CN116649508A - 复合克氏原螯虾饲料、制备方法及应用 - Google Patents

复合克氏原螯虾饲料、制备方法及应用 Download PDF

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Abstract

本申请公开了一种复合克氏原螯虾饲料、制备方法及应用。该复合克氏原螯虾饲料，其包括基础组分和益生菌组分。基础组分包括鱼粉、豆粕、小麦粉、α‑淀粉、鱼油、复合维生素、复合矿物盐。益生菌组分包括丁酸梭菌和嗜酸乳杆菌。该复合克氏原螯虾饲料能够改善养殖池水质，同时可有效调节克氏原螯虾肠道健康，抑制肠道病原菌的生长，减少肠道炎症的发生。另外，该复合克氏原螯虾饲料还能提高克氏原螯虾免疫力的作用，特别是还能够调节HIF基因的表达，提高克氏原螯虾耐受低氧能力，从而有效预防五月瘟的发生。

Description

复合克氏原螯虾饲料、制备方法及应用
技术领域
本申请涉及克氏原螯虾技术领域，具体涉及复合克氏原螯虾饲料、制备方法及应用。
背景技术
克氏原螯虾是一种生长速度快、适应性强、非常受欢迎的甲壳类动物。然而疾病的频繁爆发限制了克氏原螯虾养殖业的发展，特别是在每年的四五月，水温升高导致水中溶解氧降低，但水草的生长受到影响，水质下降，残余的饲料和粪便在水温升高后的发酵过程以及克氏原螯虾在四五月份的快速生长都会进一步降低水中溶解氧的含量。
在人或动物处于低氧环境时，缺氧诱导因子(HIF-1α)降解途径被阻断，会导致其蛋白水平大量积累，含量上升，进而激活并调节肾脏细胞中促红细胞生成素(EPO)基因的表达，使红细胞数量增加以适应低氧环境。鱼类研究表明，HIF通路会影响相关靶基因的表达、炎症反应、免疫反应以及细胞的形成等生命活动。斑马鱼中的研究发现HIF-1α和HIF-2α都可以对血管内皮细胞产生积极的影响，从而正向调节造血干细胞的形成，来应对低氧环境；同时发现HIF-3α可以通过红细胞特异核蛋白转录因子(GATA1)调节红细胞的数量来调控低氧耐受性。但是长期缺氧会导致许多组织/器官功能障碍，免疫力下降，对机体造成很大危害。
长期低氧导致克氏原螯虾活力降低、免疫力下降，病原菌丰度升高，造成大规模疾病暴发和虾死亡，极大地影响了产量，俗称五月瘟。五月瘟期间，养殖户往往会滥用药，但效果较差，对环境也造成一定的影响。目前也有研究提出对全池进行消毒并提高养殖池溶解氧，但操作较繁琐，工作量较大，因此需要发明一种经济高效的方式以预防五月瘟的发生。
发明内容
有鉴于此，本申请实施例提供了一种复合克氏原螯虾饲料、制备方法及应用。为此，本申请实施例至少公开了以下技术方案：
第一方面，实施例公开了一种复合克氏原螯虾饲料，其包括：
基础组分，所述基础组分以重量份数计包括30～50份鱼粉、10～20份豆粕、10～20份小麦粉、1～2份α-淀粉、4～6份鱼油、0.1～0.5份复合维生素、0.2～0.7份复合矿物盐；
益生菌组分，所述益生菌组分以所述复合克氏原螯虾饲料总重量计，包括不低于1.0×106CFU每重量份的丁酸梭菌，不低于1.0×106CFU每重量份的嗜酸乳杆菌。
第二方面，实施例公开了第一方面所述的复合克氏原螯虾饲料的制备方法，包括：
将配方量的所述基础组分均匀混合后，混入所述益生菌组分，充分混匀后，制粒，烘干。
第三方面，实施例公开了一种克氏原螯虾的饲喂方法，包括将第一方面所述的复合克氏原螯虾饲料每日定时投喂2次(9：00和17：00)，日投喂量为克氏原螯虾平均体重的2～3％。
第四方面，实施例公开了第一方面所述的复合克氏原螯虾饲料在如下之一中的应用，所述应用选自：
预防克氏原螯虾发生五月瘟；
降低克氏原螯虾发生五月瘟疫的死亡率；
改善克氏原螯虾的养殖池水质；
调节克氏原螯虾肠道健康；
抑制克氏原螯虾肠道病原菌的生长；
减少克氏原螯虾肠道炎症的发生；
提高克氏原螯虾耐受低氧能力。
该复合克氏原螯虾饲料能够改善养殖池水质，同时可有效调节克氏原螯虾肠道健康，抑制肠道病原菌的生长，减少肠道炎症的发生。另外，该复合克氏原螯虾饲料还能提高克氏原螯虾免疫力的作用，特别是还能够调节HIF基因的表达，提高克氏原螯虾耐受低氧能力，从而有效预防五月瘟的发生。
附图说明
图1为实施例提供的对照组和实验组克氏原螯虾在门水平上的分类组成。只有相对丰度在前十的分类单元被表示出来，其他的被归类为“Others”。
图2为实施例提供的对照组和实验组克氏原螯虾在属水平上的分类组成，未鉴定到属的后加“UG”。只有相对丰度在前十的分类单元被表示出来，其他的被归类为“Others”。
图3为实施例提供的采用Shannon指数计算两组微生物α多样性结果图。
图4为实施例提供的不同摄食组样品基于Unifrac加权距离的主成分分析(PCoA)结果图。
图5为实施例提供的对照组和实验组克氏原螯虾肠道微生物中机会致病菌丰度结果图。
具体实施方式
为了使本申请的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本申请进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本申请，并不用于限定本申请。本申请中未详细单独说明的试剂均为常规试剂，均可从商业途径获得；未详细特别说明的方法均为常规实验方法，可从现有技术中获知。
需要说明的是，本发明的说明书和权利要求书及上述附图中的术语“第一”、“第二”等是用于区别类似的对象，而不必用于描述特定的顺序或先后次序，也不对其后的技术特征起到实质的限定作用。应该理解这样使用的数据在适当情况下可以互换，以便这里描述的本发明的实施例能够以除了在这里图示或描述的那些以外的顺序实施。此外，术语“包括”和“具有”以及他们的任何变形，意图在于覆盖不排他的包含，例如，包含了一系列步骤或单元的过程、方法、系统、产品或设备不必限于清楚地列出的那些步骤或单元，而是可包括没有清楚地列出的或对于这些过程、方法、产品或设备固有的其它步骤或单元。
为了更好地理解本发明而不是限制本发明的范围，在本申请中所用的表示用量、百分比的所有数字、以及其他数值，在所有情况下都应理解为以词语“大约”所修饰。因此，除非特别说明，否则在说明书和所附权利要求书中所列出的数字参数都是近似值，其可能会根据试图获得的理想性质的不同而加以改变。各个数字参数至少应被看作是根据所报告的有效数字和通过常规的四舍五入方法而获得的。
术语“份”，仅指重量份，具体可将任意重量作为1份，如0.001g、0.01g、0.05g、0.1g、0.5g、1g、10g、100g、1000g、5000g、10000g等，对1份的绝对重量不做具体限定。
实施例以鱼粉、豆粕、小麦粉、α-淀粉、鱼油、复合维生素和复合矿物盐组成基础组分，添加丁酸梭菌、嗜酸乳杆菌、果寡糖和菊粉添加到基础组分中以形成的复合克氏原螯虾基础饲料。在该复合克氏原螯虾饲料中，鱼粉和豆粕为主要蛋白来源，鱼油为主要脂肪来源，小麦粉和α-淀粉提供碳水化合物，丁酸梭菌属于厌氧菌群，嗜酸乳杆菌是兼性厌氧菌，在不消耗氧气的同时，还可以改善水质，同时可有效调节克氏原螯虾肠道健康，抑制肠道病原菌的生长，减少肠道炎症的发生。益生元不仅能够促进益生菌的生长，也能发挥调节肠道健康，提高免疫力的作用。特别是该饲料能够调节HIF基因的表达，提高克氏原螯虾耐受低氧能力，从而有效预防五月瘟的发生。
基于此，实施例公开了一种复合克氏原螯虾饲料，其包括：
基础组分，所述基础组分以重量份数计包括30～50份鱼粉、10～20份豆粕、10～20份小麦粉、1～2份α-淀粉、4～6份鱼油、0.1～0.5份复合维生素、0.2～0.7份复合矿物盐；
益生菌组分，所述益生菌组分以所述复合克氏原螯虾饲料总重量计，包括不低于1.0×106CFU每重量份的丁酸梭菌，不低于1.0×106CFU每重量份的嗜酸乳杆菌。
在一些实施例中，所述基础组分以重量份数计包括40～50份鱼粉、13～17份豆粕、15～18份小麦粉、1.5～2份α-淀粉、4～5份鱼油、0.2～0.4份复合维生素、0.3～0.6份复合矿物盐。
在一些实施例中，所述基础组分以重量份数计包括45份鱼粉、15份豆粕、16.7份小麦粉、1.8份α-淀粉、4.5份鱼油、0.3份复合维生素、0.5份复合矿物盐。
在一些实施例中，所述复合维生素以重量份数计，包括2～5份维生素B1、3～7份维生素B2、15～25份核黄素、8～15份烟酸、8～15份维生素B6、0.2～0.6份叶酸、80～120份肌醇、0.1～0.3份维生素A、0.8～1.5份维生素K3、12～18份维生素H和700～1000份麦麸。
在一些实施例中，所述复合维生素以重量份数计，包括2～4份维生素B1、4～6份维生素B2、18～22份核黄素、8～12份烟酸、8～12份维生素B6、0.3～0.5份叶酸、90～110份肌醇、0.15～0.25份维生素A、0.8～1.2份维生素K3、14～16份维生素H和800～900份麦麸。
在一些实施例中，所述复合维生素以重量份数计，包括3份维生素B1、5份维生素B2、20份核黄素、10份烟酸、10份维生素B6、0.4份叶酸、100份肌醇、0.2份维生素A、1份维生素K3、15份维生素H和835.4份麦麸。
在一些实施例中，所述复合矿物盐以重量份数计，包括10～20份柠檬酸铁、30～70份硫酸镁、0.2～0.5份硫酸铝钾、0.4～0.8份碘酸钙、0.2～0.6份硫酸铜、1.0～2.0份硫酸锰、0.05～0.15份六水氯化钴、1.5～2.5份七水硫酸锌、800～1000份氯化钠。
在一些实施例中，所述复合矿物盐以重量份数计，包括13～17份柠檬酸铁、40～60份硫酸镁、0.3～0.5份硫酸铝钾、0.5～0.7份碘酸钙、0.3～0.5份硫酸铜、1.3～1.6份硫酸锰、0.08～0.12份六水氯化钴、1.8～2.2份七水硫酸锌、900～1000份氯化钠。
在一些实施例中，所述复合矿物盐以重量份数计，包括15份柠檬酸铁、50份硫酸镁、0.4份硫酸铝钾、0.6份碘酸钙、0.4份硫酸铜、1.5份硫酸锰、0.1份六水氯化钴、2份七水硫酸锌、930份氯化钠。
在一些实施例中，所述复合克氏原螯虾饲料以其总重量计，还包括不低于2‰的果寡糖和不低于2‰的菊粉。
在一些实施例中，所述复合克氏原螯虾饲料以其总重量计，还包括不低于3‰的果寡糖和不低于3‰的菊粉。
基于此，实施例还公开了复合克氏原螯虾饲料的制备方法，包括：将配方量的所述基础组分均匀混合后，混入所述益生菌组分，充分混匀后，制粒，烘干。在一些实施例的复合克氏原螯虾饲料的制备过程中，还混入了以其总重量计不低于2‰的果寡糖和不低于2‰的菊粉。在一些实施例的复合克氏原螯虾饲料的制备过程中，还混入了以其总重量计不低于3‰的果寡糖和不低于3‰的菊粉。
基于此，实施例还公开了一种克氏原螯虾的饲喂方法，包括将上述实施例提供所述的复合克氏原螯虾饲料每日定时投喂2次(9：00和17：00)，日投喂量为克氏原螯虾平均体重的2-3％。
基于此，实施例还公开了上述实施例提供所述的复合克氏原螯虾饲料的应用，所述应用选自：
预防克氏原螯虾发生五月瘟；
降低克氏原螯虾发生五月瘟疫的死亡率；
改善克氏原螯虾的养殖池水质；
调节克氏原螯虾肠道健康；
抑制克氏原螯虾肠道病原菌的生长；
减少克氏原螯虾肠道炎症的发生；
提高克氏原螯虾耐受低氧能力。
下面结合更加具体的实施例对本发明作进一步的描述，当然下述实施例不应理解为对本申请的限制。
1、复合克氏原螯虾饲料的制备
基础组分按重量份计包括45份鱼粉、15份豆粕、16.7份小麦粉、1.8份α-淀粉、4.5份鱼油、0.3份复合维生素、0.5份复合矿物盐。
其中，复合维生素按1kg计，由下列组分组成：维生素B1 3g、维生素B2 5g、核黄素20g、烟酸10g、维生素B6 10g、叶酸400mg、肌醇100g、维生素A200mg、维生素K3 1g、维生素H15g，麦麸835.4g。
其中，复合矿物盐，按1kg计，由下列组分组成：柠檬酸铁15g、硫酸镁50g、硫酸铝钾0.4g、碘酸钙0.6g、硫酸铜0.4g、硫酸锰1.5g、六水氯化钴0.1g、七水硫酸锌2g、氯化钠930g。
制备：将基础组分中的各原料按照其配方比例均匀混合后，加入丁酸梭菌、嗜酸乳杆菌、果寡糖和菊粉，充分混匀后，制粒，烘干，得到含益生丁酸梭菌和嗜酸乳杆菌的克氏原螯虾饲料。其中，丁酸梭菌(CCTCC CB 20081668)和嗜酸乳杆菌(CCTCC DB 20081522)的活菌数都为1.0×108CFU/g总重量，果寡糖和菊粉添加量都是3‰(总重量)。
2、饲喂实验
(1)供试品
试验组：上述实施例制得的复合克氏原螯虾饲料。对照组：以基础组分作为饲料。
(2)试验方法
在湖北省蕲春县选取生态条件基本相近的6口池塘，随机分成2个处理组。4月中旬放养克氏原螯虾，苗种规格为100尾/kg实验虾，水温15-25℃，pH为7.5-8.5。两种饲料分别投喂不同组，每日定时投喂2次(9：00和17：00)，日投喂量为克氏原螯虾平均体重的2-3％左右。实验时间为30天。
(3)血清制备检测
试验结束后采集克氏原螯虾血液，将多个虾的血液混合，分离血清后测定克氏原螯虾的抗氧化能力，如超氧化物歧化酶，丙二醛和过氧化氢酶的含量，同时测定克氏原螯虾的免疫能力，如测定酸性磷酸酶、碱性磷酸酶和溶菌酶活性。试剂均采用南京建成生物工程研究所生产的试剂盒。
表1示出了实验组和对照组克氏原螯虾血清抗氧化指标结果。由表1可知，对克氏原螯虾血清SOD浓度、丙二醛和过氧化氢酶含量测定发现，实验组SOD和过氧化氢酶的浓度显著高于对照组，丙二醛显著低于对照组(p<0.05)，说明摄食复合克氏原螯虾饲料显著提高了克氏原螯虾的抗氧化能力。
表1
对照组 实验组
SOD活性(U/mL) 27.50±1.50a 29.41±1.20b
丙二醛MDA(nmol/ml) 3.2±0.11b 1.2±0.10a
过氧化氢酶(U/mL) 2.89±0.45a 5.76±0.34b
表中数据表示为平均值±标准差，平均后不同上标表示显著差异(p<0.05)
表2示出了实验组和对照组克氏原螯虾血清非特异性免疫指标结果。由表2可知，对克氏原螯虾血清酸性磷酸酶、碱性磷酸酶和溶菌酶含量测定发现实验组溶菌酶的活性显著高于对照组(p<0.05)，说明摄食复合克氏原螯虾饲料提高了克氏原螯虾的免疫能力。
表2
对照组 实验组
酸性磷酸酶(U/mL) 41.60±2.45a 63.34±2.11b
碱性磷酸酶(U/mL) 2.88±0.32a 4.58±0.18b
溶菌酶(U/mL) 2.31±0.32a 3.65±0.21b
表中数据表示为平均值±标准差，平均后不同上标表示显著差异(p<0.05)
(4)肠道组织检测
同时采集克氏原螯虾肠道组织，用固定液进行固定后，切片并HE染色后观察测量绒毛长度和肠壁厚度；分析肠道屏障相关指标(D-乳酸和黏液覆盖率)以及肠道黏膜HIF-1a(低氧诱导因子-1a)基因表达。同时利用气相色谱法测定克氏原螯虾肠道短链脂肪酸(SCFA)含量，包括乙酸、丙酸和丁酸。黏液覆盖率是通过比较黏液区域的像元与肠道切片的总像元面积来计算的。
表3
对照组 实验组
绒毛长度(μm) 253.52±78.20a 350.23±65.67b
肠壁厚度(μm) 28.92±9.34a 30.82±8.21b
隐窝深度(μm) 125.56±15.28a 121.36±19.82b
表中数据表示为平均值±标准差，平均后不同上标表示显著差异(p<0.05)
表3示出了实验组和对照组克氏原螯虾绒毛长度、肠壁厚度和隐窝深度结果。由表3可知，实验组克氏原螯虾绒毛长度和肠壁厚度都显著高于对照组，隐窝深度显著低于对照组(p<0.05)，这说明摄食添加益生丁酸梭菌、嗜酸乳杆菌和益生元果寡糖、菊粉的复合克氏原螯虾饲料的克氏原螯虾的饲料吸收能力增强，肠道屏障功能良好，正常的黏膜形态和屏障功能可以保护肠道免受外界环境的侵害，维持克氏原螯虾健康状况，预防五月瘟的发生。
表4
对照组 实验组
黏液覆盖率(％) 0.013±0.004a 0.064±0.009b
D-乳酸(nmol/ml) 3.47±1.12b 1.89±0.76a
HIF-1a 4.36±1.12a 12.67±0.93b
表中数据表示为平均值±标准差，平均后不同上标表示显著差异(p<0.05)
表4示出了实验组和对照组克氏原螯虾肠道屏障功能相关指标以及HIF-1a表达量结果。由表4可知，在实验组中的黏液覆盖率显著高于对照组，D-乳酸的含量在实验组显著低于对照组。黏液覆盖率在反映了肠道黏膜屏障功能，另外在肠道屏障功能受损时，D-乳酸含量会升高，这说明实验组肠道屏障功能基本良好。另外缺氧诱导因子HIF-1a基因表达量在实验组中显著高于对照组。HIF-1a表达提高，可提升克氏原螯虾耐低氧的能力，提高免疫力，提高抗病能力。这说明摄食添加益生丁酸梭菌、嗜酸乳杆菌和益生元果寡糖、菊粉的复合克氏原螯虾饲料可有效避免肠道屏障功能受损，改善肠道健康，增强其免疫能力，从而预防五月瘟的发生。
表5
对照组 实验组
乙酸(mg/g) 6.98±0.76a 17.88±0.48b
丙酸(mg/g) 0.72±0.12a 1.12±0.09b
丁酸(mg/g) 2.2±0.18a 5.24±0.10b
表中数据表示为平均值±标准差，平均后不同上标表示显著差异(p<0.05)
表5示出了实验组和对照组克氏原螯虾肠道短链脂肪酸(SCFA)的含量结果。由表5可知，实验组克氏原螯虾肠道短链脂肪酸(乙酸、丙酸和丁酸)的含量显著高于对照组。短链脂肪酸可以抑制一些病原菌的生长，改善肠道健康。另外，短链脂肪酸是肠黏膜细胞的主要能量来源，可促进肠黏膜修复及其功能恢复，对肠道屏障功能具有重要作用，并能抑制炎症细胞因子的形成，起到抗炎作用，在维持肠道菌群的稳态及肠道上皮细胞完整性发挥着重要作用。这说明摄食添加益生丁酸梭菌、嗜酸乳杆菌和益生素的复合克氏原螯虾饲料可有效改善肠道健康，防止肠道屏障功能受损，抑制肠道炎症发生的功能。
(5)死亡率及免疫保护检测
试验结束后，采用浓度为107的嗜水气单胞菌对克氏原螯虾进行攻毒，每尾克氏原螯虾尾部部注射0.2ml。观察五月瘟期间和嗜水气单胞菌攻毒试验各组一周内的死亡率。
表6示出了五月瘟期间克氏原螯虾死亡率。由表6可知，实验组克氏原螯虾死亡率显著高于对照组，说明实验饲料能够降低克氏原螯虾的死亡率。
表6
对照组 实验组
死亡率(％) 9.6±0.7b 3.2±0.5a
表中数据表示为平均值±标准差，平均后不同上标表示显著差异(p<0.05)
表7示出了嗜水气单胞菌攻毒的克氏原螯虾死亡率结果。由表7可知，对照组克氏原螯虾在攻毒1d后出现小批量的死亡(9％)。在攻毒3天后，对照组克氏原螯虾死亡率明显上升(62％)，而实验组克氏原螯虾死亡率也达到22％。在攻毒7天后，对照组克氏原螯虾死亡率达到100％，实验组在攻毒7天后，死亡率达到36％。复合饲料的免疫保护效果达到64％，这说明复合克氏原螯虾饲料可有效增加克氏原螯虾对病菌的抵抗力，利于克氏原螯虾饲养过程中对疾病的控制。
表7
时间/d 对照组％ 实验组％
1 9 0
3 62 22
7 100 36
(7)克氏原螯虾肠道微生物分析
对实验组和对照组克氏原螯虾肠道微生物组成分析，结果如图1和2所示。
由图1可知，看出实验组和对照组的克氏原螯虾肠道微生物组成是有明显不同的。从门水平可以看出对照组变形菌门(Proteobacteria)的相对丰度占比最高，在80％左右，而在实验组变形菌门的相对丰度有明显的降低，柔膜菌门(Tenericutes)的相对丰度明显升高。而变形菌门中包括许多种致病菌，实验组中变形菌门的丰度下降很可能与病原菌的丰度下降有关。
由图2可知对照组中柠檬酸杆菌属(Citrobacter)的相对丰度最高，而柠檬酸杆菌属的某些种可对克氏原螯虾致病，造成虾的败血症等。从实验组中可以看出柔膜菌(Mollicutes(UG))的相对丰度升高，柠檬酸杆菌属的相对丰度下降。说明摄食添加益生丁酸梭菌、嗜酸乳杆菌和益生素的克氏原螯虾饲料可有效通过改变克氏原螯虾肠道微生物组成改善肠道健康。
(8)克氏原螯虾肠道微生物多样性分析
对实验组和对照组克氏原螯虾肠道微生物组成分析，结果如图3、4、5所示。
如图3所示，实验组微生物alpha多样性显著高于对照组，这说明摄食添加益生丁酸梭菌和嗜酸乳杆菌克氏原螯虾饲料可能更有利于肠道微生物的稳定性，另外微生物alpha多样性升高可能更有利于抵抗病原体的入侵。如图4所示，从基于Unifrac加权距离的PCoA图中可以看出实验组和对照组的beta有明显的差异。由此说明，摄食复合克氏原螯虾饲料可能更有利于改善肠道健康，更有利于肠道微生物的稳定性。
进一步对两组克氏原螯虾肠道微生物的水产养殖中的机会致病菌进行筛选，得到9种机会致病菌，并对其相对丰度进行分析。如图5所示，对照组机会致病菌的丰度较高，而实验组肠道机会致病菌丰度明显下降。这进一步说明了摄食添加益生丁酸梭菌和嗜酸乳杆菌克氏原螯虾饲料可降低其肠道机会致病菌的丰度，改善肠道健康，从而降低克氏原螯虾发病率，预防五月瘟的发生。
以上所述，仅为本申请较佳的具体实施方式，但本申请的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本申请揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本申请的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种复合克氏原螯虾饲料，其包括：
基础组分，所述基础组分以重量份数计包括30～50份鱼粉、10～20份豆粕、10～20份小麦粉、1～2份α-淀粉、4～6份鱼油、0.1～0.5份复合维生素、0.2～0.7份复合矿物盐；
益生菌组分，所述益生菌组分以所述复合克氏原螯虾饲料总重量计，包括不低于1.0×106CFU每重量份的丁酸梭菌，不低于1.0×106CFU每重量份的嗜酸乳杆菌。
2.根据权利要求1所述的复合克氏原螯虾饲料，可选地，所述基础组分以重量份数计包括40～50份鱼粉、13～17份豆粕、15～18份小麦粉、1.5～2份α-淀粉、4～5份鱼油、0.2～0.4份复合维生素、0.3～0.6份复合矿物盐；
可选地，所述基础组分以重量份数计包括45份鱼粉、15份豆粕、16.7份小麦粉、1.8份α-淀粉、4.5份鱼油、0.3份复合维生素、0.5份复合矿物盐。
3.根据权利要求1或2所述的复合克氏原螯虾饲料，所述复合维生素以重量份数计，包括2～5份维生素B1、3～7份维生素B2、15～25份核黄素、8～15份烟酸、8～15份维生素B6、0.2～0.6份叶酸、80～120份肌醇、0.1～0.3份维生素A、0.8～1.5份维生素K3、12～18份维生素H和700～1000份麦麸。
4.根据权利要求3所述的复合克氏原螯虾饲料，可选地，所述复合维生素以重量份数计，包括2～4份维生素B1、4～6份维生素B2、18～22份核黄素、8～12份烟酸、8～12份维生素B6、0.3～0.5份叶酸、90～110份肌醇、0.15～0.25份维生素A、0.8～1.2份维生素K3、14～16份维生素H和800～900份麦麸；
可选地，所述复合维生素以重量份数计，包括3份维生素B1、5份维生素B2、20份核黄素、10份烟酸、10份维生素B6、0.4份叶酸、100份肌醇、0.2份维生素A、1份维生素K3、15份维生素H和835.4份麦麸。
5.根据权利要求1所述的复合克氏原螯虾饲料，可选地，所述复合矿物盐以重量份数计，包括10～20份柠檬酸铁、30～70份硫酸镁、0.2～0.5份硫酸铝钾、0.4～0.8份碘酸钙、0.2～0.6份硫酸铜、1.0～2.0份硫酸锰、0.05～0.15份六水氯化钴、1.5～2.5份七水硫酸锌、800～1000份氯化钠。
6.根据权利要求1所述的复合克氏原螯虾饲料，可选地，所述复合矿物盐以重量份数计，包括13～17份柠檬酸铁、40～60份硫酸镁、0.3～0.5份硫酸铝钾、0.5～0.7份碘酸钙、0.3～0.5份硫酸铜、1.3～1.6份硫酸锰、0.08～0.12份六水氯化钴、1.8～2.2份七水硫酸锌、900～1000份氯化钠；
可选地，所述复合矿物盐以重量份数计，包括15份柠檬酸铁、50份硫酸镁、0.4份硫酸铝钾、0.6份碘酸钙、0.4份硫酸铜、1.5份硫酸锰、0.1份六水氯化钴、2份七水硫酸锌、930份氯化钠。
7.根据权利要求1所述的复合克氏原螯虾饲料，可选地，以所述复合克氏原螯虾饲料总重量计，还包括不低于2‰的果寡糖和不低于2‰的菊粉；
可选地，所述复合克氏原螯虾饲料以其总重量计，还包括不低于3‰的果寡糖和不低于3‰的菊粉。
8.一种如权利要求1～7任一所述的复合克氏原螯虾饲料的制备方法，包括：
将配方量的所述基础组分均匀混合后，混入所述益生菌组分，充分混匀后，制粒，烘干。
9.一种克氏原螯虾的饲喂方法，包括将如权利要求1～7任一所述的复合克氏原螯虾饲料每日定时投喂2次(9：00和17：00)，日投喂量为克氏原螯虾平均体重的2～3％。
10.权利要求1～7任一所述的复合克氏原螯虾饲料在如下之一中的应用，所述应用选自：
预防克氏原螯虾发生五月瘟；
降低克氏原螯虾发生五月瘟疫的死亡率；
改善克氏原螯虾的养殖池水质；
调节克氏原螯虾肠道健康；
抑制克氏原螯虾肠道病原菌的生长；
减少克氏原螯虾肠道炎症的发生；
提高克氏原螯虾耐受低氧能力。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN117243162A (zh) * 2023-09-13 2023-12-19 渤海水产科技(滨州)有限公司 一种适合高盐度海水养殖对虾的方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101791062A (zh) * 2010-01-20 2010-08-04 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心 一种能提高克氏原螯虾免疫力和产量的饲料及其生产方法
CN111480748A (zh) * 2020-04-15 2020-08-04 湖北华扬科技发展有限公司 一种可提高克氏原螯虾抗病力的生物饲料
CN112021471A (zh) * 2020-08-07 2020-12-04 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 一种功能性小龙虾饲料及其制备方法和应用
CN114903128A (zh) * 2022-05-11 2022-08-16 湖南文和友乔口小龙虾养殖有限公司 一种小龙虾复合饲料及其制备方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101791062A (zh) * 2010-01-20 2010-08-04 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心 一种能提高克氏原螯虾免疫力和产量的饲料及其生产方法
CN111480748A (zh) * 2020-04-15 2020-08-04 湖北华扬科技发展有限公司 一种可提高克氏原螯虾抗病力的生物饲料
CN112021471A (zh) * 2020-08-07 2020-12-04 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 一种功能性小龙虾饲料及其制备方法和应用
CN114903128A (zh) * 2022-05-11 2022-08-16 湖南文和友乔口小龙虾养殖有限公司 一种小龙虾复合饲料及其制备方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
潘春梅主编: "《微生态制剂生产及应用》", vol. 1, 中国农业大学出版社, pages: 89 - 98 *
陈孝合: "稻田养虾"五月瘟"的形成原因及防控措施", 《渔业致富指南》, no. 16, pages 52 - 54 *
陈正洪: "当前小龙虾养殖管理技术要点", 《渔业致富指南》, vol. 1, no. 11, pages 45 - 48 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN117243162A (zh) * 2023-09-13 2023-12-19 渤海水产科技(滨州)有限公司 一种适合高盐度海水养殖对虾的方法

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