CN117982389A - 一种木棉花发酵滤液的制备方法及其产品和应用 - Google Patents
一种木棉花发酵滤液的制备方法及其产品和应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN117982389A CN117982389A CN202410161276.1A CN202410161276A CN117982389A CN 117982389 A CN117982389 A CN 117982389A CN 202410161276 A CN202410161276 A CN 202410161276A CN 117982389 A CN117982389 A CN 117982389A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- kapok
- fermentation
- yeast
- culture medium
- preparing
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 title claims abstract description 123
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 title claims abstract description 123
- 244000146553 Ceiba pentandra Species 0.000 title claims abstract description 115
- 235000003301 Ceiba pentandra Nutrition 0.000 title claims abstract description 115
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 title claims abstract description 50
- 239000000047 product Substances 0.000 title claims abstract description 35
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 21
- 241000235342 Saccharomycetes Species 0.000 claims abstract description 51
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 49
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 33
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 30
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 30
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 25
- 230000003712 anti-aging effect Effects 0.000 claims abstract description 12
- 230000003020 moisturizing effect Effects 0.000 claims abstract description 12
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 10
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims description 69
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 claims description 69
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 15
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 10
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 claims description 9
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 7
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 5
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 abstract description 7
- 238000000605 extraction Methods 0.000 abstract description 4
- 238000004134 energy conservation Methods 0.000 abstract 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 16
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 15
- 150000008442 polyphenolic compounds Chemical class 0.000 description 14
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 description 14
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 12
- 241000628997 Flos Species 0.000 description 11
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 9
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 8
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241001052560 Thallis Species 0.000 description 6
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 6
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 6
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 6
- HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N dpph Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC([N+]([O-])=O)=C1[N]N(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 HHEAADYXPMHMCT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 6
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 6
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 description 5
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 5
- ZTOJFFHGPLIVKC-YAFCTCPESA-N (2e)-3-ethyl-2-[(z)-(3-ethyl-6-sulfo-1,3-benzothiazol-2-ylidene)hydrazinylidene]-1,3-benzothiazole-6-sulfonic acid Chemical compound S\1C2=CC(S(O)(=O)=O)=CC=C2N(CC)C/1=N/N=C1/SC2=CC(S(O)(=O)=O)=CC=C2N1CC ZTOJFFHGPLIVKC-YAFCTCPESA-N 0.000 description 4
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 4
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 4
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 4
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 4
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 4
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 4
- 230000007760 free radical scavenging Effects 0.000 description 4
- LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N gallic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 LNTHITQWFMADLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 4
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 4
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 4
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 4
- 101100328883 Arabidopsis thaliana COL1 gene Proteins 0.000 description 3
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 3
- 230000002087 whitening effect Effects 0.000 description 3
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 3
- -1 ABTS radicals Chemical class 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N D-erythro-ascorbic acid Natural products OCC1OC(=O)C(O)=C1O ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101000823955 Homo sapiens Serine palmitoyltransferase 1 Proteins 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229930003268 Vitamin C Natural products 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 235000010208 anthocyanin Nutrition 0.000 description 2
- 229930002877 anthocyanin Natural products 0.000 description 2
- 239000004410 anthocyanin Substances 0.000 description 2
- 150000004636 anthocyanins Chemical class 0.000 description 2
- 235000013405 beer Nutrition 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 2
- 230000006837 decompression Effects 0.000 description 2
- IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N ethanol;hydrate Chemical compound O.CCO IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000004515 gallic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229940074391 gallic acid Drugs 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 2
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 2
- USHAGKDGDHPEEY-UHFFFAOYSA-L potassium persulfate Chemical compound [K+].[K+].[O-]S(=O)(=O)OOS([O-])(=O)=O USHAGKDGDHPEEY-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 235000019154 vitamin C Nutrition 0.000 description 2
- 239000011718 vitamin C Substances 0.000 description 2
- 239000000341 volatile oil Substances 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 206010051246 Photodermatosis Diseases 0.000 description 1
- 102000003425 Tyrosinase Human genes 0.000 description 1
- 108060008724 Tyrosinase Proteins 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 230000003064 anti-oxidating effect Effects 0.000 description 1
- 108700043460 bacteria ModE Proteins 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 239000000490 cosmetic additive Substances 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 230000009144 enzymatic modification Effects 0.000 description 1
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 230000008845 photoaging Effects 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 1
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 239000013558 reference substance Substances 0.000 description 1
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 230000009759 skin aging Effects 0.000 description 1
- 210000004927 skin cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000037394 skin elasticity Effects 0.000 description 1
- 210000001626 skin fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 1
- 238000002137 ultrasound extraction Methods 0.000 description 1
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明涉及一种木棉花发酵滤液的制备方法及其产品和应用，所述木棉花发酵滤液制备方法包括：(1)将木棉花粉末与水配置成酵母菌培养基；(2)将酵母菌的发酵种子液接入酵母菌培养基中进行发酵得到发酵产物，将发酵产物离心、过滤后得到所述木棉花发酵滤液。本发明采用发酵的方式对木棉花活性成分进行提取，所述方法相比传统的提取技术，具有节能、环保、安全等优点，且得到的产物抗衰及保湿效果更佳。
Description
技术领域
本发明属于日用化妆品技术领域，具体涉及一种木棉花发酵滤液的制备方法及其产品和应用。
背景技术
木棉花能够有效地美白肌肤，其花瓣中含有大量的天然有机酸和维生素C，这些物质能够深入皮肤，促进皮肤细胞的新陈代谢，使皮肤变得更加光滑细致，在保持皮肤弹性的同时，还能够防止皮肤被侵害。此外，木棉花中还含有多种抗氧化剂，如花青素、挥发油等，这些物质可以对抗自由基的侵害，进一步延缓皮肤老化，因此，许多美容护肤产品中选择添加木棉花及其提取物，而为了更大化的发挥木棉花的作用，对于木棉花活性成分的提取方法受到越来越多厂家的重视。
CN103202784A公开了一种具有美白抗衰老活性的木棉花提取物的制备方法。该制备方法的特征是将干燥的木棉花粉碎过筛，经乙醇浸泡提取两次，合并两次提取液，经减压浓缩得到悬浊液，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取该悬浊液，减压浓缩回收乙酸乙酯，真空干燥成膏体即得木棉花提取物。用该方法获得的木棉花提取物具有抗自由基氧化、抑制酪氨酸酶活性和抗紫外线照射功能，能够用于皮肤美白和抗衰老，尤其是抗光老化。所述木棉花提取物可用作化妆品添加剂或者药物活性成分，应用于美白抗衰老化妆品中。
CN114931535A公开了一种具有保湿舒缓功效的木棉花提取物的制备方法和应用，其方法包括以下步骤：将新鲜的木棉花破碎，得到木棉花破碎物；将木棉花破碎物与乙醇水溶液搅拌混合，得到搅拌混合液，乙醇水溶液的质量浓度为70％～80％；过滤搅拌混合液，收集滤液，得到木棉花提取物。一种具有保湿舒缓功效的木棉花提取物的应用，包括在啫喱、喷雾和面膜液中的应用。
然而上述现有技术对于木棉花活性成分的提取转化效果并不太好，进而不能很好的发挥木棉花的功效，因此，急需提供一种步骤简便且使木棉花活性成分提取效果更好的方法来满足应用的需求。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种木棉花发酵滤液的制备方法及其产品和应用，本发明采用发酵的方式对木棉花活性成分进行提取，所述方法相比传统的提取技术，具有节能、环保、安全等优点，且得到的产物抗衰及保湿效果更佳。
为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：
第一方面，本发明提供了一种木棉花发酵滤液的制备方法，所述木棉花发酵滤液制备方法包括：
(1)将木棉花粉末与水配置成酵母菌培养基；
(2)将酵母菌的发酵种子液接入酵母菌培养基中进行发酵得到发酵产物，将发酵产物离心、过滤后得到所述木棉花发酵滤液。
本发明的方法以酵母菌为出发菌株，对木棉花进行发酵，能够促进酵母菌的生长，并有效提升发酵产物多酚的含量，同时结合木棉花基质的抗氧化能力，通过清除过量自由基及对相关酶活性的抑制，可使发酵产物达到抗衰老及保湿的效果。
优选地，步骤(1)所述木棉花粉末的粒径为20-50目，例如可以为25目、30目、35目、40目或45目等。
步骤(2)所述酵母菌包括葡萄酒酵母、啤酒酵母或酿酒酵母中的任意一种或至少两种的组合。
优选地，所述酵母菌为葡萄酒酵母、啤酒酵母和酿酒酵母的组合。
本发明采用混菌方式，利用葡萄酒酵母、啤酒酵母和酿酒酵母协同调控发酵过程,可以有效提高发酵效率,充分提取木棉花的活性成分,并且酵母菌在发酵代谢过程中可产多种益生因子，从而更好地增强产物的延缓衰老、保湿等功效。
优选地，所述葡萄酒酵母的编号为GDM2.95。
优选地，所述啤酒酵母的编号为GDM2.9。
优选地，所述酿酒酵母的编号为GDM2.200。
优选地，所述葡萄酒酵母、啤酒酵母和酿酒酵母的体积比为(1-2):(0.1-1):(0.5-2)。
其中“1-2”可以为1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8或1.9等；
“0.1-1”可以为0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8或0.9等；
“0.5-2”可以为0.6、0.7、0.8、0.9、1、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8或1.9等。
优选地，步骤(2)所述酵母菌的发酵种子液的制备方法为：将酵母菌在固体培养基中培养得到酵母菌菌种，然后将酵母菌菌种转接至液体培养基培养得到发酵种子液。
优选地，所述固体培养基的配方为：酵母浸粉10g/L，葡萄糖20g/L，蛋白胨10g/L，琼脂20g/L。
优选地，所述液体培养基的配方为：酵母浸粉10g/L，葡萄糖20g/L，蛋白胨10g/L。
优选地，所述酵母菌在固体培养基中培养时温度为25-35℃，例如可以为26℃、28℃、30℃、32℃或34℃等。
优选地，所述液体培养基培养时温度为25-35℃，时间为10-15h，例如可以为26℃、28℃、30℃、32℃或34℃等，时间为11h、12h、13h或14h等。
优选地，步骤(2)所述酵母菌培养基按质量百分含量计包括木棉花粉末1-10％和水90-99％。
本发明中，将木棉花配置为酵母菌培养基，不用另外补充发酵所需的氮源和碳源，可降低发酵成本，利用酵母菌缓慢发酵木棉花，可最大程度地释放出木棉花中花青素、挥发油、天然有机酸、维生素C以及其他活性成分，提高发酵效率，而在经微生物中酶类修饰结构、改造或分解，可获得更好的抗衰老及保湿效果。
其中所述木棉花粉末的质量百分含量可以为2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％或9％等；
所述水的质量百分含量可以为91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％或98％等。
优选地，步骤(2)所述发酵种子液与酵母菌培养基的体积比为1:(7-12)，例如可以为1:8、1:9、1:10、1:11。1:12等。
优选地，步骤(2)所述发酵时温度为25-35℃，时间为108-144h，例如温度可以为26℃、28℃、30℃、32℃或34℃等，时间可以为110h、115h、120h、125h、130h、135h或140h等。
优选地，步骤(2)所述发酵时进行搅拌处理。
优选地，所述搅拌的转速为100-150rpm，例如可以为105rpm、110rpm、115rpm、120rpm、125rpm、130rpm、135rpm、140rpm或145rpm等。
上述各项数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
第二方面，本发明提供了一种木棉花发酵滤液，所述木棉花发酵滤液采用如第一方面所述的方法制备得到。
第三方面，本发明提供了一种如第二方面所述的木棉花发酵滤液在制备抗衰保湿产品中的应用。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
(1)本发明的积极效果在于：以酵母菌为出发菌株，对木棉花基质进行发酵，能够促进酵母菌的生长，并有效提升发酵产物多酚的含量；
(2)本发明制备的发酵产物，含有活性成分多酚，并结合木棉花基质的抗氧化能力，通过清除过量自由基及对相关酶活性的抑制，同时达到了抗衰老、保湿的效果。
(3)本发明提供的制备方法，操作步骤简单，成本较低，易于工业化大规模生产。
具体实施方式
为更进一步阐述本发明所采取的技术手段及其效果，以下结合本发明的优选实施例来进一步说明本发明的技术方案，但本发明并非局限在实施例范围内。
本发明实施例中所用的葡萄酒酵母编号为GDM2.95，啤酒酵母编号为GDM2.9，酿酒酵母编号为GDM2.200，均购自广东省微生物菌种保藏中心。
其余原料只要购买自正规经销商均可使用。
实施例1
本实施例提供一种木棉花发酵滤液的制备方法，所述木棉花发酵滤液的制备方法为：
(1)将木棉花干燥后粉碎至粒径为40目得到木棉花粉末，在110℃下灭菌10min后备用；
(2)先将葡萄酒酵母、啤酒酵母和酿酒酵母分别转接到固体培养基于28℃下静置活化至长出单菌落；随后挑固体培养基的单菌落转接至液体培养基中，于28℃，120rpm条件下扩大培养12h；调整三种发酵种子液OD为1，等体积混合，得到混合酵母菌发酵种子液,；
(3)按照以下质量百分比配置成酵母菌培养基：木棉花粉末6％、水94％；
(4)将混合酵母菌发酵种子液接入上述培养基(发酵种子液与酵母菌培养基体积比为1:9)中，于28℃，120rpm条件下进行发酵，120h后得到发酵产物，将发酵产物离心、过滤除去菌体以及木棉花粉末后得到所述木棉花发酵滤液。
实施例2
本实施例提供一种木棉花发酵滤液的制备方法，所述木棉花发酵滤液的制备方法为：
(1)将木棉花干燥后粉碎至粒径为30目得到木棉花粉末，在120℃下灭菌5min后备用；
(2)先将葡萄酒酵母、啤酒酵母和酿酒酵母分别转接到固体培养基于25℃下静置活化至长出单菌落；随后挑固体培养基的单菌落转接至液体培养基中，于35℃，100rpm条件下扩大培养15h；调整三种发酵种子液OD为1，按照体积比为2:0.5:0.5的葡萄酒酵母、啤酒酵母和酿酒酵母，得到混合酵母菌发酵种子液；
(3)按照以下质量百分比配置成酵母菌培养基：木棉花粉末3％、水97％；
(4)将混合酵母菌发酵种子液接入酵母菌培养基(发酵种子液与酵母菌培养基体积比为1:7)中，于35℃，100rpm条件下进行发酵，108h后得到发酵产物，将发酵产物离心、过滤除去菌体以及木棉花粉末后得到所述木棉花发酵滤液。
实施例3
本实施例提供一种木棉花发酵滤液的制备方法，所述木棉花发酵滤液的制备方法为：
(1)将木棉花干燥后粉碎至粒径为50目得到木棉花粉末，在100℃下灭菌8min后备用；
(2)先将葡萄酒酵母、啤酒酵母和酿酒酵母分别转接到固体培养基于35℃下静置活化至长出单菌落；随后挑固体培养基的单菌落转接至液体培养基中，于25℃，110rpm条件下扩大培养10h；调整三种发酵种子液OD为1，按照体积比为1:0.8:2的葡萄酒酵母、啤酒酵母和酿酒酵母，得到混合酵母菌发酵种子液,；
(3)按照以下质量百分比配置成酵母菌培养基：木棉花粉末1％、水99％；
(4)将混合酵母菌发酵种子液接入酵母菌培养基(发酵种子液与酵母菌培养基体积比为1:10)中，于25℃，150rpm条件下进行发酵，144h后得到发酵产物，将发酵产物离心、过滤除去菌体以及木棉花粉末后得到所述木棉花发酵滤液。
实施例4
本实施例提供一种木棉花发酵滤液的制备方法，所述木棉花发酵滤液的制备方法与实施例1的的区别仅在于步骤(4)发酵种子液与酵母菌培养基体积比为1:5，其余步骤及工艺参数与实施例1一致。
实施例5
本实施例提供一种木棉花发酵滤液的制备方法，所述木棉花发酵滤液的制备方法与实施例1的的区别仅在于步骤(4)发酵种子液与酵母菌培养基体积比为1:15，其余步骤及工艺参数与实施例1一致。
实施例6
本实施例提供一种木棉花发酵滤液的制备方法，所述木棉花发酵滤液的制备方法与实施例1的的区别仅在于步骤(2)所述酵母菌为体积比为1:1的葡萄酒酵母和啤酒酵母，并保持酵母菌接种量不变，其余步骤及工艺参数与实施例1一致。
实施例7
本实施例提供一种木棉花发酵滤液的制备方法，所述木棉花发酵滤液的制备方法与实施例1的的区别仅在于步骤(2)所述酵母菌为体积比为1:1的葡萄酒酵母和酿酒酵母，并保持酵母菌接种量不变，其余步骤及工艺参数与实施例1一致。
实施例8
本实施例提供一种木棉花发酵滤液的制备方法，所述木棉花发酵滤液的制备方法与实施例1的的区别仅在于步骤(2)所述酵母菌为体积比为1:1的啤酒酵母和酿酒酵母，并保持酵母菌接种量不变，其余步骤及工艺参数与实施例1一致。
对比例1
本对比例提供一种木棉花发酵滤液的制备方法，所述木棉花发酵滤液的制备方法为：
(1)将木棉花干燥后粉碎至粒径为40目得到木棉花粉末，在110℃下灭菌10min后备用；
(2)按照以下质量百分比配置成酵母菌培养基：木棉花粉末6％、水94％；
(3)将酵母菌接入酵母菌培养基(酵母菌与酵母菌培养基质量比为1:9)中，于28℃，120rpm条件下进行发酵，120h后得到发酵产物，将发酵产物离心、过滤除去菌体以及木棉花粉末后得到所述木棉花发酵滤液。
对比例2
本对比例提供一种木棉花发酵滤液的制备方法，所述木棉花发酵滤液的制备方法为：
(1)将木棉花干燥后粉碎至粒径为40目得到木棉花粉末，在110℃下灭菌10min后备用；
(2)将酵母菌转接于固体培养基在28℃下静置活化至酵母菌菌落长出菌种；随后将固体培养基上菌种转接至液体培养基中，于28℃，120rpm条件下扩大培养12h，得到发酵种子液；
(3)按照以下质量百分比配置成酵母菌培养基：酵母膏1％、蛋白胨2％、葡萄糖2％以及余量的水；
(4)将发酵种子液接入酵母菌培养基(发酵种子液与酵母菌培养基体积比为1:9)中，于28℃，120rpm条件下进行发酵24h，按照6g木棉花粉末/100mL酵母菌培养基的比例向发酵体系中添加木棉花粉末继续发酵至120h得到发酵产物，将发酵产物离心、过滤除去菌体以及木棉花粉末后得到所述木棉花发酵滤液。
对比例3
本对比例提供一种木棉花发酵滤液的制备方法，所述木棉花发酵滤液的制备方法为：
(1)将木棉花干燥后粉碎至粒径为40目得到木棉花粉末，混合木棉花粉末以及木棉花粉末重量20倍的水，于380W、60℃下，超声辅助提取1h，离心后取其上清液，并用一定量水定容(木棉花粉末：水＝1:25)，得到木棉花水提液(40g/L)，在110℃下灭菌10min后备用；
(2)将酵母菌转接于固体培养基在28℃下静置活化至酵母菌菌落长出菌种；随后将固体培养基上菌种转接至液体培养基中，于28℃，120rpm条件下扩大培养12h，得到发酵种子液；
(3)按照以下质量百分比配置成酵母菌培养基：酵母膏1％、蛋白胨2％、葡萄糖2％以及余量的水；
(4)将发酵种子液接入酵母菌培养基(发酵种子液与酵母菌培养基体积比为1:9)中得到发酵体系，将步骤(1)木棉花水提液加入发酵体系中(木棉花水提液添加量为发酵体系总体积15％)，于28℃，120rpm条件下进行发酵，120h后得到发酵产物，将发酵产物离心、过滤除去菌体以及木棉花粉末后得到所述木棉花发酵滤液。
测试例1多酚含量测定
多酚与Folin-Ciocalteu试剂发生特异性反应,反应产物对特定波长的优最大吸收，且吸光值与多酚的量在一定浓度范围内成线性关系，据此可以求出待测样品中多酚的含量。
具体实验步骤如下：
(1)标准品贮备液：准确称取0.011g没食子酸标准品(相对分子量188.14，含一水)，用水溶解，定容至10mL，得到1.0mg/mL的标准贮备溶液；
(2)7.5％Na2CO3溶液：称取37.50g Na2CO3，补加水适量溶解，转移至500mL容量瓶中，定容至刻度，摇匀；
(3)10％福林酚试剂：取20ml福林酚试剂1mol/L于200ml容量瓶中，用水定容并摇匀；
(4)标准品工作液：分别取1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL的标准品贮备液于100ml容量瓶中，分别用水定容至刻度线，摇匀，浓度分别为10μg/ml，20μg/ml，30μg/ml，40μg/ml，50μg/ml；
(5)样品测定：分别移取标准品工作液、水(作空白对照用)及实施例1-5与对比例1-5得到的木棉花发酵滤液各1.0ml于具塞试管中，在每个试管内分别加入5.0ml 10％福林酚试剂，摇匀，反应5min，加入4.0ml7.5％碳酸钠溶液，摇匀，室温下放置60min，用10mm比色皿、在765nm波长下用分光光度计测定吸光度，以没食子酸对照品浓度为横坐标，相对应的吸光度值为纵坐标，对二者进行线性回归得到第一线性方程，建立多酚的含量测定方法。
每组样品平行测定4次，取平均值。
测试结果如表1所示。
表1
| 样品 | 多酚含量(mg/mL) |
| 实施例1 | 1.52 |
| 实施例2 | 1.38 |
| 实施例3 | 1.49 |
| 实施例4 | 1.31 |
| 实施例5 | 1.002 |
| 实施例6 | 0.942 |
| 实施例7 | 0.852 |
| 实施例8 | 0.99 |
| 对比例1 | 0.852 |
| 对比例2 | 1.02 |
| 对比例3 | 1.15 |
由表1的数据可知，本发明实施例1-3制备得到的木棉花发酵滤液较高的多酚含量，在1.35mg/mL以上；
由实施例4和5可知，当发酵种子液与酵母菌培养基体积比过高或过低时，都会影响最终的多酚含量；
由实施例6-8可知，当发酵为双菌混合发酵时，木棉花的发酵效果均有所下降，进而会影响最终的多酚含量；
由对比例1可知，当制备方法中没有活化菌株的步骤时，最终发酵液中多酚含量较低；
由对比例2和3可知，本发明的方法将木棉花粉末制作为酵母菌培养基会显著提高产物的多酚含量。
测试例2抗氧化功效测试
(1)DPPH自由基清除实验
步骤：准确称取称取0.0079g DPPH，用无水乙醇定容至100.0mL，得到DPPH测试液(0.2mmol/L)。按下表2顺序所示于96孔板中分别加入200μL测试液，充分摇匀后，室温避光反应30min，酶标仪517nm检测吸光度。
表2
| 试剂空白A0 | 样品A1 | 样品空白A2 | |
| 无水乙醇 | 100 | / | 100 |
| 木棉花发酵滤液 | / | 100 | 100 |
| DPPH溶液 | 190 | 100 | / |
DPPH清除率(％)＝[1-(A1-A2)/A0]×100％
结果如表4所示(每组样品平行测定5次，数据以平均值呈现)。
(2)ABTS自由基清除实验
步骤：称取0.066g过硫酸钾，用水定容至100mL，再精确称取0.0386g ABTS，用上述过硫酸钾溶液定容至10mL，避光静置12～16h。用10mmol/L的PBS(pH＝7.4)稀释，使吸光值为0.7-0.8之间，得工作液。按下表3顺序所示于96孔板中分别加入200μL测试液，充分摇匀后，室温孵育6分钟，酶标仪734nm检测吸光度。
表3
| 试剂空白A0 | 样品A1 | 样品空白A2 | |
| PBS | 10 | / | 190 |
| 木棉花发酵滤液 | / | 10 | 10 |
| ABTS工作液 | 190 | 190 | / |
根据下述公式计算出样品液对ABTS自由基的清除率。
ABTS自由基的清除率(％)＝[A0-(A1-A2)]/A0×100％。
结果如表4所示(每组样品平行测定5次，数据以平均值呈现)。
表4
由表4可知，本发明实施例1-3制备得到的木棉花发酵滤液对DPPH自由基的清除率在85％以上，对ABTS自由基清除率在99％以上，表明实施例1-3所述的木棉花发酵滤液具有较好的抗氧化效果。
测试例3保湿和抗衰老功效测试
采用PCR实验检测抗衰老基因COL1和保湿基因SPTLC1的表达含量。
测试方法：将人皮肤成纤维细胞接种至6孔板，每孔约30万细胞，在细胞培养箱培养24h后，弃去培养基，加入含有实施例1-8以及对比例1-3得到的木棉花发酵滤液的培养基，对照孔加入同等体积的DMEM完全培养基。在细胞培养箱培养24h后，分别收集细胞至无菌离心管内。对于被收集的各组细胞，使用无菌PBS清洗2次，使用离心机离心(1000rpm，10min)，弃去上清，保留细胞沉淀-80℃保存。收集到的细胞，使用柱提法提取和纯化RNA，并按照试剂盒说明书对RNA进行反转录，获取cDNA。随后分别加入保湿基因SPTLC1以及抗衰老基因COL1的引物，进行RT-PCR扩增，并使用2-ΔΔCT法分析这两个基因的相对表达量。结果见表5(保湿基因SPTLC1的表达含量)和表6(抗衰老基因COL1的表达含量)。
表5
表6
| 样品 | 保湿基因SPTLC1的表达含量(2(-ΔΔCt)) |
| 实施例1 | 2.81 |
| 实施例2 | 2.11 |
| 实施例3 | 2.07 |
| 实施例4 | 1.94 |
| 实施例5 | 1.80 |
| 实施例6 | 0.94 |
| 实施例7 | 1.69 |
| 实施例8 | 1.02 |
| 对比例1 | 1.33 |
| 对比例2 | 1.83 |
| 对比例3 | 1.99 |
由表5和6可知，本发明制备得到的木棉花发酵滤液能促进抗衰老基因COL1和保湿基因SPTLC1的表达，且实施例1-3的表达量值较高，具有比较好的抗衰老和保湿作用。
申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的一种木棉花发酵滤液的制备方法及其产品和应用，但本发明并不局限于上述实施例，即不意味着本发明必须依赖上述实施例才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。
另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。
Claims (10)
1.一种木棉花发酵滤液的制备方法，其特征在于，所述木棉花发酵滤液制备方法包括：
(1)将木棉花粉末与水配置成酵母菌培养基；
(2)将酵母菌的发酵种子液接入酵母菌培养基中进行发酵得到发酵产物，将发酵产物离心、过滤后得到所述木棉花发酵滤液。
2.如权利要求1所述的木棉花发酵滤液的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述木棉花粉末的粒径为20-50目。
3.如权利要求1或2所述的木棉花发酵滤液的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述酵母菌包括葡萄酒酵母、啤酒酵母或酿酒酵母中的任意一种或至少两种的组合；
优选地，所述酵母菌为葡萄酒酵母、啤酒酵母和酿酒酵母的组合；
优选地，所述葡萄酒酵母、啤酒酵母和酿酒酵母的体积比为(1-2):(0.1-1):(0.5-2)。
4.如权利要求3所述的木棉花发酵滤液的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述酵母菌的发酵种子液的制备方法为：将酵母菌在固体培养基中培养得到酵母菌菌种，然后将酵母菌菌种转接至液体培养基培养得到发酵种子液。
5.如权利要求1-4中任一项所述的木棉花发酵滤液的制备方法，其特征在于，所述酵母菌在固体培养基中培养时温度为25-35℃；
优选地，所述液体培养基培养时温度为25-35℃，时间为10-15h。
6.如权利要求1-5中任一项所述的木棉花发酵滤液的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述酵母菌培养基按质量百分含量计包括木棉花粉末1-10％和水90-99％。
7.如权利要求1-6中任一项所述的木棉花发酵滤液的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述发酵种子液与酵母菌培养基的体积比为1:(7-12)。
8.如权利要求1-7中任一项所述的木棉花发酵滤液的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述发酵时温度为25-35℃，时间为108-144h；
优选地，步骤(2)所述发酵时进行搅拌处理；
优选地，所述搅拌的转速为100-150rpm。
9.一种木棉花发酵滤液，其特征在于，所述木棉花发酵滤液采用如权利要求1-8中任一项所述的方法制备得到。
10.如权利要求9所述的木棉花发酵滤液在制备抗衰保湿产品中的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202410161276.1A CN117982389A (zh) | 2024-02-04 | 2024-02-04 | 一种木棉花发酵滤液的制备方法及其产品和应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202410161276.1A CN117982389A (zh) | 2024-02-04 | 2024-02-04 | 一种木棉花发酵滤液的制备方法及其产品和应用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN117982389A true CN117982389A (zh) | 2024-05-07 |
Family
ID=90892175
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202410161276.1A Pending CN117982389A (zh) | 2024-02-04 | 2024-02-04 | 一种木棉花发酵滤液的制备方法及其产品和应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN117982389A (zh) |
-
2024
- 2024-02-04 CN CN202410161276.1A patent/CN117982389A/zh active Pending
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN113337545B (zh) | 裂褶菌发酵产物及其制备方法、护肤品、裂褶菌培养基 | |
| CN108324633B (zh) | 一种化妆品用糙米发酵原液的制备方法及其产品 | |
| CN106726949B (zh) | 一种葡萄籽发酵原浆化妆品及其制备方法与应用 | |
| CN113528384B (zh) | 一种双重二裂酵母发酵产物的制备方法和产品及其应用 | |
| CN107586721A (zh) | 一种具有抗氧化活性的二苯甲酮类化合物及其制备方法和应用 | |
| CN111363687B (zh) | 鲁氏结合酵母菌株及含其的玫瑰发酵液与应用 | |
| CN115006297A (zh) | 一种复活草发酵提取液、制备方法、应用 | |
| CN112870130A (zh) | 一种杜仲花粉发酵液的制备方法及其化妆品中的应用 | |
| CN111437224A (zh) | 一种利用微生物从大麻花叶中提取抗氧化成分的方法和应用 | |
| CN117982389A (zh) | 一种木棉花发酵滤液的制备方法及其产品和应用 | |
| CN113827523B (zh) | 一种玫瑰组合物及其应用 | |
| CN114073659B (zh) | 一种泛喜马拉雅地区鸡爪谷酒酒糟来源类干酪乳杆菌的发酵产物制备及其应用 | |
| KR20160121632A (ko) | 효모 발효 허브 복합체을 이용하여 항산화 효과가 우수하고 저자극인 추출물의 제조 방법 | |
| KR20110060002A (ko) | 숙취 개선용 조성물 | |
| KR20220039942A (ko) | 블루베리로부터 분리된 티로시나아제 저해 활성 및 항산화 활성이 있는 사카로마이세스 세레비지애 ft4-4 균주 및 이의 용도 | |
| CN114081862B (zh) | 一种泛喜马拉雅地区青稞酒酒曲来源的酿酒酵母发酵产物制备及其应用 | |
| CN110638738A (zh) | 一种低温浴处理玫瑰制备生态营养液的方法及应用 | |
| KR20210042451A (ko) | 항산화 활성을 갖는 미역귀 발효추출물을 함유하는 화장료 조성물 | |
| Agrawal et al. | Role of antimicrobial agents in simultaneous saccharification and fermentation of paddy malt mash to ethanol by mixed cultures of Saccharomyces cerevisiae PH03 and Zymomonas mobilis ZM4 | |
| CN115404242B (zh) | 农业废弃物环保化生物处理方法、生物制剂和用途 | |
| CN116855392B (zh) | 一种鱼腥草发酵液及其制备方法与应用 | |
| KR102403615B1 (ko) | 천마 조성물의 제조 방법 | |
| CN115364007B (zh) | 玫瑰茄花发酵物，含其皮肤外用剂，及其制备方法和应用 | |
| CN113974099B (zh) | 一种具有抗氧化活性的血橙发酵物的制备方法及其应用 | |
| CN113662894B (zh) | 一种积雪草酶解发酵物及其制备方法和应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |