CN116919876B - 植物发酵提取液及其制备方法和在抗衰化妆品中的应用 - Google Patents
植物发酵提取液及其制备方法和在抗衰化妆品中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN116919876B CN116919876B CN202311199484.2A CN202311199484A CN116919876B CN 116919876 B CN116919876 B CN 116919876B CN 202311199484 A CN202311199484 A CN 202311199484A CN 116919876 B CN116919876 B CN 116919876B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- fermentation
- plant fermentation
- fermentation extract
- plant
- extract
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 title claims abstract description 79
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 title claims abstract description 79
- 239000000284 extract Substances 0.000 title claims abstract description 44
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 title claims abstract description 19
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 19
- 230000003712 anti-aging effect Effects 0.000 title claims abstract description 16
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims abstract description 46
- PGOYMURMZNDHNS-MYPRUECHSA-N hederagenin Chemical compound C1C[C@H](O)[C@@](C)(CO)[C@@H]2CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@@]5(C(O)=O)CCC(C)(C)C[C@H]5C4=CC[C@@H]3[C@]21C PGOYMURMZNDHNS-MYPRUECHSA-N 0.000 claims abstract description 24
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 22
- NTWLPZMPTFQYQI-UHFFFAOYSA-N (3alpha)-olean-12-ene-3,23-diol Natural products C1CC(O)C(C)(CO)C2CCC3(C)C4(C)CCC5(C)CCC(C)(C)CC5C4=CCC3C21C NTWLPZMPTFQYQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 21
- GCGBHJLBFAPRDB-UHFFFAOYSA-N Hederagenin Natural products CC1(C)CCC2(CCC3(C)C4CCC5C(C)(CO)C(O)CCC5(C)C4CC=C3C2C1)C(=O)O GCGBHJLBFAPRDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 21
- GCGBHJLBFAPRDB-KCVAUKQGSA-N Scutellaric acid Natural products CC1(C)CC[C@@]2(CC[C@@]3(C)[C@@H]4CC[C@H]5[C@@](C)(CO)[C@H](O)CC[C@]5(C)[C@H]4CC=C3[C@@H]2C1)C(=O)O GCGBHJLBFAPRDB-KCVAUKQGSA-N 0.000 claims abstract description 21
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 21
- 235000018553 tannin Nutrition 0.000 claims abstract description 16
- 229920001864 tannin Polymers 0.000 claims abstract description 16
- 239000001648 tannin Substances 0.000 claims abstract description 16
- 244000144730 Amygdalus persica Species 0.000 claims abstract description 15
- 235000006040 Prunus persica var persica Nutrition 0.000 claims abstract description 15
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 15
- GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N Thermopsosid Natural products O(C)c1c(O)ccc(C=2Oc3c(c(O)cc(O[C@H]4[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O4)c3)C(=O)C=2)c1 GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N 0.000 claims abstract description 14
- 229930003944 flavone Natural products 0.000 claims abstract description 14
- 150000002212 flavone derivatives Chemical class 0.000 claims abstract description 14
- 235000011949 flavones Nutrition 0.000 claims abstract description 14
- VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N vitamin p Natural products O1C2=CC=CC=C2C(=O)C=C1C1=CC=CC=C1 VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 14
- 241000228245 Aspergillus niger Species 0.000 claims abstract description 12
- 240000008669 Hedera helix Species 0.000 claims abstract description 12
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 11
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 claims abstract description 11
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 claims abstract description 11
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims abstract description 10
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 9
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 claims abstract description 8
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims abstract description 8
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims abstract description 8
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims abstract description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 6
- 235000012905 Brassica oleracea var viridis Nutrition 0.000 claims abstract description 3
- 244000064816 Brassica oleracea var. acephala Species 0.000 claims abstract description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 27
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 19
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 19
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 15
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 15
- 235000013905 glycine and its sodium salt Nutrition 0.000 claims description 9
- 239000004247 glycine and its sodium salt Substances 0.000 claims description 9
- 229940029258 sodium glycinate Drugs 0.000 claims description 9
- WUWHFEHKUQVYLF-UHFFFAOYSA-M sodium;2-aminoacetate Chemical compound [Na+].NCC([O-])=O WUWHFEHKUQVYLF-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 9
- 235000010643 Leucaena leucocephala Nutrition 0.000 claims description 8
- 239000001341 hydroxy propyl starch Substances 0.000 claims description 8
- 235000013828 hydroxypropyl starch Nutrition 0.000 claims description 8
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 7
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 claims description 7
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 claims description 7
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 7
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 7
- ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N glycerol triricinoleate Natural products CCCCCC[C@@H](O)CC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCC=CC[C@@H](O)CCCCCC)OC(=O)CCCCCCCC=CC[C@H](O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N 0.000 claims description 7
- 241000209046 Pennisetum Species 0.000 claims description 6
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 6
- 239000013049 sediment Substances 0.000 claims description 6
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 5
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 5
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims description 5
- 238000007873 sieving Methods 0.000 claims description 5
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 5
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims description 5
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 2
- 239000012466 permeate Substances 0.000 claims description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 2
- 240000007472 Leucaena leucocephala Species 0.000 claims 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 abstract description 8
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- 244000152045 Themeda triandra Species 0.000 abstract description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 21
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 12
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 8
- 241000220479 Acacia Species 0.000 description 7
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 7
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 239000000419 plant extract Substances 0.000 description 6
- 239000003642 reactive oxygen metabolite Substances 0.000 description 6
- 241000208341 Hedera Species 0.000 description 5
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 5
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 5
- 230000002000 scavenging effect Effects 0.000 description 5
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 4
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 3
- INLFWQCRAJUDCR-IQVMEADQSA-N (1R,2S,4S,5'S,6R,7S,8R,9S,12S,13S)-5',7,9,13-tetramethylspiro[5-oxapentacyclo[10.8.0.02,9.04,8.013,18]icosane-6,2'-oxane] Chemical compound O([C@@H]1[C@@H]([C@]2(CC[C@@H]3[C@@]4(C)CCCCC4CC[C@H]3[C@@H]2C1)C)[C@@H]1C)[C@]11CC[C@H](C)CO1 INLFWQCRAJUDCR-IQVMEADQSA-N 0.000 description 2
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N (±)-α-Tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000207925 Leonurus Species 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 230000001153 anti-wrinkle effect Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 2
- 240000005020 Acaciella glauca Species 0.000 description 1
- 241000205585 Aquilegia canadensis Species 0.000 description 1
- 102000012422 Collagen Type I Human genes 0.000 description 1
- 108010022452 Collagen Type I Proteins 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000319057 Kalopanax septemlobus Species 0.000 description 1
- 235000008582 Pinus sylvestris Nutrition 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 description 1
- 229930003427 Vitamin E Natural products 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000003064 anti-oxidating effect Effects 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003796 beauty Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000000919 ceramic Substances 0.000 description 1
- OTAFHZMPRISVEM-UHFFFAOYSA-N chromone Chemical group C1=CC=C2C(=O)C=COC2=C1 OTAFHZMPRISVEM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000037319 collagen production Effects 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 230000001815 facial effect Effects 0.000 description 1
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 1
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 1
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 1
- WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N gamma-tocopherol Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC1CCC2C(C)C(O)C(C)C(C)C2O1 WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 1
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000001471 micro-filtration Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000003020 moisturizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol group Chemical group C1(=CC=CC=C1)O ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001839 pinus sylvestris Substances 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000008439 repair process Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000009759 skin aging Effects 0.000 description 1
- 210000004927 skin cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000037394 skin elasticity Effects 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000013112 stability test Methods 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 description 1
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 108010038851 tannase Proteins 0.000 description 1
- 150000003505 terpenes Chemical class 0.000 description 1
- 235000007586 terpenes Nutrition 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 description 1
- 235000019165 vitamin E Nutrition 0.000 description 1
- 229940046009 vitamin E Drugs 0.000 description 1
- 239000011709 vitamin E Substances 0.000 description 1
- 230000037303 wrinkles Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
- A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
- A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
- A61K8/9789—Magnoliopsida [dicotyledons]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
- A61Q19/08—Anti-ageing preparations
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
- A61K2800/52—Stabilizers
- A61K2800/522—Antioxidants; Radical scavengers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
- A61K2800/59—Mixtures
- A61K2800/592—Mixtures of compounds complementing their respective functions
- A61K2800/5922—At least two compounds being classified in the same subclass of A61K8/18
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
- A61K2800/80—Process related aspects concerning the preparation of the cosmetic composition or the storage or application thereof
- A61K2800/85—Products or compounds obtained by fermentation, e.g. yoghurt, beer, wine
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Birds (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Botany (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Cosmetics (AREA)
Abstract
本发明公开一种植物发酵提取液及其制备方法和在抗衰化妆品中的应用。植物发酵提取液的其制备方法包括以下步骤：S10、以常春藤茎、羽衣草花为原料，进行以下发酵预处理：S10a、将所述常春藤茎、所述羽衣草花粉碎与桃胶、硫酸铵和水混合，然后调节pH=4‑4.5，灭菌处理后，制得发酵培养基；S10b、将保藏号为GDMCC 3.576的黑曲霉菌株接种于种子液培养基中培养，制得种子液；S10c、将所述种子液接种于所述发酵培养基中培养，制得发酵物；S20、采用提取剂对发酵物进行提取，制得植物发酵提取液。采用本发明的方法可以提取含有黄酮和常春藤皂苷元的植物发酵提取液，并且可以有效减少植物发酵提取液中的单宁等杂质。
Description
技术领域
本发明涉及日用化妆品技术领域，具体涉及一种植物发酵提取液及其制备方法和在抗衰化妆品中的应用。
背景技术
皮肤老化是人体衰老最直接的外在表现，具体表现为皮肤弹性下降、皱纹、暗淡。社会地位的提高和收入的改善刺激了人们对于美丽的追求，尤其是抗衰类（抗皱、紧致、抗氧化功效）的化妆品和相关功效原料，多年来热度不减，占据了较大的市场份额。植物提取成分因其天然、安全的特点，符合当下的消费理念，更受消费者青睐。
但是，植物提取物类原料也存在一些缺陷。目前多数的化妆品配方是以水为主要溶剂，黄酮类，萜类、甾醇等物质的水溶性普遍很低，因而限制了含有此类成分的植物提取物的应用。此外，植物的茎、花中存在的高含量杂质比如单宁，容易与其他成分中的蛋白、肽、生物碱、甙类沉淀，影响配方稳定性，这一问题在抗衰类化妆品配方中特别突出。
为了提取上述水溶性低的植物活性成分，通常需要使用大量的乙醇、甲醇，比如专利CN103126954A，后续如果需要减少提取物的杂质，可能还需要使用乙酸乙酯、正丁醇、氯仿等有毒溶剂，这些做法不仅成本高、污染大，还容易产生生产安全问题，也不符合当前一些消费者追求的“纯净美妆”的理念。
发明内容
本发明的目的之一在于提供一种植物发酵提取液的制备方法，提取含有黄酮和常春藤皂苷元的植物发酵提取液，并且可以有效减少植物发酵提取液中的单宁等杂质。
本发明的目的之二在于提供一种植物发酵提取液，其含有黄酮和常春藤皂苷元，且单宁等杂质含量少，稳定性好。
本发明的目的之三提供一种植物发酵提取液在抗衰类化妆品中的应用，该植物发酵提取液可与多种其他原料复配，适合抗衰化妆品。
为达上述目的，本发明采用以下技术方案：
一方面，提供一种植物发酵提取液的制备方法，包括以下步骤：
S10、以常春藤茎、羽衣草花为原料，进行以下发酵预处理：
S10a、将所述常春藤茎、所述羽衣草花粉碎与桃胶、硫酸铵和水混合，然后调节pH=4-4.5，灭菌处理后，制得发酵培养基；
S10b、将保藏号为GDMCC 3.576的黑曲霉菌株接种于种子液培养基中培养，制得种子液；
S10c、将所述种子液接种于所述发酵培养基中培养，制得发酵物；
S20、采用提取剂对发酵物进行提取，制得植物发酵提取液，具体为：
S20a、将发酵物进行离心处理，收集沉淀；
S20b、采用水对步骤S20a收集的沉淀重悬洗涤，再次离心，收集沉淀；
S20c、往步骤S20b收集的沉淀中加入提取剂后搅拌均匀，并依次进行过滤和微滤，收集透过液，即为植物发酵提取液；
其中，所述提取剂为含0.4%甘氨酸钠、0.5%阿拉伯胶、0.2%羟丙基淀粉和0.04%PEG-40氢化蓖麻油的水溶液。
步骤S10a中，桃胶能作为黑曲霉发酵的碳源，在此发酵条件下，黑曲霉极少产生孢子。
步骤S10b中，黑曲霉菌株的保藏号为GDMCC 3.576，购自广东省微生物菌种保藏中心，该黑曲霉菌株对特定成分有很强的分解能力，可以将常春藤皂苷元衍生物分解成皂苷元，其作用在桃胶作为碳源时可以得到加强，同时，菌株也能产生单宁酶，分解单宁。常春藤皂苷元的水溶性很低，存在游离的羧基，生物活性与其他衍生物有所不同，比如能促进胶原蛋白合成。
本发明以常春藤茎、羽衣草花为原料进行发酵预处理的作用为：①破坏植物细胞壁，促进物质的释放；②将常春藤皂苷衍生物转变为常春藤皂苷元，改变其生物活性，为下一步的提取工作做准备；③部分降解单宁，减少单宁、蛋白等杂质。
进一步地，步骤S10a具体为：按重量份取6份常春藤茎和4份羽衣草花粉碎，过20目筛，获得的粉末再与1份桃胶、0.2份硫酸铵和100份水混合，然后采用柠檬酸调节pH=4-4.5，灭菌（115℃）处理后，制得发酵培养基。
进一步地，步骤S10b具体为：将保藏号为GDMCC 3.576的黑曲霉菌株接种于种子液培养基中，于31-33℃培养2-3d，制得种子液。
进一步地，按质量分数计，所述种子液培养基包含2%蔗糖、0.2%单宁、0.5%桃胶、1%纤维素粉、0.2%酵母膏、0.4%硫酸铵和95.7%水，并采用柠檬酸调节其pH=4。
进一步地，步骤S10c具体为：以发酵培养基的质量为基准，接种4%种子液至所述发酵培养基中，有氧条件下于32℃培养4-5d，然后升温至60℃维持30min，制得发酵物。
进一步地，按质量分数计，提取剂由0.4%甘氨酸钠、0.5%阿拉伯胶、0.2%羟丙基淀粉和0.04% PEG-40氢化蓖麻油和98.86%水组成。
常春藤皂苷元和部分黄酮（色原酮母核7’或4’位至少存在一个酚羟基的黄酮），能够溶于甘氨酸钠，阿拉伯胶、羟丙基淀粉可以提高体系在不同pH的配方体系中的稳定性。
其中，S20b中，按重量份计，水的添加量为80份；S20c中，按重量份计，提取剂的添加量为80份。
进一步地，步骤S20c中，搅拌条件为50℃搅拌30min。
另一方面，提供一种采用所述的植物发酵提取液的制备方法制得的植物发酵提取液，所述植物发酵提取液含有黄酮和常春藤皂苷元。
再一方面，提供一种采用所述的植物发酵提取液的制备方法制得的植物发酵提取液在抗衰类化妆品中的应用。
本发明的有益效果：本发明结合发酵和植物提取技术，制备含有羽衣草黄酮和常春藤皂苷元的植物提取液，具有清除自由基、增强皮肤细胞活力的功效。同时，产物中杂质少，适用于多数抗衰化妆品配方。植物发酵提取液的制备过程中没有用到有机溶剂，降低了成本，也减少了污染。
附图说明
图1是本发明所述的细胞活性氧清除试验结果示意图。
图2是本发明所述的成纤维细胞胶原蛋白试验结果示意图。
具体实施方式
下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。
如无具体说明，本发明的各种原料均可市售购得，或根据本技术领域的常规方法制备得到。
实施例1
实验室制备植物发酵提取液，具体如下：
S1、发酵预处理
S11、取 30g常春藤茎和20g羽衣草花粉碎，过20目筛，粉末再与5g桃胶，1g份硫酸铵，500g水混合，用柠檬酸调节pH=4，115℃高温灭菌15min，作为发酵培养基备用；
S12、配制种子液培养基，成分为2%蔗糖、0.2%单宁、0.5%桃胶、1%纤维素粉、0.2%酵母膏、0.4%硫酸铵、95.7%水（均为质量分数），柠檬酸调节pH为4，115℃高温灭菌15min，备用；
S13、保存在PDA斜面培养基的黑曲霉菌株GDMCC 3.576，用接种环接种到种子液培养基（由2%蔗糖、0.2%单宁、0.5%桃胶、1%纤维素粉、0.2%酵母膏、0.4%硫酸铵组成，并采用柠檬酸调节其pH=4），32℃、200rpm摇床震荡培养60h，作为种子液使用；
S14、接种22.2g种子液到发酵培养基中，32℃、180rpm震荡培养培养96h，从摇床中取出放入60℃水浴锅中，维持30min，结束发酵，获得发酵物。
S2、提取
S21、把S1获得的发酵物，4000g离心20min，弃上清，沉淀转移至烧杯中；
S22、向沉淀加入400g水，搅拌至沉淀完全分散，再次4000g离心20min，弃上清，沉淀转移至烧杯中；
S23、向沉淀加入400g的提取剂，加热至50℃搅拌30min，获得提取液，其中，提取剂为含0.4%甘氨酸钠、0.5%阿拉伯胶、0.2%羟丙基淀粉、0.04% PEG-40氢化蓖麻油的水溶液；
S24、提取液依次用滤纸过滤和0.22μm滤膜微滤，即得植物发酵提取液。
实施例2
中试植物发酵提取液，具体如下：
S1、发酵预处理
S11、12kg常春藤茎和8kg羽衣草花粉碎，过20目筛，粉末再与2kg桃胶，0.4kg份硫酸铵，200kg水混合，用柠檬酸调节pH=4，混合均匀，整体转入500L发酵罐中，115℃高温灭菌15min，备用；
S12、配制种子液培养基，成分为2%蔗糖、0.2%单宁、0.5%桃胶、1%纤维素粉、0.2%酵母膏、0.4%硫酸铵、95.7%水（均为质量分数），柠檬酸调节pH为4，转入20L发酵罐中，115℃高温灭菌15min，备用；
S13、保存在PDA斜面培养基的黑曲霉菌株GDMCC 3.576先转移到新的PDA平板培养基，待长出黑色孢子，用少量0.5%吐温-80水溶液冲洗平板，冲洗液接种到种子液培养基，32℃，180rpm，通气量1V/V·min，培养72h，作为种子液使用；
S14、接种8.9kg种子液到发酵培养基中，32℃，180rpm，通气量1 V/V·min，培养120h，发酵罐加热升温到60℃，维持30min，结束发酵，制得发酵物。
S2、提取
S21、把S1获得的发酵物，通过管式离心机（转速16000rpm）离心，收集沉淀转移至搅拌罐中；
S22、向沉淀加入160kg水，搅拌至沉淀完全分散，再次通过管式离心机（转速16000rpm）离心，收集沉淀转移至搅拌罐中；
S23、向沉淀加入160kg的提取剂，加热至50℃搅拌30min，获得提取液，其中，提取剂为含0.4%甘氨酸钠、0.5%阿拉伯胶、0.2%羟丙基淀粉、0.04% PEG-40氢化蓖麻油的水溶液；
S24、提取液依次用板框（400目滤布）过滤和100nm陶瓷膜微滤，即得植物发酵提取液。
对照例1
本对照例提供一种不进行发酵处理的植物提取液的制备方法，包括以下步骤：
①30g常春藤茎和20g羽衣草花粉碎，过20目筛；
②加入400g的提取剂，加热至50℃搅拌30min，获得提取液，其中，提取剂为含0.4%甘氨酸钠、0.5%阿拉伯胶、0.2%羟丙基淀粉、0.04% PEG-40氢化蓖麻油的水溶液。
③提取液依次用滤纸过滤和0.22μm滤膜微滤，即得提取液。
对照例2
本对照例的植物发酵提取液的制备方法中，发酵菌种改为黑曲霉菌株GDMCC 3.22(购自广东省微生物菌种保藏中心)，其他与实施例1相同。
对照例3
本对照例的植物发酵提取液的制备方法中，用相同质量的常春藤叶替换常春藤茎，其他均与实施例1相同。
对照例4
本对照例的植物发酵提取液的制备方法中，用相同质量的羽衣草花替换常春藤茎，其他与实施例1相同。
对照例5
本对照例的植物发酵提取液的制备方法与实施例1基本相同，区别在于步骤S23中所使用的提取剂改成仅含0.4%甘氨酸钠的水溶液，其他不变。
对照例6
本对照例提供的植物提取液由市售羽衣草提取液和市售常春藤提取液2:3混合而得。
对照例7
本对照例的植物发酵提取液的制备方法与实施例1基本相同，区别在于将S11和S12中的桃胶成分替换成等量的可溶性淀粉。
成分分析
检测实施例1-2及对照例1-7中的黄酮、常春藤皂苷元、α常春藤皂苷及常春藤皂苷C的含量。其中，黄酮的检测方法参照文献《响应面试验优化超声辅助提取金银花叶黄酮工艺及其抗氧化活性》（罗磊等）。常春藤皂苷元、α常春藤皂苷、常春藤皂苷C的检测方法参照文献《常春藤药材HPLC指纹图谱及8种成分的含量测定方法》（刘家鑫等）和《HPLC法测定刺楸茎枝中常春藤皂苷元的含量》（倪晓霓&方缘源）。单宁的检测方法参照 NY/T 1600-2008《水果、蔬菜及其制品中单宁含量的测定》。检测结果见表1。
表1.成分检测表（单位mg/kg）
实施例1-2和对照例5进行了基本相同的发酵处理，产物中常春藤皂苷元含量远高于其他，说明发酵过程对于常春藤皂苷C、α-常春藤皂苷等衍生物进行了转化。对照例2由于使用不同菌株，其转化效率明显降低。对照例1未进行发酵，黄酮含量低于实施例1，说明发酵过程促进了植物成分释放；另一方面，实施例1-2的常春藤皂苷C、α-常春藤皂苷、单宁的含量远低于对照例1，这几个成分水溶性相对较好的水溶性，除了发酵过程的分解转化，提取过程中2次离心去上清处理也是导致含量降低的原因。对照例3使用了常春藤叶进行发酵，其常春藤皂苷元和黄酮含量低于实施例1，可能是常春藤叶含有抑制黑曲霉生长代谢的成分。对照例7采用了可溶性淀粉作为碳源，其对于常春藤皂苷的转化作用明显低于实施例1，可能是桃胶的多糖促进了黑曲霉产生相关代谢的酶。
酸碱稳定性测试
采用NaOH和稀盐酸调节实施例1及对照例5、6制得的样品的pH分别为8、7、6、5.5、5、4.5，观察各测试样品的变化，结果见表2。
表2.不同pH下的各样品的稳定性情况
其中，实施例在4.5到8的范围内不析出沉淀，多数面部护肤品的pH在4.5-7之间。对照例5仅使用甘氨酸钠成分作为提取剂，说明阿拉伯胶、羟丙基淀粉、氢化蓖麻油具有很好的体系稳定作用。
配方应用测试
采用以下2个配方测试各样品应用情况。
表3.配方1-胶原蛋白滋润精华液(pH约6.0)
制备方法：1、称取A相原料，搅拌分散均匀；2、加入B相，加热至40℃搅拌均匀；3、冷却30℃以下，依次加入C相，边加边搅拌。
表4.配方2-二裂酵母修护抗衰精华液（pH约5.3）
制备方法：称取A相原料，80~85℃均质，搅拌均匀；降温至50℃以下加入B相原料，边加边搅拌。
以上两个配方中，胶原蛋白、发酵产物类原料是抗衰护肤品常用的功效成分。观察各样品应用于各配方中的产品配伍稳定性，结果见表5。
表5.各样品在抗衰化妆品中的配伍稳定性
以上结果表明，实施例1-2的样品应用于上述抗衰化妆品中具有更好的配伍性。
功效测试
细胞活性氧清除试验：参照T/SHRH 032-2020《化妆品紧致抗皱-体外角质形成细胞活性氧（ROS）抑制测试方法》对实施例1-2及对照例1-2、4、6-7制得的样品进行细胞活性氧清除试验，各样品测试浓度均为2%。试验结果（图1）表明，在2%测试浓度下，与阴性对照相比，除对照例6外，其他均表现出显著差异，说明角质细胞清除ROS功效主要与黄酮物质相关，与单宁基本无关（注：测试中以紫外线作为外源性刺激诱导角质细胞内ROS含量升高，阴性对照只照射紫外线，阳性对照培养基添加0.05%维生素E）。
成纤维细胞胶原蛋白试验：参照T/SHRH 031-2020《化妆品紧致、抗皱功效测试-体外成纤维细胞Ⅰ型胶原蛋白含量测定》对实施例1-2及对照例1-2、4、6-7制得的样品进行成纤维细胞胶原蛋白试验，各样品测试浓度均为2%。试验结果（图2）表明，在2%测试浓度下，与阴性对照相比，只有实施例的胶原蛋白显著高于空白，表明常春藤皂苷元可能是促进胶原合成的主要因素（注：100 ng/mL TGF-β1作为阳性对照）。
综上，采用本发明的植物发酵提取液的制备方法制得的植物发酵提取液具有抗氧化作用，能促进胶原蛋白生成，并且杂质少、稳定性好，适合当下常见的抗衰类化妆品配方。
以上实施例仅用来说明本发明的详细方法，本发明并不局限于上述详细方法，即不意味着本发明必须依赖上述详细方法才能实施。所属技术领域的技术人员应该明白，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
Claims (4)
1.一种植物发酵提取液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S10、以常春藤茎、羽衣草花为原料，进行以下发酵预处理：
S10a、按重量份取6份常春藤茎和4份羽衣草花粉碎，过20目筛，获得的粉末再与1份桃胶、0.2份硫酸铵和100份水混合，然后采用柠檬酸调节pH=4-4.5，灭菌处理后，制得发酵培养基；
S10b、将保藏号为GDMCC 3.576的黑曲霉菌株接种于种子液培养基中，于31-33℃培养2-3d，制得种子液，其中，按质量分数计，所述种子液培养基包含2%蔗糖、0.2%单宁、0.5%桃胶、1%纤维素粉、0.2%酵母膏、0.4%硫酸铵和95.7%水，并采用柠檬酸调节其pH=4；
S10c、以发酵培养基的质量为基准，接种4%种子液至所述发酵培养基中，有氧条件下于32℃培养4-5d，然后升温至60℃维持30min，制得发酵物；
S20、采用提取剂对发酵物进行提取，制得植物发酵提取液，具体为：
S20a、将发酵物进行离心处理，收集沉淀；
S20b、采用水对步骤S20a收集的沉淀重悬洗涤，再次离心，收集沉淀；
S20c、往步骤S20b收集的沉淀中加入提取剂后搅拌均匀，并依次进行过滤和微滤，收集透过液，即为植物发酵提取液；
其中，所述提取剂为含0.4%甘氨酸钠、0.5%阿拉伯胶、0.2%羟丙基淀粉和0.04% PEG-40氢化蓖麻油的水溶液。
2.根据权利要求1所述的植物发酵提取液的制备方法，其特征在于，步骤S20c中，搅拌条件为50℃搅拌30min。
3.一种采用权利要求1-2任一项所述的植物发酵提取液的制备方法制得的植物发酵提取液，其特征在于，所述植物发酵提取液含有黄酮和常春藤皂苷元。
4.一种采用权利要求1-2任一项所述的植物发酵提取液的制备方法制得的植物发酵提取液在制备抗衰化妆品中的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202311199484.2A CN116919876B (zh) | 2023-09-18 | 2023-09-18 | 植物发酵提取液及其制备方法和在抗衰化妆品中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202311199484.2A CN116919876B (zh) | 2023-09-18 | 2023-09-18 | 植物发酵提取液及其制备方法和在抗衰化妆品中的应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN116919876A CN116919876A (zh) | 2023-10-24 |
| CN116919876B true CN116919876B (zh) | 2023-12-12 |
Family
ID=88382947
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202311199484.2A Active CN116919876B (zh) | 2023-09-18 | 2023-09-18 | 植物发酵提取液及其制备方法和在抗衰化妆品中的应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN116919876B (zh) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104263650A (zh) * | 2013-04-28 | 2015-01-07 | 曹庸 | 一种单宁酶高产菌株及其制备方法 |
| CN110169940A (zh) * | 2019-07-01 | 2019-08-27 | 广州市如馨化妆品有限公司 | 一种有瘦脸功能的生物纤维面膜精华液、制备方法以及利用该精华液制备的面膜 |
| CN113262189A (zh) * | 2021-05-25 | 2021-08-17 | 广东美集科技有限公司 | 一种紧致淡纹眼霜 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR3061416B1 (fr) * | 2016-12-29 | 2021-06-18 | Basf Beauty Care Solutions France Sas | Utilisation de l'eau de coco comme solvant d'extraction |
-
2023
- 2023-09-18 CN CN202311199484.2A patent/CN116919876B/zh active Active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104263650A (zh) * | 2013-04-28 | 2015-01-07 | 曹庸 | 一种单宁酶高产菌株及其制备方法 |
| CN110169940A (zh) * | 2019-07-01 | 2019-08-27 | 广州市如馨化妆品有限公司 | 一种有瘦脸功能的生物纤维面膜精华液、制备方法以及利用该精华液制备的面膜 |
| CN113262189A (zh) * | 2021-05-25 | 2021-08-17 | 广东美集科技有限公司 | 一种紧致淡纹眼霜 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN116919876A (zh) | 2023-10-24 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN105647974B (zh) | 一种酿酒酵母植物发酵物及其应用和皮肤外用剂 | |
| CN111249218B (zh) | 一种雪莲发酵原液及其制备方法和应用 | |
| JP2024073584A (ja) | 鉄皮石斛抽出物の調製方法、鉄皮石斛抽出物誘導体の調製方法及びその適用 | |
| CN115678805B (zh) | 一种具有修复抗衰功效的松茸酵母发酵液的制备方法及其应用 | |
| CN111135123B (zh) | 一种卷柏发酵提取液的制备方法和应用 | |
| CN116919876B (zh) | 植物发酵提取液及其制备方法和在抗衰化妆品中的应用 | |
| CN116421525B (zh) | 一种芍药根提取物及其制备方法 | |
| CN111743837A (zh) | 一种具有美白功效的发酵中药面膜及其制备方法 | |
| CN109602676B (zh) | 一种植物碱抗敏素的组合及其制备工艺 | |
| CN114796087B (zh) | 一种海茴香干细胞提取物的制备方法及在化妆品中的应用 | |
| NL2029555B1 (en) | Method for simultaneously extracting phytosterols and polysaccharides from pitaya stems | |
| CN106309278B (zh) | 用于抗衰老化妆品的龙舌兰发酵物及其制备方法和应用 | |
| CN114748386A (zh) | 一种具有美白功效的七白中草药发酵原浆的制备方法及应用 | |
| KR20150024628A (ko) | 마로부터 발효된 식물성 뮤신을 제조하는 방법 및 이를 포함하여 콜라겐 합성능, 보습, 피부 보호 및 상처 재생이 우수한 화장료 조성물 | |
| CN1747962A (zh) | 化合物、其制备方法和用途 | |
| CN115025025B (zh) | 一种芍药花发酵产物及其制备方法和应用 | |
| CN114763565B (zh) | 一种提升积雪草酸水溶性的生物转化方法及该方法制得的发酵混合产物 | |
| CN117925731B (zh) | 一种半乳糖酵母样菌积雪草发酵产物及其制备方法和用途 | |
| CN115948480B (zh) | 一种具有抗氧化、抗炎和提亮功效的望春花发酵液及其制备方法与应用 | |
| CN115414421B (zh) | 一种白鲜皮活性成分的提取方法及其应用 | |
| CN117084955A (zh) | 一种具有优异抗老化作用的咖啡发酵物及其制备方法和应用 | |
| CN117224434A (zh) | 一种植物提取物及其制备方法和应用 | |
| CN115120544A (zh) | 一种咖啡组合物 | |
| CN112168723A (zh) | 一种美白补水护肤液及其制备方法 | |
| CN117982389A (zh) | 一种木棉花发酵滤液的制备方法及其产品和应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |