CN116283510A - 马齿苋中一种新型苯酚类化合物及其提取分离方法 - Google Patents
马齿苋中一种新型苯酚类化合物及其提取分离方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及中药提取、分离领域，尤其涉及从马齿苋中提取、分离和鉴别出的苯酚类化合物及其提取分离方法。所述的苯酚类化合物，分子式为C10H14O，命名为2‑isobutylphenol。还提供上述化合物的提取分离方法，依次采用水煎煮提取、大孔树脂柱层析、ODS中压柱、Sephadex LH‑20及HPLC进行分离纯化与制备。其结构采用1H NMR、13C NMR及二维NMR波谱解析的方法确定为一种新的苯酚类化合物。该化合物具有潜在的抗炎活性和抗胆碱酯酶活性，并提供制备方法，为开发新药和开发新成分提供先导物和理论依据。
Description
技术领域
本发明涉及中药提取、分离领域，尤其涉及从马齿苋药材中提取、分离和鉴别出的一种苯酚类化合物及其提取分离方法。
背景技术
马齿苋（Portulaca oleraceaL.），又名长命菜、马苋菜，为马齿苋科植物。马齿苋性喜肥沃土壤，耐旱亦耐涝，生命力强，分布广泛，资源丰富，而以我国东北部的更为常见。马齿苋既可入药，又可食用，是我国卫生部划定的药食同源的野生植物之一。2020版《中华人民共和国药典》中收载马齿苋的干燥地上部分入药，具有清热解毒、凉血止血、止痢等功效，用于热毒血痢、痈肿疔疮、湿疹、丹毒、蛇虫咬伤、便血、痔血、崩漏下血等。
现代药理学研究表明，马齿苋具有降血脂、降血糖、抗炎、抗氧化、抗肿瘤、抗动脉粥样硬化、松弛或兴奋平滑肌及增强免疫力等功效。研究表明马齿苋中所含多种化学成分与其多样的药理作用息息相关，其主要化学成分包括：黄酮类、生物碱类、萜类、香豆素类、有机酸类、挥发油、多糖、氨基酸、各种色素类和矿物质类等。其中生物碱是马齿苋中的一大类活性成分，目前已报道的生物碱类成分有去甲肾上腺素、多巴胺、少量多巴、腺苷、尿嘧啶、腺嘌呤、N，N-二环己基脲、尿囊素、N-反式-阿魏酰基酪胺；还有环二肽生物碱和酰胺类生物碱：马齿苋酰胺A-I、K、L、N-S。
目前从马齿苋中分离出的化学成分大多数是已知的，且结构新颖性较低，因此，对马齿苋中新化合物的开发和分离是亟待需要的。
发明内容
针对上述问题，本发明提供从马齿苋中提取的一种新型苯酚化合物，经研究发现本发明具有抗炎的作用，同时提供一种针对本发明新化合物的简便、快速、环保、纯度高的提取分离方法。
为实现本发明的上述目的，本发明提供一种苯酚类化合物，分子式为C10H14O，命名为2-isobutylphenol，化学结构式为：
为实现本发明的上述目的，本发明还提供马齿苋中苯酚类化合物2-isobutylphenol的提取分离方法，具体步骤为：
步骤1、取马齿苋干燥药材，采用水煎煮提取两次，水提液滤过，合并滤液直接加热浓缩，放凉至室温，得药液备用；
步骤2、将步骤1中药液蒸干后上AB-8大孔树脂，其中大孔树脂16-60μm，采用乙醇-水梯度洗脱，20%乙醇部分浓缩蒸干后经预处理的ODS柱（Octadecylsilyl，十八烷基硅烷键合硅胶填料）层析分离，填料粒度为40～70μm，用甲醇-水梯度洗脱，得到若干洗脱部位，经薄层色谱进行检测，显色，将显色部位分别减压浓缩至干，得浓缩物备用；
步骤3、将步骤2中所得浓缩物再经预处理的ODS柱（Octadecylsilyl，十八烷基硅烷键合硅胶填料）层析分离，填料粒度为40～70μm，用甲醇-水梯度洗脱，得到若干洗脱部位，经薄层色谱进行检测，显色，将显色部位分别减压浓缩至干，得浓缩物备用；
步骤4、将步骤3中所得浓缩物经预处理的Sephadex LH-20（羟丙基葡聚糖凝胶）层析分离，用10%甲醇等度洗脱，经薄层色谱进行检测，显色，将显色的洗脱部位分别减压浓缩至干，得浓缩物备用；
步骤5、将步骤4中所得浓缩物经预处理的Sephadex LH-20（羟丙基葡聚糖凝胶）层析分离，用50%甲醇等度洗脱，经薄层色谱进行检测，显色，将显色的洗脱部位减压浓缩至干，得浓缩物备用；
步骤6、将步骤5中所得浓缩物通过HPLC（高效液相）分离制备，以甲醇-0.1%甲酸水为流动相进行等度洗脱，最终得到本发明所述的新天然产物。
所述ODS的预处理过程为甲醇浸泡过24小时，上柱，用甲醇洗至滴入水中无混浊，再以初始流动相平衡。
所述Sephadex LH-20凝胶的预处理过程为甲醇浸泡过24小时，上柱，以初始流动相平衡。
与现有技术相比本发明的有益效果。
本发明中所述马齿苋中一种苯酚类化合物的分离和药理活性研究未被发现有论文期刊所报道；本发明提供来源于马齿苋的一种苯酚类化合物及一种针对本发明新天然产物的提取分离方法，依次采用水煎煮提取、大孔树脂柱、ODS中压柱、Sephadex LH-20及HPLC进行分离纯化与制备，成功提取分离出一种新的苯酚类化合物，该方法操作步骤仅为六步，操作方法简便及快速，提取分离过程主要采用水煎煮，工艺方法环保，且经该方法分离得到的化合物纯度较高均大于90%，此外经研究表明以上化合物具有抗炎和抗胆碱酯酶作用，因此本发明一种苯酚类化合物及其盐和衍生物可以作为其他化合物合成先导物，以及新药开发和药理活性研究的原料，亦可用于制备抗炎和抗胆碱酯酶的药物。
附图说明
图1为本发明生物碱类化合物2-isobutylphenol的1H-NMR光谱图。
图2为本发明生物碱类化合物2-isobutylphenol的13C-NMR光谱图。
图3为本发明生物碱类化合物2-isobutylphenol的核磁共振DEPT光谱图。
图4为本发明生物碱类化合物2-isobutylphenol的核磁共振HMBC光谱图。
图5为本发明生物碱类化合物2-isobutylphenol的核磁共振HMQC光谱图。
图6为本发明物碱类化合物2-isobutylphenol的核磁共振1H-1HCOSY光谱图。
图7为本发明物碱类化合物2-isobutylphenol的核磁共振NOESY光谱图
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做详细的说明。
实施例1。
本发明提供一种苯酚类化合物，分子式为C10H14O，命名为2-isobutylphenol，化学结构式为：
所述一种苯酚类化合物根据结构命名为2-isobutylphenol，表1为该化合物的核磁数据：1H-NMR与13C-NMR在DMSO-d 6中。
表1：本发明生物碱类化合物2-isobutylphenol的核磁数据
本发明一种苯酚类化合物2-isobutylphenol的结构鉴定与推导。
2-isobutylphenol：黄色油状物。点样于硅胶薄层板后，喷三氯化铁试液斑点显紫色，提示该化合物为苯酚成分。分子量为150.1123，结合1H-NMR，13C-NMR和DEPT谱数据，推测该化合物可能的分子式为C10H14O，不饱和度为3。13C-NMR谱显示10个碳信号，分别为1个羰基碳（δ:162.8）、2个信号较低的季碳（2个烯烃碳，δ:154.30；122.65），从HMBC谱中可以看出有相关，故存在。5个CH（4个烯烃碳，δ:134.15；132.53；131.43；127.39；24.53）。一个CH2(δ:41.28)，两个CH3(δ:22.67；21.17)，一个季碳δ:154.30化学位移较大可能与羟基相连。1H-NMR谱显示5个次甲基信号δ8.62（1H，s），δ8.47（1H，s），δ7.83（1H，d，J=9.72），δ7.81（1H，d，J=9.72），δ1.18（1H，s），1个亚甲基信号δ1.18（1H，s），2个甲基信号δ0.87（3H，d，J=5.52），δ0.82（3H，d，J=5.64）。依据HMBC谱的相关性，H-7与C-1，C-3相关，H-9、H-10与C-7相关，H-8与C2相关，确定异丁基与C-2相连。并根据1H-1H COSY谱可知，δH8.62与δH7.83耦合，δH8.47与δH7.81耦合，确定该化合物含有四连氢结构。
根据以上信息，可确定此苯酚类化合物为上述结构。
本发明还提供上述此苯酚类化合物的提取分离方法，具体步骤为。
步骤1：称取马齿苋干燥药材150kg，采用水煎煮提取，水用量为药材的10倍，每次煎煮2h，提取液滤过，合并滤液，100℃加热浓缩至23Kg，放凉至室温，得药液备用。
步骤2：将步骤1中药液蒸干后上AB-8大孔树脂，其中大孔树脂16-60目，采用乙醇-水（0：100，20：80，40：60，60：40，v/v）梯度洗脱，20%乙醇部分浓缩蒸干后经预处理的ODS柱（Octadecylsilyl，十八烷基硅烷键合硅胶填料）层析分离，填料粒度为40～70μm，用甲醇-水（0：100，5：95，10：90，20：80，30：70，50：50，70：30，100：0，v/v）梯度洗脱，得到16个洗脱部位（即共得到16个瓶，每瓶500mL），将20%（体积分数）甲醇显色部位合并减压浓缩至干，得浓缩物备用。
步骤3：将步骤2中所得浓缩物再经预处理的ODS中压柱（Octadecylsilyl，十八烷基硅烷键合硅胶填料）层析分离，填料粒度为40～70μm，用甲醇-水（20：80，40：60，60：40，80：20，v/v）梯度洗脱，得到21个洗脱部位（即梯度洗脱得21个瓶，每瓶200mL），经薄层色谱进行检测，显色，将显色的12～13部位合并于50℃以下减压浓缩至干，备用。减压浓缩至干，得浓缩物备用。
步骤4：将步骤3中所得浓缩物经预处理的Sephadex LH-20（羟丙基葡聚糖凝胶）层析分离，用10%甲醇等度洗脱，得到15个洗脱部位（即等度洗脱得15个瓶，每瓶30mL），经薄层色谱进行检测，显色，将显色的洗脱部位6于65℃以下减压浓缩至干，备用。
步骤5：将步骤4中所得浓缩物经预处理的Sephadex LH-20（羟丙基葡聚糖凝胶）层析分离，用50%甲醇等度洗脱，得到12个洗脱部位（即等度洗脱得12个瓶，每瓶，8mL），经薄层色谱进行检测，显色，将显色的洗脱部位8于60℃以下减压浓缩至干，得浓缩物备用。
步骤6、将步骤5中所得浓缩物通过HPLC（高效液相）分离制备，以甲醇-0.1%甲酸水（20：80，v/v）为流动相进行等度洗脱，检测波长为210nm和254nm，分离制备得到本发明所述的新天然产物，归一化法测定纯度为90～99%。
所述ODS和Sephadex LH-20凝胶的预处理过程为甲醇浸泡过24小时，上柱，以初始流动相平衡。
实施例2本发明新天然产物的抗炎作用。
1、主要材料。
1.1 药品和试剂：实验所用新天然产物由上述方法制备，纯度为99%，精密称取，用DMSO稀释至下述各剂量组所需溶液。DMEM高糖培养基、胎牛血清（美国Hyclone公司）；青霉素、链霉素（杭州四季青公司）；LPS（美国Sigma公司）；IL-1β和TNF-α的ELISA试剂盒（美国Cayman公司）；细胞裂解液（碧云天生物技术有限公司）。
1.2 细胞株：RAW 264.7巨噬细胞（美国ATCC细胞库）。
1.3 分组：对照组、LPS组和实验组，各一组。
2、实验方法。
2.1 细胞培养，DMEM高糖培养基，加入10%的胎牛血清，l%抗菌素（100U/mL 青霉素和100μg/mL 链霉素），置于37℃，5%CO2培养箱中培养。
2.2 MTT比色法测定细胞活力：RAW 264.7细胞系在含有10%热灭活胎牛血清（FBS）和抗生素（100U/mL青霉素和100μg/mL链霉素）的DMEM中在37℃和5%CO2的湿化培养箱中培养。通过3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide（MTT）测定法评估细胞活力。然后将RAW264.7细胞以1×104个细胞/孔的密度接种在96孔板中，随后在有或没有各种浓度（5、10、25、50和100μM）的新天然产物的情况下在培养箱中预孵育1小时，然后加入1μg/mL LPS孵育24小时。处理后除去培养基并与5mg/mL MTT溶液在37℃下孵育4小时。弃去上清液，将甲臜溶解在150μL DMSO中。使用BIO-TEK酶标仪在570nm处检测吸光度值，而未处理组的吸光度为100%。
2.3 ELISA法测定炎症因子IL-1β和TNF-α：将对数生长期RAW264.7巨噬细胞接种于96孔培养板中，细胞密度为1×105个/mL，每孔1mL，温度37℃，5%CO2条件下培养过夜，实验组加入本发明的新天然产物（1μM～20μM），培育1h后，在每孔加入LPS（终浓度为1μg/mL），共孵育24h，每组处理重复3孔。ELISA法测定该马齿苋来源新化合物处理后的RAW264.7巨噬细胞分泌的IL-1β和TNF-α的含量。
3、实验结果。
实验结果表明本发明新苯酚类化合物对LPS诱导的巨噬细胞RAW264.7的增殖无影响，安全无毒；并可有效抑制LPS诱导的巨噬细胞RAW264.7所产生过量炎症细胞因子IL-1β和TNF-α，且呈浓度依赖。
细胞相对存活率实验结果如表2所示。
表2：本发明对RAW264.7巨噬细胞相对存活率的影响
注：*P<0.05与对照组比较（高浓度组有显著性差异）。
ELISA法测定炎症因子IL-1β和TNF-α结果如表3所示。
表3：本发明对LPS诱导的RAW264.7细胞分泌的IL-1β和TNF-α含量的影响（均数±标准差，n=3）
注：*P<0.05与对照组比较，#P<0.05与LPS组比较。
实施例3本发明苯酚类化合物的抗胆碱酯酶作用。
1 主要材料。
1.1 药品和试剂：实验所用苯酚类化合物由上述方法制备，纯度为90%～99%，磷酸二氢钠、磷酸氢二钠（国药集团化学试剂有限公司），毒扁豆碱（瀚香生物科技），磷5,5'-二硫代双(2-硝基苯甲酸)（Dithiobisnitrobenzoic acid，DTNB，上海金穗生物科技有限公司），乙酰胆碱酯酶（AChE）和碘化硫代乙酰胆碱（Acetylthiocholine iodide，ATCI，大连美仑生物技术有限公司）。
1.2 分组：分为阴性对照组、阳性对照组和实验组，各一组。
2 实验方法。
2.1 样品准备，分别精密称取样品和毒扁豆碱1mg，分别以甲醇为溶剂，配置成lmg/mL、0.5mg/mL、0.1mg/mL、0.05mg/mL、0.01mg/mL的五个梯度浓度。分别精密称取7.098g的磷酸二氢钠和5.999g的磷酸氢二钠，用蒸馏水定容至50mL，取3.40mL的磷酸二氢钠和46.6mL的磷酸氢二钠，配制成50mL的PBS（0.1M，pH=8.0）；精密称取0.0594g的DTNB，加入10mL的PBS，配制成DTNB溶液(15mmol/L)；精密称取0.01g的AChE，加入10mL的PBS，配制成AChE溶液（0.2U/mL）；精密称取0.044gATCI，用蒸馏水定容至10mL，配制成ATCI溶液（15mmol/L）。
2.2 改进的Ellman方法测定抗胆碱酯酶活性，在96孔酶标板中依次加入140μL的PBS（0.1M，pH=8.0），10μL的DTNB（15mmol/L），15μL的AChE（0.2U/mL），20μL样品溶液。阴性对照组实验用甲醇代替样品，阳性对照组实验用毒扁豆碱代替样品。37℃孵育10min后，加10μL的ATCI（15mmol/L）。20℃孵育10min后，用酶标仪在410nm下测定其吸光度值。
根据下式计算抑制率：抑制率（%）=（空白组－样品）/空白组×100%。
3 实验结果。
实验结果表明本发明苯酚类化合物有抗胆碱酯酶作用。
实验结果如表4所示。
表4：本发明抗胆碱酯酶抑制活性
综上所述，本发明提供一种新苯酚类化合物及其提取分离方法，依次采用水煎煮提取、大孔树脂层析、ODS柱层析、Sephadex LH-20及HPLC进行分离纯化与制备，成功的分离得到该新天然产物。该方法简便、快速、环保，且经该方法分离得到的化合物纯度较高。由于所得化合物化学结构独特，从常用中药马齿苋中提取出来，其具有抗炎和抗胆碱酯酶作用，因此本发明的新化合物2-isobutylphenol及其盐和衍生物可以作为天然产物开发中药新药，具有广阔的前景。
Claims (9)
1.一种从马齿苋药材中分离出的苯酚类化合物，其特征在于，分子式为：C10H14O，并且根据结构命名为2-isobutylphenol，其化学结构式如下：
2.一种权利要求1所述的苯酚类化合物的提取分离方法，其特征在于，具体步骤为：
步骤1、取马齿苋干燥药材，采用水煎煮提取，水提液滤过，合并滤液直接加热浓缩，放凉至室温，得药液备用；
步骤2、将步骤1中药液蒸干后上AB-8大孔树脂柱，填料粒度为16～60μm，用乙醇∶水洗脱，将20%乙醇部分浓缩蒸干后经预处理的ODS柱用甲醇∶水梯度洗脱，得到若干洗脱部位，经薄层色谱进行检测，显色，将显色部位分别减压浓缩至干，得浓缩物备用；
步骤3、将步骤2中所得物经ODS中压柱层析分离，填料粒度为40～70μm，用甲醇∶水进行梯度洗脱，得到若干洗脱部位，经薄层色谱进行检测，显色，将显色部位减压浓缩至干，得到浓缩物备用；
步骤4、将步骤3中所得浓缩物经预处理的Sephadex LH-20（羟丙基葡聚糖凝胶）层析分离，用10%甲醇等度洗脱，经薄层色谱进行检测，显色，将显色的洗脱部位分别减压浓缩至干，得浓缩物备用；
步骤5、将步骤4中所得浓缩物经预处理的Sephadex LH-20（羟丙基葡聚糖凝胶）层析分离，用50%甲醇洗脱，经薄层色谱进行检测，显色，将显色的洗脱部位分别减压浓缩至干，得浓缩物备用；
步骤6、将步骤5中所得浓缩物通过HPLC（高效液相）分离制备，以甲醇∶0.1%甲酸水为流动相进行等度洗脱，最终得到所述的化合物。
3.如权利要求2所述提取分离方法，其特征在于，所述步骤1中水煎煮提取两次，每次煎煮2小时，水用量为药材的10倍。
4.如权利要求2所述的提取分离方法，其特征在于，所述步骤2中大孔树脂柱层析分离用体积比为0：100、20∶80、40∶60和60∶40的乙醇∶水进行梯度洗脱；ODS中压柱层析分离用水、体积比为0:100、5∶95、10∶90、20∶80、30∶70、50∶50、70∶30和100：0的甲醇∶水、甲醇进行梯度洗脱；加压，使流速为1mL/min，温度为室温，其中填料粒度为40～70μm。
5.如权利要求2所述的提取分离方法，其特征在于，所述步骤3中的ODS中压柱层析分离用体积比为20∶80、40∶60、60∶40和80∶20的甲醇∶水进行梯度洗脱；加压，使流速为1mL/min，温度为室温，其中填料粒度为40～70μm。
6.如权利要求2所述的提取分离方法，其特征在于，所述步骤4中的Sephadex LH-20凝胶的预处理过程为甲醇浸泡过24小时，上柱，以10%甲醇为初始流动相平衡，所用流动相洗脱程序为等度洗脱。
7.如权利要求2所述的提取分离方法，其特征在于，所述步骤5中的Sephadex LH-20凝胶的预处理过程为甲醇浸泡过24小时，上柱，以50%甲醇为初始流动相平衡，所用流动相洗脱程序为等度洗脱。
8.如权利要求2所述的提取分离方法，其特征在于，所述步骤6中所用体积比为20：80的甲醇∶0.1%甲酸等度洗脱。
9.一种权利要求1所述的从马齿苋药材中分离出的苯酚类化合物在制备抗炎和抗胆碱酯酶的药物或保健品中的应用。
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Citations (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101817713A (zh) * | 2010-04-30 | 2010-09-01 | 北京欧凯纳斯科技有限公司 | 一种2,2′-联苯二酚及其衍生物的制备方法 |
| CN102249862A (zh) * | 2010-05-19 | 2011-11-23 | 复旦大学 | 苯酚类化合物在制备抗补体药物中的用途 |
| CN110201012A (zh) * | 2019-07-23 | 2019-09-06 | 云南贝泰妮生物科技集团股份有限公司 | 一种马齿苋提取物的制备方法及用途 |
| CN110272342A (zh) * | 2019-07-16 | 2019-09-24 | 辽宁中医药大学 | 马齿苋中一种萘酸化合物及其提取分离方法与用途 |
| CN110272369A (zh) * | 2019-07-16 | 2019-09-24 | 辽宁中医药大学 | 马齿苋中一种吡咯二羧酸类化合物及其提取分离方法与用途 |
| CN112704650A (zh) * | 2020-12-24 | 2021-04-27 | 江苏瑞霆生物科技有限公司 | 一种马齿苋提取物的制备方法和产品及其应用 |
| CN114369022A (zh) * | 2021-06-09 | 2022-04-19 | 辽宁中医药大学 | 马齿苋中一种有机酸类化合物及其提取分离方法 |
| CN115215828A (zh) * | 2022-06-17 | 2022-10-21 | 诺斯贝尔化妆品股份有限公司 | 马齿苋活性提取物、马齿苋活性多酚的制备及应用 |
| CN115521245A (zh) * | 2022-10-19 | 2022-12-27 | 辽宁中医药大学 | 马齿苋中一种生物碱类化合物及其提取分离方法与应用 |
| CN115716790A (zh) * | 2022-12-13 | 2023-02-28 | 辽宁中医药大学 | 马齿苋中一种酰胺酯类生物碱的提取分离方法及其应用 |
-
2023
- 2023-04-12 CN CN202310386747.4A patent/CN116283510B/zh active Active
Patent Citations (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101817713A (zh) * | 2010-04-30 | 2010-09-01 | 北京欧凯纳斯科技有限公司 | 一种2,2′-联苯二酚及其衍生物的制备方法 |
| CN102249862A (zh) * | 2010-05-19 | 2011-11-23 | 复旦大学 | 苯酚类化合物在制备抗补体药物中的用途 |
| CN110272342A (zh) * | 2019-07-16 | 2019-09-24 | 辽宁中医药大学 | 马齿苋中一种萘酸化合物及其提取分离方法与用途 |
| CN110272369A (zh) * | 2019-07-16 | 2019-09-24 | 辽宁中医药大学 | 马齿苋中一种吡咯二羧酸类化合物及其提取分离方法与用途 |
| CN110201012A (zh) * | 2019-07-23 | 2019-09-06 | 云南贝泰妮生物科技集团股份有限公司 | 一种马齿苋提取物的制备方法及用途 |
| CN112704650A (zh) * | 2020-12-24 | 2021-04-27 | 江苏瑞霆生物科技有限公司 | 一种马齿苋提取物的制备方法和产品及其应用 |
| CN114369022A (zh) * | 2021-06-09 | 2022-04-19 | 辽宁中医药大学 | 马齿苋中一种有机酸类化合物及其提取分离方法 |
| CN115215828A (zh) * | 2022-06-17 | 2022-10-21 | 诺斯贝尔化妆品股份有限公司 | 马齿苋活性提取物、马齿苋活性多酚的制备及应用 |
| CN115521245A (zh) * | 2022-10-19 | 2022-12-27 | 辽宁中医药大学 | 马齿苋中一种生物碱类化合物及其提取分离方法与应用 |
| CN115716790A (zh) * | 2022-12-13 | 2023-02-28 | 辽宁中医药大学 | 马齿苋中一种酰胺酯类生物碱的提取分离方法及其应用 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| CHUNLIAN LI等: "Anti-inflammatory Study on the Constituents of Angelica sinensis (Oliv.) Diels, Angelica dahurica (Hoffm.) Benth. & Hook.f. ex Franch. & Sav., Angelica pubescence Maxim and Foeniculum vulgare Mill. Essential Oils", J. OLEO SCI., vol. 71, no. 8, pages 1207 - 1219 * |
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