CN116650356A - 一种去自由基护肤湿巾及其制备方法 - Google Patents

一种去自由基护肤湿巾及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种去自由基护肤湿巾及其制备方法。本发明采用离子型脂质体负载叶黄素并吸附在天然高分子羟丙基甲基纤维素与富勒烯混合交联形成多孔的布材料上面，纳米脂质体能够吸附在富勒烯的孔隙中而稳定存在，通过擦拭皮肤留在皮肤上，清除掉皮肤表面的活性自由基，脂质体负载的叶黄素能够向皮肤深层渗透，清除掉皮肤深层的活性自由基，同时还能延长叶黄素分子的活性，对皮肤提供持续的保护，达到护肤抗皮肤老化的效果，同时该湿巾使用完丢弃后能够快速降解，减少对环境的污染。

Description

一种去自由基护肤湿巾及其制备方法
技术领域
本发明属于护肤清洁领域，具体涉及一种去自由基护肤湿巾及其制备方法。
背景技术
湿巾因其具有清洁、保湿和便于携带等特点而成为人们日常生活中常见的生活用品。目前，湿巾大多都具有清洁、抗菌、消炎、保湿等功能，对于抗皮肤老化的湿巾有待开发。皮肤是保护身体的第一道屏障，每时每刻都在与各种有害的生物或物质作斗争。当受到阳光中的紫外线、熬夜等影响会引起皮肤产生活性自由基，在活性自由基的作用下，蛋白细胞被纤维化，导致皮肤失去弹性，产生皱纹；脂肪细胞发生过氧化反应，令皮肤变得暗沉，逐渐形成色斑，这些都是引起皮肤生理性衰老的主要原因之一。
去自由基的分子有很多，比如维生素C，它是一种多羟基化合物，遇光、氧极易降解成L–脱氢抗坏血酸和二羰基化合物从而失去活性，不利于长时间保存。叶黄素是植物进行光合作用的辅助色素，广泛存在于自然界，主要结构由两个六元碳环和一个含十八碳原子的共轭双键的长链相连接而成，其分子结构中存在多个π-π共轭双键，π-π共轭使单键变短而双键变长，单双键长度差别缩小乃至消失，分子能量更低，更容易夺取自由基的电子，形成稳定的中间体，故叶黄素具有高效泯灭单线态氧和清除自由基的作用，可保护人体免受氧和自由基作用而带来的损害；不足之处是叶黄素利用率低，传统无纺布的负载量少也难降解，造成环境污染和资源浪费。
发明内容
针对目前常用的湿巾大多只具有清洁、抗菌、消炎、保湿等简单功能，需要开发一种具有抗皮肤老化的功能性护肤湿巾以满足人们日常的对皮肤护理的需要。本发明的目的在于提供一种去自由基护肤湿巾的制备方法。
本发明采用羟丙基甲基纤维素-富勒烯复合成膜，制备成多孔的膜材料，该膜可代替无纺布作为湿巾基体材料，并且纳米脂质体能够吸附在富勒烯的孔隙中而稳定存在，可以更好地保护湿巾液中的叶黄素脂质体，减少损耗，能够负载大量叶黄素脂质体的同时也能够在擦拭时将其释放出去，清除掉皮肤表面的活性自由基，脂质体负载的叶黄素能够向皮肤深层渗透，清除掉皮肤深层的活性自由基，同时还能延长叶黄素分子的活性，对皮肤提供持续的保护，减缓皮肤的氧化衰老，达到护肤抗皮肤老化的效果，同时该湿巾使用完丢弃后能够快速降解，减少对环境的污染。
上述方法制得的一种去自由基护肤湿巾。
本发明目的通过以下技术方案实现：
一种去自由基护肤湿巾液的制备方法，包括以下步骤：
(1)将脂质体组分和叶黄素溶解在有机溶剂中，然后蒸发去除有机溶剂，再用纯水水合得到叶黄素脂质体溶液，通过挤出得到叶黄素纳米脂质体溶液；
(2)将羟丙基甲基纤维素、结冷胶、醋酸钾在热水中混合溶解，溶解完全后加入甘油和聚乙二醇搅拌均匀得到羟丙基甲基纤维素溶液；将羟丙基甲基纤维素溶液与富勒烯溶液混合均匀，冷却成型，得到膜材；将膜材置于水中，热水溶出处理，冷冻干燥，得到羟丙基甲基纤维素-富勒烯湿巾布；
(3)将叶黄素纳米脂质体溶液喷洒在羟丙基甲基纤维素-富勒烯湿巾布上，静置一段时间后，再将羟丙基甲基纤维素-富勒烯湿巾布浸润在湿巾液中，得到去自由基护肤湿巾；
所述湿巾液由纯净水、保湿剂、抑菌液和pH调节剂混合均匀所得。
优选地，步骤(1)所述脂质体一方面是为了负载叶黄素，保护叶黄素不被氧化分解；另一方面是脂质体的双分子层结构与细胞膜表面类似，有利于皮肤吸收，促进叶黄素对皮肤活性自由基的抑制，减缓皮肤老化；所述脂质体组分为二油酰基磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰甘油、卵磷脂、L-A-月桂酰磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、L-α-磷脂酰胆碱、1,2-二棕榈酰-sn-甘油-3-磷酰胆碱、胆固醇、琥珀酸胆固醇酯、十八胺和磷脂酸中的至少一种；更优选为15～25重量份的L-A-月桂酰磷脂酰胆碱、2～5重量份的胆固醇和1重量份的十八胺。
优选地，步骤(1)所述脂质体质量和叶黄素质量比为18～31：2～5。
优选地，步骤(1)所述有机溶剂为体积比2：1的氯仿和甲醇混合溶剂。
优选地，步骤(1)所述脂质体质量与有机溶剂体积比为18～31mg：15mL。
优选地，步骤(1)所述叶黄素为纯度为85～99％的叶黄素晶体。
优选地，步骤(1)所述蒸发为旋转蒸发，旋转蒸发的温度为20～35℃，时间为25～35min；挥发掉有机溶剂，并在烧瓶底部形成一层干燥膜。
优选地，步骤(1)所述纯水水合指将去离子水加入到去除有机溶剂后的脂质体和叶黄素的混合物中进行水合，形成叶黄素脂质体溶液，其中去离子水的体积为有机溶剂体积的1～2.5倍。
优选地，步骤(1)所述挤出为：将叶黄素脂质体溶液经50～200nm孔径的聚碳酸酯膜挤出，得到叶黄素纳米脂质体。
优选地，步骤(2)所述羟丙基甲基纤维素5～7重量份，结冷胶0.02～0.04重量份，醋酸钾0.005～0.015重量份，甘油1～3重量份，聚乙二醇2～3重量份，水200重量份。
优选地，步骤(2)所述将羟丙基甲基纤维素、结冷胶、醋酸钾在热水中混合溶解中的热水的温度为58～65℃。
优选地，步骤(2)所述聚乙二醇的分子量为6000～15000，优选为聚乙二醇-10000(PEG-10000)。
优选地，步骤(2)中富勒烯分子结构为C60～C70，优选为C60；所述富勒烯溶液的浓度为(0.1～0.5)mg/mL。
优选地，步骤(2)所述羟丙基甲基纤维素溶液与富勒烯溶液的体积比(13～20)：(1～7)；更优选为20：1～13：7。
优选地，步骤(2)所述热水溶出处理为用48～55℃热水浸泡9～11h，期间换水3～5次。
优选地，步骤(2)具体步骤为先将纯水加热保温，再依次加入醋酸钾、羟丙基甲基纤维素、结冷胶，溶解完全后再加入甘油和聚乙二醇，充分溶解得到羟丙基甲基纤维素溶液；将富勒烯加入纯水中超声分散得到富勒烯溶液；所述成膜是指将混合液分成多次置于模具中，每次干燥后，再加入剩下的混合液，继续干燥；多次为2～3次。
优选地，步骤(2)所述冷冻干燥为本领域的常规冷冻干燥。
优选地，步骤(3)所述叶黄素纳米脂质体溶液的体积和羟丙基甲基纤维素-富勒烯湿巾布的面积之比为1～4mL：300cm2。
优选地，步骤(3)所述静置温度为10～25℃，时间为15～30min。
优选地，步骤(3)所述将羟丙基甲基纤维素-富勒烯湿巾布浸润在湿巾液中，具体操作为：将湿巾液缓慢倒入到羟丙基甲基纤维素-富勒烯湿巾布中，浸没速度为1～3cm/min，直到全部浸没，在10～25℃下静置2.5～3.5h，然后将羟丙基甲基纤维素-富勒烯湿巾布取出进行无菌封装，即得去自由基护肤湿巾。
优选地，步骤(3)所述湿巾液由95～105重量份纯净水、5.5～9重量份保湿剂和2～4重量份抑菌液混合所得，然后用pH调节剂调节pH至5.5～6.4。
优选地，步骤(3)所述保湿剂通过主动与水分子结合，锁住水分，为皮肤时刻提供补水作用，所述保湿剂为甘油、薄荷、三甲基甘氨酸、透明质酸、芦荟、泛醇、山梨醇、木糖醇、甘油葡糖苷、聚甘油、丝肽和吡咯烷酮羧酸钠中的至少一种；更优选为咯烷酮羧酸钠、丝肽和三甲基甘氨酸中的至少一种。
优选地，步骤(3)所述抑菌液是天然或合成的混合组成成分，在安全剂量内对皮肤无害，主要是延长湿巾的保质期，所述抑菌液为茴香酸、葡萄柚种籽提取物、山梨酸钾、乙基己基甘油、辛酰氧肟酸、脱水山梨醇辛酸酯、苯氧乙醇、苯甲酸钠、对羟基苯乙酮和聚山梨酯20中的至少一种；更优选为茴香酸和山梨酸钾中的至少一种。
优选地，步骤(3)所述pH调节剂主要是为了调节体系pH值符合皮肤的生理环境，所述pH调节剂为柠檬酸、柠檬酸钠和山梨酸中的至少一种；更优选为柠檬酸。
上述制备方法制得的去自由基护肤湿巾。
与现有技术相比，本发明具有以下优点及有益效果：
1、本品加入的保湿剂，抑菌液大多对皮肤无害，不仅能锁住皮肤的水分子，还能改善皮肤的通透性，促进其他物质对皮肤深层作用。
2、湿巾中的叶黄素对皮肤产生的活性自由基能够消除和抑制。
3、湿巾布材料是天然高分子材料，原料来源广，天然可降解。
4、富勒烯分散在羟丙基甲基纤维素中成膜提高了羟丙基甲基纤维素膜的力学强度，同时富勒烯造成的多孔结构有利于脂质体的储存和保护，富勒烯本身也具有消除自由基的能力。
附图说明
图1为脂质体包裹分子的示意图。
图2为叶黄素脂质体粒径。
图3为富勒烯(C60)、纯HPMC膜、HPMC/C60复合膜的红外光谱图。
图4为实施例1中不同富勒烯含量下所制备的湿巾布的孔隙率；0表示20：0，5％表示19：1，15％表示17：3，25％表示15：5，35％表示13：7。
图5为实施例1中不同富勒烯含量下所制备的湿巾布负载脂质体的含量。
图6为实施例1中不同富勒烯含量下所制备的湿巾布的抗张强度和断裂伸长率。
图7为实施例1中不同富勒烯含量下所制备的湿巾布12h内水气的透过量。
图8为实施例1中不同富勒烯含量下所制备的湿巾布的扫描电镜图。
图9为实施例1、2、3和对比例1、2、3的自由基清除率。
具体实施方式
下面结合实施例和附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
本发明实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或者制造商建议的条件进行。所用未注明生产厂商者的原料、试剂等，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
实施例1
本实例提供一种制备去自由基湿巾的方法，包括以下步骤：
脂质体的制备：
1)取25mg的L-A-月桂酰磷脂酰胆碱、2mg的胆固醇和1mg的十八胺溶解在15mL体积比2：1的氯仿：甲醇混合有机溶剂中，加入3mg的纯度为99％的叶黄素晶体，在振荡混悬仪上充分溶解；
2)将上述溶液快速注入到旋转蒸发仪上，经30℃下减压旋转蒸发30min，挥发掉有机溶剂，并在烧瓶底部形成一层干燥膜；
3)加入20mL体积的去离子水到烧瓶中进行水合，形成叶黄素脂质体溶液，将该溶液在高压下经100nm孔径的聚碳酸酯膜挤出，得到叶黄素纳米脂质体。
湿巾布的制备：
准备温度为60℃的200mL水，称取醋酸钾0.005g、羟丙基甲基纤维素(HMMC)6g、结冷胶0.03g依次加入到热水中，磁力搅拌1h，溶解完全后加入1g甘油、3g聚乙二醇-10000继续搅拌30min，使其充分溶解，得到羟丙基甲基纤维素溶液；称取80mg富勒烯(C60)溶于200mL纯水中，超声震荡1h，使其充分溶解制成0.4mg/mL的富勒烯溶液；分别按照羟丙基甲基纤维素溶液与富勒烯溶液体积比为20：0，19：1，17：3，15：5，13：7混合，获得100mL混合液，取50mL混合液倒在15×20cm的框架中，室温下干燥24h，倒入剩下的50mL混合液，继续室温下干燥24h，将干燥后的湿巾布置于50℃热水中，浸泡10h，期间换热水4次，溶出复合的湿巾布中的聚乙二醇，取出湿巾布冷冻干燥备用。
去自由基护肤湿巾的制备：
1)取4mL叶黄素纳米脂质体溶液均匀喷洒在15×20cm湿巾布上，在25℃下静置20min，得到基材；
2)取水100重量份、保湿剂(质量比1：1：1的三甲基甘氨酸、吡咯烷酮羧酸钠和丝肽)8重量份、抑菌液(质量比1：1.5的茴香酸和山梨酸钾)3重量份制备湿巾液，使用pH调节剂为柠檬酸，调节湿巾液pH值大小为6.3，将湿巾液缓慢倒入到基材中，浸没速度为1cm/min，直到全部浸没，在25℃下静置3h；将湿巾取出进行无菌封装，即得去自由基护肤湿巾。
实施例2
本实例提供一种制备去自由基湿巾的方法，包括以下步骤：
脂质体的制备：
1)取25mg的L-A-月桂酰磷脂酰胆碱、2mg的胆固醇和1mg的十八胺溶解在15mL体积比2：1的氯仿：甲醇混合有机溶剂中，加入4mg的纯度为99％的叶黄素晶体，在振荡混悬仪上充分溶解；
2)将上述溶液快速注入到旋转蒸发仪上，经30℃下减压旋转蒸发30min，挥发掉有机溶剂，并在烧瓶底部形成一层干燥膜；
3)加入20mL体积的去离子水到烧瓶中进行水合，形成叶黄素脂质体溶液，将该溶液在高压下经100nm孔径的聚碳酸酯膜挤出，得到叶黄素纳米脂质体。
湿巾布的制备：
准备温度为60℃的200mL水，称取醋酸钾0.005g、羟丙基甲基纤维素5g、结冷胶0.03g依次加入到热水中，磁力搅拌1h，溶解完全后加入1g甘油、3g聚乙二醇-10000继续搅拌30min，使其充分溶解，得到羟丙基甲基纤维素溶液；称取60mg富勒烯(C60)溶于200mL纯水中，超声震荡1h，使其充分溶解制成0.3mg/mL的富勒烯溶液；按照羟丙基甲基纤维素溶液与富勒烯溶液体积比为8：2混合，获得100mL混合液，取50mL混合液倒在15×20cm的框架中，室温下干燥24h，倒入剩下的50mL混合液，继续室温下干燥24h，将干燥后的湿巾布置于50℃热水中，浸泡10h，期间换热水4次，溶出复合的湿巾布中的聚乙二醇，取出湿巾布冷冻干燥备用。
去自由基护肤湿巾的制备：
1)取4mL叶黄素纳米脂质体溶液均匀喷洒在15×20cm湿巾布上，在25℃下静置20min，得到基材；
