CN116813674A - 一种唾液酸-喜树碱前药Sia-ss-CPT及其制备方法与应用 - Google Patents

一种唾液酸-喜树碱前药Sia-ss-CPT及其制备方法与应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种唾液酸‑喜树碱前药Sia‑ss‑CPT，其结构式如下式所示：本发明通过将唾液酸与喜树碱偶联，增强了游离喜树碱的水溶性与肿瘤靶向性。同时，唾液酸为人体内源性物质，通过与唾液酸的偶联，增强了游离喜树碱的生物相容性，减少了对机体的毒副作用。本发明通过二硫键连接唾液酸与喜树碱，可使前药在肿瘤部位谷胱甘肽下响应性释放CPT，具有一定的缓释作用。

Description

一种唾液酸-喜树碱前药Sia-ss-CPT及其制备方法与应用
技术领域
本发明属于药物制剂技术领域，具体涉及一种唾液酸-喜树碱前药Sia-ss-CPT及其制备方法与应用。
背景技术
公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
癌症是世界范围内造成人类大量死亡的主要原因之一，巨大数量的癌症病例和癌症死亡病例对各个国家构成了严重的社会和经济负担。化疗是癌症治疗的重要组成部分，目前已有许多药物被批准应用于癌症的临床化疗，但不幸的是，癌症化疗往往伴随着严重的不良反应，而且在大多数情况下，患者的预后很差。化疗药物的肿瘤靶向性低、药物水溶性差、生物利用度低、毒性副作用大、甚至诱导机体产生多药耐药，这些不足大大地限制了其在临床上的应用。
为了克服上述缺点，很多研究人员将目光看向了纳米载体，纳米载体可以将抗癌药物定向运输到肿瘤细胞，增强药物在肿瘤中的蓄积，防止不良副作用。但是纳米载体的生物安全性仍受到一定的争议，其有效性也受到物理化学性质的影响。纳米药物的表征、安全性问题、监管以及大量制造等多方面因素进一步阻碍了癌症纳米药物的研发应用。因而，开发新的化疗药物制剂种类具有十分重要的意义。
喜树碱(20-(S)-Camptothecin，CPT)为吡咯喹啉类细胞毒性生物碱，是除紫杉醇之外研究最多的天然抗肿瘤药物之一，对多种肿瘤有较强的抗肿瘤活性。虽然CPT的抗肿瘤效果优异，但其水不溶性和严重的副作用，包括骨髓抑制、呕吐、腹泻和严重出血性膀胱炎等在很大程度上限制了其临床应用。需进一步研究解决CPT及其衍生物的水溶性问题，改善传统抗癌药物缺乏靶向性以及口服药物的生物利用度差等问题。同时减少CPT及其衍生物的副作用，增加药物利用度，并具有更好的疗效与药物安全性，在治疗中取得更加瞩目的成果，推动CPT及其衍生物进一步走向临床应用。
发明内容
为了克服上述问题，本发明提供了一种唾液酸-喜树碱前药Sia-ss-CPT及其制备方法与应用。本发明利用肿瘤细胞表面的糖缀合物为靶点，，合成了可靶向肿瘤的唾液酸-喜树碱偶联物Sia-ss-CPT，利用唾液酸增强CPT的水溶性与靶向能力，从而产生更好的肿瘤抑制效力，减少药物对机体的毒副作用。
为实现上述技术目的，本发明采用如下技术方案：
本发明的第一个方面，提供了一种唾液酸-喜树碱前药Sia-ss-CPT，其结构式如下式所示：
本发明的第二个方面，提供上述唾液酸-喜树碱前药Sia-ss-CPT的制备方法，所述方法包括以下步骤：
S1、将三苯基膦溶于THF溶液中，在0℃条件下滴加偶氮二甲酸二乙酯，反应10min，制得溶液A；将唾液酸三乙胺盐溶于DMF后滴加巯基乙酸，制得溶液B；将溶液B加入到溶液A中，在室温下搅拌反应3～4h，滴加甲醇终止反应，纯化后得到9-SAc-Sia；
S2、将S1中制得的9-SAc-Sia在冰浴以及惰性气体保护下，加入甲醇钠甲醇溶液，反应一段时间后，加入DOEWX树脂进行中和，过滤除去树脂后，混合溶液加水浓缩后冻干，得9-SH-Sia(化合物2)；
S3、在冰浴以及惰性气体保护下，将CTP(化合物3)与二甲氨基吡啶(DMAP)溶于无水二氯甲烷中，制得溶液C；将三光气溶于少量的无水二氯甲烷后，制得溶液D；后将溶液D滴入溶液C中，反应一段时间后，加入2-[2-(吡啶基)二硫基]乙醇，室温条件下反应过夜；反应结束后，产物经纯化后得到化合物4；
S4、在室温的条件下，将步骤S2中制得的9-SH-Sia溶于超干甲醇后，制得溶液E；将步骤S3中得到的化合物4溶于无水二氯甲烷中，制得溶液F，将溶液F滴入溶液E中，搅拌反应10～14h，反应结束后，产物纯化制得唾液酸-喜树碱前药Sia-ss-CPT；
本发明的第三方面，提供一种抗肿瘤的药物制剂，所述药物制剂包括上述唾液酸-喜树碱前药Sia-ss-CPT。
本发明的有益效果在于：
(1)本发明利用肿瘤细胞表面的糖缀合物为靶点，合成了可靶向肿瘤的唾液酸-喜树碱偶联物Sia-ss-CPT，利用唾液酸增强CPT的水溶性与靶向能力，从而产生更好的肿瘤抑制效力，减少药物对机体的毒副作用。
(2)本发明通过二硫键连接唾液酸与喜树碱，可使前药在肿瘤部位谷胱甘肽下响应性释放CPT，具有一定的缓释作用。
(3)唾液酸为人体内源性物质，通过与唾液酸的偶联，增强了游离喜树碱的生物相容性，减少了对机体的毒副作用。
附图说明
构成本发明的一部分的说明书附图用来提供对本发明的进一步理解，本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，并不构成对本发明的不当限定。
图1为9-SH-Sia(化合物2)的核磁共振氢谱图；
图2为9-SH-Sia(化合物2)的核磁共振碳谱图；
图3为化合物4的核磁共振氢谱图；
图4为化合物4的核磁共振碳谱图；
图5为化合物Sia-ss-CPT核磁共振氢谱图；
图6为化合物Sia-ss-CPT的核磁共振碳谱图；
图7为本发明实验例1中的CPT与Sia-ss-CPT内酯稳定性比较图；
图8为本发明实验例2中的Sia-ss-CPT对GSH的响应性释放图；
图9为本发明实验例3中CPT与Sia-ss-CPT对4T1细胞的杀伤效力图；
图10为本发明实验例3中CPT与Sia-ss-CPT对EL4细胞的杀伤效力图；
图11为本发明实验例4中CPT与Sia-ss-CPT治疗中4T1肿瘤生长曲线图；
图12为本发明实验例4中CPT与Sia-ss-CPT在4T1肿瘤模型中治疗组小鼠生存率折线图；
图13为本发明实验例4中CPT与Sia-ss-CPT在4T1肿瘤模型中组肿瘤实际比较图；
图14为本发明实验例5中CPT与Sia-ss-CPT治疗中H22肿瘤生长曲线图；
图15为本发明实验例5中CPT与Sia-ss-CPT在H22肿瘤模型中治疗组小鼠体重变化图；
图16为本发明实验例5中CPT与Sia-ss-CPT在H22肿瘤模型中组肿瘤实际比较图。
具体实施方式
应该指出，以下详细说明都是示例性的，旨在对本发明提供进一步的说明。除非另有指明，本发明使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本发明的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也意图包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件和/或它们的组合。
本发明的第一种典型实施方式，提供了一种唾液酸-喜树碱前药Sia-ss-CPT，其结构式如下式所示：
本发明的第二种典型实施方式，提供上述唾液酸-喜树碱前药Sia-ss-CPT的制备方法，所述方法包括以下步骤：
S1、将三苯基膦溶于THF溶液中，在0℃条件下滴加偶氮二甲酸二乙酯，反应10min，制得溶液A；将唾液酸三乙胺盐溶于DMF后滴加巯基乙酸，制得溶液B；将溶液B加入到溶液A中，在室温下搅拌反应3～4h，滴加甲醇终止反应，纯化后得到9-SAc-Sia；
S2、将S1中制得的9-SAc-Sia在冰浴以及惰性气体保护下，加入甲醇钠甲醇溶液，反应一段时间后，加入DOEWX树脂进行中和，过滤除去树脂后，混合溶液加水浓缩后冻干，得9-SH-Sia(化合物2)；
S3、在冰浴以及惰性气体保护下，将CTP(化合物3)与二甲氨基吡啶(DMAP)溶于无水二氯甲烷中，制得溶液C；将三光气溶于少量的无水二氯甲烷后，制得溶液D；后将溶液D滴入溶液C中，反应一段时间后，加入2-[2-(吡啶基)二硫基]乙醇，室温条件下反应过夜；反应结束后，产物经纯化后得到化合物4；
S4、在室温的条件下，将步骤S2中制得的9-SH-Sia溶于超干甲醇后，制得溶液E；将步骤S3中得到的化合物4溶于无水二氯甲烷中，制得溶液F，将溶液F滴入溶液E中，搅拌反应10～14h，反应结束后，产物纯化制得唾液酸-喜树碱前药Sia-ss-CPT；
在一种或多种实施方式中，所述步骤S1中，三苯基膦、偶氮二甲酸二乙酯、唾液酸三乙胺盐与巯基乙酸的摩尔比为1～2:1～2:0.8～1.2:3～5，优选为1.8:1.8:1:4。
在一种或多种实施方式中，所述步骤S1中，三苯基膦在THF溶液中的浓度为0.07～0.25mol/L；优选为0.18mol/L。
在一种或多种实施方式中，所述步骤S1中，唾液酸三乙胺盐在DMF中的浓度为0.05～0.125mol/L；优选为0.1mol/L。
在一种或多种实施方式中，所述步骤S1中，所述搅拌反应的时间为4h。
在一种或多种实施方式中，所述步骤S1中，所述纯化的条件为：将溶剂经减压蒸馏除去，产物采用硅胶柱层析纯化。
在一种或多种实施方式中，所述步骤S2中，所述甲醇钠甲醇溶液的浓度为0.8～1.2mol/L，优选为1mol/L。
在一种或多种实施方式中，所述步骤S2中，9-SAc-Sia的质量与甲醇钠甲醇溶液的体积比为0.4～0.6g：1mL，优选为0.5：1mL。
在一种或多种实施方式中，所述步骤S2中，甲醇钠甲醇溶液与水的体积比为1:5～8，优选为1:6。
在一种或多种实施方式中，所述步骤S2中，反应的时间为1.5～2.5h，优选为2h。
在一种或多种实施方式中，所述步骤S3中，所述CTP、二甲氨基吡啶、三光气、2-[2-(吡啶基)二硫基]乙醇的摩尔比为0.8～1.2:1.5～2.5:0.3～0.5:0.8～1.2，优选为1:2:0.35:1。
在一种或多种实施方式中，所述步骤S3中，CTP在无水二氯甲烷中的浓度为：0.05～0.12mol/L，优选为0.1mol/L。
在一种或多种实施方式中，所述步骤S3中，向三光气中逐滴加入无水二氯甲烷，直至三光气刚好溶解完全。
在一种或多种实施方式中，所述步骤S3中，将溶液D滴入溶液C中，反应的时间为15～25min，优选为20min。
在一种或多种实施方式中，所述步骤S3中，将溶液D滴入溶液C中，反应在冰浴以及惰性气体保护下进行。
在一种或多种实施方式中，所述步骤S3中，所述纯化的方法为：将溶剂经减压蒸馏除去，产物采用硅胶柱层析纯化。
在一种或多种实施方式中，所述步骤S4中，9-SH-Sia与化合物4的摩尔比为1.5～2.5:0.8～1.2，优选为2:1。
在一种或多种实施方式中，所述步骤S4中，9-SH-Sia在超干甲醇中的浓度为0.5～2.5mol/L，优选为1mol/L。
在一种或多种实施方式中，所述步骤S4中，化合物4在无水二氯甲烷中的浓度为0.16～0.6mol/L，优选为0.5mol/L。
在一种或多种实施方式中，所述步骤S4中，搅拌反应12h。
在一种或多种实施方式中，所述步骤S4中，所述纯化的方法为：将溶剂经减压蒸馏除去，产物采用硅胶柱层析纯化后，再经过BioGel P-2凝胶柱，用去离子水洗脱纯化除去硅胶，后进行冻干。
本发明的第三种典型实施方式，提供一种抗肿瘤的药物制剂，所述药物制剂包括上述唾液酸-喜树碱前药Sia-ss-CPT。
为了使得本领域技术人员能够更加清楚地了解本发明的技术方案，以下将结合具体的实施例详细说明本发明的技术方案。
实施例1
化合物2的制备
将1.8mmol三苯基膦溶于10mL THF溶液中，在0℃条件下滴加1.8mmol偶氮二甲酸二乙酯，反应10min，制得溶液A；将1mmol唾液酸三乙胺盐溶于10mL DMF后滴加4mmol巯基乙酸，制得溶液B；将溶液B加入到溶液A中，在室温下搅拌反应4h，滴加0.5mL甲醇终止反应，将溶剂经减压蒸馏除去，采用硅胶柱层析纯化得到9-SAc-Sia(产率为54.71％)。
将S1中制得的9-SAc-Sia(0.5g)在冰浴以及惰性气体保护下，加入1mL 1M甲醇钠甲醇溶液，反应2h时间后，加入DOEWX树脂进行中和，过滤除去树脂后，混合溶液加水浓缩后冻干，得9-SH-Sia(化合物2)，产率为93.14％。
图1和图2分别为化合物2的氢谱和碳谱，氢谱1H NMR(600MHz,D2O)δ4.05-3.95(m,3H),3.91(t,J＝10.2Hz,1H),3.55(dd,J＝8.2,1.2Hz,1H),3.25(dd,J＝14.2,2.9Hz,1H),2.86(dd,J＝14.2,8.6Hz,1H),2.20(dd,J＝12.9,4.9Hz,1H),2.06(s,3H),1.82(dd,J＝12.9,11.5Hz,1H)。
碳谱13C NMR(150MHz,D2O)δ187.01,185.07,106.80,80.98,79.50,77.65,70.49,62.73,55.45,49.71,34.84。
实施例2
化合物4的制备：
在冰浴以及惰性气体保护下，将1mmol CTP(化合物3)与2mmol二甲氨基吡啶(DMAP)溶于10mL无水二氯甲烷中，制得溶液C；将0.35mmol三光气溶于少量的无水二氯甲烷后，制得溶液D；后将溶液D滴入溶液C中，反应一段时间后，加入1mmol 2-[2-(吡啶基)二硫基]乙醇，室温条件下反应过夜；反应结束后，将溶剂经减压蒸馏除去，产物采用硅胶柱层析纯化得到化合物4，产率为65.36％。
图3和图4分别为化合物2的氢谱和碳谱，氢谱1H NMR(600MHz,CDCl3)δ8.42(dd,J＝4.6,1.6Hz,1H),8.40(s,1H),8.22(d,J＝8.5Hz,1H),7.93(dd,1H),7.83(ddd,J＝8.3,6.7,1.4Hz,1H),7.70-7.65(m,1H),7.63-7.61(m,2H),7.33(s,1H),7.03(td,J＝5.2,2.9Hz,1H),5.69(d,J＝17.1Hz,1H),5.39(d,J＝17.1Hz,1H),5.31-5.27(m,2H),4.41-4.28(m,2H),3.06(t,J＝6.6Hz,2H),2.29(dq,J＝14.8,7.4Hz,1H),2.15(dq,J＝14.8,7.5Hz,1H),1.00(t,J＝7.5Hz,3H)。
碳谱13C NMR(150MHz,CDCl3)δ167.43,159.44,157.42,153.52,152.40,149.83,149.01,146.62,145.66,137.30,131.33,130.87,129.81,128.56,128.32,128.31,128.24,121.04,120.42,119.96,96.13,78.14,67.22,66.52,50.13,36.98,32.03,7.76.
实施例3
唾液酸-喜树碱前药Sia-ss-CPT的制备：
在室温的条件下，将步骤S2中制得的2mmol 9-SH-Sia溶于2mL超干甲醇后，制得溶液E；将步骤S3中得到的化合物4(1mmol)溶于2mL无水二氯甲烷中，制得溶液F，将溶液F滴入溶液E中，搅拌反应12h，反应结束后，将溶剂经减压蒸馏除去，产物采用硅胶柱层析纯化后，再经过BioGel P-2凝胶柱，用去离子水洗脱纯化除去硅胶，后进行冻干。
图5和图6分别为唾液酸-喜树碱前药Sia-ss-CPT的氢谱和碳谱，氢谱1HNMR(600MHz,DMSO-d6)δ8.70(s,1H),8.20(d,J＝8.5Hz,1H),8.13(d,J＝8.1Hz,1H),8.04(d,J＝8.3Hz,1H),7.90-7.84(m,1H),7.72(t,J＝7..5Hz,1H),5.52(d,J＝4.1Hz,2H),5.31(d,J＝2.7Hz,2H),4.36-4.29(m,2H),3.81(m,1H),3.73(d,J＝10.5Hz,1H),3.69-3.63(m,1H),3.54-3.41(m,1H),3.24-3.20(m,1H),3.15(dd,J＝13.4,2.4Hz,1H),2.97(td,J＝6.1,3.1Hz,2H),2.79(dd,J＝13.2,9.3Hz,1H),2.24-2.12(m,2H),1.96(dd,J＝13.1,5.1Hz,1H),1.74(s,3H),1.70(d,J＝12.2Hz,1H),0.92(t,J＝7.4Hz,3H)。
碳谱13C NMR(150MHz,DMSO-d6)δ172.26,171.77,167.56,156.95,153.26,152.70,148.38,146.68,145.23,132.04,130.91,130.26,129.48,128.96,128.46,128.21,119.57,95.21,94.99,78.35,71.74,70.53,68.32,66.89,66.48,66.07,53.49,50.78,45.81,36.16,30.69,29.46,22.82,8.01。
实施例1～3反应方程式为：
实验例1
内酯稳定性测定
将CPT与Sia-ss-CPT溶于DMSO中，用CPT的浓度进行表示，CPT与Sia-ss-CPT在DMSO中浓度均为1mg/mL CPT，用pH 7.4PBS稀释(至5μg/mL)。在室温下放置不同时间后，各取10μL溶液注入高效液相色谱(HPLC)。对比CPT部分的羧基峰与内酯峰的峰面积随时间变化趋势。结果如图7所示，在0～8小时内，CPT内酯结构有46.34％水解成羧酸形式，而Sia-ss-CPT仅有4.43％被破坏成羧酸。16h后，CPT的内酯结构仅剩初始含量的11.57％，而Sia-ss-CPT的内酯结构仍有56.28％。这些结果表明，Sia-ss-CPT能够显著增加CPT的内酯稳定性。
实验例2
Sia-ss-CPT的响应性释放
为了评估Sia-ss-CPT对GSH的响应性，将Sia-ss-CPT溶于1mM谷胱甘肽的PBS溶液中，使其浓度为100μg/mL，通过对不同反应时间点的反应液进行HPLC分析，评估Sia-ss-CPT中二硫键的裂解与CPT的响应性释放敏感性。如图8所示，在1mM的GSH溶液中，Sia-ss-CPT的二硫键逐渐被裂解，CPT被缓慢释放出来，不加GSH时，Sia-ss-CPT二硫键被裂解降低。表明Sia-ss-CPT可以在肿瘤部位响应GSH的还原性，从而将CPT缓慢地释放出来，具有一定的缓释作用。
实验例3
Sia-ss-CPT对肿瘤细胞的毒性评价
4T1或EL4肿瘤细胞加到96孔板过夜，每孔100μL培养基，过夜后将0.001、0.005、0.01、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8、1、2、4μg的CPT分别加入到各个孔中，Sia-ss-CPT对应分别加入0.002、0.011、0.022、0.111、0.223、0.445、0.891、1.782、2.227、4.454、8.908μg，之后共孵育18h同时设空白孔与调零孔。孵育结束后去除培养基，用37℃预热的PBS(pH 7.4)洗2遍细胞以除去培养基中的CPT或Sia-ss-CPT。之后加入含10μL MTT溶液(5mg/mL)的培养基100μL继续孵育4h。4h后去除培养基，加入100μL DMSO，并于37℃轻晃10min以充分溶解产生的甲瓒。570nm处测定OD值(OD：0～0.7，＞0.7则线性不准)。结果如图9(4T1)、图10(EL4)所示，表明Sia-ss-CPT对肿瘤细胞的有效杀伤作用。
实验例4
4T1-BALB/c肿瘤模型中，Sia-ss-CPT的肿瘤抑制效力
4T1肿瘤细胞以1x106 cells/100μL PBS接种于雌性BALB/c小鼠皮下。待肿瘤体积长至80～100mm3时，将荷瘤小鼠随机分为3组，每组6只。分别于分组后第1天和第3天经尾静脉注射PBS、CPT与Sia-ss-CPT(70μg CPT/mouse)。每天测量肿瘤大小。治疗结束后，将小鼠安乐死，解剖小鼠的肿瘤进行称重拍照。结果如图11、图12和图13所示，Sia-ss-CPT可以显著抑制小鼠肿瘤的生长，并显著提高治疗小鼠的生存率。
实验例5
H22-KM肿瘤模型中，Sia-ss-CPT的肿瘤抑制效力
H22肿瘤细胞以1x 106cells/100μL PBS接种于雌性H22小鼠皮下。待肿瘤体积长至80～100mm3时，将荷瘤小鼠随机分为3组，每组6只。分别于分组后第1天和第3天经尾静脉注射PBS、CPT与Sia-ss-CPT(70μg CPT/mouse)。每天测量肿瘤大小与小鼠体重并绘制生长曲线图。治疗结束后，将小鼠安乐死，解剖小鼠的肿瘤进行称重拍照。如图14、图15和图16所示，Sia-ss-CPT可以显著抑制小鼠肿瘤的生长，并且减少CPT的毒副作用，因此Sia-ss-CPT的肿瘤抑制作用具有广谱性。
通过研究发现，上述唾液酸-喜树碱偶联化合物Sia-ss-CPT比游离CPT显示出更好的水溶性与更显著的内酯稳定性。同时，Sia-ss-CPT具有良好的肿瘤细胞杀伤效力，能够显著抑制小鼠肿瘤的生长，并减少游离CPT对机体的毒副作用。

Claims (10)

1.一种唾液酸-喜树碱前药Sia-ss-CPT，其特征在于，其结构式如下式所示：
2.一种如权利要求1所述的唾液酸-喜树碱前药Sia-ss-CPT的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
S1、将三苯基膦溶于THF溶液中，在0℃条件下滴加偶氮二甲酸二乙酯，反应10min，制得溶液A；将唾液酸三乙胺盐溶于DMF后滴加巯基乙酸，制得溶液B；将溶液B加入到溶液A中，在室温下搅拌反应3～4h，滴加甲醇终止反应，纯化后得到9-SAc-Sia；
S2、将S1中制得的9-SAc-Sia在冰浴以及惰性气体保护下，加入甲醇钠甲醇溶液，反应一段时间后，加入DOEWX树脂进行中和，过滤除去树脂后，混合溶液加水浓缩后冻干，得9-SH-Sia(化合物2)；
S3、在冰浴以及惰性气体保护下，将CTP(化合物3)与二甲氨基吡啶(DMAP)溶于无水二氯甲烷中，制得溶液C；将三光气溶于无水二氯甲烷后，制得溶液D；后将溶液D滴入溶液C中，反应一段时间后，加入2-[2-(吡啶基)二硫基]乙醇，室温条件下反应过夜；反应结束后，产物经纯化后得到化合物4；
S4、在室温的条件下，将步骤S2中制得的9-SH-Sia溶于超干甲醇后，制得溶液E；将步骤S3中得到的化合物4溶于无水二氯甲烷中，制得溶液F，将溶液F滴入溶液E中，搅拌反应10～14h，反应结束后，产物纯化制得唾液酸-喜树碱前药Sia-ss-CPT；
3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中，三苯基膦、偶氮二甲酸二乙酯、唾液酸三乙胺盐与巯基乙酸的摩尔比为1～2:1～2:0.8～1.2:3～5，优选为1.8:1.8:1:4；
或，三苯基膦在THF溶液中的浓度为0.07～0.25mol/L；优选为0.18mol/L；
或，唾液酸三乙胺盐在DMF中的浓度为0.05～0.125mol/L；优选为0.1mol/L。
4.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中，所述搅拌反应的时间为4h；
或，所述纯化的条件为：将溶剂经减压蒸馏除去，产物采用硅胶柱层析纯化。
5.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中，所述甲醇钠甲醇溶液的浓度为0.8～1.2mol/L，优选为1mol/L；
或，9-SAc-Sia的质量与甲醇钠甲醇溶液的体积比为0.4～0.6g：1mL，优选为0.5：1mL；
或，甲醇钠甲醇溶液与水的体积比为1:5～8，优选为1:6。
或，所述步骤S2中，反应的时间为1.5～2.5h，优选为2h。
6.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S3中，所述CTP、二甲氨基吡啶、三光气、2-[2-(吡啶基)二硫基]乙醇的摩尔比为0.8～1.2:1.5～2.5:0.3～0.5:0.8～1.2，优选为1:2:0.35:1；
或，CTP在无水二氯甲烷中的浓度为：0.05～0.12mol/L，优选为0.1mol/L；
或，三光气在无水二氯甲烷中的浓度为0.02～0.05mol/L，优选为0.35mol/L。
7.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S3中，将溶液D滴入溶液C中，反应的时间为15～25min，优选为20min；
或，将溶液D滴入溶液C中，反应在冰浴以及惰性气体保护下进行；
或，所述纯化的方法为：将溶剂经减压蒸馏除去，产物采用硅胶柱层析纯化。
8.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，9-SH-Sia与化合物4的摩尔比为1.5～2.5:0.8～1.2，优选为2:1；
或，9-SH-Sia在超干甲醇中的浓度为0.5:～2.5mol/L，优选为1mol/L；
或，化合物4在无水二氯甲烷中的浓度为0.16:～0.6mol/L，优选为0.5mol/L。
9.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤S4中，搅拌反应12h；
或，所述纯化的方法为：将溶剂经减压蒸馏除去，产物采用硅胶柱层析纯化后，再经过BioGelP-2凝胶柱，用去离子水洗脱纯化除去硅胶，后进行冻干。
10.一种抗肿瘤的药物制剂，其特征在于，所述药物制剂包括权利要求1所述的唾液酸-喜树碱前药Sia-ss-CPT和/或权利要求2～9任一项所述的制备方法制备的唾液酸-喜树碱前药Sia-ss-CPT。
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