CN116676227B - 白色伯克霍尔德氏菌、菌剂及其应用以及促进植物生长的方法 - Google Patents

白色伯克霍尔德氏菌、菌剂及其应用以及促进植物生长的方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及微生物技术领域，公开了一株白色伯克霍尔德氏菌、菌剂及其应用以及促进植物生长的方法。本发明提供的白色伯克霍尔德氏菌CCTCC NO：M 2023003具有很好的固氮、解无机磷、解有机磷以及产铁载体的能力，在植物根际施用该菌株及相关制剂，能够有效改善土壤质量，促进植物生长。此外，由于该菌株是一株天然植物根际菌，因此具有很好的定殖能力，并且相比于实验室诱变筛选菌株而言可以更好地适应种植环境，从而稳定发挥促进植物生长的作用。

Description

白色伯克霍尔德氏菌、菌剂及其应用以及促进植物生长的 方法
技术领域
本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一株白色伯克霍尔德氏菌、菌剂及其应用以及促进植物生长的方法。
背景技术
现代农业生产中，长时间的化肥农药的施用使得土壤环境遭受大幅度的破坏，土壤肥力丧失、土壤板结、土壤盐碱化、重金属污染等环境问题逐渐严重。随着社会和经济的发展，人们迫切需要更加绿色、环保、可持续的方式来进行农业生产。
植物根际促生菌(Plant growth promoting rhizobacteria，PGPR)可以有效修复土壤和促进植物生长，其能够通过固氮、磷酸盐增溶、产铁载体等不同机制产生不同的有益影响，从而促进植物的生长，是目前有望替代或部分替代化肥的生物农业制剂的原料之一。PGPR的施用可以降低农药化肥的使用量，一方面降低生产成本，另一方面还能满足现代农业对于可持续发展的要求，对于现代农业生产的发展转型有着重要的意义。
然而，目前能够用于实际生产的PGPR菌株还十分有限，现有菌株的作用效果也有待提高。而且，现在大多植物促生菌的开发都依赖于人工诱变和筛选，获得的菌株在实际生产中容易产生难以定殖或者效果远达不到实验室检测水平的问题。为了满足农业生产的需要，亟需开发具有更好、更稳定的促生效果，更易定殖，从而能够应用于实际生产的新的PGPR菌株。
发明内容
本发明的目的是为了克服现有技术存在的上述问题，提供一株白色伯克霍尔德氏菌、菌剂及其应用以及促进植物生长的方法。本发明提供的白色伯克霍尔德氏菌是一株从自然环境中采集得到的林木根际菌，施用后具有较好的定殖能力，而且经过检测，该菌株能够高产铁载体，且具有很好的固氮、解磷能力，对植物的生长具有显著促进作用。
为了实现上述目的，本发明第一方面提供一株白色伯克霍尔德氏菌，该菌株的保藏编号为CCTCC NO：M 2023003。
本发明第二方面提供一种制备铁载体的方法，所述方法包括对第一方面所述的白色伯克霍尔德氏菌进行培养，并收集培养产物。
本发明第三方面提供一种具有促进植物生长功能的菌剂，所述菌剂中的活性成分包括第一方面所述的白色伯克霍尔德氏菌。
本发明第四方面提供第一方面所述的白色伯克霍尔德氏菌，或者，第三方面所述的菌剂在改良土壤和/或促进植物生长中的应用。
本发明第五方面提供一种促进植物生长的方法，所述方法包括将第一方面所述的白色伯克霍尔德氏菌和/或其代谢产物，或者第三方面中任意一项所述的菌剂施用于植物根际土壤中。
通过上述技术方案，本发明至少能够取得如下有益效果：
(1)本发明提供的白色伯克霍尔德氏菌具有很好的固氮、解磷效果，不仅能够解无机磷，还能解有机磷，此外，该菌株还能产铁载体，从而可以有效改善土壤质量，提高土壤中植物可以利用的营养成分的含量，进而具有很好的促进植物生长的效果。
(2)本发明提供的白色伯克霍尔德氏菌是一株从自然环境中分离获得的天然林木根际菌，与实验室诱变筛选的菌株相比对于种植环境的适应性更好，能够更好地在土壤中定殖，从而更加稳定地发挥促生功效。
附图说明
图1是实施例1中菌株YIM B08401的菌落形态图。
图2是实施例1中菌株YIM B08401的系统发育树。
图3是实施例2中菌株YIM B08401的(A)固氮效果图；(B)解无机磷效果图；(C)解有机磷效果图。
图4是实施例3中菌株YIM B08401的产铁载体效果图。
生物保藏
本发明提供的白色伯克霍尔德氏菌YIM B08401，分类命名为Burkholderia albaYIM B08401，已于2023年1月3日保藏于中国典型培养物保藏中心，地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号，武汉大学，保藏编号为CCTCC NO：M 2023003。
具体实施方式
在本文中所披露的范围的端点和任何值都不限于该精确的范围或值，这些范围或值应当理解为包含接近这些范围或值的值。对于数值范围来说，各个范围的端点值之间、各个范围的端点值和单独的点值之间，以及单独的点值之间可以彼此组合而得到一个或多个新的数值范围，这些数值范围应被视为在本文中具体公开。
本发明的发明人在研究的过程中，偶然从无量山国家级自然保护区的林木根际土壤中分离获得一株白色伯克霍尔德氏菌。经检测发现，该菌株具有良好的固氮、解磷以及产铁载体性能，该菌株不仅能够转化土壤中难溶性的磷无机磷，还能转化有机磷为可以被植物吸收的有效磷。经过进一步研究，发明人还发现，将该菌株的发酵液施用于植物根际土壤中，能够有效促进植物生长，改善土壤环境，提高农业生产力，促进生态农业绿色可持续发展。
基于上述发现，本发明一方面提供一株白色伯克霍尔德氏菌(Burkholderiaalba)，该菌株的保藏编号为CCTCC NO：M 2023003。
本发明第二方面提供第一方面所述的白色伯克霍尔德氏菌在解磷、固氮或产铁载体中的应用。
本发明中，“固氮”、“解磷”是指通过本发明提供的白色伯克霍尔德氏菌的作用使得土壤中可供植物利用的N、P含量提高。例如促使土壤中的无机磷成分(例如Ca3(PO4)2、FePO4等)，以及有机磷成分(例如卵磷脂、六磷酸肌醇等)转化为植物可利用的形式，从而促进植物对土壤中磷元素的吸收和利用。
本发明第三方面提供一种制备铁载体的方法，所述方法包括对第一方面所述的白色伯克霍尔德氏菌进行培养，并收集培养产物。
任意能够发酵培养白色伯克霍尔德氏菌，并使其产生铁载体的方式和条件均可适用于本发明。
根据本发明的优选实施方式，其中，所述培养的条件包括：培养温度28-32℃，培养时间72-96h。
根据本发明的一种优选实施方式，其中，所述发酵培养采用摇瓶发酵的方式进行时，可以在发酵过程中采用100-200rpm转速振荡培养。
本发明第四方面提供一种具有促进植物生长功能的菌剂，所述菌剂中的活性成分包括第一方面所述的白色伯克霍尔德氏菌。
根据本发明的优选实施方式，其中，所述菌剂为液体菌剂。
优选地，所述液体菌剂中，所述白色伯克霍尔德氏菌的含量不低于1×106CFU/mL。
更优选地，所述液体菌剂中，所述白色伯克霍尔德氏菌的含量为1×107-1×1010CFU/mL。更优选为1×108-1×109CFU/mL。
本发明第五方面提供第一方面所述的白色伯克霍尔德氏菌，或者，第四方面所述的菌剂在改良土壤和/或促进植物生长中的应用。
本发明中，“改良土壤”是指提高土壤中可被植物吸收利用的营养物质含量，从而改善土壤质量，使得土壤更适宜植物生长。
本发明中，“促进植物生长”是指促进植物对土壤中营养元素的吸收，提高植物的生长速度，例如提高植物的株高、径长、根长、植株重量、果实重量和品质等，或者缩短植物的生长周期，促进植物的根系生长发育等。
本发明第六方面提供一种促进植物生长的方法，所述方法包括将第一方面所述的白色伯克霍尔德氏菌和/或其代谢产物，或者第四方面所述的菌剂施用于植物根际土壤中。
根据本发明的优选实施方式，其中，所述白色伯克霍尔德氏菌的施用量不低于1×108CFU/株/次，优选为1×109-1×1012CFU/株/次。
根据本发明的优选实施方式，其中，所述菌剂的用量使得其中白色伯克霍尔德氏菌的施用量不低于1×108CFU/株/次，优选为1×109-1×1012CFU/株/次。优选所述白色伯克霍尔德氏菌或菌剂施用频率为每茬作物施用1-3次。
根据本发明的优选实施方式，其中，所述代谢产物的用量不低于100mL/株/次，优选为100-200mL/株/次。
优选地，所述代谢产物的施用频率为每茬作物施用1-3次。
更优选地，所述代谢产物包括铁载体。
根据本发明的优选实施方式，其中，所述代谢产物由所述白色伯克霍尔德氏菌的发酵液提供。所述发酵液可以采用如前所述的发酵培养方式获得，具体方式和条件在此不再赘述。
优选地，所述代谢产物中，铁载体的含量可以为20-40％(w/v)。优选为30-37％(w/v)。
本发明中，可以直接施用(经过稀释/浓缩后使其中铁载体含量达到上述水平的)所述发酵液，也可以将所述发酵液中的铁载体纯化出来后单独制成制剂施用。纯化的方式可以为本领域任意能够用于分离纯化铁载体的方式。
优选地，所述植物选自茄科植物，茄属植物，最优选为番茄。
以下将通过实施例对本发明进行详细描述。应当能够理解的是，以下实施例仅用于示例性地进一步解释和说明本发明的内容，而不用于限制本发明。
以下实施例中，未做特殊说明的情况下，采用的试剂和材料均为购自正规化学/生物试剂或材料供应商的商购产品，试剂均为分析纯。
以下实施例中，未作特殊说明的情况下，操作温度均为室温(25±5℃)。
实施例1
本实施例用于说明白色伯克霍尔德氏菌CCTCC NO：M 2023003的获得、鉴定和保藏。
(一)菌株分离纯化
菌株分离和纯化过程中采用营养琼脂培养基(NA培养基)，配制方法如下：称取蛋白胨10g、牛肉粉3g、氯化钠5g，加入到1000mL水中，调节pH至7.3±0.1，然后加入15g琼脂，121℃高压灭菌15min。
采用稀释涂布平板法和平板划线法从采集自无量山国家自然保护区的华山松根际土壤样品中分离纯化得到一株细菌，命名为YIM B08401。
(二)菌株鉴定
1、细菌形态特征及生理生化特征鉴定
参照《伯杰细菌鉴定手册》和《常见细菌系统鉴定手册》对菌株YIM B08401进行生理生化测定，描述菌落形态特性。
菌落&细胞形态：图1示出了菌株YIM B08401在NA培养基上的菌落形态，从图中可以看出，该菌株菌落为近圆形，边缘不整齐，白色，菌落中间凸起，湿润、有光泽。经光学显微镜观察，该菌株为杆状菌，有鞭毛。
生理生化特征：菌株YIM B08401革兰氏染色为阴性，盐耐受范围为0-4％(w/v)，pH耐受范围为4-8，说明该菌株具有一定的耐盐性和耐酸性。过氧化氢酶和氧化酶活性以及吐温20、40和80水解均为阳性；碱性磷酸酶、酯酶(C4)、酯酶脂肪酶(C8)、脂肪酶(C14)、亮氨酸芳基酰胺酶、缬氨酸芳基酰胺、胱氨酸芳基酰胺酶类、酸性磷酸酶、萘酚AS BI磷酸水解酶、β-葡萄糖苷酶、N-乙酰基-β-葡糖胺酶和α-甘露糖苷酶试验呈阳性结果；胰蛋白酶、α-糜蛋白酶、α半乳糖苷酶、β-半乳糖苷酶，β-葡萄糖醛酸酶、α-葡萄糖苷酶和α-岩藻糖苷酶的活性呈阴性；可以同化D-甘露醇、D-葡萄糖、D-蜜二糖、L-岩藻糖、D-山梨醇、丙酸盐、辛酸盐、戊酸盐、柠檬酸盐、L-组氨酸、2-酮葡萄糖酸盐、3-羟基丁酸盐、L-脯氨酸、N-乙酰-D-葡萄糖胺、D-核糖、肌醇、D-蔗糖、D-麦芽糖、亚油酸盐、乙酸盐、乳酸盐、L-丙氨酸、3-羟基苯甲酸盐和L-丝氨酸；无法同化水杨酸、L-阿拉伯糖、L-鼠李糖、衣康酸盐、丙二酸盐、5-酮葡萄糖酸盐和糖原。
2、分子鉴定
采用Chelex提取法提取菌株YIM B08401的总DNA作为模板，采用27F(5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’)作为上游引物，1492R(5'-TACGGCTACCTTGTTACGACTT-3’)作为下游引物，采用表1中的反应体系和条件进行16S rRNA扩增。
表1 PCR体系和条件
扩增产物经1％琼脂糖凝胶电泳，(采用广州美基生物科技有限公司生产的胶回收纯化试剂盒)纯化回收后，送至北京擎科生物科技有限公司进行测序。测序结果经在NCBI数据库(https：//www.ncbi.nlm.nih.gov/)和EZBi ocloud数据库(https：//www.ezbiocloud.net/)比对分析。采用系统发育学分析方法，选用同源性较高的模式菌株16S rRNA序列作为参比对象，用Clustal X 1.8软件进行多序列比对，计算供试菌株与参比菌株序列的相似性。系统发育分析时排除碱基缺失位点，采用邻接法(Neighbor-joininganalysis)用MEGA 7.0构建供试菌株与参比菌株之间的系统发育树。其中，Bootstrap值设定为1000，其余均为默认值。
图2示出了绘制的菌株YIM B08401的系统发育树，从中可以看出，YIM B08401与与白色伯克霍尔德氏菌(Burkholderia alba)AD18同源性最高，同源率达99.86％。
3、鉴定结果
结合菌株YIM B08401的分子检测结果以及细菌形态特征及生理生化特征检测结果，鉴定该菌株为白色伯克霍尔德氏菌(Burkholderia alba)。
(三)菌株保藏
将上述获得的Burkholderia alba YIM B08401于2023年1月3日保藏于中国典型培养物保藏中心，地址为湖北省武汉市武昌区八一路299号，武汉大学，保藏编号为CCTCCNO：M 2023003。
实施例2
本实施例用于说明白色伯克霍尔德氏菌CCTCC NO：M 2023003的固氮、解磷效果。
(一)固氮效果测试
阿斯贝(Asbhy)无氮培养基配制方法：称取葡萄糖10g、磷酸氢二钾0.2g、氯化钠0.2g、一水硫酸镁0.2g、硫酸钾0.2g、碳酸钙5g，加入到1000mL水中溶解，加入琼脂18±2g。121摄氏度高压灭菌20min。
采用平板四点接种法，将实施例1中获得的菌株YIM B08401接种在阿斯贝无氮培养平板上，重复接种3个平板。接种完成后将平板置于30℃恒温培养箱内培养5天，培养期间每天观察细菌生长状况及菌落周围透明圈产生情况。
图3(A)中示出了菌株YIM B08401的固氮效果。从图中可以看出，菌株YIM B08401在阿斯贝无氮培养基上培养时能够产生透明圈，说明该菌株具有固氮能力。采用十字交叉法测量透明圈的大小，计算出透明圈直径(D)与菌落直径(d)比值D/d＝4.519±0.403，说明菌株YIM B08401具有较强的固氮能力。
(二)解磷效果测试
1、无机磷
(1)定性检测
无机磷固体培养基配制方法：称取葡萄糖10g、硫酸铵0.5g、氯化钠0.3g、氯化钾0.3g、七水硫酸镁0.3g、七水硫酸铁0.03g、四水硫酸锰0.03g、磷酸三钙2g，加入到1000mL水中溶解，调节pH至7.3±0.1，加入琼脂18±2g。121℃高压灭菌20min。
采用平板四点接种法，将实施例1中获得的菌株YIM B08401接种在无机磷培养平板上，重复接种3个平板。接种完成后将平板置于30℃恒温培养箱内培养5天，培养期间每天观察细菌生长状况及菌落周围透明圈产生情况。
图3(B)中示出了菌株YIM B08401的解无机磷效果。从图中可以看出，菌株YIMB08401在无机磷培养平板上培养时能够产生透明圈，说明该菌株具有解无机磷能力。采用十字交叉法测量透明圈的大小，计算出透明圈直径(D)与菌落直径(d)比值D/d＝1.207±0.01。
(2)定量测试
无机磷液体培养基配制方法：称取葡萄糖10g、硫酸铵0.5g、氯化钠0.3、氯化钾0.3g、七水硫酸镁0.3g、七水硫酸铁0.03g、四水硫酸锰0.03g、磷酸三钙2g，加入到1000mL水中溶解，调节pH至7.3±0.1，121℃高压蒸汽灭菌20min。
LB液体培养基配制方法：称取胰蛋白胨10g、酵母提取物5g、氯化钠10g，加入到1000mL水中，调节pH至7，121℃高压灭菌20min。
采用LB液体培养基对菌株YIM B08401进行活化，将1mL活化液(活菌数含量约为1×106CFU/mL)接种到装有100mL无机磷液体培养基的300ml三角瓶中，30℃下180rpm摇床培养7天。以未接种菌株YIM B08401的培养基为空白对照，每个处理3个重复。每天取样培养液，并将获得的培养液样品10000rpm离心10min，取上清液采用钼锑抗比色法检测培养液中水溶性磷的含量。绘制菌株YIM B08401培养液中可溶解磷含量曲线。
经观察，培养液中第2天的水溶性磷含量最高，达到455.692mg/L。说明该菌株具有很强的解(无机)磷能力。
具体计算方法：每次取2mL发酵液12000rpm离心10min后，取1mL上清液加入50mL容量瓶，加2滴2，6-二硝基苯酚作指示剂，缓慢加入5mL钼锑抗显色剂，用蒸馏水定容，摇匀后静置30min，在700nm波长下比色。读出待测液的吸光值，代入标准曲线与式(1)的公式中计算。
标准曲线：Y＝0.2544X+0.00005053
P＝K×V/V1 式(1)
式(1)中，P为培养液中可溶性磷含量；K为从标准曲线得到的可溶性磷含量(mg/L)；V为定容的体积(mL)；V1为吸取上清液的体积(mL)
2、有机磷
有机磷固体培养基配制方法：称取葡萄糖10g、硫酸铵0.5g、酵母浸粉0.5g、氯化钠0.3g、氯化钾0.3g、硫酸镁0.3g、硫酸亚铁0.03g、硫酸锰0.03g、卵磷脂0.2g、碳酸钙1g，加入到1000mL水中溶解，调节pH至7.3±0.2，加入琼脂18±2g。121℃高压灭菌20min。
采用平板四点接种法，将实施例1中获得的菌株YIM B08401接种在有机磷培养平板上，重复接种3个平板。接种完成后将平板置于30℃恒温培养箱内培养5天，培养期间每天观察细菌生长状况及菌落周围透明圈产生情况。
图3(C)中示出了菌株YIM B08401的解有机磷效果。从图中可以看出，菌株YIMB08401在有机磷培养平板上培养时能够产生透明圈。采用十字交叉法测量透明圈的大小，计算出透明圈直径(D)与菌落直径(d)比值D/d＝2.925±0.87。说明该菌株具有较好的解有机磷能力
实施例3
本实施例用于说明白色伯克霍尔德氏菌CCTCC NO：M 2023003的产铁载体效果。
采用CAS法对实施例1中获得的菌株YIM B08401的产铁载体能力进行定性检测。
CAS显色剂配制方法：
A液：将60.5mg铬天青S(Chrome Azurol S，CAS)加到50mL去离子水中，然后与10mL的Fe3+溶液(1mM FeCl3·6H2O，10mM HCl))混合。
将上述A液和B液全部混合，0.2μm滤膜过滤后即得CAS显色剂。
水琼脂显色剂配制方法：
在100mL蒸馏水中加入1.5g琼脂，121℃高压灭菌20min，获得水琼脂。
待水琼脂冷却至不烫手时(约50℃)，在100mL水琼脂中加入10mL的CAS显色剂。即得水琼脂显色剂。
采用四点接种法将菌株YIM B08401接种在双层琼脂平板(下层为水琼脂显色剂，上层为LB固体培养基)上，重复接种3个平板，置于30℃恒温培养箱中培养5天，观察下层水琼脂显色剂的颜色变化情况。
图4示出了菌株YIM B08401的产铁载体效果。从图中可以看出，在菌落周围的培养基产生了橙红色晕圈，说明该菌株能够产生铁载体。采用十字交叉法测量显色圈的大小，计算出显色圈直径(D)与菌落直径(d)比值D/d＝3.02。
实施例4
本实施例用于说明白色伯克霍尔德氏菌CCTCC NO：M 2023003对植物的促生效果以及对土壤的改良效果。
(一)植物促生效果验证
制备菌剂：实施例1中获得的菌株YIM B08401接种于NB液体培养基中，30℃下180rpm震荡培养72h，所得发酵液即为菌株YIM B08401菌剂(活菌数含量约为5×108CFU/mL)。
植株种植：在每个的花盆中加入相同重量的土壤，按照每个处理3盆随机分组，每盆中栽种6株长势相近的番茄幼苗。
促生效果验证：在番茄幼苗移栽到花盆后第8天用100mL/株的上述菌剂对番茄幼苗进行灌根处理，同时采用等量无菌水进行相同处理作为对照组1(CK1)，等量的NB培养基进行相同处理作为对照组2(CK2)。
灌根处理后的番茄幼苗置于大棚中使其自然生长。灌根处理35天后，测量番茄植株的地上鲜重与干重、地下(根)鲜重与干重、茎直径、根长和株高。
具体测量方法如下：
地上鲜重&干重：剪取番茄植株的根基部以上的部分于分析天平称取地上部分鲜重，保留1位小数。称过鲜重的植株地上部分装入纸袋中放入烘箱，100±5℃杀青10min，然后把烘箱的温度降到75±5℃左右，烘干至恒重，于分析天平称量得到地上部分干重，保留1位小数。
地下鲜重&干重：剪取番茄植株的根基部以下的部分于分析天平称取地下部分鲜重，保留1位小数。称过鲜重的植株地下部分装入纸袋中放入烘箱，100±5℃杀青10min，然后把烘箱的温度降到75±5℃左右，烘干至恒重，于分析天平称量得到地下部分干重，保留1位小数。
茎直径：使用游标卡尺测量植株最粗茎部分的直径。
根长：将根拉直后使用直尺测量根部长度。
株高：将植株拉直后从叶片最高处使用直尺测量地上部分长度。
表2中示出了对照组和实验组番茄幼苗的生长指标测量结果。
表2番茄幼苗植株生长状况
生长指标 CK1 CK2 实验组
地上鲜重(g) 6.64±1b 13.13±5.13b 39.51±12.8a
地上干重(g) 1.06±0.38b 1.8±0.62b 3.91±1.15a
地下鲜重(g) 3.02±0.78b 4.09±0.84b 14.62±2.64a
地下干重(g) 0.36±0.17b 0.6±0.3b 2.06±0.75a
茎直径(mm) 5.72±0.95c 6.25±0.35b 9.26±1.39a
根长(cm) 16.47±2.26b 19.45±3.41b 25.23±6.37a
株高(cm) 22.17±1.86c 27.6±5.52b 41.92±6.16a
*表中数据中带有不同的字母代表具有显著差异
通过上表数据可以看出，采用YIM B08401菌剂灌根处理后，番茄植株的株高、茎直径、地上部分干鲜重、根长、根干鲜重相对于施加清水的对照组(CK1)和施加NB培养基的对照组(CK2)均有明显提高。经计算，实验组的番茄相较于CK1株高净增长量达到了89％，茎直径提高了62％，地上部分鲜重提高了495％，地上部分干重提高了268％，根长提高了53％，根鲜重提高了385％，根干重提高了469％，说明了菌株YIM B08401能够有效的促进植物生长。对照组和对照组之间存在显著性差异(P＜0.05)。说明接种根际菌株YIM B08401对番茄的生长有显著的促进作用。
(二)土壤改良效果验证
番茄(35天)培养结束后，收集各组番茄根际土壤，对获得的土样进行pH、有机质、全氮、全磷、全钾、碱解氮、速效磷、有效钾等土壤理化性质参数检测，验证菌株YIM B08401对土壤的改良效果。检测结果详见表3。
具体检测方法如下：
有机质测定采用铬酸氧还滴定法，pH值测定采用电位法，全氮测定采用凯氏定氮法，全磷测定采用氢氧化钠碱熔-钼锑抗比色法，全钾和速效钾测定采用火焰光度法，碱解氮测定采用扩散吸收法，有效磷测定采用0.5mol/NaHCO3-钼锑抗比色法。
表3土样理化性质检测结果
检测指标 CK1 CK2 实验组
pH 7.2 7.1 7.2
有机质(g/kg) 169.2 184.2 93
全氮(g/kg) 3.82 3.78 3.15
全磷(g/kg) 1.18 1.16 1.19
全钾(g/kg) 6.65 6.95 7.14
水解性氮(mg/kg) 279 299 237
有效磷(mg/kg) 110.5 124.3 82.5
速效钾(mg/kg) 259 364 472
由表中数据可得，三种处理的pH值、全磷、无明显差异，但是实验组的全钾、速效钾含量均高于两个对照组，有机质、全氮、全磷、水解性氮、水解性氮的含量均低于对照组，与表2的番茄植株生长数据共同分析，可以推定，因菌株YIM B08401具有解无机磷、解有机磷、固氮的作用，转化土壤中的营养成分为可供植物吸收的有效磷和水解性氮，并被番茄根系充分吸收，使得番茄植株的有机质含量增加、营养物质积累，从而在种植后土壤环境中的氮磷含量减少。同时，推测在菌株YIM B08401促生作用的影响下，土壤全钾、速效钾含量有所增加，证明了菌株YIM B08401对土壤具有较好的改良作用，进而能够对对番茄生长有明显的促生作用。
以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于此。在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，包括各个技术特征以任何其它的合适方式进行组合，这些简单变型和组合同样应当视为本发明所公开的内容，均属于本发明的保护范围。

Claims (15)

1.一株白色伯克霍尔德氏菌(Burkholderia alba)，其特征在于，该菌株的保藏编号为CCTCC NO:M 2023003。
2.权利要求1所述的白色伯克霍尔德氏菌在解磷、固氮或产铁载体中的应用。
3.一种制备铁载体的方法，其特征在于，所述方法包括对权利要求1所述的白色伯克霍尔德氏菌进行培养，并收集培养产物。
4.根据权利要求3所述的方法，其中，所述培养的条件包括：培养温度28-32℃，培养时间72-96h。
5.一种具有促进植物生长功能的菌剂，其特征在于，所述菌剂中的活性成分包括权利要求1所述的白色伯克霍尔德氏菌。
6.根据权利要求5所述的菌剂，其中，所述菌剂为液体菌剂。
7.根据权利要求6所述的菌剂，其中，所述液体菌剂中，所述白色伯克霍尔德氏菌的含量不低于1×106CFU/mL。
8.根据权利要求7所述的菌剂，其中，所述液体菌剂中，所述白色伯克霍尔德氏菌的含量为1×107-1×1010CFU/mL。
9.权利要求1所述的白色伯克霍尔德氏菌，或者，权利要求5-8中任意一项所述的菌剂在改良土壤和/或促进植物生长中的应用。
10.一种促进植物生长的方法，其特征在于，所述方法包括将权利要求1所述的白色伯克霍尔德氏菌和/或其代谢产物，或者权利要求5-8中任意一项所述的菌剂施用于植物根际土壤中。
11.根据权利要求10所述的方法，其中，所述白色伯克霍尔德氏菌的施用量不低于1×108CFU/株/次；或者
所述菌剂的用量使得其中白色伯克霍尔德氏菌的施用量不低于1×108CFU/株/次；或者
所述代谢产物的用量不低于100mL/株/次。
12.根据权利要求11所述的方法，其中，所述白色伯克霍尔德氏菌的施用量为1×109-1×1012CFU/株/次；或者
所述菌剂的用量使得其中白色伯克霍尔德氏菌的施用量为1×109-1×1012CFU/株/次；或者
所述代谢产物的用量为100-200mL/株/次。
13.根据权利要求10-12中任意一项所述的方法，其中，所述白色伯克霍尔德氏菌或菌剂的施用频率为每茬作物施用1-3次；或者
所述代谢产物的施用频率为每茬作物施用1-3次。
14.根据权利要求10所述的方法，其中，所述植物选自茄科植物。
15.根据权利要求14所述的方法，其中，所述植物为番茄。
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