2)取水100重量份、保湿剂(质量比1：1：1的三甲基甘氨酸、吡咯烷酮羧酸钠和丝肽)8重量份、抑菌液(质量比1：1.5的茴香酸和山梨酸钾)3重量份制备湿巾液，使用pH调节剂为柠檬酸，调节湿巾液pH值大小为6.3，将湿巾液缓慢倒入到基材中，浸没速度为1cm/min，直到全部浸没，在25℃下静置3h；将湿巾取出进行无菌封装，即得去自由基护肤湿巾。
实施例3
本实例提供一种制备去自由基湿巾的方法，包括以下步骤：
脂质体的制备：
1)取25mg的L-A-月桂酰磷脂酰胆碱、2mg的胆固醇和1mg的十八胺溶解在15mL体积比氯仿：甲醇(2：1)的混合有机溶剂中，加入2mg的纯度为99％的叶黄素晶体，在振荡混悬仪上充分溶解；
2)将上述溶液快速注入到旋转蒸发仪上，经30℃下减压旋转蒸发30min，挥发掉有机溶剂，并在烧瓶底部形成一层干燥膜；
3)加入20mL体积的去离子水到烧瓶中进行水合，形成叶黄素脂质体溶液，将该溶液在高压下经100nm孔径的聚碳酸酯膜挤出，得到叶黄素纳米脂质体。
湿巾布的制备：
准备温度为60℃的200mL水，称取醋酸钾0.005g、羟丙基甲基纤维素7g、结冷胶0.03g依次加入到热水中，磁力搅拌1h，溶解完全后加入1g甘油、3g聚乙二醇-10000继续搅拌30min，使其充分溶解，得到羟丙基甲基纤维素溶液；称取40mg富勒烯(C60)溶于200mL纯水中，超声震荡1h，使其充分溶解制成0.2mg/mL的富勒烯溶液；将羟丙基甲基纤维素溶液与富勒烯溶液混合按照8.5：1.5的体积比制作100mL混合液，获得100mL混合液，取50mL混合液倒在15×20cm的框架中，室温下干燥24h，倒入剩下的50mL混合液，继续室温下干燥24h，将干燥后的湿巾布置于50℃热水中，浸泡10h，期间换热水4次，溶出复合的湿巾布中的聚乙二醇，取出湿巾布冷冻干燥备用。
去自由基护肤湿巾的制备：
1)取4mL叶黄素纳米脂质体溶液均匀喷洒在15×20cm湿巾布上，在25℃下静置20min，得到基材；
2)取水100重量份、保湿剂(质量比1：1：1的三甲基甘氨酸、吡咯烷酮羧酸钠和丝肽)8重量份、抑菌液(质量比1：1.5的茴香酸和山梨酸钾)3重量份制备湿巾液，使用pH调节剂为柠檬酸，调节湿巾液pH值大小为6.3，将湿巾液缓慢倒入到基材中，浸没速度为1cm/min，直到全部浸没，在25℃下静置3h；将湿巾取出进行无菌封装，即得抗自由基护肤湿巾。
性能表征：
(1)红外光谱
将富勒烯、羟丙基甲基纤维素所形成的湿巾布(纯HPMC膜)、HPMC/C60复合膜进行红外光谱表征，其中HPMC/C60复合膜是由实施例1中羟丙基甲基纤维素溶液与富勒烯溶液的体积比为15：5制得，其他条件同实施例1。
如图3所示，纯的HPMC膜的红外光谱中3449cm-1是羟基峰，2904cm-1、2834cm-1和1453cm-1分别为-CH2的不对称、对称伸缩振动峰和面内弯曲剪式振动峰，当与富勒烯复合后，该复合膜在1180cm-1和1428cm-1处检测到了C60特征吸收峰，该处吸收峰是C60中C＝C键振动峰，3449cm-1的羟基吸收峰仍然存在，说明富勒烯与羟丙基甲基纤维素没有发生化学反应，而是与羟基相互作用结合成氢键分散在复合膜中。
(2)孔隙率
实施例1中不同富勒烯含量下，所制备的湿巾布(即复合膜)的孔隙率如图4所示。
其中C60含量的百分数表示的是羟丙基甲基纤维素溶液与富勒烯溶液的体积比，例如：0表示20：0，5％表示19：1，15％表示17：3，25％表示15：5，35％表示13：7。
图4对复合膜不同C60含量的孔隙率进行分析，从图可以看出随着C60含量的增加孔隙率也随着增加，原因是C60分子表面的活泼碳与HPMC分子上的氢键结合，占据一定的空间体积，破坏了PEG与HPMC之间的分子排列，使溶解更加顺畅。因此，可以增加复合膜的孔隙率。
(3)负载率
取实施例1中所制备的湿巾样品，挤出湿巾中存在的液体，使用紫外可见分光光度计在450nm波长下测定样品的吸光度值。通过吸光度值确定叶黄素脂质体的负载率。实施例1中不同富勒烯含量下，所制备的湿巾布(即复合膜)的叶黄素脂质体的负载率如图5所示。
图5表示不同含量的C60能够影响到脂质体的负载含量，从图可以看出在一定含量范围内随着C60含量增加而增加，超出一定含量范围内随着C60含量增加而趋于稳定，原因是C60在一定含量内湿巾布的孔隙率增加，与脂质体的接触面积增加，能够吸附更多的脂质体，当C60超过一定含量湿巾布孔隙率过大，吸附力减小，脂质体的负载量不再增加。
(4)力学性能
实施例1中不同富勒烯含量下，所制备的湿巾布的力学性能测试，如图6所示。随着C60含量的增加，湿巾布的抗张强度和断裂伸长率先增大后减小。从湿巾布的FI-IR光谱可以看出，C60和HPMC之间形成了氢键，这对湿巾的力学性能有正效应影响。但当C60含量超过15％时，则出现负效应。湿巾布的孔隙率也随之增大，并且由于C60在复合膜中的聚集而产生一定的应力集中，拉伸强度降低。HPMC分子链上大量的氢键、甲氧基和羟丙基降低了分子链的流动性和柔韧性，使断裂伸长率降低。
(5)透气性
实施例1中不同富勒烯含量下，所制备的湿巾布12h内透气量测试结果如图7所示。将湿巾布密封住盛水的烧杯，放在37度恒温恒湿箱内测试水蒸气的透过量。从图可以看出，富勒烯的含量对于水气通过有较大的影响，富勒烯导致湿巾布有更多的孔隙，使得水气更加容易通过，也有助于脂质体粒子更好的附着在其里面。
(6)扫描电镜分析
实施例1中在不同富勒烯含量下，所制备的湿巾布的扫描电镜图如图8所示。a、b、c、d、e对应体积比20：0，19：1，17：3，15：5，13：7；由SEM图可知，所有薄膜都有孔隙分布，当富勒烯含量较低时，孔隙较小，随着富勒烯含量增加，孔隙增大，当含量大于15％以上时出现大孔隙，这也说明孔隙率和水气透过量随着富勒烯含量变化提供了依据。
对比例1
不含叶黄素的脂质体制备成湿巾液，即参考实施例1，步骤(1)中不加入叶黄素晶体；同时湿巾布的制备按照羟丙基甲基纤维素溶液与富勒烯溶液体积比为16：4，其他条件同实施例1。
对比例2
本对比例与实施例1的不同之处：湿巾布的制备不添加富勒烯，用与富勒烯溶液相同体积的水与羟丙基甲基纤维素溶液混合，体积比为5：15。
对比例3
用无纺布代替制备的湿巾布，其他条件同实施例1。
制备湿巾的使用：当人们受到太阳照射、皮肤干燥、起油、熬夜等影响引起皮肤产生的活性自由基时，可以使用该湿巾轻轻擦拭，抑制自由基对皮肤细胞产生损害，减缓了皮肤的老化现象。
效果测试：
(1)抗菌测试：抑菌公式为：抑菌率＝(对照组菌落计数-实验组菌落计数)/对照组菌落计数×100％。以金黄色葡萄球菌(ATCC 6538)与大肠杆菌(ATCC 25922)为例，测试结果如表1所示，其中实施例1和对比例3对应的是羟丙基甲基纤维素烯溶液与富勒烯溶液的体积比为15∶5。可以看到，实施例与对比例均具有较好的抑菌性，对金黄色葡萄球菌的抑菌率大于大肠杆菌，对比例2和对比例3不含有富勒烯时，抑菌率有所下降，富勒烯有助于抑制细菌的生长。
表1
(2)去自由基效果：以DPPH、ABTS、OH自由基清除实验为例；取一整块湿巾样品(含湿巾液，下同)加入3mL的DPPH乙醇溶液(0.04g/L)中，然后将溶液充分混合，在黑暗中静置30min使其充分反应后。在波长为517nm处测定混合液的吸光度值。配制ABTS溶液(7mmol/L)，然后将4mLABTS溶液与湿巾样品混合均匀，避光放置30min。使用紫外可见分光光度计在734nm波长下测定样品的吸光度值，再将样品替换成去离子水，再测吸光度值。将1mL水杨酸溶液(10mmol/L)、1mL湿巾(挤出液)样品和1mLFeSO4溶液(10mmol/L)依次加入到离心管中，然后加入1mLH2O2溶液(8.8mmol/L)启动反应，放置15min之后用用紫外可见分光光度计在510nm波长下测定样品的吸光度值。
实验组A、B、C、D、E、F以次代表实施例1、2、3和对比例1、2、3，其中实施例1对应的是羟丙基甲基纤维素烯溶液与富勒烯溶液的体积比为15∶5，将制备完成的湿巾布从湿巾液中捞起，待液体不再流走时再拧出藏在湿巾中的液体，并收集液体，进行去自由基测试，测试结果如图9所示，实施例的自由基清除率都对比例高，对比例1中不含叶黄素脂质体清除率在6-15％；对比例2和对比例3是不含富勒烯制备的湿巾布和无纺布，虽然具有一定的清除效率，但是也说明富勒烯的存在能产生多孔结构，也能吸附更多的脂质体来清除自由基，所以清除率低于实施例，同时表明，叶黄素脂质体加入对自由基的清除具有积极作用。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种去自由基护肤湿巾的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将脂质体组分和叶黄素溶解在有机溶剂中，然后蒸发去除有机溶剂，再用纯水水合得到叶黄素脂质体溶液，通过挤出得到叶黄素纳米脂质体溶液；
(2)将羟丙基甲基纤维素、结冷胶、醋酸钾在热水中混合溶解，溶解完全后加入甘油和聚乙二醇搅拌均匀得到羟丙基甲基纤维素溶液；将羟丙基甲基纤维素溶液与富勒烯溶液混合均匀，冷却成型，得到膜材；将膜材置于水中，热水溶出处理，冷冻干燥，得到羟丙基甲基纤维素-富勒烯湿巾布；
(3)将叶黄素纳米脂质体溶液喷洒在羟丙基甲基纤维素-富勒烯湿巾布上，静置一段时间后，再将羟丙基甲基纤维素-富勒烯湿巾布浸润在湿巾液中，得到去自由基护肤湿巾；
所述湿巾液由纯净水、保湿剂、抑菌液和pH调节剂混合均匀所得。
2.根据权利要求1所述一种去自由基护肤湿巾的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述脂质体质量和叶黄素质量比为18～31：2～5；
步骤(3)所述叶黄素纳米脂质体溶液的体积和羟丙基甲基纤维素-富勒烯湿巾布的面积之比为1～4mL：300cm2；
步骤(1)所述脂质体组分为二油酰基磷脂酰乙醇胺、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰甘油、卵磷脂、L-A-月桂酰磷脂酰胆碱、二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱、L-α-磷脂酰胆碱、1,2-二棕榈酰-sn-甘油-3-磷酰胆碱、胆固醇、琥珀酸胆固醇酯、十八胺和磷脂酸中的至少一种；
步骤(1)所述叶黄素为纯度为85～99％的叶黄素晶体。
3.根据权利要求1所述一种去自由基护肤湿巾的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述羟丙基甲基纤维素5～7重量份，结冷胶0.02～0.04重量份，醋酸钾0.005～0.015重量份，甘油1～3重量份，聚乙二醇2～3重量份，水200重量份；所述聚乙二醇的分子量为6000～15000；
步骤(2)中富勒烯分子结构为C60～C70；所述富勒烯溶液的浓度为(0.1～0.5)mg/mL；
步骤(2)所述羟丙基甲基纤维素溶液与富勒烯溶液的体积比(13～20)：(1～7)。
4.根据权利要求1所述一种去自由基护肤湿巾的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述脂质体组分为15～25重量份的L-A-月桂酰磷脂酰胆碱、2～5重量份的胆固醇和1重量份的十八胺。
5.根据权利要求1所述一种去自由基护肤湿巾的制备方法，其特征在于，步骤(3)所述湿巾液由85～89重量份纯净水、5.5～9重量份保湿剂和0.05～0.08重量份抑菌液混合所得，然后用pH调节剂调节pH至5.5～6.4；
所述保湿剂为甘油、薄荷、三甲基甘氨酸、透明质酸、芦荟、泛醇、山梨醇、木糖醇、甘油葡糖苷、聚甘油、丝肽和吡咯烷酮羧酸钠中的至少一种；
所述抑菌液为茴香酸、葡萄柚种籽提取物、山梨酸钾、乙基己基甘油、辛酰氧肟酸、脱水山梨醇辛酸酯、苯氧乙醇、苯甲酸钠、对羟基苯乙酮和聚山梨酯20中的至少一种；
所述pH调节剂为柠檬酸、柠檬酸钠和山梨酸中的至少一种。
6.根据权利要求1所述一种去自由基护肤湿巾的制备方法，其特征在于，步骤(3)所述静置的10～25℃，时间为15～30min；
步骤(3)所述将羟丙基甲基纤维素-富勒烯湿巾布浸润在湿巾液中，具体操作为：将湿巾液缓慢倒入到羟丙基甲基纤维素-富勒烯湿巾布中，浸没速度为1～3cm/min，直到全部浸没，在10～25℃下静置2.5～3.5h，然后将羟丙基甲基纤维素-富勒烯湿巾布取出进行无菌封装，即得去自由基护肤湿巾。
7.根据权利要求1所述一种去自由基护肤湿巾的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述纯水水合指将去离子水加入到去除有机溶剂后的脂质体和叶黄素的混合物中进行水合，形成叶黄素脂质体溶液，其中去离子水的体积为有机溶剂体积的1～2.5倍；
步骤(1)所述挤出为：将叶黄素脂质体溶液经50～200nm孔径的聚碳酸酯膜挤出，得到叶黄素纳米脂质体。
8.根据权利要求1所述一种去自由基护肤湿巾的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述有机溶剂为体积比2：1的氯仿和甲醇混合溶剂；
所述脂质体质量与有机溶剂体积比为18～31mg：15mL。
9.根据权利要求1所述一种去自由基护肤湿巾的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述蒸发为旋转蒸发，旋转蒸发的温度为20～35℃，时间为25～35min；挥发掉有机溶剂，并在烧瓶底部形成一层干燥膜；
步骤(2)所述将羟丙基甲基纤维素、结冷胶、醋酸钾在热水中混合溶解中的热水的温度为58～65℃；
步骤(2)所述热水溶出处理为用48～55℃热水浸泡9～11h，期间换水3～5次。
10.权利要求1～9任一项所述制备方法制得的一种去自由基护肤湿巾。
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