CN116284310A - 基于利什曼原虫k26重组抗原的检测黑热病循环抗体的免疫层析试条 - Google Patents
基于利什曼原虫k26重组抗原的检测黑热病循环抗体的免疫层析试条 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种利什曼原虫K26重组抗原，作为免疫学方法检测亲内脏利什曼原虫感染体内循环抗体的靶向分子。本发明还提供了一种基于利什曼原虫K26重组抗原的检测黑热病循环抗体的免疫层析试条，包括一个样品垫，样品垫的一端紧密连接于含有胶体金标记探针的胶体金探针垫的一端，含有胶体金标记探针的胶体金探针垫的另外一端与纤维素膜的一端紧密连接，纤维素膜的另外一端紧密连接吸水垫的一端，所述胶体金探针垫包含由胶体金标记的金黄色葡萄球菌A蛋白或链球菌G蛋白探针组成。所述检测线为利什曼原虫K26重组抗原；所述质控线由特异性结合所述胶体金标记探针二抗抗体组成。本发明具有简便性、敏感性、特异性和快速性的优点。
Description
技术领域
本发明属于生物检测领域，涉及免疫层析试条，具体来说是一种基于利什曼原虫K26重组抗原的检测黑热病循环抗体的免疫层析试条。
背景技术
内脏利什曼病或称黑热病，是由杜氏利什曼原虫种团(Leishmania donovanicomplex)或婴儿利什曼原虫(L.infantum)/恰氏利什曼原虫(L.chagasi)的原虫寄生于人体的淋巴—巨噬细胞系统所引起的一种寄生虫病，由媒介白蛉叮咬传播。该病在世界范围内流行甚广，准确检测感染和诊断是监测工作急需和治疗的关键所在，因此，对黑热病诊断技术的研究始终受到重视。
以骨髓、脾等穿刺物涂片染色镜检的方法是黑热病最古老的诊断方法，迄今仍是黑热病诊断的“金标准”。国外报道显示骨髓和淋巴结穿刺物涂片镜检敏感性分别为60％～75％和30％～50％，国内报道以骨髓、淋巴结、脾穿刺涂片镜检检出率依次为:80～90％、46～87％、96～98％。由于这种检测方法对操作人员的技术要求非常高，在疾病诊断与流行病学调查中应用受到限制。
免疫学方法在黑热病诊断上的应用越来越受到重视，最有效的免疫学诊断方法是应用纯化天然抗原或重组抗原检测黑热病人特异抗体，常用检测方法有间接血凝法(Indirect haemagglutination assay；IHA)、酶联免疫吸附法(Enzyme linkedimmunosorbent assay；ELISA)、酶联免疫电转移印渍法(Enzyme-linkedimmunoelectrotransfer blot assay；EITBA),以及金标免疫点印渍法(Gold-labelleddot blotting；GDB；俗称膜法或渗滤法)和免疫层析试条法(Immunochromatographicstrip test；ICT)。
其中免疫层析试条法(ICT)因其不需要冷链系统保存试剂，操作简单，结果快速直观，对仪器设备及操作人员的要求低，非常适合现场使用。
这些方法的性能高度依赖于抗原的类型，来源和纯度。利什曼原虫粗抗原检测敏感性高，但存在不易标准化的问题，为了获得实用的有较高敏感性和特异性的抗原，研究者致力于生产新的不同的重组抗原用于内脏利什曼病的诊断。Burns等从恰氏利什曼原虫的类Kinesin基因中获得了基因片段K39，并证实其存在于所有引起内脏利什曼病的利什曼原虫虫种(株)中。美国InBios公司以此基因片段的重组抗原K39(Recombinant K39,rK39)制备的免疫层析试条在现场应用中取得较好的效果，是目前唯一商品化的快速检测内脏利什曼病的产品，但该试剂盒价格昂贵，从而限制了该试剂盒的推广和普及。因此，亟待开发我国自己的检测黑热病试剂盒。
有研究者从恰氏利什曼原虫中鉴定出了另一种很有前景的诊断抗原K26抗原，K26蛋白也被称为亲水性酰化表面蛋白B(hydrophilic acylated surface protein B，HASPB)，在硕大利什曼原虫中又称基因B蛋白(GBP)，存在于前鞭毛体和无鞭毛体的质膜上。K26抗原编码基因编码含有多个由10～11个氨基酸残基构成的重复序列。有报道表明，在ELISA试验中，rK26的敏感性高于rK39，特别是在感染的早期。但不同的利什曼原虫研究结果存在差异。
发明内容
本发明提供一种基于利什曼原虫K26重组抗原的检测黑热病循环抗体的免疫层析试条，所述的这种基于利什曼原虫K26重组抗原的检测黑热病循环抗体的免疫层析试条要解决现有技术的方法检测黑热病操作繁琐、成本高昂的技术问题。
本发明提供了一种利什曼原虫K26重组抗原，作为免疫学方法检测亲内脏利什曼原虫感染体内循环抗体的靶向分子，所述利什曼原虫K26重组抗原核苷酸序列如SEQ IDNO：1所示，氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示：
本发明还提供了本一种基于利什曼原虫K26重组抗原的检测黑热病循环抗体的免疫层析试条，包括一个样品垫，所述的样品垫的一端紧密连接于含有胶体金标记探针的胶体金探针垫的一端，所述的含有胶体金标记探针的胶体金探针垫的另外一端与纤维素膜的一端紧密连接，所述的纤维素膜的另外一端紧密连接吸水垫的一端，所述胶体金探针垫是由胶体金标记的金黄色葡萄球菌A蛋白或链球菌G蛋白探针组成，所述纤维素膜上靠近胶体金探针垫的一端分别设置一条检测线，由权利要求1所述的利什曼原虫K26重组抗原组成，在检测线和吸水垫之间的纤维素膜上设置一条质控线，所述的质控线由特异性结合所述胶体金标记探针二抗抗体组成。
进一步的，免疫层析试条背面设置一个起支撑作用的背板。
进一步的，将所述带有背板的免疫层析试条装入一个盒体中，该盒体对应于样品垫的部位设有加样孔，对应于检测线和质控线的部位设有观测窗以及检测线和质控线的位置标识。
进一步的，所述的利什曼原虫K26重组抗原按如下方法制备：K26核苷酸序列如SEQID NO：1全基因合成，通过BamHI与XhoI插入到pET32a载体中，构建K26重组蛋白表达载体。将表达载体转化至E.coli DH5a，扩增培养后提取质粒，测序验证序列正确者，转化入E.coli BL21(DE3)感受态中，挑取单克隆在1mM的IPTG条件下37℃诱导4h。使用蛋白抽提剂，蛋白酶抑制剂、核酸酶和溶菌酶裂解表达细菌，用HisTrap FF亲和层析柱纯化表达产物。
具体的，所述纤维素膜可以是硝酸纤维素膜(NC膜)或醋酸纤维素膜或混合膜；所述胶体金探针垫为玻璃纤维膜或聚脂纤维膜；所述样品垫可以是玻璃纤维或聚酯纤维或混合纤维；所述吸水垫由吸水材料制备，如吸水纸。
具体的，所述纤维素膜宽度控制在20～30mm；所述吸水垫可宽度为20～40mm，所述胶体金探针垫的宽度为5～10mm；所述样品垫宽度为10～40mm。
进一步的，检测线上的利什曼原虫K26重组抗原工作浓度为0.1～2.0mg/mL，喷涂量为0.5～1μL/cm；质控线二抗抗体工作浓度为0.1～2.0mg/mL，喷涂量为0.5～1μL/cm；胶体金标记的金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)或链球菌G蛋白(SPG)探针的工作浓度(以蛋白浓度计)：8～40μg/mL，喷涂量为40～50μL/cm。
进一步的，所述的免疫层析试条背面设置一个起支撑作用的背板，背板材料的选择是多种多样的，可以是塑料板，如聚氯乙烯板(PVC)等。
进一步的，将所述带有背板的免疫层析试条切成3～5mm宽，装入一个盒体中，该盒体对应于样品垫的部位设有加样孔，对应于检测线和质控线的部位设有观测窗以及检测线和质控线的位置标识。
本发明分别采用胶体金标记的金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)或链球菌G蛋白(SPG)作为检测探针，附着于胶体金探针垫上。检测过程中，复溶的胶体金标记探针可以与受试者血样中的循环抗体特异性结合，形成抗体探针复合物。
本发明将利什曼原虫K26重组抗原固定在纤维素膜上，形成一条检测线。当受试者血样流过检测线时，抗体探针复合物会捕获固定在纤维素膜上的利什曼原虫K26重组抗原，形成肉眼可见的沉淀线(色带)。
本发明将可与检测探针特异性结合的二抗抗体固定在纤维素膜上作为质控线。胶体金标记探针是金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)或链球菌G蛋白(SPG)，相应的质控线采用抗金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)或链球菌G蛋白(SPG)的IgG抗体。无论待检样品中是否含有K26重组抗原的抗体，本发明的诊断试条质控线位置总能形成色带，该条色带是判定检测过程是否正常和诊断试条是否变质的标准。
与胶体金标记探针特异性结合的质控线不限于使用抗金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)或链球菌G蛋白(SPG)的IgG抗体，也可采用金黄色葡萄球菌A蛋白，链球菌G蛋白，或者采用其他动物的单抗或多抗，同样能实现本发明的发明目的，这是领域的一般技术人员都知晓的。
本发明的免疫层析试条具有以下优点：
(1)敏感性及特异性高：实验室考核结果显示，本发明的免疫层析试条总的敏感性为91.82％，特异性为100.00％；
(2)检测方法简单、快速：检测过程中标本处理简单，血清或全血都可以直接使用，无需处理，不需要专门仪器和人员培训，非专业技术人员按照说明书即可操作，并可迅速观察结果，标本中的抗体经5～10分钟左右的纸层析后，即可出现肉眼可见的沉淀线，从而为黑热病人的治疗争取了时间，很适合现场和基层使用；
(3)本发明的免疫层析试条可以同时应用与人、畜和野生动物感染的现场检测，有助于寻找确定传染源，在疾病预防控制工作中有重要意义；
(4)稳定性好，易于保存。成本低廉，易于进行工业化生产。本发明将在检测亲内脏利什曼原虫感染和诊断黑热病及其相关疾病的诊断和治疗中发挥重要作用，应用前景广阔。
(5)本发明的免疫层析试条检测亲内脏利什曼原虫感染(黑热病)的体内循环抗体，具有简便性、敏感性、特异性和快速性的优点，适于临床和现场使用。
附图说明
图1是本发明的基于利什曼原虫K26重组抗原的检测黑热病循环抗体的免疫层析试条的正面、纵截面的结构示意图。其中：1为样品垫；2为胶体金探针垫；3为纤维素膜；4为吸水垫；5为检测线；6为质控线；7为背板。
图2是本发明的基于利什曼原虫K26重组抗原的检测黑热病循环抗体的免疫试纸条的检测卡结果判读示意图。其中：11为试纸条检测卡；12为观测窗；13为加样孔；14(T)为检测卡上检测线的位置标识；15(C)为检测卡上质控线的位置标识。图中检测卡A判为阴性；检测卡B判为亲利什曼原虫感染(黑热病)阳性；检测卡C、D判为无效检测。
具体实施方式
下面结合具体实施例，进一步阐明本发明，应理解这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围，在阅读了本发明之后，本领域技术人员对本发明的各种等价形式的修改均落于本申请所附权利要求所限定的范围。
实施例1利什曼原虫K26重组抗原的制备
1.目的基因的克隆、转化
本发明使用利什曼原虫MHOM/CN/1986/SC6分离株(虫株来自实验室保存，分离于四川九寨沟县黑热病患者)，扩增出K26的基因序列(已提交至GenBank，获得登录号Accession no.MN688116)【参考文献：刘建秀,高春花,杨玥涛,郑彬,汪俊云.利什曼原虫K26序列应用于我国利什曼原虫分离株鉴定的价值分析[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志,2020,38(2):181-187.】。利什曼原虫K26重组抗原核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，利什曼原虫K26重组抗原氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。
本发明委托上海生工生物工程有限公司对扩增出的K26的基因序列进行全基因合成，并加入BamHI与XhoI酶切位点，将目的基因和BamHI与XhoI双酶切的pET32a表达载体用T4连接酶连接，连接体系如下，连接反应条件：16℃下过夜连接取5μL连接产物转化E.coliDH5a细胞，具体方法为：将5μL的连接产物与200μL E.coli DH5a感受态细胞混匀，冰浴30分钟，之后于42℃水浴热休克90秒钟，再置于冰上1-2分钟，然后加入800μL预热的SOC培养基，37℃，200rpm震荡培养45分钟，取200μL菌液涂LB+Amp平板，倒置于37℃温箱过夜培养。在平板中挑取5-10个单菌落，分别置于5mL LB+Amp液体培养基中，37℃，200rpm过夜震荡培养，送生工生物技术有限公司测序检测连接是否成功，将连接成功的重组载体，用OMEGA公司的PlasmidMini Kit I抽提质粒，取1μL质粒照以上方法转化E.coli BL21(DE3)细胞。同时取1μLpET32a空载体转化E.coli DH5a细胞。
2.重组蛋白的大量表达
取确定表达的E.coli BL21(DE3)单菌落接种到10ml LB培养基中，37℃，165rpm过夜复活菌种。次日，按10％的接种量将复活菌种转接至1000mL LB培养基中，37℃，165rpm培养至OD600达到0.8-1.0时用1mM的IPTG，于37℃，200rpm诱导4h。将表达好的菌于4℃，4500rpm，离心10min，弃上清，沉淀用20mL 1xPBS重悬后再次4℃，8000rpm，离心10min后收集菌体。将收集的菌体用20mL BugBuster蛋白抽提剂(Novagen)(5mL抽提剂/g菌)，依次加入1片complete蛋白酶抑制剂、20μL Benzonase核酸酶、0.6μL Ylysozyme Soution溶菌酶充分重悬沉淀后，置于摇床上，室温振荡40-60min。4℃，13000rpm，离心45min，重复离心一次，收集上清并过0.22μm滤膜。
3.重组蛋白的纯化
目的蛋白带有6个组氨酸亲和纯化标签，采用GE公司HisTrap FF亲和层析柱进行纯化。具体操作方法按照纯化柱的说明书进行。简言之，以Buffer A平衡亲和柱(流速5mL/min)，上样(流速1mL/min)，上样结束后Buffer A漂洗亲和柱40min(流速5mL/min)然后以10％的Buffer B漂洗亲和柱40min(5mL/min)，最后用100％ Buffer B洗脱目的蛋白。获得重组蛋白的浓度为1.6mg/mL。
实施例2基于利什曼原虫K26重组抗原的检测黑热病循环抗体的免疫层析试条的制备
1.利什曼原虫K26重组抗原由实施例1制备所得；链球菌G蛋白(SPG)由购买获得(上海业力生物科技有限公司)；羊抗人IgG由购买获得(Cohesion
Biosciences公司)。
2.链球菌G蛋白(SPG)胶体金探针溶液的制备
(1)用柠檬酸还原法制备胶体金：将质量百分比浓度为0.01％的HAuCl4(上海国药集团化学试剂有限公司)水溶液煮沸，搅拌下加入2mL质量百分比浓度为1％的柠檬酸三钠水溶液，继续煮沸，直到液体呈深红色，得到胶体金溶液。
(2)免疫胶体金探针垫的制备：用0.1M K2CO3溶液调节pH值至6.0，每100mL胶体金溶液加入链球菌G蛋白为10μg/mL，搅拌1小时，再加入终浓度为0.05％ PEG20000，搅拌30min，再加入PEG20000至终浓度为0.05％，搅拌30min，10000rpm离心30min，弃上清，用10mM，pH7.5的HEPES缓冲液洗涤沉淀，并将其复溶于15mL含15％蔗糖的10mM，pH7.5的HEPES缓冲液中，得到链球菌G蛋白胶体金探针溶液。
3.上述链球菌G蛋白胶体金探针溶液1200μL，喷涂到长300mm、宽80mm的玻璃纤维垫(Ahlstrom公司)上，37℃下干燥0.5小时，得到述链球菌G蛋白胶体金探针垫。
4.快速诊断免疫试纸条的包被和装配
5.如图1所示，为基于利什曼原虫K26重组抗原的检测黑热病循环抗体的免疫层析试条的正面/纵截面结构图，试纸条由样品垫(图1-1)、胶体金探针垫(图1-2)、硝酸纤维素膜(图1-3)和吸水垫(图1-4)四部分粘贴在PVC背板(图1-7)上组成；样品垫(图1-1)、胶体金探针垫(图1-2)、硝酸纤维素膜(图1-3)和吸水垫(图1-4)依次相邻紧密接触；硝酸纤维素膜上设有一条检测线(图1-5)和一条质控线(图1-6)。该试纸条的制备方法包括以下步骤：
