CN116602214A - 一种甘薯植株再生的方法 - Google Patents

一种甘薯植株再生的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN116602214A
CN116602214A CN202310738424.7A CN202310738424A CN116602214A CN 116602214 A CN116602214 A CN 116602214A CN 202310738424 A CN202310738424 A CN 202310738424A CN 116602214 A CN116602214 A CN 116602214A
Authority
CN
China
Prior art keywords
culture medium
embryogenic callus
sweet potato
induction
time
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202310738424.7A
Other languages
English (en)
Other versions
CN116602214B (zh
Inventor
冯顺洪
陈晓琼
陈嘉玲
吴春莲
张松鑫
方洁丽
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Puning Agricultural Science Research Institute
Original Assignee
Puning Agricultural Science Research Institute
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Puning Agricultural Science Research Institute filed Critical Puning Agricultural Science Research Institute
Priority to CN202310738424.7A priority Critical patent/CN116602214B/zh
Publication of CN116602214A publication Critical patent/CN116602214A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN116602214B publication Critical patent/CN116602214B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01HNEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • A01H4/005Methods for micropropagation; Vegetative plant propagation using cell or tissue culture techniques

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)

Abstract

本发明提供了一种甘薯植株再生的方法,涉及植物组织培养技术领域。包括:将甘薯的茎尖生长点置于胚性愈伤诱导培养基上进行胚性愈伤诱导,得到胚性愈伤组织;将胚性愈伤组织置于体细胞胚诱导培养基上进行体细胞胚诱导,得到体细胞胚;将体细胞胚置于成苗培养基上进行成苗培养,得到甘薯植株。采用本发明提供的方法在60~72d就能够得到甘薯再生植株,相交于现有技术缩短了获取时间,而且植株再生率高。

Description

一种甘薯植株再生的方法
技术领域
本发明涉及植物组织培养技术领域,特别是涉及一种甘薯植株再生的方法。
背景技术
甘薯属旋花科,甘薯属,甘薯种,为蔓生性草本植物,甘薯植株分为根、茎、叶、花、果实、种子等部分。甘薯种类繁多,例如徐紫薯8号,紫皮深紫肉,高产稳产;抗旱性和耐盐性好;花青素含量高,可以预防癌症,改善心血管疾病类,预防肠道疾病,抗衰老等;蒸薯食味好;开发用途广,茎叶可食用、茶用和作为绿化用苗,薯块宜鲜食或加工紫薯全粉、薯泥、紫薯粉丝、紫薯酒和紫薯醋等。我国是世界第一甘薯生产大国,年种植面积3.69×106hm2,占世界种植总面积的45.06%,年总产8.52×107t,占世界总产量的77.38%(FAO,2008)。因此,我国甘薯产业的发展对世界甘薯生产起着举足轻重的作用。
中国专利CN201110146697.X公开了一种甘薯胚性愈伤长期继代增殖的组培方法,该专利利用茎尖分生组织培养过程中诱导形成的胚性愈伤进行形态筛选继代,达到长期保存和扩增胚性愈伤的目的,具体为在茎尖分生组织脱分化诱导出愈伤后,筛选可保持胚性的结构致密、近球形的胚性愈伤,移入含有1~3mg/L 2,4-D的MS固体培养基中培养45d后,待胚性愈伤长至5~8mm,选择颗粒致密的心形和球形胚性愈伤部分,再重复上述方法培养,最后将增殖的胚性愈伤组织转移到含1.0mg/LABA的MS固体培养基中光照下培养3~4周,体细胞胚发育并成长为小植株。该方法试验周期长,因此需要短时间内获得甘薯植株的方法。
发明内容
为了解决上述问题,本发明提供了一种甘薯植株再生的方法,采用本发明提供的方法缩短了甘薯植株的获取时间。
为了实现上述目的,本发明提供如下技术方案:
本发明提供了一种甘薯植株再生的方法,包括以下步骤:
1)将甘薯的茎尖生长点置于胚性愈伤诱导培养基上进行胚性愈伤诱导,得到胚性愈伤组织;
所述胚性愈伤诱导培养基的组分包括:MS培养基+5~7g/L植物凝胶+25~30g/L蔗糖;
2)将所述步骤1)得到的胚性愈伤组织置于体细胞胚诱导培养基上进行体细胞胚诱导,得到体细胞胚;
所述体细胞胚诱导培养基的组分包括:MS培养基+2~3g/L植物凝胶+0.1~0.3mg/L脱落酸+25~30g/L蔗糖;
3)将所述步骤2)得到的体细胞胚置于成苗培养基上进行成苗培养,得到甘薯植株;
所述成苗培养基的组分包括:MS培养基+0.5~1.5g/L植物凝胶+萘乙酸0.1~0.2mg/L。
优选的,所述步骤1)茎尖生长点的获取包括:选取生长健壮的甘薯植株,在顶端剪取1~1.5cm茎尖,剥取得到茎尖生长点。
优选的,所述茎尖依次经乙醇溶液消毒、氯化汞溶液消毒和无菌水冲洗后,再剥取得到茎尖生长点。
优选的,所述乙醇溶液的体积百分含量为75%,所述乙醇溶液的消毒时间为30~60s;
所述氯化汞溶液的质量百分含量为0.1%,所述氯化汞溶液的消毒时间为3~4min。
优选的,所述甘薯的品种包括徐紫薯8号、金玉、鲁薯1、鲁薯3、红菊花、湛江白、心香、金山57、宁薯192和徐薯18中的一种或多种。
优选的,所述步骤1)胚性愈伤诱导的条件包括:时间为20~25d,温度为25~30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2000~2400Lux。
优选的,所述步骤2)体细胞胚诱导的条件包括:时间为10~12d,温度为25~30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2000~2400Lux。
优选的,所述步骤3)成苗培养的条件包括:时间为30~35d,温度为25~30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2000~2400Lux。
本发明的有益效果为:
采用本发明提供的方法在60~72d就能够得到甘薯再生植株,相交于现有技术缩短了获取时间,而且植株再生率高。
具体实施方式
本发明提供了一种甘薯植株再生的方法,包括以下步骤:
1)将甘薯的茎尖生长点置于胚性愈伤诱导培养基上进行胚性愈伤诱导,得到胚性愈伤组织;
所述胚性愈伤诱导培养基的组分包括:MS培养基+5~7g/L植物凝胶+25~30g/L蔗糖;
2)将所述步骤1)得到的胚性愈伤组织置于体细胞胚诱导培养基上进行体细胞胚诱导,得到体细胞胚;
所述体细胞胚诱导培养基的组分包括:MS培养基+2~3g/L植物凝胶+0.1~0.3mg/L脱落酸+25~30g/L蔗糖;
3)将所述步骤2)得到的体细胞胚置于成苗培养基上进行成苗培养,得到甘薯植株;
所述成苗培养基的组分包括:MS培养基+0.5~1.5g/L植物凝胶+萘乙酸0.1~0.2mg/L。
本发明将甘薯的茎尖生长点置于胚性愈伤诱导培养基上进行胚性愈伤诱导,得到胚性愈伤组织;所述胚性愈伤诱导培养基的组分包括:MS培养基+5~7g/L植物凝胶+25~30g/L蔗糖。
在本发明中,所述茎尖生长点的获取优选包括:选取生长健壮的甘薯植株,在顶端剪取1~1.5cm茎尖,剥取得到茎尖生长点。在本发明中,所述茎尖优选依次经乙醇溶液消毒、氯化汞溶液消毒和无菌水冲洗后,再剥取得到茎尖生长点。在本发明中,所述乙醇溶液的体积百分含量优选为75%,所述乙醇溶液的消毒时间优选为30~60s。在本发明中,所述氯化汞溶液的质量百分含量优选为0.1%,所述氯化汞溶液的消毒时间优选为3~4min。在本发明中,所述甘薯的品种优选包括徐紫薯8号、金玉、鲁薯1、鲁薯3、红菊花、湛江白、心香、金山57、宁薯192和徐薯18中的一种或多种。本发明对所述植物凝胶(Phytagel)的来源没有特殊限定,采用常规市售即可。在奔本发明中,所述胚性愈伤诱导的条件优选包括:时间为20~25d,温度为25~30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2000~2400Lux。
本发明将得到的胚性愈伤组织置于体细胞胚诱导培养基上进行体细胞胚诱导,得到体细胞胚;所述体细胞胚诱导培养基的组分包括:MS培养基+2~3g/L植物凝胶+0.1~0.3mg/L脱落酸+25~30g/L蔗糖。在本发明中,所述体细胞胚诱导的条件优选包括:时间为10~12d,温度为25~30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2000~2400Lux。
本发明将得到的体细胞胚置于成苗培养基上进行成苗培养,得到甘薯植株;所述成苗培养基的组分包括:MS培养基+0.5~1.5g/L植物凝胶+萘乙酸0.1~0.2mg/L。在本发明中,所述成苗培养的条件包括:时间为30~35d,温度为25~30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2000~2400Lux。
为了进一步说明本发明,下面结合实施例对本发明进行详细地描述,但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
一种甘薯植株再生的方法,步骤:
1)将甘薯的茎尖生长点置于胚性愈伤诱导培养基上进行胚性愈伤诱导,得到胚性愈伤组织;
胚性愈伤诱导培养基的组分为:MS培养基+5g/L植物凝胶+30g/L蔗糖;
茎尖生长点的获取:选取生长健壮的甘薯植株,在顶端剪取1~1.5cm茎尖,茎尖依次经75%乙醇溶液消毒30s、0.1%氯化汞溶液消毒3min和无菌水冲洗干净后,剥取得到茎尖生长点;茎尖的数量为20个,3个重复,甘薯得到品种为紫薯8号;
胚性愈伤诱导的条件为:时间为20d,温度为25℃,光照时间为15h/d,光照强度为2400Lux;
2)将步骤1)得到的胚性愈伤组织置于体细胞胚诱导培养基上进行体细胞胚诱导,得到体细胞胚;
体细胞胚诱导培养基的组分为:MS培养基+2g/L植物凝胶+0.3mg/L脱落酸+25g/L蔗糖;
体细胞胚诱导的条件为:时间为12d,温度为25℃,光照时间为15h/d,光照强度为2400Lux;
3)将步骤2)得到的体细胞胚置于成苗培养基上进行成苗培养,得到甘薯植株;
成苗培养基的组分包括:MS培养基+0.5g/L植物凝胶+萘乙酸0.2mg/L;
成苗培养的条件为:时间为35d,温度为30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2400Lux。
统计植株再生率,结果见表1。
实施例2
一种甘薯植株再生的方法,步骤:
1)将甘薯的茎尖生长点置于胚性愈伤诱导培养基上进行胚性愈伤诱导,得到胚性愈伤组织;
胚性愈伤诱导培养基的组分为:MS培养基+6g/L植物凝胶+25g/L蔗糖;
茎尖生长点的获取:选取生长健壮的甘薯植株,在顶端剪取1~1.5cm茎尖,茎尖依次经75%乙醇溶液消毒45s、0.1%氯化汞溶液消毒4min和无菌水冲洗干净后,剥取得到茎尖生长点;茎尖的数量为20个,3个重复,甘薯得到品种为金玉;
胚性愈伤诱导的条件为:时间为25d,温度为26℃,光照时间为15h/d,光照强度为2200Lux;
2)将步骤1)得到的胚性愈伤组织置于体细胞胚诱导培养基上进行体细胞胚诱导,得到体细胞胚;
体细胞胚诱导培养基的组分为:MS培养基+3g/L植物凝胶+0.2mg/L脱落酸+30g/L蔗糖;
体细胞胚诱导的条件为:时间为10d,温度为28℃,光照时间为15h/d,光照强度为2200Lux;
3)将步骤2)得到的体细胞胚置于成苗培养基上进行成苗培养,得到甘薯植株;
成苗培养基的组分包括:MS培养基+1.5g/L植物凝胶+萘乙酸0.1mg/L;
成苗培养的条件为:时间为32d,温度为30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2200Lux。
统计植株再生率,结果见表1。
实施例3
一种甘薯植株再生的方法,步骤:
1)将甘薯的茎尖生长点置于胚性愈伤诱导培养基上进行胚性愈伤诱导,得到胚性愈伤组织;
胚性愈伤诱导培养基的组分为:MS培养基+7g/L植物凝胶+25g/L蔗糖;
茎尖生长点的获取:选取生长健壮的甘薯植株,在顶端剪取1~1.5cm茎尖,茎尖依次经75%乙醇溶液消毒30s、0.1%氯化汞溶液消毒3min和无菌水冲洗干净后,剥取得到茎尖生长点;茎尖的数量为20个,3个重复,甘薯得到品种为鲁薯1;
胚性愈伤诱导的条件为:时间为22d,温度为25℃,光照时间为15h/d,光照强度为2000Lux;
2)将步骤1)得到的胚性愈伤组织置于体细胞胚诱导培养基上进行体细胞胚诱导,得到体细胞胚;
体细胞胚诱导培养基的组分为:MS培养基+2.5g/L植物凝胶+0.2mg/L脱落酸+25g/L蔗糖;
体细胞胚诱导的条件为:时间为10d,温度为25℃,光照时间为15h/d,光照强度为2000Lux;
3)将步骤2)得到的体细胞胚置于成苗培养基上进行成苗培养,得到甘薯植株;
成苗培养基的组分包括:MS培养基+0.8g/L植物凝胶+萘乙酸0.15mg/L;
成苗培养的条件为:时间为32d,温度为30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2000Lux。
统计植株再生率,结果见表1。
实施例4
一种甘薯植株再生的方法,步骤:
1)将甘薯的茎尖生长点置于胚性愈伤诱导培养基上进行胚性愈伤诱导,得到胚性愈伤组织;
胚性愈伤诱导培养基的组分为:MS培养基+5.5g/L植物凝胶+30g/L蔗糖;
茎尖生长点的获取:选取生长健壮的甘薯植株,在顶端剪取1~1.5cm茎尖,茎尖依次经75%乙醇溶液消毒30s、0.1%氯化汞溶液消毒3min和无菌水冲洗干净后,剥取得到茎尖生长点;茎尖的数量为20个,3个重复,甘薯得到品种为鲁薯3;
胚性愈伤诱导的条件为:时间为23d,温度为25℃,光照时间为15h/d,光照强度为2300Lux;
2)将步骤1)得到的胚性愈伤组织置于体细胞胚诱导培养基上进行体细胞胚诱导,得到体细胞胚;
体细胞胚诱导培养基的组分为:MS培养基+2.2g/L植物凝胶+0.15mg/L脱落酸+28g/L蔗糖;
体细胞胚诱导的条件为:时间为11d,温度为25℃,光照时间为15h/d,光照强度为2300Lux;
3)将步骤2)得到的体细胞胚置于成苗培养基上进行成苗培养,得到甘薯植株;
成苗培养基的组分包括:MS培养基+1.4g/L植物凝胶+萘乙酸0.12mg/L;
成苗培养的条件为:时间为32d,温度为30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2300Lux。
统计植株再生率,结果见表1。
实施例5
一种甘薯植株再生的方法,步骤:
1)将甘薯的茎尖生长点置于胚性愈伤诱导培养基上进行胚性愈伤诱导,得到胚性愈伤组织;
胚性愈伤诱导培养基的组分为:MS培养基+6.5g/L植物凝胶+30g/L蔗糖;
茎尖生长点的获取:选取生长健壮的甘薯植株,在顶端剪取1~1.5cm茎尖,茎尖依次经75%乙醇溶液消毒30s、0.1%氯化汞溶液消毒3min和无菌水冲洗干净后,剥取得到茎尖生长点;茎尖的数量为20个,3个重复,甘薯得到品种为红菊花;
胚性愈伤诱导的条件为:时间为22d,温度为25℃,光照时间为15h/d,光照强度为2250Lux;
2)将步骤1)得到的胚性愈伤组织置于体细胞胚诱导培养基上进行体细胞胚诱导,得到体细胞胚;
体细胞胚诱导培养基的组分为:MS培养基+2.6g/L植物凝胶+0.25mg/L脱落酸+26g/L蔗糖;
体细胞胚诱导的条件为:时间为12d,温度为25℃,光照时间为15h/d,光照强度为2250Lux;
3)将步骤2)得到的体细胞胚置于成苗培养基上进行成苗培养,得到甘薯植株;
成苗培养基的组分包括:MS培养基+0.8g/L植物凝胶+萘乙酸0.14mg/L;
成苗培养的条件为:时间为34d,温度为30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2250Lux。
统计植株再生率,结果见表1。
实施例6
一种甘薯植株再生的方法,步骤:
1)将甘薯的茎尖生长点置于胚性愈伤诱导培养基上进行胚性愈伤诱导,得到胚性愈伤组织;
胚性愈伤诱导培养基的组分为:MS培养基+5.4g/L植物凝胶+25g/L蔗糖;
茎尖生长点的获取:选取生长健壮的甘薯植株,在顶端剪取1~1.5cm茎尖,茎尖依次经75%乙醇溶液消毒30s、0.1%氯化汞溶液消毒3min和无菌水冲洗干净后,剥取得到茎尖生长点;茎尖的数量为20个,3个重复,甘薯得到品种为湛江白;
胚性愈伤诱导的条件为:时间为23d,温度为25℃,光照时间为15h/d,光照强度为2350Lux;
2)将步骤1)得到的胚性愈伤组织置于体细胞胚诱导培养基上进行体细胞胚诱导,得到体细胞胚;
体细胞胚诱导培养基的组分为:MS培养基+2.6g/L植物凝胶+0.25mg/L脱落酸+30g/L蔗糖;
体细胞胚诱导的条件为:时间为10d,温度为25℃,光照时间为15h/d,光照强度为2350Lux;
3)将步骤2)得到的体细胞胚置于成苗培养基上进行成苗培养,得到甘薯植株;
成苗培养基的组分包括:MS培养基+1.2g/L植物凝胶+萘乙酸0.16mg/L;
成苗培养的条件为:时间为32d,温度为30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2350Lux。
统计植株再生率,结果见表1。
实施例7
一种甘薯植株再生的方法,步骤:
1)将甘薯的茎尖生长点置于胚性愈伤诱导培养基上进行胚性愈伤诱导,得到胚性愈伤组织;
胚性愈伤诱导培养基的组分为:MS培养基+5g/L植物凝胶+25g/L蔗糖;
茎尖生长点的获取:选取生长健壮的甘薯植株,在顶端剪取1~1.5cm茎尖,茎尖依次经75%乙醇溶液消毒30s、0.1%氯化汞溶液消毒3min和无菌水冲洗干净后,剥取得到茎尖生长点;茎尖的数量为20个,3个重复,甘薯得到品种为心香;
胚性愈伤诱导的条件为:时间为24d,温度为25℃,光照时间为15h/d,光照强度为2400Lux;
2)将步骤1)得到的胚性愈伤组织置于体细胞胚诱导培养基上进行体细胞胚诱导,得到体细胞胚;
体细胞胚诱导培养基的组分为:MS培养基+2.4g/L植物凝胶+0.16mg/L脱落酸+30g/L蔗糖;
体细胞胚诱导的条件为:时间为12d,温度为25℃,光照时间为15h/d,光照强度为2400Lux;
3)将步骤2)得到的体细胞胚置于成苗培养基上进行成苗培养,得到甘薯植株;
成苗培养基的组分包括:MS培养基+0.9g/L植物凝胶+萘乙酸0.1mg/L;
成苗培养的条件为:时间为32d,温度为30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2400Lux。
统计植株再生率,结果见表1。
实施例8
一种甘薯植株再生的方法,步骤:
1)将甘薯的茎尖生长点置于胚性愈伤诱导培养基上进行胚性愈伤诱导,得到胚性愈伤组织;
胚性愈伤诱导培养基的组分为:MS培养基+6.4g/L植物凝胶+30g/L蔗糖;
茎尖生长点的获取:选取生长健壮的甘薯植株,在顶端剪取1~1.5cm茎尖,茎尖依次经75%乙醇溶液消毒30s、0.1%氯化汞溶液消毒3min和无菌水冲洗干净后,剥取得到茎尖生长点;茎尖的数量为20个,3个重复,甘薯得到品种为金山57;
胚性愈伤诱导的条件为:时间为20d,温度为30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2000Lux;
2)将步骤1)得到的胚性愈伤组织置于体细胞胚诱导培养基上进行体细胞胚诱导,得到体细胞胚;
体细胞胚诱导培养基的组分为:MS培养基+3g/L植物凝胶+0.3mg/L脱落酸+25g/L蔗糖;
体细胞胚诱导的条件为:时间为10d,温度为30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2400Lux;
3)将步骤2)得到的体细胞胚置于成苗培养基上进行成苗培养,得到甘薯植株;
成苗培养基的组分包括:MS培养基+0.8g/L植物凝胶+萘乙酸0.2mg/L;
成苗培养的条件为:时间为35d,温度为30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2300Lux。
统计植株再生率,结果见表1。
实施例9
一种甘薯植株再生的方法,步骤:
1)将甘薯的茎尖生长点置于胚性愈伤诱导培养基上进行胚性愈伤诱导,得到胚性愈伤组织;
胚性愈伤诱导培养基的组分为:MS培养基+5.5g/L植物凝胶+30g/L蔗糖;
茎尖生长点的获取:选取生长健壮的甘薯植株,在顶端剪取1~1.5cm茎尖,茎尖依次经75%乙醇溶液消毒30s、0.1%氯化汞溶液消毒3min和无菌水冲洗干净后,剥取得到茎尖生长点;茎尖的数量为20个,3个重复,甘薯得到品种为宁薯192;
胚性愈伤诱导的条件为:时间为20d,温度为28℃,光照时间为15h/d,光照强度为2400Lux;
2)将步骤1)得到的胚性愈伤组织置于体细胞胚诱导培养基上进行体细胞胚诱导,得到体细胞胚;
体细胞胚诱导培养基的组分为:MS培养基+3g/L植物凝胶+0.2mg/L脱落酸+25g/L蔗糖;
体细胞胚诱导的条件为:时间为12d,温度为25℃,光照时间为15h/d,光照强度为2350Lux;
3)将步骤2)得到的体细胞胚置于成苗培养基上进行成苗培养,得到甘薯植株;
成苗培养基的组分包括:MS培养基+1.5g/L植物凝胶+萘乙酸0.15mg/L;
成苗培养的条件为:时间为35d,温度为30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2200Lux。
统计植株再生率,结果见表1。
实施例10
一种甘薯植株再生的方法,步骤:
1)将甘薯的茎尖生长点置于胚性愈伤诱导培养基上进行胚性愈伤诱导,得到胚性愈伤组织;
胚性愈伤诱导培养基的组分为:MS培养基+7g/L植物凝胶+30g/L蔗糖;
茎尖生长点的获取:选取生长健壮的甘薯植株,在顶端剪取1~1.5cm茎尖,茎尖依次经75%乙醇溶液消毒30s、0.1%氯化汞溶液消毒3min和无菌水冲洗干净后,剥取得到茎尖生长点;茎尖的数量为20个,3个重复,甘薯得到品种为徐薯18;
胚性愈伤诱导的条件为:时间为20d,温度为26℃,光照时间为15h/d,光照强度为2000Lux;
2)将步骤1)得到的胚性愈伤组织置于体细胞胚诱导培养基上进行体细胞胚诱导,得到体细胞胚;
体细胞胚诱导培养基的组分为:MS培养基+2.5g/L植物凝胶+0.1mg/L脱落酸+30g/L蔗糖;
体细胞胚诱导的条件为:时间为10d,温度为25℃,光照时间为15h/d,光照强度为2400Lux;
3)将步骤2)得到的体细胞胚置于成苗培养基上进行成苗培养,得到甘薯植株;
成苗培养基的组分包括:MS培养基+0.5g/L植物凝胶+萘乙酸0.2mg/L;
成苗培养的条件为:时间为30d,温度为30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2400Lux。
统计植株再生率,结果见表1。
表1甘薯再生植株的再生率结果
植株再生率(%)
实施例1 92.4
实施例2 75.5
实施例3 87.1
实施例4 63.8
实施例5 90.4
实施例6 85.6
实施例7 75.1
实施例8 66.9
实施例9 88.3
实施例10 84.2
由以上实施例可以得出,采用本发明提供的方法在60~72d就能够得到甘薯再生植株,相交于现有技术缩短了获取时间,而且植株再生率高。
尽管上述实施例对本发明做出了详尽的描述,但它仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部实施例,人们还可以根据本实施例在不经创造性前提下获得其他实施例,这些实施例都属于本发明保护范围。

Claims (8)

1.一种甘薯植株再生的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)将甘薯的茎尖生长点置于胚性愈伤诱导培养基上进行胚性愈伤诱导,得到胚性愈伤组织;
所述胚性愈伤诱导培养基的组分包括:MS培养基+5~7g/L植物凝胶+25~30g/L蔗糖;
2)将所述步骤1)得到的胚性愈伤组织置于体细胞胚诱导培养基上进行体细胞胚诱导,得到体细胞胚;
所述体细胞胚诱导培养基的组分包括:MS培养基+2~3g/L植物凝胶+0.1~0.3mg/L脱落酸+25~30g/L蔗糖;
3)将所述步骤2)得到的体细胞胚置于成苗培养基上进行成苗培养,得到甘薯植株;
所述成苗培养基的组分包括:MS培养基+0.5~1.5g/L植物凝胶+萘乙酸0.1~0.2mg/L。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤1)茎尖生长点的获取包括:选取生长健壮的甘薯植株,在顶端剪取1~1.5cm茎尖,剥取得到茎尖生长点。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述茎尖依次经乙醇溶液消毒、氯化汞溶液消毒和无菌水冲洗后,再剥取得到茎尖生长点。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述乙醇溶液的体积百分含量为75%,所述乙醇溶液的消毒时间为30~60s;
所述氯化汞溶液的质量百分含量为0.1%,所述氯化汞溶液的消毒时间为3~4min。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述甘薯的品种包括徐紫薯8号、金玉、鲁薯1、鲁薯3、红菊花、湛江白、心香、金山57、宁薯192和徐薯18中的一种或多种。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤1)胚性愈伤诱导的条件包括:时间为20~25d,温度为25~30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2000~2400Lux。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤2)体细胞胚诱导的条件包括:时间为10~12d,温度为25~30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2000~2400Lux。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤3)成苗培养的条件包括:时间为30~35d,温度为25~30℃,光照时间为15h/d,光照强度为2000~2400Lux。
CN202310738424.7A 2023-06-21 2023-06-21 一种甘薯植株再生的方法 Active CN116602214B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202310738424.7A CN116602214B (zh) 2023-06-21 2023-06-21 一种甘薯植株再生的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202310738424.7A CN116602214B (zh) 2023-06-21 2023-06-21 一种甘薯植株再生的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN116602214A true CN116602214A (zh) 2023-08-18
CN116602214B CN116602214B (zh) 2024-07-23

Family

ID=87674736

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202310738424.7A Active CN116602214B (zh) 2023-06-21 2023-06-21 一种甘薯植株再生的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN116602214B (zh)

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1401765A (zh) * 2002-09-27 2003-03-12 中国农业大学 甘薯胚性悬浮细胞的遗传转化方法
JP2004147538A (ja) * 2002-10-30 2004-05-27 Mitsui Chemicals Inc サツマイモの形質転換方法
US20090249515A1 (en) * 2007-03-13 2009-10-01 Korea University Industrial And Academic Collaboration Foundation Antisense DNA of Sweetpotato Expansin cDNA and Method For Increasing Storage Root Yield Using The Same
CN102217546A (zh) * 2011-05-24 2011-10-19 江苏徐州甘薯研究中心 一种甘薯胚性愈伤长期增殖保存的方法
CN109392721A (zh) * 2018-12-20 2019-03-01 江苏徐淮地区徐州农业科学研究所(江苏徐州甘薯研究中心) 一种诱导甘薯植株再生的方法
CN219165143U (zh) * 2023-02-16 2023-06-13 冯顺洪 一种外挂式甘薯碎蔓挖收一体机

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1401765A (zh) * 2002-09-27 2003-03-12 中国农业大学 甘薯胚性悬浮细胞的遗传转化方法
JP2004147538A (ja) * 2002-10-30 2004-05-27 Mitsui Chemicals Inc サツマイモの形質転換方法
US20090249515A1 (en) * 2007-03-13 2009-10-01 Korea University Industrial And Academic Collaboration Foundation Antisense DNA of Sweetpotato Expansin cDNA and Method For Increasing Storage Root Yield Using The Same
CN102217546A (zh) * 2011-05-24 2011-10-19 江苏徐州甘薯研究中心 一种甘薯胚性愈伤长期增殖保存的方法
CN109392721A (zh) * 2018-12-20 2019-03-01 江苏徐淮地区徐州农业科学研究所(江苏徐州甘薯研究中心) 一种诱导甘薯植株再生的方法
CN219165143U (zh) * 2023-02-16 2023-06-13 冯顺洪 一种外挂式甘薯碎蔓挖收一体机

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
闫会等: "ABA对甘薯体细胞胚分化及再生的影响", 《江苏农业科学》, vol. 40, no. 8, 25 August 2012 (2012-08-25), pages 58 - 59 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN116602214B (zh) 2024-07-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN115316273B (zh) 一种安吉白茶组织培养快速繁殖的方法
CN109258477B (zh) 粉葛组织培养方法
Yildirim et al. An improved micropropagation protocol for lentisk (L.)
CN113519394A (zh) 一种红果参多倍体诱导及多倍体植株的高效人工育苗方法
CN101233827A (zh) 一种快速繁殖大象大蒜的方法
CN110651717A (zh) 一种菊花苗组培脱毒与快速繁殖的方法
CN110637723A (zh) 百香果叶片植株再生快繁技术
CN110810247A (zh) 一种甘薯茎尖脱毒与育种方法
CN111616049B (zh) 一种草果组培育苗方法
CN109258478A (zh) 多花黄精的组培繁殖方法
CN110741937B (zh) 一种黄精快速繁殖的方法
CN116602214B (zh) 一种甘薯植株再生的方法
CN111727884A (zh) 一种圆锥绣球的离体芽培养方法
CN111328714A (zh) 一种虎舌红愈伤诱导及增殖方法
Prabhuling et al. In Vitro Regeneration in Pomegranate (Punica granatum L.) cv. Bhagwa using Double Nodal Segments
CN111887153B (zh) 一种燕子花根段诱导愈伤组织的方法
Vanmathi et al. Establishment of in vitro plant regeneration protocol for fig (Ficus carica L.)
Rahmah et al. Karamunting (Rhodomyrtus tomentosa) callus induction in vitro
CN114287341A (zh) 培养蓝莓组织的方法
CN113575399A (zh) 一种石斛直播育苗方法
CN108450333B (zh) 一种卷丹百合愈伤组织的诱导方法
CN107125135B (zh) 一种利用花序轴高效诱导大蒜胚性愈伤组织的方法
CN112841028A (zh) 一种两步法培养人参果脱毒苗的方法
Zhang et al. Establishment and Optimization of an in vitro Regeneration System in Shredded Pineapple
KR101839997B1 (ko) 체세포배발생을 통한 음나무 노령목의 대량번식방법

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant