术人员已知的技术掺入到不同类型的固体辅料中，例如且不限于绷带、纱布、t恤、袜子、紧身衣、内衣、腰带、手套、尿布、卫生巾、敷料、床罩、抹布、粘附贴剂、非粘附贴剂、闭塞贴剂、微电贴剂或面膜，或者其可以并入到不同的化妆产品中，诸如化妆粉底(诸如液体粉底和粉饼)、卸妆液、卸妆乳、眼部遮瑕膏、眼影、口红、护唇膏、唇彩和唇粉等。

在一个实施方案中，本发明的化妆品组合物呈选自以下的形式：乳膏、多重乳剂、溶液、液晶、无水组合物、水分散体、油、乳、香膏、泡沫、乳液、凝胶、乳膏凝胶、水醇溶液、水甘醇溶液、水凝胶、搽剂、肥皂、洗发水、护发素、精华液、多糖膜、软膏、摩丝、润发油、粉末、棒、笔、喷雾剂或气雾剂。

本发明的化妆品组合物可以包含增加本发明化合物的经皮吸收的药剂，例如且不限于，二甲亚砜、二甲基乙酰胺、二甲基甲酰胺、表面活性剂、氮酮(1-十二烷基氮杂环庚烷-2-酮)、醇、脲、乙氧基二甘醇、丙酮、丙二醇或聚乙二醇等。此外，本发明的化妆品组合物可以适用于通过离子电渗、超声促渗、电穿孔、微电贴剂、机械压力、渗透压梯度、闭塞治愈、显微注射或通过压力进行的无针注射(诸如通过氧气压力进行的注射)或它们的任何组合处理的局部区域，以实现本发明的肽的更大渗透。应用区域将通过待处理和/或护理的病状、病症和/或疾病的性质来确定。

根据本发明的化妆品组合物通过局部或经皮途径施用之外、还可以通过任何其他适当的途径，诸如口服或肠胃外途径来施用，为此这些组合物将包含用于调配所需施用形式所必需的药学上可接受的赋形剂。在本发明的上下文中，术语“肠胃外”包含经鼻、耳、眼、直肠、尿道、阴道、皮下、真皮内途径、血管内注射，诸如静脉内、肌内、眼内、玻璃体内、角膜内、脊柱内、髓内、颅内、宫颈管内、大脑内、脑膜内、关节内、肝内、胸内、气管内、鞘内和腹膜内，以及任何另一种类似的注射或输注技术。本领域的技术人员已知可以施用含有本发明的化合物的化妆品组合物的不同装置。

另选地，本发明的提取物和组合物可用于不同类型的口服调配物中，优选地以口服化妆品或药物的形式，诸如且不限于：胶囊剂，包括明胶胶囊剂、软胶囊剂、硬胶囊剂；片剂，包括糖衣片剂、片剂、丸剂、粉末剂、颗粒剂、口香糖；溶液；悬浮液；乳剂；糖浆剂；酏剂；多糖膜；胶冻或明胶；以及本领域的技术人员已知的任何其他形式。在特定实施方案中，本发明的化合物可以掺入到任何形式的功能性食品或强化食品中，诸如且不限于，膳食条或者压缩或非压缩粉末。这些粉末可以溶解于水、苏打水、乳制品、大豆衍生物中或可掺入到饮食棒中。本发明的提取物和组合物可以与用于口服组合物或食品补充剂的常见赋形剂和佐剂一起调配，诸如且不限于，在食品工业中常见的脂肪组分、水性组分、湿润剂、防腐剂、增稠剂、调味剂、香味剂、抗氧化剂以及着色剂。

在本发明中描述的化妆品组合物中含有的化妆品上或药学上可接受的佐剂中是化妆品或药物组合物中通常使用的额外的成分，例如且不限于抗皱剂、肉毒杆菌样剂和/或抗衰老剂；(ii)紧致剂、皮肤弹性剂和/或重构剂；保湿剂；(iv)抗光衰老剂和/或蓝光防护剂；DNA保护剂、DNA修复剂和/或干细胞保护剂；自由基清除剂和/或抗糖化剂、解毒剂、抗氧化剂和/或防污染剂；止汗剂；黑色素合成刺激或抑制剂；美白剂或脱色剂；促色素剂；仿晒黑剂；脂解剂或刺激脂解的药剂、生脂剂等。另外的示例可以在CTFA InternationalCosmetic Ingredient Dictionary&Handbook，第12版(2008)中找到。

在一个实施方案中，本发明提供了一种化妆品组合物，其包含本发明的提取物(例如呈水性植物提取物、纯化的水性植物提取物或储备溶液的形式)和化妆品上有效量的选自由以下项组成的组的成分：(i)抗皱剂、肉毒杆菌样试剂和/或抗衰老剂；(ii)紧致剂、皮肤弹性剂和/或重构剂；(iii)保湿剂；(iv)抗光衰老剂和/或蓝光防护剂；(v)DNA保护剂、DNA修复剂和/或干细胞保护剂；(vi)自由基清除剂和/或抗糖化剂、解毒剂、抗氧化剂和/或防污染剂；和/或它们的组合。

在特定实施方案中，抗皱剂、肉毒杆菌样剂和/或抗衰老剂选自由以下项组成的组：[INCI：旱金莲(Tropaeolum majus)花/叶/茎提取物]或Eclaline^TM。来自SILAB的[INCI：水解羽扇豆蛋白辛烯基琥珀酸酯]；司达玛(Sederma)/禾大(Croda)销售的[INCI：棕榈酰基五肽-4]、/>[INCI：棕榈酰基四肽-7、棕榈酰基寡肽]、/>Synthe’6[INCI：甘油、水、羟丙基环糊精、棕榈酰基三肽-38]、Morphomics^TM[INCI：戊二醇、辛甘醇]、Essenskin^TM[INCI：羟基蛋氨酸钙]、Renovage[INCI：替普瑞酮(Teprenone)]、/>[INCI：棕榈酰基寡肽]、Calmosensine[INCI：丁二醇、乙酰基二肽-1鲸蜡基酯]、Volulip[INCI：鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯、山梨坦异硬脂酸酯、毛马齿苋提取物、蔗糖-椰油酸酯、棕榈酰基三肽-38]、Subliskin[INCI：苜蓿中华根瘤菌发酵物、鲸蜡基羟乙基纤维素、卵磷脂]、生物肽CL[INCI：棕榈酰基寡肽]、生物肽EL[INCI：棕榈酰基寡肽]、丽晶肽(Rigin)[INCI：棕榈酰基四肽-3]、Biobustyl[INCI：甘油聚甲基丙烯酸酯、拉恩氏菌/大豆蛋白发酵物、棕榈酰基寡肽]、Dynalift[INCI：聚磺苯乙烯钠、高粱茎汁、甘油]、Idealift[INCI：乙酰基二肽-1鲸蜡基酯]、豨莶[INCI：豨莶属提取物]、Ovaliss[INCI：椰油基葡糖苷、辛甘醇、醇、海罂粟碱]、Juvinity^TM[INCI：香叶基香叶醇异丙醇]、Prolevis[INCI：水解植物蛋白]、Idealift^TM[INCI：羟乙基纤维素、乙酰基二肽-1鲸蜡基酯]、Beautifeye^TM[INCI：合欢树皮提取物、豨莶苷]、Chromocare^TM[INCI：豨莶属提取物、冬凌草提取物]或Resistem^TM[INCI提议的：心叶球花发酵物]。Pentapharm/DSM销售的/>[INCI：五肽-3]、/>[INCI：二肽二氨基丁酰苄基酰胺二乙酸盐]、/>-Coll[INCI：棕榈酰三肽-5]、Phytaluronate[INCI：长角豆(Ceratonia Siliqua)(角豆)胶]、/>[INCI：野大豆(Glycine soja)(大豆)蛋白、氧化还原酶]、Pepha-Nutrix[INCI：天然营养因子]、Pepha-Tight[INCI：藻提取物、普鲁兰]、Pentacare-NA[INCI：水解小麦谷蛋白、长角豆(Ceratonia Siliqua)胶]、/>-Tacks[INCI：甘油、棕榈酰二肽-5二氨基丁酰羟基苏氨酸、棕榈酰二肽-6二氨基羟基丁酸酯]、BeauActive MTP[INCI：水解乳蛋白]、/>-TC[INCI：十四烷基氨基丁酰缬氨酰胺基丁酸脲三氟乙酸盐、棕榈酰三肽-5、棕榈酰二肽-5二氨基丁酰羟基苏氨酸]、/>-Hycan[INCI：十四烷基氨基丁酰缬氨酰胺基丁酸脲三氟乙酸盐]、/>-Glycan[INCI：十四烷基氨基丁酰缬氨酰胺基丁酸脲三氟乙酸盐]、Regu-Age[INCI：水解米糠蛋白、氧化还原酶、野大豆(Glycine Soja)蛋白]、Pepha-Timp[INCI：人寡肽-20]、Pepha-Age[INCI：盐生杜氏藻(Dunaliella Salina)提取物]、Colhibin[INCI：水解大米蛋白]、Elhibin[INCI：野大豆(Glycine Soja)蛋白、椰油酰两性基二乙酸二钠]或All-Q^TMPlus[INCI：泛醌、生育酚乙酸酯]；Laboratoires Sérobiologiques/科宁(Cognis)/巴斯夫(BASF)销售的Myoxinol^TM[INCI：水解咖啡黄葵(Hibiscus esculentus)提取物]、Myoxinol^TMLS 9736[INCI：水解咖啡黄葵(Hibiscus esculentus)提取物、糊精]、Syniorage^TM[INCI：乙酰基四肽-11]、Dermican^TM[INCI：乙酰基四肽-9]、DN-/>LS[INCI：翅荚决明(Cassia alata)叶提取物]、Hyalufix GL[INCI：大高良姜(Alpinia Galanga)叶提取物]、Neurobiox[INCI：欧蓍草(Achillea Millefolium)提取物,]、Deliner[INCI：玉蜀黍(Zea Mays)(玉米)仁提取物]、Lys'lastine V[INCI：黄花前胡(Peucedanum Graveolens)(莳萝)提取物]、Extracellium[INCI：水解马铃薯蛋白]、Proteasyl TP LS 8657[INCI：豌豆(Pisum Sativum)提取物]、Flavagrum PEG[INCI：PEG-6异硬脂酸酯、橙皮素月桂酸酯]、Micromerol[INCI：苹果(PyrusMalus)果实提取物]、Extracellium[INCI：水解马铃薯蛋白]、Marine Filling Spheres[INCI：季戊四醇四异硬脂酸酯、二甲基甲硅烷基化硅石、硫酸软骨素钠、去端肽胶原]、Triactigen[INCI：甘露醇、环糊精、酵母提取物、琥珀酸二钠]、Eterniskin[INCI：灰树花(Grifola Frondosa)子实体提取物、麦芽糊精]、Ascotide[INCI：抗坏血酸磷酸酯琥珀酰五肽-12]、Hyalurosmooth[INCI：狭叶番泻(Cassia Angustifolia)籽多糖]、Indinyl CA[INCI：狭叶番泻(Cassia Angustifolia)籽多糖]、Arganyl[INCI：刺阿干树(ArganiaSpinosa)叶提取物]、Sphingoceryl Veg[INCI：植物神经酰胺]、Vit-A-Like[INCI：乌头叶豇豆(Vigna Acontifolia)籽提取物]、Peptiskin[INCI：精氨酸/赖氨酸多肽]、Prodejine[INCI：甘露醇、环糊精、酵母提取物、琥珀酸二钠]、Aqu'activ[INCI：二十二醇、甘油油酸酯、椰油酰胺MIPA、柠檬酸钙]、Elestan[INCI：甘油、人心果(Manilkara)叶提取物]、Hibiscin HP[INCI：咖啡黄葵(Hibiscus Esculentus)籽提取物]、/>18[INCI：非洲楝(Khaya Senegalensis)树皮]、Collrepair^TMDG[INCI：己二醇、烟酸]或Litchiderm[INCI：荔枝(Litchi Chinensis)果皮提取物]；/>[INCI：乙酰基六肽-8]、SNAP-7[INCI：乙酰基七肽-4]、SNAP-8[INCI：乙酰基八肽-3]、/>[INCI：五肽-18]、/>[INCI：乙酰基六肽-30]、/>[INCI：水解小麦蛋白、水解大豆蛋白、三肽-1]、[INCI：二氨基丙酰三肽-33]、/>[INCI：三肽-10瓜氨酸]、[INCI：三肽-9瓜氨酸]、/>[INCI：假交替单胞菌(Pseudoalteromonas)发酵产物提取物、水解小麦蛋白、水解大豆蛋白、三肽-10瓜氨酸、三肽-1]、/>[INCI：乙酰基四肽-5]、Peptide AC29[INCI：乙酰基三肽-30瓜氨酸]、/>[INCI：乙酰基精氨酰色氨酰二苯基甘氨酸]、/>[INCI：乙酰基四肽-22]、Lipochroman^TM[INCI：二甲基甲氧基苯并二氢吡喃醇]、/>[INCI：二甲基甲氧基苯并二氢吡喃棕榈酸酯]、/>[INCI：假交替单胞菌(Pseudoalteromonas)发酵产物提取物]、/>[INCI：赖氨酸HCl、卵磷脂、三肽-9瓜氨酸]、Vilastene^TM[INCI：赖氨酸HCl、卵磷脂、三肽-10瓜氨酸]、/>[INCI：假交替单胞菌(Pseudoalteromonas)发酵产物提取物]、Hyanify^TM[INCI：糖类同分异构体]、[INCI：乙酰基六肽-37]、/>[INCI：大豆(野大豆(Glycine Soja))油、倍半油酸山梨坦、异十六烷、透明质酸钠、月桂基二甲基铵羟丙基水解大豆蛋白、乙酰基六肽-39]、/>[INCI：乙酰基六肽-38]、Delisens^TM[INCI：乙酰基六肽-46]、Telangyn^TM[INCI：乙酰基四肽-40]、Reproage^TM肽[INCI：乙酰基六肽-8]、Cellynkage^TM海洋成分[INCI：糖类同分异构体]、Eyedeline^TM海洋成分[INCI：浮游生物提取物]、Uplevity^TM[INCI：乙酰基四肽-2]、Seacode^TM海洋成分[INCI：假交替单胞菌(Pseudoalteromonas)发酵产物提取物]或/>肽溶液[INCI：六肽-10]；利普泰(Lipotec)/路博润(Lubrizol)销售的/>Amplified[INCI：乙酰基六肽-8]、Dawnergy^TM[INCI：九肽-1]；Lipotrue销售的Sirtalice^TM[INCI：芽孢杆菌(Bacillus)发酵产物]、Epitensive^TM[INCI：本氏烟(Nicotiana Benthamiana)六肽-40SH-寡肽-1]、Scelleye^TM[INCI：本氏烟(Nicotiana Benthamiana)SH-寡肽-2]、Seadermium[INCI：含水、甘油、芽孢杆菌(Bacillus)发酵产物]、Pauseile[INCI：含水、甘油、芽孢杆菌(Bacillus)发酵产物]或Neoclair pro[INCI：含水、甘油、辛甘醇、乙酰基四肽-2]；温森斯(Vincience)/ISP/亚什兰(Ashland)销售的/>IS[INCI：六肽-9]、Laminixyl IS^TM[INCI：七肽]、Orsirtine^TMGL[INCI：稻(Oryza sativa)(大米)提取物]、D’Orientine^TMIS[INCI：海枣(Phoenix dactylifera)(椰枣)籽提取物]、Phytoquintescine^TM[INCI：单粒小麦(一粒小麦(Triticum monococcum))提取物]、Quintescine^TMIS[INCI：二肽-4]、Peptide Vinci 01[INCI：十五肽-1]、Peptide Vinci 02^TM[INCI：六肽-3]、Aquarize IS^TM[INCI：水解大米提取物]、Lanablue[INCI：藻提取物]、Ederline^TM[INCI：苹果(Pyrus Malus)(苹果)籽提取物]、Dynachondrine^TMISR[INCI：水解大豆蛋白]、Prolixir S20^TM[INCI：二聚体三肽-43]、Phytocohesine^TMPSP[INCI：β-谷甾醇硫酸酯钠、β-谷甾醇]、Perenityl^TMIS[INCI：西洋梨(Pyrus Communis)(梨)籽提取物]、Caspaline 14^TM[INCI：六肽-42]、Peptide Q10^TM[INCI：五肽-34三氟乙酸盐]、Survixyl IS^TM[INCI：五肽-31]、ChroNOgen^TM[INCI：四肽-26]、Elixiance[INCI：柔毛肖乳香(Schinus Molle)提取物]、Harmoniance^TM[INCI：莲(NelumboNucifera)花提取物]、Serenityl[INCI：南美牛奶藤(Marsdenia Condurango)树皮提取物]、Natriance Wrinkle-less[INCI：水解玉米蛋白]、Phytoneomatrix[INCI：水解大豆提取物]、Prolixir ICE[INCI：水解大米蛋白]、PhytoRNx Baobab^TM[INCI：水解猴面包树(Adansonia Digitata)提取物]、Natriance Renovate Extract[INCI：水解亚麻籽提取物]、Natriance Self-Hydrate Extract[INCI：豌豆(Pisum Sativum)提取物]、Actopontine YST[INCI：水解酵母蛋白]或Telosense^TM[提议的INCI：水解大豆蛋白、水解酵母蛋白]；Infinitec Activos销售的BONT-L-Peptide[INCI：棕榈酰六肽-19]、TIMPPeptide[INCI：乙酰基六肽-20]、ECM Moduline[INCI：棕榈酰三肽-28]、Renaissance[INCI：水解小麦蛋白、棕榈酰十肽-21、十肽-22、寡肽-78、棕榈酰九肽-14锌]或X50Antiaging[INCI：乳酸/乙醇酸共聚物、聚乙烯醇、棕榈酰七肽-14铜、七肽-15棕榈酸酯]；Coletica/恩格尔哈德(Engelhard)/巴斯夫(BASF)销售的EquiStat[INCI：苹果(Pyrusmalus)果实提取物、野大豆(Glycine soja)籽提取物]、Juvenesce[INCI：乙氧基二甘醇和辛酸甘油三酯、视黄醇、熊果酸、植物甲萘醌、伊洛马司他]、Ursolisome[INCI：卵磷脂、熊果酸、去端肽胶原、黄原胶、硫酸软骨素钠]、Basaline[INCI：水解麦芽提取物]、Phytokine[INCI：水解大豆蛋白]；米百乐生化公司(Mibelle Biochemistr)销售的Ameliox[INCI：肌肽、生育酚、水飞蓟(Silybum marianum)果提取物]或PhytoCellTec Malus Domestica[INCI：苹果(Malus domestica)果实细胞培养物]、Lipobelle Soyaglicane[INCI：大豆异黄酮]、RoyalEpigen P5[INCI：牛油果(Butyrospermum Parkii)油、氢化卵磷脂、麦芽糊精、五肽-48、苯乙醇、乙基己基甘油、甘油、含水]或DermCom[INCI：黄金番红花(CrocusChrysanthus)鳞茎提取物、阿拉伯胶树(Acacia Senegal)胶、含水/水]；Active Organics/Arch销售的ActiMatrix[INCI：基于肽的蘑菇提取物]、Peptamide 6[INCI：六肽-11]；以及它们的组合。

在另一个实施方案中，紧致剂、皮肤弹性剂和/或重构剂选自由以下项组成的组：巴斯夫(BASF)销售的Argassential[INCI：C10-16烷基糖苷、二辛基醚、甘油]或ReplexiumBC[INCI：异山梨醇二甲醚、聚山梨酸酯20、含水、乙酰基四肽-11、乙酰基四肽-9]；司达玛(Sederma)/禾大(Croda)销售的Prolevis[INCI：水解植物蛋白]或Poretect[INCI：辛酸/癸酸甘油三酯、山梨坦三油酸酯、芹菜(Apium Graveolens)籽提取物、亚麻(LinumUsitatissimum)籽提取物]；利普泰(Lipotec)/路博润(Lubrizol)销售的Actifirm UltraAdvanced植物成分[INCI：积雪草(Centella Asiatica)提取物、迷迭香(RosmarinusOfficinalis)叶提取物、二丙二醇、醇、狭叶松果菊(Echinacea Angustifolia)叶提取物]或Actifcol Advanced植物成分[INCI：含水、甘油、柠檬酸钠、香菇(Lentinus Edodes)提取物、山梨酸钾、苯甲酸钠、植酸]；米百乐(Mibelle)销售的Densorphin^TM[INCI：穗花牡荆(Vitex Agnus Castus)提取物、含水、麦芽糊精]或PhytoCellTec^TM [INCI：益寿糖、含水、阿尔卑斯石竹珍珠花(Saponaria Pumila)愈伤组织提取物、卵磷脂]；以及它们的组合。

在另一个实施方案中，保湿剂选自由以下项组成的组：英菲泰克(Infinitec)销售的qua Shuttle[INCI：山梨醇、掌状海带(Laminaria Digitata)提取物、硅藻土]；温森斯(Vincience)/ISP/亚什兰(Ashland)销售的Aqua-Osmoline^TM[INCI：长角豆(CeratoniaSiliqua)(角豆)籽提取物]；卢卡斯梅耶化妆品公司(Lucas Meyer Cosmetics)/Unipex销售的Hydralphatine^TMAsia[INCI：氢化淀粉水解物、泛醇、龙头竹笋(Bambusa VulgarisShoot)提取物、莲(Nelumbo Nucifera)花提取物、白睡莲(Nymphaea Alba)根提取物]或Hydraporine^TM[INCI：甜菜碱、氢化卵磷脂、蜂蜜、果胶]；L.Serobiologiques/科宁(Cognis)/巴斯夫(BASF)销售的PatcH2O^TM[INCI：海藻糖、脲、丝氨酸、甘油聚丙烯酸酯、藻胶、透明质酸钠、普鲁兰]、Aqu’activ^TM[INCI：二十二醇、甘油油酸酯、椰油酰胺MIPA]、[INCI：辛基十二烷醇、野生芒果(Irvingia Gabonensis)果仁脂、氢化椰油甘油混合酯]、/>)[INCI：辛基十二烷醇、花生醇丙酸酯、生育酚乙酸酯、棕榈酸视黄酯、亚油酸乙酯、亚麻酸乙酯]或/>SU[INCI：山梨醇、藻提取物、皱波角叉菜(Chrondrus Crispus)(角叉菜胶)、墨角藻(Fucus Vesiculosus)提取物、藻胶]；米百乐(Mibelle)销售的雪藻粉(Snow Algae Powder)[INCI：雪藻(Coenochloris Signiensis)提取物]；Pentapharm/DSM销售的Hyasol BT[INCI：透明质酸钠]、Syn-Up^TM[INCI：苄基磺酰基D-丝氨酰高苯丙氨酸脒基苯甲酰胺乙酸盐]或/>[INCI：糖类同分异构体]；司达玛(Sederma)/禾大(Croda)销售的Aqualance^TM[INCI：赤藓糖醇、龙虾肌碱盐酸盐]、Hydraprotectol^TM[INCI：甘油聚甲基丙烯酸酯、紫胶桐酸、酵母提取物(Faex)、糖蛋白]、Moist 24^TM[INCI：白茅(Imperata Cylindrica)根提取物]、Optim Hyal^TM[INCI：水解酵母提取物、鲸蜡基羟乙基纤维素、聚葡糖醛酸]、/>4[INCI：甘油、丙烯酸酯/C10-30烷基丙烯酸酯交联聚合物]或Revidrate^TM[INCI：棕榈酸乙基己酯、油酸山梨坦、月桂酸山梨坦、肉豆蔻基苹果酸酯膦酸]；利普泰(Lipotec)/路博润(Lubrizol)销售的/>分子膜[INCI：甘油、假交替单胞菌(Pseudoalteromonas)发酵产物提取物、黄原胶、脯氨酸、丙氨酸、丝氨酸、乙基己基甘油、辛甘醇]或Actizyme GL advanced植物成分[INCI：甘油、米赫毛霉(Mucor miehei)提取物、含水、柠檬酸钠、山梨酸钾、苯甲酸钠、植酸]；以及它们的组合。

