CN116322612A - 用于剥离角质或改善皮肤状态的组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明通过将蛋白质分解酶系列剥离材料与糖醇和/或丝氨酸一起包含而解决蛋白质分解酶在组合物中的稳定性降低和由此引起的角质剥离效果降低的问题,并且可以提供具有提高的角质剥离和皮肤状态改善效果的安全且稳定的组合物。
Description
技术领域
本发明涉及通过提高用于剥离角质的有效成分的稳定性来提供优异的角质护理和皮肤纹理改善效果的化妆料组合物。
背景技术
随着对美容的关注增加,在皮肤管理方面对去角质(pilling)、即剥离角质的关注和需求逐渐增加。去角质从以皮肤科或皮肤管理店的去角质手术为代表的特殊护理到利用化妆品和生活用品的家庭护理,其种类和方法多种多样。然而,与皮肤科去角质手术相比,利用化妆品的家庭护理带来的去角质的体感效果较低。
用于去角质的材料主要有包括乳酸、乙醇酸等AHA(α-羟基酸,alpha hydroxylacid)、水杨酸等BHA(β-羟基酸,beta hydroxy acid)和葡糖酸内酯等PHA(多羟基酸,polyhydroxyl acid)系列的化合物在内的化学剥离材料,木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、蛋白质分解酶等蛋白质分解酶材料,以及磨砂成分等物理剥离材料。对于化学剥离材料,效果得到认证使得足以在皮肤科手术中通常使用,而且普遍使用,但由于刺激和安全性问题,存在难以将能够体感到功效的水平的浓度应用于家庭护理产品的问题。
蛋白质分解酶主要包括木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶等植物来源酶,以及枯草杆菌蛋白酶等通过培养芽孢杆菌属(Bacillus sp.)微生物生产的蛋白质分解酶。从酶的特性来看,一个分子可以多次作用而分解蛋白质,因此即使在低浓度下,角质剥离功效也优异,而且与化学剥离材料相比,分子的尺寸较大,因此不会被吸收或渗透到皮肤中,因此具有刺激相对较小的优点。然而,从由蛋白质构成的材料的特性来看,由于根据时间和环境的成分本身的活性减少等原因,在产品应用时,存在功效降低的问题,因此难以产品化。
因此,在此背景下,本发明人研发了提高具有角质剥离功效的蛋白质分解酶系列剥离材料在化妆料组合物中的稳定性、增强角质剥离功效的化妆料组合物,从而完成了本发明。
发明内容
要解决的课题
如上所述,为了解决蛋白质分解酶系列剥离材料在组合物中的稳定性降低和由此引起的角质剥离效果降低的问题而进行研究的结果,确认了在包含蛋白质分解酶系列剥离材料作为有效成分的化妆料组合物中同时包含丝氨酸和糖醇时,组合物中有效成分的稳定性提高,从而角质剥离能力维持时间增加,并且具有增强角质剥离功效以及由此引起的改善皮肤纹理的效果以及改善毛孔和改善皱纹的效果,从而完成了本发明。
因此,本发明的目的是提供一种有效成分的稳定性和角质剥离活性的维持力增强从而刺激小并且具有优异的角质剥离效果、皮肤纹理改善效果、毛孔改善和皱纹改善效果的化妆料组合物。
课题的解决手段
为了实现上述目的,本发明提供了一种包含蛋白质分解酶和糖醇和/或丝氨酸的组合物。具体地,上述组合物可以包含蛋白质分解酶、糖醇和丝氨酸。
本发明的组合物同时包含蛋白质分解酶和糖醇,从而可以提高蛋白质分解酶的稳定性和角质剥离维持能力,由此可以提供增强或改善的优异的角质剥离效果。另外,同时包含蛋白质分解酶和丝氨酸,从而可以提供组合所带来的提高的角质剥离效果。在这方面,本发明提供了一种用于剥离角质的组合物。上述组合物根据其使用目的可以用作化妆料组合物、药学组合物、外用剂组合物、医药外品组合物或食品组合物等。
在本说明书中,“剥离角质”是指堆积在皮肤角质层中的角质从皮肤的角质层中脱落或去除。意在不仅包括通过施加物理力去除的情况,还包括在不施加额外力的情况下仅通过简单的组合物处理即可从皮肤的角质层中脱落的情况。
本发明的组合物包含蛋白质分解酶(protease)作为有效成分的角质剥离成分。
在本说明书中,“蛋白质分解酶(protease)”是指水解蛋白质的肽键的酶,也称为蛋白质水解酶。只要是具有剥离皮肤角质功效的蛋白质分解酶,就不受限制地包括在本发明中。
作为具体例,上述蛋白质分解酶(protease)可以包括木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、角蛋白酶(Keratinase)和枯草杆菌蛋白酶(subtilisin),并且选自由上述成分组成的组中的一种以上可作为有效成分包括在化妆料组合物中。另外,包括上述蛋白质分解酶中的某个成分而商业销售的物质也包括在本发明蛋白质分解酶中。例如,作为包含木瓜蛋白酶成分的成分X-pressin(巴斯夫)、作为包含木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶的成分Wonderzyme等作为蛋白质分解酶或各酶物质包括在本发明中。作为上述角蛋白酶(Keratinase)的成分,角蛋白酶H(Keratinase H)或角蛋白酶S(Keratinase S)等均可包括在本发明中。
根据本发明的一个方面,本发明组合物优选包含蛋白质分解酶作为有效成分。作为上述有效成分,蛋白质分解酶相对于组合物总重量可包含0.0001重量%至1.0重量%,优选地可包含0.0001重量%至0.5重量%。当蛋白质分解酶的含量低于上述0.0001重量%时,无法获得对剥离角质或改善皮肤状态的效果,当包含超过1.0重量%时,含量增加所带来的效果的增加不显著。
在本发明的一个实施例中,对作为蛋白质分解酶(protease)的角蛋白酶(keratinase,LCS生物技术)的皮肤角质剥离效果进行实验的结果,确认了随着作为蛋白质分解酶的角蛋白酶的浓度增加,角质剥离功效也增加(实施例1)。
本发明的组合物还包含丝氨酸作为有效成分的角质剥离成分。
在本说明书中,“丝氨酸”是指氨基酸的一种,用作包含(S)-丝氨酸、L-丝氨酸等所有异构体的含义。
上述丝氨酸作为氨基酸,在化妆料组合物中包含超过3.0重量%时,角质剥离功效饱和,在提高效果方面存在局限性。然而,当在本发明的化妆料组合物中将丝氨酸与蛋白质分解酶和糖醇一起组合包含时,与仅使用单一成分时相比,可以具有提高的角质剥离能力,因此可以克服上述局限性。
根据本发明的一个方面,本发明组合物可包含相对于组合物总重量的0.1重量%以上、优选0.1重量%至3.0重量%的丝氨酸。当丝氨酸的含量低于上述0.1重量%时,其效果不显著,当包含超过3.0重量%时,组合物含量增加所带来的效果的增加不显著。
在本说明书中,“糖醇”是指单糖类的羰基中的醛基或酮基通过加氢还原而成的具有两个以上羟基(-OH)的醇或属于同一系列的化合物。在本发明的组合物中,糖醇起到使蛋白质分解酶能够稳定存在,从而提高酶的蛋白质分解活性和增强分解能力维持时间的作用,由此可以解决角质剥离产品中蛋白质分解酶的活性降低导致产品的品质和效果下降的问题。因此,在同时包含蛋白质分解酶和糖醇的组合物中,蛋白质分解酶的角质剥离能力可以长期维持,并且与相同浓度、仅包含蛋白质分解酶的试料相比,可以获得优异的角质剥离效果。
作为具体例,上述糖醇意在包括甘油、赤藓糖醇(erythritol)、山梨糖醇、苏糖醇(threitol)、阿拉伯糖醇(arabitol)、木糖醇(xylitol)、甘露糖醇(mannitol)、山梨糖醇(sorbitol)、乙基乙二醇(ethyl glycol)、丙二醇、二丙二醇(Dipropylene Glycol;DPG)和丁二醇(例如,1,3-丁二醇,1,3-Butylene Glycol:1,3-BG)等以及上述成分的异构体全部,具体地,可以是选自由糖醇成分组成的组中的一种以上的糖醇的混合物。
当包含蛋白质分解酶和单一糖醇时,作为优选例,上述糖醇可以是甘油、山梨糖醇、赤藓糖醇、二丙二醇或丁二醇。
另外,上述糖醇可以以包含选自由甘油、山梨糖醇、二丙二醇、丁二醇和赤藓糖醇组成的组中的两种以上的成分的糖醇混合物形式包含。作为优选例,上述糖醇混合物可包含甘油、山梨糖醇、二丙二醇、丁二醇和赤藓糖醇。
根据本发明的一个方面,本发明化妆料组合物可包含相对于组合物总重量的0.001重量%至30.0重量%的糖醇。当糖醇的含量低于上述0.001重量%时,提高有效成分蛋白质分解酶的稳定性的效果不显著,当包含超过30.0重量%时,含量增加所带来的效果的增加不显著。
即使当上述糖醇作为糖醇混合物包含时,也可以在糖醇混合物的最大含量不超过30重量%的范围内在上述含量内混合并包含在组合物中。作为一个实例,当作为糖醇混合物包含在组合物中时,可以包含使得在相对于本发明的整个组合物的0.001至20w/w%的甘油、0.001至20w/w%的山梨糖醇、0.001至20w/w%的DPG、0.001至20w/w%的1,3-丁二醇和0.001至10w/w%的赤藓糖醇的含量范围内,整个糖醇混合物的含量相对于整个组合物不超过30%重量%。
在本发明的一个具体例中,将蛋白质分解酶与包括甘油、山梨糖醇、二丙二醇、1,3-丁二醇和赤藓糖醇的糖醇混合来确认角质剥离效果的结果,确认了尽管糖醇不具有角质剥离活性,但与单独处理蛋白质分解酶的情况相比,角质剥离效果显著增强,蛋白质分解活性长期维持(实施例2和3)。
据了解,上述各成分可以通过购买商业上销售的化合物来使用,并且商业上销售的形式也包括在本发明中。
另外,本发明的组合物可以通过角质剥离作用改善皮肤的状态。在这方面,本发明提供了一种用于改善皮肤状态的组合物。
在本说明书中,“改善皮肤状态”意在不仅包括皮肤的外形状态得到改善,从而使皮肤纹理变得细嫩或使皮肤的凹凸得到缓解,或者肤色得到改善,从而呈现健康的气色,还包括皮肤内部的细胞等的失衡得到恢复、改善。本发明的组合物可以通过有效且稳定地剥离在皮肤表面产生的角质的作用来改善皮肤状态。
上述改善皮肤状态具体地包括改善皮肤纹理、改善肤色、改善皮肤毛孔、改善皮肤皱纹、缓解皮肤凹凸或改善肤色的效果。在这方面,本发明的组合物提供了包含蛋白质分解酶、糖醇和丝氨酸的用于改善皮肤纹理的组合物、用于改善肤色的组合物、用于改善、收缩或减少毛孔的组合物或用于改善皮肤皱纹的组合物。
在本说明书中,“改善皮肤纹理”是指通过剥离角质(peeling)缓解或去除皮肤的凹凸等,使皮肤的表面变得光滑且健康的状态。
在本说明书中,“改善肤色”是指通过剥离角质(peeling)去除皮肤的暗沉部分,使皮肤的颜色变亮。
在本说明书中,“改善毛孔”或“收缩或减少毛孔”是指存在于皮肤中的毛孔的尺寸(直径、体积)变小或毛孔数量减少。
在本说明书中,“改善皱纹”是指预防、抑制或阻碍皮肤上产生皱纹,或缓解已经产生的皱纹。
在本说明书中,“组合物”意在包括化妆料组合物、药学组合物、外用剂组合物、医药外品组合物和食品组合物。上述各组合物可根据使用目的、有效成分的含量等改变类别而使用。
作为一个方面,上述组合物可以是化妆料组合物,在这方面,本发明提供了包含蛋白质分解酶、糖醇和丝氨酸的用于剥离角质的化妆料组合物或用于改善皮肤状态的化妆料组合物。
在本说明书中,“化妆料组合物”是指以制备化妆品为目的而构成的组合物,广义上可以解释为包括用于外用剂的外用剂组合物的含义。
根据本发明的化妆料组合物也可以制备成本领域通常制备的任何剂型。例如,上述化妆料组合物可以具有柔肤水或营养化妆水等化妆水,喷雾型化妆水,面部露(faciallotion)、身体露(body lotion)等乳液,营养霜、保湿霜、眼霜等霜,棒(stick),精华液,化妆软膏,喷雾,凝胶,面膜,防晒霜,妆前底乳,液体型或喷雾型等的粉底,粉,清洁露(cleansing lotion)、清洁油(cleansing oil)等卸妆剂,清洁泡沫(cleansing foam)、皂、沐浴露等洗涤剂等的剂型,但不限于此。
本发明的化妆料组合物可根据常规的使用方法使用,并且其使用次数可根据使用者的皮肤状态或喜好而改变。
本发明的化妆料组合物可以还包含可用于常规化妆品的所有种类的成分,例如保湿剂、紫外线阻断剂、中和剂、增稠剂、香料、防腐剂、抗氧化剂或色素。
根据本发明的化妆料组合物中包含的上述成分各自优选地可以在不超过各国政府规定的关于化妆品安全的法令或规定中记载的最大使用量的范围内包括在本发明的化妆料组合物中。
作为另一个方面,上述组合物可以是药学组合物,在这方面,本发明提供了一种包含蛋白质分解酶、糖醇和丝氨酸的药学组合物。
在本说明书中,“药学组合物”作为以制备医药品为目的而构成的组合物,是指以诊断、治疗、减轻、处置或预防包括人类在内的动物的疾病为目的而使用的组合物。广义上可以解释为包括用于以上述目的而使用的组合物中未经医生许可可购买但有别于化妆品或一般外用剂的医药外品的医药外品组合物的含义。
本发明的组合物可以提供一种稳定且具有优异的角质剥离效果的用于剥离角质的组合物,因此本发明可以是一种包含蛋白质分解酶、糖醇和丝氨酸的用于预防或治疗皮肤角化症的药学组合物。
在本说明书中,“皮肤角化症”是指由于遗传或环境因素导致皮肤表面产生过多角质的疾病,具体地包括毛孔角化症或手脚角化症。
在本说明书中,“改善”是指通过投送本发明的组合物来使目标症状比投送前症状有所好转或得到有利改变的所有行为。
在本说明书中,“预防”是指通过投送本发明的组合物来防止目标症状或疾病发生或延缓其发生或出现的所有行为。
在本说明书中,“治疗”是指通过投送本发明的组合物来使目标症状或疾病好转或消除的所有行为。
本发明的组合物中包含的蛋白质分解酶、糖醇和丝氨酸可以以药学上有效的含量(有效量)包含。上述术语“有效量”是指通过剥离皮肤的角质来表现出能够预防或治疗皮肤角化症或手掌足底角化症的效果的量。
如果在上述组合物中包含的上述组合物的治疗水平上能够表现出角质剥离效果,则可以以多种重量%包含。当各有效成分以低于下限包含时,可能无法发挥角质剥离预防或治疗功效,当以超过上限包含时,有效成分本身的物性、颜色或特有的香味可能会影响产品。
本发明的组合物以药学上有效的量投送。上述药学上有效的量是指足以以可应用于医学治疗的合理的受益/风险比例治疗疾病且不会引起副作用的量,有效用量水平可根据包括患者的健康状况、疾病的种类、重症度、药物的活性、对药物的敏感度、投送方法、投送时间、投送途径和排出比例、治疗时间、配制或同时使用的药物在内的因素及其他医学领域众所周知的因素来决定。
作为另一个方面,本发明提供了一种预防或治疗皮肤角化症的方法,其包括将包含蛋白质分解酶和糖醇的药学组合物投送于或涂敷于需要预防或治疗皮肤角化症的对象体或对象体皮肤的步骤以及抑制或减少皮肤角化症在上述对象体或对象体皮肤中发生的步骤。
上述组合物可以通过非口服、口服等的多种途径投送于鼠、小鼠、家畜、人类等的哺乳动物,并且可以预期投送的所有方式,例如可以通过粘膜、皮肤、口服、直肠或静脉、肌肉、皮下、子宫内硬膜或脑血管内(脑室内,intracerebroventricular)注射投送。上述皮肤投送包括在皮肤外部处理组合物。
本发明的药学组合物可以单独包含作为有效成分的上述组合物,除此以外,根据剂型、使用方法和使用目的还可以包含药学上允许的载体、赋形剂、稀释剂或副成分。
更具体地,除了上述有效成分之外,还可以还包含营养剂、维生素、电解质、风味剂、着色剂、填充剂、果胶酸及其盐、海藻酸及其盐、有机酸、保护性胶体增稠剂、pH调节剂、稳定化剂、防腐剂、甘油、醇、碳酸饮料中使用的碳酸化剂等。
上述“药学上允许”是指生理学上可接受并且当投送于动物、优选人类时通常不会引起胃肠障碍、晕眩症等过敏反应或类似反应。上述药学上有效的量可根据疾病及其重症程度、患者的年龄、体重、健康状况、性别、投送途径或治疗时间等而适当改变。
作为上述药学上允许的载体、赋形剂或稀释剂的实例,可以例举选自由乳糖、葡萄糖(dextrose)、蔗糖、山梨糖醇、甘露糖醇、木糖醇、赤藓糖醇、麦芽糖醇、淀粉、阿拉伯胶、海藻酸盐、明胶、磷酸钙、硅酸钙、纤维素、甲基纤维素、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、水、羟基苯甲酸甲酯、羟基苯甲酸丙酯、滑石、硬脂酸镁和矿物油、羟基苯甲酸丙酯、滑石、硬脂酸镁和矿物油、糊精、碳酸钙、糊精、碳酸钙、丙二醇、液体石蜡和生理盐水组成的组中的一种以上,但不限于此,并且常规的载体、赋形剂或稀释剂均可使用。
上述成分可以独立或组合添加到上述有效成分中。
上述药学组合物的剂型可根据使用方法而改变,并且可以使用本发明所属技术领域众所周知的方法来剂型化使得在对哺乳动物投送后可提供活性成分的快速、持续或延缓的释放。作为上述剂型的实例,可以是选自由软膏、霜、片剂、丸剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂、悬浮剂、内用液剂、乳剂、糖浆剂、水溶液、非水性溶剂、悬浮剂和油剂组成的组中的剂型。
为了上述剂型,还可以包含赋形剂,作为一个实例,常规的填充剂、增量剂、结合剂、崩解剂、表面活性剂、抗凝集剂、润滑剂、湿润剂、香料、乳化剂、防腐剂、甜味剂、芳香剂或保存剂等。
一般来说,用于口服投送的固体制剂中包括片剂(TABLETS)、药片、软质或硬质胶囊剂(CAPSULES)、丸剂(PILLS)、散剂(POWDERS)和颗粒剂(GRANULES)等,这些制剂可以混合一种以上的赋形剂例如,淀粉、碳酸钙(calcium carbonate)、蔗糖(sucrose)或乳糖(lactose)、明胶等而调制。另外,除了单纯的赋形剂之外,还可以使用硬脂酸镁、滑石等润滑剂。
另外,用于口服投送的液状制剂中包括悬浮剂(SUSTESIONS)、内用液剂、乳剂(EMULSIONS)和糖浆剂(SYRUPS)等,除了通常使用的单纯稀释剂的水或液体石蜡之外,还可以包括多种赋形剂,例如湿润剂、甜味剂、芳香剂、保存剂等。
作为用于皮肤投送而可提及的实例,有适合生成撒布剂(dusting powder)、乳状液(乳剂,emulsion)、悬浮液、油、喷雾、软膏、含脂软膏(greasy ointment)、霜膏、凝胶、泡沫或溶液并且适于经皮药物传递体(TTS:透皮给药系统,Transdermaltherapeuticsystem)的载体和/或赋形剂。本发明的局部用药学制剂可以是半固体状剂型,特别是,有软膏(溶液软膏、悬浮液软膏)、霜、凝胶或膏。乳状中主要使用的有脂肪醇例如月桂醇、鲸蜡醇、硬脂醇,脂肪酸例如棕榈酸或硬脂酸,液状或固体状石蜡或地蜡,液状或固体状蜡例如肉豆蔻酸异丙酯,天然脂肪或一部分合成脂肪例如椰子脂肪酸甘油三酯,硬化油例如氢化花生油或蓖麻油,或甘油的脂肪酸部分酯例如甘油单硬脂酸酯或甘油二硬脂酸酯。作为合适的乳化剂,有表面活性剂,例如非离子表面活性剂,例如多元醇或其氧化乙烯加成物的脂肪酸酯,例如聚甘油脂肪酸酯或聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯,失水山梨醇脂肪酸酯,例如失水山梨醇油酸酯或失水山梨醇异硬脂酸酯等,异硬脂酸酯、甾醇或聚氧乙烯脂肪醇醚或脂肪酸酯;例如阴离子表面活性剂,例如脂肪醇磺酸酯的碱金属盐,例如月桂基硫酸钠(sodium lauryl sulfate)、鲸蜡基硫酸钠(sodium cetyl sulfate)或硬脂基硫酸钠(sodium stearyl sulfate),它们通常在上述脂肪醇,例如鲸蜡醇或硬脂醇的存在下使用。其中,特别是,可将防止霜干燥的制剂,例如多元醇如甘油、山梨糖醇、丙二醇或聚乙二醇添加到水相中,或者将保存剂、香料等添加到水相中。
本发明的药学制剂可以是无水状态的软膏,适合局部用途,含有在体温状态下为液体的石蜡、特别是低粘度石蜡,或者可以含有上述天然脂肪或部分合成脂肪例如椰子脂肪酸甘油三酯,硬化油例如氢化花生油或蓖麻油,甘油的脂肪酸部分酯例如甘油单硬脂酸酯和二硬脂酸酯,有机硅例如聚甲基硅氧烷,例如六甲基二硅氧烷或八甲基三硅氧烷,例如可以含有与水性霜有关联并增加水分吸收容量的脂肪醇,以及甾醇、羊毛蜡(wool wax)、其他乳化剂和/或其他添加剂。
在本发明中,当将上述药学组合物剂型化为医药品时,可以参考Remington'sPharmaceutical Science,Mack Publishing Company,Easton PA中公开的内容,并且上述文献作为本说明书的一部分而包括其中。
上述药学组合物可以是医药外品组合物。
在本说明书中,“医药外品”是指表现出对疾病的治疗、减轻、处置或预防的效果,但对人体产生的作用比医药品轻微的物品。不包括根据药事法的用于医药品用途的物品,包括保健福祉部另行规定的分类标准的物品。具体地可以是皮肤外用剂或个人卫生用品,但不限于此。
当将本发明的组合物以预防、改善或治疗皮肤角质剥离或皮肤状态改善为目的添加到医药外品组合物中时,可将上述组合物直接添加或与其他医药外品成分一起使用,并且可根据常规方法适当使用。有效成分的混合量可根据使用目的而适当决定。
上述皮肤外用剂并不特别限于此,但例如可以制备成软膏剂、露(lotion)剂、喷雾剂、贴片剂、霜剂、散剂、悬浮剂、凝胶剂或凝胶的形式而使用。上述个人卫生用品并不特别限于此,但具体地可以是皂、化妆品、湿纸巾、卫生纸、洗发水、润肤霜、面霜、牙膏、唇膏(lipstick)、香水、彩妆、粉底、腮红、睫毛膏、眼影、防晒露、毛发护理产品、空气清新剂(airfreshener)凝胶或清洗凝胶。另外,作为本发明的医药外品组合物的其他实例,有消毒清洁剂、淋浴泡沫、湿纸巾、洗剂皂、洗手液、面膜(mask)或软膏剂。
除非另有说明,否则以上本说明书中记载的数值应被解释为包括均等范围。
发明效果
根据本发明的组合物可以通过改善蛋白质分解酶在组合物中的稳定性降低和由此引起的角质剥离效果降低,提供具有提高的角质剥离和皮肤状态改善效果的安全且稳定的组合物。
附图说明
图1示出单独使用本发明的蛋白质分解酶时,角质剥离效果优于化学剥离材料葡糖酸内酯(PHA)。
图2示出本发明的蛋白质分解酶、糖醇和丝氨酸的混合组合物,与化学剥离材料葡糖酸内酯(PHA)、单独的糖醇、单独的丝氨酸、单独的蛋白质分解酶、糖醇和丝氨酸混合物、蛋白质分解酶和糖醇混合物、蛋白质分解酶和丝氨酸混合物相比,角质剥离效果优异。
图3示出本发明的糖醇和丝氨酸延长了蛋白质分解酶的角质剥离能力维持时间。
图4示出本发明的包含蛋白质分解酶、糖醇和丝氨酸的组合物改善皮肤纹理和毛孔的效果。
图5示出含有本发明的包含蛋白质分解酶、糖醇和丝氨酸的组合物的剂型改善毛孔和皱纹的效果。
具体实施方式
通过参考后面详细描述的实验例和制备例,本发明的优点和特征以及实现这些的方法将变得明确。但是,本发明并不限于以下公开的实验例和制备例,而将以各种不同的形式实现,并且只是为了使本发明的公开完整,并向本发明所属技术领域的普通技术人员完整地告知发明的范畴而提供的。
[实施例]
实施例1.蛋白质分解酶的角质剥离效果
用纸巾按压猪皮(Medi Kenitics,2.5cm x 2.5cm x 1000um)去除水分,然后利用用乙醇消毒的6mm打孔机(punch)打孔。将猪皮切片的表皮部分朝上放入96孔板中,对于各实验群,完全浸泡在设定浓度的原料125ul中,然后在37℃下保管20小时(湿度50%)。之后,利用细胞计数芯片计算脱落在溶液中的角质细胞的个数,并测量角质剥离功效。
作为对照群使用水,作为PHA使用葡糖酸内酯,蛋白质分解酶使用角蛋白酶(Keratinase,LCS生物技术)。
蛋白质分解酶的处理群用包含0.005w/w%、0.0075w/w%、0.01w/w%、0.05w/w%、0.1w/w%或1w/w%的蛋白质分解酶即角蛋白酶、2w/w%的己二醇和余量的纯净水的组合物进行实验。
化学剥离材料处理群在PHA 10w/w%组合物中,在葡糖酸内酯的角质剥离功效最高的pH 4条件和普通免洗(leave-on)化妆品剂型中通常使用的条件即pH 6条件下分别确认了角质剥离程度。在本实验中,将因纯净水而脱落的角质剥离量设为0,将在PHA 10w/w%(pH 4)实验群中脱落的角质剥离量换算为100时,计算蛋白质分解酶引起的角质剥离量。
其结果,如图1所示,确认了0.005w/w%蛋白质分解酶的角质剥离功效(51.1%)高于通常在化妆品中使用的PHA 10w/w%(pH 6)的角质剥离功效(30.9%)。确认了随着蛋白质分解酶的浓度增加,角质剥离功效也增加,并且确认了在0.05w/w%以上的浓度下,功效出现饱和,因此不会出现角质剥离效果的增加。
实施例2.确认包含蛋白质分解酶、糖醇和丝氨酸的组合物的角质剥离增强效果通过与上述实施例1相同的方法确认了角质剥离效果。
对照群仅用纯净水处理,PHA处理群利用了葡糖酸内酯10w/w%溶液(pH4)和葡糖酸内酯10w/w%溶液(pH6)(图2中,PHA pH 4和PHA pH 6)。糖醇以混合物形式利用,具体地相对于整个组合物包含甘油5w/w%、山梨糖醇5w/w%、DPG 5w/w%、1,3-BG 5w/w%和赤藓糖醇2w/w%。丝氨酸利用了0.5w/w%L-丝氨酸氨基酸溶液(pH6)。
蛋白质分解酶使用了角蛋白酶(Keratinase,LCS生物技术),蛋白质分解酶以0.01w/w%浓度包含而进行实验(图2中,蛋白酶(protease))。
当包含蛋白酶、丝氨酸和糖醇(糖醇混合物)全部时,使用了在整个组合物100%中包含角蛋白酶0.01w/w%、丝氨酸0.5w/w%、甘油5w/w%、山梨糖醇5w/w%、DPG 5w/w%、1,3-BG 5w/w%、赤藓糖醇2w/w%、己二醇0.02w/w%和余量的纯净水77.47w/w%的组合物。
以与实施例1相同的方法,在各处理群中确认了角质剥离效果,特别是当分别组合蛋白质分解酶、丝氨酸和糖醇时,确认了蛋白质分解酶对角质剥离功效的影响。
其结果,如图2所示,糖醇混合物没有表现出角质剥离功效(2.3%),并且当单独处理丝氨酸时,确认了具有约37%的角质剥离能力。在混合丝氨酸和糖醇的实验群中,在角质剥离能力上没有表现出提高的效果。
令人惊讶的是,可以确认将丝氨酸(0.5w/w%)和蛋白质分解酶(0.01w/w%)组合并处理时,以及将蛋白质分解酶与糖醇一起处理时(176%),蛋白质分解酶的角质剥离能力显著增加,并且将蛋白质分解酶、丝氨酸和糖醇成分全部组合时,角质剥离能力进一步显著提高(223.1%)。因此,可以看出,蛋白质分解酶与丝氨酸和/或糖醇组合时,在角质剥离中具有组合所带来的协同效果。
另外,在上述相同条件下,改变丝氨酸和蛋白质分解酶的浓度并确认角质剥离效果。分别单独处理0.5w/w%丝氨酸和0.005w/w%角蛋白酶,或者将丝氨酸和角蛋白酶复合处理来确认角质剥离能力的结果,确认了分别单独处理0.5w/w%丝氨酸和0.005w/w%角蛋白酶时,分别显示出23%和53%的角质剥离效果,但同时使用两种成分时,角质剥离效果提高至86%,从而可以看出可以提供两种成分的组合所带来的协同效果。
实施例3.糖醇和丝氨酸对蛋白质分解酶的蛋白质分解活性维持
为了测量蛋白质分解酶的活性,进行了清亮区域试验(clear zone assay)。将6mm纸盘置于含有琼脂糖1w/w%、脱脂奶粉0.5w/w%的培养基上,并在纸盘上分注含有蛋白质分解酶的溶液40uL。溶液干透后翻转,在恒温恒湿器(37℃,湿度50%)中保管24小时。之后,通过测量透明部分的直径来测量蛋白质分解能力。蛋白质分解活性的维持通过将在苛刻条件50度下保管2周后的蛋白质分解能力与第0天的蛋白质分解能力(直径,mm)进行比较来测量。如果与第0天的蛋白质分解能力相比,维持25%以上,则评价为留有活性。
测定了增强角质剥离功效的糖醇是否也能增强活性维持。此处,蛋白质分解酶使用了木瓜蛋白酶(0.5w/w%)。如果木瓜蛋白酶在水溶液状态下在50℃下保管2周,则基于第0天,蛋白质分解活性降至0%。在上述木瓜蛋白酶(0.5w/w%)中,基于组合物总浓度,分别混合甘油5w/w%、甘油20w/w%、山梨糖醇5w/w%、山梨糖醇20w/w%、木糖醇20w/w%、赤藓糖醇2w/w%、1,3-丁二醇(1,3-BG)5w/w%或DPG 5w/w%,并确认在50℃条件下保管2周后是否仍维持活性。
另外,相对于整个组合物,包含22w/w%的糖醇混合物。具体地,相对于整个组合物,包含甘油5w/w%、山梨糖醇5w/w%、DPG 5w/w%、1,3-BG 5w/w%和赤藓糖醇2w/w%并且添加丝氨酸0.5w/w%的条件下也确认了木瓜蛋白酶的活性得到维持。
作为对照群使用了泊洛沙姆1w/w%或抗氧化剂曲克芦丁(troxerutin)3w/w%,在相同的条件下确认了木瓜蛋白酶是否维持活性。
由此确认了以下事实,糖醇和丝氨酸不仅增强角质剥离功效,而且还有助于维持蛋白质分解酶的活性(表1)。
[表1]
实施例4.糖醇和丝氨酸对蛋白质分解酶的角质剥离效果增强的维持
对于角质剥离功效,以与实施例1相同的方式进行了实验。对照群为纯净水,PHApH 4为葡糖酸内酯10w/w%和pH 4,PHApH 6为葡糖酸内酯10w/w%和pH 6条件。糖醇以糖醇混合物形式包含,具体地,相对于整个组合物,包含甘油5w/w%、山梨糖醇5w/w%、DPG 5w/w%、1,3-BG 5w/w%和赤藓糖醇2w/w%。丝氨酸利用了L-丝氨酸氨基酸0.5w/w%,pH 6条件。蛋白质分解酶使用了角蛋白酶(Keratinase,LCS生物技术),蛋白质分解酶的浓度以相对于整体的0.01w/w%浓度进行实验。
确认了如果将蛋白质分解酶在50℃下保管2周,则角质剥离效果比初始值减少70%以上,从而与第0周相比剩余活性为约28%左右(130.3%->36.2%)。在蛋白质分解酶中添加丝氨酸和糖醇混合物后在50℃下保管2周时,与第0周相比,剩余活性维持约71%左右,从而可以看出角质剥离功效的减少程度缓解到30%以内。由此可以看出,丝氨酸和糖醇混合物不仅增强蛋白质分解酶的角质剥离效果,而且增强的角质剥离功效维持更长时间(图3)。
实施例5.确认蛋白质分解酶、糖醇和丝氨酸的混合组合物即时改善皮肤纹理和毛孔的效果
将下表2的剂型早晚涂敷2次后,测量了下巴部位的皮肤纹理以及毛孔是否得到改善(n=1)。测量使用了Antera(Miravex Limited),对于皮肤纹理,测量了比皮肤平均表面突出的凹凸中具有直径0.1-1mm尺寸的凹凸的体积和高度。对于毛孔,测量了皮肤毛孔中直径为0.5mm以下的毛孔的体积以及每单位面积的毛孔的个数。
[表2]
原料名称 | 含量(%) |
生物-透明质酸钠 | 0.01 |
KELTROL F | 0.06 |
纯净水 | 47.205 |
角蛋白酶H | 1 |
山梨糖醇 | 5 |
1,3-BG | 5 |
DPG | 5 |
ELOGLYN R98F BULK | 5 |
丙二醇(Zemea Select Propanediol) | 5 |
HEPES | 4 |
海藻糖(Treha) | 2 |
Coemdiol | 2 |
NACL(液体洗剂、hanju盐) | 1.5 |
Genencare OSTMA BA(氨基酸保湿剂(AMINO COAT)) | 1 |
D-泛醇98%USP | 1 |
EDTA 3NA | 0.025 |
尿囊素 | 0.1 |
丝氨酸 | 1 |
Arlamol HD(PUROLAN IHD) | 8 |
澳洲坚果油 | 4 |
PMX-0345(DC 345) | 1 |
肉荳蔻L1 | 1 |
胡萝卜油 | 0.1 |
合计 | 100 |
如图4所示,在使用表2的组合物的情况下,2次使用后凹凸的体积和毛孔的体积、个数减少,皮肤凹凸的体积和高度得到缓解,从而在视觉上确认了改善皮肤纹理和改善毛孔的效果。
实施例6.确认含有蛋白质分解酶、糖醇和丝氨酸的混合组合物的剂型改善毛孔和皱纹的效果
将下表3的剂型早晚每天两次涂敷4周后,测量了皱纹和毛孔是否得到改善(n=7)。使用Janus皮肤诊断仪(PIE Co.,Ltd.)进行测量,皱纹和毛孔测量部位为整个面部。
[表3]用于皱纹和毛孔改善人体试验评价的剂型
纯净水 | 61.100 |
生物透明质酸钠 | 0.500 |
EDTA 3NA(5%) | 0.400 |
CARBOPOL 981 | 0.200 |
PEMULEN TR2 | 0.050 |
D-泛醇98%USP | 1.000 |
1,3-BG | 5.000 |
山梨糖醇 | 5.000 |
Pentavitin | 2.000 |
尿囊素 | 0.100 |
丝氨酶 | 0.500 |
DPG-FG | 5.000 |
Coemdiol | 1.500 |
ELOGLYN R98F甘油BULK | 5.000 |
DC SH 200/6Cs(SF1000NFX006) | 4.000 |
SF1202 | 1.000 |
Croduret 60-so-(SG) | 0.400 |
氨丁三醇(TRIS AMINO ULTRA PC)(10%) | 2.250 |
角蛋白酶H | 5.000 |
100.000 |
如图5所示,确认了当将表3的组合物涂敷在皮肤上时,毛孔的个数减少,皱纹的深度减少。
Claims (14)
1.一种用于剥离角质的组合物,其包含蛋白质分解酶和糖醇和/或丝氨酸。
2.如权利要求1所述的用于剥离角质的组合物,其中,上述组合物包含蛋白质分解酶、糖醇和丝氨酸。
3.如权利要求1所述的用于剥离角质的组合物,其中,上述蛋白质分解酶是选自由木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、角蛋白酶(Keratinase)和枯草杆菌蛋白酶(subtilisin)组成的组中的一种以上。
4.如权利要求1所述的用于剥离角质的组合物,其中,上述糖醇是选自由甘油、赤藓糖醇(erythritol)、山梨糖醇、苏糖醇(threitol)、阿拉伯糖醇(arabitol)、木糖醇(xylitol)、甘露糖醇(mannitol)、山梨糖醇(sorbitol)、乙基乙二醇、丙二醇、二丙二醇(Dipropylene Glycol;DPG)和丁二醇组成的组中的一种以上。
5.一种用于改善皮肤状态的组合物,其包含蛋白质分解酶和糖醇。
6.如权利要求5所述的用于改善皮肤状态的组合物,其还包含上述丝氨酸。
7.如权利要求5所述的用于改善皮肤状态的组合物,其中,上述蛋白质分解酶是选自由木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、角蛋白酶(Keratinase)和枯草杆菌蛋白酶(subtilisin)组成的组中的一种以上。
8.如权利要求5所述的用于改善皮肤状态的组合物,其中,上述糖醇是选自由甘油、赤藓糖醇(erythritol)、山梨糖醇、苏糖醇(threitol)、阿拉伯糖醇(arabitol)、木糖醇(xylitol)、甘露糖醇(mannitol)、山梨糖醇(sorbitol)、乙基乙二醇、丙二醇、二丙二醇(Dipropylene Glycol;DPG)和丁二醇组成的组中的一种以上。
9.如权利要求5所述的用于改善皮肤状态的组合物,其中,上述改善皮肤状态是改善皮肤纹理,改善肤色,改善、收缩或减少皮肤毛孔,或改善皮肤皱纹。
10.一种用于预防或治疗皮肤角化症的药学组合物,其包含蛋白质分解酶和糖醇。
11.如权利要求10所述的药学组合物,其还包含丝氨酸。
12.如权利要求10所述的药学组合物,其中,上述蛋白质分解酶是选自由木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、角蛋白酶(Keratinase)和枯草杆菌蛋白酶(subtilisin)组成的组中的一种以上。
13.如权利要求10所述的药学组合物,其中,上述糖醇是选自由甘油、赤藓糖醇(erythritol)、山梨糖醇、苏糖醇(threitol)、阿拉伯糖醇(arabitol)、木糖醇(xylitol)、甘露糖醇(mannitol)、山梨糖醇(sorbitol)、乙基乙二醇、丙二醇、二丙二醇(DipropyleneGlycol;DPG)和丁二醇组成的组中的一种以上。
14.一种预防或治疗皮肤角化症的方法,包括:
将包含蛋白质分解酶和糖醇的药学组合物投送于或涂敷于需要预防或治疗皮肤角化症的对象体或对象体皮肤的步骤;以及
抑制或减少皮肤角化症在上述对象体或对象体皮肤中发生的步骤。
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