CN116270965A - 稳定化西曲瑞克冻干组合物的方法和组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及稳定化西曲瑞克冻干组合物的方法和组合物。一方面，本发明涉及一种药物组合物，其是以醋酸西曲瑞克为原料药添加辅料配制成水溶液，经冷冻干燥工艺除去水后，制成密封于玻璃瓶中的冷冻干燥粉针剂形式，该粉针剂每瓶中包含醋酸西曲瑞克0.1～0.5mg，所述辅料包括每瓶40～70mg的甘露醇。该药物组合物在冷冻干燥前每瓶溶液的体积为0.5～2ml、pH值为4.0～6.0。本发明还涉及该药物组合物的方法，以及它们在制备用于辅助生育技术的促性腺激素释放激素拮抗剂的药物中的用途，例如在制备用于对进行控制性卵巢刺激的患者防止提前排卵的药物中的用途。本发明组合物呈现优良效果。

Description

稳定化西曲瑞克冻干组合物的方法和组合物
技术领域
本发明属于医药技术领域，涉及一种用于辅助生育技术的促性腺激素释放激素(LHRH)拮抗剂，具体涉及一种用于对进行控制性卵巢刺激的患者，防止提前排卵，进而进行采卵和辅助生殖技术治疗的促性腺激素释放激素(GnRH)拮抗剂，该促性腺激素释放激素拮抗剂典型的为西曲瑞克或其药用盐例如醋酸盐，本发明尤其是涉及稳定化西曲瑞克冻干组合物的方法和组合物。
背景技术
醋酸西曲瑞克是一种合成的十肽，具有促性腺激素释放激素(GnRH)拮抗剂活性。醋酸西曲瑞克是一种天然的GnRH的类似物，在1、2、3、6和10位有非天然的D-氨基酸取代基。醋酸西曲瑞克的中文化学名为：N-乙酰-3-(2-萘)-D-丙氨酰-4-氯-D-苯丙氨酰-3-(3-吡啶)-D-丙氨酰-L-丝氨酰-L-酪氨酰-N5-氨甲酰-D-鸟氨酰-L-亮氨酰-L-精氨酰-L-脯氨酰-D-丙氨酰胺醋酸盐，西曲瑞克的一种典型英文化学命名为：Acetyl-D-3-(2′-naphtyl)-alanine-D-4-chlorophenylalanine-D-3-(3′-pyridyl)alanine-L-serine-L-tyrosine-D-citruline-L-leucine-L-arginine-L-proline-D-alanine-amide，醋酸西曲瑞克的化学结构式、分子式和分子量如下：
Figure BDA0004125848730000011
C70H92ClN17O14·xC2H4O2，1431.06·x60.05
促性腺激素释放激素(GnRH)与垂体细胞膜上的受体结合，刺激黄体生成素(LH)及促卵泡成熟激素(FSH)释放。醋酸西曲瑞克与内源性GnRH竞争垂体细胞上的受体，从而抑制内源性LH及FSH的释放。醋酸西曲瑞克的抑制作用在注射后即时产生，没有刺激作用。在女性中，醋酸西曲瑞克的作用是推迟LH峰的出现，从而控制排卵。
目前国内外临床上使用的醋酸西曲瑞克的典型制剂是原研商品名为思则凯(Cetrotide)的冷冻干燥粉针剂，该冻干粉针剂每瓶含西曲瑞克(游离碱)计0.25mg(相当于0.26-0.27mg醋酸西曲瑞克)，该冻干粉针剂中还包含54.80mg甘露醇，使用前每瓶冻干粉针剂用1ml注射用水溶解。2008年FDA批准给EMD Serono,Inc.的Cetrotide涉及如下两种规格：3mg西曲瑞克/164.4mg甘露醇/3ml复溶用水、0.25mg西曲瑞克/54.8mg甘露醇/1ml复溶用水，该FDA批准的说明书中明确记载3mg规格贮藏条件为25℃，而0.25mg规格贮藏条件为2-8℃，但是上述3mg规格已经下架；另外，目前，经我国药品监管部门批准进口市售的0.25mg规格思则凯(Cetrotide，H20140476)的药品说明书中明确记载贮藏2-8℃、有效期24月。
由于西曲瑞克是由10个氨基酸组成的肽，溶解性较差，醋酸西曲瑞克冷冻干燥粉针剂量生产过程中存在一些技术困难，例如终端除菌过滤较慢、稳定性等等。现有技术为克服相关技术问题亦提出了一些解决方案。
例如，CN102144980B(201110054060.8)公开的LHRH拮抗剂冻干粉针剂，冻干前溶液中含有0.25mg/ml西曲瑞克，3％w/v甘露醇，0.1％w/v亚硫酸氢钠，2％w/v苯甲醇，用醋酸和醋酸钠调pH为4.5；冻干粉针剂制备工艺为：在无菌条件下，称取西曲瑞克0.25g，甘露醇30g，亚硫酸氢钠1g以及20g苯甲醇，置于灭菌容器中，加处方量80％注射用水，搅拌使溶解，用醋酸和醋酸钠调pH至4.5，加注射用水至1000ml，搅匀，加25g注射用活性炭搅拌30min，灭菌滤器粗滤脱炭，用0.45μm微孔滤膜过滤，最后用0.22μm微孔滤膜过滤，滤液检测合格后，以1ml/瓶灌装于2ml灭菌西林瓶内，冷冻真空干燥，真空压塞，出箱，轧盖，使每瓶相当于0.25mg西曲瑞克。
CN102423484B(201110376326.0)公开了西曲瑞克组合物制备方法：(1)制备甘露醇、醋酸西曲瑞克溶液，过滤；(2)将步骤(1)的溶液分装至容器，分步降温；第一阶段，以降温速率不大于3℃/min，将板层温度降至-25℃--40℃，并保温，保温时间不低于1小时；第二阶段，继续降温至小于-40℃，保温不低于1小时；(3)干燥得冻干药物组合物。
CN112933210A(201911265507.9)明公开了一种西曲瑞克冻干药物组合物的制备方法，包括以下步骤：制备甘露醇、醋酸西曲瑞克溶液；将上述溶液温度控制在0-15℃；过滤；分装至容器，冻干。甘露醇、醋酸西曲瑞克溶液的pH值为3.1-5.6。
CN114096266A(202080050026.0)公开了一种西曲瑞克的稳定配制品，该稳定配制品包含：a)西曲瑞克或其药学上可接受的盐；b)环糊精；c)冰醋酸；和d)表面活性剂；其中所述配制品可以作为即用型溶液施用；所述配制品的pH是从约3.5至8.5。
CN114599384A(202080074551.6)公开了一种包含稳定的水溶液的肠胃外剂型，其包含：西曲瑞克或其药学上可接受的盐；和(ii)小于1％w/v的西曲瑞克碱的量的式I的杂质；所述剂型是无菌的、稳定的水溶液。
CN114712315A(202110005758.4)公开了一种醋酸西曲瑞克冻干制剂的制备方法，该方法引入“退火”工艺，据信该发明能有效降低冻干过程中产生的杂质，特别对杂质脱酰胺西曲瑞克和乙酰化西曲瑞克，使其含量控制在较低的水平，另外通过该方法制备的药物组合物具有良好的稳定性。
CN112717119A(202110113618.9)公开了一种西曲瑞克药物组合物的制备方法，包括采用盐酸对醋酸西曲瑞克进行溶解，获得醋酸西曲瑞克盐酸溶液；所述醋酸西曲瑞克盐酸溶液中，所述盐酸的终浓度为0.05～3mol/L。据信该发明提供的西曲瑞克药物具有较高的稳定性，能够长时间在室温或者环境温度的条件下保存，并且明显缩短了复溶时间，提高了临床用药时的安全性。
CN112807418A(202110113629.7)公开了一种西曲瑞克制剂的制备方法，包括对含有甘露醇和醋酸西曲瑞克的混合溶液进行第一～第三阶段冷冻，第一阶段的条件为：降温至-20～-40℃后，保温0.1～2h；第二阶段的条件为：升温至-20～-5℃，保温0.1～2h；第三阶段的条件为：降温至-20～-40℃后，保温0.1～2h。据信该发明通过先将温度降低至溶液玻璃态转变温度附近，保持一段时间，在升温到一定温度后再次降温至溶液完全冻实，能最大限度地保证西曲瑞克制剂产品的稳定性；同时，经上述冷冻处理后，还可以在干燥阶段选择较高的干燥温度进行干燥，不但不会影响产品质量，还缩短了干燥时间，降低生产成本。
CN113616775A(202111027666.2)公开了一种醋酸西曲瑞克注射剂及其制备方法。通过控制预冻降温速率以及一次干燥真空度，所得冻干产品为块状固体，避免了复溶后活性成分聚集现象，并降低产品冻干后杂质水平，据信该发明产品初始水分较低、储存过程中水分、浊度、pH、纯度等关键质量属性可控，有效性及安全性更有保障。
然而，鉴于上述现有技术仍存在某些方面的缺陷，例如苯甲醇、环糊精等辅料对于注射制剂是希望尽量避免的，因此，本领域仍然期待有新的方法制备醋酸西曲瑞克组合物尤其是其冷冻干燥组合物以期获得一个或多个方面的技术效果。
发明内容
本发明的目的在于提供一种新的方法制备醋酸西曲瑞克组合物尤其是其冷冻干燥组合物，以期获得一个或多个方面的技术效果。已经出人预料的发现，通过本发明方法，制得的包含醋酸西曲瑞克的冷冻干燥组合物呈现一个或者多个方面的优良技术效果，本发明基于此类发现而得以完成。
为此，本发明第一方面提供了一种药物组合物，其是以醋酸西曲瑞克为原料药添加辅料配制成水溶液，经冷冻干燥工艺除去水后，制成密封于玻璃瓶中的冷冻干燥粉针剂形式。
根据本发明的药物组合物，其每瓶中包含醋酸西曲瑞克0.1～0.5mg，例如其每瓶中包含醋酸西曲瑞克0.2～0.4mg，例如其每瓶中包含醋酸西曲瑞克0.25mg。
根据本发明的药物组合物，其中所述辅料包括甘露醇。
根据本发明的药物组合物，其中所述辅料包括甘露醇，每瓶中的甘露醇的量为40～70mg，例如每瓶中的甘露醇的量为50～60mg，例如每瓶中的甘露醇的量为45～55mg。
根据本发明的药物组合物，其在冷冻干燥前每瓶溶液的体积为0.5～2ml，例如为0.8～1.2ml，例如为1ml。
根据本发明的药物组合物，其在冷冻干燥前溶液的pH值为4.0～6.0，例如pH值为4.0～5.5，例如pH值为4.5～5.5。
根据本发明的药物组合物，其每瓶加水1ml溶解后所得溶液的pH值为4.0～6.0，例如pH值为4.0～5.5，例如pH值为4.5～5.5。
根据本发明的药物组合物，其每瓶加水1ml完全溶解的时间小于3分钟，例如小于2分钟，例如小于1.5分钟。
根据本发明的药物组合物，其中的水分含量小于3％，例如小于2.5％，例如小于2％。
根据本发明的药物组合物，其每瓶中还包含马来酸2～5mg，例如还包含马来酸3～4mg。
根据本发明的药物组合物，其每瓶中还包含氯化钠3～6mg，例如还包含氯化钠4～5mg。
根据本发明的药物组合物，其在冷冻干燥前具有实施例2～9尤其是实施例2～4任一项所述的处方组成。
根据本发明的药物组合物，以每配制100ml的物料表示，其是照包括如下步骤的方法制备得到的：
(a)使甘露醇(和任选的马来酸和/或氯化钠)溶解于75～85ml注射用水中，向溶液中添加针用活性炭至0.5％w/v的浓度，搅拌30min，过滤脱炭，0.45μm微孔滤膜过滤二次；
(b)向药液A中添加醋酸西曲瑞克，室温搅拌30min，再在搅拌下滴加30％醋酸溶液直至药液完全溶解，加注射用水至100ml，用0.2μm微孔滤膜过滤(任选地测定药液中的活性物质含量、任选地测定药液pH)，以每瓶含醋酸西曲瑞克以西曲瑞克(C70H92ClN17O14)计0.25mg的体积(约1ml/瓶)将滤液分装到的管制瓶中，半加塞；
(c)将分装好的药液置冷冻干燥机中，按如下程序进行冷冻干燥直至冻干品水分含量小于1％后密塞即得冻干组合物：
(c1)将分装药液的管制瓶置常温冷冻干燥机内，启动冷冻机，以板层温度1℃/min降至5℃，接着以板层温度0.5℃/min继续降温至-25℃，保温1h，再以板层温度0.5℃/min继续降温至-45℃，保温3h；
(c2)密闭真空系统，开启真空泵直至真空度为0.15～0.25mba，维持此真空度，保温1h，接着以板层温度0.5℃/min升温至-30℃后保温2h，再以板层温度1℃/min升温至-5℃后保温8h；
(c3)以板层温度1℃/min升温至15℃后保温10h，再以2℃/min升温至25℃后保温2h，压塞，完成冷冻干燥。
进一步的，本发明第二方面提供了制备药物组合物的方法，该药物组合物是以醋酸西曲瑞克为原料药添加辅料配制成水溶液，经冷冻干燥工艺除去水后，制成密封于玻璃瓶中的冷冻干燥粉针剂形式；以每配制100ml的物料表示，该方法包括如下步骤：
(a)使甘露醇溶解于75～85ml注射用水中，向溶液中添加针用活性炭至0.5％w/v的浓度，搅拌30min，过滤脱炭，0.45μm微孔滤膜过滤二次；
(b)向药液A中添加醋酸西曲瑞克，室温搅拌30min，再在搅拌下滴加30％醋酸溶液直至药液完全溶解，加注射用水至100ml，用0.2μm微孔滤膜过滤(任选地测定药液中的活性物质含量、任选地测定药液pH)，以每瓶含醋酸西曲瑞克以西曲瑞克(C70H92ClN17O14)计0.25mg的体积(约1ml/瓶)将滤液分装到的管制瓶中，半加塞；
(c)将分装好的药液置冷冻干燥机中，按如下程序进行冷冻干燥直至冻干品水分含量小于1％后密塞即得冻干组合物：
(c1)将分装药液的管制瓶置常温冷冻干燥机内，启动冷冻机，以板层温度1℃/min降至5℃，接着以板层温度0.5℃/min继续降温至-25℃，保温1h，再以板层温度0.5℃/min继续降温至-45℃，保温3h；
(c2)密闭真空系统，开启真空泵直至真空度为0.15～0.25mba，维持此真空度，保温1h，接着以板层温度0.5℃/min升温至-30℃后保温2h，再以板层温度1℃/min升温至-5℃后保温8h；
(c3)以板层温度1℃/min升温至15℃后保温10h，再以2℃/min升温至25℃后保温2h，压塞，完成冷冻干燥。
根据本发明的方法，所述药物组合物其每瓶中包含醋酸西曲瑞克0.1～0.5mg，例如其每瓶中包含醋酸西曲瑞克0.2～0.4mg，例如其每瓶中包含醋酸西曲瑞克0.25mg。
根据本发明的方法，所述药物组合物每瓶中的甘露醇的量为40～70mg，例如每瓶中的甘露醇的量为50～60mg，例如每瓶中的甘露醇的量为45～55mg。
根据本发明的方法，在冷冻干燥前每瓶溶液的体积为0.5～2ml，例如为0.8～1.2ml，例如为1ml。
根据本发明的方法，在冷冻干燥前溶液的pH值为4.0～6.0，例如pH值为4.0～5.5，例如pH值为4.5～5.5。
根据本发明的方法，所述药物组合物每瓶加水1ml溶解后所得溶液的pH值为4.0～6.0，例如pH值为4.0～5.5，例如pH值为4.5～5.5。
根据本发明的方法，所述药物组合物每瓶加水1ml完全溶解的时间小于3分钟，例如小于2分钟，例如小于1.5分钟。
根据本发明的方法，所述药物组合物中的水分含量小于3％，例如小于2.5％，例如小于2％。
根据本发明的方法，所述药物组合物每瓶中还包含马来酸2～5mg，例如还包含马来酸3～4mg。
根据本发明的方法，所述药物组合物每瓶中还包含氯化钠3～6mg，例如还包含氯化钠4～5mg。
根据本发明的方法，所述药物组合物在冷冻干燥前具有实施例2～9尤其是实施例2～4任一项所述的处方组成。
进一步的，本发明第三方面提供了本发明第一方面所述药物组合物在制备用于辅助生育技术的促性腺激素释放激素拮抗剂的药物中的用途。
例如，本发明第三方面提供了本发明第一方面所述药物组合物在制备用于对进行控制性卵巢刺激的患者防止提前排卵的药物中的用途。
本发明制备的药物组合物呈现如本文上下文所述一个或者多个方面的优良技术效果。
附图说明
图1是有关物质检查的一个典型系统适用性溶液色谱图。
具体实施方式
本发明提供如下实例，以进一步阐明本发明的各个方面。在制备组合物时，为方便表述，在描述处方量是以每100瓶量表示，但在实际投料制备组合物时每批次至少以5000瓶的量投料。制备组合物所用原料、辅料、包装材料等均符合药用尤其是符合药品监管部门规定的质量指标。
实施例1：提供原料药醋酸西曲瑞克
本领域有诸多制备醋酸西曲瑞克原料药的文献，本发明作为原料药的醋酸西曲瑞克使用如下方法制备：
步骤(1)制备Fmoc-D-Aal-树脂：将Fmoc-linker-MBHA-resin(以50g的量投料，下文用比例关系表示各物料的用量)使用DCM浸泡4次，使树脂充分溶胀，加入脱帽试剂(其与树脂的投料比例为12ml/g树脂)，于45℃脱帽反应25分钟，抽干，用DMF洗涤3次，抽干，依次加入用接肽试剂溶解的Fmoc-D-Ala-OH(其摩尔数为树脂量的2倍)、HBTU/HOBT/DIEA的混合物，于40℃接肽反应2小时，抽干，树脂用DMF洗涤，真空抽干，获得Fmoc-D-Aal-树脂。
步骤(2)制备Fmoc-Pro-D-Aal-树脂：在步骤(1)制得的Fmoc-D-Aal-树脂中，加入脱帽试剂(其与树脂的投料比例为10ml/g树脂)，于45℃脱帽反应25分钟，抽干，用DMF、MeOH、DCM依次各洗涤3次，抽干，依次加入用接肽试剂溶解的Fmoc-Pro-OH(其摩尔数为树脂量的2倍)、HBTU/HOBT/DIEA的混合物，于40℃接肽反应2小时，抽干，树脂用DMF洗涤，抽干，获得Fmoc-Pro-D-Aal-树脂。
步骤(3)制备Fmoc-Arg(Tos)-Pro-D-Aal-树脂：在步骤(2)制得的Fmoc-Pro-D-Aal-树脂中，加入脱帽试剂(其与树脂的投料比例为10ml/g树脂)，于45℃脱帽反应25分钟，抽干，用DMF、MeOH、DCM依次各洗涤3次，抽干，依次加入用接肽试剂溶解的Fmoc-Arg(Tos)-OH(其摩尔数为树脂量的3倍)、HBTU/6-Cl-HOBT/DIEA的混合物，于40℃接肽反应2小时，抽干，树脂用DMF洗涤，抽干，获得Fmoc-Arg(Tos)-Pro-D-Aal-树脂。
步骤(4)制备Fmoc-Leu-Arg(Tos)-Pro-D-Aal-树脂：在步骤(3)制得的Fmoc-Arg(Tos)-Pro-D-Aal-树脂中，加入脱帽试剂(其与树脂的投料比例为10ml/g树脂)，于45℃脱帽反应25分钟，抽干，用DMF、MeOH、DCM依次各洗涤3次，抽干，依次加入用接肽试剂溶解的Fmoc-Leu-OH(其摩尔数为树脂量的2倍)、HBTU/HOBT/DIEA的混合物，于40℃接肽反应2小时，抽干，树脂用DMF洗涤，抽干，获得Fmoc-Leu-Arg(Tos)-Pro-D-Aal-树脂。
步骤(5)制备Fmoc-D-Cit-Leu-Arg(Tos)-Pro-D-Aal-树脂：在步骤(4)制得的Fmoc-Leu-Arg(Tos)-Pro-D-Aal-树脂中，加入脱帽试剂(其与树脂的投料比例为10ml/g树脂)，于45℃脱帽反应25分钟，抽干，用DMF、MeOH、DCM依次各洗涤3次，抽干，依次加入用接肽试剂溶解的Fmoc-D-Cit-OH(其摩尔数为树脂量的2倍)、HBTU/HOBT/DIEA的混合物，于40℃接肽反应2小时，抽干，树脂用DMF洗涤，抽干，获得Fmoc-D-Cit-Leu-Arg(Tos)-Pro-D-Aal-树脂。
步骤(6)制备Fmoc-Tyr(tBu)-D-Cit-Leu-Arg(Tos)-Pro-D-Aal-树脂：在步骤(5)制得的Fmoc-D-Cit-Leu-Arg(Tos)-Pro-D-Aal-树脂中，加入脱帽试剂(其与树脂的投料比例为10ml/g树脂)，于45℃脱帽反应25分钟，抽干，用DMF、MeOH、DCM依次各洗涤3次，抽干，依次加入用接肽试剂溶解的Fmoc-Tyr(tBu)-OH(其摩尔数为树脂量的2倍)、HBTU/HOBT/DIEA的混合物，于40℃接肽反应2小时，抽干，树脂用DMF洗涤，抽干，获得Fmoc-Tyr(tBu)-D-Cit-Leu-Arg(Tos)-Pro-D-Aal-树脂。
步骤(7)制备Fmoc-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Cit-Leu-Arg(Tos)-Pro-D-Aal-树脂：在步骤(6)制得的Fmoc-Tyr(tBu)-D-Cit-Leu-Arg(Tos)-Pro-D-Aal-树脂中，加入脱帽试剂(其与树脂的投料比例为10ml/g树脂)，于45℃脱帽反应25分钟，抽干，用DMF、MeOH、DCM依次各洗涤3次，抽干，依次加入用接肽试剂溶解的Fmoc-Ser(tBu)-OH(其摩尔数为树脂量的2倍)、HBTU/HOBT/DIEA的混合物，于40℃接肽反应2小时，抽干，树脂用DMF洗涤，抽干，获得Fmoc-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Cit-Leu-Arg(Tos)-Pro-D-Aal-树脂。
步骤(8)制备Fmoc-3(3-Pyridyl)-D-Ala-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Cit-Leu-Arg(Tos)-Pro-D-Aal-树脂：在步骤(7)制得的Fmoc-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Cit-Leu-Arg(Tos)-Pro-D-Aal-树脂中，加入脱帽试剂(其与树脂的投料比例为10ml/g树脂)，于45℃脱帽反应25分钟，抽干，用DMF、MeOH、DCM依次各洗涤3次，抽干，依次加入用接肽试剂溶解的Fmoc-3(3-Pyridyl)-D-Ala-OH(其摩尔数为树脂量的2倍)、HBTU/HOBT/DIEA的混合物，于40℃接肽反应2小时，抽干，树脂用DMF洗涤，抽干，获得Fmoc-3(3-Pyridyl)-D-Ala-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Cit-Leu-Arg(Tos)-Pro-D-Aal-树脂。
步骤(9)制备Fmoc-4-Chloro-D-Phe-3(3-Pyridyl)-D-Ala-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Cit-Leu-Arg(Tos)-Pro-D-Aal-树脂：在步骤(8)制得的Fmoc-3(3-Pyridyl)-D-Ala-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Cit-Leu-Arg(Tos)-Pro-D-Aal-树脂中，加入脱帽试剂(其与树脂的投料比例为10ml/g树脂)，于45℃脱帽反应25分钟，抽干，用DMF、MeOH、DCM依次各洗涤3次，抽干，依次加入用接肽试剂溶解的Fmoc-4-Chloro-D-Phe-OH(其摩尔数为树脂量的2倍)、HBTU/HOBT/DIEA的混合物，于40℃接肽反应2小时，抽干，树脂用DMF洗涤，抽干，获得Fmoc-4-Chloro-D-Phe-3(3-Pyridyl)-D-Ala-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Cit-Leu-Arg(Tos)-Pro-D-Aal-树脂。
步骤(10)制备Fmoc-3-(2-naphthyl)-D-Ala-4-Chloro-D-Phe-3(3-Pyridyl)-D-Ala-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Cit-Leu-Arg(Tos)-Pro-D-Aal-树脂：在步骤(9)制得的Fmoc-4-Chloro-D-Phe-3(3-Pyridyl)-D-Ala-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Cit-Leu-Arg(Tos)-Pro-D-Aal-树脂中，加入脱帽试剂(其与树脂的投料比例为10ml/g树脂)，于45℃脱帽反应25分钟，抽干，用DMF、MeOH、DCM依次各洗涤3次，抽干，依次加入用接肽试剂溶解的Fmoc-3-(2-naphthyl)-D-Ala-OH(其摩尔数为树脂量的2倍)、HBTU/HOBT/DIEA的混合物，于40℃接肽反应2小时，抽干，树脂用DMF洗涤，抽干，获得Fmoc-3-(2-naphthyl)-D-Ala-4-Chloro-D-Phe-3(3-Pyridyl)-D-Ala-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Cit-Leu-Arg(Tos)-Pro-D-Aal-树脂。
步骤(11)制备AC-3-(2-naphthyl)-D-Ala-4-Chloro-D-Phe-3(3-Pyridyl)-D-Ala-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Cit-Leu-Arg(Tos)-Pro-D-Aal-树脂：在步骤(10)制得的Fmoc-3-(2-naphthyl)-D-Ala-4-Chloro-D-Phe-3(3-Pyridyl)-D-Ala-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Cit-Leu-Arg(Tos)-Pro-D-Aal-树脂中，加入脱帽试剂(其与树脂的投料比例为15ml/g树脂)，于45℃脱帽反应25分钟，抽干，用DMF、MeOH、DCM依次各洗涤3次，抽干，加入醋酐、吡啶、二氯甲烷的混合溶液(三种试剂的体积比为1∶2∶2)，于40℃反应1.5小时，抽干，树脂用DMF洗涤，抽干，获得AC-3-(2-naphthyl)-D-Ala-4-Chloro-D-Phe-3(3-Pyridyl)-D-Ala-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Cit-Leu-Arg(Tos)-Pro-D-Aal-树脂。
步骤(12)制备AC-3-(2-naphthyl)-D-Ala-4-Chloro-D-Phe-3(3-Pyridyl)-D-Ala-Ser-Tyr-D-Cit-Leu-Arg-Pro-D-Ala-NH2：在步骤(11)制得的AC-3-(2-naphthyl)-D-Ala-4-Chloro-D-Phe-3(3-Pyridyl)-D-Ala-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-D-Cit-Leu-Arg(Tos)-Pro-D-Aal-树脂中，加入预冷至-15℃的切肽试剂(三氟醋酸/硫醇/三异丙基硅烷/水＝87.5/5/5/2.5，体积比)，于42℃切肽反应2.5小时，滤出溶剂，加入乙醚沉淀，收集沉淀物，再用乙醚洗涤2次，在室温下于干燥器中减压干燥4小时，获得终产物AC-3-(2-naphthyl)-D-Ala-4-Chloro-D-Phe-3(3-Pyridyl)-D-Ala-Ser-Tyr-D-Cit-Leu-Arg-Pro-D-Ala-NH2即西曲瑞克粗品。
步骤(13)制备精制醋酸西曲瑞克：称取上一步骤所得西曲瑞克粗品15g，加30％HAc水溶液1.5L溶解后，通过制备型C18柱纯化(Ultra Aqueous C18制备型色谱柱，9178579，id30mm×250mm，5μm)。纯化所用条件：流动相：流动相A为0.1％TFA，流动相B为乙腈；梯度洗脱程序：从20％流动相B开始在60分钟内至55％流动相B；检测波长260nm，收集目的峰馏分。脱盐所用条件：流动相：流动相A为30mmol/L乙酸铵水溶液/乙腈＝95/5，流动相B为水/乙腈＝95/5，流动相C为2％醋酸水溶液/乙腈＝90/10，流动相D为2％醋酸水溶液/乙腈＝50/50；洗脱程序：先用流动相A洗脱15分钟，接着用流动相B洗脱15分钟，然后用流动相C洗脱15分钟，最后用流动相D洗脱25分钟；检测波长260nm，收集目的峰馏分。将脱盐收集的馏份进行冷冻干燥至水分含量小于5％，得到精制的醋酸西曲瑞克6.24g，西曲瑞克[M]+＝1429.663，与理论值吻合。
本实施例提供的原料药符合药用要求，其一些主要质量指标的检测结果如下：
性状：本品为白色粉末。
溶解性：在二甲亚砜中易溶，在30％醋酸溶液中溶解，在水中微溶。
比旋度：取本品，精密称定，加10％醋酸溶液溶解并定量稀释制成每1ml中约含1mg的溶液，依法测定(中国药典2020年版四部通则0621)，按无水、无醋酸物计算，一般要求比旋度为-34.0°至-44.0°，本实施例实测为-39.46°。
鉴别：取本品约1mg，加水1ml使溶解，加双缩脲试液(取硫酸铜0.15g，加酒石酸钾钠0.6g，加水50ml使溶解，边搅拌边加入10％氢氧化钠溶液30ml，加水至100ml)1ml，即显蓝紫色。
酸度：取本品适量，加水溶解并稀释制成每1ml中约含1mg的溶液，依法测定(中国药典2020年版四部通则0631)，pH值一般要求应为4.0～6.0，本实施例实测为4.84。
溶液的澄清度与颜色：取本品适量，加水溶解并稀释制成每1ml中约含0.25mg的溶液，依法检查(中国药典2020年版四部通则0901第一法和通则0902第一法)，溶液澄清无色。
醋酸：照合成多肽中的醋酸测定法(中国药典2020年版四部通则0872)测定，按外标法以峰面积计算，一般要求醋酸含量应为5.0％～12.0％，本实施例实测为7.53％。
水分：取本品，照水分测定法(中国药典2020年版四部通则0832第一法2)测定，一般要求含水分不得过6.0％，本实施例实测为3.22％。
细菌内毒素：取本品，依法检查(中国药典2020年版四部通则1143)，每1mg西曲瑞克中含内毒素的量一般要求应小于50EU，本实施例实测<50EU/mg。
微生物限度：取本品3g，依法检查(中国药典2020年版四部通则1105、通则1106与通则1107)，需氧菌总数一般要求不得过103cfu/g(本实施例实测<10cfu/g)，霉菌和酵母菌总数一般要求不得过102cfu/g(本实施例实测<10cfu/g)。
有关物质和含量：参照CN107664666B之实施例1的HPLC方法测定本实施例原料药的有关物质和含量；对于原料药，有关物质一般要求杂质6不得过0.50％，其他单个杂质不得过0.20％，总杂质不得过1.5％，本实施例实测杂质6为0.043％、其他单个杂质均不过0.10％、总杂质0.137％；对于原料药，含量一般要求按无水、无醋酸物计算含醋酸西曲瑞克以西曲瑞克(C70H92ClN17O14)计应为97.0％～102.0％，本实施例实测含量为100.16％。
实施例2、制备醋酸西曲瑞克冻干组合物
处方：醋酸西曲瑞克28mg、甘露醇5g、马来酸0.35g、氯化钠0.45g、注射用水至100ml。
制法：(a)使甘露醇、马来酸和氯化钠溶解于约80ml注射用水中，向溶液中添加针用活性炭至0.5％w/v的浓度，搅拌30min，过滤脱炭，0.45μm微孔滤膜过滤二次；
(b)向药液A中添加醋酸西曲瑞克，室温搅拌30min，再在搅拌下滴加30％醋酸溶液直至药液完全溶解，加注射用水至100ml，用0.2μm微孔滤膜过滤(测定药液中的活性物质含量，测定药液pH＝4.83)，以每瓶含醋酸西曲瑞克以西曲瑞克(C70H92ClN17O14)计0.25mg的体积(约1ml/瓶)将滤液分装到2ml的管制瓶中，半加塞；
(c)将分装好的药液置冷冻干燥机中，按如下程序进行冷冻干燥直至冻干品水分含量小于1％后密塞即得冻干组合物：
(c1)将分装药液的管制瓶置常温冷冻干燥机内，启动冷冻机，以板层温度1℃/min降至5℃，接着以板层温度0.5℃/min继续降温至-25℃，保温1h，再以板层温度0.5℃/min继续降温至-45℃，保温3h；
(c2)密闭真空系统，开启真空泵直至真空度为0.15～0.25mba(历时约30min)，维持此真空度，保温1h，接着以板层温度0.5℃/min升温至-30℃后保温2h，再以板层温度1℃/min升温至-5℃后保温8h；
(c3)以板层温度1℃/min升温至15℃后保温10h，再以2℃/min升温至25℃后保温2h，压塞，完成冷冻干燥。
实施例3、制备醋酸西曲瑞克冻干组合物
处方：醋酸西曲瑞克28mg、甘露醇4.5g、马来酸0.3g、氯化钠0.5g、注射用水至100ml。
制法：(a)使甘露醇、马来酸和氯化钠溶解于约85ml注射用水中，向溶液中添加针用活性炭至0.5％w/v的浓度，搅拌30min，过滤脱炭，0.45μm微孔滤膜过滤二次；
(b)向药液A中添加醋酸西曲瑞克，室温搅拌30min，再在搅拌下滴加30％醋酸溶液直至药液完全溶解，加注射用水至100ml，用0.2μm微孔滤膜过滤(测定药液中的活性物质含量，测定药液pH＝4.77)，以每瓶含醋酸西曲瑞克以西曲瑞克(C70H92ClN17O14)计0.25mg的体积(约1ml/瓶)将滤液分装到2ml的管制瓶中，半加塞；
(c)将分装好的药液置冷冻干燥机中，按如下程序进行冷冻干燥直至冻干品水分含量小于1％后密塞即得冻干组合物：
(c1)将分装药液的管制瓶置常温冷冻干燥机内，启动冷冻机，以板层温度1℃/min降至5℃，接着以板层温度0.5℃/min继续降温至-25℃，保温1h，再以板层温度0.5℃/min继续降温至-45℃，保温3h；
(c2)密闭真空系统，开启真空泵直至真空度为0.15～0.25mba(历时约30min)，维持此真空度，保温1h，接着以板层温度0.5℃/min升温至-30℃后保温2h，再以板层温度1℃/min升温至-5℃后保温8h；
(c3)以板层温度1℃/min升温至15℃后保温10h，再以2℃/min升温至25℃后保温2h，压塞，完成冷冻干燥。
实施例4、制备醋酸西曲瑞克冻干组合物
处方：醋酸西曲瑞克28mg、甘露醇5.5g、马来酸0.4g、氯化钠0.4g、注射用水至100ml。
制法：(a)使甘露醇、马来酸和氯化钠溶解于约75ml注射用水中，向溶液中添加针用活性炭至0.5％w/v的浓度，搅拌30min，过滤脱炭，0.45μm微孔滤膜过滤二次；
(b)向药液A中添加醋酸西曲瑞克，室温搅拌30min，再在搅拌下滴加30％醋酸溶液直至药液完全溶解，加注射用水至100ml，用0.2μm微孔滤膜过滤(测定药液中的活性物质含量，测定药液pH＝4.80)，以每瓶含醋酸西曲瑞克以西曲瑞克(C70H92ClN17O14)计0.25mg的体积(约1ml/瓶)将滤液分装到2ml的管制瓶中，半加塞；
(c)将分装好的药液置冷冻干燥机中，按如下程序进行冷冻干燥直至冻干品水分含量小于1％后密塞即得冻干组合物：
(c1)将分装药液的管制瓶置常温冷冻干燥机内，启动冷冻机，以板层温度1℃/min降至5℃，接着以板层温度0.5℃/min继续降温至-25℃，保温1h，再以板层温度0.5℃/min继续降温至-45℃，保温3h；
(c2)密闭真空系统，开启真空泵直至真空度为0.15～0.25mba(历时约30min)，维持此真空度，保温1h，接着以板层温度0.5℃/min升温至-30℃后保温2h，再以板层温度1℃/min升温至-5℃后保温8h；
(c3)以板层温度1℃/min升温至15℃后保温10h，再以2℃/min升温至25℃后保温2h，压塞，完成冷冻干燥。
实施例5、制备醋酸西曲瑞克冻干组合物
处方：醋酸西曲瑞克28mg、甘露醇5g、马来酸0.35g、注射用水至100ml。
制法：(a)使甘露醇、马来酸溶解于约80ml注射用水中，向溶液中添加针用活性炭至0.5％w/v的浓度，搅拌30min，过滤脱炭，0.45μm微孔滤膜过滤二次；
(b)向药液A中添加醋酸西曲瑞克，室温搅拌30min，再在搅拌下滴加30％醋酸溶液直至药液完全溶解，加注射用水至100ml，用0.2μm微孔滤膜过滤(测定药液中的活性物质含量，测定药液pH＝4.86)，以每瓶含醋酸西曲瑞克以西曲瑞克(C70H92ClN17O14)计0.25mg的体积(约1ml/瓶)将滤液分装到2ml的管制瓶中，半加塞；
(c)将分装好的药液置冷冻干燥机中，按如下程序进行冷冻干燥直至冻干品水分含量小于1％后密塞即得冻干组合物：
(c1)将分装药液的管制瓶置常温冷冻干燥机内，启动冷冻机，以板层温度1℃/min降至5℃，接着以板层温度0.5℃/min继续降温至-25℃，保温1h，再以板层温度0.5℃/min继续降温至-45℃，保温3h；
(c2)密闭真空系统，开启真空泵直至真空度为0.15～0.25mba(历时约30min)，维持此真空度，保温1h，接着以板层温度0.5℃/min升温至-30℃后保温2h，再以板层温度1℃/min升温至-5℃后保温8h；
(c3)以板层温度1℃/min升温至15℃后保温10h，再以2℃/min升温至25℃后保温2h，压塞，完成冷冻干燥。
实施例6、制备醋酸西曲瑞克冻干组合物
处方：醋酸西曲瑞克28mg、甘露醇5g、氯化钠0.45g、注射用水至100ml。
制法：(a)使甘露醇和氯化钠溶解于约80ml注射用水中，向溶液中添加针用活性炭至0.5％w/v的浓度，搅拌30min，过滤脱炭，0.45μm微孔滤膜过滤二次；
(b)向药液A中添加醋酸西曲瑞克，室温搅拌30min，再在搅拌下滴加30％醋酸溶液直至药液完全溶解，加注射用水至100ml，用0.2μm微孔滤膜过滤(测定药液中的活性物质含量，测定药液pH＝4.79)，以每瓶含醋酸西曲瑞克以西曲瑞克(C70H92ClN17O14)计0.25mg的体积(约1ml/瓶)将滤液分装到2ml的管制瓶中，半加塞；
(c)将分装好的药液置冷冻干燥机中，按如下程序进行冷冻干燥直至冻干品水分含量小于1％后密塞即得冻干组合物：
(c1)将分装药液的管制瓶置常温冷冻干燥机内，启动冷冻机，以板层温度1℃/min降至5℃，接着以板层温度0.5℃/min继续降温至-25℃，保温1h，再以板层温度0.5℃/min继续降温至-45℃，保温3h；
(c2)密闭真空系统，开启真空泵直至真空度为0.15～0.25mba(历时约30min)，维持此真空度，保温1h，接着以板层温度0.5℃/min升温至-30℃后保温2h，再以板层温度1℃/min升温至-5℃后保温8h；
(c3)以板层温度1℃/min升温至15℃后保温10h，再以2℃/min升温至25℃后保温2h，压塞，完成冷冻干燥。
实施例7、制备醋酸西曲瑞克冻干组合物
处方：醋酸西曲瑞克28mg、甘露醇5.5g、注射用水至100ml。
制法：(a)使甘露醇溶解于约80ml注射用水中，向溶液中添加针用活性炭至0.5％w/v的浓度，搅拌30min，过滤脱炭，0.45μm微孔滤膜过滤二次；
(b)向药液A中添加醋酸西曲瑞克，室温搅拌30min，再在搅拌下滴加30％醋酸溶液直至药液完全溶解，加注射用水至100ml，用0.2μm微孔滤膜过滤(测定药液中的活性物质含量，测定药液pH＝4.94)，以每瓶含醋酸西曲瑞克以西曲瑞克(C70H92ClN17O14)计0.25mg的体积(约1ml/瓶)将滤液分装到2ml的管制瓶中，半加塞；
(c)将分装好的药液置冷冻干燥机中，按如下程序进行冷冻干燥直至冻干品水分含量小于1％后密塞即得冻干组合物：
(c1)将分装药液的管制瓶置常温冷冻干燥机内，启动冷冻机，以板层温度1℃/min降至5℃，接着以板层温度0.5℃/min继续降温至-25℃，保温1h，再以板层温度0.5℃/min继续降温至-45℃，保温3h；
(c2)密闭真空系统，开启真空泵直至真空度为0.15～0.25mba(历时约30min)，维持此真空度，保温1h，接着以板层温度0.5℃/min升温至-30℃后保温2h，再以板层温度1℃/min升温至-5℃后保温8h；
(c3)以板层温度1℃/min升温至15℃后保温10h，再以2℃/min升温至25℃后保温2h，压塞，完成冷冻干燥。
实施例8、制备醋酸西曲瑞克冻干组合物
处方：醋酸西曲瑞克28mg、马来酸0.35g、氯化钠0.45g、注射用水至100ml。
制法：
(a)使马来酸和氯化钠溶解于约80ml注射用水中，向溶液中添加针用活性炭至0.5％w/v的浓度，搅拌30min，过滤脱炭，0.45μm微孔滤膜过滤二次；
(b)向药液A中添加醋酸西曲瑞克，室温搅拌30min，再在搅拌下滴加30％醋酸溶液直至药液完全溶解，加注射用水至100ml，用0.2μm微孔滤膜过滤(测定药液中的活性物质含量，测定药液pH＝4.83)，以每瓶含醋酸西曲瑞克以西曲瑞克(C70H92ClN17O14)计0.25mg的体积(约1ml/瓶)将滤液分装到2ml的管制瓶中，半加塞；
(c)将分装好的药液置冷冻干燥机中，按如下程序进行冷冻干燥直至冻干品水分含量小于1％后密塞即得冻干组合物：
(c1)将分装药液的管制瓶置常温冷冻干燥机内，启动冷冻机，以板层温度1℃/min降至5℃，接着以板层温度0.5℃/min继续降温至-25℃，保温1h，再以板层温度0.5℃/min继续降温至-45℃，保温3h；
(c2)密闭真空系统，开启真空泵直至真空度为0.15～0.25mba(历时约30min)，维持此真空度，保温1h，接着以板层温度0.5℃/min升温至-30℃后保温2h，再以板层温度1℃/min升温至-5℃后保温8h；
(c3)以板层温度1℃/min升温至15℃后保温10h，再以2℃/min升温至25℃后保温2h，压塞，完成冷冻干燥。
实施例9、制备醋酸西曲瑞克冻干组合物
处方：醋酸西曲瑞克28mg、乳糖或蔗糖或甘氨酸5g、马来酸0.35g、氯化钠0.45g、注射用水至100ml。
制法：
(a)使乳糖或蔗糖或甘氨酸、马来酸和氯化钠溶解于约80ml注射用水中，向溶液中添加针用活性炭至0.5％w/v的浓度，搅拌30min，过滤脱炭，0.45μm微孔滤膜过滤二次；
(b)向药液A中添加醋酸西曲瑞克，室温搅拌30min，再在搅拌下滴加30％醋酸溶液直至药液完全溶解，加注射用水至100ml，用0.2μm微孔滤膜过滤(测定药液中的活性物质含量，测定药液pH＝4.83)，以每瓶含醋酸西曲瑞克以西曲瑞克(C70H92ClN17O14)计0.25mg的体积(约1ml/瓶)将滤液分装到2ml的管制瓶中，半加塞；
(c)将分装好的药液置冷冻干燥机中，按如下程序进行冷冻干燥直至冻干品水分含量小于1％后密塞即得冻干组合物：
(c1)将分装药液的管制瓶置常温冷冻干燥机内，启动冷冻机，以板层温度1℃/min降至5℃，接着以板层温度0.5℃/min继续降温至-25℃，保温1h，再以板层温度0.5℃/min继续降温至-45℃，保温3h；
(c2)密闭真空系统，开启真空泵直至真空度为0.15～0.25mba(历时约30min)，维持此真空度，保温1h，接着以板层温度0.5℃/min升温至-30℃后保温2h，再以板层温度1℃/min升温至-5℃后保温8h；
(c3)以板层温度1℃/min升温至15℃后保温10h，再以2℃/min升温至25℃后保温2h，压塞，完成冷冻干燥，得到3种分别添加乳糖或蔗糖或甘氨酸的粉针。
试验例1：醋酸西曲瑞克冻干组合物的质量检查
对实施例2～9所得全部组合物进行如下项目/方法的质量检查。
(1)性状：经检查，实施例2～9的全部粉针剂组合物均为白色冻干块状物。
(2)酸度：取粉针剂组合物，每瓶加水1ml溶解，依中国药典2020年版四部通则0631测定，本领域通常要求此溶液的pH值应为4.0～6.0。经测定，实施例2～9的粉针剂酸度均在4.75～4.93范围内，例如实施例2粉针剂的酸度为4.87。
(3)溶解时间：取粉针剂组合物，每批6瓶，每瓶加水1ml溶解，观察溶解时间，记录每批样品的溶解时间的平均值；一般地，由于原料药溶解性较差，因此粉针剂一般溶解时间通常较长，达2～3min甚至更长，但本领域通常规定不得过3分钟。经检测，市售粉针剂Cetrotide(H20140476)溶解时间为2m47s(2分47秒，下同)，实施例2～4和实施例6粉针剂溶解时间分别为0m42s、0m39s、0m47s、0m44s，实施例5和实施例7～8粉针剂的溶解时间分别为2m27s、2m44s、4m16s，实施例9所得三种粉针剂的溶解时间分别为3m31s、3m54s、4m3s。由这些结果可见，在包含甘露醇的情况下，增补氯化钠后可以显著缩短粉针剂的溶解时间，加氯化钠但不加甘露醇或者将甘露醇换为等量的乳糖/蔗糖/甘氨酸这类粉针常用赋形剂时溶解时间明显更长，可见，同时添加了适量甘露醇和氯化钠的粉针剂配方能够显著地缩短粉针剂的溶解时间。
(4)水分：取粉针剂组合物，照水分测定法(中国药典2020年版四部通则0832第一法2)测定，本领域通常规定该类粉针剂的水分含量不得过3％。经测定，Cetrotide(H20140476)水分1.87％、实施例2～4粉针剂水分在1.27～1.43％范围内例如实施例2水分1.36％，实施例5～9粉针剂水分在1.46～2.12％范围内，表明这些粉针剂水分均符合一般的粉针剂要求。
(5)有关物质：参考CN107664666B中的有关HPLC法和条件进行测试
照高效液相色谱法(中国药典2020年版四部通则0512)测定；
供试品溶液：对于每批粉针剂，取10瓶，每瓶精密加30％醋酸溶液1ml使溶解，再混合后制成每1ml中约含西曲瑞克0.25mg的溶液；
对照品贮备液：取醋酸西曲瑞克对照品与杂质6对照品各适量，精密称定，加30％醋酸溶液溶解，分别定量稀释制成每1ml中约含0.125mg的溶液，作为各对照品贮备液；已知杂质6亦称为[D-Ala10-OH]-西曲瑞克或称为Des-NH2-西曲瑞克；
对照品溶液：精密量取各对照品贮备液适量，置同一量瓶中，用30％醋酸溶液定量稀释制成每1ml中约含西曲瑞克、杂质6各1.25μg的混合溶液；
系统适用性溶液：取醋酸西曲瑞克对照品约14mg，置50ml量瓶中，再加杂质6对照品贮备液2ml，用30％醋酸溶液稀释制成每1ml中约含西曲瑞克0.25mg与杂质65μg的混合溶液；
灵敏度溶液：精密量取醋酸西曲瑞克对照品贮备液适量，用30％醋酸溶液定量稀释制成每1ml中约含西曲瑞克0.125μg的溶液；
色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(YMC Triart C18柱，4.6mm×250mm，5μm)；以0.4％硫酸溶液(在1000ml水中加入硫酸4ml、20％四丁基溴化铵溶液2ml，用氢氧化钠溶液调节pH值至2.7)-乙腈(90:10)为流动相A，以乙腈为流动相B；按下表进行线性梯度洗脱；柱温为35℃；流速为每分钟1.0ml；检测波长为226nm；进样体积20μl。
时间(分钟) 流动相A(％) 流动相B(％)
0 80 20
25 75 25
34 70 30
40 65 35
41 80 20
49 80 20
系统适用性要求：系统适用性溶液色谱图中，一般地要求，西曲瑞克、杂质6依次出峰，西曲瑞克峰与杂质6峰之间的分离度应大于3.0(实测大于4.0)，理论板数按西曲瑞克峰计算不低于5000(实测大于8000)(一个典型的系统适用性溶液色谱图参见图1)，灵敏度溶液色谱图中，西曲瑞克峰高的信噪比应大于10(实测大于15)；上述系统适用性要求均能满足；
测定法：精密量取供试品溶液与对照品溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图；
限度：供试品溶液色谱图中如有杂质峰(溶剂峰、醋酸峰、辅料峰除外)，按杂质对照品外标法以峰面积计算杂质6的含量，按主成分外标法以峰面积计算其他单个杂质的含量；对于粉针剂，本领域一般要求杂质6不得过2.0％、其他单个杂质不得过0.5％、总杂质不得过2.5％；
结果：粉针剂制备之后5±2℃避光放置不超过10天测定，实施例2～9各批粉针剂的测定结果(此结果亦作为稳定性试验中0月的结果)如下：
实施例2粉针剂的杂质6＝0.063％、其他单个杂质＝0.023％、总杂质＝0.145％，
实施例3～9全部粉针剂的杂质6＝0.055～0.072％、其他单个杂质＝0.028～0.042％、总杂质＝0.134～0.175％，表明使用同一批原料经历制剂过程制备得到的全部粉针剂它们的杂质分布及量无明显差异，与原料药相比亦无显著地增加，
Cetrotide(H20140476)粉针剂的杂质6＝0.253％、其他单个杂质＝0.081％、总杂质＝0.372％，该粉针杂质含量比实施例2～9高的可能原因是原料不同或者贮藏时间较长(距效期结束日还有11个月)，因此杂质的绝对量不具可比性。
本文所述其他单个杂质是指检测出的除了杂质6以外的其它杂质中的量最大的某个杂质。
(6)含量测定：使用上文测定粉针剂有关物质的HPLC条件进行测定，
供试品溶液：取某批粉针剂10瓶，每瓶加30％醋酸溶液溶解并定量稀释制成每1ml中约含西曲瑞克50μg的溶液，
对照品溶液：取醋酸西曲瑞克对照品适量，精密称定，加30％醋酸溶液溶解并定量稀释制成每1ml中约含西曲瑞克50μg的溶液，
测定法：精密量取供试品溶液与对照品溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算10瓶的平均含量；
结果：粉针剂制备之后4±2℃避光放置不超过10天测定，实施例2～9和市售品各批粉针剂的含量均在0.243～0.261mg/瓶范围内，相当于标示量的97.2％～104.4％，例如实施例2粉针剂的含量为0.256mg/瓶，相当于标示量的102.4％。
试验例2：醋酸西曲瑞克冻干组合物的稳定性
常规贮藏的制剂在进行稳定性加速试验时通常以40℃放置6个月的方式处理，本发明粉针剂需要在2～6℃的低温贮藏，因此稳定性加速试验以25℃放置6个月的方式处理。
将实施例2～9以及市售品及制备粉针所用原料药在避光条件下于25℃放置6个月，于0月和6月分别取样，照试验例1的各项目测定，结果发现，各批样品在杂质6方面呈现显著不同的变化差异，即不同产品的稳定性变化差异主要体现在有关物质的前后变化方面，这种变化以某杂质25℃-6月处置后的增加百分数表征，例如对于杂质6，以其6月含量减去0月含量所得差值除以该杂质0月含量所得商再乘以100％所得的百分数，即为杂质6在经历上述稳定性处理后的增加百分数，结果：
实施例2粉针剂之杂质6增加百分数为82.3％、其他单个杂质(与0月相比为同一杂质)增加百分数为53.7％、未见其它杂质有明显增加；
实施例3和4粉针剂之杂质6增加百分数为74.5％和86.9％、其他单个杂质(与0月相比为同一杂质)增加百分数为57.5％和49.6％、未见其它杂质有明显增加；
实施例5粉针剂之杂质6增加百分数为79.7％、其他单个杂质(与0月相比为同一杂质)增加百分数为54.3％、未见其它杂质有明显增加；
实施例6～9粉针剂、市售品粉针剂和本发明所用原料药的其他单个杂质(与0月相比为同一杂质)增加百分数均在46.7％～62.3％范围内，与实施例2无明显差异；
实施例6～9粉针剂之杂质6增加百分数在385～423％范围内例如实施例6粉针剂之杂质6增加百分数为407.2％，市售品粉针剂之杂质6增加百分数为437.4％，原料药之杂质6增加百分数为143.2％，这些结果表明，同时使用了甘露醇和马来酸的粉针剂中杂质6在稳定性处置过程中增长幅度显著更低。基于上文关于杂质增长速度以及溶解时间的出人预料的发现，显然，使用包含甘露醇、马来酸和氯化钠的实施例2～4粉针剂呈现显著更优的性能。
试验例3：粉针剂的稳定性
以25℃放置6个月的方式进行稳定性加速试验，对实施例2～4粉针剂进行考察，参考上文方法，测定它们在6月时的各项指标，结果如下：
(1)性状：经检查，全部粉针剂组合物均为白色冻干块状物。
(2)酸度：取粉针剂组合物，每瓶加水1ml溶解，依中国药典2020年版四部通则0631测定，三批粉针剂酸度分别为4.96、4.74、4.82。
(3)溶解时间：取粉针剂组合物，每批6瓶，每瓶加水1ml溶解，观察溶解时间，记录每批样品的溶解时间的平均值，实施例2～4三批粉针剂溶解时间分别为0m45s、0m40s、0m51s。
(4)水分：取粉针剂组合物，照水分测定法(中国药典2020年版四部通则0832第一法2)测定，三批粉针剂的水分分别为1.41％、1.29％、1.52％。
(5)有关物质：照高效液相色谱法(中国药典2020年版四部通则0512)测定，如上文所示，三批粉针剂稳定性处置6月后的杂质6、其他单个杂质相对于其0月的增加百分数均较小，6月后杂质6小于1％、其它单个杂质均小于0.5％、总杂质均小于2％。
(6)含量测定：三批粉针剂稳定性处置6月后的标示百分含量分别为101.3％、99.7％、102.7％。
以上试验结果表明本发明实施例2～4的粉针剂具有优良稳定性。
以上所述实施例仅是为充分说明本发明而所举的较佳的实施例，本发明的保护范围不限于此。本技术领域的技术人员在本发明基础上所作的等同替代或变换，均在本发明的保护范围之内。本发明的保护范围以权利要求书为准。

Claims (10)

1.一种药物组合物，其是以醋酸西曲瑞克为原料药添加辅料配制成水溶液，经冷冻干燥工艺除去水后，制成密封于玻璃瓶中的冷冻干燥粉针剂形式。
2.根据权利要求1的药物组合物，其每瓶中包含醋酸西曲瑞克0.1～0.5mg，例如其每瓶中包含醋酸西曲瑞克0.2～0.4mg，例如其每瓶中包含醋酸西曲瑞克0.25mg。
3.根据权利要求1的药物组合物，其中所述辅料包括甘露醇；例如，每瓶中的甘露醇的量为40～70mg，例如每瓶中的甘露醇的量为50～60mg，例如每瓶中的甘露醇的量为45～55mg。
4.根据权利要求1的药物组合物，其在冷冻干燥前每瓶溶液的体积为0.5～2ml，例如为0.8～1.2ml，例如为1ml。
5.根据权利要求1的药物组合物，其在冷冻干燥前溶液的pH值为4.0～6.0，例如pH值为4.0～5.5，例如pH值为4.5～5.5；或者，其每瓶加水1ml溶解后所得溶液的pH值为4.0～6.0，例如pH值为4.0～5.5，例如pH值为4.5～5.5。
6.根据权利要求1的药物组合物，其每瓶加水1ml完全溶解的时间小于3分钟，例如小于2分钟，例如小于1.5分钟。
7.根据权利要求1的药物组合物，其中的水分含量小于3％，例如小于2.5％，例如小于2％；例如，其每瓶中还包含马来酸2～5mg，例如还包含马来酸3～4mg；例如，其每瓶中还包含氯化钠3～6mg，例如还包含氯化钠4～5mg；例如，其在冷冻干燥前具有实施例2～9尤其是实施例2～4任一项所述的处方组成。
8.根据权利要求1的药物组合物，以每配制100ml的物料表示，其是照包括如下步骤的方法制备得到的：
(a)使甘露醇(和任选的马来酸和/或氯化钠)溶解于75～85ml注射用水中，向溶液中添加针用活性炭至0.5％w/v的浓度，搅拌30min，过滤脱炭，0.45μm微孔滤膜过滤二次；
(b)向药液A中添加醋酸西曲瑞克，室温搅拌30min，再在搅拌下滴加30％醋酸溶液直至药液完全溶解，加注射用水至100ml，用0.2μm微孔滤膜过滤(任选地测定药液中的活性物质含量、任选地测定药液pH)，以每瓶含醋酸西曲瑞克以西曲瑞克(C70H92ClN17O14)计0.25mg的体积(约1ml/瓶)将滤液分装到的管制瓶中，半加塞；
(c)将分装好的药液置冷冻干燥机中，按如下程序进行冷冻干燥直至冻干品水分含量小于1％后密塞即得冻干组合物：
(c1)将分装药液的管制瓶置常温冷冻干燥机内，启动冷冻机，以板层温度1℃/min降至5℃，接着以板层温度0.5℃/min继续降温至-25℃，保温1h，再以板层温度0.5℃/min继续降温至-45℃，保温3h；
(c2)密闭真空系统，开启真空泵直至真空度为0.15～0.25mba，维持此真空度，保温1h，接着以板层温度0.5℃/min升温至-30℃后保温2h，再以板层温度1℃/min升温至-5℃后保温8h；
(c3)以板层温度1℃/min升温至15℃后保温10h，再以2℃/min升温至25℃后保温2h，压塞，完成冷冻干燥。
9.制备权利要求1～8任一项的药物组合物的方法，包括如下步骤：
(a)使甘露醇溶解于75～85ml注射用水中，向溶液中添加针用活性炭至0.5％w/v的浓度，搅拌30min，过滤脱炭，0.45μm微孔滤膜过滤二次；
(b)向药液A中添加醋酸西曲瑞克，室温搅拌30min，再在搅拌下滴加30％醋酸溶液直至药液完全溶解，加注射用水至100ml，用0.2μm微孔滤膜过滤(任选地测定药液中的活性物质含量、任选地测定药液pH)，以每瓶含醋酸西曲瑞克以西曲瑞克(C70H92ClN17O14)计0.25mg的体积(约1ml/瓶)将滤液分装到的管制瓶中，半加塞；
(c)将分装好的药液置冷冻干燥机中，按如下程序进行冷冻干燥直至冻干品水分含量小于1％后密塞即得冻干组合物：
(c1)将分装药液的管制瓶置常温冷冻干燥机内，启动冷冻机，以板层温度1℃/min降至5℃，接着以板层温度0.5℃/min继续降温至-25℃，保温1h，再以板层温度0.5℃/min继续降温至-45℃，保温3h；
(c2)密闭真空系统，开启真空泵直至真空度为0.15～0.25mba，维持此真空度，保温1h，接着以板层温度0.5℃/min升温至-30℃后保温2h，再以板层温度1℃/min升温至-5℃后保温8h；
(c3)以板层温度1℃/min升温至15℃后保温10h，再以2℃/min升温至25℃后保温2h，压塞，完成冷冻干燥。
10.权利要求1～8任一项的药物组合物在制备用于辅助生育技术的促性腺激素释放激素拮抗剂的药物中的用途；例如，在制备用于对进行控制性卵巢刺激的患者防止提前排卵的药物中的用途。
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