在另一个实施方案中，抗光衰老剂和/或蓝光防护剂选自由以下项组成的组：碧高科(Greenaltech)销售的Algaktiv Genofix CPD[INCI：浮游生物提取物、含水、卵磷脂]；亚什兰(Ashland)销售的Blumilight^TMBiofunctional[提议的INCI：水/含水(和)丁二醇(和)可可(Theobroma Cacao)(可可树)籽提取物]；巴斯夫(BASF)销售的Lys’Sun[INCI：北美金缕梅(Hamamelis Virginiana)叶提取物、含水、戊二醇、辛甘醇、黄原胶]；意迪那(Indena)销售的Vitachelox[INCI：葡萄(Vitis Vinifera)籽提取物、茶(Camellia Sinensis)叶提取物、夏栎(Quercus Robur)木提取物]；Freshine Bio-technology销售的L-VCG[INCI：抗坏血酸葡糖苷]；利普泰/路博润销售的蓝色成分[INCI：甘油、含水、水解豌豆蛋白、葡萄糖、氯化钠]；Naolys公司销售的Lightwaves Defense[JS+M][INCI：茉莉(Jasminum Sambac)叶细胞提取物]；Oleos-Hallstar销售的Blue Oleoactif[INCI：野大豆(Glycine Soja)油、聚甘油-3二异硬脂酸酯、稻(Oryza Sativa)胚芽提取物、稻(OryzaSativa)提取物]；司达玛(Sederma)销售的Majestem[INCI：甘油、高山火绒草(Leontopodium Alpinum)愈伤组织提取物、黄原胶]或Senestem[INCI：甘油、长叶车前(Plantago Lanceolata)叶提取物、黄原胶]；素莱碧雅(Solabia)销售的Blueshield[INCI：甘油、辣椒(Capsicum Annuum)果提取物、黄原胶]；以及它们的组合。

在另一个实施方案中，DNA保护剂、DNA修复剂和/或干细胞保护剂选自由以下项组成的组：温森斯(Vincience)/ISP/亚什兰(Ashland)销售的GP4G SP[INCI：含水、甘油、卤虫(Aretmia)提取物]、Heliostatine[INCI：含水、甘油、豌豆(Pisum Sativum)提取物]、Orsirtine[INCI：含水、甘油、稻(Oryza Sativa)提取物]、Chronogen[INCI：含水、丁二醇、四肽(提议的INCI)]、Survixyl IS[INCI：水、丁二醇、五肽-31]和Chrondricare[INCI：含水、丁二醇五肽-28]；Atrium Innovations/卢卡斯梅耶化妆品公司(Lucas MeyerCosmetics)销售的[INCI：甘油、含水、交替单胞菌(Alteromonas)发酵产物提取物、金黄洋甘菊(Chysanthellumindicum)提取物]或Melinoil[INCI：棕榈酸异丙酯、卵磷脂、含水、乙酰基六肽-1]；CLR销售的Repair Complex[INCI：二裂酵母(Bifida)发酵产物溶胞物]；康缔肤(Codif)销售的Phycojuvenine[INCI：掌状海带(Laminaria Digitata)]；Induchem销售的Unirepair T-43[INCI：丁二醇、乙酰酪氨酸、脯氨酸、水解植物蛋白、三磷酸腺苷]；德之馨(Symrise)销售的Dragosine[INCI：肌肽]；LaboratoriesSerobiologiques/科宁(Cognis)/巴斯夫(BASF)销售的DN-Age[INCI：翅荚决明(CassiaAlata)叶提取物]；米百乐生化公司(Mibelle Biochemistry)销售的Helioguard[INCI：包封到脂质体中的脐形紫菜(Porphyra Umbilicalis)]、PhytoCellTec Malus Domestica[INCI：PhytoCellTec Malus Domestica]或PhytoCellTec Argan[INCI：刺阿干树(ArganiaSpinosa)芽细胞提取物、益寿糖、卵磷脂、苯甲酸钠、含水]；Pentapharm/DSM销售的Pepha-Protect[INCI：西瓜提取物]；锐昂(Rahn)销售的Celligent[INCI：向日葵(HelianthusAnnuus)籽油、阿魏酸乙酯、聚甘油-5三油酸酯、迷迭香(Rosmarinus Officinalis)叶提取物、含水、尿苷磷酸二钠]或Defensil[INCI：辛基十二烷醇、车前叶蓝蓟(EchiumPlantagineum)籽油、倒地铃(Cardiospermum Halicacabum)提取物、向日葵(HelianthusAnnuus)籽油不皂化物]；司达玛(Sederma)/禾大(Croda)销售的Venuceane[INCI：嗜热栖热菌(Thermus Thermophilus)发酵产物、甘油]、UV-Soft[INCI：酵母提取物]、Renovage[INCI：辛酸/癸酸甘油三酯、替普瑞酮]、Juvinity[INCI：辛酸/癸酸甘油三酯、香叶酰香叶酰丙醇(所提议)]、Phytessence Holyherb[INCI：丁二醇、北美圣草(EriodictyonCalifornicum)(圣草)花/叶/茎提取物]或Resistem[INCI：甘油、心叶球花(GlobulariaCordifolia)发酵产物]；米百乐(Mibelle)销售的Infraguard[INCI：刺云实果荚提取物、丙二醇、含水、向日葵(Helianthus Annuus)芽提取物、苯甲酸钠、苯氧乙醇]；茜莱博(Silab)销售的Heliomoduline[INCI：棉籽中的低分子量肽]或Stem-C-Guard[水解豌豆]；以及它们的组合。

在另一个实施方案中，反应性羰基物质清除剂、自由基清除剂和/或抗糖化剂、解毒剂、抗氧化剂和/或防污染剂选自例如且不限于由以下组成的组：肌肽及其衍生物；温森斯(Vincience)/ISP/亚什兰(Ashland)销售的GHK[INCI：三肽-1]及其盐和/或衍生物或Quintescine IS[INCI：二肽-4]；Pentapharm/DSM销售的Preregen[INCI：野大豆(GlycineSoja)(大豆)蛋白、氧化还原酶]、Edelweiss GC[INCI：高山火绒草(LeontopodiumAlpinum)提取物]、Lipogard[INCI：角鲨烷、泛醌]、Nectapure[INCI：大叶醉鱼草(BuddlejaDavidii)提取物、百里香(Thymus Vulgaris)提取物]、Alpaflor Nectapure[INCI：大叶醉鱼草(Buddleja Davidii)提取物、百里香(Thymus Vulgaris)提取物、甘油、水]或Dismutin-BT[INCI：来自酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的天然酵母菌株的高纯SOD]；利普泰(Lipotec)/路博润(Lubrizol)销售的[INCI：二氨基丙酰三肽-33]、/>[INCI：水解小麦蛋白、水解大豆蛋白、三肽1]、Lipochroman^TM[INCI：二甲基甲氧基苯并二氢吡喃醇]、/>[INCI：乙酰基四肽-22]、Pollushield^TM功能成分[INCI：己二酸二异丙酯、卵磷脂、丙烯酸/丙烯酰胺甲基丙烷磺酸共聚物、二甲基甲氧基苯并二氢吡喃醇、黄原胶]或/>[INCI：乙酰基二肽-3氨基己酸酯]；Laboratoires Sérobiologiques/科宁(Cognis)/巴斯夫(BASF)销售的unactyl[INCI：甘露醇、豌豆(Pisum Sativum)提取物、组氨酸盐酸盐、精氨酸、环糊精、糊精、酵母提取物、乙酰酪氨酸、盐酸吡哆醇、非洲楝(Khaya Senegalensis)树皮提取物、烟酰胺、腺嘌呤二核苷酸、琥珀酸二钠、天冬氨酸]、Imidinyl[INCI：酸豆(Tamarindus Indica)籽多糖]、Phystrogene[INCI：丁二醇、欧锦葵(Malva Sylvestris)(锦葵)提取物、黄原胶]或Purisoft[INCI：翼籽辣木(Moringa Pterogysperma)籽提取物]；米百乐生化公司(Mibelle Biochemistry)销售的AquaCacteen[INCI：甘油、仙桃仙人掌(Opuntia Ficus Indica)茎提取物、苯氧乙醇、含水]、Trimoist(KMF)[INCI：硬脂酰乳酸钠、鲸蜡醇、Olus植物油、生育酚乙酸酯、甘油、野大豆(Glycine soja)甾醇、乳酸钠、羧甲基β-葡聚糖钠、肌肽、乳酸]、MelanoBronze[INCI：穗花牡荆(Vitex Agnus Castus)提取物(圣洁莓(Monk's pepper berries)提取物(植物内啡肽))、乙酰酪氨酸]、CM-Glucan[INCI：羧甲基β-葡聚糖钠、苯氧乙醇、SunActin[INCI：向日葵(Helianthus Annuus)(葵花)芽提取物、生育酚、甘油、卵磷脂、苯氧乙醇、含水]、GSP-Tskin[INCI：甘油、醇、含水、PEG-40氢化蓖麻油、欧亚种葡萄(Vitis Vinifera)(葡萄)籽提取物]或Detoxophane[INCI：家独行菜(Lepidium Sativum)芽提取物、卵磷脂、苯氧乙醇、甘油、水]；司达玛(Sederma)/禾大(Croda)销售的Bacocalmine[INCI：PEG-8、假马齿苋(Bacopa Monniera)提取物、水(含水)、羟乙基纤维素]、Kombuchka[INCI：酵母(Saccharomyces)/木醋杆菌(Xylinum)红茶发酵产物、甘油、羟乙基纤维素]、Citystem[INCI：甘油、欧夏至草(Marrubium Vulgare)提取物]或Prodizia[INCI：合欢(AlbiziaJulibrissin)提取物、甘油]；赛比克(Seppic)销售的Extramel C[INCI：羟丙基三甲基氯化铵麦芽糊精交联聚合物、甜瓜(Cucumis Melo)(香瓜)果提取物]；茜莱博(Silab)销售的Defensine[INCI：普通小麦(Triticum Vulgare)胚芽提取物]、/>[INCI：欧蒲公英(Taraxacum officinale)(蒲公英)提取物]、/>[INCI：水、丁二醇、牛油果(Butyrospermum parkii)(乳木果油)籽饼提取物]或Antiglyskin[INCI：含水、向日葵(Helianthus Annuus)籽提取物]；以及它们的组合。

本发明的化妆品组合物还可以包括来自Silab的旱金莲[INCI:旱金莲花/叶/茎提取物]。

本发明的化妆品组合物还可以包括gamethophyte提取物。非限制性示例是裙带菜提取物，诸如来自赛比克(Seppic)的Emphemer^TM。

本发明的化妆品组合物还可以包括Lucas Meyer Cosmetics的Adipofill’in^TM[INCI名称：含水(和)丙二醇(和)鸟氨酸(和)磷脂(和)糖脂]。

本发明的组合物可以用于标题“应用”下讨论的任何应用或用途。

应用

本发明基于以下发现：本文所述的植物提取物(水性植物提取物和纯化的水性植物提取物)和组合物可用于皮肤、毛发、指甲和/或粘膜的美容性、非治疗性处理。具体地，它们可用于皮肤的美容性、非治疗性处理和/或护理。在本发明的上下文中，皮肤包括整个身体的皮肤，包括面部的皮肤(包括眼睛周围的皮肤)、颈圈、颈部、胸部、手臂、手、腿、脚、大腿、髋部、臀部、胃部和躯干，以及头皮(即，在前面以人脸为边界，在侧面和后面以颈部为边界的区域)。

已经发现，有利地，本发明的植物提取物能够调节人表皮角化细胞中缺氧诱导因子(HIF)的表达。特别地，植物提取物增加HIF-1α的表达使其超过标准，从而引起HIF-1α的“过表达”。HIF-1α调节血管舒张剂信号分子(诸如一氧化氮)的表达。因此，在一个实施方案中，本发明的植物提取物增加皮肤中的HIF-1α表达。此外，已经发现，本发明的植物提取物能够下调人表皮角化细胞中HIF-2α的表达。因此，在一个实施方案中，本发明的植物提取物还可以降低或减少皮肤中的HIF-2α表达，即使HIF-2α的表达减少到超出正常水平或“下调”HIF-2α。HIF-2α控制精氨酸酶表达，已知该精氨酸酶与HIF-1α竞争底物L-精氨酸的使用。在一个实施方案中，本发明的植物提取物增加皮肤中的HIF-1α表达并减少HIF-2α表达。本发明的植物提取物可以同时增加皮肤中的HIF-1α表达和减少HIF-2α表达。

令人惊讶的是，还发现本发明的植物提取物能够降低或抑制人表皮角化细胞中L-精氨酸酶的活性。已知L-精氨酸是精氨酸酶和一氧化氮合酶的共同底物。不受理论的约束，据信L-精氨酸酶活性的降低可增加L-精氨酸用于产生血管舒张信号传导分子(诸如一氧化氮)的生物利用度。通过增加血管舒张信号传导分子，流向皮肤的血液可能增加，从而导致氧向皮肤的转运增加。因此，在一个实施方案中，植物提取物抑制皮肤中的L-精氨酸酶活性。因此，本发明的提取物能够增加皮肤或皮肤氧合；和/或增加皮肤微循环和/或血管形成。

本发明的植物提取物可用于皮肤的美容性、非治疗性处理或护理，其中皮肤的美容性、非治疗性处理或护理是改善或增加皮肤氧合。

本发明的植物提取物可用于皮肤的美容性、非治疗性处理或护理，其中皮肤的美容性、非治疗性处理或护理是改善和/或增加皮肤微循环和/或血管形成。

皮肤血管形成的增加可增加皮肤红润度。皮肤红润度(通常也称为自然红晕)的增加是皮肤的着色或微红肤色的增加，这增加了表观健康和吸引力。

本发明的植物提取物可用于皮肤的美容性、非治疗性处理或护理，其中皮肤的美容性、非治疗性处理或护理是改善和/或增加皮肤红润度(自然红晕)。

本发明的植物提取物可用于皮肤的美容性、非治疗性处理或护理，其中皮肤的美容性、非治疗性处理或护理是改善或增加皮肤光泽度和/或亮度。

本发明的植物提取物可用于皮肤的美容性、非治疗性处理或护理，其中皮肤的美容性、非治疗性处理或护理是减少或预防皮肤衰老的症状。特别地，皮肤衰老的症状包括出现皮肤皱纹、细纹和皮肤微松弛。

本发明的植物提取物可用于皮肤的美容性、非治疗性处理或护理，其中皮肤的美容性、非治疗性处理或护理是减少或降低皮肤粗糙度；和/或改善或增加皮肤光滑度。

有利地，本发明的植物提取物不仅对皮肤的美容性、非治疗性处理或护理发挥改善的有益效果，而且该处理还可以没有副作用，诸如与过氧亚硝酸盐产生相关的那些副作用。过氧亚硝酸盐是具有高血管收缩和细胞毒性作用的反应性分子。通过避免过氧亚硝酸盐产生，本发明的提取物能够减少不期望的副作用，诸如血管收缩(其可以减少一氧化氮的血管舒张作用)和表皮细胞中的细胞毒性作用。

在一个方面，本发明提供了本发明的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物或包含本发明的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物的化妆品组合物用于以下方面的用途：改善或增加皮肤氧合；改善和/或增加皮肤微循环或血管形成；改善或增加皮肤红润度(自然红晕)；减少和/或预防皮肤衰老的症状；增加皮肤光滑度；和/或改善或增加皮肤光泽度和/或亮度。

本发明提供了本发明的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物或包含本发明的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物的化妆品组合物用于改善或增加皮肤氧合的用途。

本发明提供了本发明的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物或包含本发明的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物的化妆品组合物用于改善和/或增加皮肤微循环和/或血管形成的用途。

本发明提供了本发明的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物或包含本发明的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物的化妆品组合物用于改善和/或增加皮肤红润度(自然红晕)的用途。

本发明提供了本发明的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物或包含本发明的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物的化妆品组合物用于减少或预防皮肤衰老的症状的用途。

本发明提供了本发明的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物或包含本发明的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物的化妆品组合物用于改善或增加皮肤光泽度和/或亮度的用途。

本发明提供了本发明的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物或包含本发明的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物的化妆品组合物用于减少或降低皮肤粗糙度；和/或改善或增加皮肤光滑度的用途。

在另一个方面，本发明提供了一种处理和/或护理受试者的皮肤的方法，该方法包括向受试者施用本发明的水性植物提取物、本发明的纯化的水性植物提取物或包含本发明的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物的化妆品组合物。特别地，本发明提供了一种对受试者的皮肤进行美容性、非治疗性处理和/或护理的方法，该方法包括向受试者施用化妆品上有效量的本发明的水性植物提取物、本发明的纯化的水性植物提取物或包含本发明的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物的化妆品组合物。该方法可以用于如以上关于本发明的化合物和组合物的应用(用途)所描述的对皮肤进行处理和/或护理。施用可以为局部地或例如，经皮。在本发明的此方面，本发明的植物提取物可以存在于化妆品组合物中，诸如本文所描述的化妆品组合物。在一个实施方案中，该方法涉及使用微针施用化合物或施用组合物。

上述处理方法包括对皮肤进行美容性、非治疗性处理和/或护理，包括：改善或增加皮肤氧合；改善和/或增加皮肤微循环或血管形成；改善或增加皮肤红润度(自然红晕)；减少和/或预防皮肤衰老的症状；增加皮肤光滑度；和/或改善或增加皮肤光泽度和/或亮度。

在另一个方面，本发明提供了用作药物的本发明的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物。特别地，本发明提供了用于治疗或预防疾病或病症的本发明的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物。在另一个方面，本发明提供了本发明的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物在制造治疗或预防疾病或病症的药物中的用途。在另一方面，本发明提供了一种治疗或预防受试者的疾病或病症的方法，该方法包括向受试者施用治疗有效量的本发明的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物或包含本发明的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物的药物组合物。

对于以上描述的本发明的方法，局部或经皮施用可以通过离子电渗、超声促渗、电穿孔、机械压力、渗透压梯度、包扎护理、显微注射、借助于压力的无针注射、通过微电子贴剂、面膜或其任何组合来执行。

对于以上描述的本发明的方法，根据每个受试者的需要，应用或施用频率可能相差很大，其中应用建议为一个月一次至一天十次、优选地一周一次至一天四次、更优选地一周三次至一天两次、甚至更优选地一天一次。

通过以下非限制性实施例进一步描述了本发明。

实施例

实施例1

在160℃下从女贞果实中进行亚临界水提取

女贞果实从中国四川获得。果实呈褐色干燥形式。在提取之前，将原材料粉碎至对应于3mm筛目的平均粒度。将磨碎的果实在室温下储存，直至进一步使用。使用加速溶剂提取器(ASE350，Dionex，USA)并使用以下程序进行亚临界水提取：将7.6g女贞干燥果实和10g硅藻土(ASE prep DE，Dionex)装入100mL不锈钢池中。硅藻土起到分散剂和干燥剂的作用。将该池置于提取器中，并添加水以填充该池，然后在设定为1.38MPa的压力下加热至160℃。提取进行5分钟，并将提取物收集在收集瓶中。再次用水填充该池，并且在相同条件下进行另外2个循环的提取，每个循环5分钟。总提取时间为15分钟(5分钟的3个循环)。然后将该池吹扫10分钟，以获得保留在内部的残余水。将在每个循环中获得的提取物以及残余水一起汇集在同一收集瓶中。所用水的总量为约170g。将水性提取物与100％甘油混合以制备55％甘油溶液(按重量计)。原材料(干燥果实)与55％甘油溶液的比率按重量计为1:49。

实施例2

在160℃下从女贞果实中进行亚临界水提取

如实施例1所述获得水性提取物，不同之处在于5g原材料(即干燥果实)并且所用水的总量为约110g。将100％甘油添加到水性提取物中以制备80％甘油溶液(按重量计)并获得原材料(即干燥果实)与80％甘油溶液的1:100的最终比率。

实施例3

在125℃下从女贞果实中进行亚临界水提取

如实施例1所述获得来自干燥女贞果实的水性提取物，不同之处在于将该池加热至125℃。将获得的水性提取物与100％甘油混合以制备55％甘油溶液，并获得原材料(即干燥果实)与55％甘油溶液的按重量计1:49的比率。

实施例4

用50％甘油(重量/重量)从女贞果实中进行提取

将干燥和磨碎的女贞果实与50％甘油溶液(按重量计)以1:53的比率混合(干燥果实:50％甘油溶液，按重量计)。在搅拌的同时在60℃下进行提取，持续30分钟。随后，将果实和50％甘油溶液混合物在室温下冷却，并用10μm过滤器过滤。

实施例5

用80％甘油(重量/重量)从女贞果实中进行提取

如实施例4所述进行提取，不同之处在于使用80％甘油溶液(按重量计)，并且干燥果实与50％甘油溶液的比率为1:45。

实施例6

用水从女贞果实中进行冷提取

将干燥和磨碎的女贞果实与蒸馏水以1:48的比率混合(干燥果实:水，按重量计)。将混合物在冰箱(4℃)中放置72小时。随后，通过10μm过滤器过滤提取物。

实施例7

从女贞果实中进行乙醇提取

将干燥和磨碎的女贞果实与70％乙醇(重量/重量)以1:141的比率混合(干燥果实:70％乙醇，按重量计)。在搅拌的同时在室温下进行提取，持续7天。通过10μm过滤器过滤提取物。

实施例8

从女贞果实中进行乙醇提取

如实施例7所述进行提取，不同之处在于使用1:50的比率(干燥果实:70％乙醇，按重量计)。

每种提取方法的条件总结如下。

表2：实施例1至8的提取条件

实施例9

酚含量分析

对实施例1和实施例4-8中获得的每种提取物进行总多酚含量(TPC)和LC/MS-MS(液相色谱与串联质谱)分析。通过Folin-Ciocalteu法确定TPC。简言之，将2mL提取物与5mL蒸馏水混合，然后向混合物中添加1mL Folin-Ciocalteu试剂，并将混合物充分混合3分钟。3分钟后，添加5mL 10％碳酸钠溶液，以停止反应。在室温下30分钟后，使用分光光度计测量760nm和850nm处的吸光度。使用没食子酸作为标准以获得校准曲线。

使用LC-MS-MS鉴定更特异性的植物化学物质。将十微升(10μL)提取物与100μL的10mM HCL和890μL超纯水在2mL LC-MS小瓶中混合，将样品稀释100倍。进样体积为2μL。用于该分析的流动相包含0.1％甲酸的乙腈溶液(溶剂A)和0.1％甲酸的超纯水溶液(溶剂B)。在40℃柱温下流速为0.2mL/min。

表3：实施例1、4至8中获得的女贞中的定量生物活性物质。结果以ppm表示。ND＝未 检测到。

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实施例10

确定待测提取物在人表皮角质形成细胞(HEK)中的最大浓度。

培养物中的人表皮角质形成细胞(HEK)随时间的推移不断分裂和增殖。干扰这一过程的化合物降低生长速率，并可引起细胞形态改变。结果，观察到细胞数量的减少，并且HEK培养物的活力降低。

中性红(NR)摄取测定程序是一种基于活细胞掺入和结合NR(一种超活体染料)的能力的细胞活力测定。NR是弱阳离子染料，其通过非离子扩散穿透细胞膜并在溶酶体中进行细胞内累积。细胞表面或敏感溶酶体膜的改变导致溶酶体脆性和逐渐变得不可逆的其他变化。这种变化导致NR的摄取和结合减少。因此，可以在显微镜观察后区分活细胞、受损细胞或死细胞。该测试中的活力表示为当在用测试化合物处理后48小时测量时，活体染料NR摄取的浓度依赖性减少。

将HEK(Tebu-BIO)以2×10⁴个细胞/孔的密度接种在96孔板中的补充有MixC39016-CaCl₂溶液(Promocell)的角质形成细胞生长培养基中。温育24小时后，用含有实施例1、3、4、5或6的提取物的新鲜培养基替换培养基。继续处理48小时，并将未经处理的细胞用作基础对照。处理48小时后，通过用50μg/ml NR(Sigma)溶液在培养基中温育2小时通过NR摄取来确定细胞活力。1小时后，观察到细胞形态。在2小时温育结束时，用解吸溶液(乙醇:水:乙酸50:49:1体积/体积)解吸NR染色。最后，将板振荡10分钟，并使用酶标仪(Clariostar，BMG)在540nm处测量NR提取物的光密度。将每种条件的活力百分比相对于基础条件进行归一化。

以下结果表示的是按基础条件和细胞形态条件归一化的活力百分比。

表4：相对于基础条件的活力百分比的平均值，以及与基础条件细胞相比的HEK细 胞的形态观察(N＝正常的形态，A＝改变的形态)

实施例1和3的提取物(亚临界水提取)并未改变细胞的活力或形态，这表明这些提取物的低毒性。相比之下，实施例4和5的甘油提取物在最高浓度(1％提取物体积/体积)下将细胞活力降低超过10％，并且在0.5％(体积/)或更高的浓度下改变细胞形态。一般而言，活力降低超过10％被认为对于进一步的功效测试是不可接受的。这些结果证明了甘油提取物较高的有害作用，这限制了所述提取物可允许的最大耐受剂量。

实施例11

通过定量聚合酶链反应对HIF同种型基因表达进行体外相对定量

将人表皮角质形成细胞(HEK)(Tebu-BIO)以3×10⁵个细胞/孔的密度接种在12孔板中的补充有Mix C39016-CaCl₂溶液(Promocell)的角质形成细胞生长培养基中。温育24小时后，用含有实施例1、3、4、5或6的提取物的新鲜培养基替换培养基。根据实施例10确定所用提取物的浓度。继续处理48小时，并将用媒介物(即与提取物相同的溶剂)处理的细胞用作基础对照。处理48小时后，使用RNeasy微型试剂盒(Qiagen)按照制造商的方案进行RNA提取。然后定量每个测试项目和媒介物的RNA，并用Nanodrop(Thermo)分析其纯度。然后，用iScript Advanced(BioRad)对2μg每种RNA样品进行反转录，最终体积为20μL。在42℃下，将RNA样品和iScript Advanced在热循环仪(Eppendorf)中温育30分钟，并且在85℃下停止反应5分钟。

在与SYBR Green(BioRad)一起使用的96孔板中，使用SYBR Green Supermix(BioRad)通过在实时PCR热循环仪(BioRad)中进行的定量聚合酶链反应(qPCR)使互补DNA扩增。BioRad CFX96仪器的循环条件为：95℃下持续3分钟，然后将以下过程执行40个循环：在95℃下进行5秒的变性，在60℃下进行30秒的退火和延伸。将甘油醛3-磷酸脱氢酶(GAPDH)和次黄嘌呤磷酸核糖转移酶1(HRPT1)用作内源性对照。使用CFX Manager软件(BioRad)，使用归一化表达(ΔΔ(Ct))方法计算相对于样品HIF1和HIF2(EPAS1)基因和参考基因的表达的倍数变化。

将结果表示为基因表达增加/减少的百分比，其按每次提取的相应媒介物归一化。

表6：相对于每次提取的媒介物，HIF1和HIF2表达的平均值和平均值的标准误差 (SEM)值。使用非配对学生t检验计算统计学显著性。**：p<0.01；n.s.＝不显著，p>0.05

表7：每次提取的HIF1和HIF2相对于媒介物的变化百分比。使用非配对学生t检验 计算统计学显著性。**：p<0.01；n.s.＝不显著，p>0.05

结果表明，在160℃下使用亚临界水进行的女贞提取提供了能够提高HIF1表达水平并同时降低HIF2表达水平的唯一提取物。在测试的任何其他提取物中没有观察到这种效果。此外，在160℃下使用亚临界水提取获得的提取物与所测试的其他植物提取方法相比显示出更好的结果。

实施例12

评价人表皮角质形成细胞中的精氨酸酶活性降低。

L-精氨酸是精氨酸酶和一氧化氮合酶的共同底物。根据它们的平衡，可以观察到不同的效果：一氧化氮合酶将导致血管舒张信号诸如一氧化氮的产生，而精氨酸酶将L-精氨酸代谢为尿素和鸟氨酸。为此，能够降低精氨酸酶活性的化合物将允许L-精氨酸用于产生血管舒张信号传导的更高生物利用度，并且因此将增强皮肤氧合状态。

将年龄为54岁的供体(Tebu Bio)、年龄为36岁的供体(Promocell)和年龄为26岁的供体(Promocell)的人表皮角质形成细胞(HEK)以3×10⁵个细胞/孔的密度接种在6孔板中的补充有Mix C39016-CaCl₂溶液的角质形成细胞生长培养基中(Promocell)。温育24小时后，用含有实施例2的亚临界水提取物或实施例7的乙醇提取物的标量稀释液的新鲜培养基替换培养基。将用S-(2-硼乙基)-L-半胱氨酸盐酸盐(BEC，Sigma)1mM处理的54岁供体的细胞用作精氨酸酶抑制的阳性对照，并将单独用培养基处理的54岁供体、36岁供体和26岁供体的细胞用作不同年龄的精氨酸酶活性的基础对照。继续处理24小时。24小时后，裂解细胞并根据制造商的说明书通过比色精氨酸酶活性试剂盒(Abcam)进行分析。简言之，精氨酸酶与精氨酸反应并经历一系列反应以形成中间体，该中间体与探针化学计量地反应，从而导致有色产物的出现。通过使用设定为570nm的酶标仪(Clariostar，BMG)以动力学模式测量吸光度，持续30分钟。用该讲义获得时间依赖性曲线。用下面的公式计算每个样品在动力学的指数期的精氨酸酶活性：ΔOD＝(OD2–ODBG2)–(OD1–ODBG1)；其中：OD1和OD2分别是在时间T1和T2的样品读数，ODBG1和ODBG2分别是在时间T1和T2的样品背景读数。

使用Pierce BCA蛋白质测定试剂盒(赛默飞世尔科技公司(Thermo Scientific))根据制造商的方案确定每个样品的总蛋白质量。简而言之，在将工作试剂添加到样品和标准液之后，温育样品。之后，用吸收光酶标仪(Clariostar，BMG)在562nm下测量颜色变化。使用总蛋白质量对样品中通过精氨酸酶活性测试获得的精氨酸酶活性水平进行归一化。

将结果表示为按54岁基础条件归一化的精氨酸酶活性的百分比。

表8：相对于54岁细胞的基础条件，精氨酸酶活性的平均值和SEM值。使用非配对学 生t检验计算统计学显著性。*：p<0.05**：p<0.01***：p<0.001****：p<0.0001；ns：统计学上 不显著

条件	平均值	SEM	统计学
				基础条件，54岁	100.00	0.57
基础条件，36岁	78.80	2.91	****
				基础条件，26岁	72.97	1.95	****
BEC 1mM，54岁	70.10	1.91	****
				在0.05％(体积/体积)下实施例2的女贞SWE，54岁	88.37	2.86	****
在0.005％(体积/体积)下实施例2的女贞SWE，54岁	95.98	1.26	**
				在0.062％(体积/体积)下实施例7的女贞EtOH，54岁	112.30	2.62	*
在0.05％(体积/体积)下实施例7的女贞EtOH，54岁	99.95	3.75	ns
				在0.005％(体积/体积)下实施例7的女贞EtOH，54岁	103.70	0.55	ns

结果证实，随着表皮细胞的衰老，精氨酸酶活性增加，因为54岁细胞的精氨酸酶活性高于36岁细胞的精氨酸酶活性。用本发明的来自女贞的亚临界水提取物处理降低了54岁细胞中的精氨酸酶活性，这将使得更多的精氨酸可用作一氧化氮合酶的底物，从而导致一氧化氮的更高产量和更好的皮肤氧合。

也可将SWE提取物的结果表示为当减去26岁基础条件并按54岁基础条件归一化时，精氨酸酶活性的百分比。

表9：减去26岁基础条件并相对于54岁细胞的基础条件归一化的精氨酸酶活性的 平均值和SEM值。使用非配对学生t检验计算统计学显著性。**：p<0.01***：p<0.001****：p< 0.0001

条件	平均值	SEM	统计学
				基础条件，54岁	100.00	2.11
基础条件，36岁	21.48	10.72	****
				基础条件，26岁	0.00
BEC 1mM，54岁	-10.58	7.07	****
				在0.05％(体积/体积)下实施例2的女贞，54岁	56.71	10.54	****
在0.005％(体积/体积)下实施例2的女贞，54岁	84.75	4.66	**

实施例13

对人表皮角质形成细胞中的过氧亚硝酸盐产生进行体外定量。

在氧化应激相关状态期间，ROS(活性氧)在细胞内累积，并且解毒修复机制不足以维持细胞活力。在这些情况下，ROS参与脂质的过氧化、氨基酸氧化和DNA损伤，这三个过程促成衰老。

由于一氧化氮与ROS的反应，血管舒张信号传导分子的产生可导致副产物过氧亚硝酸盐的伴随产生。过氧亚硝酸盐是细胞内有效的血管收缩剂和毒性化合物。过氧亚硝酸盐作为有害分子起作用，其可掩盖皮肤中增强的血管舒张剂信号传导的有益效果。令人期望的是，获得能够改善血管舒张信号传导同时避免过氧亚硝酸盐产生的产品。

将人表皮角质形成细胞(HEK)以3×10⁴个细胞/孔的密度接种在96孔板中的补充有Mix C39016-CaCl₂溶液(Promocell)的角质形成细胞生长培养基中。温育24小时后，用含有实施例2的160℃下的亚临界水提取物的标量稀释液的新鲜培养基替换培养基。继续处理24小时，并将单独用培养基处理的细胞用作基础对照。温育24小时后，按照生产商的说明，用过氧亚硝酸盐测定试剂盒(Abcam)通过荧光方法测量过氧亚硝酸盐的产生。简言之，将细胞在培养基中用10μl/孔传感器绿色工作液处理1小时。将用SIN-1(Sigma)11mM或5.76mM与传感器绿色溶液组合处理1小时的细胞用作过过氧亚硝酸盐产生的阳性对照。SIN-1(Sigma)是一氧化氮供体。温育1小时后，用吸光酶标仪(Clariostar，BMG)在激发波长490nm和发射波长530nm下测量荧光。最后，通过向每个孔中添加50μl/孔的Hoescht1/1000(赛默飞世尔科技公司)将细胞核染色10分钟。用共焦显微镜Operetta(PerkinElmer)确定细胞核的数量。将过氧亚硝酸盐荧光强度相对于每种条件下的细胞数进行归一化。

将结果表示为按基础条件归一化的每个细胞的过氧亚硝酸盐的百分比。

表10：相对于基础条件，过氧亚硝酸盐产生的平均值和SEM值。使用非配对学生t检 验计算统计学显著性。****：p<0.0001

条件	平均值	SEM	统计学
				基础条件	100.00	0.97
SIN-1 5.76mM	2379.00	432	****
				SIN-1 11mM	1654.00	224.5	****
女贞0.1％(体积/体积)	95.74	2.83	n.s
				女贞0.05％(体积/体积)	97.07	2.57	n.s
女贞0.005％(体积/体积)	100.30	2.75	n.s

结果表明，用实施例2的女贞提取物处理并未增加过氧亚硝酸盐的产生，因此将避免在旧表皮细胞中出现血管收缩信号。

实施例14

对用SIN-1处理的人表皮角质形成细胞中的过氧亚硝酸盐产生进行体外定量评价

细胞ROS水平在衰老过程中以及在不同外部因素(包括接触化学品、电离辐射和细菌或病毒感染)的作用下增加。在衰老过程中，增加的ROS产生与增加的一氧化氮的组合触发了过氧亚硝酸盐的产生，过氧亚硝酸盐是一种具有血管收缩和毒性作用的副产物化合物。在这种意义上，能够降低在衰老过程中增加的过氧亚硝酸盐水平的产品将导致皮肤细胞中更好的血管舒张信号传导作用。

将人表皮角质形成细胞(HEK)以3×10⁴个细胞/孔的密度接种在96孔板中的补充有Mix C39016-CaCl₂溶液(Promocell)的角质形成细胞生长培养基中。温育24小时后，用含有根据实施例2用亚临界水160℃提取获得的女贞提取物的标量稀释液的新鲜培养基替换培养基。继续处理24小时，并将单独用培养基处理的细胞用作基础对照。温育24小时后，按照生产商的说明，用过氧亚硝酸盐测定试剂盒(Abcam)通过荧光方法测量过氧亚硝酸盐水平。简言之，将细胞用10μl/孔传感器绿色工作溶液和SIN-1(Sigma)20mM处理1小时。SIN-1是强大的氧化剂化合物，其在细胞内部形成过氧亚硝酸盐，从而模拟衰老过程中发生的情况[Hogg,N.“Production of hydroxyl radicals from the simultaneous generationof superoxide and nitric oxide”(1992).Biochemical Journal.291,419-424]。温育1小时后，用PBS洗涤细胞，并用hoescht 1/1000(赛默飞世尔科技公司)将细胞核染色10分钟。最后，用共聚焦显微镜Operetta(PerkinElmer)确定过氧亚硝酸盐荧光强度和细胞核。将过氧亚硝酸盐荧光强度相对于每种条件下的细胞数进行归一化。

将结果表示为按用SIN-1 20mM处理的基础条件归一化的每个细胞的过氧亚硝酸盐的百分比。

表11：相对于用SIN-1 20mM处理的基础条件，过氧亚硝酸盐水平的平均值和SEM 值。使用非配对学生t检验计算统计学显著性。*：p<0.05**：p<0.01***：p<0.001****：p< 0.0001

条件	平均值	SEM	统计学
				基础条件	46.82	5.09	****
基础条件+SIN-1 20mM	100.00	3.82
				女贞0.005％(体积/体积)+SIN 20mM	98.17	2.72	n.s
女贞0.05％(体积/体积)+SIN 20mM	91.61	2.36	n.s
				女贞0.1％(体积/体积)+SIN 20mM	84.59	5.71	*
女贞0.5％(体积/体积)+SIN 20mM	76.08	4.83	**

结果表明，实施例2的来自女贞的提取物可以降低表皮细胞中的过氧亚硝酸盐水平，从而导致与衰老相关联的血管收缩和毒性信号的降低。

实施例15

喷雾式精华液

在合适的容器中，将相A的成分称重：水[INCI：水(含水)]。

将相B1：Pemulen^TMEZ-4U聚合物乳化剂[INCI：丙烯酸酯/C10/30烷基丙烯酸酯交联聚合物]在搅动下添加到先前的混合物中。一旦分散，将相B2：[INCI：丙二醇]、甘油[INCI：甘油]添加到先前的混合物中并混合直至均匀。

将先前的混合物在35℃下加热并在混合下添加相B3：GMCY MB[INCI：辛酸甘油酯]。

最后，添加相B4：LDP White[INCI：磷铝钠、硅酸盐、二氧化硅、二氧化钛]，并适度搅拌直至混合均匀。

在单独的容器中，混合相C成分：Schercemol^TM1818酯[INCI：异硬脂酸异硬脂醇酯]、TOM RSPO MB[INCI：戊二醇、辛酸甘油酯、十一烯酸甘油酯]。通过在用涡轮机快速搅动下，将相C缓慢添加到先前的混合物中来制成乳剂。

利用以下相D成分将pH调节到5.3-5.8：氢氧化钠20％重量/重量[INCI：水(含水)；氢氧化钠])

将相E：根据实施例2的女贞亚临界水提取物[INCI：甘油，女贞种子提取物]添加到先前的混合物中。

将相F：水[INCI：水(含水)]、NA2-P[乙二胺四乙酸二钠]预混合并在适度搅拌下添加到先前的混合物中。

表12

实施例16

包含女贞亚临界水提取物的定妆液

在合适的容器中，在搅拌下一个接一个地称重相A的成分：水[INCI：水(含水)]、Aqua SF-1OS聚合物[INCI：水(含水)、丙烯酸酯共聚物]、Novethix^TML-10聚合物[INCI：水(含水)、丙烯酸酯/山嵛醇聚醚-25甲基丙烯酸酯共聚物]。

然后使用相B：20％重量/重量的氢氧化钠[INCI：水(含水)；氢氧化钠]中和相A，缓慢搅拌，注意不要将气泡引入。

在单独的容器中，将相C：平衡金[二氧化钛(CI 77891)、MICA、氧化锡]、/>平衡红[二氧化钛(CI 77891)、MICA、氧化锡]、/>东方米黄[INCI：MICA、二氧化钛(CI 77891)、氧化铁(CI 77491)]、/>冷冻珠宝[INCI：硼硅酸钙铝、二氧化硅、二氧化钛(CI 77891)、氧化锡]、/>PA 40[INCI：苯丙醇、丙二醇、辛甘醇、生育酚]、/>[INCI：丙二醇]预混合，并在搅拌下添加到先前的混合物中，混合直至均匀。

添加相D：变性乙醇[INCI：变性醇]、香料[INCI：香料(香精)]，并在适度搅拌下混合直至均匀。

将相E：根据实施例2的女贞亚临界水提取物[INCI：甘油，女贞种子提取物]添加到先前的混合物中。

将相F：Avalure^TMUR 450聚合物[INCI：水(AQUA)、PPG-17/IPDI/DMPA共聚物]、NA2-P[乙二胺四乙酸二钠]预混合并在搅拌下添加到先前的混合物中直至均匀。

表13

实施例17

包含女贞亚临界水提取物的乳液

在合适的容器中，称重溶解相A1的成分：水[INCI：水(含水)]、[INCI：丙三醇]、甘油[INCI：甘油]、山梨酸钾[INCI：山梨酸钾]和/>NA2[INCI：乙二胺四乙酸二钠]，使其溶解。

将相A2的成分：Ultrez 30聚合物[INCI：卡波姆]添加到先前的混合物中。一旦分散，则将相A3：黄原胶[INCI：黄原胶]引入。然后将混合物在70℃至75℃下加热。

在单独的容器中，混合相B成分：白池花籽油[INCI：白池花(白芒花)籽油]、Kodasil^TM600IDD凝胶[INCI：异十二烷；乙烯基二甲聚硅氧烷/月桂基二甲聚硅氧烷交联聚合物；二甲聚硅氧烷；月桂基二甲聚硅氧烷]、Astro-sil 2C 350[INCI：二甲聚硅氧烷]、Schercemol^TMCATC酯[INCI：椰油酰基己二酸/三羟甲基丙烷共聚物；三羟甲基丙烷]、Schercemol^TMDIS酯[INCI：癸二酸二异丙酯]、生育酚乙酸酯[INCI：生育酚乙酸酯]和Phenoxetol^TM[INCI：苯氧乙醇]，并将所得混合物在70℃至75℃下加热。

通过在用涡轮机快速搅动下，将相B缓慢添加到相A上来制成乳剂。

一旦混合物冷却至40℃，将相C：Novemer^TMEC-2聚合物[INCI：水(含水)；丙烯酸钠/山嵛醇聚醚-25甲基丙烯酸酯交联聚合物；氢化聚癸烯、月桂基葡萄糖苷]、SA-SB-300(7％)[INCI：二氧化硅；二甲聚硅氧烷]，香料[INCI：香料(香精)]和根据实施例2的女贞亚临界水提取物[INCI：甘油、女贞种子提取物]添加到先前的混合物中。

利用以下相D成分将pH调节到6.0-6.5：氢氧化钠20％重量/重量[INCI：水(含水)；氢氧化钠])。

表14

实施例18

包含女贞亚临界水提取物的面膜

在合适的容器中，称重相A的成分：水[INCI：水(含水)]、Ultrez 30聚合物[INCI：卡波姆]，并且在适度搅拌下放置，直至完全分散。

将相B成分：OSMS BA[INCI：甜菜碱]添加到先前的混合物中并混合直至均匀。

将相C成分：黄原胶[INCI：黄原胶]、[INCI：丙二醇]、甘油[INCI：甘油]在单独的容器中预混合，并引入到先前的混合物中。

在适度搅拌下一个接一个地添加相D：PA 40[INCI：苯丙醇、丙二醇、辛甘醇、生育酚]、相E：Hydramol^TMTGL酯[INCI：聚甘油-3月桂酸酯]和相F：亚临界水提取物[INCI：甘油、女贞种子提取物]，并混合直至均匀。

利用以下相G成分将pH调节到4.5-5.0：氢氧化钠20％重量/重量[INCI：水(含水)；氢氧化钠])

在缓慢搅拌下添加相H：Chembetaine^TMCAD表面活性剂[INCI：水(含水)、椰油酰胺丙基甜菜碱、氯化钠、乙二胺四乙酸四钠]，并混合直至均匀。

最后，在缓慢搅拌下添加相I：DM 0.65[INCI：二硅氧烷]，并混合直至均匀。

表15

实施例19

包含女贞亚临界水提取物的精华液

在合适的容器中，称重相A的成分：水[INCI：水(含水)]、Pemulen^TMEZ-4U聚合物乳化剂[INCI：丙烯酸酯/C10/30烷基丙烯酸酯交联聚合物]，并混合直至完全分散。

将相B成分：Kelco-Care^TMDiutan胶[INCI：鞘氨醇单胞菌发酵提取物]、[INCI：丙二醇]在单独的容器中预混合，并在适度搅拌下引入到先前的混合物中。

在适度搅拌下一个接一个地添加相C的成分：700B[INCI：乙酰丙酸、乙酰丙酸钠、水(含水)、甘油]、Hydramol^TMTGL酯[INCI：聚甘油-3月桂酸酯]，并且混合直至均匀。

将混合物加热至35℃至40℃，在适度混合下添加相D：GMCY MB[INCI：辛酸甘油酯]。

在搅拌下将相E：AlgaPūr^TM高稳定性高油酸(HSHO)海藻油[INCI：三油酸甘油酯、生育酚、向日葵籽油]添加到先前的混合物中，直至均匀。

在搅拌下将相F：根据实施例2的女贞亚临界水提取物[INCI：甘油，女贞种子提取物]添加到先前的混合物中，直至均匀。

将相G成分：L-精氨酸[INCI：精氨酸]、水[INCI：水(含水)]在单独的容器中预混合，并在搅拌下引入到先前的混合物中，直至均匀。

最后，将相H：SynBeam紫[INCI：合成氟金云母、二氧化钛(CI 77891)、氧化锡]和水[INCI：水(含水)]在单独的容器中预混，并在搅拌下引入到先前的混合物中，直至均匀。

表16

实施例20

针对在长期应用于白种人皮肤类型女性志愿者之后本发明的植物提取物的皮肤 氧合效果的评估的体内研究。

这项研究持续了28天。年龄在25岁至55岁之间的八十四(84)名白种人女性志愿者被包括在本研究中并且被细分为三组。三十(30)名受试者将实施例9中所述的组合物(活性乳膏)施用于整个面部，并且二十八(28)名受试者施用具有相同组成但不存在本发明的植物提取物的安慰剂乳膏。将活性乳膏和安慰剂乳膏应用28天，每天两次(早上和晚上)。受试者充当其自身参考，并且将在时间28天获得的结果与在初始时间获得的结果进行比较。此外，将应用活性乳膏获得的结果与应用安慰剂乳膏获得的结果进行比较。第三组受试者，包括26名志愿者，进行了瑜伽课程。没有将活性或安慰剂乳膏应用于这些受试者，并将瑜伽课程后的结果与初始时间的结果进行了比较。

皮肤氧合：TiVi氧映射器通过测量志愿者皮肤的可见区中的漫射背散射光来提供皮肤氧合的测量。利用该参数，该工具测量志愿者毛细血管中氧合血红蛋白的存在。在开始时对三个组进行测量。在第28天对活性乳膏和安慰剂乳膏以及在瑜伽课程后对瑜伽课程受试者进行终点测量。结果如下所示：

表17：在产品施用28天后皮肤氧合增加。相对于初始时间的统计学显著性

/>

结果表明，在应用本发明的组合物28天之后，与初始时间相比，存在皮肤氧合的统计学上显著的增加。此外，与瑜伽课程相比，应用活性乳膏时皮肤氧合的增加更高。

皮肤亮度(参数L*)：使用交叉偏振滤光器在微距摄影中测量。在初始时间进行所有组的初始测量，并在第28天对应用活性乳膏和应用安慰剂乳膏以及在瑜伽课程后对瑜伽课程受试者进行终点测量。

表18：产品施用之前和之后28天的参数L*。相对于初始时间的统计学显著性：*p< 0.05，使用非配对学生t检验相对于初始时间计算

结果表明，在应用本发明的组合物28天后，与应用安慰剂或瑜伽课程相比，皮肤的亮度显著增加。

鱼尾纹区域皱纹深度：利用3D微距摄影成像系统取得志愿者的鱼尾纹的图像。在初始时间和产品应用28天后或瑜伽课程后进行皱纹深度测量。

表19：在产品应用28天后或瑜伽课程后，鱼尾纹区域皱纹深度降低

结果表明，在应用本发明的组合物28天之后，与初始时间相比，存在鱼尾纹区域皱纹深度的统计学上显著的降低。此外，应用活性乳膏的皱纹深度的降低高于应用安慰剂乳膏，并且与在瑜伽课程中实现的效果相当。

鱼尾纹区域皱纹体积：利用3D微距摄影成像系统取得志愿者的鱼尾纹区域的图像。在初始时间和产品应用28天后或瑜伽课程后进行皱纹体积测量。

表20：在产品应用28天后或瑜伽课程后，鱼尾纹区域皱纹体积降低。相对于初始时 间的统计学显著性

结果表明，在产品应用28天之后，与初始时间相比，存在鱼尾纹皱纹体积的统计学上显著的降低。此外，应用活性乳膏的皱纹体积的降低高于应用安慰剂乳膏和瑜伽课程。

眼下区域皱纹深度：利用3D微距摄影成像系统取得志愿者的眼下区域的图像。在初始时间和产品应用28天后或瑜伽课程后进行皱纹深度测量。

表21：在产品应用28天后或瑜伽课程后，眼下区域皱纹深度降低。

相对于初始时间的统计学显著性

结果表明，在产品应用28天之后，与初始时间相比，存在皱纹深度的统计学上显著的降低。此外，应用活性乳膏的皱纹深度的降低高于应用安慰剂乳膏或瑜伽课程。

眼下区域皮肤粗糙度：利用3D微距摄影成像系统取得志愿者的眼下区域的图像。在初始时间和产品应用28天后或瑜伽课程后测量参数“Sa”，其被定义为粗糙度(μm)的算术平均值。

表22：在产品应用28天后或瑜伽课程后，眼下区域皮肤粗糙度降低。

结果表明，在产品应用28天之后，与初始时间相比，存在皮肤粗糙度的统计学上显著的降低。此外，应用活性乳膏的皮肤粗糙度降低高于应用安慰剂乳膏或在瑜伽课程后实现的皮肤粗糙度降低。

