CN116265937A - 一种磷酸奥司他韦有关杂质的检测方法及应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种磷酸奥司他韦有关杂质的检测方法及应用,其包括如下步骤:采用反向液相色谱法进行检测即可;反向液相色谱法的流动相为流动相A与流动相B的混合流动相;流动相A为磷酸盐缓冲溶液或乙酸铵缓冲溶液;流动相B为水溶性的极性有机溶剂;反向液相色谱法采用梯度洗脱,梯度洗脱时,流动相A:流动相B的体积比为(100:0)至(13:7)。本发明的检测方法能够实现杂质E与杂质F双峰的基线分离,也对三苯基氧膦具有选择性,具有分离效果好,灵敏度高,无空白干扰,检测成本低,分析速度快等优点。
Description
技术领域
本发明属于药物分析技术领域,具体涉及一种磷酸奥司他韦有关杂质的检测方法及应用。
背景技术
磷酸奥司他韦是用于成人和1岁及1岁以上儿童的甲型和乙型流感治疗或用于成人和13岁及13岁以上青少年的甲型和乙型流感的预防。其结构式为:
化学名为(3R,4R,5S)-4-乙酰氨基-5-氨基-3-(1-乙基丙氧基)-1-环己烯-1-羧酸乙酯磷酸盐。对于磷酸奥司他韦合成中引入的和贮存中降解的有关物质,无论是在原料药还是制剂中都是需要进行控制的。三丁基氧化膦为合成工艺中三丁基膦的氧化产物,三丁基膦由于其需要惰性气体保护,必须严格除氧,以免自由基链反应而被氧化,高度易燃,避免直接接触,远离火源等安全性特性,当前原料药企业较多采用三苯基膦来代替三丁基膦进行生产,故在生产过程中容易产生三苯基氧膦杂质。
在磷酸奥司他韦原料现行的中国药典2020年版二部中,所收录的有关杂质为杂质A、杂质E与杂质F,其检测方法为高效液相色谱法,但是无法分离杂质E与杂质F。
国外药典现有运用液相色谱法检测磷酸奥司他韦的分析技术和方法中,如欧洲药典9.8版本Ph.Eur.monograph 2422,运用超高效液相色谱法,以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,检测波长207nm,磷酸盐缓冲液(pH6.0)与甲醇和乙腈的流动相体系(620:245:135),流速1.2ml/min等度洗脱,将杂质C、杂质D与杂质E作为特定杂质,同时收录了潜在杂质A、F和G(杂质化学结构式及名称见下表),但由于杂质F具有对映异构体结构,在液相色谱中存在两个吸收峰,欧洲药典9.8版本Ph.Eur.monograph 2422方法依然无法分离杂质E与杂质F的双峰。
磷酸奥司他韦有关杂质的化学结构式及名称
因此,现有的磷酸奥司他韦有关杂质的检测方法中无法分离杂质E与杂质F,且均没有涉及三苯基氧膦的检测与分离,故本领域亟需一种专属性强、以及可同时检测多种杂质、且能够分离杂质E与杂质F的检测方法。
发明内容
本发明为了克服现有技术中磷酸奥司他韦有关杂质的检测方法专属性不强、以及不可同时检测到多种杂质、且杂质E与杂质F无法分离的缺陷,而提供一种磷酸奥司他韦有关杂质的检测方法及应用。本发明检测方法可同时检测磷酸奥司他韦原料和制剂中欧洲药典9.8版本中磷酸奥司他韦原料药质量标准中收录的6种杂质以及三苯基氧膦,具有分离效果好(能够分离杂质E与杂质F),灵敏度高,无空白干扰,检测成本低,分析速度快等优点。
本发明是通过以下技术方案解决上述技术问题的:
本发明提供了一种磷酸奥司他韦有关杂质的检测方法,其包括如下步骤:采用反向液相色谱法进行检测即可;
所述反向液相色谱法的流动相为流动相A与流动相B的混合流动相;
所述流动相A为磷酸盐缓冲溶液或乙酸铵缓冲溶液;
所述流动相B为水溶性的极性有机溶剂;
所述反向液相色谱法采用梯度洗脱,所述梯度洗脱时,流动相A:流动相B的体积比为(100:0)至(13:7)。
本发明中,所述反向液相色谱法的固定相较佳地为辛烷基硅烷键合硅胶,例如购自安捷伦型号为ZORBAX Extend C8,5um,4.6x150mm、十八烷基硅烷键合硅胶或硅胶微球键合五氟代苯基,更佳地为十八烷基硅烷键合硅胶,例如购自安捷伦型号为的C18,4.6x150mm,5um。
本发明中,所述反向液相色谱法的色谱柱长度较佳地为100nm-250nm,更佳地为150mm。
本发明中,所述磷酸盐缓冲溶液和/或所述乙酸铵缓冲溶液的pH值较佳地为4.0-7.0,更佳地为5.0-7.0,例如6.0。
本发明中,所述磷酸盐缓冲溶液和/或所述乙酸铵缓冲溶液的浓度较佳地为0.01-0.1mol/L,更佳地为0.05mol/L。
本发明中,所述磷酸盐缓冲溶液可为磷酸二氢钾溶液,例如0.05mol/L磷酸二氢钾溶液。
本发明中,一般地,所述磷酸盐缓冲溶液或所述乙酸铵缓冲溶液的pH值可通过氢氧化钾溶液、三乙胺溶液或乙酸溶液调节。所述氢氧化钾溶液的浓度可为本领域常规,例如1-2mol/L。所述三乙胺溶液或乙酸溶液可为本领域常规,例如可为100%的三乙胺或乙酸试剂,或者稀释后三乙胺溶液或乙酸溶液。
本发明中,氢氧化钾溶液、磷酸盐缓冲溶液、乙酸铵溶液、三乙胺溶液等一般均是指溶剂为水的溶液。
本发明中,所述反向液相色谱法的检测波长较佳地为200-254nm,更佳地为200-207nm。
本发明中,所述流动相的流速较佳地为0.5-1.0ml/min,更佳地为0.8-1.0ml/min。
本发明中,所述反向液相色谱法的色谱柱温度较佳地为30-40℃,例如为35-40℃。
本发明中,所述反向液相色谱法中的采用的进样量可为10μl。
本发明中,所述流动相B较佳地为甲醇、乙腈和四氢呋喃中的一种或多种,更佳地为甲醇与乙腈的混合试剂,或者甲醇与四氢呋喃的混合试剂。
当所述流动相B为甲醇和乙腈的混合试剂时,所述甲醇与所述乙腈的体积比较佳地为70:30或者80:20。当所述流动相B为甲醇与四氢呋喃的混合试剂时,所述甲醇与所述四氢呋喃的体积比较佳地为90:10。
本发明中,所述梯度洗脱中,所述流动相比例随时间的变化范围可如下表所示:
时间(min) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0-20 | (100-90) | (0-10) |
20-40 | (100-90)→(65-60) | (0-10)→(35-40) |
40-53 | (65-60) | (35-40) |
53-54 | (65-60)→(100-90) | (35-40)→(0-10) |
54-65 | (100-90) | (0-10) |
本发明中,所述梯度洗脱中,所述流动相比例随时间的变化范围较佳地如表1-5中任一种所示:
表1
时间(min) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0-20 | 100 | 0 |
20-40 | 100→65 | 0→35 |
40-53 | 65 | 35 |
53-54 | 65→100 | 35→0 |
54-65 | 100 | 0 |
表2
时间(min) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0-20 | 95 | 5 |
20-40 | 95→65 | 5→35 |
40-53 | 65 | 35 |
53-54 | 65→95 | 35→5 |
54-65 | 95 | 5 |
表3
时间(min) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0-20 | 95 | 5 |
20-40 | 95→60 | 5→40 |
40-53 | 60 | 40 |
53-54 | 60→95 | 40→5 |
54-65 | 95 | 5 |
表4
表5
时间(min) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0-53 | 100→65 | 0→35 |
53-54 | 65→100 | 35→0 |
54-65 | 100 | 0 |
本发明还提供了一种上述磷酸奥司他韦有关物质的检测方法的应用;其用于原料药及其相关制剂产品(例如片剂、胶囊剂、软膏剂等)的分析。
本发明中,所述磷酸奥司他韦有关杂质的检测方法的应用可包括如下步骤:
分别配制含磷酸奥司他韦对照品、杂质A、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、杂质G和三苯基氧膦的对照品溶液;以及配制含磷酸奥司他韦原料药或制剂供试品溶液,进行测定即可。
其中,每1ml对照品溶液中,可分别含磷酸奥司他韦对照品0.76mg、杂质A1.52μg、杂质C3.8μg、杂质D1.52μg、杂质E 2.28μg、杂质F1.52μg、杂质G1.52μg和三苯基氧膦1.52μg。
其中,所述供试品溶液的浓度可为1mg/ml。
其中,所述对照品溶液和所述供试品溶液的配制可采用能将其溶解的常规溶剂,例如磷酸与甲醇的混合溶剂,例如磷酸和甲醇的体积比为1:1的混合溶剂,再例如0.003mol/L磷酸-甲醇(1:1)溶液。
术语“原料药”表示由主要药物活性成分,以及含量可控的杂质组成。
术语“制剂”表示由主要药物活性成分,以及含量可控的杂质和/或辅料组成的,根据药典或药品监督部门批准的标准,为满足临床治疗或预防的需要而制备的药物应用形式(剂型)的具体品种。
术语“有关物质”或“杂质”表示任何影响药物纯度的物质。所述杂质按其理化性质一般分为三类:有机杂质、无机杂质及残留溶剂。按照其来源,杂质可以分为工艺杂质(包括合成中未反应完全的反应物及试剂、中间体、副产物等)、降解产物、从反应物及试剂中混入的杂质等。
在符合本领域常识的基础上,上述各优选条件,可任意组合,即得本发明各较佳实例。
本发明所用试剂和原料均市售可得。
和现有分析方法相比,本发明的有益效果在于:
本发明中,建立了可同时检测磷酸奥司他韦原料和制剂中中国药典2020年版和欧洲药典9.8版本中磷酸奥司他韦原料药和制剂质量标准中收录的6种杂质与三苯基氧膦,不仅能实现杂质E与杂质F双峰的基线分离,也对三苯基氧膦具有选择性,具有分离效果好,灵敏度高,无空白干扰,检测成本低,分析速度快等优点。
经方法学验证,其专属性、线性、范围、重复性、检测限、定量限、准确度均符合《中国药典》2020年版四部附录中,药品质量标准分析方法验证指导原则的要求,因此,本发明在磷酸奥司他韦的合成和制剂过程的质量控制方面具有重要的现实意义。
具体实施方式
下面通过实施例的方式进一步说明本发明,但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法,按照常规方法和条件,或按照商品说明书选择。
下述实施例和对比例中,
磷酸奥司他韦纯品(或对照品)购自中国食品药品检定研究院,纯度为99.8%;杂质E(纯度为100%)、杂质D(纯度为100%)和杂质C(按游离碱计,纯度为72.6%)均购自中国食品药品检定研究院。
磷酸奥司他韦原料药(或供试品)购自中西三维药业有限公司生产,批号:T180901。
杂质A购自欧洲药典杂质官网,纯度100%;
杂质G购自TLC Pharmaceutical Standards Ltd.,纯度99.3%;
杂质F购自Sinco Pharmachem Inc,纯度97.87%;
三苯基氧磷购自Sigma-Aldrich。
高效液相色谱仪为安捷伦1260系列高效液相色谱仪。
实施例1方法学考察
色谱条件:
色谱柱的长度为150mm;
流动相,流动相A:0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(用1mol/L氢氧化钾溶液调节pH值至5.0);流动相B:甲醇:四氢呋喃=90:10(V/V)。
按以下程序梯度洗脱(如表1所示):
表1
流速:0.8ml/min;检测波长:254nm
柱温:35℃;进样量:10μl
(1)专属性及系统适应性
分别取适量磷酸奥司他韦(纯品,纯度99.8%)、杂质A、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、杂质G和三苯基氧膦,以0.003mol/L磷酸溶液-甲醇(1:1)为稀释剂溶解并配制成含磷酸奥司他韦纯品1mg/ml,各组分杂质2μg/mL的混合杂质对照品溶液,进行测定,结果表明,杂质E与杂质F分离度大于1.0,各组分分离度均大于1.5。
(2)线性考察
分别取适量磷酸奥司他韦(纯品,纯度99.8%)、杂质A、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、杂质G和三苯基氧膦,用0.003mol/L磷酸溶液-甲醇(1:1)为稀释剂溶解,并以磷酸奥司他韦(原料药)供试品溶液(1mg/ml)的0.5%为基准,分别配制成20%、50%、100%、150%及200%系列标准溶液(各个杂质的浓度如下表6所示)。按拟定色谱条件进样测定,以峰面积(Y)对相应溶剂的质量浓度(X,mg/mL)进行线性回归。得各杂质在0.1~1.0μg/mL浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999,具体的线性方程如下表7所示。
表6
表7
项目 | 线性方程 | 相关系数 |
磷酸奥司他韦 | y=29.069x-0.4327 | R=1 |
杂质A | y=29.481x-0.5075 | R=1 |
杂质C | y=37.387x-0.1642 | R=1 |
杂质E | y=25.75x–0.1983 | R=1 |
杂质D | y=80.505x–2.7651 | R=1 |
杂质F | y=21.751x–0.3065 | R=1 |
杂质G | y=29.631x–0.2554 | R=1 |
三苯基氧化膦 | y=125.5x–2.4218 | R=1 |
(3)精密度
称取适量磷酸奥司他韦(原料药,批号:T180901,由中西三维药业有限公司生产;杂质A、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、杂质G和三苯基氧膦,用0.003mol/L磷酸溶液-甲醇(1:1)为稀释剂溶解并配制成含磷酸奥司他韦原料药1mg/ml,各组分杂质2μg/mL的混合杂质对照品溶液,平行配制6份,进行测定,结果表明平行6次进样,各杂质测得结果RSD均小于3%。
(4)灵敏度
称取适量杂质A、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、杂质G和三苯基氧膦,用0.003mol/L磷酸溶液-甲醇(1:1)为稀释剂溶解并配制成含各组分杂质0.2μg/mL的混合杂质对照品溶液,进行测定,各组分信噪比均大于10。
(5)准确度
称取适量磷酸奥司他韦的原料药,采用0.003mol/L磷酸溶液-甲醇(1:1)为稀释剂溶解、并加入各组分杂质的纯品配制成三个杂质浓度梯度,分别为1μg/mL、2μg/mL及4μg/mL,从而得到三个杂质浓度梯度的供试品溶液,其中磷酸奥司他韦原料药的浓度为1mg/ml,每个浓度梯度平行配制3份,进行测定,结果表明测得杂质含量的回收均在92-108%范围内,符合标准。
以上,通过专属性、线性、精密度、灵敏度和准确度的方法学验证,验证结果均符合均《中国药典》2020年版四部附录中,药品质量标准分析方法验证指导原则的要求。
实施例2
本实施例中的色谱条件(例如流动相、洗脱梯度、固定相等)均与实施例1一致。
(1)混合杂质对照品溶液的制备:
取磷酸奥司他韦对照品、杂质A、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、杂质G和三苯基氧膦对照品各适量,分别精密称定,加溶剂(0.003mol/L磷酸溶液-甲醇(1:1))溶解并定量稀释制成每1ml中约含奥司他韦0.76mg、杂质A1.52μg、杂质C 3.8μg、杂质D1.52μg、杂质E 2.28μg、杂质F1.52μg、杂质G1.52μg和三苯基氧膦1.52μg的溶液。
(2)供试品溶液的制备:
称取磷酸奥司他韦胶囊内容物适量,用0.003mol/L磷酸溶液-甲醇(1:1)为稀释剂溶解并配制成含磷酸奥司他韦1mg/ml的供试品溶液。
(3)测定
精密量取溶剂、供试品溶液与对照品溶液各10μl,分别注入液相色谱仪,记录色谱图得到如表8所示的测定结果。混合杂质对照品溶液色谱图中,杂质F与杂质E分离度不得小于1.0,其他各组分分离度不得小于1.5。
表8
实施例3
色谱条件:
固定相:辛烷基硅烷键合硅胶;(厂家安捷伦,型号ZORBAX Extend C8,5um,4.6x150mm)
色谱柱的长度为150mm;
流动相:流动相A:0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(用1mol/L氢氧化钾溶液调节pH值至6.0);流动相B:甲醇:乙腈=80:20(V/V)。
按以下程序梯度洗脱(如表2所示):
表2
时间(min) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0-20 | 95 | 5 |
20-40 | 95→65 | 5→35 |
40-53 | 65 | 35 |
53-54 | 65→95 | 35→5 |
54-65 | 95 | 5 |
流速:0.8ml/min;检测波长:207nm
柱温:35℃;进样量:10μl
(1)混合杂质对照品溶液的制备:
取磷酸奥司他韦对照品、杂质A、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、杂质G和三苯基氧膦对照品各适量,分别精密称定,加溶剂溶解并定量稀释制成每1ml中约含奥司他韦0.76mg/ml、杂质A1.52μg、杂质C 3.8μg、杂质D 1.52μg、杂质E 2.28μg、杂质F1.52μg、杂质G1.52μg和三苯基氧膦1.52μg的溶液。
(2)供试品溶液的制备:
称取磷酸奥司他韦胶囊内容物适量原料药,用0.003mol/L磷酸溶液-甲醇(1:1)为稀释剂溶解并配制成含磷酸奥司他韦1mg/ml的供试品溶液。
(3)测定
精密量取溶剂、供试品溶液与对照品溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图。混合杂质对照品溶液色谱图中,杂质F与杂质E分离度不得小于1.0,其他各组分分离度不得小于1.5,具体测定结果如表9所示。
表9
实施例4
实施例4与实施例3的区别仅在于:按以下程序梯度洗脱(如下表3所示):
表3
时间(min) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0-20 | 95 | 5 |
20-40 | 95→60 | 5→40 |
40-53 | 60 | 40 |
53-54 | 60→95 | 40→5 |
54-65 | 95 | 5 |
实施例5
实施例5与实施例3的区别仅在于:按以下程序梯度洗脱(如表4所示):
表4
按照实施例4和5的程序梯度洗脱方式进行洗脱,效果与实施例2和3的效果相当。
实施例6
实施例6与实施例3的区别仅在于:按以下程序梯度洗脱(如表5所示):
表5
时间(min) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0-53 | 100→65 | 0→35 |
53-54 | 65→100 | 35→0 |
54-65 | 100 | 0 |
实施例6可同时检测到杂质A、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、杂质G和三苯基氧膦,其分离效果如表10所示。
表10
对比例1
对比例1与实施例3的不同之处仅在于流动相A(缓冲溶液)为0.05mol/L乙酸铵水溶液,无流动相B,用100%的乙酸液调节pH至5.0。
杂质C、D的保留时间重合,无法分离。
Claims (10)
1.一种磷酸奥司他韦有关杂质的检测方法,其特征在于,其包括如下步骤:采用反向液相色谱法进行检测即可;
所述反向液相色谱法的流动相为流动相A与流动相B的混合流动相;
所述流动相A为磷酸盐缓冲溶液或乙酸铵缓冲溶液;
所述流动相B为水溶性的极性有机溶剂;
所述反向液相色谱法采用梯度洗脱,所述梯度洗脱时,流动相A:流动相B的体积比为(100:0)至(13:7)。
2.如权利要求1所述的磷酸奥司他韦有关杂质的检测方法,其特征在于,所述反向液相色谱法的固定相为辛烷基硅烷键合硅胶、十八烷基硅烷键合硅胶或硅胶微球键合五氟代苯基,更佳地为十八烷基硅烷键合硅胶;
和/或,所述反向液相色谱法的色谱柱长度为100nm-250nm,较佳地为150mm。
3.如权利要求1所述的磷酸奥司他韦有关杂质的检测方法,其特征在于,所述磷酸盐缓冲溶液和/或所述乙酸铵缓冲溶液的pH值为4.0-7.0,较佳地为5.0-7.0,例如6.0;
和/或,所述磷酸盐缓冲溶液和/或所述乙酸铵缓冲溶液的浓度为0.01-0.1mol/L,较佳地为0.05mol/L;
和/或,所述磷酸盐缓冲溶液或所述乙酸铵缓冲溶液的pH值通过氢氧化钾溶液、三乙胺溶液或乙酸溶液调节;所述氢氧化钾溶液的浓度较佳地为1-2mol/L。
4.如权利要求1所述的磷酸奥司他韦有关杂质的检测方法,其特征在于,所述磷酸盐缓冲溶液为磷酸二氢钾溶液,例如0.05mol/L磷酸二氢钾溶液。
5.如权利要求1所述的磷酸奥司他韦有关杂质的检测方法,其特征在于,所述反向液相色谱法的检测波长为200-254nm,较佳地为200-207nm;
和/或,所述流动相的流速为0.5-1.0ml/min,较佳地为0.8-1.0ml/min;
和/或,所述反向液相色谱法的色谱柱温度为30-40℃,较佳地为35-40℃;
和/或,所述反向液相色谱法中的采用的进样量可为10μl。
6.如权利要求1所述的磷酸奥司他韦有关杂质的检测方法,其特征在于,所述流动相B为甲醇、乙腈和四氢呋喃中的一种或多种,较佳地为甲醇与乙腈的混合试剂,或者甲醇与四氢呋喃的混合试剂;
当所述流动相B为甲醇和乙腈的混合试剂时,所述甲醇与所述乙腈的体积比较佳地为70:30或者80:20;
当所述流动相B为甲醇与四氢呋喃的混合试剂时,所述甲醇与所述四氢呋喃的体积比较佳地为90:10。
7.如权利要求1所述的磷酸奥司他韦有关杂质的检测方法,其特征在于,所述梯度洗脱中,所述流动相比例随时间的变化范围下表所示:
。
8.如权利要求1所述的磷酸奥司他韦有关杂质的检测方法,其特征在于,所述梯度洗脱中,所述流动相比例随时间的变化范围如表1-5中任一种所示:
表1
表2
表3
表4
表5
。
9.一种如权利要求1-8所述的磷酸奥司他韦有关物质的检测方法的应用,其特征在于,其用于原料药及其制剂的检测;
所述制剂较佳地为片剂、胶囊剂或软膏剂;
较佳地,所述磷酸奥司他韦有关物质的检测方法的应用包括如下步骤:
配制含磷酸奥司他韦、杂质A、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、杂质G和三苯基氧膦对照品溶液;以及配制含磷酸奥司他韦原料药或其制剂供试品溶液,进行测定即可。
10.如权利要求9所述的磷酸奥司他韦有关物质的检测方法的应用,其特征在于,每1ml对照品溶液中,分别含磷酸奥司他韦对照品0.76mg、杂质A1.52μg、杂质C3.8μg、杂质D1.52μg、杂质E 2.28μg、杂质F1.52μg、杂质G1.52μg和三苯基氧膦1.52μg;
和/或,所述供试品溶液的浓度为1mg/ml;
和/或,所述对照品溶液和/或所述供试品溶液的配制采用磷酸与甲醇的混合溶剂,例如磷酸和甲醇的体积比为1:1的混合溶剂,再例如0.003mol/L磷酸-甲醇(1:1)溶液。
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CN202111561848.8A CN116265937A (zh) | 2021-12-16 | 2021-12-16 | 一种磷酸奥司他韦有关杂质的检测方法及应用 |
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Cited By (1)
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CN117214369A (zh) * | 2023-11-09 | 2023-12-12 | 山东百诺医药股份有限公司 | 一种检测磷酸奥司他韦干混悬剂有关物质的液相色谱方法 |
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2021
- 2021-12-16 CN CN202111561848.8A patent/CN116265937A/zh active Pending
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CN117214369B (zh) * | 2023-11-09 | 2024-02-02 | 山东百诺医药股份有限公司 | 一种检测磷酸奥司他韦干混悬剂有关物质的液相色谱方法 |
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