CN117070423A - 一株植物乳植杆菌LPPerfectus001及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一株植物乳植杆菌LPPerfectus001及其应用。该菌株保藏于广东省微生物菌种保藏中心；保藏地址为：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼；保藏时间为2022年3月29日；保藏编号为GDMCC NO：62334；分类学命名为Lactiplantibacillus plantarum。该菌株可显著有效抑制缺锌导致的血锌含量降低，提升毛发锌含量和免疫球蛋白G（IgG）含量，可有效改善缺锌引起的厌食症状。
Description
技术领域
本发明涉及微生物技术领域，具体而言，涉及一株植物乳植杆菌LPPerfectus001及其应用。
背景技术
植物乳植杆菌（Lactiplantibacillus plantarum），曾用名植物乳杆菌，已广泛应用于发酵食品和功能食品，是一种具有重要商业意义的益生菌，已有研究表明植物乳植杆菌具有抑菌防腐、调节肠道菌群、降低胆固醇、增强免疫力等功效，亦有药敏性、溶血性以及细胞毒性等表型试验显示具有一定的安全性。
锌为人体必需的微量元素之一，具有重要的生理功能，能够促进机体正常发育、维持正常食欲、增强机体免疫力、促进伤口和创伤的愈合等。人体缺锌会导致锌作用的生理功能难以充分发挥，严重时会出现生长发育迟缓、食欲不振、身体免疫功能下降等，给机体带来巨大伤害，锌在机体无法合成，只能依靠食物和膳食补充，在发生缺锌症状时，也多采用口服锌剂进行补充。
针对缺锌症状，目前多采用口服锌剂治疗，其治疗周期长达3-12个月，且在未补充至充足时，缺锌导致的损伤会一直存在。目前多数研究往往侧重于极端锌缺乏(即膳食锌完全缺乏)；少有人知道中度缺锌（如通常由膳食锌摄入量不足引起的边缘缺锌）对机体的危害，以及如何改善边缘缺锌症状。边缘性锌营养缺乏也称临界性锌营养缺乏,它是指与正常供应相近的轻度的锌营养缺乏，锌缺乏初起无特异症状，不易被重视，不易被辨认，危害极大。而针对植物乳植杆菌的研究，目前仅停留在药敏性、溶血性、细胞毒性等表型试验结果上，未结合基因层面的耐药基因分析、毒力基因分析等综合判断其安全性，益生菌安全性与基因有很大关系，药敏性、溶血性和细胞毒性仅是从不同表型试验评价其安全性，未能全面体现菌株安全性，现有植物乳植杆菌的安全性研究不够充分；更未涉及在改善缺锌层面的开发与研究，缺乏相关应用。益生菌的安全特性和益生特性在属种水平上都有差异，同种不同株的益生菌菌株，其安全性能和功效性能以及在作用机制上也存在差异，研究具新用途的益生菌仍是目前研究的难点。
鉴于此，特提出本发明。
发明内容
本发明的目的在于提供一株植物乳植杆菌及其在改善缺锌症状中的应用。该菌株可显著有效抑制缺锌导致的血锌含量降低，提升毛发锌含量和免疫球蛋白G（IgG）含量，可有效改善缺锌引起的厌食症状。
本发明是这样实现的：
第一方面，本发明提供了一株植物乳植杆菌，命名为Lactiplantibacillus plantarumLPPerfectus001，该菌株在本发明中简称为植物乳植杆菌LPPerfectus001，已保藏于广东省微生物菌种保藏中心；保藏地址为：广州市先烈中路100号大院59号楼5楼；保藏时间为2022年3月29日；保藏编号为GDMCC NO：62334；分类学命名为Lactiplantibacillus plantarum。
第二方面，本发明提供了上述植物乳植杆菌LPPerfectus001在制备改善缺锌症状的产品中的应用。
在一些实施例中，上述的缺锌症状为边缘性缺锌症状。
在一些实施例中，上述的缺锌症状具体表现为血锌含量降低、毛发锌含量降低、摄食量降低以及免疫球蛋白G含量降低中的任意一种或多种。
第三方面，本发明提供了上述植物乳植杆菌LPPerfectus001在制备改善厌食症状的产品中的应用。
在一些实施例中，上述厌食症状是由缺锌引起的摄食量降低。
上述改善缺锌症状和改善厌食症状的产品可以是食品，也可以是药品，对于产品的剂型可以为常规的溶液剂、片剂、丸剂、颗粒剂和粉末剂。
第四方面，本发明还提供了一种微生物菌剂，其含有上述植物乳植杆菌LPPerfectus001和/或上述植物乳植杆菌 LPPerfectus001的发酵产物。
采用上述方法制备获得的微生物菌剂中，植物乳植杆菌LPPerfectus001的活菌数不低于5×1011CFU/g。
在一些实施例中，上述微生物菌剂为液体菌剂、半液体菌剂、浓缩菌剂或固体菌剂。
在一些实施例中，上述微生物菌剂由上述植物乳植杆菌在发酵培养基中进行发酵培养后制得。
本发明具有以下有益效果：
本发明分离纯化获得了一株植物乳植杆菌LPPerfectus001，经过试验证明，该菌株具有抑制血锌含量降低，提升发锌含量和免疫球蛋白G（IgG）含量，可有效改善缺锌引起的厌食症状；同时其溶血反应为阴性，无致病性，对常见抗生素无耐药性，无毒力基因和可转移耐药基因，其安全性非常高。将该菌株可产业化制成菌粉，其中活菌数不低于5×1011CFU/g，因此可实现产业化，并具有良好的应用前景。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1为植物乳植杆菌LPPerfectus001宏观形态图；
图2为植物乳植杆菌LPPerfectus001微观形态图；
图3为植物乳植杆菌LPPerfectus001与其他菌株的序列对比结果；
图4为植物乳植杆菌LPPerfectus001的系统发育学分析结果；
图5为植物乳植杆菌LPPerfectus001基因染色体序列图谱；
图6为植物乳植杆菌LPPerfectus001溶血性测试图，其中1为阴性对照菌：英诺克李斯特氏菌（Listeria innocua）CICC10417；2为阳性对照菌：金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）CICC10473；3为样品：植物乳植杆菌LPPerfectus001；
图7为实施例6中各组SD大鼠血锌含量的对比结果；
图8为实施例6中各组SD大鼠毛发锌含量的对比结果；
图9为实施例6中各组SD大鼠每周摄食量的对比结果；
图10为实施例6中各组SD大鼠免疫球蛋白G（IgG）含量的对比结果。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
本实施例为植物乳植杆菌LPPerfectus001的分离、纯化，具体步骤如下：
1）采用生理盐水将四川传统泡菜样品做十倍梯度稀释，每个梯度取200μL均匀涂布于MRS固体平板培养基上。
上述MRS琼脂培养基为大豆蛋白胨10g、牛肉膏5g、酵母粉4g、葡萄糖20g、吐温801mL、磷酸氢二钠2g、无水乙酸钠5g、柠檬酸三胺2g、硫酸锰0 .02g、硫酸镁0 .1g、琼脂粉15g和和蒸馏水1000mL。
2）将涂布后的平板放于培养箱中37℃厌氧培养24～72h，挑取单菌落连续在上述相同的培养基上划线纯化2 次后，进行革兰氏染色和过氧化氢酶试验，将革兰氏阳性、过氧化氢阴性菌挑选出来做菌种鉴定。
实施例2
本实施例为植物乳植杆菌LPPerfectus001的鉴定
按照《FMIC-QO01-001-2015微生物学检测细菌多相鉴定检测方法》对植物乳植杆菌LPPerfectus001进行鉴定。结果如下：
1）形态学观察：
将植物乳植杆菌LPPerfectus001置于MRS培养基中培养，37℃厌氧培养24h，菌落白色，圆形、表面湿润，不透明，边缘整齐，宏观形态图如图1所示。
菌体呈杆状，0.5-0.7μm×1.0-2.5μm，单个或成对排列，革兰氏阳性，微观形态如图2。
2）生理生化鉴定：通过评价不同碳源培养基中的生长情况，辅助鉴定菌种，结果如表1所示；
表1 菌种鉴定结果
符号说明：“+”，阳性；“w”,弱阳性；“-”，阴性。
3）通过细菌16s rDNA基因序列测序，进行菌种鉴定。
①序列分析：植物乳植杆菌LPPerfectus001的16S rDNA序列如SEQ ID NO:1所示：
CGAACGAACTCTGGTATTGATTGGTGCTTGCATCATGATTTACATTTGAGTGAGTGGCGAACTGGTGAGTAACACGTGGGAAACCTGCCCAGAAGCGGGGGATAACACCTGGAAACAGATGCTAATACCGCATAACAACTTGGACCGCATGGTCCGAGCTTGAAAGATGGCTTCGGCTATCACTTTTGGATGGTCCCGCGGCGTATTAGCTAGATGGTGGGGTAACGGCTCACCATGCAATGATACGTAGCCGACCTGAGAGGGTAATCGGCCACATTGGGACTGAGACACGGCCCAAACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCCACAATGGACGAAAGTCTGATGGAGCAACGCCGCGTGAGTGAAGAAGGGTTTCGGCTCGTAAAACTCTGTTGTTAAAGAAGAACATATCTGAGAGTAACTGTTCAGGTATTGACGGTATTTAACCAGAAAGCCACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTGTCCGGATTTATTGGGCGTAAAGCGAGCGCAGGCGGTTTTTTAAGTCTGATGTGAAAGCCTTCGGCTCAACCGAAGAAGTGCATCGGAAACTGGGAAACTTGAGTGCAGAAGAGGACAGTGGAACTCCATGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGATATATGGAAGAACACCAGTGGCGAAGGCGGCTGTCTGGTCTGTAACTGACGCTGAGGCTCGAAAGTATGGGTAGCAAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCATACCGTAAACGATGAATGCTAAGTGTTGGAGGGTTTCCGCCCTTCAGTGCTGCAGCTAACGCATTAAGCATTCCGCCTGGGGAGTACGGCCGCAAGGCTGAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGAAGCTACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATACTATGCAAATCTAAGAGATTAGACGTTCCCTTCGGGGACATGGATACAGGTGGTGCATGGTTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTATTATCAGTTGCCAGCATTAAGTTGGGCACTCTGGTGAGACTGCCGGTGACAAACCGGAGGAAGGTGGGATGACGTCAAATCATCATGCCCCTTATGACCTGGGCTACACACGTGCTACAATGGATGGTACAACGAGTTGCGAACTCGCGAGAGTAAGCTAATCTCTTAAAGCCATTCTCAGTTCGGATTGTAGGCTGCAACTCGCCTACATGAAGTCGGAATCGCTAGTAATCGCGGATCAGCATGCCGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACACCATGAGAGTTTGTAACACCCAAAGTCGGTGGGGTAACCTTT。
②序列比对：与以NCBI数据库为基础的专业数据库（Update 2021.08.23）进行序列比对，结果如图3所示。
③系统发育学分析：采用MEGA软件，邻位连接法构建系统发育树，进行1000次的相似度重复计算，具体分析结果见下图，图中发育树节点只显示Bootsrap值大于50%数值，上标的“T”表示模式菌株。结果如图4所示
综合形态学特征、生理生化特性、16S rDNA分析，该菌株被鉴定为植物乳植杆菌（Lactiplantibacillus plantarum）。
实施例3
本实施例为植物乳植杆菌LPPerfectus001的全基因测序
将冷冻保存的植物乳植杆菌LPPerfectus001接种至MRS培养基中，37℃培养24h，传代2次后，取对数生长末期的菌体培养物置于无菌EP离心管内离心，经8000rpm离心5min（4℃）后收集菌体，弃上清，液氮速冻，待菌体冻透，转移放入-80℃冰箱，邮寄至检测机构开展二代和三代基因测序。
通过二代+三代全基因组测序对植物乳植杆菌LPPerfectus001进行测序，二代采用DNBSEQ测序平台，三代采用Nanopore测序平台，完成全基因组完成图组装，植物乳植杆菌LPPerfectus001基因组DNA为环状，有3个质粒，基因组大小为3,372,453 bp，GC含量为44.42%，共检测到16个核糖体RNA（rRNA）基因、73个转运RNA（tRNA）和3230个编码序列（CDS），基因染色体序列图如图5所示。
实施例4
本实施例为植物乳植杆菌LPPerfectus001表型以及基因组安全性评价
4.1植物乳植杆菌LPPerfectus001药物敏感性测试
按照《EFSA 5206 Guidance on the characterization of miroorganisms usedas feed additives or as production or ganisms-2.2》测试植物乳植杆菌LPPerfectus001药敏性，测试结果表2。如表2所示，植物乳植杆菌LPPerfectus001对氨苄西林（AMP）、庆大霉素（GM）、卡那霉素（KM）、红霉素（ERY）、克林霉素（CM）四环素（TE）、氯霉素（CHL）均敏感，无常见抗生素耐药性。
表2 植物乳植杆菌LPPerfectus001 MIC值及药敏性测试结果
4.2植物乳植杆菌LPPerfectus001溶血性测试
按照《SH-QO01-008-2019 微生物学检测微生物菌种溶血检测方法》测试植物乳植杆菌LPPerfectus001的溶血性，溶血反应为阴性，具体结果如图2所示。
4.3植物乳植杆菌LPPerfectus001大鼠致病性测试
参考《保健食品原料用细菌致病性检验方法-保健食品原料用菌种安全性检验与评价技术指导原则（2020年版）附录A》进行测试，测试结果如下：
（1）小鼠细菌致病性试验（腹腔注射）试验结果见表3。如表3 所示，给两种性别的小鼠腹腔注射1次植物乳植杆菌LPPerfectus001，每只小鼠注射菌量为1.03×107CFU/mL，在观察的21d期间，动物状态正常，无中毒体征和死亡等异常情况。
表3 小鼠细菌致病性（腹腔注射）试验结果
（2）小鼠细菌致病性（经口灌胃）试验结果见表4。如表4所示，给两种性别的小鼠灌胃3次植物乳植杆菌LPPerfectus001，灌胃菌量分别为2.51×108CFU/mL 与1.25×109CFU/mL，在观察的21d期间，动物状态正常，无中毒体征和死亡等异常情况。
表4小鼠细菌致病性（经口灌胃）试验结果
小鼠细菌致病性试验结果表明，植物乳植杆菌LPPerfectus001对两种性别的小鼠经口灌胃与腹腔注射后观察的21d期间，对动物一般健康情况、体重均无不良影响，无中毒体征和死亡等异常情况，植物乳植杆菌LPPerfectus001无致病性。
4.4植物乳植杆菌LPPerfectus001毒力基因和耐药基因分析
将实施例3测得的基因组序列与目前国内外主流的毒力基因数据库（VFDB）、耐药基因数据库（包括CARD、ecoh、megares、plasmidfinder、ResFinder、Argannot、NCBI）中存储的序列进行比对，分析是否存在毒力基因和耐药性基因。
植物乳植杆菌LPPerfectus001与毒力基因数据库序列比对结果见表5，与毒力基因DNA序列最高一致性（Identity）为76.8%，根据目前普遍采用的序列一致性高于85%作为潜在风险基因判断标准，没有符合标准的潜在毒力基因。因此，植物乳植杆菌LPPerfectus001基因组不存在毒力基因。
表5 植物乳植杆菌LPPerfectus001与毒力基因数据库序列比对结果
植物乳植杆菌LPPerfectus001与耐药性基因数据库（包括CARD、ecoh、megares、plasmidfinder、ResFinder、Argannot、NCBI）进行比对，挖掘基因组中耐药基因，对应结果见表6。根据目前普遍采用的序列一致性高于70%作为潜在风险基因判断标准，因此推测可能对表6中所示抗生素具有一定抗性。此外，没有潜在耐药基因被注释到位于质粒、前噬菌体、转座子上。因此可认为植物乳植杆菌LPPerfectus001无可转移耐药基因。
表6 植物乳植杆菌LPPerfectus001与数据库抗生素耐药性基因序列比对结果
结合药物敏感性测试、溶血性测试、小鼠致病性测试表型试验测试结果以及毒力基因和耐药基因分析可知，植物乳植杆菌LPPerfectus001溶血反应为阴性，无致病性，对常见抗生素无耐药性，基因分析显示无毒力基因和可转移耐药基因。综上，植物乳植杆菌LPPerfectus001是一株安全的菌株，符合人体安全性需求。
实施例5
本实施例为植物乳植杆菌LPPerfectus001菌粉制备，具体步骤如下：
5.1 种子活化：使用MRS培养基配制体积为15mL的一级培养基、体积为500mL的二级培养基，调整pH（6.50±0.02），121℃灭菌15min备用。具体如下：
一级种子扩增：超净工作台内在酒精灯火焰旁将种子冻存管接种于1支装有15mL培养基的试管中。（37±1）℃条件下，需氧培养（24±0.5）h；培养24h观察菌体形态是否正常，测定其pH至（3.84±0.01），OD600nm至（5.34±0.004）时，扩增成功。
二级种子扩增：取一级种子液，确认试管中培养基由透明液体变为悬浊液且试管底部有沉淀积累，在超净工作台内酒精灯火焰旁将一级种子液10mL接种于装有500mL MRS培养基的锥形瓶中，接种量2%（V/V）。（37±1）℃条件需氧下培养（24±0.5）h；培养24h观察菌体形态是否正常，测定其pH至（3.97±0.01），OD600nm至（4.09±0.001）时，扩增成功。
5.2发酵：将二级种子液（400mL）接种至装有20L 种子培养基的50L种子罐中。接种后，使用氨水调整初始pH至（6.50±0.02），无菌空气保持罐压0.02~0.03MPa，设置搅拌转速100rpm/min，（37±0.2）℃需氧发酵10-12h，当种子液pH值至（4.50±0.05）、OD600nm至（8.09±0.01）时进行移种。具如下：
接种发酵：采用火焰接种法将二级种子液（400mL）接种至装有20L 种子培养基的50L种子罐中。接种后，使用氨水调整初始pH至（6.50±0.02），无菌空气保持罐压0.02~0.03MPa，设置搅拌转速100rpm/min，（37±0.2）℃需氧发酵10-12h，当种子液pH值至（4.50±0.05）、OD600nm至（8.09±0.01）时进行移种。
接种前对移种管道再进行灭菌（121℃，15min），灭菌结束后温度降至（37±0.2）℃并恒温；按照接种量5%（V/V）通过压力差将所需的三级种子液移入发酵罐中完成接种，记录发酵罐内培养物总体积。
接种结束后加入氨水调整发酵液初始pH至（6.50±0.02），无菌空气保压0.02~0.03MPa，设置搅拌速度100rpm/min，开始发酵。培养条件：培养温度（37±0.2）℃，使用氨水控制pH值恒定(5.90±0.02)。
发酵过程中，当发酵液OD600值达到（17.00±1.00）时，并且连续两个取样点OD（间隔1h）值差异不显著（p＜0.05）判断为发酵终点即发酵结束，发酵结束后通过冷却水对发酵罐内培养物进行降温并开始离心。
5.3离心浓缩
启动离心机，待离心机稳定运行3~5min后，物料进入离心机进行离心分离（转速14000rpm/min）。
5.4干燥粉碎
将离心浓缩的菌泥冷冻干燥，干燥后的菌粉粉碎至40目，即可获得植物乳植杆菌LPPerfectus001菌粉。生产完检测水分含量、水分活度和活菌数，结果如表7所示。
表7植物乳植杆菌LPPerfectus001菌粉生产结果
| 批次 | 发酵液活菌数（×1011CFU/g） | 菌粉活菌数（×1011CFU/g） | 水分含量（%） | 水分活度 |
| 20210824001 | 3.19±0.17 | 10.18±0.84 | 4.5±0.1 | 0.126±0.003 |
| 20210914003 | 3.21±0.30 | 8.13±0.41 | 5.1±0.3 | 0.128±0.001 |
综上，经过两次测试，植物乳植杆菌LPPerfectus001可开展产业化，为实现菌株用途提供了可行性。
实施例6
本实施例为植物乳植杆菌LPPerfectus001对缺锌动物的干预作用
（1）动物：50g～60g SPF级刚断奶（21d龄）雄性SD大鼠24只（实验前均已称重并标号），分为正常组、模型组、植物乳植杆菌LPPerfectus001组，共3组，如表8所示。
（2）造模方式：
正常组：喂养正常饲料38天；
模型组：喂养低锌饲料31天+缺锌饲料7天；
植物乳植杆菌LPPerfectus001组：（低锌饲料+植物乳植杆菌LPPerfectus001）31天+（缺锌饲料+植物乳植杆菌LPPerfectus001）7天；
以上分组的大鼠每日喂食1次，其中正常含锌饲料、低锌饲料及缺锌饲料除锌含量不同外，其他成分完全相同；正常含锌饲料的锌含量为56mg/kg；低锌饲料的锌含量为10mg/kg；缺锌饲料的锌含量为3mg/kg。以上饲料均购置小黍有泰（北京）生物科技有限公司[许可证号：SCXK（京）2018-0006]。
（3）检测指标：每周摄食量；第39天杀鼠，检测血锌含量、毛发锌含量、体重、免疫球蛋白IgG含量。
表8 实验SD大鼠分组情况
血锌的检测结果如图7所示，与正常组相比（1.60mg/L），模型组的血锌含量显著下降至1.15mg/L（P＜0.001）。与模型组相比，植物乳植杆菌LPPerfectus001能显著抑制血锌含量降低（p＜0.001），达到1.65 mg/L，并接近正常组水平（P（正常组与实验组）=0.261），证明植物乳植杆菌LPPerfectus001可抑制缺锌饮食带来的血锌含量降低。
毛发锌的检测结果如图8所示，与正常组相比（161.41 mg/kg），模型组的毛发锌含量未出现下降（163.32 mg/kg）。但相对于正常组和模型组，植物乳植杆菌LPPerfectus001组毛发锌含量显著增加至184.04 mg/kg（p＜0.001）。证明植物乳植杆菌LPPerfectus001可增加正常和缺锌大鼠的毛发锌含量，说明植物乳植杆菌LPPerfectus001对缺锌引起的毛发锌含量降低有潜在的抑制作用。
摄食量的检测结果如图9所示，为期38天的喂养中，模型组大鼠每周摄食量均显著低于正常组；植物乳植杆菌LPPerfectus001组每周摄入量均高于模型组，其中第1周和5周的摄食量显著高于模型组，证明植物乳植杆菌LPPerfectus001可改善SD大鼠缺锌引起的厌食现象。
免疫球蛋白G的检测结果如图10所示，与正常组相比（0.67pg/mL），模型组的IgG含量出现下降现象（0.58 pg/mL）。但相对于正常组和模型组，植物乳植杆菌LPPerfectus001组可显著提高IgG含量至1.03 pg/mL（p＜0.05）。证明植物乳植杆菌LPPerfectus001可增加缺锌饮食大鼠的IgG含量，说明植物乳植杆菌LPPerfectus001对缺锌引起的免疫力降低有潜在的缓解作用。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一株植物乳植杆菌（Lactiplantibacillus plantarum），其特征在于，所述植物乳植杆菌命名为Lactiplantibacillus plantarumLPPerfectus001，其保藏编号为GDMCC NO：62334。
2.如权利要求1所述的植物乳植杆菌Lactiplantibacillus plantarumLPPerfectus001在制备改善缺锌症状的产品中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述缺锌症状为边缘性缺锌症状。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述缺锌症状表现为血锌含量降低、毛发锌含量降低、摄食量降低以及免疫球蛋白G含量降低中的任意一种或多种。
5. 如权利要求1所述的植物乳植杆菌Lactiplantibacillus plantarumLPPerfectus001在制备改善由缺锌引起的厌食症状的产品中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述厌食症状是由缺锌引起的摄食量降低。
7.一种微生物菌剂，其特征在于，其含有权利要求1所述的植物乳植杆菌Lactiplantibacillus plantarumLPPerfectus001和/或如权利要求1所述的植物乳植杆菌Lactiplantibacillus plantarumLPPerfectus001的发酵产物。
8.根据权利要求7所述的微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂中植物乳植杆菌Lactiplantibacillus plantarumLPPerfectus001的活菌数至少为5×1011CFU/g。
9.根据权利要求8所述的微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂为液体菌剂、半液体菌剂、浓缩菌剂或固体菌剂。
10.根据权利要求9所述的微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂由所述植物乳植杆菌在发酵培养基中进行发酵培养后制得。
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