CN116421632A - 乳酸片球菌在制备具有减脂作用的食品、保健品或药物中的应用 - Google Patents

乳酸片球菌在制备具有减脂作用的食品、保健品或药物中的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN116421632A
CN116421632A CN202310234373.4A CN202310234373A CN116421632A CN 116421632 A CN116421632 A CN 116421632A CN 202310234373 A CN202310234373 A CN 202310234373A CN 116421632 A CN116421632 A CN 116421632A
Authority
CN
China
Prior art keywords
pediococcus acidilactici
nss0302
fat
bacterial
use according
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202310234373.4A
Other languages
English (en)
Inventor
刘翠玲
李昊彦
朱英莲
高树军
王辉娟
王晓伟
张明俊
孙海燕
赵志强
杨庆利
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Qingdao Northen Biotechnology Co ltd
Original Assignee
Qingdao Northen Biotechnology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Qingdao Northen Biotechnology Co ltd filed Critical Qingdao Northen Biotechnology Co ltd
Priority to CN202310234373.4A priority Critical patent/CN116421632A/zh
Publication of CN116421632A publication Critical patent/CN116421632A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明公开了乳酸片球菌在制备具有减脂作用的食品、保健品或药物中的应用。所述乳酸片球菌为保藏编号为CCTCC NO：M 20221643的乳酸片球菌NSS0302，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，且具有耐酸、耐胆碱的性质，还具有很好的肠道黏附定植性和胆盐水解酶活性。所述乳酸片球菌NSS0302经实验验证，能够减少脂肪堆积、降低脂肪系数来达到抑制大鼠的体重增加，进而减肥的目的；还能够降低血清中TG、TC和LDL‑C水平，提高HDL‑C水平，从而动脉粥样硬化指数，达到起到降脂减脂的作用。因此，乳酸片球菌NSS0302具有广阔的应用前景。

Description

乳酸片球菌在制备具有减脂作用的食品、保健品或药物中的 应用
技术领域
本发明属于微生物技术领域，具体涉及乳酸片球菌在制备具有减脂作用的食品、保健品或药物中的应用。
背景技术
肥胖是由于食物摄入过多或机体代谢的改变而导致体内脂肪积聚过多造成体重过度增长并引起人体病理、生理改变或潜伏的病症。单纯性肥胖占肥胖者的95％以上，社会环境、心理因素以及运动量减少等均会造成脂肪的堆积，体重的增加。肥胖会引起其他一系列疾病，比如消化系统疾病、动脉粥样硬化等。肥胖者减肥最重要的是减少体内的脂肪，而现有的减脂产品种类繁多，有些还会对人体造成损害。
益生菌是可以通过定殖在人体内，改变宿主某一部位菌群组成的一类对宿主有益的活性微生物，其能够产生有利于机体健康的作用。目前发现，益生菌在增强免疫功能、抗肿瘤等方面均具有重要的作用。因此，通过益生菌来达到减脂的目的，非常有利于肥胖者的身心健康。
发明内容
