CN116239706B - 一种直链茯苓β-葡聚糖及其提取方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种直链茯苓β‑葡聚糖及其提取方法和应用，直链茯苓β‑葡聚糖在DMSO中的分子量为451800g/mol，是β‑D‑呋喃葡萄糖残基以β‑(1→3)‑糖苷键连接而成的直链均一多糖，其提取方法包括如下步骤：将茯苓丁粉碎脱脂，用水提法去除水溶性多糖，再用低温碱提法提取，最后进行脱蛋白纯化，冷冻干燥即得直链茯苓β‑葡聚糖；将提取的直链茯苓β‑葡聚糖溶于碱液，加入甘草酸、冰醋酸混合液制备凝胶产品。本发明提取的茯苓多糖结构简单均一，纯度高，方法简单、成本低，制备的凝胶产品有良好的美白效果，安全可靠，可广泛用于化妆品行业。

Description

一种直链茯苓β-葡聚糖及其提取方法和应用

技术领域

本发明属于茯苓加工技术领域，具体涉及一种直链茯苓β-葡聚糖及其提取方法和应用。

背景技术

茯苓是多孔菌科茯苓属真菌茯苓Poriacocos(Schw.)Wolf的干燥菌核，作为药物始载于《神农本草经》被列为上品。多糖为茯苓的主要化学成分之一，茯苓多糖约占茯苓菌核总重70～90％，其中水溶性多糖约占3％左右，其余为水不溶性的碱溶性多糖。

关于茯苓多糖提取的报道很多，专利CN110655590A利用水提法+碱液提取获得茯苓多糖，其产品为杂多糖，结构并非简单均一，并且反应过程中反应釜温度高达74-76℃，而碱提法时高温条件会破坏多糖的结构，可能会导致多糖糖苷键断裂。专利CN111349181A利用酶解法提取茯苓多糖，虽然提取条件温和，不易破坏多糖结构，但是对实验要求高，需要寻求合适温度、pH、底物与酶浓度比例等因素，并且提取的多糖同样为杂多糖，结构并非简单均一。

此外，天然多糖凝胶在高分子生物医用材料方面的应用一直被广泛关注，多糖做为一种天然的大分子物质，生物相容性好，以多糖为原料制备的凝胶具有良好的生物相容性，且多糖水凝胶易于降解，制备方法简单。凝胶具有特殊的结构，可以作为基质负载其他具有生物活性的小分子物质，但是以茯苓多糖为原料制备的天然凝胶在化妆品领域的应用并不多。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明提供了一种直链茯苓β-葡聚糖及其提取方法和应用。

为达到上述目的，本发明采用以下技术方案：

本发明提供一种直链茯苓β-葡聚糖，所述直链茯苓β-葡聚糖在DMSO中的分子量为451800g/mol，是β-D-呋喃葡萄糖残基以β-(1→3)-糖苷键连接而成的直链均一多糖。

本发明还提供上述直链茯苓β-葡聚糖的提取方法，包括以下步骤：

S1、将茯苓丁粉碎过筛，有机溶剂回流脱脂，得脱脂残渣；

S2、取上述脱脂残渣加入盐水浸提过滤，并重复多次，直至滤液中检测不出糖含量，得二次残渣；

S3、取上述二次滤渣加入碱液浸提过滤，并重复1-2次，收集所有滤液；

S4、取S3中滤液用Sevage法脱蛋白过滤，重复多次至无蛋白质沉淀，收集所有上清液，并向上清液中加冰醋酸调pH至中性过滤，收集沉淀并洗涤，洗涤后沉淀经冷冻干燥得茯苓粗多糖；

