CN116855319A - 含酶清洗剂及其制备方法 - Google Patents

含酶清洗剂及其制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN116855319A
CN116855319A CN202310821944.4A CN202310821944A CN116855319A CN 116855319 A CN116855319 A CN 116855319A CN 202310821944 A CN202310821944 A CN 202310821944A CN 116855319 A CN116855319 A CN 116855319A
Authority
CN
China
Prior art keywords
enzyme
cleaning agent
weight
amylase
containing cleaning
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202310821944.4A
Other languages
English (en)
Inventor
缪慧
张国庆
许相川
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Institute of Advanced Technology University of Science and Technology of China
Original Assignee
Institute of Advanced Technology University of Science and Technology of China
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Institute of Advanced Technology University of Science and Technology of China filed Critical Institute of Advanced Technology University of Science and Technology of China
Priority to CN202310821944.4A priority Critical patent/CN116855319A/zh
Publication of CN116855319A publication Critical patent/CN116855319A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D1/00—Detergent compositions based essentially on surface-active compounds; Use of these compounds as a detergent
    • C11D1/66—Non-ionic compounds
    • C11D1/83—Mixtures of non-ionic with anionic compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/20—Organic compounds containing oxygen
    • C11D3/2003—Alcohols; Phenols
    • C11D3/2065—Polyhydric alcohols
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/20—Organic compounds containing oxygen
    • C11D3/22—Carbohydrates or derivatives thereof
    • C11D3/222—Natural or synthetic polysaccharides, e.g. cellulose, starch, gum, alginic acid or cyclodextrin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/26—Organic compounds containing nitrogen
    • C11D3/33—Amino carboxylic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
    • C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
    • C11D3/38618—Protease or amylase in liquid compositions only
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D1/00—Detergent compositions based essentially on surface-active compounds; Use of these compounds as a detergent
    • C11D1/66—Non-ionic compounds
    • C11D1/72—Ethers of polyoxyalkylene glycols
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D1/00—Detergent compositions based essentially on surface-active compounds; Use of these compounds as a detergent
    • C11D1/66—Non-ionic compounds
    • C11D1/74—Carboxylates or sulfonates esters of polyoxyalkylene glycols

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Detergent Compositions (AREA)

Abstract

本发明公开了一种含酶清洗剂及其制备方法。该含酶清洗剂包括蛋白酶、淀粉酶、甘油、表面活性剂和酶稳定剂，所述酶稳定剂包括氨基酸和/或可溶性淀粉。该含酶清洗剂采用氨基酸和可溶性淀粉均可以抑制蛋白酶和淀粉酶在长期保存后酶活性的降低，具有更强的清洗能力和更长的保质期。

Description

含酶清洗剂及其制备方法
技术领域
本发明涉及清洗剂技术领域，具体涉及含酶清洗剂及其制备方法。
背景技术
含酶清洗剂常用于医疗器械的清洗，其主要是由表面活性剂、蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶等多种生物酶构成。在清洗如内镜等医疗器械表面的血渍和脂肪残留时，含酶清洗剂的清洗能力通常受到酶活性的影响，而随着反应次数的增加，酶活性逐渐降低直至丧失，同样，溶液中的酶在长期保存后酶活性同样会逐渐降低。
由此可见，现有的含酶清洗剂仍有待改进。
发明内容
本发明旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本发明的一个目的在于提出一种含酶清洗剂及其制备方法，该含酶清洗剂能够抑制酶在长期保存后酶活性的降低，具有更强的清洗能力和更长的保质期。
在本发明的第一个方面，本发明提出了一种含酶清洗剂。根据本发明的实施例，该含酶清洗剂包括：蛋白酶、淀粉酶、甘油、表面活性剂和酶稳定剂，所述酶稳定剂包括氨基酸和/或可溶性淀粉。
根据本发明上述实施例的含酶清洗剂，通过添加氨基酸能够增加溶液中游离的氨基酸含量，抑制蛋白酶和淀粉酶肽链氨基酸的脱落，从而抑制蛋白酶和淀粉酶在长期保存后酶活性的降低；通过添加可溶性淀粉，能够使可溶性淀粉与部分淀粉酶反应，增加部分淀粉酶肽链两端脱落的氨基酸的含量，在一定程度上抑制其余淀粉酶和蛋白酶与底物的反应，从而抑制蛋白酶和淀粉酶在长期保存后酶活性的降低，由此，采用氨基酸和可溶性淀粉均可以抑制蛋白酶和淀粉酶在长期保存后酶活性的降低，从而使含酶清洗剂具有更强的清洗能力和更长的保质期，其中，两者同时使用，效果更佳。并且，蛋白酶和淀粉酶是由多条肽链折叠聚合而成，甘油的分子大小远小于肽链中的氨基酸间隙，因此能够进入蛋白酶和淀粉酶肽链的空隙，减少蛋白酶和淀粉酶分子蛋白间的相互碰撞，同时阻止变性剂接近蛋白酶和淀粉酶的活性中心，由此提高蛋白酶和淀粉酶结构的稳定性，从而使含酶清洗剂具有更长的保质期。
另外，根据本发明上述实施例的含酶清洗剂还可以具有如下附加的技术特征：
在本发明的一些实施例中，所述含酶清洗剂包括：1重量份-4重量份的蛋白酶；0.1重量份-0.5重量份的淀粉酶；5重量份-10重量份的甘油；10重量份-20重量份的表面活性剂；0.1重量份-4.6重量份的酶稳定剂。
在本发明的一些实施例中，所述酶稳定剂包括0.1重量份-1重量份的氨基酸和/或0.4重量份-3.6重量份的可溶性淀粉。
在本发明的一些实施例中，所述氨基酸包括谷氨酸、苏氨酸、缬氨酸和赖氨酸中的至少之一。