本发明的目的在于提供乳酸片球菌在制备具有减脂作用的食品、保健品或药物中的应用。所述乳酸片球菌NSS0302具有很好的减脂效果。
为实现上述发明目的，本发明采用以下技术方案予以实现：
本发明提供了乳酸片球菌在制备具有减脂作用的食品、保健品或药物中的应用。
进一步的，所述乳酸片球菌为保藏编号为CCTCC NO：M 20221643的乳酸片球菌NSS0302。
进一步的，所述乳酸片球菌NSS0302的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。
进一步的，所述食品、保健品或药物中包含1.0×106CFU/ml乳酸片球菌NSS0302菌粉。
进一步的，所述乳酸片球菌NSS0302菌粉的制备方法为：将乳酸片球菌NSS0302活化后，以3％(v/v)的接种量接种于培养基中，37℃-40℃，培养16h-24h得到的发酵液，经低温离心、清洗后，收集菌泥与冻干保护剂以1：2的质量体积比混匀后，干燥过筛，得到乳酸片球菌NSS0302菌粉。
进一步的，所述乳酸片球菌NSS0302能够通过抑制体重增加、减少脂肪堆积、降低脂肪系数达到减脂的目的。
进一步的，所述食品、保健品或药物中还包含载体或辅料；所述保健品或药物剂型选自粉剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、悬浮剂制剂形式。
本发明还提供了乳酸片球菌在制备防治由肥胖、高血脂引起的动脉粥样硬化的药物中的应用，所述乳酸片球菌为乳酸片球菌NSS0302。
进一步的，所述乳酸片球菌NSS0302能够降低血清中TG、TC和LDL-C水平，提高HDL-C水平，从而降低动脉粥样硬化指数。
进一步的，所述药物中包含菌含量不少于1×107cfu/g的乳酸片球菌NSS0302。
与现有技术相比，本发明具有以下优点和技术效果：
本发明从四川三台县传统农家发酵豆豉分离到一株全新的乳酸片球菌NSS0302，其安全性强，无致病性，且具有耐酸、耐胆碱的性质，还具有很好的肠道黏附定植性和胆盐水解酶活性，能够有效用于体内水解肠道中的胆盐，促使更多的胆固醇向胆汁酸的转变，从而降低血清中胆固醇的含量。所述乳酸片球菌NSS0302经实验验证，能够减少脂肪堆积、降低脂肪系数来达到抑制大鼠的体重增加，进而减肥的目的。另外，所述乳酸片球菌NSS0302还能够降低血清中TG、TC和LDL-C水平，提高HDL-C水平，从而动脉粥样硬化指数，达到起到降脂减脂的作用。因此，乳酸片球菌NSS0302具有广阔的应用前景。
附图说明
图1为乳酸片球菌NSS0302的镜检照片。
图2为乳酸片球菌NSS0302的耐酸存活率。
图3为乳酸片球菌NSS0302耐胆盐存活率。
图4为乳酸片球菌NSS0302的抑菌圈。
图5为乳酸片球菌NSS0302的胆盐水解酶活力测定。
图6为实验期间大鼠的体重变化。
具体实施方式
结合以下具体实例对本发明的技术方案作进一步详细的说明。
下述实施例中，如无特殊说明，所使用的实验方法均为常规方法，所用材料、试剂等均可从生物或化学试剂公司购买。
实施例1、乳酸片球菌NSS0302的活化、筛选、鉴定
1、菌株的活化培养
以来源于3份四川三台县传统农家发酵豆豉为样品。将多份豆豉按5％的体积分别接种到MRS液体培养基中，放入37℃培养箱中恒温培养24h。无菌试管中加入1.0mL菌液和9.0mL 0.85％无菌生理盐水，稀释成浓度为10-1的菌液，重复上述操作依次将菌液稀释成浓度为10-2、10-3、10-4、10-5四个梯度，用无菌吸管各吸取0.1mL的10-3、10-4、10-5三个浓度梯度的菌液涂于MRS固体培养基上，每个浓度梯度做3个平行试验。37℃静置培养24h。
2、菌株的分离纯化
无菌的接种环挑取大小、形态、颜色不同的单个菌落，在MRS固体培养基上划线培养，进一步纯化菌株，37℃培养24h。待平板上长出菌落后，重复划线直至长出生长状态好的单菌落。
3、菌株的镜检
挑取生长状态好的单个菌落进行革兰氏染色。染色后在显微镜下观察菌株的颜色形态特征(图1)，进而筛选得到一株编号为NSS0302的菌株。
4、生理生化特征鉴定
生理生化特征观察参照《常见细菌系统鉴定手册》和《乳酸细菌分类鉴定及实验方法》方法进行。具体的生理生化特性见表1、2。
表1生理生化检测结果
特征 运动性 接触酶 氧化酶 过氧化氢酶 VP反应 葡萄糖产气
结果 - - - - - -
特征 硝酸盐还原实验 淀粉酶 蛋白酶 吲哚试验 甲基红试验 精氨酸双水解酶
结果 - - - - + +
表2糖发酵结果
Figure BDA0004121477260000031
Figure BDA0004121477260000041
注：+为阳性结果，－为阴性结果。
5、16S rRNA鉴定
提取菌株NSS0302的DNA作为模板，利用细菌16S rRNA通用引物进行扩增，扩增片段送至生物公司进行序列测定，测序结果如SEQ ID No.1所示。BLAST比对结果表明，菌株NSS0302与Pediococcus acidilactici的序列相似性为99.72％，因此结合上述实验结果，判断菌株NSS0302为乳酸片球菌。
将筛选到的菌株NSS0302进行菌种保藏，所述乳酸片球菌NSS0302的保藏单位：中国典型培养物保藏中心(CCTCC)；地址：中国.武汉.武汉大学；保藏日期：2022年10月24日；乳酸片球菌Pediococcus acidilactici的保藏编号为CCTCC NO：M 20221643。
实施例2、乳酸片球菌NSS0302的性能测定
1、耐酸实验
MRS液体培养基中加入胃蛋白酶(3.5g/L)，用0.5mol/L的盐酸调节培养基pH为3.0和2.0，用0.22μm膜过滤除去杂质，作为人工模拟胃液。将活化好的乳酸片球菌NSS0302按6％的接种量接种于10.0mL MRS液体培养基里，37℃恒温培养24h，离心收集菌泥，弃上清液，在菌泥中加入0.85％生理盐水制成菌悬液，各取1.0mL菌悬液分别加入到9.0mL pH 2.0和pH 3.0的MRS液体培养基中，37℃恒温培养2h、4h。稀释涂布计数，37℃恒温培养24h。根据公式计算菌株存活率(SR)：
SR＝SX/S1
其中，S1：培养0h后菌液的活菌数；SX：培养Xh后菌液的活菌数。
结果如图2所示，乳酸片球菌NSS0302在pH 2.0和pH 3.0的条件下，4h后的存活率仍能达到90％以上，说明其具有良好的耐酸特性。
2、耐胆盐实验
MRS液体培养基中加入胰蛋白酶10.0g/L，一份加入0.15％的牛胆酸钠，一份加入0.30％的牛胆酸钠，用0.5mol/L的NaOH溶液调节pH为8.0，经0.22μm滤膜过滤除去杂质。将活化好的乳酸片球菌NSS0302按6％接种量接种于10.0mL MRS液体培养基中，37℃恒温培养24h，离心收集菌泥，弃上清液，在菌泥中加入0.85％生理盐水制成菌悬液，各取1.0mL菌悬液分别加入到上述配制的MRS液体培养基中，37℃恒温静置培养4h。稀释涂布，37℃恒温培养24h。根据公式计算菌株存活率(SR)：
SR＝SX/S1
其中，S1：培养0h后菌液的活菌数；SX：培养4h后菌液的活菌数。
结果如图3所示，乳酸片球菌NSS0302在0.3％的条件下，4h后的存活率仍能达到105.3％以上，说明其具有良好的耐胆盐特性。
3、抑菌实验
病原指示菌：大肠杆菌(BNCC336902)，沙门氏菌(BNCC103134)，金黄色葡萄球菌(BNCC186335)和单增李斯特菌(BNCC336877)，志贺氏菌(CCTCC AB91106)。在LB琼脂板上活化3代，挑取单菌落接种至LB肉汤于37℃恒温摇床200r/min扩增培养12h。采用琼脂扩散法进行抑菌试验。
抑菌试验(图4)结果，乳酸片球菌NSS0302对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、单增李斯特菌、志贺氏菌等5种常见的致病菌都表现出各自独特的抑菌能力，抑菌圈直径为15.69㎜到20.01㎜。
4、肠道黏附定植性
采用Caco-2细胞模型确定肠道的黏附定植性，设置NSS0302、与外采乳酸片球菌1号、乳酸片球菌2号三个实验组，重复实验，统计50个Caco-2细胞上的黏附数，以平均每个Caco-2细胞上黏附的菌数来判定每个菌在肠道内的黏附能力。
肠道黏附实验结果如表3所示，Caco-2细胞上黏附的乳酸片球菌NSS0302菌株数量最多为13.4±2.5个/细胞，证明其可以有效黏附在Caco-2细胞上，外采乳酸片球菌2号菌株最少，为8.8±1.9个/细胞。乳酸菌有效的黏附定植在肠黏膜上才可以发挥维持机体微生态平衡的重要作用，进而对机体产生有益作用，说明乳酸片球菌NSS0302具有很好的肠道黏附定植性。
表3Caco-2细胞黏附的菌株数量
Figure BDA0004121477260000051
5、胆盐水解酶活力定性实验
在MRS液体培养基中添加0.30％牛胆酸钠、0.20％羟基乙酸钠(THIO)，0.4g/LCaCl2和3.00％琼脂，121℃灭菌15min，厌氧培养48h，取大小适宜的无菌滤纸片，滴加10.0uL菌液(NSS0302、与外采乳酸片球菌1号、乳酸片球菌2号)的滤纸片放在培养基表面，37℃厌氧培养72h后，观察滤纸片的周围有无白色沉淀物生成。
实验结果表明(图5)，只有NSS0302能够在滤纸片周围产生明显的白色沉淀圈，其他两种外采的乳酸片球菌产生的白色沉淀不明显或几乎没有，证明NSS0302具有较好的胆盐水解酶活性，可以水解肠道中的胆盐，促使更多的胆固醇向胆汁酸的转变，从而降低血清中胆固醇的含量。
实施例3：乳酸片球菌NSS0302菌粉的制备
将乳酸片球菌NSS0302接种于MRS液体培养基中，37℃培养16h，连续活化三代后，按3％(v/v)的接种量接种于MRS液体培养基中，37℃下培养9h，经12000rpm，4℃离心，得到菌泥，超纯水清洗后将菌泥加入无菌的冻干保护剂(配方：30g海藻糖，10g脱脂乳粉，0.2g甘氨酸，1g吐温80，1000mL纯水)中，其中保护剂与菌泥的体积质量比为2：1，充分混合，真空冷冻干燥，得到冻干菌粉，再经80目筛网进行摇摆式粉碎，最终得到乳酸片球菌NSS0302冻干菌粉。
乳酸片球菌NSS0302的发酵液水平达到1.4×1010cfu/ml，离心收率2.09％，菌泥菌量8.9×1011cfu/g，菌粉菌量1.53×1012cfu/g。菌粉真空保存在-18℃的冰箱中以备后用。
实施例4：动物试验
1、大鼠模型建立
实验前，供试SD大鼠在实验环境下适应性1周，按体重随机分为2组，其中空白对照组(control group,CG)10只，喂饲基础饲料；其余45只为造模组(modeling group,MG)，喂饲高脂饲料(基础饲料80％，猪油10％，蛋黄粉10％)，每周称量一次大鼠体重。
造模的实验结果(表4)表明，造模结束后，造模组(MG)大鼠体重增加明显，相对于空白对照组(CG)有极显著差异(p<0.01)。在摄食量方面，造模组的大鼠总摄食量有显著下降，但食物利用率则大幅度提高，说明实验所配置的高脂营养饲料对促进大鼠肥胖有显著性作用，实验造模结果是成功的。
表4高脂饲料对大鼠造模的影响(x±SD)
Figure BDA0004121477260000071
注：“*”表示与造模组比较在P<0.05水平差异显著，“**”表示在p<0.01水平差异显著。
2、NSS0302菌粉对大鼠体重、摄食量和食物利用率的影响
造模成功后(30d)取其中40只SD大鼠随机分成4组，每组10只，分别为肥胖模型组(obesity model group,OG)，继续喂饲高脂饲料。NSS0302菌粉低剂量组(low dose group,LG)，NSS0302菌粉中剂量组(middle dose group,MG)，NSS0302菌粉高剂量组(high dosegroup,HG)，喂饲含不同剂量(0.5g、1.0g、2.0g)NSS0302菌粉的高脂饲料。实验期间大鼠自由饮水和取食，周期为6周。实验期间隔天称一次体重，记录每组动物的给食量、剩食量和撒食量。
判定减肥效果一般以体重的减轻或者体重增长的减缓作为重要的指标。见图6，试验结束时，NSS0302菌粉低、中、高剂量处理组大鼠体重以及增重，与肥胖模型组相比均表现出显著性差异(P<0.05)，其中高剂量NSS0302菌粉处理组大鼠体重最轻，增重最少，而且中、高剂量组处理大鼠体重与空白对照组比较无显著性差异。试验结果说明NSS0302菌粉具有抑制大鼠体重增加的减肥效果，并且存在剂量效应。
另一方面，摄食量和食物利用率也是导致大鼠体重变化的重要原因。见表5，各处理组大鼠在试验期间摄食量均无明显的变化，无显著性差异，但不同的实验组对食物的利用率有所差异，肥胖模型组食物的利用率最高，为13.1％，大鼠增重明显；NSS0302菌粉中、高剂量组食物利用率则比较低。说明NSS0302菌粉对大鼠体重的减轻不是通过减少大鼠对食物的摄取量来达到目的的。
表5NSS0302菌粉菌粉对大鼠体重、摄食量和食物利用率的影响(x±SD)
Figure BDA0004121477260000072
Figure BDA0004121477260000081
注：“*”表示同一列各组与肥胖模型组比较在P<0.05水平差异显著，“**”表示在P<0.01水平差异显著。
3、NSS0302菌粉对营养肥胖型大鼠体内脂肪的影响
实验结束时禁食12h，处死大鼠快速收集血液，解剖大鼠，观察大鼠体内脂肪情况及肝、肾、脾等主要脏器变化情况，快速分离大鼠肝脏及体脂(睾丸及肾周脂肪垫)，生理盐水涮洗后吸于水分迅速称重，所有样品置-20℃冻存备用。
见表6，结果表明，肥胖模型组大鼠的肾周脂肪垫和睾丸周脂肪垫重量均明显高于空白对照组，证明了高脂营养饲料能促进脂肪在大鼠体内的堆积，其总脂肪重与空白对照组有显著性差异(P<0.05)；而喂饲含不同剂量NSS0302菌粉高脂营养饲料则能改善大鼠体内的脂肪指标，除低剂量处理组外，NSS0302菌粉中、高剂量处理组均能明显减少脂肪在大鼠体内的堆积，其总脂肪重已接近于正常大鼠体内的脂肪重量，说明NSS0302菌粉对单纯营养性肥胖大鼠有显著的减肥效果。
另一方面，脂肪系数是也是判定大鼠体内脂肪的多少及大鼠肥胖程度的重要指标。表6的数据也表明，喂饲含有不同剂量NSS0302菌粉高脂营养饲料的大鼠脂肪系数都低于肥胖模型组大鼠；而与空白对照组比较，低剂量NSS0302菌粉组大鼠脂肪系数有明显降低，中、高剂量大鼠的脂肪系数则呈现出显著降低趋势，与空白对照组无明显差异。
表6NSS0302菌粉对大鼠脂肪重和脂肪系数的影响(x±SD)
Figure BDA0004121477260000082
Figure BDA0004121477260000091
注：“*”表示同一列各组与肥胖模型组比较在P<0.05水平差异显著，“**”表示在P<0.01水平差异显著。
4、NSS0302菌粉对营养肥胖性大鼠血清的影响
血液4℃下2000r/min离心15min，取上清液检测生化指标。动物体内血清指标的检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)测定均按试剂盒方法进行测定。
实验结果(表7)表明：与空白对照组相比，肥胖模型组大鼠的血清TC有明显增加，达到了极显著差异(P<0.01)，TG指标也有显著性差异(P<0.05)；而HDL-C指标则有所下降，说明高脂营养饲料有明显促进大鼠肥胖的作用。喂饲含有不同剂量NSS0302菌粉的饲料后，各处理组血清TC、TG水平均有明显下降，其中TC与肥胖模型组相比有极显著差异(P<0.01)，虽然与空白对照组相比也有显著的差异，但已经逐渐接近空白对照组的水平；低剂量NSS0302菌粉处理组TG与肥胖模型组相比无显著性差异，中、高剂量NSS0302菌粉处理组的TG指标与肥胖模型组有显著差异，与空白对照组却已无显著性差异，表明NSS0302菌粉处理对大鼠体内血清TG的抑制效果要优于TC。
表7NSS0302菌粉对肥胖大鼠血清指标的影响(x±SD)
Figure BDA0004121477260000092
注：“*”表示同一列各组与肥胖模型组比较在P<0.05水平差异显著，“**”表示在P<0.01水平差异显著。
实验结果表明，喂饲含不同剂量NSS0302菌粉高脂营养饲料的各组实验大鼠HDL-C指标均有明显提高，与肥胖模型组相比表现出极显著差异(P<0.01)，说明NSS0302菌粉对提高大鼠HDL-C水平有显著效果；另一方面，LDL-C则有显著下降趋势，尤其是高剂量NSS0302菌粉处理组与肥胖模型组有极显著差异(P<0.01)，其LDL-C指标已接近于空白对照组。而且，肥胖模型组大鼠的AI值明显高出空白对照组几倍(表7)，表明喂饲高脂营养饲料会显著增加大鼠患动脉粥样硬化相关疾病的几率；而在高脂营养饲料中添加NSS0302菌粉粉后，各组实验大鼠的动脉粥样硬化指数明显降低，尤其是高剂量NSS0302菌粉处理组的AI值已降低至接近空白对照组的水平。
本实验的研究结果表明，NSS0302菌粉能呈剂量关系地抑制喂饲高脂营养饲料SD大鼠体重的增加，同时能改善其血清指标的质量，起到降脂减脂的作用。
以上实施例仅用于说明本发明的技术方案，而非对其进行限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的普通技术人员来说，依然可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明所要求保护的技术方案的精神和范围。

Claims (10)

1.乳酸片球菌在制备具有减脂作用的食品、保健品或药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述乳酸片球菌为保藏编号为CCTCC NO：M20221643的乳酸片球菌NSS0302。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述乳酸片球菌NSS0302的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。
4.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述食品、保健品或药物中包含1.0×107CFU/ml乳酸片球菌NSS0302菌粉。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述乳酸片球菌NSS0302菌粉的制备方法为：将乳酸片球菌NSS0302活化后，以3％(v/v)的接种量接种于培养基中，37℃-40℃，培养16h-24h得到的发酵液，经低温离心、清洗后，收集菌泥与冻干保护剂以1：2的质量体积比混匀后，干燥过筛，得到乳酸片球菌NSS0302菌粉。
6.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述乳酸片球菌NSS0302能够通过抑制体重增加、减少脂肪堆积、降低脂肪系数达到减脂的目的。
7.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述食品、保健品或药物中还包含载体或辅料；所述保健品或药物剂型选自粉剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、悬浮剂制剂形式。
8.乳酸片球菌在制备防治由肥胖、高血脂引起的动脉粥样硬化的药物中的应用，其特征在于，所述乳酸片球菌为权利要求2所述的乳酸片球菌NSS0302。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述乳酸片球菌NSS0302能够降低血清中TG、TC和LDL-C水平，提高HDL-C水平，从而降低动脉粥样硬化指数。
10.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述药物中包含菌含量不少于1×107cfu/g的乳酸片球菌NSS0302。
CN202310234373.4A 2023-03-13 2023-03-13 乳酸片球菌在制备具有减脂作用的食品、保健品或药物中的应用 Pending CN116421632A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202310234373.4A CN116421632A (zh) 2023-03-13 2023-03-13 乳酸片球菌在制备具有减脂作用的食品、保健品或药物中的应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202310234373.4A CN116421632A (zh) 2023-03-13 2023-03-13 乳酸片球菌在制备具有减脂作用的食品、保健品或药物中的应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN116421632A true CN116421632A (zh) 2023-07-14

Family

ID=87082333

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202310234373.4A Pending CN116421632A (zh) 2023-03-13 2023-03-13 乳酸片球菌在制备具有减脂作用的食品、保健品或药物中的应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN116421632A (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN117866844A (zh) * 2024-01-18 2024-04-12 朗恒科技集团有限公司 一株乳酸片球菌lh01及其应用
CN118620807A (zh) * 2024-08-15 2024-09-10 山东健源生物科技有限公司 一株具有减肥、降血糖作用的乳酸片球菌及其后生元和应用

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN117866844A (zh) * 2024-01-18 2024-04-12 朗恒科技集团有限公司 一株乳酸片球菌lh01及其应用
CN118620807A (zh) * 2024-08-15 2024-09-10 山东健源生物科技有限公司 一株具有减肥、降血糖作用的乳酸片球菌及其后生元和应用

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN116024130B (zh) 一株降血尿酸发酵乳杆菌a21215及其应用
CN109929773B (zh) 一株可用于富硒培养的双歧杆菌及其活性蛋白和应用
CN111534446A (zh) 罗伊氏乳杆菌及其应用
CN110157645B (zh) 一种唾液乳杆菌y4及其应用
CN112574924B (zh) 一种枯草芽孢杆菌菌株及其微生态制剂和应用
CN116421632A (zh) 乳酸片球菌在制备具有减脂作用的食品、保健品或药物中的应用
CN110495522B (zh) 一种饲料用中药微生态制剂
CN114085789B (zh) 戊糖片球菌ma.wtpqj01及其应用
CN114752529B (zh) 植物乳杆菌hom3201菌株及其活菌制剂、制备方法和用途
CN109022313B (zh) 一株植物乳杆菌
CN116179440B (zh) 一株鸡源贝莱斯芽孢杆菌及其应用
CN117143767A (zh) 可调节肠道菌群的母乳源发酵粘液乳杆菌msjk0025及其应用
CN116970512A (zh) 一种植物乳杆菌、植物乳杆菌的培养方法及其应用
CN116987645A (zh) 一种植物乳植杆菌（Lactiplantibacillus plantarum）HEPRO-185及其应用
CN111154677B (zh) 嗜酸乳杆菌及其应用
CN114806953A (zh) 一种具有改善1型糖尿病特性的格氏乳杆菌
CN113980838A (zh) 一株高效定向表达细菌素m6的枯草芽孢杆菌及其应用
CN114015598A (zh) 分离自藏灵菇的乳酸片球菌及其在防治轮状病毒感染中的应用
CN117683697B (zh) 一株贝莱斯芽孢杆菌y01及其在抑菌和提高动物生长性能中的应用
CN114836338B (zh) 一株鼠李糖乳杆菌a5及其应用
CN117070423B (zh) 一株植物乳植杆菌LPPerfectus001及其应用
CN114262671B (zh) 一株可用于防治胆汁淤积型肝病的瑞士乳杆菌及其应用
CN117535185B (zh) 一株适用于鹰嘴豆发酵的副干酪乳酪杆菌fmbl l23249 fjx及其应用
CN114395514B (zh) 一株嗜酸乳杆菌、菌剂及其应用
CN115975846B (zh) 一株沙阿霉素链霉菌、其微生态制剂及其制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination