CN116474742A - 一种用于dna负载的带电多孔微球的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种用于DNA负载的带电多孔微球的制备方法，属于DNA载体制备领域。所述制备方法包括如下步骤：将两亲性多嵌段聚合物溶于与水不相溶的有机溶剂，形成聚合物溶液，与表面活性剂水溶液共同乳化，挥发有机溶剂，再加入三甲胺水溶液，收集固相组分，得到所述用于DNA负载的带电多孔微球。本发明通过在聚合过程中增加一段带正电荷的功能性分子，将正电荷引入到多孔光子微球中，再通过微球表面的正电荷和DNA磷酸基团的负电荷之间存在的静电相互作用，实现了对DNA的快速吸附。

Description

一种用于DNA负载的带电多孔微球的制备方法
技术领域
本发明涉及DNA载体制备领域，特别涉及一种用于DNA负载的带电多孔微球的制备方法。
背景技术
生物分子分离对于组学研究、结构分析、药物纯化以及临床诊断的下游应用至关重要。为了实现有效的生物分子分离，在过去的几十年中各种分离材料的研究与开发一直是生物医学等领域的关键话题。在所有分离材料中，纳米多孔材料因其操作方便、能耗经济和可回收性而被经常使用。目前的生物分子分离方面的纳米多孔材料主要为表面纳米多孔二氧化硅微粒、分子印迹聚合物(MIPs)、二维材料、金属有机骨架(MOF)、共价有机骨架(COF)、功能水凝胶和自组装嵌段共聚物等。
近年来，两亲性嵌段共聚物自组装成多孔的纳米结构材料引起了人们的极大兴趣。如，现有技术(Self-Assembled Photonic Microsensors with Strong Aggregation-Induced Emission for Ultra-Trace Quantitative Detection)中记载了一种使用两亲性瓶刷嵌段共聚物(BBCP)作为表面活性剂来稳定水包油包水(W/O/W)双乳液液滴，并通过一步法制备粒径、孔径均匀的光子晶体多孔微球的方案，也证明了由此制备的光子晶体多孔微球可用于小分子物质的痕量检测(ppb级，ng/L)和吸附。
核酸是一类特殊的带负电荷的聚合物，它可以与阳离子小分子络合，形成形态丰富的聚电解质络合物。双链DNA(dsDNA)的线性电荷密度约为0.59个负电荷/单链DNA(ssDNA)的线性电荷密度约为0.29个负电荷//>核酸的强负电荷使它们能够与带正电荷的分子结合，这种相互作用具有重要的生物学功能。但是，现有的DNA吸附材料还面临着孔径难以控制、多孔连通性差等问题，而且现有的用于DNA吸附的正离子嵌段共聚物容易从溶液中聚集和沉淀，不利于DNA的长期稳定储存。限制了其进一步发展。因此，如何设计一款新型纳米多孔材料，以实现对DNA的快速吸附，对于生物分子分离领域的发展相当重要。
发明内容
本发明的目的在于，提供了一种用于DNA负载的带电多孔微球的制备方法。本发明制得的带电多孔微球具有高比表面积和高电荷量，可以吸附DNA，适于在DNA信息存储等领域的应用。
为实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：
本发明技术方案之一：提供一种用于DNA负载的带电多孔微球的制备方法，步骤包括方法(1)或方法(2)，其中：
方法(1)：将两亲性多嵌段聚合物溶于与水不相溶的有机溶剂，形成聚合物溶液，与表面活性剂水溶液和三甲胺水溶液的混合液共同乳化，挥发有机溶剂，收集固相组分，得到所述用于DNA负载的带电多孔微球；
方法(2)：将两亲性多嵌段聚合物溶于与水不相溶的有机溶剂，形成聚合物溶液，与表面活性剂水溶液共同乳化，挥发有机溶剂，再加入三甲胺水溶液，收集固相组分，得到所述用于DNA负载的带电多孔微球；
其中，方法(1)和方法(2)中所述两亲性多嵌段聚合物的嵌段中包含带正电荷的嵌段。