(1)硝酸纤维素膜的包被：选择长300mm、宽20mm的硝酸纤维素膜(Sartorius公司)。将利什曼原虫K26重组抗原用10mM，pH7.4的磷酸缓冲液(PBS)
配制到0.5mg/mL，用BIODOT公司XZ1000点样机包被于硝酸纤维素膜靠底边Y＝8.0mm处，形成一条检测线(图1-5)；将羊抗人IgG用10mM，pH7.4的磷酸缓冲液配制到0.3mg/mL，用点样机包被于硝酸纤维素膜靠底边Y＝12.0mm处，形成一条质控线(图1-6)；包被好的硝酸纤维素膜置37℃下干燥2小时。
(2)基于利什曼原虫K26重组抗原的检测黑热病循环抗体的免疫层析试条的制备：用一块单面涂了不干胶的PVC底板(图1-7)，中间粘贴上处理好的上述硝酸纤维素膜(图1-3)；膜靠近质控线的一端紧密粘贴吸水垫(Millipore公司)(图1-4)；膜靠近检测线的一端紧密粘贴胶体金探针垫(图1-2)；胶体金探针垫另一端紧密粘贴全血滤血膜样品垫
(Whatman公司)(图1-1)；样品垫、胶体金探针垫和硝酸纤维素膜的连接处表面粘贴隐形贴纸；按需要切割试纸条，宽4.0mm，长8.0mm。
(3)基于利什曼原虫K26重组抗原的检测黑热病循环抗体的检测卡的制备：
将上述切割好的免疫层析试纸条装入定制的试纸条检测卡盒体中(如图2)，该盒体(图2-11)对应于试纸条的样品垫的部位设有加样孔(图2-13)，对应于试纸条上包被的检测线和质控线的硝酸纤维素膜部位设有观测窗(图2-12)，检测线和质控线的位置分别依次标识T(图2-14)、C(图2-15)，再加干燥剂后密封单包装保存。
6.基于利什曼原虫K26重组抗原的检测黑热病循环抗体的检测试剂盒的制备：
基于利什曼原虫K26重组抗原的检测黑热病循环抗体的检测试剂盒试纸条
(检测卡)、样品稀释液液、采血管、说明书共同组成。
7.样品稀释液：含有10mM PBS，150mM NaCl，pH7.4；
8.毛细采血管：容量5μL的自吸式微量吸管(上海白洋仪表有限公司)；实施例3基于利什曼原虫K26重组抗原的检测黑热病循环抗体的检测试条的实验室和现场检测评价
1.本发明rK26试条检测方法
(1)样本要求：检测样本为全血，使用采血针采集末梢血(现场)或使用已采集的静脉抗凝血(实验室)。样本采集后应尽快进行检测，若不能及时检测，采集的全血样本需加入抗凝剂，在2～8℃可以保存3天，如果需要长期保存，需在-20℃以下保存，避免反复冻融。样本需要在含干冰的保温瓶或其它装置条件下运输。
(2)检测方法：用毛细采血管吸取待测血样标本5μL，放入试纸条检测卡(图2-11)的加样孔(图2-13)中，缓慢滴加4滴(120～200μL)样品稀释液，10分钟后观察观测窗(图2-12)里硝酸纤维素膜上的显色情况，观察超过30分钟无效。
2.结果判定：如图2所示
(1)仅在质控线C显色，检测线T不显色，判为阴性，提示没有亲利什曼原虫感染(图2-A)；
(2)质控线显C色，检测线T显色，判为亲利什曼原虫感染阳性(图2-B)；
(3)质控线C不显色，无论检测线T是否显色，表明不正确的操作过程或者试剂盒已变质失效(图2-C、图2-D)。
3.实验结果
用本发明的检测试条进行实验室和现场检测结果
如表1所示，由表1可以看出本发明的基于利什曼原虫K26重组抗原的检测黑热病循环抗体的试条的敏感性为91.82％，特异性为100.00％。上述检测结果表明本发明的基于利什曼原虫K26重组抗原的检测黑热病循环抗体的试条可以用于亲内脏利什曼原虫感染(黑热病)的快速检测。
表1本发明基于利什曼原虫K26重组抗原的检测黑热
病循环抗体的检测试条检测内脏利什曼病患者血清和对照血清结果
实施例4基于利什曼原虫K26重组抗原的检测黑热病循环抗体的试条与利什曼原虫rK39重组抗原的市售产品检测对照。
1.本发明rK26试条检测和判读方法同实施例3。
2.rK39试条使用购买的美国InBios公司基于重组抗原K39(Recombinant K39,rK39)制备的免疫层析试条产品Kalazar DetectTM。检测和判读方法(按其说明书)：
(1)样本要求：检测样本为血清。因为使用全血会影响试纸显色背景干扰判读，因此不能使用全血检测；不要使用缓冲液直接稀释血清，应用阴性血清稀释阳性样品；应尽快从凝血中采集血清，避免溶血；样本采集后应尽快进行检测，若不能及时检测，样品在2～8℃可以保存3天，如果需要长期保存，需在-20℃以下保存；测试前样品需恢复至室温，避免反复冻融；样本运输需要符合相关传染性病原体的运输规定。
(2)检测方法：检测样品恢复至室温；打开包装取出试纸平放平面上或竖直插于离心管或板孔中；取20μL血清样本，放入试纸箭头下方的样品垫上，缓慢滴加2～3滴(150μL)样品稀释液，10分钟内观察显色区域的显色情况，超过10分钟后观察可能会引起误判。
(3)结果判定：
a.当显色区出现质控线和检测线时，判为阳性，检测线红色强度不同表示抗利什曼抗体浓度不同，弱阳性样本显示微弱的红色；
b.只有质控线显色，判为阴性，表示没有检测出抗利什曼抗体；
c.如果质控线没有显色，无论检测线是否显色，均判为无效。建议使用新的试纸和血清重新检测。
3.实验结果
用本发明的rK26试条和市售rK39试条检测内脏利什曼病患者血清和对照血清结果如表2所示。由表3可以看出本发明的基于利什曼原虫rK26试条的敏感性为91.82％(101/110)，特异性为100％；市售rK39试条敏感性为93.64％(103/110)，特异性为100％。四格表配对资料的卡方检验表明两者并无统计学差异(χ2＝0.25P>0.05)。
表2本发明基于利什曼原虫rK26试条与市售rK39试条检测内脏利什曼病患者血清和对照血清结果
表3rK26和rK39试条检测内脏利什曼病患者血清结果
Claims (4)
1.一种利什曼原虫K26重组抗原，作为免疫学方法检测亲内脏利什曼原虫感染体内循环抗体的靶向分子，所述利什曼原虫K26重组抗原核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。
2.一种基于利什曼原虫K26重组抗原的检测黑热病循环抗体的免疫层析试条，包括一个样品垫，所述的样品垫的一端紧密连接于含有胶体金标记探针的胶体金探针垫的一端，所述的含有胶体金标记探针的胶体金探针垫的另外一端与纤维素膜的一端紧密连接，所述的纤维素膜的另外一端紧密连接吸水垫的一端，其特征在于：所述胶体金探针垫是由胶体金标记的金黄色葡萄球菌A蛋白或链球菌G蛋白探针组成，所述纤维素膜上靠近胶体金探针垫的一端分别设置一条检测线，由权利要求1所述的利什曼原虫K26重组抗原组成，在检测线和吸水垫之间的纤维素膜上设置一条质控线，所述的质控线由特异性结合所述胶体金标记探针二抗抗体组成。
3.如权利要求2所述的一种基于利什曼原虫K26重组抗原的检测黑热病循环抗体的免疫层析试条，其特征在于：免疫层析试条背面设置一个起支撑作用的背板。
4.如权利要求3所述的一种基于利什曼原虫K26重组抗原的检测黑热病循环抗体的免疫层析试条，其特征在于：将所述带有背板的免疫层析试条装入一个盒体中，该盒体对应于样品垫的部位设有加样孔，对应于检测线和质控线的部位设有观测窗以及检测线和质控线的位置标识。
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| CN202310227447.1A Pending CN116284310A (zh) | 2023-03-10 | 2023-03-10 | 基于利什曼原虫k26重组抗原的检测黑热病循环抗体的免疫层析试条 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN116284310A (zh) |
-
2023
- 2023-03-10 CN CN202310227447.1A patent/CN116284310A/zh active Pending
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