S5、取上述茯苓粗多糖溶于DMSO溶液中，滴加超纯水并不断搅拌，收集产生的沉淀并冷冻干燥即得直链茯苓β-葡聚糖。

进一步地，所述步骤S1中过筛目数为60-100目，所述有机溶剂为丙酮和乙酸乙酯，分别回流脱脂4-6h，确保脱脂完全。

进一步地，所述步骤S2中盐水为0.9％氯化钠溶液，浸提温度80-100℃，浸提时间3-4h。

进一步地，所述步骤S3中碱液为0.3-0.8mol/L的NaOH水溶液，浸提温度0-5℃，浸提时间1-2h，低浓度碱液和低温浸提保证糖苷键不被破坏，提高提取率。

进一步地，所述步骤S4中所述洗涤依次用按质量体积比1:1加乙醇洗涤，然后再用按质量体积比1:10加水洗涤。

本发明还提供一种直链茯苓β-葡聚糖凝胶产品，利用上述直链茯苓β-葡聚糖来制备，制备方法如下：

(1)将所述直链茯苓β-葡聚糖溶解与碱液中，得多糖溶液；

(2)将甘草酸溶于冰醋酸中形成混合酸，备用；

(3)将(2)中的混合酸加入到(1)中的多糖溶液中调节pH，静置，即得直链茯苓β-葡聚糖凝胶产品。

进一步地，步骤(1)中碱液为0.3-0.8mol/L的NaOH水溶液，多糖溶液中直链茯苓β-葡聚糖浓度为1wt％-3wt％。

进一步地，步骤(3)中甘草酸与多糖溶液的质量体积比为1:1，pH为6-7，静置温度为0～25℃，静置时间1-2h。

上述直链茯苓β-葡聚糖凝胶产品在化妆品中的应用。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：

(1)本发明先用水提法去除水溶性多糖，然后通过低温碱提取法提取水不溶性多糖，再去除杂蛋白，最后利用DMSO进行纯化，得到的多糖结构简单均一，提取产率为60±2％、纯度为98.82％；

(2)本发明制备工艺简单，原材料易于取得，绿色环保；

(3)本发明所制备的凝胶产品具有良好的保湿性能、美白活性且能持续释放甘草酸，可以显著降低黑色素含量与酪氨酸酶活性，安全可靠，可广泛适用于化妆品。

附图说明

图1为本发明实施例1中PPCA二维核磁HMBC图；

图2为本发明实施例1中PPCA的SEC-LLS光谱图；

图3为本发明实施例1中PPCA单糖组成图谱；

图4为本发明实施例1中PPCA红外图谱；

图5为本发明实施例3中PPCA-G产品实物图；

图6为本发明实施例3中PPCA-G产品的SEM图；

图7为本发明实施例3中PPCA-GGA产品的缓慢释放曲线图；

图8为本发明实施例3中PPCA-GGA产品对黑色素细胞中黑色素含量影响图；

图9为本发明实施例3中PPCA-GGA产品对黑色素细胞中酪氨酸酶活性影响图。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步的详细说明，以使本领域的技术人员更加清楚地理解本发明。

茯苓由湖北辰美中药有限公司提供，生产批号：2121110220；

乙酸乙酯、丙酮、冰醋酸、NaCl、NaOH、DMSO购自国药集团化学试剂有限公司；

磷酸盐缓冲液购自源叶生物科技有限公司；

L-多巴购自上海颖心实验室；

RPMI-1640培养基购自普诺赛生物科技有限公司；

甘草酸标准品购自索莱宝生物科技有限公司；

实验小鼠由辽宁长生生物技术股份有限公司提供，8周龄FVB健康雄性小鼠。

实施例1

实施例提供一种直链茯苓β-葡聚糖的提取方法，具体包括如下步骤：

S1、将茯苓丁粉碎过80目筛，用150目纱布样品袋装载后放入索氏提取器，使用丙酮和乙酸乙酯分别回流6h，收集脱脂残渣。

S2、取上述脱脂残渣加入0.9％氯化钠溶液，加热到90℃搅拌4h，收集滤渣，并重复多次，采用苯酚硫酸法检测，直至滤液中检测不出糖含量，收集二次残渣。

S3、取上述二次滤渣加入0.5mol/LNaOH水溶液，在5℃条件下搅拌2h，收集滤液，并重复2次，收集所有滤液。

S4、取S3中滤液，按照滤液：氯仿：正丁醇＝25:5:1，采用Sevage法脱蛋白，搅拌30min，并重复3次过滤，收集所有上清液，向上清液中加99％冰醋酸调pH至中性并不断搅拌，直至产生大量沉淀，收集沉淀，并将沉淀按照质量体积比1:1加入95％乙醇，混合均匀后静置6h，收集沉淀，再取醇洗后的沉淀，按照质量体积比1:10加入蒸馏水，搅拌均匀后收集沉淀，并重复3次后收集所得沉淀即为茯苓粗多糖。

S5、取上述茯苓粗多糖溶于DMSO中，得浓度为1mg/mL的茯苓粗多糖DMSO溶液，使用恒压滴液漏斗逐滴滴加超纯水并不断搅拌，收集产生的沉淀并冷冻干燥即得直链茯苓β-葡聚糖，并命名为PPCA。

将所得PPCA的结构进行鉴定，包括以下步骤：

1)分子量：对实施例1获得的PPCA采用尺寸排除色谱-激光光散射仪联用装置进行纯度和分子量鉴定。

色谱柱：采用凝胶排阻色谱柱(OhpakSB-805HQ(300×8mm)，OhpakSB-804HQ(300×8mm)和OhpakSB-803HQ(300×8mm)串联。柱温60℃；进样量100μL；流动相B(0.5％LiBr，DMSO)，流速0.3ml/min，检测器：示差检测器为OptilabT-rEX(Wyatttechnology，CA，USA)，激光光散射检测器为DAWNHELEOSⅡ(Wyatttechnology，CA，USA)。

表1PPCA的分子量

如图2所示：其分子量分布呈现唯一、较窄对称峰，表明PPCA的分子量分布较窄，是一种均一多糖，在DMSO中的分子量为451800g/moL。

2)单糖组成分析：

采用离子色谱对PPCA的单糖组成进行分析，取干净的色谱瓶，精确称量多糖样品5mg(±0.05mg)，加入1ml2MTFA酸溶液，121℃加热2小时。通氮气，吹干。加入3mL甲醇清洗，再吹干，重复甲醇清洗2-3次。加入5mL无菌水溶解，转入色谱瓶中待测。采用ThermoU3000液相色谱系统。

标准品溶液的配制：依次称取鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸、氨基葡萄糖盐酸盐、氨基半乳糖盐酸盐单糖各5mg，岩藻糖10mg，溶解后用容量瓶定容至10ml，配制成标准品母液。按照下表2的标准品序列配置混标，进行离子色谱分析。色谱柱为ZORBAXEclipseXDB-C18,流动相为乙腈：磷酸盐缓冲液(磷酸二氢钾12g/L，2MNaOH调整PH至pH＝6.8)等度洗脱，乙腈和磷酸盐缓冲液的体积比为17:83，流速为0.8ml/min，柱温30℃，检测波长250nm，进样量10μl。

表2混标中单糖标准品浓度及出峰时间

如图3所示：PPCA单糖由葡萄糖组成。

3)键接方式测试分析：

采用FT-IR分析PPCA结构，结果如图4，吸收带在3600～3200cm^-1是-OH的伸缩震动吸收峰，为糖类的特征峰。在891cm^-1处有吸收峰，表明PPCA为β构型的葡聚糖。

经一维和二维核磁共振分析(如下表3所示)，¹³C核磁共振谱图只有六个特征碳的吸收峰，并没有其他杂峰。其中，只在δ103.51ppm处显示了一个异头碳(C-1)信号峰峰，表明它只存在唯一一种糖残基，通常β-异头碳连接的多糖C-1峰高于100ppm，而α-异头碳连接的多糖C-1峰低于100ppm，表明为PPCA为β多糖并且纯度较高，不含α多糖杂质。在低场范围(160-200ppm区域)未出现位移峰，表明不存在羰基峰，进一步证明PPCA为中性多糖，这与前文中FT-IR及元素分析结果相吻合。与¹³CNMR谱相比，由于存在H-H间相互耦合裂分峰，多糖¹HNMR谱图往往比较复杂难以解析。HMBC谱图反映与C原子直接相连的H原子与C原子间的耦合信息，在谱图中以交叉的点表现出来。若C的信号峰已经进行了归属，就可解析出¹H谱，归属结果列在表3中。再从它的¹³C-¹H HMBC碳氢相关二维核磁共振谱图中的化学位移值和近似的耦合常数，可以断定它是一种重复单元为葡萄糖的线型β-(1→3)-D-葡聚糖。可知PPCA是β-D-葡萄糖残基以β-(1→3)-糖苷键连接而成的直链均一多糖。

表3PPCA的氢谱和碳谱化学位移归属

NMR实验步骤：称取多糖样品50mg，将其溶于0.5ml的DMSO-d6中并冷冻干燥。随后将冻干粉再溶于0.5ml的重水中，并继续冷冻干燥，重复以上过程，以充分交换活泼氢。然后将样品溶于0.5ml的重水中，在室温25℃下置于以600MHz的核磁共振仪测定¹HNMR谱、¹³CNMR谱和二维图谱。

PPCA的¹H和¹³C的化学位移归属如上表3所示。结合单糖组成的结果可知PPCA是一种直链的β-葡聚糖。

最终确定：PPCA分子量为451800g/moL，是β-D-葡萄糖残基以β-(1→3)-糖苷键连接的直链β-葡聚糖。

PPCA对酪氨酸酶活性的影响：

将新鲜马铃薯-20℃预冷10h，去皮，切成碎块，取10g预冷的马铃薯置于研钵中，按(m/v＝1:1)加入磷酸盐缓冲液(PH＝6.86)，捣碎，顺时针研磨1min(冰上)，4000rpm离心10min，分离出上清置于冰上，3h内用尽。精密称定PPCA冻干品，溶于DMSO，配制成浓度为0.2mg/mL的多糖溶液。精密称定L-Dopa(L-多巴)，溶于PH＝6.86的磷酸盐缓冲液(PBS)中，使终浓度为1mg/mL。将各测试样混匀，将每个样品中的1～4种测试样混匀，将样品与酶混匀37℃，水浴10min，加入1ml底物反应10min，立即以475nm处测吸光度。按下式计算提取物对酪氨酸酶的抑制率。

表4PPCA对酪氨酸酶活性测定

其中测试样1结果为A1，测试样2结果为A2，测试样3结果为A3，测试样4结果为A4。

最终结果得出PPCA对酪氨酸酶活性抑制率为40.5％。

对比例1：

本对比例提供一种直链茯苓β-葡聚糖提取方法，其采用的原料及工艺步骤与实施例1的基本相同，区别在于：在步骤S4中，碱液提取温度换成25℃，其余条件不变。并将其制备的PPCA进行酪氨酸酶活性的影响实验，实验方法和实施例1中方法完全相同，实验结果见表5。

对比例2：

本对比例提供一种直链茯苓β-葡聚糖提取方法，其采用的原料及工艺步骤与实施例1的基本相同，区别在于：在步骤S4中，碱提多糖不使用sevage法脱蛋白，其余条件不变。并将其制备的PPCA进行酪氨酸酶活性的影响实验，实验方法和实施例1中方法完全相同，实验结果见表5。

表5实施例1和对比例1、2PPCA对酪氨酸酶抑制率结果

由表5结果可知，当碱液提取温度换成25℃或多糖不使用sevage法脱蛋白其制备的PPCA对酪氨酸酶抑制率较差，原因可能是25℃条件下碱液提取可能破坏了PPCA之间糖苷键，导致其活性下降；且未经脱蛋白时里面的杂蛋白也会影响PPCA活性。

实施例2

(1)将实施例1制备的PPCA溶解溶解于0.5mol/L的NaOH中配置成浓度为20mg/mL的多糖溶液。

(2)将甘草酸溶于99％冰醋酸中形成混合酸，备用。

(3)按照甘草酸与多糖溶液的质量体积比为1:1，将(2)中的混合酸加入到(1)中的多糖溶液中调节pH至7，4℃静置1h，即得直链茯苓β-葡聚糖凝胶产品，命名为PPCA-GGA。

将上述制备的PPCA-GGA进行保湿效果实验，具体实验步骤如下：

将所制备的PPCA-GGA称重，记为m₀。然后将凝胶置于相对湿度为30％±5％的环境中，分别于0.5h、1.0h、1.5h、2.0h、4.0、6.0h、8.0h、10.0h、12.0h时称重，记为m_i，上述实验重复3次，保湿率＝(m_i/m₀)*100％

表6PPCA-GGA保湿率

结果表明，PPCA-GGA具有良好的保湿效果，在0.5h时保湿率高达95.54±0.06％。

将上述制备的PPCA-GGA进行长效释放效果实验，具体实验步骤如下：

将PPCA-GGA分别置于20ml pH分别为5.0、6.8、7.4的磷酸盐缓冲液PBS中，将该体系置于37℃，rpm为80的孵育箱中振摇，分别于1、2、4、6、8、10、12h取4ml浸提液，并补充添加等量的磷酸盐缓冲液。

采用HPLC对浸提液中的甘草酸含量进行检测。色谱柱为：AgilentZORBAXSB-C18(4.6×250nm)；流动相为2％醋酸：甲醇＝27:73；检测波长为237nm；柱温：30℃；流速：1ml/min；进样量10μL。

长效释放效果结果见图7，结果表明：PPCA-GGA在12h内能够缓慢的释放甘草酸，在不同的PH环境下释放率有所不同。且随着浸提时间的增长，释放率在不断增加。在pH＝5.0的缓冲介质中，甘草酸8h时释放率为20.18±2.08％；在pH＝6.8的缓冲介质中，甘草酸8h时释放率为26.22±0.98％；在PH＝7.4的缓冲介质中，甘草酸8h时释放率为18.99±2.25％。

实施例3

PPCA-GGA在美白效果中的应用，本实施例所述PPCA-GGA均为实施例2制备的PPCA-GGA。

利用PPCA-GGA对小鼠黑色素瘤细胞中黑色素含量、氨酸酶活性以及对小鼠皮肤刺激、眼刺激这四组实验来进行表征。

1.PPCA-GGA对小鼠黑色素瘤细胞中黑色素含量具体步骤如下：

制备空白凝胶：和实施例2制备的PPCA-GGA采用的原料及工艺步骤基本相同，区别在于：制备过程中不使用甘草酸，仅用冰醋酸调节pH至7，4℃静置1h，即得空白凝胶产品，命名为PPCA-G。

使用培养基分别浸提空白凝胶和PPCA-GGA 10h，得凝胶浸提培养基。然后将处于对数生长期的B16细胞接种于55cm×16cm的培养皿，并随机分为空白对照组、PPCA-G组、PPCA-GGA组，培养24h后，弃去上清，按照分组依次加入空白培养基、PPCA-G浸提培养基、PPCA-GGA浸提培养基，培养24h。采用NaOH裂解法，使用1mol/LNaOH裂解细胞，100℃水浴30min，离心，取上清，将上清加入96孔板，于450nm处测定吸光度，黑色素含量＝(OD实验×106)/n×100％。

表7各组黑色素细胞黑色素含量

如图8、表7所示，结果表明：与空白对照组相比，PPCA-G组和PPCA-GGA组黑色素瘤细胞中黑色素含量显著降低，且PPCA-GGA组效果比PPCA-G组更明显。

2.PPCA-GGA对小鼠黑色素瘤细胞中酪氨酸酶活性影响具体步骤如下：

采用多巴氧化法，首先提前配制好1％TritonX-100溶液和0.1％L-DOPA溶液备用。

将处于对数生长期的细胞接种于96孔板中，将细胞随机分为对照组、PPCA-G组、PPCA-GGA组，培养24h。按照分组依次加入空白培养基、PPCA-G浸提培养基、PPCA-GGA浸提培养基后继续培养24h，将96孔板上清液弃去，每孔依次加入100μLTritonX-100溶液，在-80℃温度下冻存1h，而后室温下使其融化裂解，每孔依次加0.1％L-DOPA100μL，于37℃培养箱孵育2h，置酶标仪下测定其在490nm处OD值。

酪氨酸酶活性＝(OD实验-OD空白)/(OD正常-OD空白)×100％。

表8各组黑色素细胞酪氨酸酶活性

如图9、表8所示，结果表明，与空白组相比，PPCA-G组和PPCA-GGA组黑色素瘤细胞中酪氨酸酶活性显著降低，且PPCA-GGA组效果比PPCA-G组更明显。

3.PPCA-GGA对小鼠皮肤刺激性试验具体步骤如下：

随机选取4只雄性小鼠，试验开始前24h将动物背部脊柱两侧毛剃掉，去毛范围左右各约3cm×3cm。取PPCA-GGA0.5g，涂抹于一侧去毛皮肤处，另一侧作为空白对照。采用封闭实验，敷用24h后用温水洗去残留物，去除受试物后，分别于1、24、48h观察涂抹部位的皮肤反应，按《化妆品安全技术规范》评分标准进行皮肤反应积分和刺激强度评价(皮肤刺激强度评价标准：0～0.4无刺激性；0.5～2.9轻刺激性；3.0～5.9中等刺激性；6.0～8.0强刺激性)，以受试动物积分的平均值进行综合评价，根据24h、48h和72h各观察时点最高积分均值。

表9 PPCA-GGA对小鼠皮肤刺激性实验结果

试验结果表明，PPCA-GGA对小鼠皮肤刺激性等级为无刺激。

4.PPCA-GGA对小鼠眼刺激性试验具体步骤如下：

随机选取4只雄性小鼠，取PPCA-GGA0.1g滴入试验动物一侧的结膜囊内，另一侧作为对照。滴药后使眼被动闭合5～10s，防止受试物流出，另一侧眼睛不做处理，作为对照，滴入受试物后24h内不冲洗眼睛，在滴入受试物后1h、24h、48h、72h以及第4d和第7d对动物眼睛进行检查，如果72h未出现刺激反应，即可终止试验。按《化妆品安全技术规范》进行眼刺激性评价和眼刺激性强度判定(眼刺激强度评价标准：0～0.4无刺激性；0.5～2.9轻刺激性；3.0～5.9中等刺激性；6.0～8.0强刺激性)。

表10PPCA-GGA对小鼠眼刺激实验结果

试验结果表明，PPCA-GGA对小鼠眼刺激性等级为无刺激。

通过以上多项结果说明，本发明提供直链茯苓β-葡聚糖结构简单均一，所制备的凝胶产品具有良好的保湿性能、美白活性且能持续释放甘草酸，将其制备成PPCA-GGA可以更显著降低黑色素含量与酪氨酸酶活性，广泛适用于化妆品。

本发明中未对具体描述试剂、设备等均为现有技术中已经成熟运营，可以从市面上直接购买得到。

以上仅为本发明的较佳实施方案，并非用于限定本发明的保护范围。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (4)

1.一种直链茯苓β-葡聚糖凝胶产品，其特征在于，利用直链茯苓β-葡聚糖来制备，制备方法如下：

(1)将所述直链茯苓β-葡聚糖溶解与碱液中，得多糖溶液；

(2)将甘草酸溶于冰醋酸中形成混合酸，备用；

(3)将(2)中的混合酸加入到(1)中的多糖溶液中，调节pH，静置，即得直链茯苓β-葡聚糖凝胶产品；

所述的直链茯苓β-葡聚糖的提取方法，包括以下步骤：

S1、将茯苓丁粉碎过筛，有机溶剂回流脱脂，得脱脂残渣；

S2、取上述脱脂残渣加入盐水浸提过滤，并重复多次，直至滤液中检测不出糖含量，得二次残渣；

S3、取上述二次滤渣加入碱液浸提过滤，并重复1-2次，收集所有滤液；

S4、取S3中滤液用Sevage法脱蛋白过滤，收集所有上清液，并向上清液中加冰醋酸调pH至中性过滤，收集沉淀并洗涤，洗涤后的沉淀经冷冻干燥，得茯苓粗多糖；

S5、取上述茯苓粗多糖溶于DMSO溶液中，滴加超纯水并不断搅拌，收集产生的沉淀并冷冻干燥，即得直链茯苓β-葡聚糖；

所述步骤S1中过筛目数为60-100目，所述有机溶剂为丙酮和乙酸乙酯，分别回流脱脂4-6h；

所述步骤S2中盐水为0.9％氯化钠溶液，浸提温度80-100℃，浸提时间3-4h；

所述步骤S3中碱液为0.3-0.8mol/L的NaOH，浸提温度0-5℃，浸提时间1-2h；

所述步骤S4中所述洗涤依次用按质量体积比1:1加乙醇洗涤，然后再用按质量体积比1:10加水洗涤。

2.根据权利要求1所述的直链茯苓β-葡聚糖凝胶产品，其特征在于，步骤(1)中碱液为0.3-0.8mol/L的NaOH水溶液，多糖溶液中直链茯苓β-葡聚糖浓度为1wt％-3wt％。

3.根据权利要求2所述的直链茯苓β-葡聚糖凝胶产品，其特征在于，步骤(3)中甘草酸与多糖溶液的质量体积比为1:1，pH为6-7，静置温度为0-25℃，静置时间1-2h。

4.权利要求1至3任一项所述的直链茯苓β-葡聚糖凝胶产品在制备化妆品中的应用。