在本发明的一些实施例中，所述表面活性剂包括脂肪醇聚氧乙烯醚羧酸钠。由此可以减小表面活性剂对蛋白酶和淀粉酶活性的影响。
在本发明的一些实施例中，所述表面活性剂还包括脂肪醇聚氧乙烯醚。由此可以提升含酶清洗剂的清洗能力。
在本发明的一些实施例中，所述脂肪醇聚氧乙烯醚羧酸钠与所述脂肪醇聚氧乙烯醚的质量比为(1～3):1。由此可以提升含酶清洗剂的清洗能力。
在本发明的第二个方面，本发明提出了一种制备上述含酶清洗剂的方法。根据本发明的实施例，该方法包括：(1)将蛋白酶、淀粉酶与甘油混合，以便得到混合液；(2)将所述混合液、表面活性剂与酶稳定剂混合，以便得到所述含酶清洗剂，所述酶稳定剂包括氨基酸和/或可溶性淀粉。
根据本发明上述实施例的制备含酶清洗剂的方法，通过将蛋白酶、淀粉酶与甘油混合，能够使甘油进入蛋白酶和淀粉酶肽链的空隙，减少蛋白酶和淀粉酶分子蛋白间的相互碰撞，同时阻止变性剂接近蛋白酶和淀粉酶的活性中心，由此提高蛋白酶和淀粉酶结构的稳定性；通过将混合液、表面活性剂与包括氨基酸和/或可溶性淀粉的酶稳定剂混合，氨基酸能够直接增加溶液中游离的氨基酸含量，抑制蛋白酶和淀粉酶肽链氨基酸的脱落，从而抑制蛋白酶和淀粉酶在长期保存后酶活性的降低；可溶性淀粉能够与部分淀粉酶反应，增加部分淀粉酶肽链两端脱落的氨基酸的含量，在一定程度上抑制其余淀粉酶和蛋白酶与底物的反应，从而抑制蛋白酶和淀粉酶在长期保存后酶活性的降低，使制得的含酶清洗剂具有更强的清洗能力和更长的保质期，其中，氨基酸和可溶性淀粉同时使用，效果更佳。
另外，根据本发明上述实施例的制备含酶清洗剂的方法还可以具有如下附加的技术特征：
在本发明的一些实施例中，制备含酶清洗剂的方法还包括：(3)将步骤(2)得到的所述含酶清洗剂进行超声处理。由此提高蛋白酶和淀粉酶结构的稳定性。
在本发明的一些实施例中，所述超声处理的时间为3min-10min，所述超声处理的频率为37kHz-80kHz。
本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。
附图说明
本发明的上述和/或附加的方面和优点从结合下面附图对实施例的描述中将变得明显和容易理解，其中：
图1是根据本发明一个实施例的制备含酶清洗剂的方法流程示意图。
具体实施方式
下面详细描述本发明的实施例，所述实施例的示例在附图中示出，其中自始至终相同或类似的标号表示相同或类似的元件或具有相同或类似功能的元件。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的，旨在用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。
本发明的技术方案是发明人基于下列发现完成的：酶促反应的本质是随着酶催化反应的进行，由氨基酸构成的酶肽链不断地脱落成游离的氨基酸，同时酶肽链中的氨基酸也会随着放置时间的增加而脱落，因此，随着反应次数的增加，酶活性逐渐降低直至丧失，同样，酶在长期保存后酶活性同样会逐渐降低。
为此，在本发明的第一个方面，本发明提出了一种含酶清洗剂。根据本发明的实施例，该含酶清洗剂包括：蛋白酶、淀粉酶、甘油、表面活性剂和酶稳定剂，酶稳定剂包括氨基酸和/或可溶性淀粉。根据本发明实施例的含酶清洗剂，通过添加氨基酸能够增加溶液中游离的氨基酸含量，抑制蛋白酶和淀粉酶肽链氨基酸的脱落，从而抑制蛋白酶和淀粉酶在长期保存后酶活性的降低；通过添加可溶性淀粉，能够使可溶性淀粉与部分淀粉酶反应，增加部分淀粉酶肽链两端脱落的氨基酸的含量，在一定程度上抑制其余淀粉酶和蛋白酶与底物的反应，从而抑制蛋白酶和淀粉酶在长期保存后酶活性的降低，由此，采用氨基酸和可溶性淀粉均可以抑制蛋白酶和淀粉酶在长期保存后酶活性的降低，从而使含酶清洗剂具有更强的清洗能力和更长的保质期，其中，两者同时使用，效果更佳。并且，酶是由多条肽链折叠聚合而成，甘油的分子大小远小于酶肽链中的氨基酸间隙，因此能够进入蛋白酶和淀粉酶肽链的空隙，减少蛋白酶和淀粉酶分子蛋白间的相互碰撞，同时阻止变性剂接近蛋白酶和淀粉酶的活性中心，由此提高蛋白酶和淀粉酶结构的稳定性，从而使含酶清洗剂具有更长的保质期。
根据本发明的实施例，含酶清洗剂可以包括：1重量份-4重量份的蛋白酶；0.1重量份-0.5重量份的淀粉酶；5重量份-10重量份的甘油；10重量份-20重量份的表面活性剂；0.1重量份-4.6重量份的酶稳定剂。发明人经过大量实验得到上述较优配方，由此，可以抑制蛋白酶和淀粉酶在长期保存后酶活性的降低，从而使含酶清洗剂具有更强的清洗能力和更长的保质期。在本发明的一些具体实施例中，含酶清洗剂还可以包括60.9重量份-83.8重量份的溶剂，例如水。
根据本发明的实施例，表面活性剂可以包括脂肪醇聚氧乙烯醚羧酸钠。表面活性剂是清洗剂中最常见的添加剂，但是常规的表面活性剂对蛋白酶和淀粉酶活性的影响较大，发明人经过大量实验发现，十二烷基苯磺酸钠(LAS)、十二烷基硫酸钠(AOS)、脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠(AES)、脂肪醇聚氧乙烯醚羧酸钠(AEC-9Na)对蛋白酶和淀粉酶活性的影响依次减小，其中，AEC-9Na和AES的分子结构中含有环氧乙烷链，对酶活性的影响比较小，而从亲水基电荷强度考虑AEC-9Na与蛋白酶和淀粉酶的作用要比AES更小。由此选用AEC-9Na作为含酶清洗剂配方中表面活性剂的主剂可以减小表面活性剂对蛋白酶和淀粉酶活性的影响。
根据本发明的实施例，表面活性剂还可以包括脂肪醇聚氧乙烯醚。发明人经过大量实验发现，将阴离子表面活性剂AEC-9Na与非离子表面活性剂脂肪醇聚氧乙烯醚(AEO-9)复配能够显著提高表面活性，同时可以提高AEO-9的浊点，从而提高含酶清洗剂在较高温度条件下使用的稳定性，并增加含酶清洗剂的溶解度，进而提升含酶清洗剂的清洗能力。在本发明的一些具体实施例中，含酶清洗剂可以在45℃使用。
根据本发明的实施例，脂肪醇聚氧乙烯醚羧酸钠与脂肪醇聚氧乙烯醚的质量比可以为(1～3):1，例如可以为1:1、1.25:1、1.5:1、1.75:1、2:1、2.25:1、2.5:1、2.75:1、3:1等。发明人发现，若脂肪醇聚氧乙烯醚羧酸钠与脂肪醇聚氧乙烯醚的质量比过小，则含酶清洗剂在较高温度条件下使用的稳定性较差，并且溶解度较小，若脂肪醇聚氧乙烯醚羧酸钠与脂肪醇聚氧乙烯醚的质量比过大，则表面活性剂复配体系对蛋白酶和淀粉酶活性造成的影响较大。由此，本发明通过将脂肪醇聚氧乙烯醚羧酸钠与脂肪醇聚氧乙烯醚的质量比控制在上述范围内，既可以减小表面活性剂复配体系对蛋白酶和淀粉酶活性造成的影响，还可以提高含酶清洗剂在较高温度条件下使用的稳定性，并增加含酶清洗剂的溶解度，进而提升含酶清洗剂的清洗能力。
根据本发明的实施例，酶稳定剂可以包括0.1重量份-1重量份的氨基酸和/或0.4重量份-3.6重量份的可溶性淀粉。由此可以进一步抑制蛋白酶和淀粉酶在长期保存后酶活性的降低，从而使含酶清洗剂具有更强的清洗能力和更长的保质期。
根据本发明的实施例，氨基酸可以包括谷氨酸、苏氨酸、缬氨酸和赖氨酸中的至少之一。由此可以进一步抑制蛋白酶和淀粉酶肽链氨基酸的脱落，从而抑制蛋白酶和淀粉酶在长期保存后酶活性的降低，使含酶清洗剂具有更强的清洗能力和更长的保质期。
在本发明的第二个方面，本发明提出了一种制备上述含酶清洗剂的方法。根据本发明的实施例，参考图1，该方法包括：
S100：将蛋白酶、淀粉酶与甘油混合
该步骤中，将蛋白酶、淀粉酶与甘油混合，得到混合液，由于蛋白酶和淀粉酶是由多条肽链折叠聚合而成的，甘油分子的大小远小于肽链中氨基酸之间的间隙，通过将蛋白酶、淀粉酶与甘油混合，能够使甘油进入蛋白酶和淀粉酶肽链的空隙，减少蛋白酶和淀粉酶分子蛋白间的相互碰撞，同时阻止变性剂接近蛋白酶和淀粉酶的活性中心，由此提高蛋白酶和淀粉酶结构的稳定性。进一步地，可以将蛋白酶、淀粉酶分别与甘油混合，得到蛋白酶与甘油的混合液，以及淀粉酶与甘油的混合液，由此可以进一步减少蛋白酶和淀粉酶分子蛋白间的相互碰撞，提高蛋白酶和淀粉酶结构的稳定性。
S200：将步骤S100得到的混合液、表面活性剂与酶稳定剂混合
该步骤中，将步骤S100得到的混合液、表面活性剂与酶稳定剂混合，得到含酶清洗剂，上述酶稳定剂包括氨基酸和/或可溶性淀粉，通过将步骤S100得到的混合液、表面活性剂与包括氨基酸和/或可溶性淀粉的酶稳定剂混合，氨基酸能够直接增加溶液中游离的氨基酸含量，抑制蛋白酶和淀粉酶肽链氨基酸的脱落，从而抑制蛋白酶和淀粉酶在长期保存后酶活性的降低；可溶性淀粉能够与部分淀粉酶反应，增加部分淀粉酶肽链两端脱落的氨基酸的含量，在一定程度上抑制其余淀粉酶和蛋白酶与底物的反应，从而抑制蛋白酶和淀粉酶在长期保存后酶活性的降低，使制得的含酶清洗剂具有更强的清洗能力和更长的保质期，其中，氨基酸和可溶性淀粉同时使用，效果更佳。
根据本发明的实施例，制备上述含酶清洗剂的方法还可以包括：
S300：将步骤S200得到的含酶清洗剂进行超声处理
该步骤中，由于蛋白酶和淀粉酶本质上是蛋白质，将步骤S200得到的含酶清洗剂进行超声处理，可以提高蛋白酶和淀粉酶等蛋白质表面疏水性并改变其二级结构，同时可以提高热诱导的蛋白酶和淀粉酶等蛋白质的折叠强度，从而增强蛋白酶和淀粉酶在含酶清洗剂中的稳定性。
根据本发明的实施例，超声处理的时间可以为3min-10min，例如可以为3min、4min、5min、6min、7min、8min、9min、10min等，超声处理的频率可以为37kHz-80kHz，例如可以为37kHz、40kHz、45kHz、50kHz、55kHz、60kHz、65kHz、70kHz、75kHz、80kHz等。发明人发现若超声处理的时间过长或频率过高，则会对蛋白酶和淀粉酶等蛋白质结构造成破坏，若超声处理的时间过短或频率过低，则无法有效提高热诱导的蛋白酶和淀粉酶等蛋白质的折叠强度并增强其在含酶清洗剂中的稳定性。本发明通过将超声条件控制在上述范围内，不仅可以提高热诱导的蛋白酶和淀粉酶等蛋白质的折叠强度并增强其在含酶清洗剂中的稳定性，还可以避免对蛋白酶和淀粉酶等蛋白质结构造成破坏。
下面参考具体实施例，对本发明进行描述，需要说明的是，这些实施例仅仅是描述性的，而不以任何方式限制本发明。实施例中未注明具体技术或条件的，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用原料未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
实施例1
含酶清洗剂配方包括：4重量份的蛋白酶、0.5重量份的淀粉酶、5重量份的甘油、5重量份的AEC-9Na、5重量份的AEO-9、0.5重量份的谷氨酸、2重量份的可溶性淀粉和78重量份的水。将蛋白酶、淀粉酶分别与甘油混合，得到蛋白酶的甘油溶液和淀粉酶的甘油溶液；将蛋白酶的甘油溶液、淀粉酶的甘油溶液、AEC-9Na、AEO-9、谷氨酸、可溶性淀粉与水混合，得到含酶清洗剂；将得到的含酶清洗剂进行超声处理，超声处理的时间为3min，超声处理的频率为37kHz。
含酶清洗剂清洗能力测试
采用《T/WSJD 002-2019医用清洗剂卫生要求》中规定的人工模拟污染物制作方法，制作人工模拟污染物来验证本实施例的含酶清洗剂的清洗能力：
3片模拟污染物为一组，在干燥器中过夜后，称重为m0(每组污染片待天平回零后称重三次，精确至0.1mg，取其平均值作为试验前重量，称重时，应用镊子夹取，勿以手直接接触样片)。在试验开始前20min，将盛有300mL的待测含酶清洗剂的玻璃罐，在水浴中恒温至40℃。将3片模拟污染物分别放入3个盛有300mL待测含酶清洗剂的玻璃罐中，加盖。以45r/min-60r/min的转动速度旋转洗涤预定时间，取下玻璃罐，取出模拟污染物，挂在晾架上，30℃存放2h后，称重为m1，并目测其清洗效果。
称量后的模拟污染物，按以下步骤去污：
a)在含洗涤剂的水中浸泡30min；
b)超声波中清洗30min；
c)纯净水洗净；
d)放入含洗涤剂的水中煮沸30min；
e)用自来水洗净；
f)用蒸馏水煮沸10min；
g)用蒸馏水漂洗至pH呈中性；
h)挂在晾架上30min后并在干燥器中过夜后，称每组样品的重量，为m2。
计算人工模拟污染物去除率R：
式中：
R为人工模拟污染物去除率(％)；
m0为清洗前模拟污染物质量，单位为毫克(mg)；
m1为含酶清洗剂清洗后模拟污染物质量，单位为毫克(mg)；
m2为洗净后模拟污染物质量，单位为毫克(mg)；
每一待测样品需准备三组模拟污染物，取三组模拟污染物的测试结果的平均值作为测量样品的人工模拟污染物去除率，测试结果如表1所示。
表1
由表1可以看出，无论是蛋白质、脂肪、淀粉三种污染物单一的去除率还是混合污染物去除率，本实施例的含酶清洗剂均处于较高水平。
含酶清洗剂酶活测试
对本实施例的含酶清洗剂在37℃环境下放置90天(模拟2年有效期)前后的酶活性(包括蛋白酶和淀粉酶)分别进行两次平行测试，以表征本实施例的含酶清洗剂保质期的延长效果。
对含酶清洗剂的蛋白酶活性进行测试的方法如下：
蛋白酶在一定的温度与pH条件下，水解酪素(酪蛋白)底物，产生含有酚基的氨基酸(如：酪氨酸、色氨酸等)，在碱性条件下，将福林试剂(Folin)还原，生产钼蓝和钨蓝，用分光光度计于波长680nm下测定溶液吸光度，酶活力与吸光度成正比，由此可以计算产品的酶活力，酶活力单位的定义为：每1mL粗酶液，在一定温度和pH值条件下，10min水解酪素产生1μg酪氨酸为一个酶活力单位，以u/mL表示。
标准曲线的绘制：
L-酪氨酸标准溶液：按照表2配制(L-酪氨酸稀释液应在稀释后立即进行测定)。
表2
分别取上述溶液各3.00ml，各加42.4g/L的碳酸钠溶液15.00ml、福林试剂使用溶液(一份福林试剂与两份水混合)3.00mL，振荡均匀，置于40℃±0.2℃水浴中显色20min，取出冷却至常温，用分光光度计于波长680nm测定其吸光度(A)，以吸光度A为纵坐标，酪氨酸的浓度c为横坐标，绘制标准曲线(此线应通过零点)。
不通过零点：
y＝0.0069x-0.0237
R2＝0.9713
通过零点：
y＝0.0062x
R2＝0.9838
准确吸取样品10.0mL于100mL容量瓶中，用适宜溶剂(蒸馏水或者缓冲溶液)定容至刻度。控制稀释样品酶活力在100u/mL-1000u/mL范围内。
a、先将酪素溶液放入40±0.2℃恒温水浴中，预热5min；
b、按下列程序操作：
试管A(空白)：加稀释样品4.00mL，于40±0.2℃保温2min，加0.4mol/L的三氯乙酸8.00mL(摇匀)，用沸水煮沸10min(精确计时)，加10g/L的酪素溶液(已预热)4.00mL(摇匀)，于40±0.2℃保温30min，过滤(定性滤纸)，取3.00mL滤液，加42.4g/L的碳酸钠溶液15.0mL，加福林试剂使用溶液3.00mL，于40±0.2℃显色20min，冷却至常温，于680nm波长，测定酪氨酸浓度；
试管B(酶试样，需作三个平行试样)：加稀释样品4.00mL，于40±0.2℃保温2min，加10g/L的酪素溶液(已预热)4.00mL(摇匀)，于40±0.2℃保温30min(精确计时)，加0.4mol/L的三氯乙酸8.00mL(摇匀)，用沸水煮沸10min，过滤(定性滤纸)，取3.00mL滤液，加42.4g/L的碳酸钠溶液15.0mL，加福林试剂使用溶液3.00mL，于40±0.2℃显色20min，冷却至常温，于680nm波长，测定酪氨酸浓度。
从标准曲线上读出样品最终稀释液的酶活力，单位为u/mL。样品的酶活力按式(1)计算：
式中：
X为样品的酶活力(u/mL)；
C为由标准曲线得出的检测试液的酶活力(u/mL)；
21为检测试液的体积(mL)；
16为反应试液的总体积(mL)；
N为所测样品的稀释倍数；
3为反应时间为10min的倍数；
3为吸取滤液的体积(mL)；
4为加入稀释样品的体积(mL)；
所得结果表示至整数，含酶清洗剂中蛋白酶活性的两次平行测试的结果如表3所示。
对含酶清洗剂的淀粉酶活性进行测试的方法如下：
α-淀粉酶能将淀粉分子链中的α-1,4葡萄糖苷键随机切断成长短不一的短链糊精、少量麦芽糖和葡萄糖，而使淀粉对碘呈蓝紫色的特异性反应逐渐消失，呈红棕色，其颜色消失的速度与酶活性有关，可通过固定反应后的吸光度计算其酶活力。
称取碘(I2)11g、碘化钾(KI)22g，用少量蒸馏水使碘完全溶解，然后定容至500mL；吸取上述原碘液2.00mL，加碘化钾20g用蒸馏水溶解并定容至500mL，贮于棕色瓶中；称取可溶性淀粉2.000g，精确至0.001g，用蒸馏水调成浆状物，在搅动下缓缓倾入70mL沸水中，然后以30mL蒸馏水分几次冲洗装淀粉的烧杯，洗液并入其中，加热至完全透明，冷却，定容至100mL；吸取含酶清洗剂1.00mL，用磷酸缓冲液(pH＝6)定容至刻度，摇匀。通过四层纱布过滤，滤液供测定用；吸取可溶性淀粉溶液20.0mL于试管中，加入磷酸缓冲液(pH＝6)5.00mL，摇匀后，于60℃±0.2℃恒温水浴中预热5min。加入稀释好的待测含酶清洗剂1.00mL，立刻计时，摇匀，准确反应5min。立即吸取反应液1.00mL于5.00mL稀碘液中，摇匀，并以稀碘液作空白，于660nm波长下，用10mm比色皿，迅速测定其吸光度(A)。根据其吸光度查《T/WSJD002-2019医用清洗剂卫生要求》表B.1，求得测试含酶清洗剂中淀粉酶的酶浓度(酶活性，u/mL)，两次平行测试的结果如表4所示。
对比例1
含酶清洗剂配方包括：4重量份的蛋白酶、0.5重量份的淀粉酶、5重量份的甘油、5重量份的AEC-9Na、5重量份的AEO-9和80.5重量份的水。将蛋白酶、淀粉酶分别与甘油混合，得到蛋白酶的甘油溶液和淀粉酶的甘油溶液；将蛋白酶的甘油溶液、淀粉酶的甘油溶液、AEC-9Na、AEO-9与水混合，得到含酶清洗剂，其余步骤与实施例1相同。含酶清洗剂在37℃环境下放置90天前后，其蛋白酶活性两次平行测试的结果如表3所示，淀粉酶活性两次平行测试的结果如表4所示。
表3
表4
由表3和表4可以看出，实施例1的含酶清洗剂在37℃的条件下放置90天(模拟2年有效期)后，蛋白酶活性和淀粉酶活性相较于对比例1均有明显提升，由此可见，本发明的含酶清洗剂通过添加氨基酸、可溶性淀粉，能够极大地提升蛋白酶和淀粉酶在含酶清洗剂中的活性有效期，进而延长含酶清洗剂的保质期。
实施例2
含酶清洗剂配方包括：1重量份的蛋白酶、0.1重量份的淀粉酶、10重量份的甘油、10重量份的AEC-9Na、10重量份的AEO-9、0.1重量份的谷氨酸、0.4重量份的可溶性淀粉和68.4重量份的水。将蛋白酶、淀粉酶分别与甘油混合，得到蛋白酶的甘油溶液和淀粉酶的甘油溶液；将蛋白酶的甘油溶液、淀粉酶的甘油溶液、AEC-9Na、AEO-9、谷氨酸、可溶性淀粉与水混合，得到含酶清洗剂；将得到的含酶清洗剂进行超声处理，超声处理的时间为10min，超声处理的频率为37kHz。
对超声处理后的含酶清洗剂在54℃环境下放置14天前后的酶活性分别进行测试，测试方法同实施例1，并计算其酶活下降率，酶活下降率＝(含酶清洗剂在54℃环境下放置14天前的酶活性-在54℃环境下放置14天前后的酶活性)/含酶清洗剂在54℃环境下放置14天前的酶活性，测试结果如表5所示。
实施例3
含酶清洗剂配方包括：2重量份的蛋白酶、0.2重量份的淀粉酶、10重量份的甘油、10重量份的AEC-9Na、10重量份的AEO-9、0.2重量份的谷氨酸、0.8重量份的可溶性淀粉和66.8重量份的水，其余同实施例2。
实施例4
含酶清洗剂配方包括：3重量份的蛋白酶、0.3重量份的淀粉酶、10重量份的甘油、10重量份的AEC-9Na、10重量份的AEO-9、0.4重量份的谷氨酸、1.2重量份的可溶性淀粉和65.1重量份的水，其余同实施例2。
实施例5
含酶清洗剂配方包括：4重量份的蛋白酶、0.4重量份的淀粉酶、10重量份的甘油、10重量份的AEC-9Na、10重量份的AEO-9、0.5重量份的谷氨酸、1.6重量份的可溶性淀粉和63.5重量份的水，其余同实施例2。
实施例6
含酶清洗剂配方包括：4重量份的蛋白酶、0.5重量份的淀粉酶、10重量份的甘油、10重量份的AEC-9Na、10重量份的AEO-9、0.6重量份的谷氨酸、2.0重量份的可溶性淀粉和62.9重量份的水，其余同实施例2。
实施例7
含酶清洗剂配方包括：4重量份的蛋白酶、0.5重量份的淀粉酶、10重量份的甘油、10重量份的AEC-9Na、10重量份的AEO-9、0.7重量份的谷氨酸、2.4重量份的可溶性淀粉和62.4重量份的水，其余同实施例2。
实施例8
含酶清洗剂配方包括：4重量份的蛋白酶、0.5重量份的淀粉酶、10重量份的甘油、10重量份的AEC-9Na、10重量份的AEO-9、0.8重量份的谷氨酸、2.8重量份的可溶性淀粉和61.9重量份的水，其余同实施例2。
实施例9
含酶清洗剂配方包括：4重量份的蛋白酶、0.5重量份的淀粉酶、10重量份的甘油、10重量份的AEC-9Na、10重量份的AEO-9、0.9重量份的谷氨酸、3.2重量份的可溶性淀粉和61.4重量份的水，其余同实施例2。
实施例10
含酶清洗剂配方包括：4重量份的蛋白酶、0.5重量份的淀粉酶、10重量份的甘油、10重量份的AEC-9Na、10重量份的AEO-9、1.0重量份的谷氨酸、3.6重量份的可溶性淀粉和60.9重量份的水，其余同实施例2。
表5
由实施例2～10可以看出，当含酶清洗剂配方中谷氨酸添加量为0.1重量份-1重量份，可溶性淀粉添加量为0.4重量份-3.6重量份时，蛋白酶酶活下降率为不高于3.47％，淀粉酶酶活下降率不高于4.11％，能够较好的延长两种酶在含酶清洗剂中的有效期。
在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。
尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。

Claims (10)

1.一种含酶清洗剂，其特征在于，包括：蛋白酶、淀粉酶、甘油、表面活性剂和酶稳定剂，所述酶稳定剂包括氨基酸和/或可溶性淀粉。
2.根据权利要求1所述的含酶清洗剂，其特征在于，所述含酶清洗剂包括：
1重量份-4重量份的蛋白酶；
0.1重量份-0.5重量份的淀粉酶；
5重量份-10重量份的甘油；
10重量份-20重量份的表面活性剂；
0.1重量份-4.6重量份的酶稳定剂。
3.根据权利要求2所述的含酶清洗剂，其特征在于，所述酶稳定剂包括0.1重量份-1重量份的氨基酸和/或0.4重量份-3.6重量份的可溶性淀粉。
4.根据权利要求1所述的含酶清洗剂，其特征在于，所述氨基酸包括谷氨酸、苏氨酸、缬氨酸和赖氨酸中的至少之一。
5.根据权利要求1-3中任一项所述的含酶清洗剂，其特征在于，所述表面活性剂包括脂肪醇聚氧乙烯醚羧酸钠。
6.根据权利要求5所述的含酶清洗剂，其特征在于，所述表面活性剂还包括脂肪醇聚氧乙烯醚。
7.根据权利要求6所述的含酶清洗剂，其特征在于，所述脂肪醇聚氧乙烯醚羧酸钠与所述脂肪醇聚氧乙烯醚的质量比为(1～3):1。
8.一种制备权利要求1-7中任一项所述的含酶清洗剂的方法，其特征在于，包括：
(1)将蛋白酶、淀粉酶与甘油混合，以便得到混合液；
(2)将所述混合液、表面活性剂与酶稳定剂混合，以便得到所述含酶清洗剂，所述酶稳定剂包括氨基酸和/或可溶性淀粉。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，还包括：
(3)将步骤(2)得到的所述含酶清洗剂进行超声处理。
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述超声处理的时间为3min-10min，所述超声处理的频率为37kHz-80kHz。
CN202310821944.4A 2023-07-05 2023-07-05 含酶清洗剂及其制备方法 Pending CN116855319A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202310821944.4A CN116855319A (zh) 2023-07-05 2023-07-05 含酶清洗剂及其制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202310821944.4A CN116855319A (zh) 2023-07-05 2023-07-05 含酶清洗剂及其制备方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN116855319A true CN116855319A (zh) 2023-10-10

Family

ID=88226273

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202310821944.4A Pending CN116855319A (zh) 2023-07-05 2023-07-05 含酶清洗剂及其制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN116855319A (zh)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20020019325A1 (en) Acidic cleaning composition comprising an acidic protease obtained from aspergillus aculeatus
JPS62182651A (ja) 混濁除去剤
CN101679987A (zh) 嗜碱芽孢杆菌物种α-淀粉酶变体、包括α-淀粉酶变体的组合物以及使用方法
CN104568929A (zh) 一种食品中过氧化氢残留快速检测试纸
CN103484267B (zh) 一种内镜清洗消毒机专用多酶清洗液及其制备工艺
EP1075505A1 (en) An acidic cleaning composition comprising an acidic protease
CN113584125B (zh) 一种液态稳定的5’-核苷酸酶校准品及检测试剂盒及其应用
JPH01500642A (ja) プロテアーゼ、その製造および用途
JPH0696717B2 (ja) 酵素洗剤組成物
CN116855319A (zh) 含酶清洗剂及其制备方法
JPH0647679B2 (ja) 酵素含有皿洗い組成物
CN110463925A (zh) 一种固定化蛋白酶制备高起泡性蛋清液的方法
KR100894491B1 (ko) 계면활성제계
JPH06240297A (ja) 酵素固定化洗浄用助剤
CN115895791A (zh) 一种奶瓶清洗机用洗涤剂组合物及制备方法
JP2011072208A (ja) 酵母早期凝集性の抑制された大麦麦芽の製造方法
DK159501B (da) Flydende vaskemiddel med enzymblanding
CN110343527B (zh) 量子点荧光探针及其制备方法和应用以及检测弹性蛋白酶活性的方法和试剂盒
CN109490296A (zh) 一种脂肪酶检测试剂盒及生产工艺
Rammeloo et al. Two serum pancreatic isoamylase determinations compared.
JP2009052006A (ja) 酵素含有洗浄剤組成物
CN1230557C (zh) 酶的检测和测量
SE451593B (sv) Lagalkaliskt enzyminnehallande maskindiskmedel
US3625653A (en) Determination of the isoelectric points of proteins
Etoh et al. Photo-oxidation of a histidyl residue of milk-clotting acid protease, Mucor rennin

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination