CN1165302C - 穿心莲内酯及衍生物的医学用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及具有如(I)所示穿心莲内酯结构骨架的二萜类化合物及其衍生物在医学中的新用途。其中，R₁，R₂，R₃＝H，有机酸及无机酸形成的酰基。该类化合物具有显著的抗冠状病毒引起的严重急性呼吸道综合症(SARS)的作用，用于治疗和预防由SARS病毒引起疾病的药物中应用。

Description

穿心莲内酯及衍生物的医学用途

技术领域

本发明涉及草药穿心莲中的二萜类化合物的用途。更具体指穿心莲内酯及衍生物的医学用途，特别是它的抗冠状病毒活性可在预防、治疗SARS病毒疾病的药物中应用。

背景技术

穿心莲是一种草药，据文献记载它具有多种医学用途：

(1)用于外感风热，温病初起，肺热咳喘，肺痈吐脓，咽喉肿痛。本品苦寒降泄，清热解毒，善清肺火，故凡肺肺火引起的病症皆可应用。治外感风热或温病初起，发热头痛，常与金银花、连翘、薄荷等同用.治肺热咳嗽气喘，常与黄芩、桑白皮、地骨皮合用；治肺痈咳吐脓痰，多与鱼腥草、桔梗、冬瓜仁等药同用；治咽喉肿痛，常与玄参、牛蒡子、板蓝根等药同用。

(2)用于湿热泻痢，热淋涩痛，湿疹瘙痒。本品苦燥性寒，有清热解毒燥湿的功效，故凡湿热诸症均可应用。治胃肠湿热，脚痛泄泻，下痢脓血者，可单用或与马齿苋、黄连等同用，治膀胱湿热，淋沥涩痛，多与车前子、白茅根、黄柏等药合用，治湿疹瘙痒，可以本品为末，甘油调涂。

(3)用于痈肿疮毒，蛇虫咬伤。木品清热解毒，燥湿消肿，故可用治湿热火毒诸症。治痈肿疮毒，蛇虫咬伤，可单用，或配金银花、野菊花、蚤休等煎服，并用鲜品捣烂外敷，均有解毒消肿的作用。

穿心莲内酯是从草药穿心莲中分离得到的一种二萜类化合物。该化合物具有清热解毒，凉血，消肿。用于感冒发热、咽喉肿痛、口舌生疮、顿咳劳嗽、泄泻痢疾、热淋涩痛、痈肿疮疡、毒蛇咬伤。

由冠状病毒引起的SARS是人类新近遇到的一种疾病，具有很强的传染性，对人的健康和生命造成极大威胁，且在全世界范围内严重影响了人们的生活和工作秩序。本发明对穿心莲中提取获得的穿心莲内酯及其衍生物进行药理筛选，证明它具有抗冠状病毒活性，可望有助于预防和治疗冠状病毒导致的SARS，将产生巨大的社会效益。

发明内容

本发明目的在于提供穿心莲内酯及其衍生物在制备预防、治疗抗SARS疾病药物中应用。

本发明是这样实施的：

穿心莲二萜类化合物可从草药穿心莲中通过常规化学提取方法获得或对天然穿心莲二萜进行化学衍生化获得；

化学结构式如下：

其中，R₁，R₂，R₃＝H，有机酸及无机酸形成的酰基及亚硫酸氢钠加成物。

穿心莲内酯的羟基在有机酸或无机酸存在下形成它的酰基，也可在亚硫酸氢钠存在下形成加成物。

穿心莲内酯的抗SARS病毒的作用试验如下：

测试日期：2003-5-31

测试项目：药物抗SARS病毒活性筛选(病毒-细胞水平模型)

测试原理：以Vero-E6细胞作为病毒宿主细胞(易感细胞)，测试样品抵抗病毒感染细胞的作用，检测指标为细胞变性反应(CPE)以及感染细胞保护率。

测试材料和方法：

1.测试样品：穿心莲内酯

2.国家新药筛选中心样品号：

3.病毒株：BJ-01

4.样品处理：样品溶于培养液或DMSO，配成适宜的初始浓度，3倍稀释，6个稀释度。

5.测试方法：把Vero-E6细胞接种于96孔培养板，置37℃，5％CO₂培养，分别加入不同稀释浓度的样品和SARS病毒，设病毒对照、细胞对照和样品对照。每日镜下观察结果，记录CPE，并用中性红染色测定OD值，参照对照进行样品抗SARS病毒活性作用的计算和评价。

测试结果：

        浓度(ug/ml)        CPE        感染细胞保护率

        100                -          10.83

        33.3               -          3.65

        11.1               -          2.30

        3.7                +          1.37

        1.23               ++         1.37

        0.41               +++        0.98

细胞病变法(CPE)：以加号表示细胞病变程度，＜25％+，25％～50％++，50％～75+++，＞75％++++。

感染细胞保护率：通过比较病毒对照、细胞对照和样品对照的OD值，计算样品对病毒感染细胞的保护活性，保护率＞1.5倍率，初步被认为样品对病毒感染细胞具有一定的保护活性。

^*样品细胞毒性：如果样品的细胞毒性与细胞对照比＞50％时，不做CPE评价和保护率计算。

结论：所检样品穿心莲内酯有保护细胞抵抗SARS病毒感染活性。

具体实施方式

穿心莲内酯的提取方法：取穿心莲茎叶粗粉300克，用1500毫升乙醇分2次冷浸，每次24小时，合并两次浸出液于5000毫升圆底烧瓶中，加25克活性炭回流脱色30分钟，趁热抽滤，回收乙醇至100毫升，转移至三角烧瓶中，缓缓加水约30毫升，放置析晶，抽滤，用水少许洗涤。滤饼加8倍量乙醇，加热使溶解，再加入约为溶液体积1％的活性炭回流30分钟，抽滤，滤液放置析晶，得白色穿心莲内酯粗品。将穿心莲内酯粗品加入5倍量氯仿振摇，冷浸放置1小时，过滤。用同法再处理两次，不溶部分为穿心莲内酯。将此不溶部分于室温干燥后，再加10(W/W)倍量乙醇，加热回流溶解，稍冷后加入为溶液体积1％的活性炭继续回流30分钟左右，抽滤，滤液回收乙醇至半量，放冷析晶，抽滤得精制穿心莲内酯。

穿心莲内酯亚硫酸氢钠加成物制备方法：穿心莲内酯0.5克，加乙醇12毫升，加热溶解。取1mol/L亚硫酸钠溶液3毫升，加入2％硫酸约4毫升混合(混合液的pH应为5.6-5.9之间)，加水5毫升。将穿心莲内酯乙醇液倒如亚硫酸钠的硫酸溶液中，振摇(混合液的pH应为8)，加热回流30分钟(颜色应不变黄)后，加2％硫酸调pH至中性，回收乙醇至无乙醇味，置于小分液漏斗中，用氯仿提取3次，每次8毫升左右，分出水层，浓缩至1-2毫升，加乙醇8-10毫升溶解，过滤，滤液减压回收乙醇至干，真空抽松，得白色穿心莲内酯亚硫酸氢钠加成物。

穿心莲内酯抗SARS病毒的活性同上所述。

Claims (3)

1、一种由中药穿心莲提取的结构如下的穿心莲内酯及其衍生物在制备抗SARS病毒药物中的应用

其中R₁、R₂、R₃＝H，有机酸及无机酸形成的酰基及亚硫酸氢钠加成物。

2、根据权利要求1所述的由中药穿心莲提取的穿心莲内酯及其衍生物的用途，其特征在于在制备预防、治疗SARS病毒引起疾病的药物中应用。

3、根据权利要求2所述的由中药穿心莲提取的穿心莲内酯及其衍生物的用途，其特征在于在制备预防、治疗严重急性呼吸道综合症药物中应用。