CN116768821A - 一种植物提取物改性分子探针及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于功能食品应用技术领域,本发明公开了一种植物提取物改性分子探针及其制备方法和应用,该植物提取物改性分子探针制备方法,包括如下步骤:将3‑乙基‑2‑甲基苯并噻唑碘化物溶液滴加到藏红花醛溶液中,制得混合溶液;将无机盐溶液滴加到混合溶液中,混合后进行缩合反应,制得植物提取物改性分子探针,所制得的植物提取物改性分子探针化学稳定性良好,能够长期保存,生物相容性较好,无毒,同时具有较好的光稳定性,在长时间照射过程中不容易出现光漂白现象。
Description
技术领域
本发明涉及功能食品应用技术领域,尤其涉及一种植物提取物改性分子探针及其制备方法和应用。
背景技术
黏性糖蛋白,是一种主要由黏多糖组成的糖蛋白,其具有很强的絮凝功能,广泛存在于自然界多种植物以及人体膝盖滑膜等部位中,黏性糖蛋白被认为是预防心血管脂肪沉积、防止动脉粥样硬化、避免血管扩张和预防肥胖的非常有效的植物提取物之一,其还具有增强人体免疫力、保持肠道润滑、促进胆固醇物质消耗等突出优势,因此,从植物中提取的黏性糖蛋白已广泛应用于食疗。实际上,许多常见的天然食品都或多或少含有黏性糖蛋白物质,比如:秋葵、山药、银耳等。但是,这些植物的黏性糖蛋白仅存在于这些天然食材的部分区域,相对含量有限,如果提取工艺不恰当,或者加工过程不合适,均难以保证黏性糖蛋白功能的完整性,其营养效能将会大打折扣。
传统用于微区粘度测量大多采用粘度计,包括:落球粘度计、旋转粘度计、毛细管粘度计等,这些测试方法普遍强烈依赖设备,前处理过程较为复杂,测试过程耗时,更重要的是,这些测试设备对于样品的需求量一般较大,多数情况需要破碎样品才能获得待测试试样,此外,这些检测设备对于低粘度的检测可能存在精度不灵敏,对于部分酸性或碱性的溶液环境难以适用,容易腐蚀设备等问题,不仅如此,这些测试设备难以实现原位、可视化、实时的监测效果。
因此,研究得到一种植物提取物改性分子探针及其制备方法,使其能够在多种极性溶液和pH范围内精确检测黏性糖蛋白含量具有重要意义。
发明内容
有鉴于此,本发明提供了一种植物提取物改性分子探针及其制备方法和应用,其目的是得到一种化学稳定性良好,能够长期保存,生物相容性较好,无毒,同时具有较好的光稳定性,在长时间照射过程中不容易出现光漂白现象的分子探针。
为了达到上述目的,本发明采用如下技术方案:
本发明提供了一种植物提取物改性分子探针,改性分子探针的结构式如式I所示:
本发明还提供了植物提取物改性分子探针的制备方法,包括如下步骤:
(1)将3-乙基-2-甲基苯并噻唑碘化物溶液滴加到藏红花醛溶液中,制得混合溶液;
(2)将无机盐溶液滴加到混合溶液中,混合后进行缩合反应,制得植物提取物改性分子探针。
优选的,步骤(1)中藏红花醛的结构式如式II所示:
优选的,步骤(1)中3-乙基-2-甲基苯并噻唑碘化物与藏红花醛的摩尔比为1:1~60,所述3-乙基-2-甲基苯并噻唑碘化物溶液的浓度为1~50M,藏红花醛溶液的浓度为1~200M。
优选的,步骤(1)所述3-乙基-2-甲基苯并噻唑碘化物溶液、藏红花醛溶液和步骤(2)所述无机盐溶液中的溶剂独立的为N,N-二甲基甲酰胺、乙酸乙酯、乙醇、甲醇、正丁醇、异丙醇、正丙醇、环己醇、乙二醇、正己醇和丙二醇中的一种或几种。
优选的,步骤(1)和(2)所述滴加的速度独立的为1~10滴/10s。
优选的,步骤(2)中无机盐为碳酸钠、碳酸氢钠、醋酸钙、碳酸铯、碳酸钾、醋酸锡、碳酸氢钾或碳酸钙;所述无机盐溶液的浓度为1~100M;无机盐与3-乙基-2-甲基苯并噻唑碘化物的摩尔比为1~50:1。
优选的,步骤(2)所述混合的温度为23~28℃,混合的时间为1~24h,混合在搅拌的条件下进行,搅拌的速率为100~800rpm。
优选的,步骤(2)所述缩合反应的温度为45~110℃,缩合反应的时间为1~48h,缩合反应在搅拌的条件下进行,搅拌的速率为100~1500rpm。
本发明还提供了植物提取物改性分子探针在测量黏性糖蛋白含量中的应用。
经由上述的技术方案可知,与现有技术相比,本发明的有益效果如下:
(1)本发明的改性分子探针是基于植物提取物藏红花醛经过化学修饰得到,该修饰过程采用一步法制得,原料主要来自植物提取物,性价比高,整体的制备成本较低,制备过程相对绿色、环保、无污染,最终产率也较高,适合规模化制备,后处理简单,符合环保可持续发展的理念;
(2)本发明的植物提取物改性分子探针能够适用于黏性糖蛋白含量的测量,具有可视化检测成像的效果,对于黏性糖蛋白的用量控制和部分保健食品的制备工艺可提供分子级辅助工具;
(3)本发明的植物提取物改性分子探针具有较强的化学稳定性和光稳定性,在多种极性溶液和pH范围内均可释放出较为稳定的光信号,不易被复杂的植物类食品所干扰,随着黏性糖蛋白含量的增加,其荧光强度由弱到强,属于典型的“turn-on”型分子工具。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案,下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅是本发明的实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据提供的附图获得其他的附图。
图1为本发明制得的植物提取物改性分子探针对黏性糖蛋白作用的机理示意图;
图2为实施例1制得的植物提取物改性分子探针的质谱图;
图3为实施例1制得的植物提取物改性分子探针在丙三醇/水混合体系中的荧光质谱图,其中,图中曲线由下至上依次为丙三醇体积分数为0%、10%、30%、50%、70%、100%的植物提取物混合体系;
图4为实施例1制得的植物提取物改性分子探针在丙三醇/水混合体系中的荧光强度与粘度值的对数函数;
图5为实施例1制得的植物提取物改性分子探针在粘度为1.0cP的去离子水和粘度为956.0cP的丙三醇溶液中的光稳定性测试图;
图6为实施例1制得的植物提取物改性分子探针在不同极性溶液中的吸收光谱图;
图7为实施例1制得的植物提取物改性分子探针在不同pH溶液中的发射光谱图;
图8为实施例1制得的植物提取物改性分子探针在不同秋葵浆液中的发射光谱图。
具体实施方式
本发明提供了一种植物提取物改性分子探针,改性分子探针的结构式如式I所示:
本发明提供了植物提取物改性分子探针的制备方法,包括如下步骤:
(1)将3-乙基-2-甲基苯并噻唑碘化物溶液滴加到藏红花醛溶液中,制得混合溶液;
(2)将无机盐溶液滴加到混合溶液中,混合后进行缩合反应,制得植物提取物改性分子探针。
本发明中,步骤(1)中藏红花醛的结构式如式II所示:
本发明中,步骤(1)中3-乙基-2-甲基苯并噻唑碘化物与藏红花醛的摩尔比优选为1:1~60,进一步优选为1:10~50,更优选为1:20~30,所述3-乙基-2-甲基苯并噻唑碘化物溶液的浓度优选为1~50M,进一步优选为5~40M,更优选为20~30M,藏红花醛溶液的浓度优选为1~200M,进一步优选为50~150M,更优选为100~125M。
本发明中,步骤(1)所述3-乙基-2-甲基苯并噻唑碘化物溶液、藏红花醛溶液和步骤(2)所述无机盐溶液中的溶剂独立的优选为N,N-二甲基甲酰胺、乙酸乙酯、乙醇、甲醇、正丁醇、异丙醇、正丙醇、环己醇、乙二醇、正己醇和丙二醇中的一种或几种。
本发明中,步骤(1)和(2)所述滴加的速度独立的优选为1~10滴/10s,进一步优选为2~8滴/10s,更优选为4~6滴/10s。
本发明中,步骤(2)中无机盐优选为碳酸钠、碳酸氢钠、醋酸钙、碳酸铯、碳酸钾、醋酸锡、碳酸氢钾或碳酸钙;所述无机盐溶液的浓度优选为1~100M,进一步优选为10~80M,更优选为50~60M;无机盐与3-乙基-2-甲基苯并噻唑碘化物的摩尔比优选为1~50:1,进一步优选为5~45:1,更优选为20~30:1。
本发明中,步骤(2)所述混合的温度优选为23~28℃,进一步优选为24~27℃,更优选为25~26℃,混合的时间优选为1~24h,进一步优选为4~20h,更优选为8~16h,混合优选在搅拌的条件下进行,搅拌的速率优选为100~800rpm,进一步优选为200~700rpm,更优选为300~500rpm。
本发明中,步骤(2)所述混合过程中的气氛为氮气。
本发明中,步骤(2)所述缩合反应为Knoevenagel缩合反应,缩合反应的温度优选为45~110℃,进一步优选为55~100℃,更优选为70~80℃,缩合反应的时间优选为1~48h,进一步优选为8~40h,更优选为20~30h,缩合反应优选在搅拌的条件下进行,搅拌的速率优选为100~1500rpm,进一步优选为500~1200rpm,更优选为800~1000rpm。
本发明中,步骤(2)所述缩合反应后优选对产物进行纯化分离,纯化分离优选顺次进行浓缩、层析、洗涤和干燥。
本发明中,所述浓缩优选在低压环境下进行,浓缩的压力优选为-0.09~-0.08MPa,浓缩的温度优选为25~80℃,进一步优选为35~70℃,更优选为40~50℃,浓缩的时间优选为10~80min,进一步优选为20~65min,更优选为40~50min。
本发明中,所述浓缩优选在旋转蒸发器中进行,旋转蒸发器的转速优选为10~300rpm,进一步优选为100~280rpm,更优选为150~200rpm。
本发明中,所述层析优选为板层析,层析所用的层析液优选为甲醇和乙酸乙酯的混合溶液,甲醇和乙酸乙酯的体积比优选为1:1~20,进一步优选为1:5~15,更优选为1:8~12。
本发明中,所述洗涤优选为离心洗涤,离心洗涤的试剂优选为乙醇,离心洗涤前优选对溶液进行超声,超声的功率优选为5~50KHz,进一步优选为10~45KHz,更优选为20~30KHz,超声的时间优选为10~80min,进一步优选为20~60min,更优选为30~45min,离心洗涤的速率优选为1000~10000r/min,进一步优选为2000~8000r/min,更优选为4000~5000r/min,离心洗涤的时间优选为5~60min,进一步优选为15~45min,更优选为25~30min,离心洗涤的次数优选为1~5次,进一步优选为2~4次,更优选为3次。
本发明中,所述干燥优选为冷冻干燥,干燥的温度优选为-60~-5℃,进一步优选为-50~-15℃,更优选为-40~-30℃,干燥的时间优选为1~48h,进一步优选为10~36h,更优选为18~24h。
本发明还提供了植物提取物改性分子探针在测量黏性糖蛋白含量中的应用。
下面结合实施例对本发明提供的技术方案进行详细的说明,但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
(1)将0.6g 3-乙基-2-甲基苯并噻唑碘化物溶于无水乙醇中制得溶液A(3-乙基-2-甲基苯并噻唑碘化物的浓度为2M);将6g藏红花醛溶于无水乙醇中,制得溶液B(藏红花醛的浓度为40M);将5.3g碳酸钠溶于无水乙醇中,制得溶液C(碳酸钠的浓度为50M);
(2)将溶液A以3s/滴的速度滴加至溶液B中,制得混合溶液,将溶液C以2s/滴的速度滴加至混合溶液中,在25℃下搅拌2h(搅拌速率为600rpm),并在氮气气氛、60℃下进行Knoevenagel缩合反应,控制搅拌速率为1200rpm并反应24h后得到初级产物;
(3)利用旋转蒸发器(转速为200rpm)将初级产物在-0.09MPa的低压、60℃的温度下浓缩60min,除去无水乙醇;将浓缩后产物经过板层析(层析液为体积比为1:10的甲醇和乙酸乙酯的混合溶液);将层析后的产物溶解于无水乙醇中,并超声(功率为10KHz)30min,再将其在8000r/min的速率下离心洗涤30min,共离心洗涤3次;将离心洗涤后的产物在-30℃下冷冻干燥24h,即得植物提取物改性分子探针。
实施例2
(1)将0.305g3-乙基-2-甲基苯并噻唑碘化物溶于乙酸乙酯中制得溶液A(3-乙基-2-甲基苯并噻唑碘化物的浓度为1M);将0.15g藏红花醛溶于乙酸乙酯中,制得溶液B(藏红花醛的浓度为1M);将0.074g碳酸氢钠溶于乙酸乙酯中,制得溶液C(碳酸氢钠的浓度为1M);
(2)将溶液A以10s/滴的速度滴加至溶液B中,制得混合溶液,将溶液C以1s/滴的速度滴加至混合溶液中,在23℃下搅拌1h(搅拌速率为800rpm),并在氮气气氛、45℃下进行Knoevenagel缩合反应,控制搅拌速率为1500rpm并反应48h后得到初级产物;
(3)利用旋转蒸发器(转速为10rpm)将初级产物在-0.08MPa的低压、以25℃的温度浓缩80min,除去乙酸乙酯;将浓缩后产物经过板层析(层析液为体积比为1:1的甲醇和乙酸乙酯的混合溶液);将层析后的产物溶解于无水乙醇中,并超声(功率为5KHz)10min,再将其在1000r/min的速率下离心洗涤60min;将离心洗涤后的产物在-10℃下冷冻干燥48h,即得植物提取物改性分子探针。
实施例3
(1)将3.05g 3-乙基-2-甲基苯并噻唑碘化物溶于N,N-二甲基甲酰胺中制得溶液A(3-乙基-2-甲基苯并噻唑碘化物的浓度为50M);将88g藏红花醛溶于N,N-二甲基甲酰胺中,制得溶液B(藏红花醛的浓度为200M);将69g碳酸钾溶于N,N-二甲基甲酰胺中,制得溶液C(碳酸钾的浓度为100M);
(2)将溶液A以1s/滴的速度滴加至溶液B中,制得混合溶液,将溶液C以1s/滴的速度滴加至混合溶液中,在28℃下搅拌24h(搅拌速率为800rpm),并在氮气气氛、110℃下进行Knoevenagel缩合反应,控制搅拌速率为100rpm并反应1h后得到初级产物;
(3)利用旋转蒸发器(转速为300rpm)将初级产物在-0.08MPa的低压、以80℃的温度浓缩10min,除去N,N-二甲基甲酰胺;将浓缩后产物经过板层析(层析液为体积比为1:10的甲醇和乙酸乙酯的混合溶液);将层析后的产物溶解于无水乙醇中,并超声(功率为50KHz)80min,再将其在10000r/min的速率下离心洗涤5min,共离心洗涤5次;将离心洗涤后的产物在-60℃下冷冻干燥1h,即得植物提取物改性分子探针。
本发明制得的植物提取物改性分子探针对黏性糖蛋白作用的机理示意图如图1所示,由图1可见,该分子探针的化学结构中含有多个可以自由旋转的共轭结构,其能够在较稀的溶液中自由旋转,而在较稠的溶液中旋转受限,受外部激发光源激发的能量从机械耗散(非辐射)的方式跃迁回基态转而通过辐射跃迁的方式返回基态,进而释放出强烈光信号。
实施例1所得植物提取物改性分子探针的质谱图如图2所示,由图2可见,实施例1所得植物提取物改性分子探针的相对分子质量为312.10534[M]+,其理论相对质量估算值为312.10528,可以确定所合成的产物为植物提取物改性分子探针3-乙基-2-(4-羟基-3-甲氧基苯乙烯基)苯并[d]噻唑-3-鎓盐,具有式I所示的结构式,式I的分子式为C18H18NO2S+。
对实施例1的植物提取物改性分子探针进行性能测试:
对粘度的响应性能测试:
将3.12mg实施例1制得的植物提取物改性分子探针溶于去离子水中,得到浓度为10mM的植物提取溶液,将植物提取溶液加入至丙三醇中,分别制得丙三醇体积分数为0%、10%、30%、50%、70%、100%的混合体系,在室温下贮存1h后,在室温下进行测试,测试波长为520nm,测试结果如图3所示。
实施例1制得的植物提取物改性分子探针在丙三醇/水混合体系中的荧光质谱图如图3所示,由图3可见,随着丙三醇体积分数的增加,混合溶液的体系粘度逐渐增大,光信号强度逐渐增强。
将图3所示粘度与荧光强度的数值进行对数函数换算,并拟合成一条直线,如图4所示,具体数值如表1所示:
表1粘度的对数与荧光强度的对数
粘度的对数(logη) | 0.01 | 0.24 | 0.57 | 1.03 | 1.77 | 2.99 |
荧光强度的对数(logI) | 2.60 | 2.68 | 2.89 | 3.08 | 3.35 | 3.67 |
实施例1制得的植物提取物改性分子探针在丙三醇/水混合体系中的荧光强度与粘度值的对数函数如图4所示,由图4可见,植物提取物改性分子探针的粘度和光信号释放强度之间的关系符合关系式,从该关系式可以看出,所述植物提取物改性分子探针对粘度的敏感系数为0.39,可决系数为0.98。可见,本发明所述植物提取物改性分子探针对溶液的微区粘度的灵敏度较高,适合用于黏性糖蛋白含量的检测。
不同粘度溶液中的光稳定性的测试:
将4.68mg实施例1所得植物提取物改性分子探针溶于去离子水中,控制其浓度为10μM,并分别添加到粘度为1.0cP的去离子水、956.0cP的丙三醇溶液中,在520nm的激发光源下持续激发60min,测试其光信号强度的变化规律,测试结果如图5所示,所得数据如表2所示:
表2光信号强度测试结果
时间/min | 0 | 10 | 20 | 30 | 60 |
在去离子水中的荧光强度/a.u. | 403.2 | 402.3 | 401.1 | 400.2 | 398.2 |
在丙三醇中的荧光强度/a.u. | 4408.2 | 4405.3 | 4403.5 | 4401.1 | 4398.6 |
实施例1制得的植物提取物改性分子探针在高粘度和低粘度溶液中的光稳定性测试图如图5所示,由表2和图5可知,实施例1制得的植物提取物改性分子探针的光稳定性较好,能够在较长时间的激发光源照射下释放稳定的光信号。
不同极性溶液中的吸光度的测试
将1.56mg实施例1所得植物提取物改性分子探针溶于去离子水中,控制其浓度为1mM;将所得植物提取物改性分子探针溶液分别添加至丙三醇、二甲基亚砜、四氢呋喃、二氯甲烷、甲苯和无水乙醇六种常见的不同极性的溶液中,并控制植物提取物改性分子探针的浓度为10μM。将上述六种不同溶液在室温下进行测试,结果如图6所示。
实施例1制得的植物提取物改性分子探针在不同极性溶液中的吸收光谱图如图6所示,由图6可知,植物提取物改性分子探针在不同极性溶液中的吸光度和吸收波长区别并不明显,即其在不同极性溶液中均可有效吸收激发光的能量,不会因为溶液极性的变化导致吸收光谱的变化,表明其在复杂的植物类食品中具有较好的普适性,溶液极性的波动不会影响其对粘度的测量效果。
不同pH条件下的光稳定性的测试
将6.24mg实施例1所得植物提取物改性分子探针溶于去离子水中,控制其浓度为2mM;取6份植物提取物改性分子探针溶液,分别将其pH值调至3、5、6.8、7.4、8和9,并控制植物提取物改性分子探针的浓度为10μM,测试其在复杂不同pH条件中的光谱变化规律。将上述六种不同溶液在室温下进行测试,结果如图7所示。
实施例1制得的植物提取物改性分子探针在不同pH溶液中的发射光谱图如图7所示,由图7可知,植物提取物改性分子探针在pH为3~9的溶液中所释放的光信号强度无显著变化(光谱重合度高),在pH为3~9的范围内表现出较好的光信号释放稳定性,表明制得的植物提取物改性分子探针能够在较宽pH的溶液中使用,即适合在多种植物提取食品中应用。
植物提取物改性分子探针在检测黏性糖蛋白含量的应用
将2.5mg实施例1所得植物提取物改性分子探针溶于去离子水中,控制其浓度为2mM;将所得植物提取物改性分子探针溶液分别添加至粘度为3.5cP的秋葵浆液1、粘度为6.0cP的秋葵浆液2和粘度为9.8cP的秋葵浆液3中,并控制植物提取物改性分子探针的浓度为10μM。将所得三种不同的秋葵分子探针溶液在室温下贮存30min,在520nm的外部光源激发波长的条件下进行测试,结果如图8所示。
实施例1制得的植物提取物改性分子探针在不同秋葵浆液中的发射光谱图如图8所示,由图8可知,植物提取物改性分子探针在3种不同秋葵浆液中的光信号释放强度各不相同,表明3种秋葵浆液存在一定的粘度差异,该测试结果显示本发明提供的植物提取物改性分子探针能够适用于黏性糖蛋白含量的检测,充分感知黏性糖蛋白引起的溶液微区粘度变化,并通过光信号强弱表现出来,这对于研究不同浓度的黏性糖蛋白含量的添加以及植物提取食品的配制工艺具有重要意义。
基于上述内容可知,本发明提供的植物提取物改性分子探针3-乙基-2-(4-羟基-3-甲氧基苯乙烯基)苯并[d]噻唑-3-鎓盐,简称(EHMBI)具有可自由旋转的共轭结构,能够在不同粘度的溶液中释放出不同强度的光信号,呈现出可视化的检测效果,可以作为一种分子级工具平台用于溶液内部微区粘度的变化追踪。测试结果表明,该EHMBI具有较好的光稳定性,且适合应用在较宽pH范围内的溶液中,在多种极性的溶液中其吸收光谱相差不大,普适性较强,且其发射波长为580nm,不容易受到含有黏性糖蛋白的植物提取物食品所含的其它添加剂影响,对于体积较少的含有黏性糖蛋白的液态食品仍然具有可视化监测效果。
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (10)
1.一种植物提取物改性分子探针,其特征在于,改性分子探针的结构式如式I所示:
2.权利要求1所述一种植物提取物改性分子探针的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)将3-乙基-2-甲基苯并噻唑碘化物溶液滴加到藏红花醛溶液中,制得混合溶液;
(2)将无机盐溶液滴加到混合溶液中,混合后进行缩合反应,制得植物提取物改性分子探针。
3.根据权利要求2所述一种植物提取物改性分子探针的制备方法,其特征在于,步骤(1)中藏红花醛的结构式如式II所示:
4.根据权利要求2所述一种植物提取物改性分子探针的制备方法,其特征在于,步骤(1)中3-乙基-2-甲基苯并噻唑碘化物与藏红花醛的摩尔比为1:1~60,所述3-乙基-2-甲基苯并噻唑碘化物溶液的浓度为1~50M,藏红花醛溶液的浓度为1~200M。
5.根据权利要求4所述一种植物提取物改性分子探针的制备方法,其特征在于,步骤(1)所述3-乙基-2-甲基苯并噻唑碘化物溶液、藏红花醛溶液和步骤(2)所述无机盐溶液中的溶剂独立的为N,N-二甲基甲酰胺、乙酸乙酯、乙醇、甲醇、正丁醇、异丙醇、正丙醇、环己醇、乙二醇、正己醇和丙二醇中的一种或几种。
6.根据权利要求2或5所述一种植物提取物改性分子探针的制备方法,其特征在于,步骤(1)和(2)所述滴加的速度独立的为1~10滴/10s。
7.根据权利要求2所述一种植物提取物改性分子探针的制备方法,其特征在于,步骤(2)中无机盐为碳酸钠、碳酸氢钠、醋酸钙、碳酸铯、碳酸钾、醋酸锡、碳酸氢钾或碳酸钙;所述无机盐溶液的浓度为1~100M;无机盐与3-乙基-2-甲基苯并噻唑碘化物的摩尔比为1~50:1。
8.根据权利要求7所述一种植物提取物改性分子探针的制备方法,其特征在于,步骤(2)所述混合的温度为23~28℃,混合的时间为1~24h,混合在搅拌的条件下进行,搅拌的速率为100~800rpm。
9.根据权利要求8所述一种植物提取物改性分子探针的制备方法,其特征在于,步骤(2)所述缩合反应的温度为45~110℃,缩合反应的时间为1~48h,缩合反应在搅拌的条件下进行,搅拌的速率为100~1500rpm。
10.权利要求1所述植物提取物改性分子探针在测量黏性糖蛋白含量中的应用。
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