CN116602214A - 一种甘薯植株再生的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种甘薯植株再生的方法,涉及植物组织培养技术领域。包括:将甘薯的茎尖生长点置于胚性愈伤诱导培养基上进行胚性愈伤诱导,得到胚性愈伤组织;将胚性愈伤组织置于体细胞胚诱导培养基上进行体细胞胚诱导,得到体细胞胚;将体细胞胚置于成苗培养基上进行成苗培养,得到甘薯植株。采用本发明提供的方法在60~72d就能够得到甘薯再生植株,相交于现有技术缩短了获取时间,而且植株再生率高。
Description
技术领域
本发明涉及植物组织培养技术领域,特别是涉及一种甘薯植株再生的方法。
背景技术
甘薯属旋花科,甘薯属,甘薯种,为蔓生性草本植物,甘薯植株分为根、茎、叶、花、果实、种子等部分。甘薯种类繁多,例如徐紫薯8号,紫皮深紫肉,高产稳产;抗旱性和耐盐性好;花青素含量高,可以预防癌症,改善心血管疾病类,预防肠道疾病,抗衰老等;蒸薯食味好;开发用途广,茎叶可食用、茶用和作为绿化用苗,薯块宜鲜食或加工紫薯全粉、薯泥、紫薯粉丝、紫薯酒和紫薯醋等。我国是世界第一甘薯生产大国,年种植面积3.69×106hm2,占世界种植总面积的45.06%,年总产8.52×107t,占世界总产量的77.38%(FAO,2008)。因此,我国甘薯产业的发展对世界甘薯生产起着举足轻重的作用。
中国专利CN201110146697.X公开了一种甘薯胚性愈伤长期继代增殖的组培方法,该专利利用茎尖分生组织培养过程中诱导形成的胚性愈伤进行形态筛选继代,达到长期保存和扩增胚性愈伤的目的,具体为在茎尖分生组织脱分化诱导出愈伤后,筛选可保持胚性的结构致密、近球形的胚性愈伤,移入含有1~3mg/L 2,4-D的MS固体培养基中培养45d后,待胚性愈伤长至5~8mm,选择颗粒致密的心形和球形胚性愈伤部分,再重复上述方法培养,最后将增殖的胚性愈伤组织转移到含1.0mg/LABA的MS固体培养基中光照下培养3~4周,体细胞胚发育并成长为小植株。该方法试验周期长,因此需要短时间内获得甘薯植株的方法。
发明内容
为了解决上述问题,本发明提供了一种甘薯植株再生的方法,采用本发明提供的方法缩短了甘薯植株的获取时间。
为了实现上述目的,本发明提供如下技术方案:
本发明提供了一种甘薯植株再生的方法,包括以下步骤:
1)将甘薯的茎尖生长点置于胚性愈伤诱导培养基上进行胚性愈伤诱导,得到胚性愈伤组织;
所述胚性愈伤诱导培养基的组分包括:MS培养基+5~7g/L植物凝胶+25~30g/L蔗糖;
2)将所述步骤1)得到的胚性愈伤组织置于体细胞胚诱导培养基上进行体细胞胚诱导,得到体细胞胚;
所述体细胞胚诱导培养基的组分包括:MS培养基+2~3g/L植物凝胶+0.1~0.3mg/L脱落酸+25~30g/L蔗糖;
3)将所述步骤2)得到的体细胞胚置于成苗培养基上进行成苗培养,得到甘薯植株;
所述成苗培养基的组分包括:MS培养基+0.5~1.5g/L植物凝胶+萘乙酸0.1~0.2mg/L。
优选的,所述步骤1)茎尖生长点的获取包括:选取生长健壮的甘薯植株,在顶端剪取1~1.5cm茎尖,剥取得到茎尖生长点。
优选的,所述茎尖依次经乙醇溶液消毒、氯化汞溶液消毒和无菌水冲洗后,再剥取得到茎尖生长点。
优选的,所述乙醇溶液的体积百分含量为75%,所述乙醇溶液的消毒时间为30~60s;
所述氯化汞溶液的质量百分含量为0.1%,所述氯化汞溶液的消毒时间为3~4min。
优选的,所述甘薯的品种包括徐紫薯8号、金玉、鲁薯1、鲁薯3、红菊花、湛江白、心香、金山57、宁薯192和徐薯18中的一种或多种。
优选的,所述步骤1)胚性愈伤诱导的条件包括:时间为20~25d,温度为25~30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2000~2400Lux。
优选的,所述步骤2)体细胞胚诱导的条件包括:时间为10~12d,温度为25~30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2000~2400Lux。
优选的,所述步骤3)成苗培养的条件包括:时间为30~35d,温度为25~30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2000~2400Lux。
本发明的有益效果为:
采用本发明提供的方法在60~72d就能够得到甘薯再生植株,相交于现有技术缩短了获取时间,而且植株再生率高。
具体实施方式
本发明提供了一种甘薯植株再生的方法,包括以下步骤:
1)将甘薯的茎尖生长点置于胚性愈伤诱导培养基上进行胚性愈伤诱导,得到胚性愈伤组织;
所述胚性愈伤诱导培养基的组分包括:MS培养基+5~7g/L植物凝胶+25~30g/L蔗糖;
2)将所述步骤1)得到的胚性愈伤组织置于体细胞胚诱导培养基上进行体细胞胚诱导,得到体细胞胚;
所述体细胞胚诱导培养基的组分包括:MS培养基+2~3g/L植物凝胶+0.1~0.3mg/L脱落酸+25~30g/L蔗糖;
3)将所述步骤2)得到的体细胞胚置于成苗培养基上进行成苗培养,得到甘薯植株;
所述成苗培养基的组分包括:MS培养基+0.5~1.5g/L植物凝胶+萘乙酸0.1~0.2mg/L。
本发明将甘薯的茎尖生长点置于胚性愈伤诱导培养基上进行胚性愈伤诱导,得到胚性愈伤组织;所述胚性愈伤诱导培养基的组分包括:MS培养基+5~7g/L植物凝胶+25~30g/L蔗糖。
在本发明中,所述茎尖生长点的获取优选包括:选取生长健壮的甘薯植株,在顶端剪取1~1.5cm茎尖,剥取得到茎尖生长点。在本发明中,所述茎尖优选依次经乙醇溶液消毒、氯化汞溶液消毒和无菌水冲洗后,再剥取得到茎尖生长点。在本发明中,所述乙醇溶液的体积百分含量优选为75%,所述乙醇溶液的消毒时间优选为30~60s。在本发明中,所述氯化汞溶液的质量百分含量优选为0.1%,所述氯化汞溶液的消毒时间优选为3~4min。在本发明中,所述甘薯的品种优选包括徐紫薯8号、金玉、鲁薯1、鲁薯3、红菊花、湛江白、心香、金山57、宁薯192和徐薯18中的一种或多种。本发明对所述植物凝胶(Phytagel)的来源没有特殊限定,采用常规市售即可。在奔本发明中,所述胚性愈伤诱导的条件优选包括:时间为20~25d,温度为25~30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2000~2400Lux。
本发明将得到的胚性愈伤组织置于体细胞胚诱导培养基上进行体细胞胚诱导,得到体细胞胚;所述体细胞胚诱导培养基的组分包括:MS培养基+2~3g/L植物凝胶+0.1~0.3mg/L脱落酸+25~30g/L蔗糖。在本发明中,所述体细胞胚诱导的条件优选包括:时间为10~12d,温度为25~30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2000~2400Lux。
本发明将得到的体细胞胚置于成苗培养基上进行成苗培养,得到甘薯植株;所述成苗培养基的组分包括:MS培养基+0.5~1.5g/L植物凝胶+萘乙酸0.1~0.2mg/L。在本发明中,所述成苗培养的条件包括:时间为30~35d,温度为25~30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2000~2400Lux。
为了进一步说明本发明,下面结合实施例对本发明进行详细地描述,但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
一种甘薯植株再生的方法,步骤:
1)将甘薯的茎尖生长点置于胚性愈伤诱导培养基上进行胚性愈伤诱导,得到胚性愈伤组织;
胚性愈伤诱导培养基的组分为:MS培养基+5g/L植物凝胶+30g/L蔗糖;
茎尖生长点的获取:选取生长健壮的甘薯植株,在顶端剪取1~1.5cm茎尖,茎尖依次经75%乙醇溶液消毒30s、0.1%氯化汞溶液消毒3min和无菌水冲洗干净后,剥取得到茎尖生长点;茎尖的数量为20个,3个重复,甘薯得到品种为紫薯8号;
胚性愈伤诱导的条件为:时间为20d,温度为25℃,光照时间为15h/d,光照强度为2400Lux;
2)将步骤1)得到的胚性愈伤组织置于体细胞胚诱导培养基上进行体细胞胚诱导,得到体细胞胚;
体细胞胚诱导培养基的组分为:MS培养基+2g/L植物凝胶+0.3mg/L脱落酸+25g/L蔗糖;
体细胞胚诱导的条件为:时间为12d,温度为25℃,光照时间为15h/d,光照强度为2400Lux;
3)将步骤2)得到的体细胞胚置于成苗培养基上进行成苗培养,得到甘薯植株;
成苗培养基的组分包括:MS培养基+0.5g/L植物凝胶+萘乙酸0.2mg/L;
成苗培养的条件为:时间为35d,温度为30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2400Lux。
统计植株再生率,结果见表1。
实施例2
一种甘薯植株再生的方法,步骤:
1)将甘薯的茎尖生长点置于胚性愈伤诱导培养基上进行胚性愈伤诱导,得到胚性愈伤组织;
胚性愈伤诱导培养基的组分为:MS培养基+6g/L植物凝胶+25g/L蔗糖;
茎尖生长点的获取:选取生长健壮的甘薯植株,在顶端剪取1~1.5cm茎尖,茎尖依次经75%乙醇溶液消毒45s、0.1%氯化汞溶液消毒4min和无菌水冲洗干净后,剥取得到茎尖生长点;茎尖的数量为20个,3个重复,甘薯得到品种为金玉;
胚性愈伤诱导的条件为:时间为25d,温度为26℃,光照时间为15h/d,光照强度为2200Lux;
2)将步骤1)得到的胚性愈伤组织置于体细胞胚诱导培养基上进行体细胞胚诱导,得到体细胞胚;
体细胞胚诱导培养基的组分为:MS培养基+3g/L植物凝胶+0.2mg/L脱落酸+30g/L蔗糖;
体细胞胚诱导的条件为:时间为10d,温度为28℃,光照时间为15h/d,光照强度为2200Lux;
3)将步骤2)得到的体细胞胚置于成苗培养基上进行成苗培养,得到甘薯植株;
成苗培养基的组分包括:MS培养基+1.5g/L植物凝胶+萘乙酸0.1mg/L;
成苗培养的条件为:时间为32d,温度为30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2200Lux。
统计植株再生率,结果见表1。
实施例3
一种甘薯植株再生的方法,步骤:
1)将甘薯的茎尖生长点置于胚性愈伤诱导培养基上进行胚性愈伤诱导,得到胚性愈伤组织;
胚性愈伤诱导培养基的组分为:MS培养基+7g/L植物凝胶+25g/L蔗糖;
茎尖生长点的获取:选取生长健壮的甘薯植株,在顶端剪取1~1.5cm茎尖,茎尖依次经75%乙醇溶液消毒30s、0.1%氯化汞溶液消毒3min和无菌水冲洗干净后,剥取得到茎尖生长点;茎尖的数量为20个,3个重复,甘薯得到品种为鲁薯1;
胚性愈伤诱导的条件为:时间为22d,温度为25℃,光照时间为15h/d,光照强度为2000Lux;
2)将步骤1)得到的胚性愈伤组织置于体细胞胚诱导培养基上进行体细胞胚诱导,得到体细胞胚;
体细胞胚诱导培养基的组分为:MS培养基+2.5g/L植物凝胶+0.2mg/L脱落酸+25g/L蔗糖;
体细胞胚诱导的条件为:时间为10d,温度为25℃,光照时间为15h/d,光照强度为2000Lux;
3)将步骤2)得到的体细胞胚置于成苗培养基上进行成苗培养,得到甘薯植株;
成苗培养基的组分包括:MS培养基+0.8g/L植物凝胶+萘乙酸0.15mg/L;
成苗培养的条件为:时间为32d,温度为30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2000Lux。
统计植株再生率,结果见表1。
实施例4
一种甘薯植株再生的方法,步骤:
1)将甘薯的茎尖生长点置于胚性愈伤诱导培养基上进行胚性愈伤诱导,得到胚性愈伤组织;
胚性愈伤诱导培养基的组分为:MS培养基+5.5g/L植物凝胶+30g/L蔗糖;
茎尖生长点的获取:选取生长健壮的甘薯植株,在顶端剪取1~1.5cm茎尖,茎尖依次经75%乙醇溶液消毒30s、0.1%氯化汞溶液消毒3min和无菌水冲洗干净后,剥取得到茎尖生长点;茎尖的数量为20个,3个重复,甘薯得到品种为鲁薯3;
胚性愈伤诱导的条件为:时间为23d,温度为25℃,光照时间为15h/d,光照强度为2300Lux;
2)将步骤1)得到的胚性愈伤组织置于体细胞胚诱导培养基上进行体细胞胚诱导,得到体细胞胚;
体细胞胚诱导培养基的组分为:MS培养基+2.2g/L植物凝胶+0.15mg/L脱落酸+28g/L蔗糖;
体细胞胚诱导的条件为:时间为11d,温度为25℃,光照时间为15h/d,光照强度为2300Lux;
3)将步骤2)得到的体细胞胚置于成苗培养基上进行成苗培养,得到甘薯植株;
成苗培养基的组分包括:MS培养基+1.4g/L植物凝胶+萘乙酸0.12mg/L;
成苗培养的条件为:时间为32d,温度为30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2300Lux。
统计植株再生率,结果见表1。
实施例5
一种甘薯植株再生的方法,步骤:
1)将甘薯的茎尖生长点置于胚性愈伤诱导培养基上进行胚性愈伤诱导,得到胚性愈伤组织;
胚性愈伤诱导培养基的组分为:MS培养基+6.5g/L植物凝胶+30g/L蔗糖;
茎尖生长点的获取:选取生长健壮的甘薯植株,在顶端剪取1~1.5cm茎尖,茎尖依次经75%乙醇溶液消毒30s、0.1%氯化汞溶液消毒3min和无菌水冲洗干净后,剥取得到茎尖生长点;茎尖的数量为20个,3个重复,甘薯得到品种为红菊花;
胚性愈伤诱导的条件为:时间为22d,温度为25℃,光照时间为15h/d,光照强度为2250Lux;
2)将步骤1)得到的胚性愈伤组织置于体细胞胚诱导培养基上进行体细胞胚诱导,得到体细胞胚;
体细胞胚诱导培养基的组分为:MS培养基+2.6g/L植物凝胶+0.25mg/L脱落酸+26g/L蔗糖;
体细胞胚诱导的条件为:时间为12d,温度为25℃,光照时间为15h/d,光照强度为2250Lux;
3)将步骤2)得到的体细胞胚置于成苗培养基上进行成苗培养,得到甘薯植株;
成苗培养基的组分包括:MS培养基+0.8g/L植物凝胶+萘乙酸0.14mg/L;
成苗培养的条件为:时间为34d,温度为30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2250Lux。
统计植株再生率,结果见表1。
实施例6
一种甘薯植株再生的方法,步骤:
1)将甘薯的茎尖生长点置于胚性愈伤诱导培养基上进行胚性愈伤诱导,得到胚性愈伤组织;
胚性愈伤诱导培养基的组分为:MS培养基+5.4g/L植物凝胶+25g/L蔗糖;
茎尖生长点的获取:选取生长健壮的甘薯植株,在顶端剪取1~1.5cm茎尖,茎尖依次经75%乙醇溶液消毒30s、0.1%氯化汞溶液消毒3min和无菌水冲洗干净后,剥取得到茎尖生长点;茎尖的数量为20个,3个重复,甘薯得到品种为湛江白;
胚性愈伤诱导的条件为:时间为23d,温度为25℃,光照时间为15h/d,光照强度为2350Lux;
2)将步骤1)得到的胚性愈伤组织置于体细胞胚诱导培养基上进行体细胞胚诱导,得到体细胞胚;
体细胞胚诱导培养基的组分为:MS培养基+2.6g/L植物凝胶+0.25mg/L脱落酸+30g/L蔗糖;
体细胞胚诱导的条件为:时间为10d,温度为25℃,光照时间为15h/d,光照强度为2350Lux;
3)将步骤2)得到的体细胞胚置于成苗培养基上进行成苗培养,得到甘薯植株;
成苗培养基的组分包括:MS培养基+1.2g/L植物凝胶+萘乙酸0.16mg/L;
成苗培养的条件为:时间为32d,温度为30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2350Lux。
统计植株再生率,结果见表1。
实施例7
一种甘薯植株再生的方法,步骤:
1)将甘薯的茎尖生长点置于胚性愈伤诱导培养基上进行胚性愈伤诱导,得到胚性愈伤组织;
胚性愈伤诱导培养基的组分为:MS培养基+5g/L植物凝胶+25g/L蔗糖;
茎尖生长点的获取:选取生长健壮的甘薯植株,在顶端剪取1~1.5cm茎尖,茎尖依次经75%乙醇溶液消毒30s、0.1%氯化汞溶液消毒3min和无菌水冲洗干净后,剥取得到茎尖生长点;茎尖的数量为20个,3个重复,甘薯得到品种为心香;
胚性愈伤诱导的条件为:时间为24d,温度为25℃,光照时间为15h/d,光照强度为2400Lux;
2)将步骤1)得到的胚性愈伤组织置于体细胞胚诱导培养基上进行体细胞胚诱导,得到体细胞胚;
体细胞胚诱导培养基的组分为:MS培养基+2.4g/L植物凝胶+0.16mg/L脱落酸+30g/L蔗糖;
体细胞胚诱导的条件为:时间为12d,温度为25℃,光照时间为15h/d,光照强度为2400Lux;
3)将步骤2)得到的体细胞胚置于成苗培养基上进行成苗培养,得到甘薯植株;
成苗培养基的组分包括:MS培养基+0.9g/L植物凝胶+萘乙酸0.1mg/L;
成苗培养的条件为:时间为32d,温度为30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2400Lux。
统计植株再生率,结果见表1。
实施例8
一种甘薯植株再生的方法,步骤:
1)将甘薯的茎尖生长点置于胚性愈伤诱导培养基上进行胚性愈伤诱导,得到胚性愈伤组织;
胚性愈伤诱导培养基的组分为:MS培养基+6.4g/L植物凝胶+30g/L蔗糖;
茎尖生长点的获取:选取生长健壮的甘薯植株,在顶端剪取1~1.5cm茎尖,茎尖依次经75%乙醇溶液消毒30s、0.1%氯化汞溶液消毒3min和无菌水冲洗干净后,剥取得到茎尖生长点;茎尖的数量为20个,3个重复,甘薯得到品种为金山57;
胚性愈伤诱导的条件为:时间为20d,温度为30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2000Lux;
2)将步骤1)得到的胚性愈伤组织置于体细胞胚诱导培养基上进行体细胞胚诱导,得到体细胞胚;
体细胞胚诱导培养基的组分为:MS培养基+3g/L植物凝胶+0.3mg/L脱落酸+25g/L蔗糖;
体细胞胚诱导的条件为:时间为10d,温度为30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2400Lux;
3)将步骤2)得到的体细胞胚置于成苗培养基上进行成苗培养,得到甘薯植株;
成苗培养基的组分包括:MS培养基+0.8g/L植物凝胶+萘乙酸0.2mg/L;
成苗培养的条件为:时间为35d,温度为30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2300Lux。
统计植株再生率,结果见表1。
实施例9
一种甘薯植株再生的方法,步骤:
1)将甘薯的茎尖生长点置于胚性愈伤诱导培养基上进行胚性愈伤诱导,得到胚性愈伤组织;
胚性愈伤诱导培养基的组分为:MS培养基+5.5g/L植物凝胶+30g/L蔗糖;
茎尖生长点的获取:选取生长健壮的甘薯植株,在顶端剪取1~1.5cm茎尖,茎尖依次经75%乙醇溶液消毒30s、0.1%氯化汞溶液消毒3min和无菌水冲洗干净后,剥取得到茎尖生长点;茎尖的数量为20个,3个重复,甘薯得到品种为宁薯192;
胚性愈伤诱导的条件为:时间为20d,温度为28℃,光照时间为15h/d,光照强度为2400Lux;
2)将步骤1)得到的胚性愈伤组织置于体细胞胚诱导培养基上进行体细胞胚诱导,得到体细胞胚;
体细胞胚诱导培养基的组分为:MS培养基+3g/L植物凝胶+0.2mg/L脱落酸+25g/L蔗糖;
体细胞胚诱导的条件为:时间为12d,温度为25℃,光照时间为15h/d,光照强度为2350Lux;
3)将步骤2)得到的体细胞胚置于成苗培养基上进行成苗培养,得到甘薯植株;
成苗培养基的组分包括:MS培养基+1.5g/L植物凝胶+萘乙酸0.15mg/L;
成苗培养的条件为:时间为35d,温度为30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2200Lux。
统计植株再生率,结果见表1。
实施例10
一种甘薯植株再生的方法,步骤:
1)将甘薯的茎尖生长点置于胚性愈伤诱导培养基上进行胚性愈伤诱导,得到胚性愈伤组织;
胚性愈伤诱导培养基的组分为:MS培养基+7g/L植物凝胶+30g/L蔗糖;
茎尖生长点的获取:选取生长健壮的甘薯植株,在顶端剪取1~1.5cm茎尖,茎尖依次经75%乙醇溶液消毒30s、0.1%氯化汞溶液消毒3min和无菌水冲洗干净后,剥取得到茎尖生长点;茎尖的数量为20个,3个重复,甘薯得到品种为徐薯18;
胚性愈伤诱导的条件为:时间为20d,温度为26℃,光照时间为15h/d,光照强度为2000Lux;
2)将步骤1)得到的胚性愈伤组织置于体细胞胚诱导培养基上进行体细胞胚诱导,得到体细胞胚;
体细胞胚诱导培养基的组分为:MS培养基+2.5g/L植物凝胶+0.1mg/L脱落酸+30g/L蔗糖;
体细胞胚诱导的条件为:时间为10d,温度为25℃,光照时间为15h/d,光照强度为2400Lux;
3)将步骤2)得到的体细胞胚置于成苗培养基上进行成苗培养,得到甘薯植株;
成苗培养基的组分包括:MS培养基+0.5g/L植物凝胶+萘乙酸0.2mg/L;
成苗培养的条件为:时间为30d,温度为30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2400Lux。
统计植株再生率,结果见表1。
表1甘薯再生植株的再生率结果
植株再生率(%) | |
实施例1 | 92.4 |
实施例2 | 75.5 |
实施例3 | 87.1 |
实施例4 | 63.8 |
实施例5 | 90.4 |
实施例6 | 85.6 |
实施例7 | 75.1 |
实施例8 | 66.9 |
实施例9 | 88.3 |
实施例10 | 84.2 |
由以上实施例可以得出,采用本发明提供的方法在60~72d就能够得到甘薯再生植株,相交于现有技术缩短了获取时间,而且植株再生率高。
尽管上述实施例对本发明做出了详尽的描述,但它仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部实施例,人们还可以根据本实施例在不经创造性前提下获得其他实施例,这些实施例都属于本发明保护范围。
Claims (8)
1.一种甘薯植株再生的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)将甘薯的茎尖生长点置于胚性愈伤诱导培养基上进行胚性愈伤诱导,得到胚性愈伤组织;
所述胚性愈伤诱导培养基的组分包括:MS培养基+5~7g/L植物凝胶+25~30g/L蔗糖;
2)将所述步骤1)得到的胚性愈伤组织置于体细胞胚诱导培养基上进行体细胞胚诱导,得到体细胞胚;
所述体细胞胚诱导培养基的组分包括:MS培养基+2~3g/L植物凝胶+0.1~0.3mg/L脱落酸+25~30g/L蔗糖;
3)将所述步骤2)得到的体细胞胚置于成苗培养基上进行成苗培养,得到甘薯植株;
所述成苗培养基的组分包括:MS培养基+0.5~1.5g/L植物凝胶+萘乙酸0.1~0.2mg/L。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤1)茎尖生长点的获取包括:选取生长健壮的甘薯植株,在顶端剪取1~1.5cm茎尖,剥取得到茎尖生长点。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述茎尖依次经乙醇溶液消毒、氯化汞溶液消毒和无菌水冲洗后,再剥取得到茎尖生长点。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述乙醇溶液的体积百分含量为75%,所述乙醇溶液的消毒时间为30~60s;
所述氯化汞溶液的质量百分含量为0.1%,所述氯化汞溶液的消毒时间为3~4min。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述甘薯的品种包括徐紫薯8号、金玉、鲁薯1、鲁薯3、红菊花、湛江白、心香、金山57、宁薯192和徐薯18中的一种或多种。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤1)胚性愈伤诱导的条件包括:时间为20~25d,温度为25~30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2000~2400Lux。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤2)体细胞胚诱导的条件包括:时间为10~12d,温度为25~30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2000~2400Lux。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤3)成苗培养的条件包括:时间为30~35d,温度为25~30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2000~2400Lux。
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