自我问卷调查：应用活性乳膏和应用安慰剂乳膏28天之后，志愿者回答了自我问卷调查，以评价两种产品的功效。

表23：产品应用28天之后对皮肤相关问题的积极反应的百分比

根据志愿者的回答，结果表明，与应用安慰剂乳膏相比，在28天后，应用活性乳膏示出了更高的改善。

实施例21

来自女贞的大规模亚临界水提取物

该提取物是通过一种方法获得的，该方法包括在亚临界状态下以动态模式进行水提取，其遵循以下步骤：

i)研磨女贞果实，获得尺寸对应于约0.5mm至约1mm筛目的颗粒。

ii)将120g粉碎的女贞装入300mL反应器中，将其置于预先加热至高于100℃的温度的烘箱中，然后将水泵送通过该反应器，持续220分钟。

iii)以15mL/min的流速、160℃的水温和1.5MP的压力，使3300mL亚临界状态下的水(原材料与水的比率为1:27)通过植物材料，

得到水性提取物。

iv)将获得的水性提取物的一部分与100重量％甘油混合以制成80重量％甘油溶液，从而获得1:100的原材料在80％甘油溶液中的最终浓度。

实施例22

在不同温度下获得的来自女贞的亚临界水提取物

如实施例1所述获得亚临界水提取物，但是在140℃、150℃、170℃或180℃下进行提取。

表24：通过不同SW条件获得的女贞中的定量生物活性物质。ND＝未检测到

/>

在此温度范围内的所有提取物均包含松柏醇、杨梅黄酮、芹菜素、橄榄苦苷和红景天苷。

相比之下，实施例4至8中获得的提取物中没有一种提取物包含杨梅黄酮，并且不包含松柏醇、杨梅黄酮、芹菜素、橄榄苦苷和红景天苷。

通过以下带编号的条款进一步描述本发明：

1.一种用于从女贞的果实获得植物提取物的方法，该方法包括用亚临界水对女贞的果实进行提取，其中该提取包括使该果实与亚临界水在至少140℃的温度下和适于将该水维持在液态的压力下接触至少5分钟的时段以形成水性植物提取物的步骤。

2.根据条款1所述的方法，其中该亚临界水处于约140℃至约180℃、或约150℃至约175℃、或约155℃至约170℃、或约155℃至约165℃、或约160℃至约165℃的温度。

3.根据条款1或条款2所述的方法，其中该果实是干燥果实。

4.根据条款所述3的方法，其中干燥果实的重量与亚临界水的体积的比率为1:5g/mL(重量/体积)至1:50g/mL(重量/体积)。

5.根据前述条款中任一项所述的方法，其中使该果实与亚临界水接触的步骤进行至少约15分钟、至少约30分钟、至少约1小时、至少约2小时或至少约3小时的时段。

6.根据前述条款中任一项所述的方法，其中该亚临界水处于约0.5MPa至约20MPa、或约1MPa至约2MPa的压力下。

7.根据前述条款中任一项所述的方法，其中该果实呈颗粒形式。

8.根据前述条款中任一项所述的方法，其中该提取仅用亚临界水进行。

9.根据前述条款中任一项所述的方法，其中利用亚临界水的该提取以动态模式进行并且包括使该果实与该亚临界水的连续流接触。

10.根据条款9所述的方法，其中该亚临界水具有约5mL/min至约30mL/min的流速。

11.根据前述条款中任一项所述的方法，该方法包括从该水性植物提取物中分离该果实的步骤。

12.根据条款11所述的方法，该方法包括纯化该水性植物提取物以获得纯化的水性植物提取物的步骤。

13.根据条款12所述的方法，其中纯化该水性植物提取物包括浓缩该水性植物提取物以获得该水性植物提取物的浓缩物。

14.根据条款13所述的方法，其中纯化该水性植物提取物包括干燥该水性植物提取物以获得固体形式的该植物提取物。

15.根据条款11所述的方法，该方法包括将水混溶性有机溶剂和任选的水与该水性植物提取物混合以形成包含该植物提取物、水和该水混溶性有机溶剂的溶液的步骤。

16.根据条款12所述的方法，该方法包括将水混溶性有机溶剂和任选的水与该纯化的水性植物提取物混合以形成包含该纯化的植物提取物、该水混溶性有机溶剂和任选的水的溶液的步骤。

17.根据条款16所述的方法，其中该纯化的水性植物提取物是该水性植物提取物的浓缩物。

18.根据条款16所述的方法，其中该纯化的水性植物提取物是固体形式的该植物提取物。

19.根据条款15至18中任一项所述的方法，其中该水混溶性有机溶剂是多元醇并且是例如C2-C10脂肪族烃基二醇或甘油。

20.一种水性植物提取物，其能够通过根据条款1至11中任一项所述的方法获得。

21.一种纯化的水性植物提取物，其能够通过根据条款12至14中任一项所述的方法获得。

22.根据条款21所述的纯化的水性植物提取物，其是能够通过根据权利要求13所述的方法获得的水性植物提取物的浓缩物。

23.根据条款21所述的纯化的水性植物提取物，其是能够通过根据条款14所述的方法获得的固体形式的该植物提取物。

24.根据条款20所述的水性植物提取物或根据条款21至23中任一项所述的纯化的水性植物提取物，包含橄榄苦苷、红景天苷和杨梅黄酮。

25.根据条款24所述的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物，还包含松柏醇和/或芹菜素。

26.根据条款24或条款25所述的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物，还包含至少一种选自香草醛、3,4-二羟基苯甲酸、3,5-二羟基苯甲酸、4-羟基苯甲醛、4-羟基苯甲酸、咖啡酸、槲皮素、芥子醇、水杨酸、山奈酚和柚皮素的化合物。

27.根据条款26所述的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物，还包含香草醛、3,4-二羟基苯甲酸和/或3,5-二羟基苯甲酸、4-羟基苯甲酸、咖啡酸、芥子醇、水杨酸和山奈酚。

28.根据条款24或条款25所述的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物，还包含至少一种选自香草醛、4-羟基苯甲醛、4-羟基苯甲酸、槲皮素、芥子醇、水杨酸和柚皮素的化合物。

29.根据条款28所述的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物，还包含香草醛、4-羟基苯甲酸、芥子醇和水杨酸。

30.根据条款24或条款25所述的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物，还包含香草醛、木犀草素-7-O-葡萄糖苷、3,4-二羟基苯甲酸和/或3,5-二羟基苯甲酸、4-羟基苯甲醛、4-羟基苯甲酸、香草酸、咖啡酸、阿魏酸、脱落酸、槲皮素、圣草酚、芥子醇、水杨酸、松柏醛、芹菜素-7-O-葡萄糖苷、肉桂酸、香豆酸、山奈酚、3,5-二羟基苯甲醛和柚皮素。

31.一种组合物，该组合物包含根据条款20或24至30中任一项所述的水性植物提取物和水混溶性有机溶剂以及任选的(额外的)水。

32.一种组合物，该组合物包含根据条款21至30中任一项所述的纯化的水性植物提取物、水混溶性有机溶剂和任选的水。

33.根据条款30或条款32所述的组合物，其中该水混溶性有机溶剂是多元醇并且是例如C2-C10脂肪族烃基二醇或甘油。

34.根据条款33所述的组合物，其中基于该总组合物的重量计，所述多元醇以50重量％至90重量％的量存在。

35.根据条款31至34中任一项所述的组合物，包含约1ppm至约40ppm的橄榄苦苷、约1ppm至约40ppm的红景天苷和约0.1ppm至约3ppm的杨梅黄酮，并且优选约1ppm或2ppm至约25ppm的松柏醇(4-[(E)-3-羟基丙-1-烯基]-2-甲氧基苯酚)和/或约0.01ppm至约5ppm的芹菜素。

36.一种化妆品组合物，该化妆品组合物包含：根据条款20或24至30中任一项所述的水性植物提取物、根据条款21至30中任一项所述的纯化的水性植物提取物、或根据条款31至35中任一项所述的组合物；以及至少一种美容上可接受的赋形剂或成分。

37.根据条款36所述的化妆品组合物，包含根据条款31至35中任一项所述的组合物，所述组合物的量为约0.01重量％至20重量％、约0.1重量％至5重量％、或约0.5重量％至4重量％、或约1重量％至3重量％。

38.根据条款36或条款37所述的化妆品组合物，其中该至少一种美容上可接受的赋形剂或成分选自表面活性剂、毛发和皮肤调理剂、润肤剂、乳化剂、湿润剂、流变改性剂、维生素、毛发生长促进剂、仿晒黑剂、防晒剂、亮肤剂、抗衰老化合物、抗皱化合物、抗蜂窝组织化合物、抗痤疮化合物、去头皮屑剂、紧致剂、皮肤弹性剂、重构剂、保湿剂、抗光衰老剂、蓝光保护剂、DNA保护剂、DNA修复剂、干细胞保护剂、自由基清除剂和/或抗糖化剂、解毒剂、防污染剂、抗炎化合物、止痛剂、止汗剂、除臭剂、毛发固定剂、微粒、磨料、抗氧化剂、角质层分离剂、抗静电剂、泡沫促进剂、水溶助长剂、增溶剂、螯合剂、抗微生物剂、抗真菌剂、pH调节剂、螯合剂、缓冲剂、辅助植物性药材、毛发着色剂、氧化剂、还原剂、推进剂、热变色染料、毛发和皮肤漂白剂、颜料、防龋剂、防牙垢剂、防牙斑剂、溶剂、防腐剂；以及它们的组合。

39.根据条款36至38中任一项所述的化妆品组合物，其中该化妆品组合物呈选自由以下项组成的组的形式：乳膏、多重乳剂、溶液、液晶、无水组合物、水分散体、油、乳、香膏、泡沫、乳液、凝胶、乳膏凝胶、水醇溶液、水甘醇溶液、水凝胶、搽剂、肥皂、洗发水、护发素、精华液、多糖膜、软膏、摩丝、润发油、粉末、棒、笔、喷雾剂或气雾剂。

40.根据条款36至39中任一项所述的化妆品组合物，其中该化妆品组合物被掺入织物、非织造织物或医疗装置中。

41.根据条款20或24至30中任一项所述的水性植物提取物或根据条款21至30中任一项所述的纯化的水性植物提取物用于改善或增加皮肤微循环和/或血管形成的用途。

42.根据条款20或24至30中任一项所述的水性植物提取物或根据条款21至30中任一项所述的纯化的水性植物提取物用于改善或增加皮肤氧合的用途。

43.根据条款20或24至30中任一项所述的水性植物提取物、或根据条款21至30中任一项所述的纯化的水性植物提取物用于改善皮肤红润度(自然红晕)的用途。

44.根据条款20或24至30中任一项所述的水性植物提取物或根据条款21至30中任一项所述的纯化的水性植物提取物用于减少和/或预防皮肤衰老的症状的用途。

45.根据条款20或24至30中任一项所述的水性植物提取物或根据条款21至30中任一项所述的纯化的水性植物提取物用于增加皮肤光滑度的用途。

46.根据条款20或24至30中任一项所述的水性植物提取物或根据条款21至30中任一项所述的纯化的水性植物提取物用于改善或增加皮肤光泽度和/或亮度的用途。

47.一种用于对皮肤进行美容性、非治疗性处理和/或护理的方法，该方法包括向该皮肤局部施用根据条款20或24至30中任一项所述的水性植物提取物、根据条款21至30中任一项所述的纯化的水性植物提取物或根据条款36至39中任一项所述的组合物。

48.根据条款47所述的方法，其中该皮肤的美容性、非治疗性处理和/或护理是：改善和/或增加皮肤微循环或血管形成；改善或增加皮肤氧合；改善或增加皮肤红润度(自然红晕)；减少和/或预防皮肤衰老的症状；增加皮肤光滑度；和/或改善或增加皮肤光泽度和/或亮度。

还通过以下带编号的条款的附加集合来进一步描述本发明：

I.一种用于从女贞的果实获得植物提取物的方法，该方法包括用亚临界水对女贞的果实进行提取，其中该提取包括使该果实与亚临界水在至少140℃的温度下和适于将该水维持在液态的压力下接触至少5分钟的时段以形成水性植物提取物的步骤。

II.根据条款I所述的方法，其中该亚临界水处于约140℃至约180℃、或约150℃至约175℃、或约155℃至约170℃、或约155℃至约165℃、或约160℃至约165℃的温度。

III.根据条款I或条款II所述的方法，其中使该果实与亚临界水接触的步骤进行至少约15分钟、至少约30分钟、至少约1小时、至少约2小时或至少约3小时的时段。

IV.根据前述条款(即条款(I至III))中任一项所述的方法，其中该亚临界水处于约0.5MPa至约20MPa、或约1MPa至约2MPa的压力下。

V.根据前述条款(即条款(I至IV))中任一项所述的方法，该方法包括从该水性植物提取物中分离该果实的步骤，并且任选地包括纯化该水性植物提取物以获得纯化的水性植物提取物的进一步步骤。

VI.一种水性植物提取物或纯化的水性植物提取物，其能够通过根据条款I至V中任一项所述的方法获得。

VII.根据条款VI所述的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物，包含橄榄苦苷、红景天苷和杨梅黄酮，并且任选地还包含松柏醇和/或芹菜素。

VIII.根据条款VII所述的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物，还包含至少一种选自香草醛、3,4-二羟基苯甲酸、3,5-二羟基苯甲酸、4-羟基苯甲醛、4-羟基苯甲酸、咖啡酸、槲皮素、芥子醇、水杨酸、山奈酚和柚皮素的化合物。

IX.一种组合物，包含根据条款VI至VIII中任一项所述的水性植物提取物、任选的(额外的)水和水混溶性有机溶剂；或根据权利要求6至8中任一项所述的纯化的水性植物提取物、水和水混溶性有机溶剂。

X.根据条款IX所述的组合物，其中基于该总组合物的重量计，所述多元醇以50重量％至90重量％的量存在。

XI.根据条款IX或条款X所述的组合物，包含约1ppm至约40ppm的橄榄苦苷、约1ppm至约40ppm的红景天苷和约0.1ppm至约3ppm的杨梅黄酮，并且优选约1ppm或2ppm至约25ppm的松柏醇和/或约0.01ppm至约5ppm的芹菜素。

XII.一种化妆品组合物，包含：根据条款VI至VIII中任一项所述的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物，或根据条款IX至XI中任一项所述的组合物；以及至少一种美容上可接受的赋形剂或成分。

XIII.根据条款VI至VIII中任一项所述的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物用于改善或增加皮肤微循环和/或血管形成；和/或改善或增加皮肤氧合的用途。

XIV.根据条款VI至VIII中任一项所述的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物用于改善皮肤红润度(自然红晕)；减少和/或预防皮肤衰老的症状；增加皮肤光滑度；和/或改善或增加皮肤光泽度和/或亮度的用途。

XV.一种用于对皮肤进行美容性、非治疗性处理和/或护理的方法，该方法包括向该皮肤局部施用根据条款VI至VIII中任一项所述的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物或根据条款IX至XII中任一项所述的组合物。

Claims (46)

1.一种用于从女贞的果实获得植物提取物的方法，所述方法包括用亚临界水对女贞的果实进行提取，其中所述提取包括使所述果实与亚临界水在以下温度下：

约140℃至约180℃、或约150℃至约175℃、或约155℃至约170℃、或约155℃至约165℃、或约160℃至约165℃，

和适于将所述水维持在液态的压力下接触至少5分钟的时段以形成水性植物提取物的步骤。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述果实是干燥果实。

3.根据权利要求2所述的方法，其中干燥果实的重量与亚临界水的体积的比率为1:5g/mL(重量/体积)至1:50g/mL(重量/体积)。

4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中使所述果实与亚临界水接触的步骤进行至少约15分钟、至少约30分钟、至少约1小时、至少约2小时或至少约3小时的时段。

5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述亚临界水处于约0.5MPa至约20MPa、或约1MPa至约2MPa的压力下。

6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述果实呈颗粒形式。

7.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述提取仅用亚临界水进行。

8.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中利用亚临界水的所述提取以动态模式进行并且包括使所述果实与所述亚临界水的连续流接触。

9.根据权利要求8所述的方法，其中所述亚临界水具有约5mL/min至约30mL/min的流速。

10.根据前述权利要求中任一项所述的方法，所述方法包括从所述水性植物提取物中分离所述果实的步骤。

11.根据权利要求10所述的方法，所述方法包括纯化所述水性植物提取物以获得纯化的水性植物提取物的步骤。

12.根据权利要求11所述的方法，其中纯化所述水性植物提取物包括浓缩所述水性植物提取物以获得所述水性植物提取物的浓缩物。

13.根据权利要求12所述的方法，其中纯化所述水性植物提取物包括干燥所述水性植物提取物以获得固体形式的所述植物提取物。

14.根据权利要求10所述的方法，所述方法包括将水混溶性有机溶剂和任选的水与所述水性植物提取物混合以形成包含所述植物提取物、水和所述水混溶性有机溶剂的溶液的步骤。

15.根据权利要求11所述的方法，所述方法包括将水混溶性有机溶剂和任选的水与所述纯化的水性植物提取物混合以形成包含所述纯化的植物提取物、所述水混溶性有机溶剂和任选的水的溶液的步骤。

16.根据权利要求15所述的方法，其中所述纯化的水性植物提取物是所述水性植物提取物的浓缩物。

17.根据权利要求15所述的方法，其中所述纯化的水性植物提取物是固体形式的所述植物提取物。

18.根据权利要求14至17中任一项所述的方法，其中所述水混溶性有机溶剂是多元醇并且是例如C2-C10脂肪族烃基二醇或甘油。

19.一种能够通过根据权利要求1至10中任一项所述的方法获得的水性植物提取物，所述水性植物提取物包含橄榄苦苷、红景天苷和杨梅黄酮。

20.一种能够通过根据权利要求11至13中任一项所述的方法获得的纯化的水性植物提取物，所述纯化的水性植物提取物包含橄榄苦苷、红景天苷和杨梅黄酮。

21.根据权利要求20所述的纯化的水性植物提取物，所述纯化的水性植物提取物是能够通过根据权利要求12所述的方法获得的水性植物提取物的浓缩物。

22.根据权利要求19所述的纯化的水性植物提取物，所述纯化的水性植物提取物是能够通过根据权利要求13所述的方法获得的固体形式的所述植物提取物。

23.根据权利要求20所述的水性植物提取物或根据权利要求20至22中任一项所述的纯化的水性植物提取物，还包含松柏醇和/或芹菜素。

24.根据权利要求23所述的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物，还包含至少一种选自香草醛、3,4-二羟基苯甲酸、3,5-二羟基苯甲酸、4-羟基苯甲醛、4-羟基苯甲酸、咖啡酸、槲皮素、芥子醇、水杨酸、山奈酚和柚皮素的化合物。

25.根据权利要求24所述的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物，还包含香草醛、3,4-二羟基苯甲酸和/或3,5-二羟基苯甲酸、4-羟基苯甲酸、咖啡酸、芥子醇、水杨酸和山奈酚。

26.根据权利要求23所述的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物，还包含至少一种选自香草醛、4-羟基苯甲醛、4-羟基苯甲酸、槲皮素、芥子醇、水杨酸和柚皮素的化合物。

27.根据权利要求26所述的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物，还包含香草醛、4-羟基苯甲酸、芥子醇和水杨酸。

28.根据权利要求23所述的水性植物提取物或纯化的水性植物提取物，还包含香草醛、木犀草素-7-O-葡萄糖苷、3,4-二羟基苯甲酸和/或3,5-二羟基苯甲酸、4-羟基苯甲醛、4-羟基苯甲酸、香草酸、咖啡酸、阿魏酸、脱落酸、槲皮素、圣草酚、芥子醇、水杨酸、松柏醛、芹菜素-7-O-葡萄糖苷、肉桂酸、香豆酸、山奈酚、3,5-二羟基苯甲醛和柚皮素。

29.一种组合物，所述组合物包含根据权利要求19或权利要求23至28中任一项所述的水性植物提取物和水混溶性有机溶剂以及任选的(额外的)水。

30.一种组合物，所述组合物包含根据权利要求20至28中任一项所述的纯化的水性植物提取物、水混溶性有机溶剂和任选的水。

31.根据权利要求29或权利要求30所述的组合物，其中所述水混溶性有机溶剂是多元醇并且是例如C2-C10脂肪族烃基二醇或甘油。

32.根据权利要求31所述的组合物，其中基于总组合物的重量计，所述多元醇以50重量％至90重量％的量存在。

33.根据权利要求29至32中任一项所述的组合物，所述组合物包含约1ppm至约40ppm的橄榄苦苷、约1ppm至约40ppm的红景天苷和约0.1ppm至约3ppm的杨梅黄酮，并且优选约1ppm或2ppm至约25ppm的松柏醇(4-[(E)-3-羟基丙-1-烯基]-2-甲氧基苯酚)和/或约0.01ppm至约5ppm的芹菜素。

34.一种化妆品组合物，所述化妆品组合物包含：根据权利要求19或23至28中任一项所述的水性植物提取物、根据权利要求20至28中任一项所述的纯化的水性植物提取物、或根据权利要求29至33中任一项所述的组合物；以及至少一种美容上可接受的赋形剂或成分。

35.根据权利要求34所述的化妆品组合物，所述化妆品组合物包含根据权利要求29至33中任一项所述的组合物，所述组合物的量为约0.01重量％至20重量％、约0.1重量％至5重量％、或约0.5重量％至4重量％、或约1重量％至3重量％。

36.根据权利要求34或权利要求35所述的化妆品组合物，其中所述至少一种美容上可接受的赋形剂或成分选自表面活性剂、毛发和皮肤调理剂、润肤剂、乳化剂、湿润剂、流变改性剂、维生素、毛发生长促进剂、仿晒黑剂、防晒剂、亮肤剂、抗衰老化合物、抗皱化合物、抗蜂窝组织化合物、抗痤疮化合物、去头皮屑剂、紧致剂、皮肤弹性剂、重构剂、保湿剂、抗光衰老剂、蓝光保护剂、DNA保护剂、DNA修复剂、干细胞保护剂、自由基清除剂和/或抗糖化剂、解毒剂、防污染剂、抗炎化合物、止痛剂、止汗剂、除臭剂、毛发固定剂、微粒、磨料、抗氧化剂、角质层分离剂、抗静电剂、泡沫促进剂、水溶助长剂、增溶剂、螯合剂、抗微生物剂、抗真菌剂、pH调节剂、螯合剂、缓冲剂、辅助植物性药材、毛发着色剂、氧化剂、还原剂、推进剂、热变色染料、毛发和皮肤漂白剂、颜料、防龋剂、防牙垢剂、防牙斑剂、溶剂、防腐剂；以及它们的组合。

37.根据权利要求34至36中任一项所述的化妆品组合物，其中所述化妆品组合物呈选自由以下项组成的组的形式：乳膏、多重乳剂、溶液、液晶、无水组合物、水分散体、油、乳、香膏、泡沫、乳液、凝胶、乳膏凝胶、水醇溶液、水甘醇溶液、水凝胶、搽剂、肥皂、洗发水、护发素、精华液、多糖膜、软膏、摩丝、润发油、粉末、棒、笔、喷雾剂或气雾剂。

38.根据权利要求34至37中任一项所述的化妆品组合物，其中所述化妆品组合物被掺入织物、非织造织物或医疗装置中。

39.根据权利要求19或23至28中任一项所述的水性植物提取物或根据权利要求20至28中任一项所述的纯化的水性植物提取物用于改善或增加皮肤微循环和/或血管形成的用途。

40.根据权利要求19或23至28中任一项所述的水性植物提取物或根据条款20至28中任一项所述的纯化的水性植物提取物用于改善或增加皮肤氧合的用途。

41.根据权利要求19或23至28中任一项所述的水性植物提取物或根据权利要求20至28中任一项所述的纯化的水性植物提取物用于改善皮肤红润度(自然红晕)的用途。

42.根据权利要求19或23至28中任一项所述的水性植物提取物或根据权利要求20至28中任一项所述的纯化的水性植物提取物用于减少和/或预防皮肤衰老的症状的用途。

43.根据权利要求19或23至28中任一项所述的水性植物提取物或根据权利要求20至28中任一项所述的纯化的水性植物提取物用于增加皮肤光滑度的用途。

44.根据权利要求19或23至28中任一项所述的水性植物提取物或根据权利要求20至28中任一项所述的纯化的水性植物提取物用于改善或增加皮肤光泽度和/或亮度的用途。

45.一种用于对皮肤进行美容性、非治疗性处理和/或护理的方法，所述方法包括向所述皮肤局部施用根据权利要求19或23至28中任一项所述的水性植物提取物、根据权利要求20至28中任一项所述的纯化的水性植物提取物或根据权利要求34至37中任一项所述的组合物。

46.根据权利要求45所述的方法，其中所述皮肤的美容性、非治疗性处理和/或护理是：改善和/或增加皮肤微循环或血管形成；改善或增加皮肤氧合；改善或增加皮肤红润度(自然红晕)；减少和/或预防皮肤衰老的症状；增加皮肤光滑度；和/或改善或增加皮肤光泽度和/或亮度。