CN116735746A - 一种分离测定盐酸氯哌丁及其杂质的方法 - Google Patents
一种分离测定盐酸氯哌丁及其杂质的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN116735746A CN116735746A CN202310716062.1A CN202310716062A CN116735746A CN 116735746 A CN116735746 A CN 116735746A CN 202310716062 A CN202310716062 A CN 202310716062A CN 116735746 A CN116735746 A CN 116735746A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- mobile phase
- hydrochloride
- clopidodine
- volume
- impurities
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 239000012535 impurity Substances 0.000 title claims abstract description 79
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 53
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 23
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical group OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 39
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 28
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 claims abstract description 26
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims abstract description 17
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 11
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims abstract description 11
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims abstract description 10
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims abstract description 10
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims abstract description 7
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims abstract description 6
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 claims abstract description 4
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 8
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 7
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 claims description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 230000007423 decrease Effects 0.000 claims description 6
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 6
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 6
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 claims description 6
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 5
- YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N octadecylsilane Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC[SiH3] YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 claims description 3
- LFVGISIMTYGQHF-UHFFFAOYSA-N ammonium dihydrogen phosphate Chemical compound [NH4+].OP(O)([O-])=O LFVGISIMTYGQHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910000387 ammonium dihydrogen phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 claims description 2
- MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N diammonium hydrogen phosphate Chemical compound [NH4+].[NH4+].OP([O-])([O-])=O MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 2
- 235000019837 monoammonium phosphate Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000019799 monosodium phosphate Nutrition 0.000 claims description 2
- 229910000403 monosodium phosphate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical compound [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 2
- 229910000388 diammonium phosphate Inorganic materials 0.000 claims 1
- 235000019838 diammonium phosphate Nutrition 0.000 claims 1
- 229940111688 monobasic potassium phosphate Drugs 0.000 claims 1
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 9
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 3
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 3
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 3
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 239000007857 degradation product Substances 0.000 description 2
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 2
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 description 2
- -1 1- {2- [ (RS) - (4-chlorophenyl) benzyl ] ethyl } piperidine monohydrochloride Chemical group 0.000 description 1
- FLNXBVJLPJNOSI-UHFFFAOYSA-N 1-[2-[(4-chlorophenyl)-phenylmethoxy]ethyl]piperidine Chemical compound C1=CC(Cl)=CC=C1C(C=1C=CC=CC=1)OCCN1CCCCC1 FLNXBVJLPJNOSI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 description 1
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 229960002544 cloperastine Drugs 0.000 description 1
- 229950010560 clopidogrel hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 229940088679 drug related substance Drugs 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- XIHVAFJSGWDBGA-RSAXXLAASA-N methyl (2s)-2-(2-chlorophenyl)-2-(6,7-dihydro-4h-thieno[3,2-c]pyridin-5-yl)acetate;hydrochloride Chemical compound Cl.C1([C@H](N2CC=3C=CSC=3CC2)C(=O)OC)=CC=CC=C1Cl XIHVAFJSGWDBGA-RSAXXLAASA-N 0.000 description 1
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
- G01N30/06—Preparation
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
- G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
- G01N30/34—Control of physical parameters of the fluid carrier of fluid composition, e.g. gradient
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/62—Detectors specially adapted therefor
- G01N30/74—Optical detectors
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N2030/022—Column chromatography characterised by the kind of separation mechanism
- G01N2030/027—Liquid chromatography
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
- G01N30/02—Column chromatography
- G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
- G01N2030/042—Standards
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Spectroscopy & Molecular Physics (AREA)
- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
Abstract
一种分离测定盐酸氯哌丁及其杂质的方法，包括以下步骤：1)取盐酸氯哌丁或含盐酸氯哌丁的制剂，加稀释剂溶解，得到浓度为0.1‑10mg/ml的试样溶液；2)取步骤1)的试样溶液，加稀释剂稀释50‑1000倍，得到对照溶液；3)取色谱柱，流动相包括流动相A和流动相B，流动相A为浓度是0.0001‑1mol/L的缓冲溶液，流动相B为甲醇，流动相采用梯度洗脱方式进入色谱柱，4)分别向色谱柱进样等体积的步骤1)的试样溶液、步骤2)的对照溶液，利用200nm‑250nm波长检测，记录色谱图，完成试样溶液中杂质的分离测定。本发明操作简单、方便，可高效分离测定盐酸氯哌丁及其杂质，保证盐酸氯哌丁及其制剂产品的质量。
Description
技术领域
本发明涉及医药领域，特别涉及一种分离测定盐酸氯哌丁及其杂质的方法。
背景技术
盐酸氯哌丁(Cloperastine hydrochloride)主要通过抑制咳嗽中枢而镇咳，有微弱的抗阻胺作用，无依赖性，其分子式为C20H24ClNO·HCl，结构式如式(a)所示。
盐酸氯哌丁的化学名为1-{2-[(RS)-(4-氯苯基)苯甲氧基]乙基}哌啶单盐酸盐。在合成该化合物的过程中，有几步重要的中间体和未知杂质可能会由于去除不完全而影响药物的纯度和质量，这些已知中间体和未知杂质以及产生的降解产物即为药物质量控制中通常所说的有关物质(即杂质)。对于盐酸氯哌丁的合成主要控制的已知杂质有十三个，分别是：杂质Z1、杂质Z2、杂质Z3、杂质Z4、杂质Z5、杂质Z6、杂质Z7、杂质Z8、杂质Z9、杂质Z10、杂质Z11、杂质Z12、杂质Z13，结构式分别如式(b)、(c)、(d)、(e)、(f)、(g)、(h)、(i)、(j)、(k)、(l)、(m)、(n)。
可见，盐酸氯哌丁的杂质较多，且结构类似，给分离带来难度。此外，各杂质的极性各不相同，在满足盐酸氯哌丁与各杂质分离的前提下，还要满足杂质与杂质之间的分离，使得检测难度较大。采用常规的检测手段方法难以实现盐酸氯哌丁与杂质，以及杂质与杂质之间的有效分离和含量测定，导致盐酸氯哌丁及其制剂的质量难以控制。
为了准确地控制盐酸氯哌丁及其制剂产品的质量，有必要研究一种能简单、快速、准确地分离检测出盐酸氯哌丁及其制剂中有关物质的方法。
发明内容
本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种分离测定盐酸氯哌丁及其杂质的方法，其操作简单、方便，可高效分离测定盐酸氯哌丁及其杂质，保证盐酸氯哌丁及其制剂产品的质量。
本发明的技术方案是：一种分离测定盐酸氯哌丁及其杂质的方法，包括以下步骤：
1)配置试样溶液
取盐酸氯哌丁或含盐酸氯哌丁的制剂，加稀释剂溶解，得到浓度为0.1-10mg/ml的试样溶液；
2)配置对照溶液
取步骤1)的试样溶液，加稀释剂稀释50-1000倍，得到对照溶液；
3)取色谱柱，流动相包括流动相A和流动相B，流动相A为浓度是0.0001-1mol/L的缓冲溶液，流动相B为甲醇，流动相采用梯度洗脱方式进入色谱柱，0分钟，流动相A的体积百分数为60-50％，流动相B的体积百分数为40-50％；0分钟至5分钟，流动相A的体积百分数为60-50％，流动相B的体积百分数为40-50％；5分钟至35分钟，流动相A的体积百分数线性减少至30-10％，流动相B的体积百分数线性增加至70-90％；35分钟至45分钟，流动相A的体积百分数为30-10％，流动相B的体积百分数为70-90％；45分钟至50分钟，流动相A的体积百分数线性增加至60-50％，流动相B的体积百分数线性减少至40-50％；50分钟至60分钟，流动相A的体积百分数为60-50％，流动相B的体积百分数为40-50％；
4)分别向色谱柱进样等体积的步骤1)的试样溶液、步骤2)的对照溶液，利用200nm-250nm波长检测，记录色谱图，完成试样溶液中杂质的分离测定。
步骤1)、步骤2)所述稀释剂为甲醇和水的混合物，甲醇和水的体积比为3-7：7-3。
优选的，甲醇和水的体积比为1：1。
步骤3)所述色谱柱，填料采用十八烷基硅烷键合硅胶，色谱柱采用AgilentEclipse Plus C18色谱柱或Agilent Zorbax SB-C18色谱柱或YMC-Pack ODS-AQ色谱柱。
步骤3)所述缓冲溶液为磷酸或磷酸盐溶液或两者的混合物，所述磷酸盐为磷酸二氢钾、磷酸二氢钠、磷酸二氢铵、磷酸氢二钾、磷酸氢二钠、磷酸氢二铵中的任一种或几种混合，缓冲溶液的pH值为2.0-3.0。
优选的，所述缓冲溶液为磷酸二氢钾溶液，浓度为0.001-0.1mol/L，pH值为2.3-2.7。
步骤3)梯度洗脱方式为：0分钟，流动相A的体积百分数为55％，流动相B的体积百分数为45％；0分钟至5分钟，流动相A的体积百分数为55％，流动相B的体积百分数为45％；5分钟至35分钟，流动相A的体积百分数线性减少至20％，流动相B的体积百分数线性增加至80％；35分钟至45分钟，流动相A的体积百分数为20％，流动相B的体积百分数为80％；45分钟至50分钟，流动相A的体积百分数线性增加至55％，流动相B的体积百分数线性减少至45％；50分钟至60分钟，流动相A的体积百分数为55％，流动相B的体积百分数为45％。
步骤3)流动相的流速为0.8-1.2ml/min，步骤4)试样溶液、对照溶液的进样量为5μl-100μl。
步骤4)进样量为10μl，利用222nm波长检测，色谱柱的柱温为20-40℃。
优选的，色谱柱的柱温为30℃。
采用上述技术方案具有以下有益效果：
1、本发明分离测定方法，采用十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以缓冲溶液为流动相A，甲醇为流动相B，能够有效的分离检测盐酸氯哌丁及其杂质。选用水与甲醇的混合液作为稀释剂溶解样品，排除了溶剂峰的干扰和溶剂效应。采用梯度洗脱方式调整流动相A、流动相B的体积比，确保能够使盐酸氯哌丁与杂质、杂质与杂质之间得到有效分离。通过增加磷酸二氢钾溶液的浓度，可以增强保留、改善分离度，确保色谱峰的良好对称性和较高的柱效。若流动相A、流动相B的体积比不以梯度调整，则会导致主峰与异构体杂质峰分离度差甚至无法分离。
2、本发明分离测定方法采用加校正因子的自身对照法计算试品中各杂质含量，准确度高，各杂质最小相对检测限为0.0006％，表明含量大于0.0006％的杂质均能被检出。
3、本发明分离测定方法使用的流动相A及流动相B配制简单、方便，所用试剂均为常见试剂，经济实惠。根据各成分的极性，调节流动相梯度，可以将盐酸氯哌丁与相邻的杂质峰、降解产物以及起始原料、中间体以及各个已知结构的杂质达到有效分离，准确测定杂质，而且峰形对称，柱效较高。分离测定方法运行时间合适，从而解决了盐酸氯哌丁及其制剂有关物质(杂质：包括起始原料、中间体和降解产物)分离和测定较为困难的问题，可有效保证盐酸氯哌丁及制剂的质量。
下面结合附图和具体实施方式作进一步的说明。
附图说明
图1为实施例1甲醇-水混合液的液相色谱图；
图2为实施例1混合对照溶液的液相色谱图；
图3为实施例2试样溶液的液相色谱图；
图4为实施例2对照溶液的液相色谱图；
图5为实施例3试样溶液的液相色谱图；
图6为实施例3对照溶液的液相色谱图；
图7为实施例3空白辅料供试液的液相色谱图。
具体实施方式
仪器与条件
高效液相色谱仪选用Agilent 1200型液相色谱仪及化学工作站，设置为自动进样。以YMC-Pack ODS-AQ柱(5μm，250×4.6mm)为分离色谱柱。紫外检测器波长：222nm。流动相：以0.05mol/L的磷酸二氢钾溶液(用磷酸溶液调节pH值至2.5)为流动相A，以甲醇为流动相B。梯度洗脱方式：0分钟，流动相A的体积百分数为55％，流动相B的体积百分数为45％；0分钟至5分钟，流动相A的体积百分数为55％，流动相B的体积百分数为45％；5分钟至35分钟，流动相A的体积百分数线性减少至20％，流动相B的体积百分数线性增加至80％；35分钟至45分钟，流动相A的体积百分数为20％，流动相B的体积百分数为80％；45分钟至50分钟，流动相A的体积百分数线性增加至55％，流动相B的体积百分数线性减少至45％；50分钟至60分钟，流动相A的体积百分数为55％，流动相B的体积百分数为45％。柱温为30℃，流速：1.0ml/min。进样体积为20μl。
使用的试剂
杂质对照品：来源于重庆三圣实业股份有限公司技术研发分公司；
磷酸二氢钾：分析纯，重庆川东化工(集团)有限公司，含量99.5％；
甲醇：色谱级，Hollywell，含量99.9％。
实施例1
分别取杂质Z1、杂质Z2、杂质Z3、杂质Z4、杂质Z5、杂质Z6、杂质Z7、杂质Z8、杂质Z9、杂质Z10、杂质Z11、杂质Z12、杂质Z13(各杂质的纯度均在99％以上)各40mg，精密称量，置于100ml量瓶中，加甲醇-水(体积比为50：50)溶解并稀释至刻度，摇匀，作为杂质贮备液；取盐酸氯哌丁40mg，精密称定，置于50ml量瓶中，精密加入杂质贮备液0.5ml，加甲醇-水(体积比为50：50)溶解并稀释至刻度，摇匀，作为混合对照溶液，混合对照溶液的溶质中，酸氯哌丁的浓度为0.8mg/ml，各杂质的浓度均为4μg/ml。
分别取甲醇-水(体积比为50：50)、混合对照溶液，按上述色谱条件进行液相色谱分析，记录色谱图，结果如图1、图2所示。
图1表明，甲醇-水的混合液及色谱系统不干扰测定。
图2中依次出峰的顺序是杂质Z13、杂质Z4、杂质Z5、杂质Z6、盐酸氯哌丁、杂质Z9、杂质Z10、杂质Z7、杂质Z8、杂质Z11、杂质Z12、杂质Z2、杂质Z1、杂质Z3。图2表明，本发明分离测定方法可以有效分离盐酸氯哌丁中可能存在的未知结构的杂质和已知结构的杂质，可以用于盐酸氯哌丁及其制剂中杂质的测定。
实施例2盐酸氯哌丁原料药(由重庆三圣实业股份有限公司提供)中杂质的测定
取盐酸氯哌丁原料药40mg，精密称定，置于50ml量瓶中，加甲醇-水(体积比为50：50)超声处理溶解并稀释至刻度，摇匀，作为试样溶液；精密量取试样溶液0.5ml，置于100ml量瓶，用甲醇-水(体积比为50：50)稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液；按实施例1的色谱条件进行液相色谱分析。记录色谱图，结果如图3、图4所示。采用加校正因子的自身对照法计算试品中杂质含量，检测结果如表1：
实施例3盐酸氯哌丁片(由辽源市百康药业有限责任公司提供)中杂质的测定
取盐酸氯哌丁片适量(约相当于盐酸氯哌丁40mg)，置于50ml量瓶中，加甲醇-水(体积比为50：50)超声处理溶解并稀释至刻度，摇匀，作为试样溶液；精密量取试样溶液0.5ml，置于100ml量瓶，用甲醇-水(体积比为50：50)稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液；另按盐酸氯哌丁片处方比例取空白辅料适量，照供试样溶液相同的方法制备空白辅料供试液；按实施例1的色谱条件进行液相色谱分析。记录色谱图，结果如图5、图6、图7。采用加校正因子的自身对照法计算试品中杂质含量，检测结果如表1：
实施例2、实施例3的检测结果如表1
表1
Claims (10)
1.一种分离测定盐酸氯哌丁及其杂质的方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)配置试样溶液
取盐酸氯哌丁或含盐酸氯哌丁的制剂，加稀释剂溶解，得到浓度为0.1-10mg/ml的试样溶液；
2)配置对照溶液
取步骤1)的试样溶液，加稀释剂稀释50-1000倍，得到对照溶液；
3)取色谱柱，流动相包括流动相A和流动相B，流动相A为浓度是0.0001-1mol/L的缓冲溶液，流动相B为甲醇，流动相采用梯度洗脱方式进入色谱柱，0分钟，流动相A的体积百分数为60-50％，流动相B的体积百分数为40-50％；0分钟至5分钟，流动相A的体积百分数为60-50％，流动相B的体积百分数为40-50％；5分钟至35分钟，流动相A的体积百分数线性减少至30-10％，流动相B的体积百分数线性增加至70-90％；35分钟至45分钟，流动相A的体积百分数为30-10％，流动相B的体积百分数为70-90％；45分钟至50分钟，流动相A的体积百分数线性增加至60-50％，流动相B的体积百分数线性减少至40-50％；50分钟至60分钟，流动相A的体积百分数为60-50％，流动相B的体积百分数为40-50％；
4)分别向色谱柱进样等体积的步骤1)的试样溶液、步骤2)的对照溶液，利用200nm-250nm波长检测，记录色谱图，完成试样溶液中杂质的分离测定。
2.根据权利要求1所述的分离测定盐酸氯哌丁及其杂质的方法，其特征在于，步骤1)、步骤2)所述稀释剂为甲醇和水的混合物，甲醇和水的体积比为3-7：7-3。
3.根据权利要求2所述的分离测定盐酸氯哌丁及其杂质的方法，其特征在于，甲醇和水的体积比为1：1。
4.根据权利要求1所述的分离测定盐酸氯哌丁及其杂质的方法，其特征在于，步骤3)所述色谱柱，填料采用十八烷基硅烷键合硅胶，色谱柱采用Agilent Eclipse Plus C18色谱柱或Agilent Zorbax SB-C18色谱柱或YMC-Pack ODS-AQ色谱柱。
5.根据权利要求1所述的分离测定盐酸氯哌丁及其杂质的方法，其特征在于，步骤3)所述缓冲溶液为磷酸或磷酸盐溶液或两者的混合物，所述磷酸盐为磷酸二氢钾、磷酸二氢钠、磷酸二氢铵、磷酸氢二钾、磷酸氢二钠、磷酸氢二铵中的任一种或几种混合，缓冲溶液的pH值为2.0-3.0。
6.根据权利要求5所述的分离测定盐酸氯哌丁及其杂质的方法，其特征在于，所述缓冲溶液为磷酸二氢钾溶液，浓度为0.001-0.1mol/L，pH值为2.3-2.7。
7.根据权利要求1所述的分离测定盐酸氯哌丁及其杂质的方法，其特征在于，步骤3)梯度洗脱方式为：0分钟，流动相A的体积百分数为55％，流动相B的体积百分数为45％；0分钟至5分钟，流动相A的体积百分数为55％，流动相B的体积百分数为45％；5分钟至35分钟，流动相A的体积百分数线性减少至20％，流动相B的体积百分数线性增加至80％；35分钟至45分钟，流动相A的体积百分数为20％，流动相B的体积百分数为80％；45分钟至50分钟，流动相A的体积百分数线性增加至55％，流动相B的体积百分数线性减少至45％；50分钟至60分钟，流动相A的体积百分数为55％，流动相B的体积百分数为45％。
8.根据权利要求1所述的分离测定盐酸氯哌丁及其杂质的方法，其特征在于，步骤3)流动相的流速为0.8-1.2ml/min，步骤4)试样溶液、对照溶液的进样量为5μl-100μl。
9.根据权利要求8所述的分离测定盐酸氯哌丁及其杂质的方法，其特征在于，步骤4)进样量为10μl，利用222nm波长检测，色谱柱的柱温为20-40℃。
10.根据权利要求9所述的分离测定盐酸氯哌丁及其杂质的方法，其特征在于，色谱柱的柱温为30℃。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202310716062.1A CN116735746B (zh) | 2023-06-16 | 2023-06-16 | 一种分离测定盐酸氯哌丁及其杂质的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202310716062.1A CN116735746B (zh) | 2023-06-16 | 2023-06-16 | 一种分离测定盐酸氯哌丁及其杂质的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN116735746A true CN116735746A (zh) | 2023-09-12 |
| CN116735746B CN116735746B (zh) | 2024-06-18 |
Family
ID=87909327
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202310716062.1A Active CN116735746B (zh) | 2023-06-16 | 2023-06-16 | 一种分离测定盐酸氯哌丁及其杂质的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN116735746B (zh) |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1793905A (zh) * | 2005-12-30 | 2006-06-28 | 江中药业股份有限公司 | 一种同时检测盐酸氯哌丁与马来酸氯苯那敏组合物的方法 |
| US20140142313A1 (en) * | 2012-11-16 | 2014-05-22 | Syn-Tech Chem. & Pharm. Co., Ltd. | New crystalline form of cloperastine hydrochloride |
| CN111239299A (zh) * | 2020-03-30 | 2020-06-05 | 重庆三圣实业股份有限公司 | 一种分离测定帕博西尼及其杂质的方法 |
| CN111380982A (zh) * | 2020-05-11 | 2020-07-07 | 重庆市食品药品检验检测研究院 | 一种检测盐酸氯哌丁原料中2-氯乙醇含量的方法 |
| CN113651772A (zh) * | 2021-09-22 | 2021-11-16 | 重庆三圣实业股份有限公司 | 一种盐酸氯哌丁的制备方法 |
| CN115598261A (zh) * | 2022-11-10 | 2023-01-13 | 地奥集团成都药业股份有限公司（Cn） | 一种盐酸氯哌丁原料及其制剂中有关物质的测定方法 |
-
2023
- 2023-06-16 CN CN202310716062.1A patent/CN116735746B/zh active Active
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1793905A (zh) * | 2005-12-30 | 2006-06-28 | 江中药业股份有限公司 | 一种同时检测盐酸氯哌丁与马来酸氯苯那敏组合物的方法 |
| US20140142313A1 (en) * | 2012-11-16 | 2014-05-22 | Syn-Tech Chem. & Pharm. Co., Ltd. | New crystalline form of cloperastine hydrochloride |
| CN111239299A (zh) * | 2020-03-30 | 2020-06-05 | 重庆三圣实业股份有限公司 | 一种分离测定帕博西尼及其杂质的方法 |
| CN111380982A (zh) * | 2020-05-11 | 2020-07-07 | 重庆市食品药品检验检测研究院 | 一种检测盐酸氯哌丁原料中2-氯乙醇含量的方法 |
| CN113651772A (zh) * | 2021-09-22 | 2021-11-16 | 重庆三圣实业股份有限公司 | 一种盐酸氯哌丁的制备方法 |
| CN115598261A (zh) * | 2022-11-10 | 2023-01-13 | 地奥集团成都药业股份有限公司（Cn） | 一种盐酸氯哌丁原料及其制剂中有关物质的测定方法 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| GARCIA ANTONIA 等: "Development of chromatographic methods for the determination of genotoxic impurities in cloperastine fendizoate", 《JOURNAL OF PHARMACEUTICAL AND BIOMEDICAL ANALYSIS》, vol. 61, 19 December 2011 (2011-12-19), pages 230 - 236, XP028886674, DOI: 10.1016/j.jpba.2011.12.014 * |
| LIU HE-YING: "Identification and quantification of five impurities in cloperastine hydrochloride", 《JOURNAL OF PHARMACEUTICAL AND BIOMEDICAL ANALYSIS》, vol. 193, 30 January 2021 (2021-01-30), pages 1 - 7 * |
| 高振强;刘珠;: "HPLC法测定盐酸氯哌丁原料药的有关物质", 中国药房, vol. 19, no. 22, 31 December 2008 (2008-12-31), pages 1738 - 1739 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN116735746B (zh) | 2024-06-18 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN110133149B (zh) | 一种分离测定lcz696及其杂质的方法 | |
| CN112782327B (zh) | 一种液相色谱法分离测定羧甲司坦及其杂质的方法 | |
| CN114646701B (zh) | 一种l-脯氨酰胺中有关物质的hplc测试方法 | |
| CN116735746B (zh) | 一种分离测定盐酸氯哌丁及其杂质的方法 | |
| CN116908347A (zh) | 一种氨磺必利口服溶液抑菌剂及矫味剂的检测方法 | |
| CN114324642B (zh) | 一种氢溴酸右美沙芬有关物质的测定方法 | |
| CN113820417B (zh) | 一种分离测定吡罗昔康及其杂质的方法 | |
| CN112034066B (zh) | 一种分离测定瑞博西尼及杂质的方法 | |
| CN112557520B (zh) | Tgr-1中tgr-1-对应异构体的检测方法 | |
| CN113848271A (zh) | 一种检测盐酸左西替利嗪口服溶液中有关物质的方法 | |
| CN115248260A (zh) | 一种苯磺顺阿曲库铵原料药中有关物质的hplc分析检测方法 | |
| CN108037221B (zh) | 用液相色谱法同时分离测定复方氨基酸注射液18aa中蛋氨酸亚砜和蛋氨酸砜杂质的方法 | |
| CN107656005B (zh) | 盐酸厄洛替尼与潜在杂质的分离与测定方法 | |
| CN114660213B (zh) | 一种复方利血平氢氯噻嗪片的成分含量测定方法 | |
| CN117907492B (zh) | 同时定性和定量检测5-异喹啉磺酸及其六种杂质的高效液相色谱方法 | |
| Hamsa et al. | Analytical profile of cinacalcet hydrochloride: A review | |
| CN112394112B (zh) | 一种检测硫酸羟氯喹中羟氯喹氮氧化物杂质含量的方法 | |
| CN115856141A (zh) | Hplc分离测定替尼类关键中间体及其相关杂质的方法 | |
| CN117191969A (zh) | 一种检测丁丙诺啡中间体vi中的中间体v的方法 | |
| CN117871727A (zh) | 一种利奈唑胺葡萄糖注射液中枸橼酸根含量的检测方法 | |
| CN117705964A (zh) | 一种盐酸达泊西汀及其制剂的分析方法 | |
| CN117214328A (zh) | 一种甘氨胆酸有关物质的分析方法 | |
| CN114280167A (zh) | 分离检测左亚叶酸钙中双（2-羟乙基）二硫化物的方法 | |
| CN117491548A (zh) | 一种盐酸达克罗宁有关物质的检测方法 | |
| CN115950989A (zh) | 一种依巴斯汀口服溶液的有关物质分析方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant |