CN116785493A - 一种中空复合型双层鼻腔止血海绵、制备方法及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种可降解的中空复合型双层鼻腔止血海绵的制备方法，由止血层、隔离层组成；所述止血层为最外层，为胶原蛋白类材料与壳聚糖的复合材料，在止血作用的同时采用具有抑菌活性的壳聚糖类材料能够有效防止伤口感染。隔离层选用明胶材料，提高整体支撑度的同时可以有效地隔离血液，防止影响患者正常呼吸。本专利中提供的止血海绵具有良好的止血、抑菌和隔离功能，植入尺寸小，膨胀率高，可自行降解，是一种理想的鼻腔止血材料。
Description
技术领域
本发明属于医用材料领域，具体涉及一种中空复合型双层鼻腔止血海绵、制备方法及其应用。
背景技术
壳聚糖具有无毒、生物相容性好、可生物降解的特性，近年来，常作为天然医用高分子材料在可吸收手术缝合线、止血材料、伤口包扎材料以及人造皮肤等方面。但是，壳聚糖止血材料从强度和降解速度上都难以满足现有需要，而将胶原和壳聚糖复合后不仅能够增加支架整体力学强度，同时调节材料降解的时间，以及细胞和组织的生长。
鼻出血指鼻腔及周围组织的血管破裂，血液向前经鼻孔流出或向后流入口咽部，是耳鼻咽喉科常见病，可由鼻子本身疾病引起，亦可由全身疾病所致。发病多为单侧，也有双侧出血，出血量多少不一，轻者仅为间歇性少量出血或仅痰中带血，重者为持续性大量出血，甚至可引起失血性休克对于鼻出血的治疗，局部填塞止血为最有效、最重要的方法，但长期以来都是以凡士林纱条填塞为主，虽然止血效果良好，但在填塞时对病人造成的痛苦及填塞后产生不同程度的反应，令病人难以接受。
目前市场上出现的鼻腔止血海绵以聚乙烯醇为主要材料制成是纱布的最佳替代品，产品利用止血海绵的吸水膨胀性，先将海绵用模具压扁、压实，使用时吸液迅速膨胀为具有高弹性的海绵体，按照压塞部位形状充满鼻腔，提供均匀的支撑和压迫，从而止血。临床上海绵的留置时间通常为24h左右，最长使用时间为7d，因为海绵与创面接触时间较长，可能发生黏连，在取出海绵时容易对鼻腔粘膜造成二次损伤，同时海绵填充鼻腔后患者无法通过鼻腔呼吸，医疗体验差，给医护人员和患者带来极大的困扰。
因此，本发明中提出了一种中空复合型双层鼻腔止血海绵的制备方法，采用天然高分子材料制备了复合型止血海绵制成，制备方法简单、成本低、易工业放大。在使用过程中，无需对创口进行压迫，即可达到止血效果，并能够在给鼻腔止血的同时，满足可吸收以及鼻腔的正常呼吸。
发明内容
本发明的目的是提供一种中空复合型双层鼻腔止血海绵的制备方法，具有良好的止血、抗菌功能的同时，解决了当前鼻腔止血海绵使用过程中体验感差的情况，并且在制备过程中，提供了一种简单、快捷易放大生产的方法。
本发明提供了如下的技术方案：
一种可降解的中空复合型双层鼻腔止血海绵的制备方法，具体步骤包括如下：
步骤一：将所用金属模具转移至冰箱中冷冻；
步骤二：称取明胶粉末溶解在水中，搅拌均匀后，静置消泡；
步骤三：将冷冻后的金属模具插入步骤二消泡的溶液中，迅速取出置于PBS(磷酸盐缓冲溶液)中进行交联。交联完成后转移至-20℃中冷冻。
步骤四：分别称取蛋白粉末与壳聚糖，溶解于合适的溶液中，搅拌均匀，待完全溶解后加入交联剂进行交联，并静置消泡；
步骤五：将步骤三所得模具插入步骤四消泡后的溶液中，迅速取出转移至冰箱中继续冷冻；
步骤六：将冷冻后的样品从冰箱中取出，冷冻干燥处理即可得到中空复合型双层鼻腔止血海绵。
作为一种中空复合型双层鼻腔止血海绵的制备方法的优选技术方案，步骤一中所述金属模具为铁质、不锈钢、铜制材料中的一种或多种。
作为一种中空复合型双层鼻腔止血海绵的制备方法的优选技术方案，步骤一中所述冷冻温度为0～-200℃。
作为一种中空复合型双层鼻腔止血海绵的制备方法的优选技术方案，步骤二中所述明胶溶液浓度为2～10wt％。
作为一种中空复合型双层鼻腔止血海绵的制备方法的优选技术方案，步骤二中所述静置消泡时间为0.5～4h。
作为一种中空复合型双层鼻腔止血海绵的制备方法的优选技术方案，步骤三中缓冲液的pH值为8.0～10.0。
作为一种中空复合型双层鼻腔止血海绵的制备方法的优选技术方案，步骤三中所述交联时间为1～5s。
作为一种中空复合型双层鼻腔止血海绵的制备方法的优选技术方案，步骤三中所述冷冻时间为3～12h。
作为一种中空复合型双层鼻腔止血海绵的制备方法的优选技术方案，步骤四中所述胶原蛋白粉末为动物源I型胶原蛋白、重组胶原蛋白、丝素蛋白、丝胶蛋白、脱细胞基质材料中的一种或多种。
作为一种中空复合型双层鼻腔止血海绵的制备方法的优选技术方案，步骤四中所述蛋白溶液浓度为2～60mg/mL。
作为一种中空复合型双层鼻腔止血海绵的制备方法的优选技术方案，步骤四中所述壳聚糖浓度为1～3wt％。
作为一种中空复合型双层鼻腔止血海绵的制备方法的优选技术方案，步骤四中所述交联剂为戊二醛、谷氨酰胺转移酶、京尼平、EDC/NHS或1,4-丁二醇二缩水甘油醚。
作为一种中空复合型双层鼻腔止血海绵的制备方法的优选技术方案，步骤四中所述交联剂的终浓度为0.03～0.10％(w/v)。
作为一种中空复合型双层鼻腔止血海绵的制备方法的优选技术方案，步骤四中所述静置消泡时间为1～8h。
作为一种中空复合型双层鼻腔止血海绵的制备方法的优选技术方案，步骤五中所述冷冻温度为0～-200℃。
作为一种中空复合型双层鼻腔止血海绵的制备方法的优选技术方案，步骤五中所述浸泡时间为1～5s。
作为一种中空复合型双层鼻腔止血海绵的制备方法的优选技术方案，步骤六中所述冻干时间为6～48h。
本发明的另一个发明点是：通过上述制备方法生产出的中空复合型双层鼻腔止血海绵，包括防粘修复层、交联支撑层以及中空孔，所述交联支撑层中部位置设有所述中空孔，所述交联支撑层的外表面贴附有所述防粘修复层。
本发明的有益效果是：本发明提供的鼻窦部用止血海绵，采用生物止血海绵制成，可以利用生物止血海绵遇血后激发血小板活性，促进血小板聚集和释放，形成血栓进行止血，因此无需太大的机械压力对创口进行压迫，即可达到止血效果，同时双层结构使得位于内部的防粘修复层在辅助完成止血后可轻易取出，位于其外侧的交联支撑层可保持原形态不变，从而在交联支撑层内部形成通气孔，止血时该通孔可以始终保持通畅，所以不会妨碍鼻腔的正常呼吸，这样既能满足止血功能，又提高了患者的舒适性，且本发明结构简单，制作方便，成本低廉，并且外表美观，使用方便。
附图说明
附图用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本发明的实施例一起用于解释本发明，并不构成对本发明的限制。在附图中：
图1是本发明产品鼻窦部用止血海绵的实物图；
图2是本发明产品鼻窦部用止血海绵的俯视结构示意图；
附图标记：1、防粘修复层；2、交联支撑层；3、中空孔；
具体实施方式
为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合说明书实施例对本发明的具体实施方式做详细的说明。
在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明，但是本发明还可以采用其他不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似推广，因此本发明不受下面公开的具体实施例的限制。
其次，此处所称的“一个实施例”或“实施例”是指可包含于本发明至少一个实现方式中的特定特征、结构或特性。在本说明书中不同地方出现的“在一个实施例中”并非均指同一个实施例，也不是单独的或选择性的与其他实施例互相排斥的实施例。
测试方法：
吸水倍率测试方法：称取不同实施例条件下制备的海绵，精密称量0.25g，记为m1。将不同海绵浸入至盛有20℃的PBS缓冲液中，用镊子轻轻按压直至样品中所有空气均被除去。待吸足水分后，用小镊子轻轻夹住一角，将其从PBS缓冲液中用镊子取出，在溶液表面排水1min后，再次称量，记为m2。随机抽取试样5份，取平均值，按下式计算
式中：A—试样吸水倍数；
m1—试样浸湿前的质量；
m2—试样浸湿后的质量。
吸水用时测试方法：称取不同实施例条件下制备的海绵，精密称量0.25g，记为m1。将不同海绵缓慢置于盛有20℃的PBS缓冲液中，在不施加外力的情况下，用秒表记录海绵完全吸收缓冲液所需的时间。
孔隙率测试方法：采用排水法测定海绵的孔隙率，将海绵切割成长1cm，宽0.5cm，厚0.5cm的大小并浸没在体积为V1的乙醇中。在乙醇中浸泡2h后，记录乙醇和支架的总体积V2。将支架从乙醇中取出，记录剩余乙醇的体积为V3，按下式计算海绵孔隙率：
抗拉强度测试：将制备出的样品切成95*25mm，两端固定在万能试验机的夹具上，测试速度为0.075cm/s。
厚度测定：将制备出的中空复合型双层鼻腔止血海绵沿着其长度反向切割呈5等分，用数字微计测定样品的厚度，并计算其平均值，即可得止血海绵的厚度值；
溶血率测试：将制备出的止血海绵放置在0.8％的氯化钠溶液中24h，获得止血海绵的提取物质。将1ml的止血海绵的提取物质和1ml的红悬液混合，在38℃的条件下保存4h。1ml纯净水和1ml的2％红悬液混合，在38℃的条件下保存4h作为阳性对照组；1ml 0.8％生理氯化钠溶液和1ml的2％红悬液混合，在38℃的条件下保存4h作为阴性对照组。将上述混合物在1700r/min的条件下离心15min，去上清液用酶标仪在545nm处测定吸光度值，测试样的吸光度值记为C，阳性对照组的吸光度值记为Y1，阴性对照组的吸光度值记为Y2。根据下式计算溶血率：
溶血率＝(C-Y2)/(Y1-Y2)
全血凝固时间测试：取20mg止血海绵切割成小块放置到离心管中，将离心管中的小块加热至38℃。之后加入2ml的抗凝全血，然后马上再滴入150ul的0.4mol/L的氯化钙溶液，再立马混匀4s。每3至5s慢慢的歪倒一次离心管，直到将离心管歪倒90度血液不再流动即为凝血，并记录凝血时间。
实施例1
步骤1.将所用金属模具转移至-20℃冰箱中冷冻；
步骤2.按质量比3％(w/v)称取一定量明胶，溶解在水中，搅拌均匀后，4℃下静置消泡；
步骤3.将冷冻后的金属模具插入步骤二消泡的溶液中，迅速取出置于pH＝9.0的PBS(磷酸盐缓冲溶液)中进行交联，-20℃冷冻3～4h；
步骤4.分别称取5mg/mL的胶原蛋白粉与0.5wt％的壳聚糖，溶于质量浓度为0.5mol/L的醋酸溶液中，按胶原：壳聚糖＝9:1(质量比)的比例配制为胶原-壳聚糖醋酸溶液，溶解后加入20.6mg/mL的EDC/NHS溶液“摩尔浓度2:1”使得最终浓度达到0.019/0.0058％(w/v)进行交联，搅拌均匀后，4℃下静置消泡；
步骤5.将步骤三所得模具插入步骤四消泡后的溶液中1～2s，迅速取出转移至冰箱中继续冷冻；
步骤6.将冷冻后的样品从冰箱中取出，转移至冷冻干燥机内冷冻干燥12h处理即可得到中空复合型双层鼻腔止血海绵。
实施例2
本实施例中与实施例1中步骤相同，只是在步骤S4中胶原：壳聚糖＝1:1(质量比)的比例配制为胶原-壳聚糖醋酸溶液。
实施例3
本实施例中与实施例1中步骤相同，只是在步骤S4中胶原：壳聚糖＝1:9(质量比)的比例配制为胶原-壳聚糖醋酸溶液。
实施例4
本实施例中与实施例1中步骤相同，只是在步骤S4中交联剂为0.25％的戊二醛使其在体系中终浓度为0.05％。
实施例5
步骤1.将所用金属模具转移至-20℃冰箱中冷冻；
步骤2.按质量比5％(w/v)称取一定量明胶，溶解在水中，搅拌均匀后，4℃下静置消泡；
步骤3.将冷冻后的金属模具插入步骤二消泡的溶液中，迅速取出置于pH＝10.0的PBS(磷酸盐缓冲溶液)中进行交联，-20℃冷冻3～4h；
步骤4.分别称取5mg/mL的胶原蛋白粉与0.5wt％的壳聚糖，溶于质量浓度为0.5mol/L的醋酸溶液中，按胶原：壳聚糖＝1:1的比例配制为胶原-壳聚糖醋酸溶液，溶解后加入20.6mg/mL的EDC/NHS溶液“摩尔浓度2:1”使得终浓度达到0.019/0.0058％(w/v)进行交联，搅拌均匀后，4℃下静置消泡；
步骤5.将步骤三所得模具插入步骤四消泡后的溶液中1～2s，迅速取出转移至冰箱中继续冷冻；
步骤6.将冷冻后的样品从冰箱中取出，转移至冷冻干燥机内冷冻干燥12h处理即可得到中空复合型双层鼻腔止血海绵。
实施例6
步骤1.将所用金属模具转移至-20℃冰箱中冷冻；
步骤2.按质量比3％(w/v)称取一定量明胶，溶解在水中，搅拌均匀后，4℃下静置消泡；
步骤3.将冷冻后的金属模具插入步骤二消泡的溶液中，迅速取出置于pH＝8.0的PBS(磷酸盐缓冲溶液)中进行交联，-20℃冷冻3～4h；
步骤4.取5.00g脱细胞真皮基质加入至500mL的去离子水中，50rpm下搅拌直至脱细胞真皮基质完全溶胀，将溶胀后的样品用筛网过筛，称取湿重为100g的脱细胞真皮基质；
步骤5.分别称取5mg/mL的脱细胞真皮机制与0.5wt％的壳聚糖，溶于质量浓度为0.5mol/L的醋酸溶液中，按脱细胞真皮机制：壳聚糖＝1:1的比例配制为脱细胞真皮机制-壳聚糖醋酸溶液，溶解后加入20.6mg/mL的EDC/NHS溶液(摩尔浓度2:1)使得最终浓度达到0.019/0.0058％(w/v)进行交联，搅拌均匀后，4℃下静置消泡；
步骤6.将步骤三所得模具插入步骤四消泡后的溶液中1～2s，迅速取出转移至冰箱中继续冷冻；
步骤7.将冷冻后的样品从冰箱中取出，转移至冷冻干燥机内冷冻干燥12h处理即可得到中空复合型双层鼻腔止血海绵。
实施例7
步骤1.将所用金属模具转移至-20℃冰箱中冷冻；
步骤2.按质量比7％(w/v)称取一定量明胶，溶解在水中，搅拌均匀后，4℃下静置消泡；
步骤3.将冷冻后的金属模具插入步骤二消泡的溶液中，迅速取出置于pH＝10.0的PBS(磷酸盐缓冲溶液)中进行交联，-20℃冷冻3～4h；
步骤4.分别称取5mg/mL的胶原蛋白粉与0.5wt％的壳聚糖，溶于质量浓度为0.5mol/L的醋酸溶液中，按胶原：壳聚糖＝1:1的比例配制为胶原-壳聚糖醋酸溶液，溶解后加入20.6mg/mL的EDC/NHS溶液“摩尔浓度2:1”使得终浓度达到0.019/0.0058％(w/v)进行交联，搅拌均匀后，4℃下静置消泡；
步骤5.将步骤三所得模具插入步骤四消泡后的溶液中1～2s，迅速取出转移至冰箱中继续冷冻；
步骤6.将冷冻后的样品从冰箱中取出，转移至冷冻干燥机内冷冻干燥12h处理即可得到中空复合型双层鼻腔止血海绵。
实施例8
步骤1.将所用金属模具转移至-20℃冰箱中冷冻；
步骤2.按质量比10％(w/v)称取一定量明胶，溶解在水中，搅拌均匀后，4℃下静置消泡；
步骤3.将冷冻后的金属模具插入步骤二消泡的溶液中，迅速取出置于pH＝10.0的PBS(磷酸盐缓冲溶液)中进行交联，-20℃冷冻3～4h；
步骤4.分别称取5mg/mL的胶原蛋白粉与0.5wt％的壳聚糖，溶于质量浓度为0.5mol/L的醋酸溶液中，按胶原：壳聚糖＝1:1的比例配制为胶原-壳聚糖醋酸溶液，溶解后加入20.6mg/mL的EDC/NHS溶液“摩尔浓度2:1”使得终浓度达到0.019/0.0058％(w/v)进行交联，搅拌均匀后，4℃下静置消泡；
步骤5.将步骤三所得模具插入步骤四消泡后的溶液中1～2s，迅速取出转移至冰箱中继续冷冻；
步骤6.将冷冻后的样品从冰箱中取出，转移至冷冻干燥机内冷冻干燥12h处理即可得到中空复合型双层鼻腔止血海绵。
表1不同止血海绵的各性能指标的测试数据
表1是不同海绵的各性能指标的测试数据，实施例为1至4为不同配比的胶原蛋白粉制备的海绵，海绵的吸水倍率从20.72提高至33.27，海绵的吸水用时从4.3s提高至15.9s，通过对比可知，材料性质未发生变化，壳聚糖比例增加，使得材料吸水倍率相应增加，但同时吸水用时也相应延长；通过实施例2和实施例6对比可知，利用脱细胞真皮机制制备出的海绵的吸水倍率、膨胀率较大于利用胶原制备出的海绵，同时利用脱细胞真皮机制制备出的海绵吸水用时较短。
从实施例1至3制备样品的孔隙率测试结果可以得知，随壳聚糖比例的不断提高，海绵的孔隙率随之下降；壳聚糖比例处于较低水平时(胶原：壳聚糖＝9：1)，海绵整体较均一，如图1所示，得到的海绵孔隙率相对更优达到85.3％，还可以保持较短的吸水用时；从实施例2和实施例6制备样品的孔隙率测试结果可以得知，含脱细胞真皮机制制成的材料与胶原材料相较，由于其中可能含有的杂蛋白的影响，其制备的孔隙率略小，膨胀率低。
从实施例1至3制备样品的抗拉强度的测试结果可以得知，随壳聚糖比例的不断提高，海绵的抗拉强度随之下降，壳聚糖比例处于较低水平时(胶原：壳聚糖＝9：1)，海绵整体较均一，可保持较高的抗拉性能，其抗拉强度可以达到3.45N；从实施例2以及实施例8制备样品的抗拉强度的测试结果可以得知，明胶的质量分数不同，抗拉强度变化较小。
实施例4与实施例1相比，将交联剂(EDC/NHS溶液)更换为戊二醛，制备出的海绵经过冷冻干燥之后会变成黄色。
表2为不同含量的明胶所制备的止血海绵的厚度
从实施例2、实施例5、实施例7以及实施例8制备样品的抗拉强度的测试结果可以得知，明胶浓度过高，溶液较浓稠，会导致吸附在金属模具上量较多，终产品内部那层膜较厚，达不到产品要求。
实施例9
将实施例1制备的中空复合型双层鼻腔止血海绵，按照上述溶血率测试进行测试表征。
表3为止血海绵溶血率测试数据
表3是止血海绵溶血率测试数据，从表中的实验数据可以看出，止血海绵的溶血率低于5％，说明海绵对红细胞没有破坏作用。
实施例10
实施例1制备的中空复合型双层鼻腔止血海绵，按照上述全血凝固时间测试方法进行测试，将不加样品的抗凝全血作为空白对照组，另外，再将止血海绵替换成止血棉纱布作为模型组。
表4为止血海绵、空白组以及止血棉纱布的全血凝固时间
从表4中的实验数据可以看出，与空白对照组和止血棉纱布相比，本发明实施例1制备的止血海绵的止血时间显著的缩短，从而表明该方法制备的产品止血效果好。
实施例11
采用实施例1制备的样品浸提液实施抑菌实验，取琼脂糖培养皿，将大肠杆菌(E.coli)及金黄色葡萄球菌(S.aureus)调整为105/m，将样品浸提液置于培养皿中，置于37℃恒温孵箱24h，计算抑菌率；另外，将单纯的壳聚糖制备中空止血海绵材料作为对照组1，将单纯的蛋白粉末制备的中空止血海绵作为对照组2；
表5为止血海绵的抗菌性能
表5为不同的止血海绵分别对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌率，由表5中的数据可知，单纯壳聚糖及蛋白粉未见明显的抑菌作用，通过壳聚糖和蛋白粉的协同作用，从而使制备的止血海绵对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌右很好的抑菌效率。
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (9)
1.一种可降解的中空复合型双层鼻腔止血海绵的制备方法，其特征在于，具体步骤包括如下：
步骤一：将所用金属模具冷冻；
步骤二：称取明胶粉末溶解在水中，搅拌均匀后，静置消泡；
步骤三：将冷冻后的金属模具插入步骤二消泡的溶液中，迅速取出置于PBS中进行交联，交联完成后转移至-20℃中冷冻；
步骤四：分别称取蛋白粉末与壳聚糖，溶解于合适的溶液中，搅拌均匀，待完全溶解后加入交联剂进行交联，并静置消泡；
步骤五：将步骤三所得模具插入步骤四消泡后的溶液中，迅速取出转移至冰箱中继续冷冻；
步骤六：将冷冻后的样品从冰箱中取出，冷冻干燥处理即可得到中空复合型双层鼻腔止血海绵。
2.根据权利要求1所述的一种中空复合型双层鼻腔止血海绵的制备方法，其特征在于，在步骤一中，所述金属模具为铁质、不锈钢、铜制材料中的一种或多种，冷冻温度可以为0～-200℃。
3.根据权利要求1所述的一种中空复合型双层鼻腔止血海绵的制备方法，其特征在于，在步骤二中，所述明胶溶液浓度为2～10wt％，静置消泡时间为0.5～4h。
4.根据权利要求1所述的一种中空复合型双层鼻腔止血海绵的制备方法，其特征在于，在步骤三中，缓冲液的pH值为8.0～10.0，所述交联时间为1～5s，所述冷冻时间为3～12h。
5.根据权利要求1所述的一种中空复合型双层鼻腔止血海绵的制备方法，其特征在于，在步骤四中，所述胶原蛋白粉末为动物源I型胶原蛋白、重组胶原蛋白、丝素蛋白、丝胶蛋白、脱细胞基质材料中的一种或多种，所述蛋白溶液浓度为2～60mg/mL，所述壳聚糖浓度为1～3wt％，所述交联剂为戊二醛、谷氨酰胺转移酶、京尼平、EDC/NHS或1,4-丁二醇二缩水甘油醚，所述交联剂浓度为0.03～0.10％(w/v)，所述静置消泡时间为1～8h。
6.根据权利要求1所述的一种中空复合型双层鼻腔止血海绵的制备方法，其特征在于，在步骤五中，所述冷冻温度为0～-200℃，所述浸泡时间为1～5s。
7.根据权利要求1所述的一种中空复合型双层鼻腔止血海绵的制备方法，其特征在于，在步骤六中，所述冻干时间为6～48h。
8.基于权利要求1至7任一所述的制备方法生产出的中空复合型双层鼻腔止血海绵，其特征在于，包括防粘修复层、交联支撑层以及中空孔，所述交联支撑层中部位置设有所述中空孔，所述交联支撑层的外表面贴附有所述防粘修复层。
9.一种根据权利要求8所述的中空复合型双层鼻腔止血海绵可应用于狭窄的腔道止血。
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Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102753203A (zh) * | 2009-12-16 | 2012-10-24 | 巴克斯特国际公司 | 止血海绵 |
| CN104740683A (zh) * | 2015-03-18 | 2015-07-01 | 常州大学 | 一种双层结构角膜修复材料及其制备方法 |
| CN106237371A (zh) * | 2016-09-21 | 2016-12-21 | 振德医疗用品股份有限公司 | 双层复合止血海绵、制作双层复合止血海绵的模具及方法 |
| CN115970044A (zh) * | 2022-12-29 | 2023-04-18 | 德晟康(苏州)生物科技有限公司 | 一种双层结构壳聚糖止血海绵及其制备方法 |
| CN116059156A (zh) * | 2023-04-06 | 2023-05-05 | 四川大学 | 一种双层网络水凝胶微针及其制备方法和应用 |
-
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Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102753203A (zh) * | 2009-12-16 | 2012-10-24 | 巴克斯特国际公司 | 止血海绵 |
| CN104740683A (zh) * | 2015-03-18 | 2015-07-01 | 常州大学 | 一种双层结构角膜修复材料及其制备方法 |
| CN106237371A (zh) * | 2016-09-21 | 2016-12-21 | 振德医疗用品股份有限公司 | 双层复合止血海绵、制作双层复合止血海绵的模具及方法 |
| CN115970044A (zh) * | 2022-12-29 | 2023-04-18 | 德晟康(苏州)生物科技有限公司 | 一种双层结构壳聚糖止血海绵及其制备方法 |
| CN116059156A (zh) * | 2023-04-06 | 2023-05-05 | 四川大学 | 一种双层网络水凝胶微针及其制备方法和应用 |
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