CN117044935A - 一种具有降尿酸功能的营养组合物配方及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开一种具有降尿酸功能的营养组合物配方及其制备方法。所述的营养组合物配方包括CaHMB(β‑羟基‑β‑甲基丁酸钙)和大豆肽；CaHMB含量为1％‑5％(w/w),大豆肽含量为80‑95％(w/w)。本发明中通过全细胞催化能够将大豆分离蛋白水解得到500‑3000Da的低分子量大豆肽，从而使大豆肽具备较好的降尿酸的功能；将大豆肽与HMB钙联合使用，不但加强了大豆肽的降尿酸功能；同时由于大豆肽是优质蛋白来源原料、HMB钙具有促进肌肉生长，使得该配方更能适用于肌肉衰减患者、免疫力低下患者、肿瘤患者的高尿酸等多种人群。

Description

一种具有降尿酸功能的营养组合物配方及其制备方法
技术领域
本发明涉及降尿酸营养功能性食品领域，特别是涉及一种具有降尿酸功能的营养组合配方及其制备方法。
背景技术
高尿酸血症是指机体嘌呤代谢紊乱，尿酸分泌过多或肾脏排泄功能障碍，使尿酸在血液中积聚的状态。人体内尿酸的产生主要有两种途径：一是通过摄入富含嘌呤类食物分解代谢产生(外源性)，占人体内尿酸总量的20％；二是通过体内核蛋白分解产生(内源性)，占总量的80％。肥胖、糖尿病、高血压、高血脂、经常饮水过少、经常进行无氧运动而不事后按摩舒缓、先天体质特殊的这些人群，很容易在新陈代谢过程中，无法将摄取的嘌呤进一步代谢成为可以从肾脏中经尿液排出的排泄物，这些物质最终形成过多的尿酸，再经血液流向结缔组织，以结晶体积存于其中。近年来，高尿酸血症和痛风的患病率持续增高，并呈现年轻化的趋势，18-35岁的年轻高尿酸血症及痛风患者占比已达60％。
大豆肽是大豆蛋白的水解产物，主要功能性营养物质包括多肽、寡肽、游离氨基酸和糖类，其相对分子质量低，易于消化吸收。丰富的小肽能调节矿物质、脂类代谢，降低胆固醇，提高免疫力。大豆肽的加工一般是使用酶来水解大豆蛋白，从而得到分子量更低的大豆肽。全细胞本身可以给酶提供一个天然环境从而更有利于酶的稳定；全细胞中存在多酶体系与辅酶因子，可避免外源添加这些物质，并适用于多步复杂反应等等。目前，全细胞催化已经用于多种酯化反应的研究，包括拆分天然化合物、风味物质的产生、合成生物柴油、抗癌药物制备等方面。
HMB广泛存在于柑橘类水果、某些蔬菜如花椰菜、豆科类植物如紫苜蓿以及某些鱼类海产品。HMB钙是一种人体基本的微量含支链氨基酸的代谢产物，在肌肉组织的蛋白质合成中起重要作用，可促进肌肉细胞生长，提高斜体组织。HMB钙作为高强度运动者一种新型的合成代谢营养剂，能使人体脂肪减少，减少肌肉蛋白质消耗，有助肌肉恢复和减少因过度劳累导致肌肉损伤的作用，可提高运动强度和耐力。HMB钙也是一种很强的免疫受激剂，能增强人体免疫功能，降低血胆固醇的作用，可减少疾病，防衰老，增强体质，提高生活质量。
发明内容
基于此，本发明提供了一种降尿酸功能的营养组合物配方。本发明中通过全细胞催化能够将大豆分离蛋白水解得到500-3000Da的低分子量大豆肽，从而使大豆肽具备较好的降尿酸的功能；将大豆肽与HMB钙联合使用，不但加强了大豆肽的降尿酸功能；同时由于大豆肽是优质蛋白来源原料、HMB钙具有促进肌肉生长，使得该配方更能适用于肌肉衰减患者、免疫力低下患者、肿瘤患者的高尿酸等多种人群且可以与大豆肽产生协同降尿酸的效果。
具体技术方案如下：
一种具有降尿酸功能的营养组合物配方，其特征在于所述的营养组合物配方包括CaHMB(β-羟基-β-甲基丁酸钙)和大豆肽；CaHMB含量为1％-5％(w/w),大豆肽含量为80-95％(w/w)。
本发明还提供一种具有免疫调节功能的药食同源组合发酵物的制备方法。
具体技术方案如下：
一种具有降尿酸功能的营养组合配方的制备方法，包括以下步骤：1)将发酵乳杆菌CECT5716接种于乳酸菌培养基，30-40℃下培养96h，得到发酵培养液；
2)将1)所述的发酵培养液在5000rpm下离心5-15mi n，离心后冻干，得到发酵乳杆菌CECT5716全细胞催化剂；
3)将大豆分离蛋白按照料液比1:5-1:10g/mL加入纯化水，2450rpm下剪切均质，均质得到大豆分离蛋白溶液；
4)将蔗糖、大豆油分别按照2-5％g/mL；3-6％g/mL的料液比加入到3)中的大豆分离蛋白溶液中，调节pH在4.5-5.5，进行UHT灭菌，灭菌条件为110℃灭菌30s；灭菌后冷却到30℃以下，得到大豆分离蛋白培养基；
5)将2)所述的发酵乳杆菌CECT5716全细胞催化剂0.001-0.005％的料液比加入到4)中的大豆分离蛋白培养基，在常温(20-35℃)下培养48-96h，得到大豆蛋白水解液；
6)将5)中的大豆蛋白水解液进行喷雾干燥，即得到大豆肽；
7)将CaHMB与大豆肽进行混合，加入或不加入食品添加剂，得到营养组合物配方；
8)将CaHMB与大豆肽进行混合后，按照1-25％g/mL的料液比加入水，加入或者不加入食品添加剂，进行灭菌，得到液体型的营养组合物配方；
本发明的具有降尿酸功能的营养组合物配方的制备，具有以下优点和有益效果：
本发明的发明人通过大量研究优选出最佳微生物，通过全细胞催化能够将大豆分离蛋白水解得到500-3000Da的低分子量大豆肽，从而使大豆肽具备较好的降尿酸的功能；将大豆肽与HMB钙联合使用，不但加强了大豆肽的降尿酸功能；同时由于大豆肽是优质蛋白来源原料、HMB钙具有促进肌肉生长，使得该配方更能适用于肌肉衰减患者、免疫力低下患者、肿瘤患者的高尿酸等多种人群。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步地具体详细描述，但本发明的实施方式不限于此，对于未特别注明的工艺参数，可参照常规技术进行。
实施例1：不同微生物对大豆分离蛋白水解的影响
1.大豆肽的制备
1.1将发酵乳杆菌CECT5716(A组)、嗜酸乳杆菌NCFM(B组)、动物双岐杆菌BB12(C组)、乳双岐杆菌HN091(D组)、乳双岐杆菌B i07(E组)分别接种于乳酸菌培养基，30℃下培养96h，得到发酵培养液；
1.2将1.1发酵培养液在5000rpm下离心15mi n，离心后冻干，得到5种微生物全细胞催化剂；
1.3将1.2大豆分离蛋白按照料液比1:10g/mL加入纯化水，2450rpm下剪切均质15mi n，得到大豆分离蛋白溶液；
1.4将蔗糖、大豆油分别按照5％；5％g/mL的料液比加入到1.3中的大豆分离蛋白溶液中，调节pH在5.0，进行UHT灭菌，灭菌条件为110℃灭菌30s；灭菌后冷却到30℃以下，得到大豆分离蛋白培养基；1.5将1.2所述的微生物全细胞催化剂0.002％g/mL的料液比加入到1.4中的大豆分离蛋白培养基，在常温25℃下培养72h，得到大豆蛋白水解液；
1.6将1.5中的大豆蛋白水解液进行喷雾干燥，即得到5种大豆肽；
2.大豆肽分子量测定
将1.6中的5种大豆肽按照GBT22729，送给第三方检测公司进行检测分子量分布，同时从市场上采购2款不同型号的大豆肽做对比(酶解工艺)。
3实验结果
表1不同大豆肽的分子量分布
从表1中可以看出，A组的大豆肽分子量分布最集中，平均分子量最低。因而考虑A组大豆肽是否有特殊的功效。
实施例2：大豆肽对高尿酸血症小鼠的影响
1.试验材料
SPF级昆明种小鼠90只，岁龄4w，体重200±10g，雌雄各半，购于广东金域医学检验中心。
2.试验方案
(1)正常对照组:以普通鼠粮饲养小鼠，自由饮水，持续21d。
(2)高尿酸模型组:试验开始，每只小鼠以相同剂量腹腔注射12mg/mL氧嗪酸钾，同时灌胃0.18g/mL酵母膏，持续7d。第8d开始每只小鼠灌胃生理盐水200μL,持续14d。
(3)治疗组:试验开始，每只小鼠以相同剂量腹腔注射12mg/mL氧嗪酸钾,同时灌胃0.18g/mL酵母膏，持续7d。第8d开始，每只小鼠分别灌胃0.4g/(kg*bw)的大豆肽(具体实施实例1中的A组-H组大豆肽)持续14d。
每7d一次尾静脉取血0.5mL，4000r/min离心10min，取血清。取血前所有小鼠空腹一夜，按尿酸试剂盒说明书操作，检测血清中尿酸含量。
3.试验结果
表2大豆肽对高尿酸小鼠的影响
注：*：与空白组比P＜0.05，**：P＜0.01；#：与高尿酸模型组比P＜0.05，##：与高尿酸模型组比P＜0.01。
从表2中可以看出，治疗组A(发酵乳杆菌CECT5716大豆肽)能够明显降低高尿酸小鼠的尿酸。
实施例3：大豆肽剂量对高尿酸血症小鼠的影响
1.试验材料
SPF级昆明种小鼠60只，岁龄4w，体重200±10g，雌雄各半，购于广东金域医学检验中心。
2.试验方案
(1)正常对照组:以普通鼠粮饲养小鼠，自由饮水，持续21d。
(2)高尿酸模型组:试验开始，每只小鼠以相同剂量腹腔注射12mg/mL氧嗪酸钾，同时灌胃0.18g/mL酵母膏，持续7d。第8d开始，每只小鼠灌胃生理盐水200μL,持续14d。
(3)治疗组:试验开始，每只小鼠以相同剂量腹腔注射12mg/mL氧嗪酸钾,同时灌胃0.18g/mL酵母膏，持续7d。第8d开始，每只小鼠分别灌胃0.2g/(kg*bw)、0.4g/(kg*bw)、
0.6g/(kg*bw)的大豆肽(具体实施实例1中的A组大豆肽)持续14d。
(4)药品治疗对照组：试验开始，每只小鼠以相同剂量腹腔注射12mg/mL氧嗪酸钾注射液，同时灌胃0.18g/mL酵母膏，持续7d。第8d开始,每只小鼠灌胃别嘌呤醇混悬液，灌胃剂量为5.2mg/100g，持续14d。
每7d一次尾静脉取血0.5mL，4 000r/mi n离心10mi n，取血清。取血前所有小鼠空腹一夜，按尿酸试剂盒说明书操作，检测检测血清UA。每7d称一次体重。
表3大豆肽剂量对高尿酸血症小鼠的尿酸影响
注：*：与空白组比P＜0.05，**：P＜0.01；#：与高尿酸模型组比P＜0.05，##：与高尿酸模型组比P＜0.01。
从表3出可以看出，无论是低剂量组还是高剂量组均可以降低高尿酸血症小鼠的尿酸。其中高剂量组降低高尿酸血症的效果不亚于药品治疗组。
表4大豆肽剂量对高尿酸血症小鼠体重的影响
注：*：与空白组比P＜0.05，**：P＜0.01；#：与高尿酸模型组比P＜0.05，##：与高尿酸模型组比P＜0.01。▲：与药品治疗组相比P＜0.05，▲▲：与药品治疗组相比P＜0.01。
从表4中可以看出，大豆肽治疗组小鼠体重明显高于空白组、高尿酸模型组、药品治疗组，可以推测大豆肽一方面是蛋白质营养物质来源，有利于小鼠生长，另外一方面大豆肽还具体免疫功能，可以提高小鼠免疫力有关。
实施例4CaHMB对高尿酸小鼠的影响
1.试验材料
SPF级昆明种小鼠60只，岁龄4w，体重200±10g，雌雄各半，购于广东金域医学检验中心。
2.试验方案
(1)正常对照组:以普通鼠粮饲养小鼠，自由饮水，持续14d。
(2)高尿酸模型组:试验开始，每只小鼠以相同剂量腹腔注射12mg/mL氧嗪酸钾，同时灌胃0.18g/mL酵母膏，持续7d。第8d开始，每只小鼠灌胃生理盐水200μL,持续7d。
(3)治疗组:试验开始，每只小鼠以相同剂量腹腔注射12mg/mL氧嗪酸钾,同时灌胃0.18g/mL酵母膏，持续7d。第8d开始，每只小鼠分别灌胃0.2g/(kg*bw)、0.4g/(kg*bw)、
0.6g/(kg*bw)的大豆肽(具体实施实例1中的A组大豆肽)持续7d。
(4)药品治疗对照组：试验开始，每只小鼠以相同剂量腹腔注射12mg/mL氧嗪酸钾注射液，同时灌胃0.18g/mL酵母膏，持续7d。第8d开始,每只小鼠灌胃别嘌呤醇混悬液，灌胃剂量为5.2mg/100g，持续7d。
每7d一次尾静脉取血0.5mL，4000r/mi n离心10mi n，取血清。取血前所有小鼠空腹一夜，按尿酸试剂盒说明书操作，检测检测血清UA。每7d称一次体重。
实施例5CaHMB对高尿酸小鼠的影响
1.试验材料
SPF级昆明种小鼠50只，岁龄4w，体重200±10g，雌雄各半，购于广东金域医学检验中心。
2.试验方案
(1)正常对照组:以普通鼠粮饲养小鼠，自由饮水，持续21d。
(2)高尿酸模型组:试验开始，每只小鼠以相同剂量腹腔注射12mg/mL氧嗪酸钾，同时灌胃0.18g/mL酵母膏，持续7d。第8d开始，每只小鼠灌胃生理盐水200μL,持续14d。
(3)大豆肽组:试验开始，每只小鼠以相同剂量腹腔注射12
mg/mL氧嗪酸钾,同时灌胃0.18g/mL酵母膏，持续7d。第8d开始，每只小鼠分别灌胃0.6g/(kg*bw)的大豆肽(具体实施实例1中的A组大豆肽)持续14d。
(4)CaHMB-大豆肽组：试验开始，每只小鼠以相同剂量腹腔注射12mg/mL氧嗪酸钾注射液，同时灌胃0.18g/mL酵母膏持续7d。第8d开始，每只小鼠分别灌胃0.02g/(kg*bw)CaHMB+0.6g/(kg*bw)的大豆肽(具体实施实例1中的A组大豆肽)持续7d。
(5)CaHMB组：试验开始，每只小鼠以相同剂量腹腔注射12mg/mL氧嗪酸钾注射液，同时灌胃0.18g/mL酵母膏，持续14d。第8d开始，每只小鼠分别灌胃0.02g/(kg*bw)CaHMB,持续14d
每7d一次尾静脉取血0.5mL，4000r/mi n离心10mi n，取血清。取血前所有小鼠空腹一夜，按尿酸试剂盒说明书操作，检测检测血清UA。每7d称一次体重。
2.试验结果
表5CaHMB对高尿酸小鼠尿酸的影响
从表5中可以看出，单独的CaHMB对高尿酸小鼠没有影响，但CaHMB与大豆肽联用后，可以更快的降低高鸟酸小鼠的尿酸含量。
表6CaHMB对高尿酸血症小鼠体重的影响
注：*：与空白组比P＜0.05，**：P＜0.01；#：与高尿酸模型组比P＜0.05，##：与高尿酸模型组比P＜0.01。▲：与大豆肽组相比P＜0.05，▲▲：与大豆肽相比P＜0.01。
从表6中可以看出，CaHMB-大豆肽组、大豆肽、CaHMB均可以促进小鼠体重增长，且CaHMB对小鼠体重增长效果最好。
实施例6CaHMB-大豆肽对人体降尿酸的研究
1、降尿酸营养组合物配方的制备
将具体实施实例1中A组发酵乳杆菌CECT5716组大豆肽、CaHMB三氯蔗糖(甜味剂)、食品用香精(牛奶味)、食品用香精(去苦香精)进行混合，其中每100g中大豆肽89.595g,CaHMB含量为10g,大豆肽＝1:30，三氯蔗糖含量0.005g,食品用香精(牛奶味)0.2g，食品用香精(去苦香精)0.2g。得到的产品口味、冲调性较好。
2、人体试验
征集高尿酸人群40例，男女各占一半，中男性600±20umo l/L，女性尿酸450±20umo l/L。日常饮食由单位食堂提供同样的非高嘌呤食物。
试验组：口服上述制备的降尿酸营养组合物配方食品20g，连续服用14天，每7天测定尿酸含量。
对照组：口服对照品20g。每100g对照品：中麦芽糊精99.595g大豆肽89.595g,CaHMB含量为10g,三氯蔗糖含量0.005g,食品用香精(牛奶味)0.2g，食品用香精(去苦香精)0.2g。得到的对照品口味、冲调性较好。
3、试验结果
表7人体试验
从表7中可以看出服用降尿酸组合物后，试验组的尿酸降低到正常水平(男性小于420μmol/L，女性小于360μmol/L)。
实施例7
1.大豆肽的制备
1.1将发酵乳杆菌CECT5716接种于乳酸菌培养基，分别在37℃下培养48(A组)、72(B组)、96h(C组)，得到发酵培养液；
1.2将1.1发酵培养液在5000rpm下离心15mi n，离心后冻干，得到微生物全细胞催化剂；
1.3将1.2大豆分离蛋白按照料液比1:10加入纯化水，2450rpm下剪切均质15mi n，得到大豆分离蛋白溶液；
1.4将蔗糖、大豆油分别按照3％；3％的料液比加入到1.3中的大豆分离蛋白溶液中，调节pH在5.0，进行UHT灭菌，灭菌条件为110℃灭菌30s；灭菌后冷却到30℃以下，得到大豆分离蛋白培养基；
1.5将1.2所述的微生物全细胞催化剂0.005％的料液比加入到1.4中的大豆分离蛋白培养基，在常温37℃下培养48、72、96h，得到大豆蛋白水解液；
1.6将1.5中的大豆蛋白水解液进行喷雾干燥，即得到5种大豆肽；
2.大豆肽分子量测定
将1.6中的5种大豆肽按照GBT22729，送给第三方检测公司进行检测分子量分布。
3、试验结果
表7不同条件下大豆肽分子量分布
从上表中可以看出，在不同条件下得到的大豆肽分子量分布主要集中在500-3000Da。

Claims (10)

1.一种具有降尿酸保健功能的营养组合物配方，其特征在于，所述的营养组合物配方包括CaHMB(β-羟基-β-甲基丁酸钙、HMB钙)和大豆肽。
2.根据权利要求1所述具有降尿酸保健功能的营养组合物配方，其特征在于，所述的营养组合物配方含的CaHMB含量为1％-10％(w/w),大豆肽含量为50-99％(w/w)；
所述的大豆肽平均分子量分布在500-3000Da含量大于80％。
3.根据权利要求1所述具有降尿酸保健功能的营养组合物配方，其特征在于，所述大豆肽蛋白含量为30％-95％。
4.根据权利要求1所述具有降尿酸保健功能的营养组合物配方，其特征在于，所述营养组合物配方还添加其他能够降低尿酸的功能性食品原料；所述降低尿酸的功能性食品原料包括：芹菜籽、酸樱桃提取物、姜黄、维生素中的一种以上。
5.根据权利要求1所述具有降尿酸保健功能的营养组合物配方，其特征在于，所述的营养组合物配方还添加碳水化合物来源的食品原料；所述的碳水化合物来源是葡萄糖、果糖、麦芽糖、麦芽糊精、淀粉、蔗糖、膳食纤维中的一种以上。
6.根据权利要求1所述具有降尿酸保健功能的营养组合物配方，其特征在于，所述的营养组合物配方添加脂肪来源的原料，为中链或者长链脂肪酸来源原料的一种以上。
7.根据权利要求1所述具有降尿酸保健功能的营养组合物配方，其特征在于，添加食品添加剂以改善该配方的冲调性、稳定性等物理性质。
8.根据权利要求1所述具有降尿酸保健功能的营养组合物配方，其特征在于，营养组合物配方为液体、粉剂或半固体剂型。
9.一种具有降尿酸功能的营养组合物配方的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
1)将发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)CECT5716接种于乳酸菌培养基，30-40℃下培养96h，得到发酵培养液；
2)将步骤1)所述的发酵培养液在5000rpm下离心5-15min，离心后冻干，得到发酵乳杆菌CECT5716全细胞催化剂；
3)将大豆分离蛋白按照料液比1:5-1:10g/mL加入纯化水，2450rpm下剪切均质，均质得到大豆分离蛋白溶液；
4)将蔗糖、大豆油分别按照2-5％；3-6％g/mL的料液比加入到步骤3)中的大豆分离蛋白溶液中，调节pH在4.5-5.5，进行UHT灭菌，灭菌条件为110℃灭菌30s；灭菌后冷却到30℃以下，得到大豆分离蛋白培养基；
5)将步骤2)所述的发酵乳杆菌CECT5716全细胞催化剂0.001-0.005％的料液比加入到步骤4)中的大豆分离蛋白培养基，在常温(20-35℃)下培养48-96h，得到大豆蛋白水解液；
6)将步骤5)中的大豆蛋白水解液进行喷雾干燥，即得到大豆肽；
7)将CaHMB与大豆肽进行混合，加入或不加入食品添加剂，得到营养组合物配方；
或
将CaHMB与大豆肽进行混合后，按照1-25％g/mL的料液比加入水，加入或者不加入食品添加剂，进行灭菌，得到液体型的营养组合物配方。
10.一种具有降尿酸功能的营养组合物配方的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)将发酵乳杆菌CECT5716接种于乳酸菌培养基，30-40℃下培养96h，得到发酵培养液；
2)将步骤1)所得的发酵培养液在5000rpm下离心5-15min，离心后冻干，得到发酵乳杆菌CECT5716全细胞催化剂；
3)将大豆分离蛋白按照料液比1:5-1:30g/mL加入纯化水，2450rpm下剪切均质，均质得到大豆分离蛋白溶液；
4)将蔗糖、大豆油分别按照2-5％g/mL；3-6％g/mL的料液比加入到步骤3)中的大豆分离蛋白溶液中，调节pH在4.5-5.5，进行UHT灭菌，灭菌条件为110℃灭菌30s；灭菌后冷却到30℃以下，得到大豆分离蛋白培养基；
5)将步骤2)所述的发酵乳杆菌CECT5716全细胞催化剂按照0.001-0.005％g/mL的料液比加入到步骤4)中的大豆分离蛋白培养基，在常温(20-35℃)下培养48-96h，得到大豆蛋白水解液；
6)将CaHMB加入到步骤5)所述的大豆蛋白水解液中；
7)将步骤6)中的大豆蛋白水解液进行喷雾干燥，降尿酸的营养组合物配方。
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