CN116236416A - 一种纳米负载的透明质酸钠及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种纳米负载的透明质酸钠,其为三层纳米球结构,包括最外层的透明质酸钠,中间层的纳米硒以及内层的二氢杨梅素,纳米硒以二氢杨梅素为模板结合,再成为透明质酸钠的载体。本发明制备得到三层纳米球结构的透明质酸钠,该纳米复合物在斑马鱼水平上,可以有效降低斑马鱼胚胎中类胰蛋白酶的表达水平,具有很好的抗过敏作用,可作为原料应用于抗过敏化妆品。

Description

一种纳米负载的透明质酸钠及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于化妆品领域,具体涉及一种纳米负载的透明质酸钠及其制备方法和应用。
背景技术
近年来,倍受敏感肌困扰的人群越来越多,对抗过敏的需求也越来越大。敏感肌的成因复杂,其形成机制尚不明晰。目前研究中涉及的成因有皮肤屏障功能受损、表皮存在炎症状态、皮肤感受神经系统异常,而这些成因往往相互促进累及,导致敏感肌肤问题陷入不良循环,不易转变为正常皮肤。
根据目前研究中涉及到的敏感肌成因,抗过敏也主要从保湿修复抗炎等方面进行开发。
硒是生物体必需的微量元素之一,在生命活动中发挥着至关重要的作用。研究证实,硒是生物体中谷胱甘肽过氧化物酶、磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶活性中心的关键组成元素。此外硒还具有清除自由基、抗衰老、保护肝脏、免疫调节、抗肿瘤等多方面活性。但硒的有效剂量和毒性剂量之间范围狭窄,超过临界浓度则毒性很强,尽管纳米技术的使用降低了硒的毒性,提高了其利用度,但其稳定性问题仍存在,容易聚沉且容易氧化,导致其失效甚至毒性增加。
透明质酸钠是一种葡聚糖醛酸,广泛存在于胎盘、羊水、晶状体、关节软骨、皮肤真皮层等组织,是皮肤屏障修复的重要成分之一,在化妆品中最重要的作用是保湿修复,但很少单独使用,一般与其他功效性成分配伍使用。透明质酸钠具有大分子多糖结构,可作为载体,将具有活性的纳米硒负载于透明质酸钠上,既能很好地分散纳米硒分子间的间距,防止其因分子碰撞从而导致聚沉的问题,同时透明质酸钠对纳米硒分子表面进行包裹,从而防止其被钝化成无活性的单质硒而失效和毒性增强。
发明内容
本发明提出了一种纳米负载的透明质酸钠,其是将以藤茶提取物二氢杨梅素(DMY)为模板的纳米硒(nano-Se)负载到透明质酸钠(HA)上,制备得到三层纳米球结构的透明质酸钠,该纳米复合物更稳定,抗过敏功效更出色,在斑马鱼水平上,可以有效降低斑马鱼胚胎中类胰蛋白酶的表达水平,具有很好的抗过敏作用,可作为原料应用于抗过敏化妆品。
本发明上述目的通过以下技术方案予以实现:
一种纳米负载的透明质酸钠,其为三层纳米球结构,包括最外层的透明质酸钠,中间层的纳米硒以及内层的二氢杨梅素,纳米硒以二氢杨梅素为模板结合,再成为透明质酸钠的载体。
本发明的一种纳米负载的透明质酸钠的制备方法,包括以下步骤:
e.称取藤茶提取物,加入液体脂质和表面活性剂,超声至溶解;
f.往上述体系中加入蒸馏水,超声至溶解,得到以藤茶提取物的模板溶液;
g.取一定量模板溶液,加入含硒离子的溶液,混合均匀后,在超声分散条件下,逐滴滴加还原剂。滴加完毕后,超声30min,得到以藤茶提取物为模板的纳米硒,呈红色透明胶体状。
h.将上述制备得到的红色纳米硒胶体,在磁力搅拌下,逐滴加入等体积的透明质酸钠溶液,滴加完毕后,室温搅拌30min,得到纳米负载的透明质酸钠水溶液。
所述藤茶提取物主要为二氢杨梅素,质量浓度为0.02%;液体脂质主要为亚麻籽油、辛癸酸甘油酯等,质量浓度为0.4%;表面活性剂主要为吐温80,质量浓度为4%;含硒离子溶液主要为二氧化硒,质量浓度为1.75%;还原剂为抗坏血酸,质量浓度为5%;透明质酸钠溶液质量浓度为0.25%。
附图说明
图1为纳米负载的透明质酸钠的示意图;
图2-4为制备得到的纳米负载的透明质酸钠在不同倍数下的透射电镜图;
图5为制备得到的纳米负载的透明质酸钠的稳定性评价结果;
图6为制备得到的纳米负载的透明质酸钠的抗过敏功效结果。
具体实施方式
为让本领域的技术人员更加清晰直观的了解本发明,下面将结合附图,对本发明作进一步的说明。
实施例1纳米负载的透明质酸钠的制备
称取10mg二氢杨梅素,加入200uL辛/癸酸甘油三脂和2mL吐温80,超声至固体完全溶解后,加入45mL去离子水,超声搅拌均匀,得到二氢杨梅素模板溶液,备用。
往二氢杨梅素模板溶液中加入2mL质量浓度为1.75%的二氧化硒溶液,混合均匀,在超声下逐滴滴加3mL质量浓度为5%的抗坏血酸溶液,滴加完毕后,超声30min,得到纳米硒-二氢杨梅素纳米复合物,体系呈红色纳米胶体。
上述制备得到的红色纳米胶体在磁力搅拌下,逐滴往里滴加等体积的质量浓度为0.25%的透明质酸溶液,滴加完毕后,搅拌30min,得到纳米硒负载透明质酸钠体系。
在透射电镜下观察,如图2-4所示,制备得到的样品呈三层结构,从里到外分别是二氢杨梅素、纳米硒和透明质酸钠,粒径大约在200nm。
实施例2样品的稳定性评价
将透明质酸溶液、纳米硒和二氢杨梅素直接混合,得到一个混合物样品,作为参照。
以去离子水为空白对照,在紫外分光光度仪上分别对实施例1制备的样品和混合物样品进行全波长扫描,记录最大吸光度,根据A=-LgT计算样品的透光率。
其中A为吸光度,T为透光率,透光率越大,样品越稳定。
测试结果如图5所示,实施例1制备得到的样品吸光度值为2.904,计算得透光率为0.12%,混合物的吸光度值为3.496,计算得透光率为0.03%。
从该结果可以看出,制备该三层结构的样品,比直接混合得到的样品体系更为稳定。
实施例3样品的抗过敏功效评价
挑选发育正常3dpf的斑马鱼置于96孔板中,每孔5条,模型对照组加入200μLCompound 48/80,测试组加入200μL受试样品溶液,溶剂对照组加入200μL蒸馏水,每个实验组设置3个复孔,于28℃孵育。
孵育后,每孔取100μL溶液置于0.5mL EP中,同时加入BAPNA,置于38℃孵育。
使用酶标仪检测各实验组的吸光值。Tryptase表达水平公式如下:
Figure SMS_1
采用SPSS 19.0软件统计处理数据,实验数据均用
Figure SMS_2
数据表示,用单因素方差分析。各浓度组与空白对照组两两比较:*P<0.05,**P<0.01,***P<0.005。
测试结果如图6所示,实施例1制备的样品和混合物均能有效抑制类胰蛋白酶的表达,具有抗过敏作用,其中实施例1制备的样品对斑马鱼Tryptase的相对表达水平为55.60±4.29%,混合物样品对斑马鱼Tryptase的相对表达水平为77.00±1.53%,低于模型对照组的斑马鱼Tryptase的相对表达水平(100.00±2.31%),表示两个样品均具有抗过敏作用,且实施例1制备的样品效果优于混合物样品。
上述对实施例的描述是为便于该技术领域的普通技术人员能理解和应用本发明。熟悉本领域技术的人员显然可以容易地对这些实施例做出各种修改,并把在此说明的一般原理应用到其他实施例中而不必经过创造性的劳动。因此,本发明不限于这里的实施例,本领域技术人员根据本发明的揭示,对于本发明做出的改进和修改都应该在本发明的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种纳米负载的透明质酸钠,其特征在于,其为三层纳米球结构,包括最外层的透明质酸钠,中间层的纳米硒以及内层的二氢杨梅素,纳米硒以二氢杨梅素为模板结合,再成为透明质酸钠的载体。
2.如权利要求1所述的一种纳米负载的透明质酸钠的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
a.称取藤茶提取物,加入液体脂质和表面活性剂,超声至溶解;
b.往上述体系中加入蒸馏水,超声至溶解,得到以藤茶提取物的模板溶液;
c.取一定量模板溶液,加入含硒离子的溶液,混合均匀后,在超声分散条件下,逐滴滴加还原剂;滴加完毕后,超声30min,得到以藤茶提取物为模板的纳米硒,
呈红色透明胶体状;
d.将上述制备得到的红色纳米硒胶体,在磁力搅拌下,逐滴加入等体积的透明质酸钠溶液,滴加完毕后,室温搅拌30min,得到纳米负载的透明质酸钠水溶液。
3.如权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述藤茶提取物主要为二氢杨梅素,质量浓度为0.02%。
4.如权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述液体脂质选自亚麻籽油、辛癸酸甘油酯,质量浓度为0.4%。
5.如权利要求2所述的制备方法,其特征在于,表面活性剂主要为吐温80,质量浓度为4%。
6.如权利要求2所述的制备方法,其特征在于,含硒离子溶液主要为二氧化硒,质量浓度为1.75%。
7.如权利要求2所述的制备方法,其特征在于,还原剂为抗坏血酸,质量浓度为5%。
8.如权利要求2所述的制备方法,其特征在于,透明质酸钠溶液质量浓度为0.25%。
9.如权利要求1所述的一种纳米负载的透明质酸钠在抗过敏化妆品中的应用。
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