优选地，方法(1)和方法(2)中：所述两亲性多嵌段聚合物的质量浓度为1-25mg/mL；所述两亲性多嵌段聚合物为两亲性三嵌段共聚物刷。
优选地，所述两亲性三嵌段共聚物刷的分子量为20×104-50×104g/mol，聚合度为80-300，其中，疏水嵌段的聚合度为20-100，亲水嵌段的聚合度为5-60，可离子化的第三嵌段的聚合度为5-150。
优选地，所述两亲性三嵌段共聚物刷的制备方法包括如下步骤：依照摩尔比(20-40)：(10-40)：(20-90)：1将疏水嵌段、亲水嵌段、可离子化的第三嵌段和催化剂混合，聚合反应，得到所述两亲性三嵌段共聚物刷。
优选地，所述疏水嵌段包括聚苯乙烯、聚丙烯酸叔丁酯、聚二甲基硅氧烷、聚甲基丙烯酸甲酯、聚丙烯酸甲酯、聚丙烯腈、聚乳酸、聚ε-己内酯、聚乙烯或聚丙烯；所述亲水嵌段包括聚环氧乙烷；所述可离子化的第三嵌段包括含卤素的降冰片烯基化合物；所述催化剂为Grubbs第三代催化剂。
优选地，方法(1)和方法(2)中：所述与水不相溶的有机溶剂包括甲苯、二甲苯、二氯甲烷、三氯甲烷、苯、正己烷或石油醚。
优选地，方法(1)和方法(2)中：所述表面活性剂包括十二烷基硫酸钠、十六烷基三甲基溴化铵或聚乙烯醇；所述表面活性剂水溶液的质量分数为0.2-20％；所述三甲胺水溶液的质量分数为2-30％，所述三甲胺水溶液和表面活性剂水溶液添加量的质量比为10％-150％。
优选地，方法(1)和方法(2)中：乳化方法为微流控、震荡或膜乳化。
本发明技术方案之二：提供一种根据上述制备方法得到的用于DNA负载的带电多孔微球。
本发明技术方案之三：提供一种上述用于DNA负载的带电多孔微球在DNA信息存储中的应用。
本发明制得的带电多孔微球的粒径为5-100μm。
本发明的有益技术效果如下：
本发明设计的用于DNA负载的带电多孔微球通过在聚合过程中增加一段带正电荷的功能性分子，将正电荷引入到多孔光子微球中，再通过微球表面的正电荷和DNA磷酸基团的负电荷之间存在的静电相互作用，实现了对DNA的快速吸附。相较于传统的纳米多孔材料，本发明通过OSE(有序自发乳化)机制制备得到的带电多孔微球具有尺寸更大的微孔及通道，便于生物分子进入。
本发明制得的带电多孔微球具有高比表面积和高电荷量，可以吸附DNA，适于在DNA信息存储等领域的应用。
现有的用于DNA吸附的正离子嵌段共聚物还面临着稳定性不足等问题，容易从溶液中聚集和沉淀。而本发明通过结合稳定的聚合物骨架与高比表面积，提升了产物对DNA的长期稳定储存能力。
附图说明
图1为各实施例制备带电多孔微球的流程示意图。
图2为实施例1-8所得产物的显微镜反射图片。
图3为实施例1-8所得产物的反射光谱图。
图4为实施例1-6所得产物对DNA混合溶液的吸附动力学曲线。
图5为实施例6产物的SEM图。
具体实施方式
现详细说明本发明的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本发明的限制，而应理解为是对本发明的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。应理解本发明中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本发明。
另外，对于本发明中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值，以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本发明内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。
除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本发明所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本发明仅描述了优选的方法和材料，但是在本发明的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。
关于本发明中所使用的“包含”、“包括”、“具有”、“含有”等等，均为开放性的用语，即意指包含但不限于。
本发明以下各实施例中所用表面活性剂为聚乙烯醇(PVA)，其分子量为23000-27000g/mol，分子量分布(PDI)为2.7。基于本发明中表面活性剂起的降低表面张力从而稳定乳液滴的作用，十二烷基硫酸钠或十六烷基三甲基溴化铵替换聚乙烯醇作为本发明表面活性剂均能实现相似的技术效果。
本发明以下实施例中所用有机溶剂为甲苯，基于有机溶剂的作用为溶解聚合物同时与水层分相形成乳液滴，将其替换为二甲苯、二氯甲烷、三氯甲烷、苯、正己烷或石油醚均能实现相似的技术效果。
本发明以下各实施例中所用疏水嵌段为聚苯乙烯，具体为降冰片烯封端的聚苯乙烯(NB-PS)，分子量为4500g/mol。基于疏水嵌段作用为稳定乳液滴同时构成多孔微球的骨架，将本发明实施例中聚苯乙烯替换为聚丙烯酸叔丁酯、聚二甲基硅氧烷、聚甲基丙烯酸甲酯、聚丙烯酸甲酯、聚丙烯腈、聚乳酸、聚ε-己内酯、聚乙烯或聚丙烯均能实现相似的技术效果。
本发明以下各实施例中所用亲水嵌段为聚环氧乙烷，具体为降冰片烯封端的聚环氧乙烷(NB-PEO)，分子量为4000g/mol，合成路线如下所示：
本发明以下各实施例中所用可离子化的第三嵌段为降冰片烯基化合物，具体为含溴的降冰片烯基化合物(NB-Br)，合成路线如下所示：
基于本发明中可离子化的第三嵌段作用为与三甲胺反应生成离子化嵌段，将NB-Br替换为其他含卤素的降冰片烯基化合物均能实现相似的技术效果。
本发明实施例1中步骤(1)两亲性三嵌段共聚物刷的合成路线如下所示：
本发明实施例1中步骤(2)两亲性三嵌段共聚物刷离子化的合成路线如下所示：
本发明以下各实施例中所用各原料均为市售产品。
图1为本发明以下实施例制备带电多孔微球的流程示意图。
实施例1
用于DNA负载的带电多孔微球的制备方法如下：
(1)制备两亲性三嵌段共聚物刷：依照摩尔比40:1:40:20将聚苯乙烯(NB-PS)、Grubbs第三代催化剂、聚环氧乙烷(NB-PEO)和降冰片烯基化合物(NB-Br)加入含有二氯甲烷的聚合瓶中混合，常温下磁子搅拌2h，得到两亲性三嵌段共聚物刷(PS-b-PEO)。
(2)制备用于DNA负载的带电多孔微球：将两亲性三嵌段共聚物刷溶于甲苯中配制成浓度15mg/mL的聚合物溶液；然后采用微流控的方式将聚合物溶液倒入2wt％的聚乙烯醇水溶液中，乳化形成乳液滴，然后放在25℃、50％RH的条件下静置25h使有机溶剂甲苯挥发完全，再将30wt％的三甲胺水溶液(TMA)以三甲胺水溶液:聚乙烯醇水溶液为1:10的质量比加入到聚乙烯醇水溶液中，得到用于DNA负载的带电多孔微球。
图2为实施例1-8所得产物的显微镜反射图片。由图可知，实施例1制备的用于DNA负载的带电多孔微球在正常光照下显示出绿色结构色，微球的孔径平均在250nm左右。
实施例2
与实施例1的区别仅在于，聚苯乙烯、聚环氧乙烷、降冰片烯基化合物和Grubbs第三代催化剂添加量的摩尔比为40:40:30:1，得到用于DNA负载的带电多孔微球。
图2为实施例1-8所得产物的显微镜反射图片。由图可知，实施例2制备的用于DNA负载的带电多孔微球在正常光照下显示出红色结构色，微球的孔径平均在300nm左右。
实施例3
与实施例1的区别仅在于，聚苯乙烯、聚环氧乙烷、降冰片烯基化合物和Grubbs第三代催化剂添加量的摩尔比为40:40:40:1，得到用于DNA负载的带电多孔微球。
图2为实施例1-8所得产物的显微镜反射图片。由图可知，实施例3制备的用于DNA负载的带电多孔微球在正常光照下显示出红色结构色，微球的孔径平均在320nm左右。
实施例4
与实施例1的区别仅在于，聚苯乙烯、聚环氧乙烷、降冰片烯基化合物和Grubbs第三代催化剂添加量的摩尔比为40:40:50:1，得到用于DNA负载的带电多孔微球。
图2为实施例1-8所得产物的显微镜反射图片。由图可知，实施例4制备的用于DNA负载的带电多孔微球在正常光照下显示出红色结构色，微球的孔径平均在340nm左右。
实施例5
与实施例1的区别仅在于，聚苯乙烯、聚环氧乙烷、降冰片烯基化合物和Grubbs第三代催化剂添加量的摩尔比为40:40:60:1，得到用于DNA负载的带电多孔微球。
图2为实施例1-8所得产物的显微镜反射图片。由图可知，实施例5制备的用于DNA负载的带电多孔微球在正常光照下显示出蓝色结构色，微球的孔径平均在420nm左右。
实施例6
与实施例1的区别仅在于，聚苯乙烯、聚环氧乙烷、降冰片烯基化合物和Grubbs第三代催化剂添加量的摩尔比为40:40:70:1，得到用于DNA负载的带电多孔微球。
图2为实施例1-8所得产物的显微镜反射图片。由图可知，实施例6制备的用于DNA负载的带电多孔微球在正常光照下显示出黄绿结构色，微球的孔径平均在430nm左右。
实施例7
与实施例1的区别仅在于，聚苯乙烯、聚环氧乙烷、降冰片烯基化合物和Grubbs第三代催化剂添加量的摩尔比为40:40:80:1，得到用于DNA负载的带电多孔微球。
图2为实施例1-8所得产物的显微镜反射图片。由图可知，实施例7制备的用于DNA负载的带电多孔微球在正常光照下没有结构色，微球孔径分布不均，在500nm左右。
实施例8
与实施例1的区别仅在于，聚苯乙烯、聚环氧乙烷、降冰片烯基化合物和Grubbs第三代催化剂添加量的摩尔比为40:40:90:1，得到用于DNA负载的带电多孔微球。
图2为实施例1-8所得产物的显微镜反射图片。由图可知，实施例8制备的用于DNA负载的带电多孔微球在正常光照下没有结构色，微球孔径分布不均，在550nm左右。
实施例9
用于DNA负载的带电多孔微球的制备方法如下：
(1)制备两亲性三嵌段共聚物刷：依照摩尔比20:10:20:1将聚苯乙烯、聚环氧乙烷、降冰片烯基化合物和Grubbs第三代催化剂加入含有二氯甲烷的聚合瓶中混合，常温下磁子搅拌2h，得到两亲性三嵌段共聚物刷(PS-b-PEO)。
(2)制备用于DNA负载的带电多孔微球：将两亲性三嵌段共聚物刷溶于甲苯中配制成浓度10mg/mL的聚合物溶液；然后采用微流控的方式将聚合物溶液倒入0.22wt％的聚乙烯醇水溶液中，乳化形成乳液滴，再将30wt％的三甲胺水溶液(TMA)以三甲胺水溶液:聚乙烯醇水溶液为1:5的质量比加入到聚乙烯醇水溶液中，然后放在25℃、50％RH的条件下静置25h使有机溶剂甲苯挥发完全，得到用于DNA负载的带电多孔微球。
实施例10
与实施例1的区别仅在于，聚苯乙烯、聚环氧乙烷、降冰片烯基化合物和Grubbs第三代催化剂添加量的摩尔比为30:20:50:1，得到用于DNA负载的带电多孔微球。
实施例11
与实施例1的区别仅在于，聚苯乙烯、聚环氧乙烷、降冰片烯基化合物和Grubbs第三代催化剂添加量的摩尔比为40:20:60:1，得到用于DNA负载的带电多孔微球。
实施例12
与实施例1的区别仅在于，聚苯乙烯、聚环氧乙烷、降冰片烯基化合物和Grubbs第三代催化剂添加量的摩尔比为40:20:70:1，得到用于DNA负载的带电多孔微球。
实施例13
与实施例1的区别仅在于，聚苯乙烯、聚环氧乙烷、降冰片烯基化合物和Grubbs第三代催化剂添加量的摩尔比为40:20:80:1，得到用于DNA负载的带电多孔微球。
实施例14
与实施例1的区别仅在于，聚苯乙烯、聚环氧乙烷、降冰片烯基化合物和Grubbs第三代催化剂添加量的摩尔比为40:10:60:1，得到用于DNA负载的带电多孔微球。
实施例15
与实施例1的区别仅在于，聚苯乙烯、聚环氧乙烷、降冰片烯基化合物和Grubbs第三代催化剂添加量的摩尔比为40:10:70:1，得到用于DNA负载的带电多孔微球。
实施例16
与实施例1的区别仅在于，聚苯乙烯、聚环氧乙烷、降冰片烯基化合物和Grubbs第三代催化剂添加量的摩尔比为40:10:80:1，得到用于DNA负载的带电多孔微球。
实施例17
与实施例1的区别仅在于，聚苯乙烯、聚环氧乙烷、降冰片烯基化合物和Grubbs第三代催化剂添加量的摩尔比为40:10:90:1，得到用于DNA负载的带电多孔微球。
实施例18
与实施例1的区别仅在于，聚苯乙烯、聚环氧乙烷、降冰片烯基化合物和Grubbs第三代催化剂添加量的摩尔比为40:10:100:1，得到用于DNA负载的带电多孔微球。
实施例19
用于DNA负载的带电多孔微球的制备方法如下：
(1)制备两亲性三嵌段共聚物刷的方法与实施例1相同。
(2)制备用于DNA负载的带电多孔微球：将两亲性三嵌段共聚物刷溶于甲苯中配制成浓度15mg/mL的聚合物溶液；然后采用微流控的方式将聚合物溶液倒入2wt％的聚乙烯醇水溶液中，乳化形成乳液滴，然后放在25℃、50％RH的条件下静置24h使有机溶剂甲苯挥发完全，再将30wt％的三甲胺水溶液(TMA)以三甲胺水溶液:聚乙烯醇水溶液为1:1的质量比加入到聚乙烯醇水溶液中，得到用于DNA负载的带电多孔微球。
实施例20
与实施例19的区别仅在于，聚苯乙烯、聚环氧乙烷、降冰片烯基化合物和Grubbs第三代催化剂添加量的摩尔比为40:40:30:1，得到用于DNA负载的带电多孔微球。
实施例21
与实施例19的区别仅在于，聚苯乙烯、聚环氧乙烷、降冰片烯基化合物和Grubbs第三代催化剂添加量的摩尔比为40:40:40:1，得到用于DNA负载的带电多孔微球。
实施例22
与实施例19的区别仅在于，聚苯乙烯、聚环氧乙烷、降冰片烯基化合物和Grubbs第三代催化剂添加量的摩尔比为40:40:50:1，得到用于DNA负载的带电多孔微球。
实施例23
与实施例6的区别仅在于，先将三甲胺水溶液与聚乙烯醇水溶液混合，再进行后期乳化步骤，得到用于DNA负载的带电多孔微球。
用于DNA负载的带电多孔微球的制备方法如下：
(1)制备两亲性三嵌段共聚物刷的方法与实施例1相同。
(2)制备用于DNA负载的带电多孔微球：将两亲性三嵌段共聚物刷溶于甲苯中配制成浓度15mg/mL的聚合物溶液；将30wt％的三甲胺水溶液与2wt％的聚乙烯醇水溶液以质量比1:10混合形成乳化溶液；然后采用微流控的方式将聚合物溶液倒入乳化溶液中，乳化形成乳液滴，然后放在25℃、50％RH的条件下静置25h使有机溶剂甲苯挥发完全，得到用于DNA负载的带电多孔微球。
对比例1
与实施例6的区别仅在于，不添加可离子化的降冰片烯基化合物，得到用于DNA负载的多孔微球。
对比例2
与实施例6的区别仅在于，将可离子化降冰片烯基化合物替换为聚赖氨酸，得到用于DNA负载的带电微球。
对比例3
与实施例6的区别仅在于，将三甲胺水溶液替换为等质量的水，得到用于DNA负载的带电多孔微球。
对比例4
与实施例6的区别仅在于，将聚苯乙烯替换为等摩尔量的聚丙烯酸甲酯，得到用于DNA负载的带电多孔微球。
效果验证：
(1)本发明对实施例1-22进行了以下测试。测试结果如表1和图3所示。
表1参数
图3为实施例1-8所得产物的反射光谱图。由图3可知，实施例1-6的产物皆产生了较强的反射峰，这主要是因为纳米孔的有序排列产生了强烈的布拉格反射。并且随着第三嵌段含量的增加，反射峰逐渐红移，这主要是多孔微球的孔径增加导致的。实施例7-8的产物由于孔径过大导致多孔结构的有序性不能维持，因此反射峰不明显。
(2)为了验证本发明所得产物的DNA吸附性能，对实施例1-5、6、对比例1-3制备的带电多孔微球、实施例6制备的两亲性三嵌段共聚物刷，进行了以下测试：
将带电多孔微球配置成4mg/mL的悬浊液，与1mg/mL的DNA溶液等体积混合后在室温下静置，并用Nanodrop仪器测量混合后溶液中上清液的DNA浓度随时间的变化，以表征微球的DNA吸附动力学曲线。其中，所用DNA来自于鲑鱼精子的商用DNA，吸附量数据由上清液浓度差值计算得到。测试结果如表2所示。
表2物理性能测试
图4为实施例1-6所得产物对DNA混合溶液的吸附动力学曲线。由图4可知，微球对DNA有着很好的吸附效果，随着时间延长，吸附速率放缓并逐渐达到平衡状态。
以上所述的实施例仅是对本发明的优选方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案做出的各种变形和改进，均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。

Claims (9)

1.一种用于DNA负载的带电多孔微球的制备方法，其特征在于，步骤包括方法(1)或方法(2)，其中：
方法(1)：将两亲性多嵌段聚合物溶于与水不相溶的有机溶剂，形成聚合物溶液，与表面活性剂水溶液和三甲胺水溶液的混合液共同乳化，挥发有机溶剂，收集固相组分，得到所述用于DNA负载的带电多孔微球；
方法(2)：将两亲性多嵌段聚合物溶于与水不相溶的有机溶剂，形成聚合物溶液，与表面活性剂水溶液共同乳化，挥发有机溶剂，再加入三甲胺水溶液，收集固相组分，得到所述用于DNA负载的带电多孔微球；
其中，方法(1)和方法(2)中所述两亲性多嵌段聚合物的嵌段中包含带正电荷的嵌段。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，方法(1)和方法(2)中：所述聚合物溶液中的两亲性多嵌段聚合物的质量浓度为1-25mg/mL；所述两亲性多嵌段聚合物为两亲性三嵌段共聚物刷。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述两亲性三嵌段共聚物刷的分子量为20×104-50×104g/mol，聚合度为80-300，其中，疏水嵌段的聚合度为20-100，亲水嵌段的聚合度为5-60，可离子化的第三嵌段的聚合度为5-150。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述两亲性三嵌段共聚物刷的制备方法包括如下步骤：依照摩尔比(20-40)：(10-40)：(20-90)：1将疏水嵌段、亲水嵌段、可离子化的第三嵌段和催化剂混合，聚合反应，得到所述两亲性三嵌段共聚物刷。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述疏水嵌段包括聚苯乙烯、聚丙烯酸叔丁酯、聚二甲基硅氧烷、聚甲基丙烯酸甲酯、聚丙烯酸甲酯、聚丙烯腈、聚乳酸、聚ε-己内酯、聚乙烯或聚丙烯；所述亲水嵌段包括聚环氧乙烷；所述可离子化的第三嵌段包括含卤素的降冰片烯基化合物；所述催化剂为Grubbs第三代催化剂。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，方法(1)和方法(2)中：所述与水不相溶的有机溶剂包括甲苯、二甲苯、二氯甲烷、三氯甲烷、苯、正己烷或石油醚。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，方法(1)和方法(2)中：所述表面活性剂包括十二烷基硫酸钠、十六烷基三甲基溴化铵或聚乙烯醇；所述表面活性剂水溶液的质量分数为0.2-20％；所述三甲胺水溶液的质量分数为2-30％，所述三甲胺水溶液和表面活性剂水溶液添加量的质量比为10％-150％。
8.一种根据权利要求1-7任一项所述制备方法得到的用于DNA负载的带电多孔微球。
9.一种权利要求8所述用于DNA负载的带电多孔微球在DNA信息存储中的应用。
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