CN116134143A - 多种抗病基因及其基因组堆叠件 - Google Patents

多种抗病基因及其基因组堆叠件 Download PDF

Info

Publication number
CN116134143A
CN116134143A CN202180057080.2A CN202180057080A CN116134143A CN 116134143 A CN116134143 A CN 116134143A CN 202180057080 A CN202180057080 A CN 202180057080A CN 116134143 A CN116134143 A CN 116134143A
Authority
CN
China
Prior art keywords
plant
seq
disease
leu
sequence
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202180057080.2A
Other languages
English (en)
Inventor
M·J·弗兰克
郜会荣
J·哈本
S·亨伯特
N·克里希那默西
M·拉斯纳
李柏林
R·B·米利
L·D·佩鲁吉尼
G·M·泰伯
P·J·沃尔特斯
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Pioneer Hi Bred International Inc
Original Assignee
Pioneer Hi Bred International Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Pioneer Hi Bred International Inc filed Critical Pioneer Hi Bred International Inc
Publication of CN116134143A publication Critical patent/CN116134143A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
    • C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
    • C12N15/8271—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
    • C12N15/8279—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for biotic stress resistance, pathogen resistance, disease resistance
    • C12N15/8286—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for biotic stress resistance, pathogen resistance, disease resistance for insect resistance
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8201—Methods for introducing genetic material into plant cells, e.g. DNA, RNA, stable or transient incorporation, tissue culture methods adapted for transformation
    • C12N15/8213—Targeted insertion of genes into the plant genome by homologous recombination
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
    • C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
    • C12N15/8271—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
    • C12N15/8274—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for herbicide resistance
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
    • C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
    • C12N15/8271—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
    • C12N15/8279—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for biotic stress resistance, pathogen resistance, disease resistance
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
    • C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
    • C12N15/8271—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
    • C12N15/8279—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for biotic stress resistance, pathogen resistance, disease resistance
    • C12N15/8282—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for biotic stress resistance, pathogen resistance, disease resistance for fungal resistance

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Insects & Arthropods (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

领域为分子生物学，并且更特别地，用于使用位点特异性编辑在基因组基因座中对多种天然基因、如抗病基因进行染色体工程化以产生植物的方法。本文还描述了在植物中产生包含多个种内多核苷酸序列的异源基因组基因座的方法。

Description

多种抗病基因及其基因组堆叠件
相关申请的交叉引用
本申请要求2021年3月1日提交的美国临时申请号63/154,960和2020年8月18日提交的美国临时申请号63/067,090的权益，将其中的每一个通过引用以其全文并入本文。
技术领域
领域为分子生物学，并且更特别地，用于使用位点特异性编辑在基因组基因座中对多种天然基因、如抗病基因进行染色体工程化以产生植物的方法。
以电子方式递交的序列表的引用
序列表的官方副本经由EFS-Web作为ASCII格式的序列表以电子方式提交，文件名为“7823WO ST25.txt”，创建于2021年8月10日，且具有249千字节大小，并与本说明书同时提交。包含在此ASCII格式的文件中的序列表是本说明书的一部分并且通过引用以其全文并入本文。
背景技术
植物在其染色体中含有多个基因及其等位基因变体。但是那些基因和等位基因通常不会以促进更快育种的方式与其他性状(如昆虫抗性和除草剂耐受性)结合。例如，对多种疾病的抗性是作物改良的重要组成部分，特别是在疾病压力和模式在不断变化的气候下迅速演变时。对特定疾病的抗性典型地通过将基因组区从抗性来源渗入至优良品系来实现。此方法耗时且经常导致产量累赘以及其他有害影响。此外，赋予针对多种疾病的抗性的渗入基因座变得不切实际(在时间和资源的背景下)(因为涉及的基因座数量)并且在遗传连锁基因座的情况下变得很困难。本公开提供了多种方法和组合物来克服使用多个基因座进行育种中的一些困难，并且提供了用于染色体工程化基因堆叠件如例如抗病基因的平台。
发明内容
可以通过本文所述的组合物和方法来克服用于将基因组区从来源渗入至优良品系的常规育种的限制。
本文提供的实施例描述了用于定义作物基因组区的方法，该作物基因组被特异性工程化以赋予对多种疾病、病原体种族及其组合的抗病性。另外，本文公开了用于通过基因编辑插入多种抗病基因并在定义的区内组合这些基因的方法。此外，本文公开了用于结合产品环境中的其他性状部署工程化区域的方法。
本文提供了用于在作物植物细胞中产生非天然的异源基因组基因座的方法，该异源基因组基因座包含多个种内多核苷酸序列。这些方法包括将两个或更多个种内多核苷酸序列引入植物细胞中的预定基因组基因座中，其中引入步骤不会导致对植物来说是天然的转基因或外源多核苷酸的整合；种内多核苷酸赋予植物一个或多个农艺学特征；在种内多核苷酸整合至异源基因组基因座之前，这些种内多核苷酸中的至少一个或多个来自不同的染色体，或者与异源基因组基因座相比，这些种内多核苷酸不位于与其天然配置相同的染色体中；并且该引入步骤包括不是传统育种的至少一种位点定向基因组修饰。在一个实施例中，该基因组基因座与包含一种或多种转基因性状的基因组基因座相邻，这些转基因性状包含来自不同植物物种的多个多核苷酸。在另一实施例中，转基因性状包含赋予对一种或多种昆虫的抗性的一种或多种性状。在又一实施例中，转基因性状包含除草剂耐受性状。
在一个实施例中，基因组基因座由约1至约5cM或作物植物物种的等效物理染色体图谱距离的染色体区定义。在另一实施例中，染色体区为约10Kb至约50Mb。在一些方面，该植物为玉米、大豆、卡诺拉油菜或棉花植物。
还提供了在优良作物植物基因组中产生疾病超级基因座(disease super locus)以提高该优良作物植物中的性状渗入效率的方法，该方法包括通过以下来在该作物植物染色体的预定基因组基因座处引入多种抗病性状：工程化插入两个或更多个抗病基因、通过靶向染色体工程化来基因组易位一个或多个抗病基因、通过靶向基因组修饰在该基因组基因座处工程化复制一个或多个抗病基因、通过引入一个或多个插入来修饰该基因组基因座、缺失或取代该基因组中的核苷酸、或上述的组合。在一个实施例中，疾病超级基因座与转基因性状连锁不平衡。在另一实施例中，转基因性状选自由昆虫抗性、除草剂耐受性和农艺学性状组成的组。在又一实施例中，转基因性状为先前存在的商业性状。在另一实施例中，通过减少至少50％回交或减少三代回交来提高性状渗入效率。在另一实施例中，通过减少至少10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或100％回交来提高性状渗入效率。在又一实施例中，通过减少至少一代、二代、三代或四代回交来提高性状渗入效率。
还提供了用于获得具有经修饰的基因组基因座的植物细胞的方法，该经修饰的基因组基因座包含至少两个异源多核苷酸序列或至少两种性状，该至少两个异源多核苷酸序列赋予对至少一种植物疾病的增强的抗病性，该至少两种性状通过两种不同的作用模式导致对至少一种疾病的抗性，其中所述至少两个多核苷酸序列与相应的基因组基因座异源并且来自相同的植物物种。该方法包括在植物细胞的基因组基因座的至少一个靶位点处引入位点特异性修饰；将赋予增强的抗病性的至少两个多核苷酸序列引入靶位点；以及获得具有基因组基因座的植物细胞，该基因组基因座包含赋予增强的抗病性的至少两个多核苷酸序列。在一个实施例中，至少一个靶位点包含选自表2的靶位点。在另一实施例中，两个异源多核苷酸中的至少一个进一步包含位点特异性修饰。在又一实施例中，位点特异性修饰为遗传修饰或表观遗传修饰。在一个实施例中，多核苷酸序列编码多肽序列，其中该多肽序列与选自由以下组成的组的多肽序列具有至少90％同一性：RppK(SEQ ID NO：11)、Ht1(SEQID NO：8)、NLB18(SEQ ID NO：3或5)、NLR01(SEQ ID No：29)、NLR02(SEQ ID No：26)、RCG1(SEQ ID No：31)、和RCG1b(SEQ ID No：33)。在另一实施例中，多核苷酸序列编码多肽序列，其中该多肽序列与选自由以下组成的组的多肽序列具有至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、或100％同一性：RppK(SEQ ID NO：11)、Ht1(SEQ ID NO：8)、NLB18(SEQ ID NO：3或5)、NLR01(SEQ ID No：29)、NLR02(SEQ ID No：26)、RCG1(SEQ ID No：31)、和RCG1b(SEQ ID No：33)。在又一实施例中，多核苷酸序列编码多肽序列，其中该多肽序列与选自由以下组成的组的多肽序列具有至少90％同一性：PRR03(SEQ ID No：36)、PRR01(SEQ ID No：38)、NLR01(SEQ ID No：41)、和NLR04(SEQ ID No：44)。在另一实施例中，多核苷酸序列编码多肽序列，其中该多肽序列与选自由以下组成的组的多肽序列具有至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性：PRR03(SEQ ID No：36)、PRR01(SEQ ID No：38)、NLR01(SEQ ID No：41)、和NLR04(SEQ ID No：44)。
还提供了用于获得具有经修饰的基因组基因座的植物细胞的方法，该经修饰的基因组基因座包含至少两个多核苷酸序列或至少两种性状，该至少两个多核苷酸序列赋予对至少一种植物疾病的增强的抗病性，该至少两种性状通过两种不同的作用模式导致对至少一种疾病的抗性，其中该至少两个多核苷酸序列与相应的基因组基因座异源。在一个实施例中，该方法包括在植物细胞的基因组基因座的一个或多个靶位点处引入双链断链或位点特异性修饰；引入赋予增强的抗病性的至少两个多核苷酸序列；以及获得具有基因组基因座的植物细胞，该基因组基因座包含赋予增强的抗病性的至少两个多核苷酸序列。在一个实施例中，至少一个靶位点包含选自表2的靶位点。在另一实施例中，多核苷酸序列编码多肽序列，其中该多肽序列与选自由以下组成的组的多肽序列具有至少90％同一性：RppK(SEQ ID NO：11)、Ht1(SEQ ID NO：8)、NLB18(SEQ ID NO：3或5)、NLR01(SEQ ID No：29)、NLR02(SEQ ID No：26)、RCG1(SEQ ID No：31)、和RCG1b(SEQ ID No：33)。在另一实施例中，多核苷酸序列编码多肽序列，其中该多肽序列与选自由以下组成的组的多肽序列具有至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、或100％同一性：RppK(SEQ ID NO：11)、Ht1(SEQ ID NO：8)、NLB18(SEQ ID NO：3或5)、NLR01(SEQ ID No：29)、NLR02(SEQ IDNo：26)、RCG1(SEQ ID No：31)、和RCG1b(SEQ ID No：33)。在又一实施例中，多核苷酸序列编码多肽序列，其中该多肽序列与选自由以下组成的组的多肽序列具有至少90％同一性：PRR03(SEQ ID No：36)、PRR01(SEQ ID No：38)、NLR01(SEQ ID No：41)、和NLR04(SEQ IDNo：44)。在另一实施例中，多核苷酸序列编码多肽序列，其中该多肽序列与选自由以下组成的组的多肽序列具有至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性：PRR03(SEQ ID No：36)、PRR01(SEQ ID No：38)、NLR01(SEQ ID No：41)、和NLR04(SEQ IDNo：44)。
还提供了包含经修饰的基因组基因座的植物，该基因座包含至少第一经修饰的靶位点和第二经修饰的靶位点，其中该第一经修饰的靶位点包含赋予对第一植物疾病的增强的抗病性的第一多核苷酸序列，并且其中该第二经修饰的靶位点包含赋予对该第一植物疾病或第二植物疾病的增强的抗病性的第二多核苷酸序列，其中该第一多核苷酸序列和该第二多核苷酸序列与该经修饰的基因组基因座异源并且存在于小于约1cM的基因组窗口内。
还提供了用于获得具有经修饰的基因组基因座的植物细胞的方法，该经修饰的基因组基因座包含至少两个多核苷酸序列或至少两种性状，该至少两个多核苷酸序列赋予对至少一种植物疾病的增强的抗病性，该至少两种性状通过两种不同的作用模式导致对至少一种疾病的抗性，其中该至少两个多核苷酸序列与相应的基因组基因座异源，其中该基因组基因座位于1号染色体的远端区。在一个实施例中，基因组基因座位于端粒区。
还提供了在植物的单个基因座处育种转基因和天然疾病性状的方法，该方法包括在植物的单个基因座处插入赋予对第一植物疾病的增强的抗病性的第一异源多核苷酸序列和赋予对该第一植物疾病或第二植物疾病的增强的抗病性的第二异源多核苷酸序列；在该单个基因座处插入至少一个编码杀昆虫多肽、农艺学性状多肽或除草剂抗性多肽的异源多核苷酸序列；将具有该单个基因座的植物与不同的植物杂交；以及获得包含该单个基因座的子代植物；并且其中与在多于一个的基因座处具有性状的植物相比，该单个基因座允许较少的回交。
还提供了将多个抗病基因座渗入或正向育种至优良种质的方法，其中将来自不同供体植物的两个或更多个异源多核苷酸插入优良品系并开发纯合抗性品系的时间段更短。在一个实施例中，这些方法包括改善具有多种抗病性的农艺学性状，并减少育种的产量累赘。
还提供了堆叠来自多种来源的遗传连锁抗性基因的方法。在一方面，提供了经修饰的作物植物，其包含堆叠在单个基因组基因座中的至少两个、至少三个或至少四个性状基因，其中单个基因座中的性状堆叠件允许提高育种效率，并且其中该性状堆叠件包含通过基因组修饰引入的至少两种或更多种非转基因天然性状，这些天然性状包含来自相同作物植物的多核苷酸。在一个实施例中，性状基因是天然性状。在另一实施例中，性状基因选自由除草剂耐受性、昆虫抗性、产量性状或抗病性组成的组。
另外的实施例提高了堆叠性状的育种效率，其中这些堆叠性状位于单个基因座并且这些堆叠性状包含导致对两种不同疾病的抗性的至少两种性状或通过两种不同作用方式导致对至少一种疾病的抗性的至少两种性状。在一些实施例中，堆叠性状进一步包含在单个基因座处的昆虫控制性状和/或除草剂抗性性状。
还提供了经修饰的植物，其包含选自由NLB18、Ht1和RppK组成的组的至少三种抗病基因，其中该至少三种抗病基因位于同一基因组基因座。在一个实施例中，该植物为玉蜀黍植物。在一个实施例中，该植物进一步包含PRR03。在另一实施例中，经修饰的植物进一步包含选自以下的至少一种基因：NLR01、NLR02、RCG1、RCG1b、PRR03、PRR01、NLR01和NLR04。
附图和序列表说明
图1示出了育种堆叠方法的实例。通过在超级基因座的靶位点1、3和6处分别插入3个、2个和2个目的基因独立地创建变体1、2和3。变体1和变体2通过使用标准育种方法杂交组合。选择含有靶位点1处的插入和靶位点3处的插入两者的重组体。通过使用标准育种方法杂交来将新材料与变体3进一步组合。选择含有靶位点1和3处的插入和靶位点6处的插入的重组体。新材料由超级基因座的若干靶位点处的一个或几个目的基因的多个插入组成。
图2是创建多疾病抗性堆叠件的可能情形的图示。A.在分子堆叠方法中，含有一个或多个目的基因的一个构建体用作修复模板以在超级基因座的靶位点处插入那些基因。B.在育种堆叠方法中，将目的基因独立地插在几个靶位点处，然后通过育种杂交组装以获得超级基因座处所需的一组基因。C.在连续转化方法中，含有一个或多个目的基因的一个构建体用作修复模板，以在单个靶位点处插入那些基因。然后将包含此第一插入的材料用作下一插入的转化背景，其中将另一组一个或多个目的基因插在超级基因座的相同或另一靶位点处。可以重复此迭代方法以获得超级基因座处目的基因的期望组合。此处呈现的三种情形可以组合使用，以在超级基因座处组装所需的一组目的基因。
序列表说明
Figure BDA0004113413250000081
Figure BDA0004113413250000091
具体实施方式
应当理解的是，本文所使用的术语仅用于描述特定实施例的目的，而不旨在是限制性的。当在本说明书和所附权利要求书中使用时，单数和单数形式的术语例如“一个/一种(a/an)”以及“所述/该(the)”包括复数指代物，除非上下文中另外明确指明。因此，例如术语“植物(plant)、所述植物(the plant)、或一种植物(a plant)”也包括多种植物；也取决于上下文，使用的术语“植物”也可包括该植物遗传相似或相同的子代；使用的术语“核酸”实际上任选地包括该核酸分子的多个拷贝；同样地，术语“探针”任选地(并且典型地)涵盖许多相似或相同的探针分子。除非另有定义，本文所用的所有技术和科学术语具有与本公开所属领域的普通技术人员通常所理解相同的含义，除非另有明确说明。
本文提供了组合物和方法以修饰玉蜀黍基因组，以产生具有增强的抗病性的玉蜀黍植物，这些疾病包括但不限于北方叶枯病、炭疽茎腐病、灰叶斑病、南方锈病、黑肿病(tarspot)、玉米细菌性枯萎病、高斯细菌性枯萎病和疫病(Goss’s Bacterial Wilt andBlight)、绒毛草叶枯病、细菌性叶枯病、细菌性茎腐病、细菌性叶条斑病、细菌性条纹和叶斑病(Bacterial Stripe and Leaf Spot)、蚕豆赤斑病、籽粒冠斑病(Kernel CrownSpot)、玉米矮化病、玉蜀黍丛矮病、种子腐烂病、幼苗枯萎病和猝倒病、腐霉根腐病(和饲养根坏死病(Feeder Root Necrosis))、丝核菌冠和支柱根腐病、镰刀菌根腐病、红根腐病、南方玉米叶枯病、北方玉米叶枯病、北方玉米叶斑病、喙叶斑病、节壶菌褐斑病(PhysodermaBrown Spot)、眼斑病(eyespot)、炭疽叶枯病、灰叶斑病、高粱霜霉病、爪哇霜霉病、菲律宾霜霉病、甘蔗霜霉病、拉贾斯坦霜霉病(Rajasthan Downy Mildew)、甜根子草霜霉病、裂叶霜霉病、拟禾本科霜霉病(Graminicola Downy Mildew)、疯顶病(Crazy Top)、褐条霜霉病、麦角症、瘤黑粉病、丝黑穗病、稻曲病、普通锈病、南方锈病、热带锈病、赤霉菌属茎腐病、色二孢(狭壳柱孢属(Stenocarpella))茎腐病、炭疽茎腐病、木炭腐病、镰刀菌属茎腐病、腐霉茎腐病、晚枯病、曲霉属穗腐病、色二孢穗腐病、镰刀菌属粒或穗腐病、赤霉菌属穗或红腐病、黑孢霉属穗腐或穗轴腐病、青霉菌穗腐病和蓝眼病、真菌毒素和真菌毒素中毒(Mycotoxicoses)、玉蜀黍矮花叶病、玉蜀黍褪绿矮缩病、玉蜀黍条斑病、玉蜀黍粗矮缩病、南方根结线虫、腐线虫、刺线虫、针线虫、短粗根线虫、Awl线虫、玉米胞囊线虫、匕首线虫、兰斯线虫、环线虫、旋线虫、矮化线虫、由寄生种子植物如独脚金引起的疾病。
术语“等位基因”是指在特定基因座处出现的两种或更多种不同核苷酸序列中的一种。等位基因可以包括单核苷酸多态性(SNP)以及较大的插入和缺失(“Indel”)。
术语“种内”是指相同物种内的生物体。术语“种内多核苷酸序列”是指来自相同物种的多核苷酸序列，如例如玉蜀黍作物的玉蜀黍DNA、大豆作物的大豆DNA。
“回交”是指杂交体子代借以反复与亲本中之一杂交的方法。在回交方案中，“供体”亲本是指待渗入的具有所需的一种或多种基因、基因座或特定表型的亲本植物。“受体”亲本(使用一次或多次)或“轮回”亲本(使用两次或更多次)是指基因或基因座被渗入到其中的亲本植物。例如，参见Ragot，M.等人(1995)Marker-assisted backcrossing：apractical example[标记辅助回交：实践实例]，在Techniques et Utilisations desMarqueurs Moleculaires Les Colloques[分子标记技术和应用专题讨论会]第72卷，第45-56页中，以及Openshaw等人，(1994)Marker-assisted Selection in BackcrossBreeding[回交育种中的标记辅助选择]，Analysis of Molecular Marker Data[分子标记数据分析]，第41-43页。最初的杂交产生F1代；术语“BC1”则是指第二次使用轮回亲本，“BC2”是指第三次使用轮回亲本，以此类推。
厘摩(“cM”)是重组频率的度量单位。一个cM等于有1％的机会，一个遗传基因座处的标记会由于单代中的交换而与第二基因座处的标记分离。
如本文所用，术语“染色体区间”是指存在于植物单一染色体上的基因组DNA的连续线性跨度。位于单条染色体区间上的遗传元件或基因是物理连锁的。染色体区间的大小没有特别的限制。在一些方面，位于单条染色体区间内的遗传元件是遗传连锁的，典型地具有例如小于或等于20cM，或者可替代地，小于或等于10cM的遗传重组距离。也就是说，单条染色体区间内的两个遗传元件以小于或等于20％或10％的频率进行重组。
在本申请中，短语“紧密连锁”是指两个连锁的基因座之间的重组以等于或小于约10％(即，在遗传图谱上分隔不超过10cM)的频率发生。换言之，该紧密连锁的基因座有至少90％的机会发生共分离。当标记基因座显示与所需的性状(例如，对灰叶斑病的抗性)发生共分离(连锁)的显著概率时，该标记基因座对于本公开内容的主题是特别有用的。紧密连锁的基因座(例如标记基因座和第二基因座)可以显示10％或更低、优选约9％或更低、还更优选约8％或更低、又更优选约7％或更低、还更优选约6％或更低、又更优选约5％或更低、还更优选约4％或更低、又更优选约3％或更低、以及还更优选约2％或更低的基因座间重组频率。在非常优选的实施例中，相关基因座显示约1％或更低，例如约0.75％或更低、更优选约0.5％或更低、或又更优选约0.25％或更低的重组频率。定位于相同染色体并且具有使得两个基因座之间的重组以小于10％(例如，约9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％、0.75％、0.5％、0.25％或更少)的频率发生的距离的该两个基因座也被认为是彼此“邻近的”。在一些情况下，两个不同的标记可以具有相同的遗传图谱坐标。在这种情况下，两个标记彼此非常邻近，以至于两者之间的重组以不可检测的这种低频发生。
当基因渗入时，不仅引入了基因而且引入了侧接区域(Gepts.(2002).Crop Sci[作物科学]；42：1780-1790)。这称为“连锁累赘”。在供体植物与受体植物极不相关的情况下，这些侧接区域携带可以编码农艺学上不需要的性状的另外的基因。即便与优良品系回交多个周期后，此“连锁累赘”也可能导致产量下降或其他负面农艺学特征。这有时也称为“产量累赘”。
术语“杂交的”或“杂交”是指有性杂交，并且涉及通过授粉将两种单倍体配子融合以产生二倍体子代(例如细胞、种子或植物)。该术语涵盖一株植物被另一株植物授粉和自交(或自体授粉，例如当花粉和胚珠来自同一植物时)两者。
如本文所用，术语“疾病超级基因座”或“DSL”通常是指包含靶向至少两种不同植物疾病的至少两种不同抗病基因或者包含通过两种不同的作用模式的靶向至少一种疾病的至少两种不同的抗病基因的基因组基因座。在一个实施例中，抗病基因彼此相距约0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10cM以内。在另一实施例中，抗病基因彼此相距约1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、200、300、400、500、600、700、800、900、1000、2000、3000、4000、5000、6000、7000、8000、9000、10000、20000、30000、40000、50000、60000、70000、80000、90000、100000或约1000000个碱基以内。可以将此DSL以促进增强育种(位于同一位置的转基因除草剂和/或昆虫或其他农艺学性状)的方式进行工程化。
“遗传图谱”是对给定物种内的一个或多个染色体(或连锁群)上的基因座之间的遗传连锁关系的描述，通常以图表或表格形式描述。对于每个遗传图谱，基因座之间的距离通过这些基因座的等位基因在群体中一起出现的频率(基因座的重组频率)来测量。可以使用DNA或蛋白标记或者可观察到的表型来检测等位基因。遗传图谱是用来作图的群体、所用标记的类型以及不同群体之间每个标记的多态性潜力的产物。对于不同的遗传图谱，基因座之间的遗传距离可以是不同的。但是，可以使用通用标记，将信息从一张图谱关联到另一张图谱上。本领域的普通技术人员可以使用通用标记位置来鉴定每个单独的遗传图谱上的标记和其他目的基因座的位置。尽管由于例如在不同群体中检测交替重复基因座的标记、在用于排序这些标记的统计学方法上的差异、新的突变或实验室错误，经常在标记顺序上有小的变化，但是基因座顺序在图谱之间不应该改变。
“遗传图谱定位”是遗传图谱上相对于相同连锁群上的周围遗传标记的定位，其中在给定物种内可以找到指定的标记。
“遗传作图”是通过使用遗传标记、针对这些标记的群体分离和重组频率的标准遗传原理来定义基因座的连锁关系的方法。
“遗传标记”是在群体中多态的核酸，并且该遗传标记的等位基因可以通过一种或多种分析方法(例如RFLP、AFLP、同工酶、SNP、SSR等)来检测和区分。该术语还指与用作探针的基因组序列(例如核酸)互补的核酸序列。可以通过本领域中公认的方法检测对应于群体成员之间的遗传多态性的标记。这些方法包括，例如基于PCR的序列特异性扩增方法、限制性片段长度多态性检测(RFLP)、同功酶标记检测、通过等位基因特异性杂交(ASH)进行的多核苷酸多态性检测、植物基因组的扩增可变序列检测、自主序列复制检测、简单重复序列检测(SSR)、单核苷酸多态性检测(SNP)、或扩增片段长度多态性检测(AFLP)。已知公认的方法也用于检测表达的序列标签(EST)和衍生自EST序列的SSR标记，以及随机扩增多态性DNA(RAPD)。
“遗传重组频率”是两个遗传基因座之间杂交(重组)的频率。重组频率可以通过遵循减数分裂后的标记和/或性状的分离来观察。
如本文所用，术语“单倍型”通常是指由遗传特征定义的染色体区，该遗传特征包括例如一种或多种多态分子标记。换言之，单倍型是一组趋向于一起遗传的DNA变异或多态性。单倍型可以是指等位基因的组合或在相同染色体或染色体区上发现的一组单核苷酸多态性(SNP)。“单倍型窗口”一般是指通过统计分析划定的并且通常连锁不平衡的染色体区。单倍型窗口的空间划定可以随着可用标记密度和/或可以区分多个单倍型的其他基因型信息密度而变化。
术语“异质性”用于指示群组内的个体在一个或多个特定基因座处的基因型不同。
“IBM遗传图谱”可以指以下图谱中的任一项：IBM、IBM2、IBM2邻接、IBM2 FPC0507、IBM22004邻接、IBM22005邻接、IBM22005邻接框、IBM22008邻接、IBM22008邻接框、或玉蜀黍GDB网站的最新版本。IBM遗传图谱基于B73 x Mo17群体，其中使来自初始杂交的子代在构建重组近交系用于作图之前随机交配多代。较新的版本反映了遗传和BAC定位的基因座的添加以及由于从其他遗传图谱或物理图谱、经过清理的数据或新算法的使用获得的信息的整合而提高的图谱精度。
术语“近交系”是指已经进行育种以获得遗传同质性的品系。
如本文所用，术语“优良种质”或“优良植物”分别是指通过育种和选择获得优异农艺学性能的任何种质或植物。
术语“插入缺失(indel)”是指插入或缺失，其中一个品系可以称为相对于第二品系具有插入的核苷酸或DNA碎片，或该第二品系可以称为相对于该第一品系具有缺失的核苷酸或DNA碎片。
术语“渗入”是指遗传基因座的期望等位基因从一种遗传背景传递到另一种遗传背景的现象。例如，可以经由相同物种的两个亲本之间的有性杂交将指定基因座处的所需等位基因的渗入传递给至少一个子代，其中这些亲本中的至少一个在其基因组内具有该所需的等位基因。可替代地，例如等位基因的传递可以通过两个供体基因组之间的重组而发生，例如在融合原生质体中，其中至少一个供体原生质体在其基因组中具有所需等位基因。所需等位基因可以，例如通过与表型相关联的标记，在QTL、转基因等处进行检测。在任何情况下，包含所需等位基因的后代可以反复与具有所需遗传背景的品系回交并选择所需等位基因，以产生固定在选择的遗传背景中的等位基因。
当“渗入”重复两次或更多次时，该方法通常被称为“回交”。
“品系”或“品种”是一组具有相同亲缘关系的个体，其通常在一定程度上是近交的，并且在大多数基因座处通常是纯合和同质的(同基因的或接近同基因的)。“亚系”是指遗传上不同于起源于相同祖先的其他类似近交系亚群的近交系亚群。
如本文所用，术语“连锁”用于描述一个标记基因座与另一个标记基因座或一些其他基因座的相关联程度。分子标记与影响表型的基因座之间的连锁关系以“概率”或“调整的概率”表示。连锁可以表示为所需的限制或范围。例如，在一些实施例中，当任何标记与任何其它标记在单次减数分裂图谱(基于已经进行一轮减数分裂的群体(如例如，F2)的遗传图谱；IBM2图谱由多次减数分裂组成)上分隔小于50、40、30、25、20或15个图距单位(或cM)时，这些标记是连锁的(遗传上或物理上)。在一些方面，限定加括号的连锁范围是有利的，例如，在10和20cM之间、在10和30cM之间、或在10和40cM之间。标记与第二基因座的连锁越紧密，标记对第二基因座的指示效果越好。因此，“紧密连锁的基因座”，例如标记基因座和第二基因座显示10％或更低、优选约9％或更低、还更优选约8％或更低、又更优选约7％或更低、还更优选约6％或更低、又更优选约5％或更低、还更优选约4％或更低、又更优选约3％或更低、以及还更优选约2％或更低的基因座间重组频率。在非常优选的实施例中，相关基因座显示约1％或更低，例如约0.75％或更低、更优选约0.5％或更低、或又更优选约0.25％或更低的重组频率。定位于相同染色体并且具有使得两个基因座之间的重组以小于10％(例如，约9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％、0.75％、0.5％、0.25％或更少)的频率发生的距离的两个基因座也被认为是彼此“邻近”。因为一个cM是显示1％的重组频率的两个标记之间的距离，因此任何标记与紧密相邻(例如，以等于或小于10cM的距离)的任何其他标记紧密连锁(遗传上和物理上)。在相同染色体上的两个紧密连锁的标记可相互定位为9、8、7、6、5、4、3、2、1、0.75、0.5或0.25cM或更近。
术语“连锁不平衡”是指遗传基因座或性状(或两者)的非随机分离。在任一情况下，连锁不平衡意味着相关的基因座沿着一段染色体在物理上足够接近，以便它们以高于随机(即非随机)的频率一起分离。显示连锁不平衡的标记被认为是连锁的。连锁的基因座有超过50％的机会(例如约51％至约100％的机会)发生共分离。换句话说，共分离的两个标记具有小于50％(并且根据定义，在相同连锁群上分隔小于50cM)的重组频率。如本文所用，连锁可以存在于两个标记之间，或可替代地，标记和影响表型的基因座之间。标记基因座可以与性状“相关联”(连锁)。标记基因座和影响表型性状的基因座的连锁程度例如通过该分子标记与该表型共分离的统计学概率(例如，F统计或LOD评分)进行测量。
连锁不平衡最常见地用量度r2评估，该量度r2使用以下文献中描述的公式计算：Hill，W.G.和Robertson，A，Theor.Appl.Genet.[理论与应用遗传学]38：226-231(1968)。当r2＝1时，两个标记基因座间存在完全的LD，意味着这些标记还未进行重组分离并且具有相同的等位基因频率。r2值取决于所使用的群体。r2值大于1/3显示了用于定位的足够强的LD(Ardlie等人，Nature Reviews Genetics[遗传学自然综述]3：299-309(2002))。因此，当成对标记基因座间的r2值大于或等于0.33、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、或1.0时，等位基因处于连锁不平衡。
如本文所用，“连锁平衡”描述其中两个标记独立地分离的情况，即，在子代中随机分配。显示连锁平衡的标记被认为是不连锁的(无论它们是否位于相同染色体上)。
“标记”是发现遗传或物理图谱上的位置或发现标记与性状基因座(影响性状的基因座)之间的连锁的方式。标记所检测的位置可通过检测多态性等位基因及其遗传定位而获知，或通过对已经进行物理标测的序列进行杂交、序列匹配或扩增而获知。标记可以是DNA标记(检测DNA多态性)、蛋白质(检测编码的多肽的变异)或简单遗传的表型(诸如“腊质”表型)。可从基因组核苷酸序列或从表达的核苷酸序列(例如，从剪接的RNA或cDNA)开发DNA标记。根据DNA标记技术，该标记由侧接于该基因座的互补性引物和/或与该基因座处的多态性等位基因杂交的互补性探针组成。DNA标记或遗传标记还可用于描述该染色体自身上的基因、DNA序列或核苷酸(而非用于检测该基因或DNA序列的组分)，并且其通常在该DNA标记与人遗传学中的特定性状相关联时使用(例如乳腺癌标记)。术语标记基因座是该标记所检测的基因座(基因、序列或核苷酸)。
检测群体成员之间的遗传多态性的标记在本领域中是公认的。标记可由其所检测的多态性的类型以及用于检测该多态性的标记技术所定义。标记类型包括但不限于例如限制性片段长度多态性检测(RFLP)、同功酶标记检测、随机扩增多态性DNA(RAPD)、扩增片段长度多态性检测(AFLP)、简单重复序列检测(SSR)、植物基因组的扩增可变序列检测、自主序列复制检测、或单核苷酸多态性检测(SNP)。SNP可以经由例如DNA测序、基于PCR的序列特异性扩增方法、通过等位基因特异性杂交(ASH)进行的多核苷酸多态性检测、动态等位基因特异性杂交(DASH)、分子信标、微阵列杂交、寡核苷酸连接酶分析、Flap内切核酸酶、5’内切核酸酶、引物延伸、单链构象多态性(SSCP)或温度梯度凝胶电泳(TGGE)进行检测。DNA测序(如焦磷酸测序技术)具有能够检测组成单倍型的一系列连锁SNP等位基因的优点。单倍型倾向于比SNP更具信息性(检测更高水平的多态性)。
“标记等位基因”，可替代地“标记基因座的等位基因”可以指群体中标记基因座处发现的多个多态性核苷酸序列中的一个。
“标记辅助选择”(MAS)是基于标记基因型选择个体植物的方法。
“标记辅助反向选择”是借以使用标记基因型鉴定将不被选择的植物的方法，使得这些植物从育种程序或种植中去除。
“标记单倍型”是指标记基因座处的等位基因或单倍型的组合。
“标记基因座”是物种基因组中的特定染色体定位，在该定位处可发现特异标记。标记基因座可用于追踪第二连锁基因座(例如影响表型性状表达的连锁基因座)的存在。例如，标记基因座能够用于监控在遗传上或物理上连锁的基因座处的等位基因的分离。
“标记探针”是可以用于通过核酸杂交鉴定标记基因座存在的核酸序列或分子，例如与标记基因座序列互补的核酸探针。包含所述标记基因座的30个或更多个连续核苷酸(该标记基因座序列的“全部或部分”)的标记探针可用于核酸杂交。可替代地，在一些方面，标记探针是指能够区别存在于标记基因座处的特定等位基因的任何类型(即基因型)的探针。
如上所定义的，当鉴定连锁基因座时，术语“分子标记”可以用于指遗传标记，或其用作参照点的编码产物(例如，蛋白质)。标记能够衍生自基因组核苷酸序列或衍生自表达的核苷酸序列(例如衍生自剪接的RNA、cDNA等)，或衍生自编码的多肽。该术语也指与标记序列互补或与其侧接的核酸序列，如用作探针或能够扩增该标记序列的引物对的核酸。“分子标记探针”是可以用于鉴定标记基因座存在与否的核酸序列或分子，例如与标记基因座序列互补的核酸探针。可替代地，在一些方面，标记探针是指能够区别存在于标记基因座处的特定等位基因的任何类型(即基因型)的探针。当核酸，例如根据沃森-克里克碱基配对原则，在溶液中特异性杂交时，这些核酸是“互补的”。当位于插入缺失区域，例如本文所述的非共线区域时，本文所述标记中的一些也称为杂交标记。这是因为，根据定义，该插入区域是关于无该插入的植物的多态性。因此，该标记仅需要指示该插入缺失区域是否存在。任何合适的标记检测技术都可以用于鉴定这样的杂交标记，例如在本文提供的实例中使用SNP技术。
“玉米大斑病菌(Exserohilum turcicum)”以前被称为大斑病长蠕孢(Helminthosporium turcicum)，是诱导北方叶枯病感染的真菌病原体。该真菌病原体在本文中也被称为突脐蠕孢属(Exserohilum)或Et。
短语“灰叶斑病”或“GLS”是指由真菌病原体玉米灰斑病菌(Cercospora zeae-maydis)引起的谷物疾病，该真菌性病原体玉米灰斑病菌特征性地产生平行于叶脉的长的、矩形、浅灰褐色叶病变。
“抗病性”(如例如，北方叶枯病抗性)是植物的一种特征，其中该植物避免、最小化或减少作为植物-病原体相互作用(例如玉蜀黍-玉米大斑病菌相互作用)的结果的疾病症状。即，防止病原体导致植物疾病和相关的疾病症状，或可替代地，使由病原体引起的疾病症状最小化或减轻。
“基因座”是染色体上基因或标记所在的位置。
“抗性”是一个相对的术语，其表明被感染的植物比另一种经过类似处理的更易感的植物具有更好的植物健康或玉蜀黍产量。也就是说，与易感玉蜀黍植物相比，这些条件导致耐受性玉蜀黍植物的玉蜀黍存活、生长和/或产量降低减少。技术人员将会理解，对北方叶枯病或引起这样的疾病的病原体有抗性的玉蜀黍植物可以代表一系列更多抗性或更少抗性的表型，并且可以根据感染的严重程度而变化。然而，通过简单观察，技术人员可以确定不同植物、植物品系或植物家族对北方叶枯病的相对抗性或易感性，并且此外还将识别“抗性”的表型等级。例如，可以使用表示对北方叶枯病的抗性水平的1至9个视觉等级。分数越高表明抗性越高。术语“耐受性”和“抗性”在本文中可互换使用。
抗性可以是“新赋予的”或“增强的”。“新赋予的”或“增强的”抗性是指针对特定病原体、广谱病原体或由一种或多种病原体引起的感染的抗性水平增加。例如，针对特定真菌病原体(如Et)的增加的抗性水平构成“增强的”或改进的真菌抗性。实施例可以增强或提高真菌植物病原体抗性。
在一些实施例中，可以通过在所需改变附近的基因组中在限定位置诱导双链断裂(DSB)来促进基因编辑。可以使用可用的任何DSB诱导剂诱导DSB，该诱导剂包括但不限于，TALEN、大范围核酸酶、锌指核酸酶、Cas9-gRNA系统(基于细菌性CRISPR-Cas系统)等。在一些实施例中，可以将DSB的引入与多核苷酸修饰模板的引入组合。
可以通过本领域已知的任何方法将多核苷酸修饰模板引入细胞中，这些方法如但不限于瞬时引入方法、转染、电穿孔、显微注射、颗粒介导的递送、局部应用、晶须介导的递送、经由细胞穿透肽的递送或介孔二氧化硅纳米颗粒(MSN)介导的直接递送。
可以将多核苷酸修饰模板作为单链多核苷酸分子、双链多核苷酸分子或作为环状DNA(载体DNA)的一部分引入细胞中。多核苷酸修饰模板还可以与指导RNA和/或Cas内切核酸酶进行系链。系链的DNA可以允许共定位靶标和模板DNA，可用于基因组编辑和靶向的基因组调控，并且还可以用于靶向有丝分裂后期细胞，在这些细胞中内源性同源重组HR机制的功能预计会大大降低(Mali等人2013Nature Methods[自然方法]第10卷：957-963)。多核苷酸修饰模板可以瞬时地存在于细胞中，或可以经由病毒复制子引入。
“经修饰的核苷酸”或“编辑的核苷酸”是指与其未经修饰的核苷酸序列相比时，包含至少一种改变的目的核苷酸序列，并且该改变是有意的人为干预。这样的“改变”包括，例如：(i)至少一个核苷酸的替换，(ii)至少一个核苷酸的缺失，(iii)至少一个核苷酸的插入，或(iv)(i)-(iii)的任何组合。“编辑的细胞”或“编辑的植物细胞”是指与在基因组序列中不包含至少一个改变的对照细胞或植物细胞相比，在基因组序列中包含这样的改变的细胞。
如本文所用，术语“多核苷酸修饰模板”或“修饰模板”是指当与待编辑的靶核苷酸序列相比时，包含至少一个核苷酸修饰的多核苷酸。核苷酸修饰可以是至少一个核苷酸取代、添加或缺失。任选地，多核苷酸修饰模板可以进一步包含位于至少一个核苷酸修饰侧翼的同源核苷酸序列，其中侧翼同源核苷酸序列为待编辑的希望的核苷酸序列提供了充足同源性。
用于编辑组合有DSB和修饰模板的基因组序列的方法通常包括：向宿主细胞提供识别染色体序列中的靶序列的DSB诱导剂或编码DSB诱导剂的核酸，并且其中该DSB诱导剂能够诱导该基因组序列中的DSB；并且提供与待编辑的核苷酸序列相比时包含至少一个核苷酸变化的至少一个多核苷酸修饰模板。内切核酸酶可以通过本领域已知的任何方法提供给细胞，这些方法例如但不限于瞬时引入方法、转染、显微注射、和/或局部应用、或间接经由重组构建体。内切核酸酶可以作为蛋白或作为指导多核苷酸复合物直接提供给细胞或经由重组构建体间接提供。使用本领域已知的任何方法，可以瞬时地将内切核酸酶引入细胞中，或可以将内切核酸酶并入宿主细胞的基因组中。在CRISPR-Cas系统的情况下，如WO2016073433中所述的，可以用细胞穿透肽(CPP)促进内切核酸酶和/或指导多核苷酸摄入进细胞。
如本文所用，“基因组区”是指细胞基因组中染色体的区段。在一个实施例中，基因组区包括存在于靶位点的任一例上的细胞基因组中的一段染色体，或可替代地，还包含靶位点的一部分。基因组区可以包含至少5-10、5-15、5-20、5-25、5-30、5-35、5-40、5-45、5-50、5-55、5-60、5-65、5-70、5-75、5-80、5-85、5-90、5-95、5-100、5-200、5-300、5-400、5-500、5-600、5-700、5-800、5-900、5-1000、5-1100、5-1200、5-1300、5-1400、5-1500、5-1600、5-1700、5-1800、5-1900、5-2000、5-2100、5-2200、5-2300、5-2400、5-2500、5-2600、5-2700、5-2800、5-2900、5-3000、5-3100或更多个碱基，这样使得基因组区具有足够的同源性以与相应的同源区域进行同源重组。
“经修饰的植物”是指具有有目的地插入其基因组中的异源多核苷酸的任何植物，其中插入的多核苷酸与植物异源、与基因组中的位置异源、或者与来自相同遗传背景的未经修饰植物相比具有改变的序列。经修饰的植物可以通过转基因应用、基因组修饰(包括CRISPR或Talens)、传统育种或其任何组合创造。
术语“作用位点”通常是指生物体内特定的物理位置或生物化学位点，其中特定的配体或多肽起作用或直接相互作用。例如，效应子多肽可以与抗病多肽相互作用。
术语“作用模式”通常描述生物体暴露于多肽或调控RNA等物质中导致的功能或解剖变化。术语“作用模式”还可以指细胞或分子水平上的特定识别机制或作用机制。
在一些实施例中，经修饰的植物包含异源多核苷酸，将该异源多核苷酸的转录物可替代地剪接为编码两种多肽的两种信使RNA，其中该两种多肽具有不同的作用位点或作用模式。在一些实施例中，当表达所述转录物时，经修饰的植物对植物病原体具有增加的抗性持久性，将该转录物可替代地剪接为编码两种多肽的两种信使RNA，其中该两种多肽具有不同的作用位点或作用模式。在其他实施例中，当表达所述转录物时，经修饰的植物对多于一种植物病原体具有增加的抗性，将该转录物可替代地剪接为编码两种多肽的两种信使RNA，其中该两种多肽具有不同的作用位点或作用模式。
在另一实施例中，经修饰的植物包含至少两种异源多核苷酸，其中这些多核苷酸产生一种或多种非编码转录物或编码一种或多种多肽。在另一实施例中，所述一种或多种非编码转录物或一种或多种多肽靶向相同的植物病原体。在另一实施例中，所述一种或多种非编码转录物或一种或多种多肽通过不同的作用模式靶向相同的植物病原体。
在一个实施例中，经修饰的植物包含至少两种异源多核苷酸，其中这些多核苷酸产生一种或多种非编码转录物或编码一种或多种多肽。在另一实施例中，所述至少两种异源多核苷酸衍生自相同的物种。在又一实施例中，所述至少两种异源多核苷酸衍生自不同的物种。
TAL效应子核酸酶(TALEN)是一类序列特异性核酸酶，其可以用于在植物或其他生物体的基因组中特异性靶序列处造成双链断裂。(参见Miller等人(2011)NatureBiotechnology[自然生物技术]29：143-148)。
内切核酸酶是在多核苷酸链内切割磷酸二酯键的酶。内切核酸酶包括限制性内切核酸酶，其在特异性位点处切割DNA而不损坏碱基；并且包括大范围核酸酶，也称为归巢内切核酸酶(HE酶)，其相似于限制性内切核酸酶，在特异性识别位点处结合并且切割，然而对于大范围核酸酶，识别位点典型地更长，约18bp或更长(于2012年3月22日提交的专利申请PCT/US12/30061)。基于保守的序列基序将大范围核酸酶分类为四个家族，这些家族是LAGLIDADG、GIY-YIG、H-N-H、和His-Cys box家族。这些基序参与金属离子的配位和磷酸二酯键的水解。HE酶的显著之处在于它们的长识别位点，并且还在于耐受其DNA底物中的一些序列多态性。对于大范围核酸酶的命名约定相似于对其他限制性内切核酸酶的约定。大范围核酸酶还分别表征为针对由独立的ORF、内含子、和内含肽编码的酶的前缀F-、I-、或PI-。重组方法的一个步骤涉及在识别位点处或在该识别位点附近的多核苷酸切割。可以将切割活性用于产生双链断裂。对于位点特异性重组酶和它们的识别位点的综述，参见Sauer(1994)Curr Op Biotechnol[生物技术新见]5：521-7；以及Sadowski(1993)FASEB[美国实验生物学学会联合会杂志]7：760-7。在一些实例中，重组酶来自整合酶(Integrase)或解离酶(Resolvase)家族。
锌指核酸酶(ZFN)是由锌指DNA结合结构域和双链-断裂-诱导剂结构域组成的工程化双链断裂诱导剂。识别位点特异性由锌指结构域赋予，该锌指结构域典型地包含两个、三个、或四个锌指，例如具有C2H2结构，然而其他锌指结构是已知的并且已经被工程化。锌指结构域适于设计特异性结合所选择的多核苷酸识别序列的多肽。ZFN包括连接至非特异性内切核酸酶结构域(例如来自IIs型内切核酸酶例如FokI的核酸酶结构域)的工程化DNA结合锌指结构域。额外的功能性可以融合到锌指结合结构域中，这些额外的功能性包括转录激活因子结构域、转录阻遏物结构域、和甲基化酶。在一些实例中，核酸酶结构域的二聚化是切割活性所需的。每个锌指在靶DNA中识别三个连续的碱基对。例如，3指结构域识别9个连续核苷酸的序列，由于核酸酶的二聚化需要，因此两组锌指三联体用于结合18个核苷酸的识别序列。
例如美国专利申请US 2015-0082478 A1、WO 2015/026886 A1、WO 2016007347以及WO 201625131(其全部通过引用并入本文)中已经描述了使用DSB诱导剂(例如Cas9-gRNA复合物)进行的基因组编辑。
本文中术语“Cas基因”是指在细菌系统中通常与侧翼CRISPR基因座偶联、缔合或接近或在邻近处的基因。术语“Cas基因”，“CRISPR相关的(Cas)基因”在本文中可互换地使用。本文的术语“Cas内切核酸酶”是指由Cas基因编码的蛋白或蛋白复合物。当与适合的多核苷酸组分复合时，本文公开的Cas内切核酸酶能够识别、结合特异性DNA靶序列的全部或部分、并任选地使特异性DNA靶序列的全部或部分产生切口或切割特异性DNA靶序列的全部或部分。如本文所述的Cas内切核酸酶包含一个或多个核酸酶结构域。本公开的Cas内切核酸酶包括具有HNH或HNH-样核酸酶结构域和/或RuvC或RuvC-样核酸酶结构域的那些。本公开的Cas内切核酸酶可以包括Cas9蛋白、Cpf1蛋白、C2c1蛋白、C2c2蛋白、C2c3蛋白、Cas3、Cas 5、Cas7、Cas8、Cas10或这些的复合物。
如本文所用，术语“指导多核苷酸/Cas内切核酸酶复合物”、“指导多核苷酸/Cas内切核酸酶系统”、“指导多核苷酸/Cas复合物”、“指导多核苷酸/Cas系统”、“指导性Cas系统”在本文中可互换地使用，并且是指能够形成复合物的至少一种指导多核苷酸和至少一种Cas内切核酸酶，其中所述指导多核苷酸/Cas内切核酸酶复合物可以将Cas内切核酸酶引导至DNA靶位点，使Cas内切核酸酶能够识别、结合DNA靶位点、并任选地使DNA靶位点产生切口或切割DNA靶位点(引入单链或双链断裂)。本文中指导多核苷酸/Cas内切核酸酶复合物可以包含四种已知的CRISPR系统(Horvath和Barrangou，2010，Science[科学]327：167-170)(例如I型、II型或III型CRISPR系统)中任一种的一种或多种Cas蛋白和一种或多种合适的多核苷酸组分。Cas内切核酸酶在靶序列处解开DNA双链体并任选地切割至少一条DNA链，如通过由与Cas蛋白复合的多核苷酸(例如但不限于crRNA或指导RNA)识别靶序列所介导的。如果正确的前间隔序列邻近基序(PAM)位于或相邻于DNA靶序列的3′端，则通过Cas内切核酸酶对靶序列进行的这样的识别和切割典型地会发生。可替代地，本文中的Cas蛋白可能缺乏DNA切割或切口活性，但是当与合适的RNA组分复合时，仍然可以特异性结合DNA靶序列。(还参见美国专利申请US 2015-0082478 A1和US 2015-0059010 A1，两者均通过引用以其全文特此并入)。
指导多核苷酸/Cas内切核酸酶复合物可以切割DNA靶序列的一条或两条链。可以切割DNA靶序列的两条链的指导多核苷酸/Cas内切核酸酶复合物典型地包含具有处于功能状态的所有其内切核酸酶结构域的Cas蛋白(例如野生型内切核酸酶结构域或其变体在每个内切核酸酶结构域中保留一些或全部活性)。因此，在Cas蛋白的每个内切核酸酶结构域中保留一些或全部活性的野生型Cas蛋白或其变体是可以切割DNA靶序列的两条链的Cas内切核酸酶的合适实例。包含功能性RuvC和HNH核酸酶结构域的Cas9蛋白是可以切割DNA靶序列的两条链的Cas蛋白的实例。可以切割DNA靶序列的一条链的指导多核苷酸/Cas内切核酸酶酶复合物可以在本文中表征为具有切口酶活性(例如，部分切割能力)。Cas切口酶典型地包含一个功能性内切核酸酶结构域，该结构域允许Cas仅切割DNA靶序列的一条链(即，形成切口)。例如，Cas9切口酶可以包含(i)突变的、功能失调的RuvC结构域和(ii)功能性HNH结构域(例如野生型HNH结构域)。作为另一个实例，Cas9切口酶可以包含(i)功能性RuvC结构域(例如野生型RuvC结构域)和(ii)突变的功能失调的HNH结构域。适用于本文使用的Cas9切口酶的非限制性实例公开于美国专利申请公开号2014/0189896中，将其通过引用并入本文。
可以使用一对Cas9切口酶来增加DNA靶向的特异性。一般来说，这可以通过提供两个Cas9切口酶来进行，这两个Cas9切口酶通过与具有不同指导序列的RNA组分缔合，在希望靶向的区域的相反链上在DNA序列附近进行靶向和切口。每个DNA链的这样的附近切割产生双链断裂(即，具有单链突出端的DSB)，其然后被识别为非同源末端连接(NHEJ)(倾向于产生导致突变的不完美修复)或同源重组(HR)的底物。在这些实施例中的每个切口可以，例如，彼此分离至少约5、10、15、20、30、40、50、60、70、80、90、或100(或在5与100之间的任何整数)个碱基。本文中的一种或两种Cas9切口酶蛋白可以用于Cas9切口酶对。例如，可以使用具有突变的RuvC结构域但具有功能性HNH结构域的Cas9切口酶(即，Cas9 HNH+/RuvC-)(例如，酿脓链球菌Cas9 HNH+/RuvC-)。通过使用本文中的合适的RNA组分(具有将每个切口酶靶向每个特异性DNA位点的指导RNA序列)，将每个Cas9切口酶(例如，Cas9 HNH+/RuvC-)引导到彼此邻近(分离多达100个碱基对)的特定的DNA位点。
Cas蛋白可以是包含一个或多个异源蛋白结构域(例如除Cas蛋白之外的1、2、3或更多个结构域)的融合蛋白的一部分。这样的融合蛋白可以包含任何另外的蛋白序列，以及任选地在任何两个结构域之间(例如在Cas和第一异源结构域之间)的接头序列。可以与本文中的Cas蛋白融合的蛋白结构域的实例包括但不限于表位标签(例如，组氨酸[His]、V5、FLAG、流感血球凝集素[HA]、myc、VSV-G、硫氧还蛋白[Trx])；报告子(例如谷胱甘肽-5-转移酶[GST]、辣根过氧化物酶[HRP]、氯霉素乙酰转移酶[CAT]、β-半乳糖苷酶、β-葡萄糖醛酸酶[GUS]、荧光素酶、绿色荧光蛋白[GFP]、HcRed、DsRed、青色荧光蛋白[CFP]、黄色荧光蛋白[YFP]、蓝色荧光蛋白[BFP])；以及具有一个或多个以下活性的结构域：甲基化酶活性、去甲基化酶活性、转录激活活性(例如，VP16或VP64)、转录抑制活性、转录释放因子活性、组蛋白修饰活性、RNA切割活性和核酸结合活性。Cas蛋白还可以与结合DNA分子或其他分子的蛋白融合，例如麦芽糖结合蛋白(MBP)、S-标签、Lex A DNA结合结构域(DBD)、GAL4A DNA结合结构域和单纯疱疹病毒(HSV)VP16。关于Cas蛋白的更多实例，参见2016年5月12日提交的PCT专利申请PCT/US16/32073和2016年5月12日提交的PCT/US16/32028(两个申请通过引用并入本文)。
在某些实施例中指导多核苷酸/Cas内切核酸酶复合物可以结合DNA靶位点序列，但不切割在靶位点序列处的任何链。这样的复合物可以包含其中所有核酸酶结构域都是突变的、功能失调的Cas蛋白。例如，可以结合到DNA靶位点序列但在靶位点序列处不切割任何链的本文的Cas9蛋白可以包含突变的、功能失调的RuvC结构域和突变的、功能失调的HNH结构域。结合但不切割靶DNA序列的本文中的Cas蛋白可以用于调节基因表达，例如，在该情况下，Cas蛋白可以与转录因子(或其部分)融合(例如阻遏物或激活因子，例如本文公开的那些中的任一种)。在其他方面，可以将失活的Cas蛋白与具有内切核酸酶活性的另一种蛋白例如Fok I内切核酸酶融合。
本文中的“Cas9”(以前称为Cas5、Csn1、或Csx12)是指与cr核苷酸和tracr核苷酸或与单指导多核苷酸形成复合物的II型CRISPR系统的Cas内切核酸酶，其用于特异性识别和切割DNA靶序列的全部或部分。Cas9蛋白包含RuvC核酸酶结构域和HNH(H-N-H)核酸酶结构域，它们各自可以在靶序列处切割单个DNA链(两个结构域的协同作用导致DNA双链切割，而一个结构域的活性导致一个切口)。通常，RuvC结构域包含亚结构域I、II和III，其中结构域I位于Cas9的N末端附近，并且亚结构域II和III位于蛋白的中间，即位于HNH结构域的侧翼(Hsu等人，Cell[细胞]，157：1262-1278)。II型CRISPR系统包括利用与至少一种多核苷酸组分复合的Cas9内切核酸酶的DNA切割系统。例如，Cas9可以与CRISPR RNA(crRNA)和反式激活CRISPR RNA(tracrRNA)复合。在另一个实例中，Cas9可以与单指导RNA复合。
Cas内切核酸酶可以包括Cas9多肽的修饰形式。Cas9多肽的修饰形式可以包括降低Cas9蛋白的天然存在的核酸酶活性的氨基酸变化(例如，缺失、插入、或取代)。例如，在一些情况下，Cas9蛋白的修饰形式具有低于50％、低于40％、低于30％、低于20％、低于10％、低于5％、或低于1％的相应的野生型Cas9多肽(美国专利申请US 20140068797 A1)的核酸酶活性。在一些情况下，该Cas9多肽的修饰形式不具有实质性的核酸酶活性并且被称作催化“失活的Cas9”或“失活的cas9(dCas9)”。催化失活的Cas9变体包括在HNH和RuvC核酸酶结构域中包含突变的Cas9变体。这些催化失活的Cas9变体能够与sgRNA相互作用，并且在体内结合至靶位点但不能切割靶DNA的任一链。
催化失活的Cas9可以融合到异源序列(美国专利申请US 20140068797 A1)。适合的融合配偶体包括，但不限于提供活性的多肽，该活性通过直接作用于靶DNA上或与该靶DNA相关的多肽(例如，组蛋白或其他DNA-结合蛋白)上间接地增加转录。另外的适合的融合配偶体包括，但不限于提供甲基转移酶活性、去甲基化酶活性、乙酰基转移酶活性、脱乙酰基酶活性、激酶活性、磷酸酶活性、泛素连接酶活性、去泛素化酶活性、腺苷酸化活性、去腺苷酸化活性、苏素化活性、去苏素化活性、核糖基化活性、去核糖基化活性、豆蔻酰化活性，或去豆蔻酰化活性的多肽。进一步适合的融合配偶体包括，但不限于直接提供靶核酸的增加的转录的多肽(例如，募集转录激活因子、小分子/药物-应答性转录调节因子等的转录激活因子或其片段，蛋白质或其片段)。还可以将催化失活的Cas9融合到FokI核酸酶从而产生双链断裂(Guilinger等人Nature Biotechnology[自然生物技术]，第32卷，第6期，2014年6月)。
术语Cas内切核酸酶的“功能性片段”、“功能上等效的片段”和“功能等效片段”在本文中可互换地使用，并且意指本公开的Cas内切核酸酶序列的一部分或子序列，其中保留识别、结合靶位点并任选地使靶位点产生切口或切割靶位点(引入单链或双链断裂)的能力。
术语Cas内切核酸酶的“功能性变体”、“功能上等效的变体”和“功能等效变体”在本文中可互换地使用，并且意指本公开的Cas内切核酸酶的变体，其中保留识别、结合靶位点并任选地使靶位点产生切口或切割靶位点(引入单链或双链断裂)的能力。这些片段和变体可以经由例如定点诱变和合成构建等方法来获得。
可以在本文公开的方法中使用任何指导的内切核酸酶(例如，指导的CRISPR-Cas系统)。这样的内切核酸酶包括但不限于Cas9、Cas12f及其变体(参见美国专利号10,934,536的SEQ ID NO：37，其通过引用以其全文并入本文)和Cpf1内切核酸酶。迄今为止，已经描述了许多可以识别特定PAM序列(参见例如-Jinek等人(2012)Science[科学]337第816-821页，PCT专利申请PCT/US16/32073和PCT/US16/32028，以及Zetsche B等人2015.Cell[细胞]163，1013)并在特定位置切割靶DNA的内切核酸酶。应当理解的是，基于本文所述的使用指导的Cas系统的方法和实施例，现在人们可以定制这些方法这样使得它们可以利用任何指导的内切核酸酶系统。2021年5月28日提交的PCT/US2021/034704中说明了各种染色体工程化工具和方法，并将其在涉及某些靶向染色体工程化应用的范围的内容通过引用并入本文中。
如本文所用，术语“指导多核苷酸”涉及可以与Cas内切核酸酶形成复合物并且使得Cas内切核酸酶能够识别、结合并任选地切割DNA靶位点的多核苷酸序列。指导多核苷酸可以是单分子或双分子。指导多核苷酸序列可以是RNA序列、DNA序列或其组合(RNA-DNA组合序列)。任选地，指导多核苷酸可以包含至少一种核苷酸、磷酸二酯键或连接修饰，诸如但不限于锁核酸(LNA)、5-甲基dC、2,6-二氨基嘌呤、2′-氟A、2’-氟U、2′-O-甲基RNA、硫代磷酸酯键、与胆固醇分子的连接、与聚乙二醇分子的连接、与间隔子18(六乙二醇链)分子的连接、或导致环化的5′至3′共价连接。仅仅包含核糖核酸的指导多核苷酸也被称为“指导RNA”或“gRNA”(还参见美国专利申请US 2015-0082478 A1和US 2015-0059010 A1，两者均通过引用以其全文特此并入)。
指导多核苷酸可以是包含cr核苷酸序列和tracr核苷酸序列的双分子(也称为双链体指导多核苷酸)。cr核苷酸包括可以与靶DNA中的核苷酸序列杂交的第一核苷酸序列区域(称为可变靶向结构域或VT结构域)和作为Cas内切核酸酶识别(CER)结构域的一部分的第二核苷酸序列(也称为tracr配对序列)。tracr配对序列可以沿互补区域与tracr核苷酸杂交，并一起形成Cas内切核酸酶识别结构域或CER结构域。CER结构域能够与Cas内切核酸酶多肽相互作用。双链体指导多核苷酸的cr核苷酸和tracr核苷酸可以是RNA、DNA和/或RNA-DNA组合序列。在一些实施例中，双链体指导多核苷酸的cr核苷酸分子被称为“crDNA”(当由DNA核苷酸的连续延伸构成时)或“crRNA”(当由RNA核苷酸的连续延伸构成时)或“crDNA-RNA”(当由DNA和RNA核苷酸的组合构成时)。cr核苷酸可以包含天然存在于细菌和古细菌中的cRNA的片段。可以存在于本文公开的cr核苷酸中的细菌和古细菌中天然存在的cRNA片段的大小可以是但不限于2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20或更多个核苷酸。在一些实施例中，tracr核苷酸被称为“tracrRNA”(当由RNA核苷酸的连续延伸构成时)或“tracrDNA”(当由DNA核苷酸的连续延伸构成时)或“tracrDNA-RNA”(当由DNA和RNA核苷酸的组合构成时)。在一个实施例中，指导RNA/Cas9内切核酸酶复合物的RNA是包含双链体crRNA-tracrRNA的双链体化的RNA。
在5′-至-3′方向上，tracrRNA(反式激活CRISPR RNA)含有(i)与CRISPR II型crRNA的重复区退火的序列和(ii)含茎环的部分(Deltcheva等人，Nature[自然]471：602-607)。双链体指导多核苷酸可以与Cas内切核酸酶形成复合物，其中所述指导多核苷酸/Cas内切核酸酶复合物(还称作指导多核苷酸/Cas内切核酸酶系统)可以将该Cas内切核酸酶引导至基因组靶位点，使该Cas内切核酸酶能够识别、结合到靶位点中并任选地使靶位点产生切口或切割靶位点(向靶位点中引入单链或双链断裂)。(还参见2015年3月19日公开的美国专利申请US 2015-0082478 A1和US 2015-0059010 A1，两者均通过引用以其全文特此并入)。
单指导多核苷酸可以与Cas内切核酸酶形成复合物，其中所述指导多核苷酸/Cas内切核酸酶复合物(还称为指导多核苷酸/Cas内切核酸酶系统)可以将Cas内切核酸酶引导至基因组靶位点，使Cas内切核酸酶能够识别、结合靶位点、并任选地使靶位点产生切口或切割靶位点(引入单链或双链断裂)。(还参见美国专利申请US 2015-0082478 A1和US2015-0059010 A1，两者均通过引用以其全文特此并入)。
术语“可变靶向结构域”或“VT结构域”在本文中可互换使用，并且包括可以与双链DNA靶位点的一条链(核苷酸序列)杂交(互补)的核苷酸序列。第一核苷酸序列结构域(VT结构域)与靶序列之间的互补百分比可以为至少50％、51％、52％、53％、54％、55％、56％、57％、58％、59％、60％、61％、62％、63％、63％、65％、66％、67％、68％、69％、70％、71％、72％、73％、74％、75％、76％、77％、78％、79％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％。可变靶向结构域可以是至少12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30个核苷酸长度。在一些实施例中，可变靶向结构域包含12至30个核苷酸的连续延伸。可变靶向结构域可以由DNA序列、RNA序列、经修饰的DNA序列、经修饰的RNA序列或其任何组合构成。
术语(指导多核苷酸的)“Cas内切核酸酶识别结构域”或“CER结构域”在本文中可互换地使用，并且包括与Cas内切核酸酶多肽相互作用的核苷酸序列。CER结构域包含tracr核苷酸配对序列，随后是tracr核苷酸序列。CER结构域可以由DNA序列、RNA序列、经修饰的DNA序列、经修饰的RNA序列(参见例如US 2015-0059010 A1，其通过引用以其全文并入本文)或其任何组合组成。
术语指导RNA，crRNA或tracrRNA的“功能片段”、“功能上等效的片段”和“功能等效片段”在本文中可互换地使用，并且分别是指本公开的指导RNA、crRNA或tracrRNA的一部分或子序列，其中分别保留用作指导RNA、crRNA或tracrRNA的能力。
术语指导RNA、crRNA或tracrRNA(分别地)的“功能性变体”、“功能上等效的变体”和“功能等效变体”在本文中可互换地使用，并且分别是指本公开的指导RNA、crRNA或tracrRNA的变体，其中分别保留用作指导RNA、crRNA或tracrRNA的能力。
术语“单指导RNA”和“sgRNA”在本文中可互换使用，并涉及两个RNA分子的合成融合，其中包含可变靶向结构域(与tracrRNA杂交的tracr配对序列连接)的crRNA(CRISPRRNA)与tracrRNA(反式激活CRISPR RNA)融合。单指导RNA可以包含可与II型Cas内切核酸酶形成复合物的II型CRISPR/Cas系统的crRNA或crRNA片段和tracrRNA或tracrRNA片段，其中所述指导RNA/Cas内切核酸酶复合物可以将Cas内切核酸酶引导至DNA靶位点，使得Cas内切核酸酶能够识别、结合DNA靶位点、并任选地使DNA靶位点产生切口或切割DNA靶位点(引入单链或双链断裂)。
术语“指导RNA/Cas内切核酸酶复合物”、“指导RNA/Cas内切核酸酶系统”、“指导RNA/Cas复合物”、“指导RNA/Cas系统”、“gRNA/Cas复合物”、“gRNA/Cas系统”、“RNA-指导的内切核酸酶”，“RGEN”在本文中可互换地使用并且意指至少一种RNA组分和至少一种能够形成复合物的Cas内切核酸酶，其中所述指导RNA/Cas内切核酸酶复合物可以将Cas内切核酸酶引导至DNA靶位点，使Cas内切核酸酶能够识别、结合DNA靶位点并任选地使DNA靶位点产生切口或切割DNA靶位点(引入单链或双链断裂)。本文中的指导RNA/Cas内切核酸酶复合物可以包含四种已知的CRISPR系统(Horvath和Barrangou，2010，Science[科学]327：167-170)(如I型、II型或III型CRISPR系统)中任一种的一种或多种Cas蛋白和一种或多种合适的RNA组分。指导RNA/Cas内切核酸酶复合物可以包括II型Cas9内切核酸酶和至少一种RNA组分(例如，crRNA和tracrRNA、或gRNA)。(还参见美国专利申请US 2015-0082478 A1和US2015-0059010 A1，两者均通过引用以其全文特此并入)。
使用本领域已知的任何方法(如，但不限于，粒子轰击、农杆菌转化或局部应用)，可以将作为单链多核苷酸或双链的多核苷酸的指导多核苷酸瞬时地引入细胞。指导多核苷酸还可以通过引入(通过，诸如但不限于粒子轰击或农杆菌转化等方法)包含编码指导多核苷酸的异源核酸片段的重组DNA分子来被间接引入细胞，该重组DNA分子可操作地连接到能够在所述细胞中转录指导RNA的特异性启动子。特异性启动子可以是但不限于RNA聚合酶III启动子，其允许具有精确定义的未经修饰的5′端和3′端的RNA转录(DiCarlo等人，Nucleic Acids Res.[核酸研究]41：4336-4343；Ma等人，Mol.Ther.Nucleic Acids[分子治疗-核酸]3：e161)，如在WO 2016025131中所述，其通过引用以其全文并入本文。
术语“靶位点”、“靶序列”、“靶位点序列”、“靶DNA”、“靶基因座”、“基因组靶位点”、“基因组靶序列”、“基因组靶基因座”和“前间隔序列”在本文中可互换地使用，并且意指多核苷酸序列，包括但不限于，在细胞的染色体、附加体，或基因组中的任何其他DNA分子(包括染色体DNA、叶绿体DNA、线粒体DNA、质粒DNA)中的核苷酸序列，在该序列处指导多核苷酸/Cas内切核酸酶复合物可以进行识别、结合并任选地产生切口或进行切割。靶位点可以是细胞的基因组中的内源位点，或者可替代地，靶位点对于该细胞可以是异源的并且从而不是天然存在于细胞的基因组中，或者与在自然界发生的位置相比，可以在异源基因组位置中找到靶位点。如本文所用，术语“内源性靶序列”和“天然靶序列”在本文中可互换使用，是指对细胞基因组来说是内源的或天然的靶序列。细胞包括但不限于人、非人、动物、细菌、真菌、昆虫、酵母、非常规酵母和植物细胞以及通过本文所述方法生产的植物和种子。“人工靶位点”或“人工靶序列”在本文中可互换使用，并且是指已经引入细胞的基因组中的靶序列。这样的人工靶序列可以在序列上与细胞基因组中的内源性或天然靶序列相同，但位于细胞基因组中不同的位置(即，非内源性或非天然位置)。
“改变的靶位点”、“改变的靶序列”、“经修饰的靶位点”、“经修饰的靶序列”在本文中可互换使用，并且是指如本文公开的靶序列，当与非改变的靶序列相比时，该靶序列包含至少一个改变。这样的“改变”包括，例如：(i)至少一个核苷酸的替换，(ii)至少一个核苷酸的缺失，(iii)至少一个核苷酸的插入，或(iv)(i)-(iii)的任何组合。
靶DNA序列(靶位点)的长度可以变化，并且包括例如为至少12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30或更多个核苷酸长度的靶位点。还有可能靶位点可以是回文的，即，一条链上的序列与在互补链上以相反方向的读取相同。切口/切割位点可以在靶序列内，或者切口/切割位点可以在靶序列之外。在另一种变异中，切割可以发生在彼此正好相对的核苷酸位置处，以产生平端切割，或者在其他情况下，切口可以交错以产生单链突出端，也称为“粘性端”，其可以是5′突出端抑或3′突出端。还可以使用基因组靶位点的活性变体。这样的活性变体可以包含与给定靶位点至少65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更高的序列同一性，其中这些活性变体保留生物活性，因此能够被Cas内切核酸酶识别和切割。测量由内切核酸酶引起的靶位点的单链或双链断裂的测定是本领域已知的，并且通常测量药剂在含有识别位点的DNA底物上的总体活性和特异性。
本文中的“前间隔序列邻近基序”(PAM)指与由本文所述的指导多核苷酸/Cas内切核酸酶系统识别的(靶向的)靶序列(前间隔序列)邻近的短核苷酸序列。如果靶DNA序列后面不是PAM序列，则Cas内切核酸酶可能无法成功识别该靶DNA序列。本文中的PAM的序列和长度可以取决于所使用的Cas蛋白或Cas蛋白复合物而不同。PAM序列可以是任何长度，但典型地是1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20个核苷酸长度。
术语“靶向”、“基因靶向”和“DNA靶向”在本文中可互换地使用。本文中的DNA靶向可能是在特异性的DNA序列(例如细胞的染色体或质粒)中特异性引入敲除、编辑、或敲入。一般来说，在本文DNA靶向可以通过用于适宜的多核苷酸组分相关的内切核酸酶在细胞的特定DNA序列处切割一条或两条链来进行。这样的DNA切割，如果是双链断裂(DSB)，可以促进NHEJ或HDR方法，这可能导致靶位点处的修饰。
本文的靶向方法能以例如在该方法中靶向两个或更多个DNA靶位点的这样的方式进行。这样的方法可以任选地被表征为多重方法。在某些实施例中，可以同时靶向两个、三个、四个、五个、六个、七个、八个、九个、十个或更多个靶位点。多重方法典型地通过本文的靶向方法进行，其中提供了多个不同的RNA组分，每一个被设计成将指导多核苷酸/Cas内切核酸酶复合物引导到唯一的DNA靶位点。
术语“敲除”、“基因敲除”和“基因敲除”在本文中可互换使用。如本文所用，敲除表示已经通过用Cas蛋白进行靶向使得细胞的DNA序列部分或完全无效；例如，这样的DNA序列在敲除之前可能已编码氨基酸序列，或可能已具有调节功能(例如启动子)。可以通过插入缺失(通过NHEJ在靶DNA序列中插入或缺失核苷酸碱基)，或通过特异性去除在靶向位点处或其附近处降低或完全破坏序列功能的序列来产生敲除。在一个单独的实施例中，“敲除”可能是通过RNA干扰下调基因的结果。在一些方面，可以在公开的方法和组合物中使用一种或多种双链RNA(dsRNA)分子，以介导靶序列表达的降低，例如通过以序列特异性方式介导RNA干扰“RNAi”或基因沉默。在一些实施例中，通过RNA干扰或基因编辑敲除在DSL中具有抗性基因对应物的基因的天然易感拷贝等位基因。
指导多核苷酸/Cas内切核酸酶系统可以与共同递送的多核苷酸修饰模板组合使用以允许编辑(修饰)目的基因组核苷酸序列。(还参见美国专利申请US 2015-0082478 A1和WO 2015/026886 A1，两者均通过引用以其全文并入)。
术语“敲入”、“基因敲入”、“基因插入”和“遗传敲入”在本文中可互换地使用。敲入代表通过用Cas蛋白靶向在细胞中的特定DNA序列处进行的DNA序列的替换或插入(通过HR，其中还使用合适的供体DNA多核苷酸)。敲入的实例包括但不限于异源氨基酸编码序列在基因的编码区中的特异性插入，或转录调节元件在遗传基因座中的特异性插入。
可以采用不同方法和组合物来获得细胞或生物体，该细胞或生物体具有插入针对Cas内切核酸酶的靶位点中的目的多核苷酸。这样的方法可以采用同源重组以提供目的多核苷酸在靶位点处的整合。在提供的一种方法中，在供体DNA构建体中将目的多核苷酸提供至生物细胞。如本文所用，“供体DNA”是包含待插入到Cas内切核酸酶的靶位点的目的多核苷酸的DNA构建体。供体DNA构建体可进一步包含位于目的多核苷酸侧翼的同源的第一区域和第二区域。供体DNA的同源的第一区域和第二区域分别与存在于细胞或生物基因组的靶位点中或位于该靶位点侧翼的第一和第二基因组区具有同源性。“同源”意指DNA序列是相似的。例如，在供体DNA上发现的“与基因组区同源的区域”是与细胞或生物体基因组中给定的“基因组序列”具有类似序列的DNA的区域。同源的区域可以具有足以促进在切割的靶位点处的同源重组的任何长度。例如，同源的区域的长度可以包括至少5-10、5-15、5-20、5-25、5-30、5-35、5-40、5-45、5-50、5-55、5-60、5-65、5-70、5-75、5-80、5-85、5-90、5-95、5-100、5-200、5-300、5-400、5-500、5-600、5-700、5-800、5-900、5-1000、5-1100、5-1200、5-1300、5-1400、5-1500、5-1600、5-1700、5-1800、5-1900、5-2000、5-2100、5-2200、5-2300、5-2400、5-2500、5-2600、5-2700、5-2800、5-2900、5-3000、5-3100或更多个碱基，这样使得同源的区域具有足够的同源性以与相应的基因组区进行同源重组。“足够的同源性”表示两个多核苷酸序列具有足够的结构相似性以充当同源重组反应的底物。结构相似性包括每个多核苷酸片段的总长度以及多核苷酸的序列相似性。序列相似性可以通过在序列的整个长度上的百分比序列同一性和/或通过包含局部相似性的保守区域(例如具有100％序列同一性的连续核苷酸)以及在序列长度的一部分上的百分比序列同一性来描述。
相对于参考序列(主题序列)，“序列同一性百分比(％)”被确定为在比对序列并引入空位(如果需要)以实现最大百分比序列同一性后，并且不考虑作为序列同一性的一部分的任何氨基酸保守取代，候选序列(查询序列)中与参考序列中的相应氨基酸残基或核苷酸同一的氨基酸残基或核苷酸的百分比。用于确定序列同一性百分比目的而进行的比对能以本领域技术范围内的各种方式实现，例如，使用公共可用的计算机软件，例如BLAST、BLAST-2。本领域的技术人员可以确定用于比对序列的适当参数，包括在进行比较的序列的全长度上实现最大比对所需的任何算法。为了确定两种氨基酸序列或两种核酸序列的同一性百分比，出于最佳比较目的，将序列进行比对。两个序列之间的同一性百分比是序列共有的相同位置的数目的函数(例如，查询序列的同一性百分比＝查询序列和主题序列之间的相同位置的数目/查询序列的位置总数(例如，重叠位置)×100)。
由靶标和供体多核苷酸共享的同源性或序列同一性的量可以变化，并且包括总长度和/或在约1-20bp、20-50bp、50-100bp、75-150bp、100-250bp、150-300bp、200-400bp、250-500bp、300-600bp、350-750bp、400-800bp、450-900bp、500-1000bp、600-1250bp、700-1500bp、800-1750bp、900-2000bp、1-2.5kb、1.5-3kb、2-4kb、2.5-5kb、3-6kb、3.5-7kb、4-8kb、5-10kb、或多达并包括靶位点的总长度的范围内具有单位整数值的区域。这些范围包括范围内的每个整数，例如1-20bp的范围包括1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19和20bp。同源性的量也可以通过在两个多核苷酸的完整比对长度上的百分比序列同一性来描述，其包括约至少50％、55％、60％、65％、70％、71％、72％、73％、74％、75％、76％、77％、78％、79％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％的百分比序列同一性。足够的同源性包括多核苷酸长度、总体百分比序列同一性，和任选地连续核苷酸的保守区域或局部百分比序列同一性的任何组合，例如，足够的同源性可以被描述为与靶基因座的区域具有至少80％序列同一性的75-150bp的区域。足够的同源性也可以通过预测的两个多核苷酸在高严格条件下特异性杂交的能力来描述，参见例如Sambrook等人，(1989)MolecularCloning：A Laboratory Manual[分子克隆：实验室手册]，(Cold Spring HarborLaboratory Press，NY[纽约州冷泉港实验室出版社])；Current Protocols in MolecularBiology[分子生物学实验指南]，Ausubel等人编辑(1994)Current Protocols[实验室指南]，(Greene Publishing Associates，Inc.[格林出版联合公司]和John Wiley&Sons，Inc.[约翰威利父子公司])；以及Tijssen(1993)Laboratory Techniques inBiochemistry and Molecular Biology--Hybridization with Nucleic Acid Probes[生物化学与分子生物学实验技术-与核酸探针杂交]，(Elsevier，New York[纽约爱思唯尔公司])。
在给定的基因组区和在供体DNA上发现的相应的同源的区域之间的结构相似性可以是允许同源重组发生的任何程度的序列同一性。例如，由供体DNA的“同源的区域”和生物体基因组的“基因组区”共享的同源性或序列同一性的量可以是至少50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性，这样使得序列进行同源重组
供体DNA上的同源的区域可以与靶位点侧翼的任何序列具有同源性。虽然在一些实施例中，同源的区域与紧邻靶位点侧翼的基因组序列共享显著的序列同源性，但是应当认识到同源的区域可以被设计为与可能更靠近靶位点的5′或3′的区域具有足够的同源性。在又其他实施例中，同源的区域还可以与靶位点的片段以及下游基因组区具有同源性。在一个实施例中，第一同源的区域进一步包含靶位点的第一片段，并且第二同源的区域包含靶位点的第二片段，其中第一片段和第二片段不同。
如本文所用，“同源重组”包括在同源的位点处的两个DNA分子之间的DNA片段的交换。同源重组的频率受多个因素影响。不同的生物体相对于同源重组的量和同源与非同源重组的相对比例而变化。一般来说，同源区的长度会影响同源重组的频率：同源区越长，频率越高。为观察同源重组而需要的同源区域的长度也是随物种而异的。在许多情况下，已经利用了至少5kb的同源性，但已经观察到具有仅25-50bp的同源性的同源重组。参见，例如，Singer等人，(1982)Cell[细胞]31：25-33；Shen和Huang，(1986)Genetics[遗传学]112：441-57；Watt等人，(1985)Proc.Natl.Acad.Sci.USA[美国国家科学院院刊]82：4768-72，Sugawara和Haber，(1992)Mol Cell Biol[分子细胞生物学]12：563-75，Rubnitz和Subramani，(1984)Mol Cell Biol[分子细胞生物学]4：2253-8；Ayares等人，(1986)Proc.Natl.Acad.Sci.USA[美国国家科学院院刊]83：5199-203；Liskay等人，(1987)Genetics[遗传学]115：161-7。
同源-定向修复(HDR)是在细胞中用来修复双链DNA和单链DNA断裂的机制。同源定向修复包括同源重组(HR)和单链退火(SSA)(Lieber.2010Annu.Rev.Biochem.[生物化学年鉴]79：181-211)。HDR的最常见形式称为同源重组(HR)，其在供体与受体DNA之间具有最长的序列同源性要求。HDR的其他形式包括单链退火(SSA)和断裂诱导的复制，并且这些需要相对于HR更短的序列同源性。缺口(单链断裂)处的同源-定向修复可以经由与在双链断裂处的HDR不同的机制发生(Davis和Maizels.(2014)PNAS[美国科学院院报](0027-8424)，111(10)，第E924-E932页)。
植物细胞的基因组的改变，例如通过同源重组(HR)，其是对于遗传工程而言的有力工具。已经证明了在植物中(Halfter等人，(1992)Mol Gen Genet[分子和普通遗传学]231：186-93)和昆虫中(Dray和Gloor，1997，Genetics[遗传学]147：689-99)的同源重组。同源重组也已在其他生物体中完成。例如，在寄生原生动物利什曼原虫中，至少需要150-200bp的同源性进行同源重组(Papadopoulou和Dumas，(1997)Nucleic Acids Res[核酸研究]25：4278-86)。在丝状真菌构巢曲霉中，已经用仅50bp侧翼同源性实现基因替换(Chaveroche等人，(2000)Nucleic Acids Res[核酸研究]28：e97)。在纤毛虫嗜热四膜虫中也已经证明了靶向基因替换(Gaertig等人，(1994)Nucleic Acids Res[核酸研究]22：5391-8)。在哺乳动物中，使用可以在培养基中生长、转化、选择、和引入小鼠胚胎中的多能胚胎干细胞系(ES)的同源重组在小鼠中是最成功的(Watson等人，(1992)Recombinant DNA[重组DNA]，第2版，(Scientific American Books distributed by WH Freeman&Co.[由WHFreeman&Co.公司发行的科学美国人图书])。
在一些实施例中，提供了用于使用CRISPR-Cas技术来倒位(inverting)染色体的大片段、缺失染色体片段和重新定位(relocating)片段或基因的方法和组合物(2020年5月29日提交的美国专利申请63/301822)。在一些方面，DSL染色体片段可以使用染色体重排来移动或改变。
在另一实施例中，染色体片段可以重排列至DSL中。在一些方面，染色体片段是至少约1kb、在1kb至10kb之间、至少约10kb、在10kb至20kb之间、至少约20kb、在20kb至30kb之间、至少约30kb、在30kb至40kb之间、至少约40kb、在40kb至50kb之间、至少约50kb、在50kb至60kb之间、至少约60kb、在60kb至70kb之间、至少约70kb、在70kb至80kb之间、至少约80kb、在80kb至90kb之间、至少约90kb、在90kb至100kb之间或大于100kb。在一些方面，该区段是至少约100kb、在100kb至150kb之间、至少约150kb、在150kb至200kb之间、至少约200kb、在200kb至250kb之间、至少约250kb、在250kb和300kb之间、至少约300kb、在300kb和350kb之间、至少约350kb、在350kb和400kb之间、至少约400kb、在400kb和450kb之间、至少约450kb、在450kb至500kb之间、至少约500kb、在500kb至550kb之间、至少约550kb、在550kb至600kb之间、至少约600kb、在600kb至650kb之间、至少约650kb、在650kb至700kb之间、至少约700kb、在700kb至750kb之间、至少约750kb、在750kb至800kb之间、至少约800kb、在800kb至850kb之间、至少约850kb、在850kb和900kb之间、至少约900kb、在900kb和950kb之间、至少约950kb、在950kb和1000kb之间、至少约1000kb、在1000kb和1050kb之间、至少约1050kb、在1050kb和1100kb之间、或大于1100kb。在一些方面，该片段是至少约1Mb、在1Mb至10Mb之间、至少约10Mb、在10Mb至20Mb之间、至少约20Mb、在20Mb至30Mb之间、至少约30Mb、在30Mb至40Mb之间、至少约40Mb、在40Mb至50Mb之间、至少约50Mb、在50Mb至60Mb之间、至少约60Mb、在60Mb至70Mb之间、至少约70Mb、在70Mb至80Mb之间、至少约80Mb、在80Mb至90Mb之间、至少约90Mb、在90Mb至100Mb之间或大于100Mb。
易错DNA修复机制可以在双链断裂位点处产生突变。非同源末端连接(NHEJ)途径是用来将断裂的末端结合在一起的最常见的修复机制(Bleuyard等人，(2006)DNA Repair[DNA修复]5：1-12)。染色体的结构完整性典型地通过修复来保持，但是缺失、插入、或其他重排是可能的。一个双链断裂的两个末端是NHEJ最普遍的底物(Kirik等人，(2000)EMBO J[欧洲分子生物学学会杂志]19：5562-6)，然而如果发生两种不同的双链断裂，则来自不同断裂的游离端可以被连接，并且导致染色体缺失(Siebert和Puchta，(2002)Plant Cell[植物细胞]14：1121-31)，或在不同的染色体之间的染色体易位(Pacher等人，(2007)Genetics[遗传学]175：21-9)。
可以通过本领域已知的任何手段引入供体DNA。可以通过本领域已知的任何转化方法(包括，例如农杆菌介导的转化或生物射弹粒子轰击)提供供体DNA。供体DNA可以瞬时地存在于细胞中，或可以经由病毒复制子引入。在Cas内切核酸酶和靶位点存在下，将供体DNA插入到转化植物的基因组中。
指导RNA/Cas内切核酸酶系统的另外的用途已进行了描述(参见美国专利申请US2015-0082478 A1、WO 2015/026886 A1、US 2015-0059010 A1、美国申请US 2017/0306349A1，和美国申请62/036,652，将其全部通过引用并入本文)，并且包括，但不限于修饰或取代目的核苷酸序列(如调节元件)、目的多核苷酸插入、基因敲除、基因敲入、剪接位点的修饰和/或引入交替剪接位点、编码目的蛋白的核苷酸序列的修饰、氨基酸和/或蛋白融合物、以及通过在目的基因中表达反向重复序列引起的基因沉默。
目的多核苷酸和/或性状可以在复杂性状基因座中堆叠在一起，如在US 2013/0263324-A1和PCT/US13/22891中所述，将这两个申请通过引用特此并入。
在一些实施例中，本文提供了包含具有至少一个核苷酸序列的基因组基因座的玉蜀黍植物细胞，该至少一个核苷酸序列赋予了对北方叶枯病和至少一种不同的植物疾病的增强的抗性。另外的植物疾病可以包括但不限于灰叶斑病、南方玉米锈病和炭疽茎腐病。公开的方法包括在玉蜀黍植物细胞的基因组基因座中的一个或多个靶位点处引入双链断裂；引入赋予对多于一种植物疾病的增强的抗性的一个或多个核苷酸序列，其中每个核苷酸序列的侧翼为相应靶位点的5’或3’的300-500bp的核苷酸序列；以及获得具有基因组基因座的玉蜀黍植物细胞，该基因组基因座包含赋予对多于一种植物疾病的增强的抗性的一个或多个核苷酸序列。双链断裂可以由核酸酶(如但不限于TALEN、大范围核酸酶、锌指核酸酶或CRISPR相关的核酸酶)诱导。该方法可以进一步包括从具有基因组基因座的玉蜀黍植物细胞生长玉蜀黍植物，该基因组包含赋予对北方叶枯病的增强的抗性的至少一个核苷酸序列，并且玉蜀黍植物可以表现出对北方叶枯病的增强的抗性。
与在目的基因组基因座处缺少赋予增强的抗性的核苷酸序列的等效植物相比时，玉蜀黍植物表现出增强的抗性。“等效”意指除目的基因组基因座外，这些植物在遗传上相似。
在一些方面，赋予增强的抗病性的一个或多个核苷酸序列包括以下中的任一序列：例如RppK(基因组DNA SEQ ID NO：9；cDNA SEQ ID NO：10；蛋白质SEQ ID NO：11)、Ht1(基因组DNA SEQ ID NO：6；cDNA SEQ ID NO：7；蛋白质SEQ ID NO：8)、NLB18(基因组DNASEQ ID NO：1；cDNA SEQ ID NO：2or 4；蛋白质SEQ ID NO：3或5)、NLR01(基因组DNA SEQ IDNo：27；cDNA SEQ ID NO：28；蛋白质SEQ ID No：29)、NLR02(基因组DNA SEQ ID No：24；cDNASEQ ID NO：25；蛋白质SEQ ID No：26)、RCG1(cDNA SEQ ID No：30；蛋白质SEQ ID No：31)、RCG1b(cDNA SEQ ID No：32；蛋白质SEQ ID No：33)、PRR03(基因组DNA SEQ ID No：34；cDNASEQ ID NO：35；蛋白质SEQ ID No：36)、PRR01(cDNA SEQ ID NO：37；蛋白质SEQ ID No：38)、NLR01(基因组DNA SEQ ID No：39；cDNA SEQ ID NO：40；蛋白质SEQ ID No：41)、或NLR04(基因组DNA SEQ ID No：42；cDNA SEQ ID NO：43；蛋白质SEQ ID No：44)。
如本文所用，“复合转基因性状基因座”是目的基因组区内的染色体片段，该染色体片段包含彼此遗传连锁的至少两个改变的靶序列并且还可以包含如下文所述的一个或多个目的多核苷酸。复合转基因性状基因座中的改变的靶序列中的每个均源自相应的靶序列，该相应的靶序列例如通过涉及由本发明的双链断裂诱导剂诱导的靶序列内的双链断裂的机制而改变。在本发明的某些实施例中，改变的靶序列包含转基因。
CTL1存在于1号玉蜀黍染色体上大约5cM的窗口中(美国专利号10,030,245、美国专利公开号2018/0258438A1、美国专利公开号2018/0230476A1)。为开发复杂性状基因座(CTL)而鉴定的第一玉蜀黍基因组窗口跨越1号染色体上ZM01：12987435(侧翼为公共SNP标记SYN12545)至Zm01：15512479(侧翼为公用SNP标记SYN20196)。表1示出了玉蜀黍1号染色体上的目的基因组窗口内的众多玉蜀黍SNP标记(Ganal，M.等人，A Large Maize(Zea maysL.)SNP Genotyping Array：Development and Germplasm Genotyping，and GeneticMapping to Compare with the B73Reference Genome.[大型玉蜀黍(玉米(Zea maysL.))SNP基因分型阵列：发育和种质基因分型，以及与B73参考基因组相比的遗传作图]PloSone[公共科学图书馆期刊]，2011年12月08日DOI：10.1371)和Cas内切核酸酶靶位点(31个位点)的物理和遗传图谱位置(如果可用)。
表1.玉蜀黍的1号染色体上包含复杂性状基因座(CTL1)的基因组窗口
Figure BDA0004113413250000451
Figure BDA0004113413250000461
Figure BDA0004113413250000471
在一个实施例中，基因组基因座包含疾病超级基因座1(DSL1)。在另一实施例中，疾病超级基因座1(DSL1)位于距离复杂性状基因座1(CTL1)大约0.5、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10cM的1号染色体的远端区内。在一个实施例中，疾病超级基因座(DSL)位于距离至少一个不同性状基因座大约0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1、2、3、4、5、6、7、8、9或10cM处。在另一实施例中，DSL位于端粒区内。在优选的实施例中，DSL1位于CTL1远端约0.5cM至约5cM范围内。在又一实施例中，DSL1的侧翼是pze-101020971(SEQ ID NO：22)和pze-101022341(SEQ ID NO：23)。在一些实施例中，CTL1包含昆虫控制性状和除草剂耐受性状。
在一个方面，赋予对北方叶枯病的增强的抗性的基因组基因座包含DSL1。
如本文所述的指导多核苷酸/Cas9内切核酸酶系统提供了用来产生双链断裂并允许将性状在复杂性状基因座中堆叠的有效系统。因此，在一方面，Cas9内切核酸酶用作DSB诱导剂，并且一个或多个指导RNA用于将Cas9靶向至DSL1基因座中的位点处。
通过本文所述的方法产生的玉蜀黍植物可以提供持久和广谱抗病性，并且可以协助育种抗病玉蜀黍植物。例如，因为赋予增强的抗病性的核苷酸序列彼此(在一个基因座处)紧密连接，所以这减少了需要通过回交进行性状渗入的特定基因座的数量，并最小化来自非优良抗性供体的连锁累赘。在一个实施例中，DSL位于距QTL至少1cM、2cM、3cM、4cM、5cM、6cM、7cM、8cM、9cM、10cM、15cM或20cM以内以实现产量稳定性或抗病性。
在一些实施例中，可以将包含DSL的玉蜀黍植物用杀昆虫剂、杀真菌剂或生物制剂处理。在一个实施例中，与不包含DSL的玉蜀黍植物所需要的杀真菌剂或生物制剂水平相比，由本文所述方法产生的玉蜀黍植物可能需要水平更低或数量更少的杀真菌剂或生物制剂处理。在另外的实施例中，与不包含DSL的玉蜀黍植物所需要的杀真菌剂或生物制剂水平相比，更低水平或数量更少的真菌剂或生物制剂处理可增加杀真菌剂或生物制剂的耐久性。
在一个实施例中，杀真菌剂包含选自由以下组成的组的杀真菌剂组合物：嘧菌酯、噻菌灵、咯菌腈、甲霜灵、戊唑醇、丙硫菌唑、种菌唑、戊苯吡菌胺、和氟唑环菌胺。本文公开的组合物可以包含杀真菌剂，该杀真菌剂可以包括但不限于：呼吸抑制剂，例如嘧菌酯，其靶向线粒体电子传递的复合体III；微管蛋白抑制剂，例如噻菌灵，其结合β-微管蛋白；渗透胁迫相关的激酶抑制剂咯菌腈；卵菌(一组真菌样生物体)的RNA聚合酶抑制剂，例如甲霜灵；甾醇生物合成的抑制剂，其包括甾醇生物合成途径的C-14去甲基化酶的抑制剂(通常称为去甲基化酶抑制剂或DMI)，例如戊唑醇、丙硫菌唑、和种菌唑；呼吸抑制剂，其靶向复合体II线粒体电子传递，例如戊苯吡菌胺；呼吸抑制剂，其靶向复合体II线粒体电子传递，例如氟唑环菌胺。可以在frac.info/docs/default-source/publications/frac-code-list/frac-code-list-2016.pdf?sfvrsn＝2(可通过使用“www”前缀在万维网上访问；参见Hirooka和Ishii(2013)，Journal of General Plant Pathology[普通植物病理学杂志])找到具有不同或相似作用模式的其他类别的杀真菌剂。杀真菌剂可以包含如本文所述的不同类别的杀真菌剂的全部或任何的组合。在某些实施例中，本文公开的组合物包含嘧菌酯、噻菌灵、咯菌腈、和甲霜灵。在另一实施例中，本文公开的组合物包含戊唑醇。在另一实施例中，本文公开的组合物包含丙硫菌唑、甲霜灵、和戊苯吡菌胺。在另一实施例中，本文公开的组合物包含种菌唑和甲霜灵。在另一实施例中，本文公开的组合物包含氟唑环菌胺。如本文所用，组合物可以是液体、非均匀混合物、均匀混合物、粉末、溶液、分散体或其任何组合。在另一实施例中，生物防治剂可以与DSL组合使用。
减少对庇护所的需求的另一个策略是对具有针对靶标有害生物的不同作用模式的性状进行聚合。例如，由于抗性风险降低，具有金字塔化在一种转基因植物中的不同作用模式的Bt毒素能够减少避难所需求。对于抗病性和性状耐久性也可以如此。在一些方面，靶向相同疾病的两个基因可以增加每种性状的耐久性。例如，植物中表达的NLB1 8和Ht1(分别为SEQ ID NO：3和8)的组合增加了每种性状的耐久性，以提高对北方叶枯病的抗性。金字塔组合中不同的作用模式也延长了每种性状的耐久性，因为抗性发展到每种性状的速度较慢。
在一个实施例中，将第一疾病超级基因座与第二疾病超级基因座堆叠。在另一实施例中，使用育种堆叠法获得包含与第二疾病超级基因座堆叠的第一疾病超级基因座的玉蜀黍植物。在一些实施例中，第二疾病超级基因座具有至少一个与第一疾病超级基因座不同的抗病基因。
在一个实施例中，编码抗病基因的多核苷酸序列包含异源启动子。在另一实施例中，编码抗病基因的多核苷酸序列包含cDNA序列。在又一实施例中，编码抗病基因的多核苷酸序列包含内源性抗病基因座，并且进一步包含异源性表达调节元件(EME)。
在一个实施例中，DSL包含产生非编码转录物或非编码RNA的多核苷酸。在另一实施例中，非编码转录物的来源可以来自非编码基因，或者其可以来自类似转座子或逆转录转座子的重复序列。在另一实施例中，非编码转录物可以由带有发夹设计的RNAi构建体产生。在另一个实施例中，DSL可以包含不编码多肽但包含转座子或重复序列的一个或多个多核苷酸序列，或转录为各种大小的非编码转录物(如例如长的非编码RNA(lncRNA))的序列。在一个实施例中，可以将非编码转录物加工成小RNA，如微小RNA(miRNA)、短干扰(siRNA)、反式作用siRNA(tasiRNA)和相位siRNA(phasiRNA)。在一个实施例中，DSL中的非编码基因和序列可以与植物病原体或有害生物(如病毒、细菌、卵菌、真菌、昆虫和寄生植物)中的特定序列共享核苷酸序列同源性。非编码转录物或加工产物，如小RNA，可以调控或调节特定基因或序列在植物病原体或有害生物中的表达，从而降低病原体的致病性并提高宿主植物的抗性。
在另外的实施例中，包含疾病超级基因座(DSL)的植物可以与一种或多种另外的Bt杀昆虫毒素(包括但不限于，Cry3B毒素、mCry3B毒素、mCry3A毒素或Cry34/35毒素)堆叠。在另外的实施例中，包含疾病超级基因座(DSL)的植物可以与一种或多种另外的转基因堆叠，这些转基因含有这些Bt杀昆虫毒素和其他鞘翅目活性Bt杀昆虫性状，例如，事件MON863、事件MIR604、事件5307、事件DAS-59122、事件DP-4114、事件MON 87411和事件MON88017。在一些实施例中，包含DSL的植物可与以下堆叠：MON-87429-9(MON87429事件)；MON87403；MON95379；MON87427；MON87419；MON-00603-6(NK603)；MON-87460-4；LY038；DAS-06275-8；BT176；BT11；MIR162；GA21；MZDT09Y；SYN-05307-1；DP-23211、DP-915635、和DAS-40278-9。
如本文所用，关于序列的“异源性”是指该序列源于外来物种，或者，如果源于相同物种的话，则是通过精心的人为干预从其在组合物和/或基因组基因座中的天然形式进行实质性修饰得到的序列。例如，可操作地连接至异源多核苷酸的启动子来自与从其衍生该多核苷酸的物种不同的物种，或者，如果来自相同/类似的物种，那么一方或双方基本上由它们的原来形式和/或基因组基因座修饰得到，或者该启动子不是被可操作地连接的多核苷酸的天然启动子。在一些实施例中，异源序列包含编码来自不同位置处的相同物种的多肽的多核苷酸，即“天然基因”。在一些实施例中，异源序列包含天然基因和来自不同物种的序列。在一些实施例中，DSL包含至少两个异源天然基因，并且不含来自不同物种的多核苷酸。
IV.玉蜀黍植物细胞、植物和种子
“玉蜀黍(maize)”是指玉蜀黍(Zea mays L.ssp.mays)植物，并且也被称为“玉米”。在本文描述的对象前使用“ZM”是指该对象来自玉米(Zea mays)的事实。
还提供了具有经修饰的以下序列的玉蜀黍植物、玉蜀黍植物细胞、玉蜀黍植物部分和种子以及玉蜀黍谷物：RppK(基因组DNA SEQ ID NO：9；cDNA SEQ ID NO：10；蛋白质SEQID NO：11)、Htl(基因组DNA SEQ ID NO：6；cDNA SEQ ID NO：7；蛋白质SEQ ID NO：8)、NLB18(基因组DNA SEQ ID NO：1；cDNA SEQ ID NO：2或4；蛋白质SEQ ID NO：3或5)、NLR01(基因组DNA SEQ ID No：27；cDNA SEQ ID NO：28；蛋白质SEQ ID No：29)、NLR02(基因组DNA SEQ IDNo：24；cDNA SEQ ID NO：25；蛋白质SEQ ID No：26)、RCG1(cDNA SEQ ID No：30；蛋白质SEQID No：31)、RCG1b(cDNA SEQ ID No：32；蛋白质SEQ ID No：33)、PRR03(基因组DNA SEQ IDNo：34；cDNA SEQ ID NO：35；蛋白质SEQ ID No：36)、PRR01(cDNA SEQ ID NO：37；蛋白质SEQID No：38)、NLR01(基因组DNA SEQ ID No：39；cDNA SEQ ID NO：40；蛋白质SEQ ID No：41)、或NLR04(基因组DNA SEQ ID No：42；cDNA SEQ ID NO：43；蛋白质SEQ ID No：44)，例如，本文公开的序列。
如本文所用，术语植物包括植物细胞、植物原生质体、从中可再生出植物的植物细胞组织培养物、植物愈伤组织、植物块和在植物或植物部分(例如胚、花粉、胚珠、种子、叶、花、籽粒、穗、穗轴、壳、茎、根、根尖、花药等)中的完整植物细胞。谷物旨在意指由商业种植者出于栽培或繁殖物种之外的目的所生产的成熟种子。
实例
提供以下实例以说明但不限制所附权利要求书。应当理解，本文所述实例和实施例仅用于说明目的，并且本领域的技术人员将认识到在不脱离实施例精神或所附权利要求书的范围的情况下可以改变各种试剂或参数。
实例1
设计适合在玉蜀黍中基因工程化抗病性状的基因座
在定义和选择适用于疾病超级基因座开发的玉蜀黍基因组区时，考虑了几个因素：产品组装的便利性、分子特征以及监管和管理方面。
一个选择的基因座，疾病超级基因座1(DSL1)，位于1号染色体的远端区，距离复杂性状基因座1(CTL1)大约0.5cM。此距离是专门选择和工程化的，以促进具有插入性状的育种堆叠件，如昆虫控制性状和/或除草剂耐受性状插入CTL1着陆垫(图1)并加快产品组装的最终步骤。DSL1在一系列种质(包括一组代表性北美近交系和一系列热带品系)中没有表现主要结构变异的区中的跨越大约3.2cM或515Kbp。在更局部的水平上，泛基因组比对表明该区域的大部分在非硬茎近交系中结构保守。
用于无缝插入性状的靶位点的识别
使用生物信息学工具扫描DSL1区的靶位点，以搜索前间隔序列邻近基序(PAM)并检索上游20个碱基序列。然后应用以下过滤器来选择合适的靶位点及其相应的指导RNA。
如果与任何天然基因注释的距离小于2.5kb，则认为靶位点不合适。靶近交系中的基因注释基于结合了计算机预测和体内证据的生物信息途径。对于下游分析原因，位于大于200bp的重复区2kb内的靶位点也被认为是不合适的。
最终使用针对基因组组件运行的生物信息学工具在计算机上检查了靶向适宜位点的候选指导RNA的潜在的脱靶活性。对于每个候选指导RNA，基于生物信息学分析生成了潜在脱靶位点列表，如果潜在脱靶点与引导存在3个或更多个错配(包括PAM近端种子序列中的至少一个错配)，则将其排除(Young，Zastrow-Hayes等人2019，Sci Rep[科学报告]4月30日；9(1)：672)。
表2中提供了DSL1中的潜在可接受位点列表。图2示出了靶位点位置的示意图。
表2.DSL1中的可接受位点
Figure BDA0004113413250000531
表3标记侧翼DSL1
Figure BDA0004113413250000532
指导和模板的载体构建
为了改善它们的共表达和存在，将Cas内切核酸酶和指导RNA表达盒连接至单个DNA构建体中。合成了含有指导RNA编码序列的480-490bp序列、来自选择的玉蜀黍基因组靶位点的12-30bp可变靶向结构域和U6启动子的一部分。然后将序列克隆至已经具有cas盒和其余gRNA表达盒的骨架上。
设计同源定向修复(HDR)模板以使抗病基因插入所需靶位点。为了优化递送，合成模板序列并克隆至含有Cas内切核酸酶和指导RNA的载体骨架。在此设置中，通过在HDR模板的每一例插入与载体上编码的指导RNA对应的靶位点序列，实现从载体中释放模板(图3)。模板序列包括一个或多个目的抗病基因的全基因组区，侧翼是对应于与切割位点直接相邻的100-1000bp区域的同源臂。
通过农杆菌介导的转化将包含Cas内切核酸酶表达盒、指导RNA表达盒和HDR模板的质粒递送至玉蜀黍胚中。通过Cas内切核酸酶在指定位点处进行DNA切割后，将通过同源定向修复整合模板，从而在赋予对一种或多种疾病的抗性的基因组区的切割位点处进行无缝插入。
赋予针对北方叶枯病和南方锈病的抗性的玉蜀黍基因组片段的插入
一个基因组片段可以含有单个抗性来源或分子堆叠的多个来源，以在DSL1处产生基因组插入。在某些方面，与由分天然或异源启动子驱动的转基因盒相比，存在于此基因组片段内的编码序列由其天然调控序列(如天然启动子和/或增强子序列)驱动。然后可以单独使用或者之后通过育种组合使用DSL1内不同靶位点处的单个和堆叠插入。例如，可以将赋予针对北方叶枯病的抗性的NLB18(基因组DNA SEQ ID NO：1；cDNA SEQ ID NO：2或4；蛋白质SEQ ID NO：3或5)或HT1(基因组DNA SEQ ID NO：6；cDNA SEQ ID NO：7；蛋白质SEQ IDNO：8)的基因组片段(美国专利申请号16/341，531)和赋予针对南方锈病的抗性的来自近交系K22的RppK基因的基因组片段(WO 2019/236257(基因组DNA SEQ ID NO：9；cDNA SEQ IDNO：10；蛋白质SEQ ID NO：11))单独地或组合地插入DSL1处，如图4所示。
实例2
将多个抗病基因座渗入或正向育种至优良种质中
与独立地将不同基因渗入至基础近交系相比，多个基因在约5cM的区域内组合以赋予多种抗病性的疾病超级基因座(DSL)可以有几个优点。
为了组合赋予对4种不同疾病的增加的抗性的来自7个不同抗性供体品系的7个基因，为将这些QTL组合成单个近交系所需要开发的群体数量很大，并且最终需要将含有抗性基因的所有基因座移动到相同背景的不同杂交数量众多，并且需要很长时间。此外，在作为常规育种计划的一部分而开发的新杂交中选择并保持7个独立的基因座在一起在商业上是不切实际的，并且限制了在任何给定的产品周期中引入的性状数量。因此需要将独立的QTL区域回交到需要改善抗性的同一基础近交系中。一种典型的情形是回交，然后自交以获得具有含有回交亲本背景中存在的抗性基因的基因座的近等基因系(NIL)。
标记可用于针对回交系和随后的自交系中抗性基因座的存在进行基因分型。一种典型的情形是开发第三代回交和两个自交(BC3S2)代品系。如果一年可以培养三代，开发纯合BC3 S2品系需要约2年的时间。
一旦开发了7个单独基因座中每一个的近等基因系，就需要开始进行额外的杂交，以将7个QTL区组合，这将需要额外的世代(5-6代，大约等于2年)和大的群体大小，以便能开发具有7个纯合抗性基因座的近等基因系(NIL)。为了确保在随后的育种中同时选择这7个基因座，群体需要非常大的群体大小，以确保获得含有7个纯合的基因座的子代，以维持对多种病原体的期望抗性水平。
理论上，在衍生自具有所有7个抗性基因座的纯合品系与不含有这7个基因座的品系的F2群体中，16384个子代中只有1个固定了所有7个基因座。此单个子代将仅针对7个抗性基因座的存在而不是针对任何其他期望的性状而被选择。在育种计划中，选择下一代改良种质时需要考虑许多性状。因此，可能需要例如30-100个含有7个抗性基因座的F2子代，以便还允许选择将在两个亲本的F2子代中分离的其他重要性状。这将转化为需要来自一个杂交的约50万至约160万个子代，以确保人们可以选择7个基因座处具有改良农艺学性状和抗病性的品系。作为商业育种计划的一部分，不可能开发这样的群体大小。
除了开发含有来自不同供体来源的抗性基因座的品系所需的延长时间，以及确保7个基因座在子代中存在所需的巨大群体大小之外，另一个挑战是最小化来自供体来源的连锁累赘。即使使用标记辅助选择，回交亲本基因组恢复率也将不到100％。即使在回交亲本背景中仅保留2％的供体源基因组，这也将转化为几百个来自抗性供体亲本的基因，这些基因存在于针对每个单个抗性基因座开发的每个近等基因系中。
当将来自7个不同近等基因系的抗性基因座放在一起，并且假设这些NIL中的每一个仍然含有其各自供体源基因组的2％时，含有7个抗性基因座的最终近等基因系在其背景中可能具有高达14％的非优良基因组。由于抗性供体来源通常是非适应性品系，具有良好的抗性，但农艺学特征较差，因此衍生自非适应性供体的14％将很可能会对性状(如，例如成熟度和产量)产生不利影响。
相反，使用DSL方法，将七个基因转移到针对良好的农艺学选择的当前优良种质系(或一组精选的优良种质系)中定义的基因组区中。除了7个抗病基因的基因组片段序列外，此品系中没有额外的供体基因组。此外，此大约5cM的DSL区在许多商业相关的优良品系中是相同的或基本上相同的，因此将此区渗入至其他优良品系中将改善对多种病原体的抗性。
使用DSL方法，将来自不同的抗性玉蜀黍供体的七个天然抗性基因插入至此优良品系中并开发纯合抗性品系的时间更短。一旦开发了基因组背景与基础近交系完全相同(除了5cM的DSL区内的7个插入基因之外)的这样一个初始抗性品系，它就可以用作抗性优良桥接供体品系，以用于随后将DSL渗入其他优良种质。
这样的渗入方法可以在2年时间内完成并且由于抗性桥供体系处于优良背景中，即使此抗性桥供体的基因组的2％仍存在于新渗入的品系中，也应该不会对农艺学性状有负面影响，因为桥供体品系是经过多年育种开发的具有良好农艺学特征的优良品系。
利用DSL区进行育种计划的机会
可以选择用赋予对多种重要病原体的抗性的DSL区进行渗入或正向育种，还允许育种计划利用基因组的其余部分来选择除抗病性之外的有利性状。换言之，一旦DSL区域固定，育种者可以自由选择、取消选择和/或选择与先前定位的抗病基因座相关或不相关的其他性状，而不会因期望等位基因的分离而导致抗性等位基因丢失。在当前的育种方法中，人们总是需要选择多种疾病的抗性基线。一些与抗病性相关的区可能与农艺学性状的负等位基因有关。如果可以通过DSL的渗入或正向育种获得对多种病原体的高水平抗性，则育种计划可以集中于利用DSL以外的所有基因组区选择最佳农艺学性状，而不必为了抗病性和与基因组其他部分的负面影响的假定联系而妥协。利用所有玉蜀黍基因组选择所需农艺学性状，而不限于所需水平的对多种疾病的抗性的同时选择(因为DSL提供了这样的抗性)的机会可能会导致性状(如产量、耐旱性以及其他农艺学性状)育种的进展更快。
具有多种抗病性并降低育种产量累赘的改良农艺学性状
有了在整个基因组中选择积极的农艺学性状，而不受需要整个基因组内的多个不同的基因座来赋予对多种疾病的基本抗性水平的限制的机会，就有可能取得额外的进展，以开发具有更好的总体农艺学的更好的产量品系。
当田间的病原体群体多年来发生变化时(这可能是由于可以克服一个或多个抗性基因的种族转变，或者是由于增加了以前不是问题的新病原体的问题)，可能需要替换含有这样的DSL的优良品系的DSL中的一个或多个抗性基因。
由于在杂交数量、所需群体大小、开发含有多个纯合形式QTL组合的近交系作为疾病对照选择的时间线等方面存在挑战，因此传统的杂交和选择将来自非适应性供体品系的新QTL区域引入到优良种质中可能具有商业成本。由于同样的挑战，目前来说，在未来的品系种质开发中将多个QTL区保持在一起在常规育种计划中是不可行的。
相比之下，通过靶向基因编辑技术在优良近交系中去除、替换或添加新的抗性基因至DSL中更快，并且减少了目的基因周围的连锁累赘，或者由于来自抗性、非适应性供体品系的背景遗传学。人们将能够开发出与最初的含DSL的近交系的相同或接近相同，但现在新的抗病基因取代了非功能抗病基因、疾病超级基因座中新添加抗病基因、或新的交换DSL或再经修饰的DSL的品系。
插入相同等位基因的多个拷贝以优化性状表达并消除两亲存在与传统的杂交和选择程序相反，人们还可以在一个近交系的DSL(即，在同一染色体臂/区域)中将同一基因的多个所需等位基因组合在一起，这有时是为了赋予期望的抗性水平。如果在近交系的DSL处每个染色体上存在所需等位基因的两个拷贝，则此近交系与另一个近交系(不具有这样的等位基因)杂交产生的杂种将产生具有等位基因的两个拷贝的杂交子代。这在传统的杂交发展中是不可能的，在传统的杂交发展中，需要在谱系的两侧引入目的基因，以开发具有所需等位基因的两个拷贝的杂种。
来自多个来源的遗传连锁抗性基因的堆叠
还可以将源自不同供体来源的抗性基因的等位基因插入至DSL中，但这些等位基因位于那些不同供体品系中的玉蜀黍基因组上完全相同的区域。使用传统的杂交将来自不同供体来源的这样的基因组合成一个优良的回交亲本对于商业产品开发周期将具有挑战性或不切实际，因为从独立供体品系获得基因组上相同位置的基因之间的正确重组仅在非常低的频率下发生。需要大量的杂交和子代才能有机会鉴定出具有所需重组的子代品系。
具有阻碍同源重组的结构变异的来自多种来源的抗性基因的堆叠
例如，玉蜀黍含有抗病基因簇，如10号染色体(c10)的短臂。由于缺乏与其他育种品系的序列同源性，这些簇可以表现出显著的结构变异，阻碍育种杂交期间的同源重组。
例如，如果希望将c10上的供体品系A的抗病基因与位于c10上相同基因组区的供体品系B的抗病基因结合，并将这两个抗病基因移入优良近交系C中，则可能会出现几个挑战。由于基因含量的差异和基因间序列的差异，三个品系之间的这样的区可能在遗传上有很大的差异，因此可能很难获得在这样的区中有任何重组的子代(在商业相关的育种周期中)，因为高度不同的区的重组较少。这将阻碍开发具有所需重组的子代的机会，从而允许将两个不同供体品系的两个抗病基因转移到一个优良的近交系中。此外，即使可以成功地产生这样的独特重组，由于缺乏重组频率，供体系中仍有很大一部分区域仍将存在于优良近交系中，从而导致抗病基因周围的供体品系基因组连锁累赘至优良的近交系中。在近交系的这样的抗性基因簇中，可能存在某些疾病的抗性等位基因的基因和具有其他疾病的易感性等位基因的其他基因。通过重组仅组合来自几个近交系的不同基因的抗性等位基因并同时避免导致具有理想的抗性等位基因的基因与不希望的易感等位基因连锁的近交系之间的重组通常是非常困难的。疾病超级基因座将允许来自多个玉蜀黍品系的抗性等位基因的这样的堆叠，而不会受到通过重组引入不良易感等位基因的机会的阻碍，因为疾病超级基因座不依赖于重组和所需重组的产生，但只允许对赋予抗病性的等位基因进行精确和靶向性堆叠。
在另一个目的性状或区域附近的DSL基因座的插入
开发疾病超级基因座的另一个优势是，可以将此DSL紧邻已开发抗昆虫基因座(IRL)的遗传区。在一个实施例中，IRL可以是昆虫超级基因座(ISL)。这将允许同时渗入多种抗昆虫性状和抗病性状。性状渗入方法将具有成本效益，因为这些多个性状将作为一个基因座渗入，这将更快，因为不需要在重复亲本中渗入不同的基因座，然后进行几代的最终杂交和自交，以开发抗昆虫基因座(IRL)和疾病超级基因座的纯合系；最后，它将限制供体品系遗传学在转化的回交亲本的基因组背景中的存在，因为两个不同的超级基因座中仅有一个超级基因座将从供体亲本中渗入，这将导致连锁累赘较低和最终基因渗入系中来自供体亲本的背景基因组百分比较低。
如果未来需要将昆虫超级基因座与疾病超级基因座分离，则可以通过鉴定两个超级基因座(SL)之间的重组体来实现。当前品系是用距IRL约0.6cM遗传距离的DSL创造的，并且由于这些SL是在优良种质中开发的，因此含有两个SL的品系与我们的大部分近交系之间的0.6cM区的序列相似性完全相同。因此，重组频率预计是正常的，并且应该能够以165个子代中有1个的频率识别F2群体中的重组子代系。
因此，如果需要将IRL与DSL中的抗病性状包分开，则可以这样做。有机会将这样的组合性状包作为一个基因座渗入，能够根据需要分离不同的性状包，并且能够通过基因编辑将新的抗病基因替换或添加到DSL区域，这允许开发最适合特定环境的杂种。
开发一种独特的单一SL(含有允许控制多种疾病或不同昆虫或两者的组合的性状包)也将简化单一杂种中将这样的SL与其他性状(例如，除草剂耐受性)组合在一起的方法。例如，可以将DSL加ISL渗入谱系的雌性一例，并将其与谱系的雄性一例的除草剂耐受性状组合。通过限制通过SL的开发渗入的基因座的数量，如果需要的话，也可以更容易地将此SL的另一个性状组合在一个品系中。与在一个单个近交系中以纯合状态将7个或更多个独立基因座组合在一起相比，开发组合两个目的独立基因座的品系所需的子代和杂交的数量要少几个数量级。
实例3
定义适合在大豆中基因工程化抗病性状的基因座
在设计和选择适用于疾病超级基因座开发的大豆基因组区时，考虑了几个因素：产品组装的便利性、分子特征以及监管和管理问题。
一个疾病超级基因座(DSL)位于在一系列种质中没有表现出主要的结构变异的区域。
用于无缝插入性状的靶位，点的识别
使用生物信息学工具扫描DSL区的靶位点，以搜索前间隔序列邻近基序(PAM)并检索上游20个碱基序列。然后应用过滤器来选择合适的靶位点及其相应的指导RNA。
如果与任何天然基因注释的距离小于2.5kb，则认为靶位点不合适。靶近交系中的基因注释是基于结合了计算机预测和体内证据的生物信息途径。对于下游分析原因，位于大于200bp的重复区2kb内的靶位点也被认为是不合适的。
靶向合适位点的候选指导RNA最终通过在计算机中检查其潜在的脱靶活性。对于每个候选指导RNA，基于当前文献生成了潜在脱靶位点列表，如果潜在脱靶点与引导存在3个或更多个错配(包括PAM近端种子序列中的至少一个错配)，则将其排除。
指导和模板的载体构建
将合适的Cas基因通过标准分子生物学技术与大豆泛素启动子可操作地连接。
大豆启动子用于表达将Cas核酸酶引导至指定基因组位点的指导RNA。为了使Cas内切核酸酶和指导RNA形成蛋白质/RNA复合物以介导位点特异性DNA双链切割，Cas内切核酸酶和指导RNA必须同时存在。为了改善它们的共表达和存在，将Cas内切核酸酶和指导RNA表达盒连接至单个DNA构建体中。合成含有指导RNA编码序列的序列、来自选择的大豆基因组靶位点的可变靶向结构域和部分启动子。然后将序列克隆至已经具有cas盒和其余gRNA表达盒的骨架上。
设计同源定向修复(HDR)模板以使抗病基因插入所需靶位点。为了优化递送，合成模板序列并克隆至含有Cas内切核酸酶和指导RNA的载体骨架。在此设置中，通过在HDR模板的每一例插入与载体上编码的指导RNA相应的靶位点序列，实现从载体中释放模板。模板序列包括一个或多个目的抗病基因的全基因组区，侧翼是对应于与切割位点直接相邻的100-1000bp区域的同源臂。
通过农杆菌介导的转化将包含大豆密码子优化的Cas内切核酸酶表达盒、指导RNA表达盒和HDR模板的质粒递送至大豆胚中。通过Cas内切核酸酶在指定位点处进行DNA切割后，将通过同源定向修复整合模板，从而在赋予对一种或多种疾病的抗性的基因组区的切割位点处进行无缝插入。
实例4
赋予对疾病的抗性的大豆基因组片段的插入
一个模板可以含有单个抗性来源或分子堆叠的多个来源，以在DSL处产生基因组插入。然后可以单独使用或者之后通过育种组合使用DSL内不同靶位点处的单个和堆叠插入。
例如，大豆抗病性状可以包括如美国专利号7,872,171中所述的大豆胞囊线虫抗性、如美国专利号7,767,882中所述的对茄病镰刀菌(Fusarium solani)(一种大豆猝死综合征病原体，目前称为北美大豆猝死综合征病菌(Fusarium virgulform))的耐受性、如美国专利公开号US 20140178867 A1中所述的大豆中的疫霉(Phytophthora)的耐受性、如美国专利公开号US 20160130671 A1和美国专利号9,464,330中所述的大豆胞囊线虫抗性、如美国专利公开号US 20130047301 A1中所述的大豆根结线虫耐受性、如美国专利公开号US20160032409 A1中所述的蛙眼叶斑病抗性和褐茎腐病抗性、美国专利号9,894,857和美国专利公开号US 20180084745 A1中所述的大豆中的炭腐病抗旱复合抗性、如美国专利号9347105中所述的大豆对胞囊线虫的抗性、如美国专利号US 20180291471 A1和美国专利公开号US 20180334728 A1中所述的大豆的褐茎腐病抗性、如美国专利号9049822中所述的大豆胞囊线虫抗性、如美国专利公开号2014-0283197中所述的疫霉抗性、如美国专利号10995377中所讨论的大豆中的疫霉根腐病和茎腐病。
实例5
染色体工程化
重排(例如，倒位、易位)染色体区或片段，包括与作物植物(如玉米、大豆、棉花、卡诺拉油菜、小麦、水稻、高粱或向日葵)中的一种或多种疾病相关的DSL，以使得这些染色体区处于优选的染色体配置，与对照和其他育种增强相比，这样能够实现更快的性状渗入、减少连锁累赘、最佳的连锁不平衡。在实施例中，优选的染色体配置是DSL染色体片段易位到预先存在的含有一个或多个昆虫和/或除草剂耐受性状(任选地，转基因性状)的转基因基因座上。在另一实施例中，将第一DSL与第二DSL易位，其中第二DSL含有与第一DSL不同的至少一个基因。在另外的实施例中，将DSL易位至端粒区，在该区中，通过依赖单个杂交而不是两个杂交来使性状渗入至其他优良种质的效率更高。
实例6
在具有多个抗病基因的植物上优化杀真菌剂的使用
使用具有DSL的作物植物可以减少杀真菌剂的使用或延迟杀真菌剂的应用，因为这些植物对多种病原体表现出多种抗性模式。因此，优化这样的植物上的杀真菌剂使用有助于系统农业和农业运营。由于有害生物压力的增加，杀真菌剂的使用在过去几年变得普遍。在美国，三分之二的种植者在其玉米或大豆作物的生长季节期间至少应用一种杀真菌剂。其他地区需要额外的应用来充分保护产量，如巴西和阿根廷。这些做法增加了农民的成本和不便，同时也增加了杀有害生物剂的使用。此外，应用的时间与治疗结果高度相关，是本季节遇到的关键挑战之一。包含疾病超级基因座的多疾病抗性杂种可以减轻对杀真菌剂使用的需求，并允许在时间应用上具有灵活性。此外，当仍建议使用杀真菌剂处理时，这样的杂种预计需要较低的应用率，从而提高杀真菌剂的耐久性，减少对环境的影响，并提高可持续性。
实例7
非编码序列的插入
疾病超级基因座(DSL)可能包含来自不编码多肽的基因或序列的抗性来源。相反，这些基因或序列可以转录成非编码转录物或非编码RNA，这些非编码转录物或非编码RNA可以调节基因表达并作为针对植物病原体的抗性来源。
DSL可以含有不编码多肽的一个或多个多核苷酸序列、转座子、可转录成各种大小的非编码转录物(例如长非编码RNA(lncRNA))的重复序列。可以将一种非编码转录物加工成小RNA，如微小RNA(miRNA)、短干扰(siRNA)、反式作用siRNA(tasiRNA)和相位siRNA(phasiRNA)。DSL中的非编码基因和序列可以与植物病原体或有害生物(如病毒、细菌、卵菌、真菌、昆虫和寄生植物)中的特定序列共享核苷酸序列同源性。非编码转录物或加工产物(如小RNA)可以调节或干扰植物病原体或有害生物中特定基因或序列的表达，从而降低病原体致病性并提供改善的宿主植物抗性。
在一个方面，包含DSL的植物中的易感等位基因可以被直接敲除一例如，当这样的位置已经是DSL的一部分时，通过插入抗性等位基因并替换易感等位基因。在其他实施例中，可通过RNA干扰、同源重组、包括CRISPR和TALENS的基因组修饰或通过将DSL插入易感等位基因位点来敲除或敲低易感等位基因座。
实例8
DSL植物为种植者提供了作物管理实践的灵活性
保护性耕作做法(如免耕或条耕)由于其对环境的积极影响，在农业系统中通常是期望的。这些做法有助于限制土壤侵蚀并改善土壤质量。此外，它们还通过减少燃料和劳动力需求提供了另一个优势。然而，由于前一个生长季节的作物残留而导致的疾病压力增加通常令人望而却步，特别是在容易爆发疾病的环境中。在这些情况下，包含DSL的多疾病抗性杂种将能够在更大范围的环境中更广泛地采用这些实践。
包含DSL并且因此对多种疾病具有更强的抵抗力的杂种植物使得在某些耕作实践中具有更大的灵活性，而使用标准杂种可能是不可能的或被认为风险太大。影响植物地上部分(如叶和/或茎)的许多疾病的严重程度部分取决于土壤表面存在的接种量。前一个生长季节的残留物是这种接种物的可能来源之一，因为许多病原体可以在前一作物残留在田间的碎片和其他植物部分上存活。管理实践(如作物轮作和耕作)直接影响到一个生长季节后留在田间的残留物的类型和量，因此有可能在下一个生长季开始时减轻或加剧疾病压力。
例如，导致北方叶枯病的大斑病长蠕孢主要在玉米残渣上越冬。除了特定的天气条件外，疾病的爆发还与玉米对玉米和保护性耕作实践有关。在这些实践下，易感杂种特别容易发生病变。例如，包含DSL且对包括NLB在内的多种疾病以及NLB疾病的多个种族具有抗性的杂种预计不仅会留下病原体负荷减少的残留物，而且还会显示出对此接种物的抗性，尤其是在早期季节。
杂草管理主要是保护作物免受资源(如养分、水和光)竞争。因为杂草也可以作为植物疾病和植物疾病的昆虫媒介的储存库，因此杂草管理也可以影响植物健康并保护作物免受疾病。例如，禾本科杂草(如茅草)可以携带禾生炭疽病菌，导致玉米炭疽病的真菌病原体。预计使用包含DSL并对多种疾病(包括炭疽病)具有抗性的杂种可以缓解需要，特别是在担心疾病压力时控制杂草的严格时间。这可以使农场在管理和做出杂草处理决策时更加灵活。
实例9
作物植物中增加的抗病性耐久性-包括遗传性状和作物保护剂两者
研究中的田间监测数据的分析表明，植物内的抗病基因的聚合是提供对植物病原体的持久抗性的最有力方法。这样的聚合或堆叠策略允许抗性基因的有效期更长。
疾病超级基因座(DSL)允许这样的堆叠赋予病原体抗性的几个基因，并且还允许在田间病原体群落随时间变化的情况下调整DSL基因座(交换、添加基因/等位基因)。
疾病管理(如部署DSL)使病原体群体大小保持较小，这将有助于控制这样的较小群体中的突变或重组的总数，并限制有利于病原体克服宿主抗性的突变或组合的发生。换言之，通过限制有害生物的群体大小，DSL在作物生长环境中受到有害生物压力的田间条件下生长的作物植物中的存在降低了这样的有害生物群体中可能出现抗性避免突变的机会。
将抗病基因与其他病原体控制实践(杀有害生物剂、农业实践)组合是一种减缓强毒病原体基因型的演变的相关的管理策略，并且各种有害生物控制手段可以协同提高彼此的耐久性。
因此，部署DSL与合适的杀有害生物剂管理策略的组合不仅可以延长DSL中抗性基因的耐久性，而且还可以通过限制杀有害生物剂靶向的病原体基因的突变来延长来控制病原体的杀有害生物剂的耐久性。
实例10
与通过育种的传统性状聚合相比，DSL方法的提高的模块化
疾病超级基因座方法提供了一种更简单的方法来调节在特定环境或特定种质中提供足够抗病性所需的一组基因。例如，可能影响玉米作物的一系列疾病在很大程度上取决于地理位置：在美国，东南部发生玉米南部锈病的风险高于其他地区，而美国玉米带和大西洋各州发生灰叶斑病的风险更高。此外，某些地区的种族进化可能会导致新种族在特定地区流行，而其他地区则不受影响。还已知，由于近交亲本种质中存在的天然性状的潜在组合，特定杂交组合或多或少易受特定疾病或种族的影响。在这些情况下，可能需要调节通过DSL传递的抗病性状包，并使其适应特定的地理位置和种质易感性。超级基因座方法非常适合这种对灵活性的需求，而传统的育种方法只有通过大量的时间和专门的努力才能实现。例如，玉米杂种可能表现出农艺学特征，使其非常适合具有不同疾病压力程度的多个地区。使用DSL方法，可以很容易地将所需的一组抗病基因插入一个近交亲本中，以提供对最可能发生在一个地区的疾病的足够抗性，并将一组稍有不同的抗病基因插入同一近交亲本，以提供对最可能在另一个地区发生的疾病的充分抗性。因此，可以使用这种方法产生表现相似的农艺学特征但适应不同地理位置的抗病特性的杂种。可以使用超级基因座方法，通过在DSL靶位点插入两组不同的基因来实现此结果。这也可以通过创建由针对疾病1的抗病基因“组1”组成的第一DSL插入，然后与由针对疾病2的抗病基因“组2”组成的另一近交系杂交，同时还将“组1”与由针对疾病3的第三组基因“组3”组成的近交系杂交，产生两个各自具有不同抗性基因组(组1和2，或组1和3)的近交系来实现。同样的结果可以通过创建由组1组成的第一近交系，并重新改变此近交系以创建组2或3的插入来实现。这也可以通过创建由组1和2组成的第一近交系，并将组2与组3交换来实现。例如，如果以这些可能的方式中的一种创建的近交系中的一个基因或一组基因由于疾病压力的变化而过时，则可以直接缺失不需要的基因或基因组，或将其替换为更相关的基因或基因组。相比之下，由于所需的成本和时间，以及每一个新基因渗入都可能产生连锁累赘，因此使用传统育种方法实现同样的结果是不切实际的。这样的模块化也可以通过位于给定DSL中的多个抗病基因之间的内置的、独特的重组连接(“URL”)序列来实现。例如，这样的DSL可以包括包含“抗性基因A-URL1抗性基因B-URL2抗性基因C等”的签名。可以将这样的URL设计成通过特定的重组增强剂如CRISPR-Cas内切核酸酶或任何其他位点定向剂(包括例如基于FLP/FRT重组酶的系统)靶向。
实例11
DSL植物的种植密度
病原体通常对天气条件非常敏感。此外，一些病原体对植物冠层中的微环境特别敏感。导致灰叶斑病的灰斑病菌(Cercospora maydis)就是这种情况。叶面及其周围的湿度有利于此疾病的发展。例如，预计植物密度和行距对这种微环境有直接影响。较高的密度创造了湿度增加和通风减少的条件，两者都适合病原体的发展。例如，使用含有DSL并抗GLS的杂种可以缓解此问题，进而实现更高的种植密度(例如，每英亩40,000-80,000株或更多的玉蜀黍植物)，否则由于疾病爆发的风险更高，可能不会考虑这种种植密度。
实例12
DSL植物的成熟度和种植日期
人们认识到，晚熟的杂种和延迟种植在季节后期发生疾病的风险较高，并导致严重的产量损失。包含DSL并对多种疾病(包括在生长季节后期发展的那些疾病)具有抗性的杂种预计在谷物灌浆期间疾病压力较高时表现更好。种质中存在疾病超级基因座所带来的多疾病抗性可能为晚熟杂种类提供更大的种植日期灵活性和增强的产量保护。
实例13
组合易感性天然基因座敲低与DSL
除了在疾病超级基因座插入抗病等位基因外，本领域已知敲除或下调易感基因的表达可以增强病原体抗性的持久性和范围。因此，可能需要将DSL方法与已知疾病易感基因的敲除组合。例如，众所周知，在病原体感染期间，参与营养运输和可用性的基因有时会被激活，并以植物为代价用于维持病原体感染。在一个实施例中，可以设想能够组合两种抗性模式的几种方法。一种方法是创建由一个或几个易感基因敲除组成的近交系，该易感基因敲除通过基因编辑、经典诱变或自然变异育种获得，并通过育种杂交将此材料与由DSL组成的近交系组合。另一种方法是通过在由一个或几个易感基因(通过直接转化敲除)组成的近交系中的DSL处插入抗病基因来创造相同的近交系。第三种方法是通过在DSL处插入抗病基因和反式作用的非编码转录物两者来降低或敲除基因组中易感基因的表达来产生类似的结果。
实例14
针对作物所需的表型，使用天然增强子来改变DSL中抗病基因的表达
基因或QTL可以是隐性或半显性的，并且需要两个拷贝的基因或QTL以获得所需的性状。可以将基因或QTL的两个或更多个拷贝引入至DSL中。在杂交作物中，这要求基因或QTL渗入雄性和雌性亲本两者中。此渗入区域可以带来导致连锁累赘的额外的基因组区。如果因果基因是已知的，那么携带所需性状所需基因的质粒载体可以用作模板，以使用CRISPR或转基因方法向亲本添加额外的拷贝。当使用转基因方法时，可以使用不同的调节元件组合，如启动子、内含子和终止子，来适当表达所需表型的因果基因。然而，如果需要QTL的两个拷贝，则质粒模板是不可能的。QTL区的表达可以通过使用CRISPR-Cas的天然增强子或超级增强子来改变。改变QTL内因果基因或基因组表达的一种可能性是使用CRISPR将天然增强子移动到QTL或基因组的另一部分附近，这改变了QTL内基因的表达水平或表达模式，从而导致期望的表型。另一种方法是将QTL移动到新的染色体区域，在此区域中，天然增强子或超级增强子改变了QTL内因果基因的表达时间、空间或水平。如果多个QTL需要类似的表达变化，那么这些QTL可以共同位于一个超级基因座中，其中天然增强子影响多个基因和QTL。
实例15
含有影响植物高度的遗传修饰的株型矮小玉蜀黍植物
在一些实施例中，包含DSL的玉蜀黍植物是株型矮小的。参见US 20200199609 A1(通过引用以其全文并入本文)，能产生株型矮小的植物的方法和组合物以及涉及株型矮小植物的农业管理解决方案。DSL玉蜀黍植物包含靶向参与植物高度降低的多于一个不同基因组基因座的一个或多个遗传修饰。在实施例中，与对照植物相比，减小植物高度约5％至约30％。在实施例中，植物包括在V6-V8生长阶段减小的平均叶长宽比。在实施例中，植物高度减小基本上不会影响开花时间。在实施例中，与不包括修饰的对照植物相比，开花时间变化不超过约5-10CRM或正负10％GDU或125-250GDU。
在实施例中，如本文所示的DSL玉蜀黍植物包含Br2基因组基因座，该Br2基因组基因座包含编码Br2多肽的多核苷酸中的编辑，该Br2多肽包含与US 20200199609 A1的SEQID NO：43具有至少95％同一性的氨基酸序列，使得该编辑导致(a)编码Br2多肽的多核苷酸表达减少；(b)Br2多肽的活性降低；(c)编码Br2多肽的多核苷酸的一个或多个另外的剪接转录物的生成；(d)Br2多肽的一个或多个结构域的缺失；(e)编码Br2多肽的多核苷酸的一个或多个外显子中的移码突变；(f)编码Br2多肽的多核苷酸的很大一部分的缺失或编码Br2多肽的多核酸的缺失；(g)存在于编码Br2多肽的调节区内的增强子基序的抑制；(h)一个或多个核苷酸的修饰或与编码Br2多肽的多核苷酸的表达可操作连接的调节元件的缺失，其中调节元件存在于启动子、内含子、3’UTR、终止子或其组合内。
在实施例中，如本文所示的DSL玉蜀黍植物包含D8基因组基因座，该D8基因组基因座包含赤霉酸生物合成或信号传导途径，该途径由选自由以下组成的组的D8遗传基因座处的一个或多个引入的核苷酸变化来调节：(a)编码D8多肽(如US 20200199609 A1的SEQ IDNO：76所示的，通过引用以其全文并入本文)的多核苷酸的表达减少；(b)D8多肽的活性降低；(c)编码D8多肽的多核苷酸的一个或多个另外的剪接转录物的生成；(d)D8多肽的一个或多个结构域的缺失；(e)编码D8多肽的多核苷酸的一个或多个外显子中的移码突变；(f)编码D8多肽的多核苷酸的很大一部分的缺失或编码Br2多肽的多核酸的缺失；(g)存在于编码D8多肽的调节区内的增强子基序的抑制；(h)一个或多个核苷酸的修饰或与编码D8多肽的多核苷酸的表达可操作连接的调节元件的缺失，其中调节元件存在于启动子、内含子、3’UTR、终止子或其组合内。
在某些实施例中，以较高的种植密度种植本公开的玉蜀黍DSL植物。这包括提供玉米植物，其中与对照植物相比，调节与植物高度相关的多核苷酸的表达和/或活性导致显著的高度降低或高度改变(即，通过引入导致玉米植物高度降低的遗传修饰来降低植物高度)；并以每英亩约30，000至约75，000株植物的种植密度种植玉米植物。
在某些实施例中，种植密度为至少50，000株植物；55，000株植物；58，000株植物；60，000株植物；62，000株植物；64，000株植物。在某些方面，玉米植物包含编码D8多肽的基因组区中的突变或降低的编码D8多肽的多核苷酸的表达。在某些方面，玉米植物种植在多行中，行宽为约8英寸至约30英寸。
                         序列表
<110>  先锋良种国际有限公司（Pioneer Hi-Bred International, Inc.）
       Frank, Mary
<120>  多种抗病基因及其基因组堆叠件
<130>  7823-WO-PCT
<160>  44
<170>  PatentIn 3.5版
<210>  1
<211>  13643
<212>  DNA
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  1
tctaacgccg acaccgtcga cgagtaagag gtcgtggccg gctgcccaca cgtctgtgtg      60
aacctcacca tcgacaccac cgtccgcctg cggcctacgg cctcgaactc caacatcaca     120
ttcctctaca actgcatgaa gaacattacc ctaccctctg tcatggaact gagtgggttc     180
ccacaacaac aagaagatag atgtaggtcg tacgtgctgt gggatggcgg gatcacgggt     240
gctcaggcgt acgggtatgg gtgcgaggac ttggtggtag cgtcggagct ggatgtacac     300
aaaaagggag aaggcgatcc acctccggaa cggatcgctc catcgggttg ccgcatgacg     360
ggatcgagct gaactacgac actcactcta agcagtggga cctagggatg aaaacggtcg     420
gtaaacacta aagcaattac cgttttcata ttttttttat cgaaaacaaa atcgaaaacg     480
gtaactccgg aaatggaaac gatatcggta tttcggaaac atcgcaaacg aaagttcggt     540
gcgaaaaata cacaagtaac ggtcgaaatc taaaatacga tcgataaaca tatcaaactt     600
cataatacaa caaagttgac aaaagatcac aaagaccaca agttcacaat tcatgatata     660
acaagtttaa aatataacaa gttcacaagg atcacaaatt tataatataa aaaaattaca     720
aagatcacaa gttcacaata taacaagttc acagtataac aagttcataa agatcacaag     780
ttcacaaact caaggttcac aattcacaat atccactcga tttagctgac atggcatgct     840
tactcatgaa atattttttc ctcaaataaa gagtttttca cagactcgta ggaaaaccct     900
aaaatctagt atgtggaaaa gacagactgt cggctctatc attatatatt actaatacat     960
aacatgtgga cagaaaatgg tggattcgtt cgagagacca aatcgttaat ctcaactgcc    1020
ttccaacacc atctatcaaa aaaaatctta aggcgtccaa aaaatacaaa aaataagtaa    1080
tccttatcta gagacgtaca ggcgatgcga aaaaaatcac atgctgaata attccgaaaa    1140
aaattccgga aaattctgag acataaatcc ggtaatttcc gacaaaaacc ggtaaccgaa    1200
ggaaacagtc ggtaaaacac cacgccgatt ccgataccga ctctaataga aatttccgaa    1260
aaccgatttc gttttcgaaa aatactgtta ccggtgaata caatcgaaaa atttcgaaat    1320
cggtttccgg aataccaaaa aattgtgaaa ctgttttcat cactagtggg accgatgtga    1380
tggctccgac ggatggtgtg gctaccagcg tgatgagacg cccaccggcg ggatgacatt    1440
cgcatgtttt tgcaaacgca gcccgatcac atgtgcacaa tcgttagtgg cgcgttttaa    1500
aaaagacgta actacgaaaa aaaatagcga catgttttta gccagtgtca caaacgtcat    1560
cttcgagcac ttttgatgta gtgtatacaa tctactagtc aaattaaaaa gaataacata    1620
cacgaaatgg ttcataactt ttatatagtt aaacaataat aaatttataa aaatccctaa    1680
acaaacaaca aaacgttgga cacctccccg ctatttatgg cggatggccc gcccaattga    1740
cgtaatttcc acatcgaagt cgaagaaccg gtcgctgtga ccagtcaccc caacctccgt    1800
cacttgtctc tcacgcgcgc gcaacatcgc cgagaaaacc agaacagacc tccggattgg    1860
tctctccccc gttcacacga gcacattgcg atggctcctc tgctcctgct gctcctcttc    1920
cccgtccagc tccccctcgc agtagccgac gccgtctccg gtccctgcac cagagccaca    1980
tgcgccggcc aggacgtcca ttacccgttc tggctcaagt cctccgcgcc cgactgcgtc    2040
tatcccggtg tcggccttgt ggcccttgtc tgcgagggca actcgacgct gatcctcccc    2100
ttcaagtccc acagatacgt agtgctcagc atcgactaca agacgcgtac cgtgctggtc    2160
tccgacgccg acatcgtcca cgagtacgac gcggccggct gcccgcgcgt ccgcgtgaac    2220
ctcaccatcg acaccgcctg gctgcggccc acggcctccg actccaacat caccttcctc    2280
tacaactgca agaagaacat caccctgccc tccgccgtgg aactgagcgg gtgccagcag    2340
cagcagcaac aagacggcag caggtcgtat tcgtacgtgc tgccggacgg cggggtcacg    2400
ggcgctgagg cgcaccagta cgggtgcgag gacttggtgg tggcgccggt gctggacgtc    2460
cacaggaggg cgatcttgag ggcgcctggc ggcccgactc tggagaacgg gtcgctccgt    2520
cggttgctgc agggcgggtt cgagctgaac tacgacactc actccgagca gtgcgaccga    2580
tgcgaggcct ccggcgggtg gtgtggctac cagcgcgacg agacgcccgc cggctggatg    2640
acgttcgcct gcttctgcga cggcgggccg acgaccacgg cccgatgcgg tgccggtatg    2700
tctttttttt ttcttcgaac aaggtgtggc atgtgttcta ccgtttcaac tagtaaatga    2760
ttacattgag ctaggcagct agccacacat tttcttgaat gattttcttt gatgaacctg    2820
ctgtttgctt ttatgacgtg aacaacgggg cctgcaagct gccacatacc tagggagact    2880
agttcgtgac cttctttaca cgtcttctct actcgccact gggagttgac gccgctcggt    2940
cgtcccactt tgtgacgttc aaccagagtc tagagatgta attctctgcg aatacaggac    3000
tagttggagc taacaacgca gcttgacgag ggtgaaccca gctccacctc gtctaccacg    3060
tcttctcctc gccatggctg ctcacctacc acgcctcccc gtcctcctcc tcgtcctcct    3120
cgctgctcat gtcgtctcca cctccgccca tgccgagcct cctcttccga gcccttacag    3180
cacctccgcc catggcgagc ctcctcttcc gagcacttac aacgtctcca tgtgctcgga    3240
atcgttctgg tgcggcggcg tcgaaatccg ctacccgttc tatcttgcca acgcaaccgc    3300
cgactacagc gggagctact actcctgcgg ctacaccgac ttgagcgttt cctgcaaact    3360
cgaggtcgag gggccgacga cgacatggac ccctaccatc cgtctcggcg gcgacaacta    3420
caccgtcaag aacatcttgt acgactatca taccatctca ctggcggaca gcgatgtgct    3480
cggaggcggc gagtgccccg tcgtccacca caacgtcagc ttcgacgaga cgtggctgca    3540
caaccccagc gccttcgaca acctcacctt cttcttcgga tgccactggg ggccacgcga    3600
tacactgcct gaatttgccg gcaacaacat cagctgcgcc gggttcagta ctccagctat    3660
cagcggtgga ggctccttcg tgttcaagcc tgaagatctt gacgaacatg cggagcagga    3720
gttggcttca cactgcgacg aggttttctc cgtgccagtg agaagcgagg ctctgcagca    3780
ggcgatcgtc agcaacctca gcctcgggga cgggtacggc gagctgctta ggcaggggat    3840
cgagttggaa tggaaacgga catcggagga tcagtgtggc cagtgcgagg aatcgggctc    3900
cggcggacgg tgcgcctaca gccagaagag agaattcctt ggctgcttgt gcagcggagg    3960
gaaggcgggc aacccgttct gcaaaccatc aagtaaagtc ctgaaccgag cctcccttat    4020
ttttttttca ttttttgcaa tccaccagag agcacgcatc ggttgcgtca gtatcttgca    4080
acctcgtagc tagccccgca gtgtcccctg tgtgcgagta ccgcgctgct ccagcttgcc    4140
tcctgctaac gcctaacggt gaatgcttca tgcttgacat gatctagcta gtctacactt    4200
tgcttggggt ttgcctggga gctggaaatt ctggctcctg tttgcatcac tcgacaagga    4260
cgctttcaga cttgcgactc tcgttctgct tttgcaccaa atccgtgttt ttttcatttc    4320
gtgatcgaga ttaatctagc ttagagatga caatgggtat ccgaaactcg aaacttgatg    4380
gatttttact ccattagggt ataggtttga atcaattttc atatttatgg atttgttaat    4440
aggcataaat atatatccaa caggtttata gatacgagtt tgtttctaca gtactcaaat    4500
ccgtgaacac atgaggtttt taaacccgac caaacctagt gcatattgtc attttatttt    4560
ataaacgaac aacaaaattg ttatctctat ttacttccta ttttttatcg attggtgaat    4620
gtataagtag ttggtgagaa tgtttcttgc ttgctattat agttttacta gcgttatata    4680
tgttgtgggt ggataactta gtgcaatgtc acttgattat acaacttatt atttgtattc    4740
attctctcta ctaataattt ttataccaaa tcatgaactc ggtgtttatt atataaattt    4800
tggaccataa tctcattaat catcacgata gttattgatt atgagaaaaa acaagcatat    4860
tggagataaa accctcggct aacccgttaa cccgatgggt acgggtttga acaaaatttc    4920
aaacctatta tgaatataag ttttttaaca agtatagata tatttcacgg atagagttta    4980
agatgacaaa atccaacgga tttgtatcca ttgccatctc tatccggcgg cccttacccg    5040
gcggccctta ccgtgctcca cgagcagagg tcgtatcgtc cctcttcccg tgtcgcctgc    5100
ttcgcgttgc cgaacggaga cgtttggtag cgttggccgg ctctagcagt cgggtcaact    5160
ctttttgttg ttgttttcga tgttgttgga tttttgttcc gtataagcca tgttttagta    5220
atttatttag tccagccgaa tccgaagacg tgtttgctgg gttggagact ttggagttgc    5280
tagtcatgat atgctttcta ctcggtttga tttcaaccca gttaggctat atttaatact    5340
ctagtattta tttcaatata aatggtttga aacggattaa ggtataaatt agtttaattt    5400
atatatttaa ttcctctcaa tccatatgta ttgggctgaa tactgaggta gtgtttggtt    5460
gaagagccat atagaacgga gccgttctgt tccagttttg ttgttgtttg gttataaagt    5520
aactagaacg gaatgacttc aattaaggaa tattcttctc agatccagaa ccattccgct    5580
ctaaaaaatc aaccggacgg agccgctccg tttccatcct gctcttacag tcacgctccg    5640
ttccgttcac tctgcaacca aacaaaaaac agagccgctc cgttccaaat taccaaacac    5700
agaacagagc ggcttcattc ctagaattag gaatggaacg actctgttct acttgactcc    5760
tcaaccaaac actacctaag tatccaaaca agcccttatt taagatgcat ttcctttaca    5820
gttacacatg accactattg tgtgggggca ggctgaacaa gcccttattt aagatgcatt    5880
tcctttagag ttacacgtgg ccactattgt gggggggggg gggggggggc aggccgatcc    5940
tactcgtcag tgctcattcg agagcaaaga taccgaagga gattagagag actaaaaact    6000
ttttactatt taaaattaga taataagacg atttaatccc gttccatatc tttgctctaa    6060
acaaaccctc aatgatcata tatctcggaa gatccggccg gctgttcttt atttatcaag    6120
tgatgactgc tgaccgctta tagaatatat attttaaagc aaaatttctt ctacagcagt    6180
aaaaggacta gacgaaacaa tgatgcattt ctctaacaaa agaaagtaga attatcaagc    6240
ggagagccaa gaccaaaagc cttacttcta tgggcgtcaa caaatgatac cgcgacggaa    6300
ccatcccagc aggtctatac tgtctgtcac gacccagcga gtaatcgtgt ggctacgcta    6360
ttagacttag gattggatga aatgctcggt ttattaatga gccagctcgt gagttaagag    6420
tgtttggttt gatgaatgaa gtaattcatc ttcttttcac tccccacttt tttatttggt    6480
ttgtgtaata gaatgagttg atccatcacc accacattca tcataagcta ataattagta    6540
tatacatgag tagtgagttg attccaccaa aattgatgaa atgaacttat gatgcatcat    6600
ctcatgaagc atagagtgac tccacaaacc aaacacacca taaatgatct attacataac    6660
gaaattatat gcatatcatt tatcagggcg acgacagggg gcatagggag gcaatatccc    6720
cctaatgctc cccaaattct atagggattg ttagtttctt ttagctaatt ctcatgtaaa    6780
caatataaaa aatgcttcta acagtccctc ctaattataa tttggtccac cctaatctta    6840
gatcctggct tcgtccgtgc catttacgta acaattggta aatatgttat acatgtgtgg    6900
tatctatggc ctatgaattg aactaatgat tgatgaattg tgcttatgtg ttaaattggt    6960
ctatgcgaat ataactatgg gttaaacgga tgaacatgtg tgttcattgt taattcatga    7020
gtgatgaatt atgtataatt tggtgttata ttgatgtgtt ttgtgaaact atgtgtataa    7080
ttattatttt ctataattaa atttgtttga aattaactag aaattgatta ttatatatat    7140
atatatatat atattgtttt tctgctctag tctgcaagct aaacgagcaa gctcaagctc    7200
gtaaacgatc cgaaccgagc tgactttgtg gctcattaac ttaacaagcc gagttgggcc    7260
aacttgttag cttaacgagt cagctcgaat acggacaagt tgagccgagt tggcatgata    7320
tccagcccta attaggcttg taccagtgca acatatccct ctcgcctttg tcacgtccag    7380
acatgtcaat gggccccgat tcccgcaagg aatttctcta ttaagggatg aggatgggaa    7440
agtttctccc cccacagaaa aattctctcc cgacggataa gcggggacaa cactccccat    7500
ccccattccc cgtggggacc tattagactt acatatggtg atgttttcat gtaaaagtta    7560
atgataaaaa taaacaatta ccttgttgtc ggcgtttcga ccccggaggg tccctggacc    7620
gacgagtaaa ttgtcgctgc gtgtcccagc ccagatgggt cgacgcgaga cggaacacaa    7680
gggggaaaca ataaggggaa tcgcggcctc gtgttgtcct gcgcccaggg cggatgcgct    7740
tgcagtaagg ggttacaagc gttcgcgagg gagagagaga gagagcctgt gcgccagccc    7800
gtcctcccgc gcggccacct tctcgtacga gggccctgga cctttctttt atagatgtaa    7860
ggagagggtc caggtgtaca acagggagcg tagcaatgtg ctaacgtgtc tagcagaggg    7920
aagccagaat cctatgtaca ggccgacgtg actgtcgaag aggttttggc gccctgttca    7980
tgtgatgtcg tggccgtcgg aggagcgctt gagccctgta ggagcacagc tgtcggagct    8040
gtcgggtcct tgctgacgtc tcattgcttc catagggagc tgagaaccgc cgtcgtcatg    8100
gagcacgcgg ggtgccatca ttacttgttt taccgggacg agccagatgg gacgctggtc    8160
ttgttcccag tagcctgagg tagctagagg tagggtaatg atgtgccctc ctgcgacgtg    8220
gtcggtccga gcccaaggtc gggcgaggcg gaggctcctc cgaggtcgag gctgagtccg    8280
agacctgggg tcgggcgagg cggagaccgt cgtccgaggt cgaggttgag tccgagccct    8340
ggggtcgggc gaggcagagt ccatcgtccg aggtcgaggt tgagtccgag ccctggggtc    8400
gggcgaggcg gagacagtcg tccgaggtca aggttgagtc cgagccctgg ggtcgggcga    8460
ggcggagttc gtcttccgag gtcgaggtgg agtctgagcc ctagggtcag gcgaggcgga    8520
gaccgtcgtc cgaggtcgag gttgagtccg agctctgggg tcgggcgagg tggagcttcc    8580
tatggcgcct gaggccggac ttggcggctg tcagcctcaa cctgacgggt ggcacagcag    8640
tcgaagcagc gcaggcggcg ctgtttttct atcaggtcag ccagtggagg ggcgaagtga    8700
ctgcggtcac ttcggctctg tcgactgaag agcgtgcgtc aggataaggt gtcaggcgat    8760
ccttgcattg aatgctcctg cgatccggtc ggctggcgag gcgatcttgg ctaaggttgc    8820
ttctccgcga agcctgcctg agctgggcct cgggcgagtc ggaggtgcgc ccgttgcttg    8880
aggaggccct cgggcgaggc gtgaacctgc ctgggcctgc tgtttctgcc cgaggctggg    8940
ctcgggtgag gcgagatcgt gtcccttgag cggacagagc tttgtcctgt gttgcgccca    9000
tcaggccttt gcagctttgt gctgatggtg tttaccagcc gagtttaaga gtcttggggg    9060
tacccctaat tatggtcccc gacacttgtc aagagatcac tttttgtaca aatatattca    9120
ttctgatgta cacatatttt tttcttacat ctaacaatgt gtataagtga gaatgtttta    9180
tattaataac aaatgaagta tgtcctaatt agacttctca cattgagcag caacaaaaca    9240
ttttatgaat tagtaaccat tttacttact aaaataatta ctattgtatc ttaatcattt    9300
tgtgcaaaat aaagaatgaa ccaaattttg ggtcaggtgt gggtcactcg caggttgaaa    9360
taaaaacccg cacccacact cgtgaaactt tgggtcagat gcgggttaca cccgcggatt    9420
aaaatctcta cccataccca cactcatcag atcgagtacc caaagatttt aagtttgcgg    9480
gttaaattgt catccctcga caccaacgtg ttggaggatt tggaagtttc gcgatgcgta    9540
cttaccaagt gtttggttct atgataaaag tttagcctgt gtcgcattag atgattgaat    9600
gtctattatg agtattaaat attgtctaat tattaatcaa attacacaag tgaaggctaa    9660
acaacgagac aaatttatta agcctaatta atctatgatt agcaaatgtt tacagtagca    9720
ccatctagta gcaccatctg agcgaatcat gaactaatta ggtttaatag gttcgtctta    9780
acgtttaatt cttatctatg taattagttt tataagtaaa ttatatttaa tacttctaat    9840
tagcctccaa acattcgata taacatagac taaaatttag tcagtggtgc tgctgctggc    9900
tcttttcctt catccgacgt aatgttttcc tcccaattta ttgtgttgtt ttgtttgtgc    9960
tttaaaactg acttgctctc tgcttgctgt atcaaagtcg tgatgtgtgc ttagcttatt   10020
cccttccttg ctagctgccc ttagcatcta tatagggata tttggttata gggactaaag   10080
tttagtttag tccgtgtcca attataaaac taattacata actgaatact aaaagacgag   10140
aaaattttat taaacttaat taatttatga ttagcaaatg tttattgtaa catcacataa   10200
gtaaattata gactaatttt gtttaatagg ttcatcttat catttagtct tcatctatgt   10260
aattagtttt gtaattagac tatatttact atttctaact agtatctaaa cattaaatgt   10320
gacatggatt aaaatttagt tagagcaact ccagtagttt tctaaaagac ttcctaaatc   10380
aataatttag gtagttaaca tgaaaactat tctccaacag ttctctaaat aaactttcta   10440
aatttaacaa cttgtcatct aacctcattt tctctctaca tttggcaacc atttaataac   10500
tccctaatca aaaatgttga ctgcattata tagtttttgt gacttatttt ttatgtggat   10560
aaatacaaaa taaaattaca acctatattt agagaactat tggagaaccc acttattttt   10620
atttcaaaag tcatttagca acttcttaaa tctgtaattt agaaagctaa aatttacata   10680
actattagag ttgctcttag tgacgttagg cttttagagt tgagttggtc gtagcttggt   10740
ttagttacgt gtttgttctc ttgcgtttat ttaggacctc tctataatgt tttatcacct   10800
tcttaataca aattaaaata cgcagctctc ttgcgtattg gaggcgtgtg ttcctatatt   10860
ttttaggctc aattatgaat gaaattattc tcagcgagca tataaccgtt ttcgaggtaa   10920
aatgaactaa aagcatatgg gcctgcctgt tcgcataagt acaccctccg tctaaaaaag   10980
aataaaaata tcatttcttg atgagtcaaa aaagttcaaa tttaagaaaa tatatgttac   11040
gacaccaata tttataatgt gtaataagta ctgctgatta attttaaaat aaaattttca   11100
taataaacct atttgaagat acaagtattg gtactatttc taataaatct aatcaaactg   11160
gtgttatatc ttttgtaaca aatttgtgct ttgtgtttct ggttgacgtg aatcagctta   11220
atcttgctga aatctaacat tgtcttttgt tcgttggcat acaggatcaa aaaggaaaga   11280
agcatctatt gttggtaaga gcctatagtc aatacccatg ttcatttcgt ctaaaagagc   11340
agaagaaaag catatgatga attattgcca tgtcatgttt aaaatacaga attctcaaaa   11400
acaaaaacaa aaaaaacttg gaatccacta accagtaacc actgatagca ttgtagaaaa   11460
tttcatcctc cctttgggca atacactgat gagtttacat gctgactagt ggtgcatttg   11520
ttctttgcca attgaatttt tagaatgctt tgcagctgaa ttcacttgtg attttttttt   11580
gtgatgcagg tgctgttgcc gttgcattcc tgtgtctagt cattctcaca tgcttcttgg   11640
cttgtagaca tggttcgctg cccttcaaat cggagaacaa accagggaca aggattgagt   11700
ccttcctaca gaagaacgag agtatacatc cgaaaagata cacctacacg gacgtgaaaa   11760
gaatgacaaa atccttcgct gtgaagctag gccaaggtgg gtttggtgct gtatacaaag   11820
gcagcctcca cgatggccga caggtagcag tcaagatgct caaggacacc caaggtgacg   11880
gcgaggaatt catgaacgag gtggctagca tcagcaggac ttctcatgtc aacgtcgtga   11940
cacttctagg gttttgcttg caagggtcga aaagagcact gatctacgag tacatgccca   12000
atggttcgct cgaaaggtat gccttcaccg gtgacatgaa cagtgagaat ttgctaacct   12060
gggaaaggct atttgacata gcaattggca cggccagagg gctcgaatac ctacaccggg   12120
gatgcaacac tcggatcgtg cattttgaca tcaagccaca caacatcctg ttagaccagg   12180
atttctgtcc taagatctct gactttggac tggccaagct atgtctgaac aaagagagcg   12240
ctatctccat tgttggcgca agagggacga tagggtatat cgccccggag gtctactcaa   12300
agcaatttgg aacaatcagc agcaagtctg atgtctatag ctatgggatg atggtccttg   12360
agatggttgg agcaagggaa aggaatacaa gcgcaagcgc agatagtgac catagcagcc   12420
aatatttccc tcagtggatt tatgaacatt tggacgacta ttgtgttggt gcttccgaga   12480
ttaatggtga gaccacagag ctcgtgagga agatgatagt tgtaggtctg tggtgcatac   12540
aagtgattcc gactgatcga ccaacaatga cgagagtcgt cgagatgttg gaagggagca   12600
cgagtaatct agagttgcca cccagagttc tcttgagctg acaaagcgta gatatttttc   12660
ctatcaaatg ttgcttccag gtcacacaaa tgcaaaatat ttgtggagac gagtgcctat   12720
ttacctcata cactgtatct gtatgacaaa agtcccacga ctcactggac gcggaaatgt   12780
cgcttgacta cgccaatttt ctaaaaagat tggcagcaat taatggaggc ttatagcggt   12840
aactttggtt cgcattaatc ctaggactag ggttgaatat cgatctaact cgacgcggct   12900
tggtcaagct caagctagct ccactcatct cattaaagaa tccagctaga aaatcaaccc   12960
aagtcgttta cgaaacgagt ttgagctgac tcgtttagat cgtaaatcac aacaaaaaca   13020
atatgcacat atatacaata atataatcaa tactagttaa ttctagacta gtttaacact   13080
agaaaagagt aatgatactc ataatttcac atacaatgtc aatccaacac caatttaaca   13140
cacttcatca cttattagtt catccaacca agtgtaggct ttgatttact aacaaatggt   13200
tgctcgttcg agctagcgag cttgcttgtt aacaaactga gttgagatgc tagcttaact   13260
tgtgacaaaa ttaaaacgag ccgagtcgag tcaagttgag ctcacgatga gtcgagcaag   13320
ctcacaatcc acgagtattt ttttagtcct atctaagact aaagtttaat cctaaaacta   13380
aattttaatc tctatttgtt tggttctata aactaaacag gttcagaaaa cataaaatac   13440
attatagaaa acctgaaata cccttctata cttaaggcat cactaagaga gagcaataaa   13500
taaagggtag agagaggaat aaatctgctt tattcccttt tagctaccct ttgagagagt   13560
aaacactaaa atgaaaggat ccttgaggat tttgatgttt tggatgacaa ctaacacaat   13620
taaaggtcta attaggatgt taa                                           13643
<210>  2
<211>  2001
<212>  DNA
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  2
atggctgctc acctaccacg cctccccgtc ctcctcctcg tcctcctcgc tgctcatgtc      60
gtctccacct ccgcccatgc cgagcctcct cttccgagcc cttacagcac ctccgcccat     120
ggcgagcctc ctcttccgag cacttacaac gtctccatgt gctcggaatc gttctggtgc     180
ggcggcgtcg aaatccgcta cccgttctat cttgccaacg caaccgccga ctacagcggg     240
agctactact cctgcggcta caccgacttg agcgtttcct gcaaactcga ggtcgagggg     300
ccgacgacga catggacccc taccatccgt ctcggcggcg acaactacac cgtcaagaac     360
atcttgtacg actatcatac catctcactg gcggacagcg atgtgctcgg aggcggcgag     420
tgccccgtcg tccaccacaa cgtcagcttc gacgagacgt ggctgcacaa ccccagcgcc     480
ttcgacaacc tcaccttctt cttcggatgc cactgggggc cacgcgatac actgcctgaa     540
tttgccggca acaacatcag ctgcgccggg ttcagtactc cagctatcag cggtggaggc     600
tccttcgtgt tcaagcctga agatcttgac gaacatgcgg agcaggagtt ggcttcacac     660
tgcgacgagg ttttctccgt gccagtgaga agcgaggctc tgcagcaggc gatcgtcagc     720
aacctcagcc tcggggacgg gtacggcgag ctgcttaggc aggggatcga gttggaatgg     780
aaacggacat cggaggatca gtgtggccag tgcgaggaat cgggctccgg cggacggtgc     840
gcctacagcc agaagagaga attccttggc tgcttgtgca gcggagggaa ggcgggcaac     900
ccgttctgca aaccatcaag atcaaaaagg aaagaagcat ctattgttgg tgctgttgcc     960
gttgcattcc tgtgtctagt cattctcaca tgcttcttgg cttgtagaca tggttcgctg    1020
cccttcaaat cggagaacaa accagggaca aggattgagt ccttcctaca gaagaacgag    1080
agtatacatc cgaaaagata cacctacacg gacgtgaaaa gaatgacaaa atccttcgct    1140
gtgaagctag gccaaggtgg gtttggtgct gtatacaaag gcagcctcca cgatggccga    1200
caggtagcag tcaagatgct caaggacacc caaggtgacg gcgaggaatt catgaacgag    1260
gtggctagca tcagcaggac ttctcatgtc aacgtcgtga cacttctagg gttttgcttg    1320
caagggtcga aaagagcact gatctacgag tacatgccca atggttcgct cgaaaggtat    1380
gccttcaccg gtgacatgaa cagtgagaat ttgctaacct gggaaaggct atttgacata    1440
gcaattggca cggccagagg gctcgaatac ctacaccggg gatgcaacac tcggatcgtg    1500
cattttgaca tcaagccaca caacatcctg ttagaccagg atttctgtcc taagatctct    1560
gactttggac tggccaagct atgtctgaac aaagagagcg ctatctccat tgttggcgca    1620
agagggacga tagggtatat cgccccggag gtctactcaa agcaatttgg aacaatcagc    1680
agcaagtctg atgtctatag ctatgggatg atggtccttg agatggttgg agcaagggaa    1740
aggaatacaa gcgcaagcgc agatagtgac catagcagcc aatatttccc tcagtggatt    1800
tatgaacatt tggacgacta ttgtgttggt gcttccgaga ttaatggtga gaccacagag    1860
ctcgtgagga agatgatagt tgtaggtctg tggtgcatac aagtgattcc gactgatcga    1920
ccaacaatga cgagagtcgt cgagatgttg gaagggagca cgagtaatct agagttgcca    1980
cccagagttc tcttgagctg a                                              2001
<210>  3
<211>  666
<212>  PRT
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  3
Met Ala Ala His Leu Pro Arg Leu Pro Val Leu Leu Leu Val Leu Leu
1               5                   10                  15
Ala Ala His Val Val Ser Thr Ser Ala His Ala Glu Pro Pro Leu Pro
            20                  25                  30
Ser Pro Tyr Ser Thr Ser Ala His Gly Glu Pro Pro Leu Pro Ser Thr
        35                  40                  45
Tyr Asn Val Ser Met Cys Ser Glu Ser Phe Trp Cys Gly Gly Val Glu
    50                  55                  60
Ile Arg Tyr Pro Phe Tyr Leu Ala Asn Ala Thr Ala Asp Tyr Ser Gly
65                  70                  75                  80
Ser Tyr Tyr Ser Cys Gly Tyr Thr Asp Leu Ser Val Ser Cys Lys Leu
                85                  90                  95
Glu Val Glu Gly Pro Thr Thr Thr Trp Thr Pro Thr Ile Arg Leu Gly
            100                 105                 110
Gly Asp Asn Tyr Thr Val Lys Asn Ile Leu Tyr Asp Tyr His Thr Ile
        115                 120                 125
Ser Leu Ala Asp Ser Asp Val Leu Gly Gly Gly Glu Cys Pro Val Val
    130                 135                 140
His His Asn Val Ser Phe Asp Glu Thr Trp Leu His Asn Pro Ser Ala
145                 150                 155                 160
Phe Asp Asn Leu Thr Phe Phe Phe Gly Cys His Trp Gly Pro Arg Asp
                165                 170                 175
Thr Leu Pro Glu Phe Ala Gly Asn Asn Ile Ser Cys Ala Gly Phe Ser
            180                 185                 190
Thr Pro Ala Ile Ser Gly Gly Gly Ser Phe Val Phe Lys Pro Glu Asp
        195                 200                 205
Leu Asp Glu His Ala Glu Gln Glu Leu Ala Ser His Cys Asp Glu Val
    210                 215                 220
Phe Ser Val Pro Val Arg Ser Glu Ala Leu Gln Gln Ala Ile Val Ser
225                 230                 235                 240
Asn Leu Ser Leu Gly Asp Gly Tyr Gly Glu Leu Leu Arg Gln Gly Ile
                245                 250                 255
Glu Leu Glu Trp Lys Arg Thr Ser Glu Asp Gln Cys Gly Gln Cys Glu
            260                 265                 270
Glu Ser Gly Ser Gly Gly Arg Cys Ala Tyr Ser Gln Lys Arg Glu Phe
        275                 280                 285
Leu Gly Cys Leu Cys Ser Gly Gly Lys Ala Gly Asn Pro Phe Cys Lys
    290                 295                 300
Pro Ser Arg Ser Lys Arg Lys Glu Ala Ser Ile Val Gly Ala Val Ala
305                 310                 315                 320
Val Ala Phe Leu Cys Leu Val Ile Leu Thr Cys Phe Leu Ala Cys Arg
                325                 330                 335
His Gly Ser Leu Pro Phe Lys Ser Glu Asn Lys Pro Gly Thr Arg Ile
            340                 345                 350
Glu Ser Phe Leu Gln Lys Asn Glu Ser Ile His Pro Lys Arg Tyr Thr
        355                 360                 365
Tyr Thr Asp Val Lys Arg Met Thr Lys Ser Phe Ala Val Lys Leu Gly
    370                 375                 380
Gln Gly Gly Phe Gly Ala Val Tyr Lys Gly Ser Leu His Asp Gly Arg
385                 390                 395                 400
Gln Val Ala Val Lys Met Leu Lys Asp Thr Gln Gly Asp Gly Glu Glu
                405                 410                 415
Phe Met Asn Glu Val Ala Ser Ile Ser Arg Thr Ser His Val Asn Val
            420                 425                 430
Val Thr Leu Leu Gly Phe Cys Leu Gln Gly Ser Lys Arg Ala Leu Ile
        435                 440                 445
Tyr Glu Tyr Met Pro Asn Gly Ser Leu Glu Arg Tyr Ala Phe Thr Gly
    450                 455                 460
Asp Met Asn Ser Glu Asn Leu Leu Thr Trp Glu Arg Leu Phe Asp Ile
465                 470                 475                 480
Ala Ile Gly Thr Ala Arg Gly Leu Glu Tyr Leu His Arg Gly Cys Asn
                485                 490                 495
Thr Arg Ile Val His Phe Asp Ile Lys Pro His Asn Ile Leu Leu Asp
            500                 505                 510
Gln Asp Phe Cys Pro Lys Ile Ser Asp Phe Gly Leu Ala Lys Leu Cys
        515                 520                 525
Leu Asn Lys Glu Ser Ala Ile Ser Ile Val Gly Ala Arg Gly Thr Ile
    530                 535                 540
Gly Tyr Ile Ala Pro Glu Val Tyr Ser Lys Gln Phe Gly Thr Ile Ser
545                 550                 555                 560
Ser Lys Ser Asp Val Tyr Ser Tyr Gly Met Met Val Leu Glu Met Val
                565                 570                 575
Gly Ala Arg Glu Arg Asn Thr Ser Ala Ser Ala Asp Ser Asp His Ser
            580                 585                 590
Ser Gln Tyr Phe Pro Gln Trp Ile Tyr Glu His Leu Asp Asp Tyr Cys
        595                 600                 605
Val Gly Ala Ser Glu Ile Asn Gly Glu Thr Thr Glu Leu Val Arg Lys
    610                 615                 620
Met Ile Val Val Gly Leu Trp Cys Ile Gln Val Ile Pro Thr Asp Arg
625                 630                 635                 640
Pro Thr Met Thr Arg Val Val Glu Met Leu Glu Gly Ser Thr Ser Asn
                645                 650                 655
Leu Glu Leu Pro Pro Arg Val Leu Leu Ser
            660                 665
<210>  4
<211>  1887
<212>  DNA
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  4
atggctcctc tgctcctgct gctcctcttc cccgtccagc tccccctcgc agtagccgac      60
gccgtctccg gtccctgcac cagagccaca tgcgccggcc aggacgtcca ttacccgttc     120
tggctcaagt cctccgcgcc cgactgcgtc tatcccggtg tcggccttgt ggcccttgtc     180
tgcgagggca actcgacgct gatcctcccc ttcaagtccc acagatacgt agtgctcagc     240
atcgactaca agacgcgtac cgtgctggtc tccgacgccg acatcgtcca cgagtacgac     300
gcggccggct gcccgcgcgt ccgcgtgaac ctcaccatcg acaccgcctg gctgcggccc     360
acggcctccg actccaacat caccttcctc tacaactgca agaagaacat caccctgccc     420
tccgccgtgg aactgagcgg gtgccagcag cagcagcaac aagacggcag caggtcgtat     480
tcgtacgtgc tgccggacgg cggggtcacg ggcgctgagg cgcaccagta cgggtgcgag     540
gacttggtgg tggcgccggt gctggacgtc cacaggaggg cgatcttgag ggcgcctggc     600
ggcccgactc tggagaacgg gtcgctccgt cggttgctgc agggcgggtt cgagctgaac     660
tacgacactc actccgagca gtgcgaccga tgcgaggcct ccggcgggtg gtgtggctac     720
cagcgcgacg agacgcccgc cggctggatg acgttcgcct gcttctgcga cggcgggccg     780
acgaccacgg cccgatgcgg tgccggatca aaaaggaaag aagcatctat tgttggtgct     840
gttgccgttg cattcctgtg tctagtcatt ctcacatgct tcttggcttg tagacatggt     900
tcgctgccct tcaaatcgga gaacaaacca gggacaagga ttgagtcctt cctacagaag     960
aacgagagta tacatccgaa aagatacacc tacacggacg tgaaaagaat gacaaaatcc    1020
ttcgctgtga agctaggcca aggtgggttt ggtgctgtat acaaaggcag cctccacgat    1080
ggccgacagg tagcagtcaa gatgctcaag gacacccaag gtgacggcga ggaattcatg    1140
aacgaggtgg ctagcatcag caggacttct catgtcaacg tcgtgacact tctagggttt    1200
tgcttgcaag ggtcgaaaag agcactgatc tacgagtaca tgcccaatgg ttcgctcgaa    1260
aggtatgcct tcaccggtga catgaacagt gagaatttgc taacctggga aaggctattt    1320
gacatagcaa ttggcacggc cagagggctc gaatacctac accggggatg caacactcgg    1380
atcgtgcatt ttgacatcaa gccacacaac atcctgttag accaggattt ctgtcctaag    1440
atctctgact ttggactggc caagctatgt ctgaacaaag agagcgctat ctccattgtt    1500
ggcgcaagag ggacgatagg gtatatcgcc ccggaggtct actcaaagca atttggaaca    1560
atcagcagca agtctgatgt ctatagctat gggatgatgg tccttgagat ggttggagca    1620
agggaaagga atacaagcgc aagcgcagat agtgaccata gcagccaata tttccctcag    1680
tggatttatg aacatttgga cgactattgt gttggtgctt ccgagattaa tggtgagacc    1740
acagagctcg tgaggaagat gatagttgta ggtctgtggt gcatacaagt gattccgact    1800
gatcgaccaa caatgacgag agtcgtcgag atgttggaag ggagcacgag taatctagag    1860
ttgccaccca gagttctctt gagctga                                        1887
<210>  5
<211>  628
<212>  PRT
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  5
Met Ala Pro Leu Leu Leu Leu Leu Leu Phe Pro Val Gln Leu Pro Leu
1               5                   10                  15
Ala Val Ala Asp Ala Val Ser Gly Pro Cys Thr Arg Ala Thr Cys Ala
            20                  25                  30
Gly Gln Asp Val His Tyr Pro Phe Trp Leu Lys Ser Ser Ala Pro Asp
        35                  40                  45
Cys Val Tyr Pro Gly Val Gly Leu Val Ala Leu Val Cys Glu Gly Asn
    50                  55                  60
Ser Thr Leu Ile Leu Pro Phe Lys Ser His Arg Tyr Val Val Leu Ser
65                  70                  75                  80
Ile Asp Tyr Lys Thr Arg Thr Val Leu Val Ser Asp Ala Asp Ile Val
                85                  90                  95
His Glu Tyr Asp Ala Ala Gly Cys Pro Arg Val Arg Val Asn Leu Thr
            100                 105                 110
Ile Asp Thr Ala Trp Leu Arg Pro Thr Ala Ser Asp Ser Asn Ile Thr
        115                 120                 125
Phe Leu Tyr Asn Cys Lys Lys Asn Ile Thr Leu Pro Ser Ala Val Glu
    130                 135                 140
Leu Ser Gly Cys Gln Gln Gln Gln Gln Gln Asp Gly Ser Arg Ser Tyr
145                 150                 155                 160
Ser Tyr Val Leu Pro Asp Gly Gly Val Thr Gly Ala Glu Ala His Gln
                165                 170                 175
Tyr Gly Cys Glu Asp Leu Val Val Ala Pro Val Leu Asp Val His Arg
            180                 185                 190
Arg Ala Ile Leu Arg Ala Pro Gly Gly Pro Thr Leu Glu Asn Gly Ser
        195                 200                 205
Leu Arg Arg Leu Leu Gln Gly Gly Phe Glu Leu Asn Tyr Asp Thr His
    210                 215                 220
Ser Glu Gln Cys Asp Arg Cys Glu Ala Ser Gly Gly Trp Cys Gly Tyr
225                 230                 235                 240
Gln Arg Asp Glu Thr Pro Ala Gly Trp Met Thr Phe Ala Cys Phe Cys
                245                 250                 255
Asp Gly Gly Pro Thr Thr Thr Ala Arg Cys Gly Ala Gly Ser Lys Arg
            260                 265                 270
Lys Glu Ala Ser Ile Val Gly Ala Val Ala Val Ala Phe Leu Cys Leu
        275                 280                 285
Val Ile Leu Thr Cys Phe Leu Ala Cys Arg His Gly Ser Leu Pro Phe
    290                 295                 300
Lys Ser Glu Asn Lys Pro Gly Thr Arg Ile Glu Ser Phe Leu Gln Lys
305                 310                 315                 320
Asn Glu Ser Ile His Pro Lys Arg Tyr Thr Tyr Thr Asp Val Lys Arg
                325                 330                 335
Met Thr Lys Ser Phe Ala Val Lys Leu Gly Gln Gly Gly Phe Gly Ala
            340                 345                 350
Val Tyr Lys Gly Ser Leu His Asp Gly Arg Gln Val Ala Val Lys Met
        355                 360                 365
Leu Lys Asp Thr Gln Gly Asp Gly Glu Glu Phe Met Asn Glu Val Ala
    370                 375                 380
Ser Ile Ser Arg Thr Ser His Val Asn Val Val Thr Leu Leu Gly Phe
385                 390                 395                 400
Cys Leu Gln Gly Ser Lys Arg Ala Leu Ile Tyr Glu Tyr Met Pro Asn
                405                 410                 415
Gly Ser Leu Glu Arg Tyr Ala Phe Thr Gly Asp Met Asn Ser Glu Asn
            420                 425                 430
Leu Leu Thr Trp Glu Arg Leu Phe Asp Ile Ala Ile Gly Thr Ala Arg
        435                 440                 445
Gly Leu Glu Tyr Leu His Arg Gly Cys Asn Thr Arg Ile Val His Phe
    450                 455                 460
Asp Ile Lys Pro His Asn Ile Leu Leu Asp Gln Asp Phe Cys Pro Lys
465                 470                 475                 480
Ile Ser Asp Phe Gly Leu Ala Lys Leu Cys Leu Asn Lys Glu Ser Ala
                485                 490                 495
Ile Ser Ile Val Gly Ala Arg Gly Thr Ile Gly Tyr Ile Ala Pro Glu
            500                 505                 510
Val Tyr Ser Lys Gln Phe Gly Thr Ile Ser Ser Lys Ser Asp Val Tyr
        515                 520                 525
Ser Tyr Gly Met Met Val Leu Glu Met Val Gly Ala Arg Glu Arg Asn
    530                 535                 540
Thr Ser Ala Ser Ala Asp Ser Asp His Ser Ser Gln Tyr Phe Pro Gln
545                 550                 555                 560
Trp Ile Tyr Glu His Leu Asp Asp Tyr Cys Val Gly Ala Ser Glu Ile
                565                 570                 575
Asn Gly Glu Thr Thr Glu Leu Val Arg Lys Met Ile Val Val Gly Leu
            580                 585                 590
Trp Cys Ile Gln Val Ile Pro Thr Asp Arg Pro Thr Met Thr Arg Val
        595                 600                 605
Val Glu Met Leu Glu Gly Ser Thr Ser Asn Leu Glu Leu Pro Pro Arg
    610                 615                 620
Val Leu Leu Ser
625
<210>  6
<211>  5930
<212>  DNA
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  6
gatattgaat ccaattcaat tctataacct ccaaaatcga tatcctaaca tagcatgata      60
gtttttttga gaggtgtgat ttaacatatt agatgaattt tcttttttta atacgctatg     120
ttctagatgt ctgacgatga atggagccgc tctgcatata ccaaacgcta tctaagtttg     180
tgaacaaatg actaaattat ccacacgacc acaattgggc gctgataaga tccacacttg     240
ctggttttaa ttcatccggt ctttatcaac tgtcacatca gttatagatc attatcaact     300
tttatctaca attgatgttg taatacacgg tcacttaaga ccatgtttag gtacaatgtc     360
tctcaaaact atgattttac ttatgatgac aataccgtag ttttgaatag ctctaaaaat     420
atcatggttc taaaaatatt gtttggattc aacattataa atcgtggtat taagcaaaag     480
ctagtcatgt tataaaaact ttaggttgaa gtagagtttt caatactaaa aaaatatcat     540
ggtatttaga atatcatgat tttaaaaata tagttcttac gaatgcaacc aaacacctta     600
tgatataaaa taatatggta ttgcctacaa actacaaaaa taaatcactc ccaagcatta     660
cataaacatc atttttataa actttttagt aaaataaagc gcaatgtttt tattaaatag     720
aaatttatac aagtatatat aattaagcaa ataaaaacta cgttattcat aaaaagctaa     780
taaaaagtaa aaagtaaaaa ctatataatt cataaaaaaa tcgttatctt tctcttccat     840
cttattatct atttttagtt gttttgtcaa atttaaggct attttatggg ttctttttat     900
ctttgtacat gtcgtgagcc aataacttat tgaattggtc aatcaattta ggttgagttt     960
tacttttaac taacctagta tagtttgttc aacacctttt tttcataatc ggggactcat    1020
tccacttgtt gttgacccat tttttcttct actgagttct tgcccttttg caatcaatag    1080
gacgtggtga gcccatattt ttaggtgtta tggatttata atcaccgttc aaatttgaat    1140
gaatattttg tttttattat tgaagtcttc gtcaatcgtt atcatgcctc gcataccact    1200
tagaccgacg aagtccaaca tatttctccc ccgacgagga gagattcttc gtaaaattgc    1260
tactggtatt actggtattg aatagaagat aagggtgcgt ttggttgcat gcatctacgc    1320
gtgcttgcat cacggaatgc gggttggtgc tgtttggttg ctataagcta gactatacat    1380
atgcaagttt tgtgtttggt tggctgcatg cagatttcga tccaaactcg cacgatccac    1440
acagcaccct gggccaggct taccagatac gagtagattg gtcgcatctt tggagccagg    1500
ctttagcggt ccgcggtcct ggctgacacg gccagattgc cgagagaaac caaccaaaca    1560
gggtctaaat gtccaatcgt ttgactgcta ctggatgaaa aaagaatgtc acaactttaa    1620
aatgtgtatt tatttatact cctacacatg aaataactac tatactcaga tttcttttac    1680
attcagattt tttctcagcc actgaaacat accagccctt tactaccaaa aacaggaact    1740
ccacggtcca atgattatgt gagtcggagg agaggggagg aagaatcgcc tgtgaaggag    1800
ggagggaggg agggacgtcc gatccgaaga tggaaggagc tggggagggg agcgccttga    1860
cggggatgat gggtcctgcg ctcgacaagc tcgctagcct cgttgacaag tacaccgagc    1920
tcagaaacgt gaggaagaag atggagcagc tgaggaagga gctgattgcg atcaacctcg    1980
cgcttgagaa gcacgcggcc atggagaacc cagacgcgca ggcgaaggcg tgggcggcgg    2040
agatgcgcga gctggcctac gacatggagg acagcatcga tctcttcacc caccacgtcg    2100
accacgaacc ggccgacacc gccaccaccg gcgtcaagag gttcttcctc cggatcatcc    2160
ggaagcttaa gaaactccac taccgccaca ggtttgttca ggagatcaaa caactccacg    2220
accttgccaa cgaatcgtac cggcgtagga agaggtacag gattgaggag ggcggttcaa    2280
gcctctcgca cgcggagatc gatcctcggt tagaggcgct ctacgtggag gtggagaaac    2340
tcgtgggcat ccagggccca agccaggaga tcattggaca gctcgtcggc gagaacgcag    2400
cggagcgacg gagggttgtc gccgttgttg gatctggagg ttcaggcaag accacacttg    2460
ccaaacaggt gtacgagaaa atcaggtgcc aattctcttg tgcagccttt gtgtctgtgt    2520
cgcaaaagcc caacatgaat agcctcctgt gggagttgct atctcaaatc gggaaccatg    2580
gtggagattt aggaatgatg gcagtaggat attgcagtga caaacaactg atcgacagac    2640
taagatcaca tcttgaaaag cagaggttag tttacctttt cattccggtt agcttaattc    2700
ggtacaccaa ctagagattt gtgatttgct attaattaca ccaaatttct cctacacaac    2760
aataactggt ttagcatgat ggcgatccaa agtcaaaact atcttctact actagtgtat    2820
gccatactca tatagatatt ttcttttcat aaactctcgt agcattttta catgcattca    2880
tattcctatt gcctttatac agaactgatt tttcactgct tcacaatctg ctcttaggta    2940
tctcgttgtg atagatgatg tttggacaaa ctcagcgtgg gagaccatac aatgtgcgct    3000
ccctaaaaat gcccatgcaa gtaaaataat tctgacaaca cgaatcaaca gtgtaggcca    3060
gttctcctgc actccagatg agggttttat ctatcagatg aagcctcttt gcagaaacga    3120
ttctgaaaat ctgtttctga aaaggacact atgtgataaa gataagtttc ctgctcagct    3180
ggaggggatt aaaaacgaga taatcgagaa atgcgatggt ttgccactgg ctattgttac    3240
tctagctagc atgttagcta ctaaacagag aacaagggaa gaatgggaga gggcacttga    3300
ttcaatccat tctatgcaca agaaagatag tggcctggaa gtgatggaca agatactgtc    3360
tctgagttac agggatctac ctcacaacat gagaaattgc ttgctgtatc tcagtacatt    3420
tccagaggac cacacgattt acaaagatgc cctagtatgg agatggatgg ctgaagggtt    3480
tatcgctgaa acacaaggct ttactttgga gcaggttgcc gagggctact tctacgagtt    3540
tgtgaacagg agtttggttc agcccataac cttgcgttca agatatgaaa tgcgtggaga    3600
aggaggttgc cgagtccatg acattgtact gaacttcctc atctctcgtg cagctgaaga    3660
gaacttttta actacgctgt atggcgccca gggggttcca tcttcagacc gaaggattcg    3720
ccggctctct gtctgggaca gtccagaaca cgcactggca gtctctagag cgaccatgaa    3780
tctgtcccat ctccggtcag ttagaatatg caacgttgga gactggcccg tgcctgctgt    3840
tctagactta cctgtccttc gagtgttaga tctagaggga tgccgtgatc tgaggatcga    3900
cgaacctgac tgcattctaa gcttgtttca tctgagatac ctgggtttcc gcagcgcaag    3960
tggtgtcgtg ctaccggctc aaatcggaaa tttacaccat ctgcagacca tcgatttaag    4020
cgggactgga gtgacacagc tgccagaaag cattgtccag ctcaagcgac tgatgcatct    4080
tgttgggcaa cggctcatca tgccagacgg gtttggtagc atggaatccc ttgaggagtt    4140
aggtactatc gactgctgca agtgccccgt cagttttggg gaagacctag cacttctgag    4200
caggctgagg gtgctccgag tggctttcat cggggtcgaa acaagtgaca tggaaaccag    4260
aaggaaatct ttgatgtcat ccctctgcaa actcggagga gacaaccttc ggcgtgtcac    4320
tattatcgac ctcgctggcg gtggagattg ctttgtggag tcgtggcacc ctcctcctcg    4380
tctcctccag aagttcatcc atatcagtca gcaacagcac ttctccaggt ttccagaatg    4440
gatcagttcc tgcctatgtg atctcaccca cctggatata aaggccgaaa agatggaaag    4500
ggagcatcta agtgttcttg aacacctgcc cgccatccgt tgcctatacc ttttcgtgaa    4560
gcgagtctcc gaagacgggc tcgccatcag ccacggcgcg ttccgatgtc tacggcgtct    4620
cgagttctgc aacgtagatg gacctggttt gatgtttgca ggaggcgttc caatgttgga    4680
atggctgagg ctcgggttcg acgcggatag agcgcaatcg acatacggcg gtctggaggt    4740
tggcatccag cgcctctcgt ctctcaaaca tgtcgtgctc attgtatgga tggtttctga    4800
aggcggtgat gatccagcgg agcaagccgt ctggtctgcc atcaatggcc aagtagagat    4860
gctccccaac tctccgacgg ttgatatccg gtttcgtaga cggagtcagc tgcaggcaag    4920
ctcagaataa ggagcacgaa aaagacgatg atgttggatg tcgcctgcta gctgtagtat    4980
gttgctgctt ctgcttgttg ccaacacatt ttttttgggt tagggtgggg tacaaccata    5040
aaatgtgtgt ggatgtgctt gtaagcatta cttgtatgtt tttttttgta aagcacaata    5100
tagatagatg catatatgtg tgcgtgcaaa gctatgatta tcgacactca cacttgtaca    5160
ttagctagat gaaggtctcg acagagcaga gcatagtaca catctctggg agttggactg    5220
gacactataa cggggatgct gcagccgaaa ctcaaaagct acatgcatgt cacttggctc    5280
atcggcgcag gaagcaacgc aggtccatca cgcgcagcac cttgaacccg tccaggctac    5340
accccagcag cagcctcggc ttcttcggcg ccggcgggca gcgcgggggg cgttcggttc    5400
cagcgccact cgccgtcgcc gacgacagcg gcgagagctt ccgtggacct tcttcgtcct    5460
cgtcgccgcc gcgggagtaa gaccgcttca gcttcagcgg ccgcagctcc accagctgcg    5520
gaatgctaac atcttcttca ggcacctgcc gggtggttct ctttcccaga atcttccgct    5580
ggagacccat ggcgagctcg gttcggttta acctgcaatt aatgcgcaat agcggagtag    5640
gaagcgagat tgttagctca ggcgagcaga gatgaaccgg ctaggaaagt ttagttgctc    5700
gtgcatgcta ccagctagct tgttggaggc tcttgctttg gacaccaagc aacggatatg    5760
acagcagaat gtgcgtgctt ataagcaagc aagcagagca gcagttgcaa agaagggaaa    5820
aggtggagtg gaaaaaggag ttgccattga agtgcacgag tgagcgagca tcatgtcaag    5880
gaaccaggag ggaagttgca caacagatga aaagcggaga gctgtttccg               5930
<210>  7
<211>  2829
<212>  DNA
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  7
atggaaggag ctggggaggg gagcgccttg acggggatga tgggtcctgc gctcgacaag      60
ctcgctagcc tcgttgacaa gtacaccgag ctcagaaacg tgaggaagaa gatggagcag     120
ctgaggaagg agctgattgc gatcaacctc gcgcttgaga agcacgcggc catggagaac     180
ccagacgcgc aggcgaaggc gtgggcggcg gagatgcgcg agctggccta cgacatggag     240
gacagcatcg atctcttcac ccaccacgtc gaccacgaac cggccgacac cgccaccacc     300
ggcgtcaaga ggttcttcct ccggatcatc cggaagctta agaaactcca ctaccgccac     360
aggtttgttc aggagatcaa acaactccac gaccttgcca acgaatcgta ccggcgtagg     420
aagaggtaca ggattgagga gggcggttca agcctctcgc acgcggagat cgatcctcgg     480
ttagaggcgc tctacgtgga ggtggagaaa ctcgtgggca tccagggccc aagccaggag     540
atcattggac agctcgtcgg cgagaacgca gcggagcgac ggagggttgt cgccgttgtt     600
ggatctggag gttcaggcaa gaccacactt gccaaacagg tgtacgagaa aatcaggtgc     660
caattctctt gtgcagcctt tgtgtctgtg tcgcaaaagc ccaacatgaa tagcctcctg     720
tgggagttgc tatctcaaat cgggaaccat ggtggagatt taggaatgat ggcagtagga     780
tattgcagtg acaaacaact gatcgacaga ctaagatcac atcttgaaaa gcagaggtat     840
ctcgttgtga tagatgatgt ttggacaaac tcagcgtggg agaccataca atgtgcgctc     900
cctaaaaatg cccatgcaag taaaataatt ctgacaacac gaatcaacag tgtaggccag     960
ttctcctgca ctccagatga gggttttatc tatcagatga agcctctttg cagaaacgat    1020
tctgaaaatc tgtttctgaa aaggacacta tgtgataaag ataagtttcc tgctcagctg    1080
gaggggatta aaaacgagat aatcgagaaa tgcgatggtt tgccactggc tattgttact    1140
ctagctagca tgttagctac taaacagaga acaagggaag aatgggagag ggcacttgat    1200
tcaatccatt ctatgcacaa gaaagatagt ggcctggaag tgatggacaa gatactgtct    1260
ctgagttaca gggatctacc tcacaacatg agaaattgct tgctgtatct cagtacattt    1320
ccagaggacc acacgattta caaagatgcc ctagtatgga gatggatggc tgaagggttt    1380
atcgctgaaa cacaaggctt tactttggag caggttgccg agggctactt ctacgagttt    1440
gtgaacagga gtttggttca gcccataacc ttgcgttcaa gatatgaaat gcgtggagaa    1500
ggaggttgcc gagtccatga cattgtactg aacttcctca tctctcgtgc agctgaagag    1560
aactttttaa ctacgctgta tggcgcccag ggggttccat cttcagaccg aaggattcgc    1620
cggctctctg tctgggacag tccagaacac gcactggcag tctctagagc gaccatgaat    1680
ctgtcccatc tccggtcagt tagaatatgc aacgttggag actggcccgt gcctgctgtt    1740
ctagacttac ctgtccttcg agtgttagat ctagagggat gccgtgatct gaggatcgac    1800
gaacctgact gcattctaag cttgtttcat ctgagatacc tgggtttccg cagcgcaagt    1860
ggtgtcgtgc taccggctca aatcggaaat ttacaccatc tgcagaccat cgatttaagc    1920
gggactggag tgacacagct gccagaaagc attgtccagc tcaagcgact gatgcatctt    1980
gttgggcaac ggctcatcat gccagacggg tttggtagca tggaatccct tgaggagtta    2040
ggtactatcg actgctgcaa gtgccccgtc agttttgggg aagacctagc acttctgagc    2100
aggctgaggg tgctccgagt ggctttcatc ggggtcgaaa caagtgacat ggaaaccaga    2160
aggaaatctt tgatgtcatc cctctgcaaa ctcggaggag acaaccttcg gcgtgtcact    2220
attatcgacc tcgctggcgg tggagattgc tttgtggagt cgtggcaccc tcctcctcgt    2280
ctcctccaga agttcatcca tatcagtcag caacagcact tctccaggtt tccagaatgg    2340
atcagttcct gcctatgtga tctcacccac ctggatataa aggccgaaaa gatggaaagg    2400
gagcatctaa gtgttcttga acacctgccc gccatccgtt gcctatacct tttcgtgaag    2460
cgagtctccg aagacgggct cgccatcagc cacggcgcgt tccgatgtct acggcgtctc    2520
gagttctgca acgtagatgg acctggtttg atgtttgcag gaggcgttcc aatgttggaa    2580
tggctgaggc tcgggttcga cgcggataga gcgcaatcga catacggcgg tctggaggtt    2640
ggcatccagc gcctctcgtc tctcaaacat gtcgtgctca ttgtatggat ggtttctgaa    2700
ggcggtgatg atccagcgga gcaagccgtc tggtctgcca tcaatggcca agtagagatg    2760
ctccccaact ctccgacggt tgatatccgg tttcgtagac ggagtcagct gcaggcaagc    2820
tcagaataa                                                            2829
<210>  8
<211>  942
<212>  PRT
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  8
Met Glu Gly Ala Gly Glu Gly Ser Ala Leu Thr Gly Met Met Gly Pro
1               5                   10                  15
Ala Leu Asp Lys Leu Ala Ser Leu Val Asp Lys Tyr Thr Glu Leu Arg
            20                  25                  30
Asn Val Arg Lys Lys Met Glu Gln Leu Arg Lys Glu Leu Ile Ala Ile
        35                  40                  45
Asn Leu Ala Leu Glu Lys His Ala Ala Met Glu Asn Pro Asp Ala Gln
    50                  55                  60
Ala Lys Ala Trp Ala Ala Glu Met Arg Glu Leu Ala Tyr Asp Met Glu
65                  70                  75                  80
Asp Ser Ile Asp Leu Phe Thr His His Val Asp His Glu Pro Ala Asp
                85                  90                  95
Thr Ala Thr Thr Gly Val Lys Arg Phe Phe Leu Arg Ile Ile Arg Lys
            100                 105                 110
Leu Lys Lys Leu His Tyr Arg His Arg Phe Val Gln Glu Ile Lys Gln
        115                 120                 125
Leu His Asp Leu Ala Asn Glu Ser Tyr Arg Arg Arg Lys Arg Tyr Arg
    130                 135                 140
Ile Glu Glu Gly Gly Ser Ser Leu Ser His Ala Glu Ile Asp Pro Arg
145                 150                 155                 160
Leu Glu Ala Leu Tyr Val Glu Val Glu Lys Leu Val Gly Ile Gln Gly
                165                 170                 175
Pro Ser Gln Glu Ile Ile Gly Gln Leu Val Gly Glu Asn Ala Ala Glu
            180                 185                 190
Arg Arg Arg Val Val Ala Val Val Gly Ser Gly Gly Ser Gly Lys Thr
        195                 200                 205
Thr Leu Ala Lys Gln Val Tyr Glu Lys Ile Arg Cys Gln Phe Ser Cys
    210                 215                 220
Ala Ala Phe Val Ser Val Ser Gln Lys Pro Asn Met Asn Ser Leu Leu
225                 230                 235                 240
Trp Glu Leu Leu Ser Gln Ile Gly Asn His Gly Gly Asp Leu Gly Met
                245                 250                 255
Met Ala Val Gly Tyr Cys Ser Asp Lys Gln Leu Ile Asp Arg Leu Arg
            260                 265                 270
Ser His Leu Glu Lys Gln Arg Tyr Leu Val Val Ile Asp Asp Val Trp
        275                 280                 285
Thr Asn Ser Ala Trp Glu Thr Ile Gln Cys Ala Leu Pro Lys Asn Ala
    290                 295                 300
His Ala Ser Lys Ile Ile Leu Thr Thr Arg Ile Asn Ser Val Gly Gln
305                 310                 315                 320
Phe Ser Cys Thr Pro Asp Glu Gly Phe Ile Tyr Gln Met Lys Pro Leu
                325                 330                 335
Cys Arg Asn Asp Ser Glu Asn Leu Phe Leu Lys Arg Thr Leu Cys Asp
            340                 345                 350
Lys Asp Lys Phe Pro Ala Gln Leu Glu Gly Ile Lys Asn Glu Ile Ile
        355                 360                 365
Glu Lys Cys Asp Gly Leu Pro Leu Ala Ile Val Thr Leu Ala Ser Met
    370                 375                 380
Leu Ala Thr Lys Gln Arg Thr Arg Glu Glu Trp Glu Arg Ala Leu Asp
385                 390                 395                 400
Ser Ile His Ser Met His Lys Lys Asp Ser Gly Leu Glu Val Met Asp
                405                 410                 415
Lys Ile Leu Ser Leu Ser Tyr Arg Asp Leu Pro His Asn Met Arg Asn
            420                 425                 430
Cys Leu Leu Tyr Leu Ser Thr Phe Pro Glu Asp His Thr Ile Tyr Lys
        435                 440                 445
Asp Ala Leu Val Trp Arg Trp Met Ala Glu Gly Phe Ile Ala Glu Thr
    450                 455                 460
Gln Gly Phe Thr Leu Glu Gln Val Ala Glu Gly Tyr Phe Tyr Glu Phe
465                 470                 475                 480
Val Asn Arg Ser Leu Val Gln Pro Ile Thr Leu Arg Ser Arg Tyr Glu
                485                 490                 495
Met Arg Gly Glu Gly Gly Cys Arg Val His Asp Ile Val Leu Asn Phe
            500                 505                 510
Leu Ile Ser Arg Ala Ala Glu Glu Asn Phe Leu Thr Thr Leu Tyr Gly
        515                 520                 525
Ala Gln Gly Val Pro Ser Ser Asp Arg Arg Ile Arg Arg Leu Ser Val
    530                 535                 540
Trp Asp Ser Pro Glu His Ala Leu Ala Val Ser Arg Ala Thr Met Asn
545                 550                 555                 560
Leu Ser His Leu Arg Ser Val Arg Ile Cys Asn Val Gly Asp Trp Pro
                565                 570                 575
Val Pro Ala Val Leu Asp Leu Pro Val Leu Arg Val Leu Asp Leu Glu
            580                 585                 590
Gly Cys Arg Asp Leu Arg Ile Asp Glu Pro Asp Cys Ile Leu Ser Leu
        595                 600                 605
Phe His Leu Arg Tyr Leu Gly Phe Arg Ser Ala Ser Gly Val Val Leu
    610                 615                 620
Pro Ala Gln Ile Gly Asn Leu His His Leu Gln Thr Ile Asp Leu Ser
625                 630                 635                 640
Gly Thr Gly Val Thr Gln Leu Pro Glu Ser Ile Val Gln Leu Lys Arg
                645                 650                 655
Leu Met His Leu Val Gly Gln Arg Leu Ile Met Pro Asp Gly Phe Gly
            660                 665                 670
Ser Met Glu Ser Leu Glu Glu Leu Gly Thr Ile Asp Cys Cys Lys Cys
        675                 680                 685
Pro Val Ser Phe Gly Glu Asp Leu Ala Leu Leu Ser Arg Leu Arg Val
    690                 695                 700
Leu Arg Val Ala Phe Ile Gly Val Glu Thr Ser Asp Met Glu Thr Arg
705                 710                 715                 720
Arg Lys Ser Leu Met Ser Ser Leu Cys Lys Leu Gly Gly Asp Asn Leu
                725                 730                 735
Arg Arg Val Thr Ile Ile Asp Leu Ala Gly Gly Gly Asp Cys Phe Val
            740                 745                 750
Glu Ser Trp His Pro Pro Pro Arg Leu Leu Gln Lys Phe Ile His Ile
        755                 760                 765
Ser Gln Gln Gln His Phe Ser Arg Phe Pro Glu Trp Ile Ser Ser Cys
    770                 775                 780
Leu Cys Asp Leu Thr His Leu Asp Ile Lys Ala Glu Lys Met Glu Arg
785                 790                 795                 800
Glu His Leu Ser Val Leu Glu His Leu Pro Ala Ile Arg Cys Leu Tyr
                805                 810                 815
Leu Phe Val Lys Arg Val Ser Glu Asp Gly Leu Ala Ile Ser His Gly
            820                 825                 830
Ala Phe Arg Cys Leu Arg Arg Leu Glu Phe Cys Asn Val Asp Gly Pro
        835                 840                 845
Gly Leu Met Phe Ala Gly Gly Val Pro Met Leu Glu Trp Leu Arg Leu
    850                 855                 860
Gly Phe Asp Ala Asp Arg Ala Gln Ser Thr Tyr Gly Gly Leu Glu Val
865                 870                 875                 880
Gly Ile Gln Arg Leu Ser Ser Leu Lys His Val Val Leu Ile Val Trp
                885                 890                 895
Met Val Ser Glu Gly Gly Asp Asp Pro Ala Glu Gln Ala Val Trp Ser
            900                 905                 910
Ala Ile Asn Gly Gln Val Glu Met Leu Pro Asn Ser Pro Thr Val Asp
        915                 920                 925
Ile Arg Phe Arg Arg Arg Ser Gln Leu Gln Ala Ser Ser Glu
    930                 935                 940
<210>  9
<211>  11437
<212>  DNA
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  9
ccgagtacat tgccgcagga cattgttgcg cgcaattgct ttggatgagg caaaccctgc      60
gggactacgg ttacaaatta accaaagtcc ctttgctatg tgataatgag agtgcaatta     120
agatggccga caatcccgtc gagcatagcc gcactaagca catagccatt cggtatcatt     180
ttcttaggga tcaccaacaa aagggggata tcgagatttc ttacattaat actaaagatc     240
aattagccga tatctttacc aagcctcttg atgaacaaac ttttaccaaa cttaggcatg     300
agctcaatat tcttgattct agaaatttct tttgctaagc ttgcacacat agctcatttg     360
aatacctttg atcatatctc ttttatatgc tatgactaat gtgttttcaa gtctatttca     420
aaccaagtca taggtatatt gaaagggaat tggagtcttc ggcgaagaca aaggcttcca     480
ctccgtaact catacttcgc caccactccg agcaactctc tcttctttgg gggagaaatg     540
agcatcaagg aaaaggactt catccttggg ggagagaata aaagctcaaa cgcaaaagga     600
cttcgtcttt ggtataatct taactcactt atttatgacc aaaggggaag aacttacttc     660
tagggctcta atgattccgt ttttttggcg attcatgcca aaaaggggga gaaatgagcc     720
caaagcaaaa ggaccgcacc accaccacca aattcaaaaa cttagtgctt tccaaaagtc     780
tttatcattt ggtatcctat tgtgttcaaa agggggagaa agtagtattt caaaaatggt     840
atatcaaaac cctcttgaac actaagaggt gaatctcttt tagggggagt tttgtttagt     900
caaaggaaaa gcatttgaaa cagggggagg aaatttcaaa tcttaaaaaa tgcttttgca     960
aactcttatt tatttacctt tgactatctg caaaagatct atgaaaagga tttacaaaag    1020
gttttgcaaa aacaaaacaa gtggtgcaaa cgtggtccaa aatgttatat aagaaagaaa    1080
caattcatgc atattttgca agtatttata ttggcccaat ttcaagcaac ctttgcactt    1140
atattatgca aactagttca attatgcact tccatatttg ctttggtttg tgttggcatc    1200
aatcaccaaa aagggggaga ttgaaaggga attaggctta cacctagttc ctaaatagtt    1260
ttggtggttg aatcgcccaa cacaaataaa ttgaactaac tagtttgctc tagattacat    1320
gttctacagg tgccaaaggt tcatctacaa ctatactaat tcgactgtcc ggaataccgt    1380
agattattcc ggacaggaga agctttttgg aaaaacaggc caagcgcgga ccgtccgggc    1440
tcttgcggcg gaccgtccgc aacatcggga tactcctcgg acagaaccaa tgcaaaaaca    1500
caagtttcca ctacagactg tccggaggaa aagcaaagac cgtccgagcc cttgcgcgga    1560
ccgtccggcc tctggcgcgg accgtccggt aggtgagaaa ccgaaaaacc cgaaggtaac    1620
gggttcggag aaatgaatta tagcggcctc gcggaccgtc cggaccaggc gggcggaccg    1680
tccgcgactg gctctgtctg acatctgacg acgcattaaa tgcaatatag ccgttgatat    1740
agccgttact gctgaccgtt gcattttcag ccgttgatct acaggggcgg accgtccgca    1800
ccaggagggc ggaccgtccg cgctcagcag aatggcccaa cggctaggaa gtggttggtg    1860
gctataaata caaccccaac cacctccatt caatccatcc aagcattcca accttcaaca    1920
ttcaatacaa gagctagcaa tccattccaa gacacattca aagcctccat ctctccaagt    1980
ttcacaattg agaaaagaga tcattagtga ttagtagctt gagagagaaa gtgatccgtg    2040
tgttatttgt cgctcttgtt gcttggcttt ttaatcgtgc tttcttgatt ctttcattgc    2100
gatcaaactc acttgtaatt gaggcaagag acaccaatct tgtggtgatc cttgtaggaa    2160
ctttgtgttc caagtgattg agaaaagaaa gctcactcga tccgtggatc gtttgagaga    2220
gggaagggtt gaaagagacc cggcctttgt ggcctcctca acggggagta ggtttgcgag    2280
aaccgaacct cggtaaaaca aatccgcgtg tctcacttac ttattcgctt gcgatttgtt    2340
ttgcaccctc tctcgcggac tcatttatta ttactaacgc taacctcggc ttgtagttgt    2400
gattattttt gtaaatttca gtttcgccct attcaccccc ccctctaggc gactttcact    2460
caccagtatt gatttaagaa ctaagcgcct tgttattact ggtctatttg gataagtagg    2520
aatgacttag tttttaataa tatttcaagt tttacttatc tgcaggtttt ttttccagag    2580
gtacacactg gcttagattc tgggctcaac tacaaaagga cgaagctgat ggagttttaa    2640
taaaggatgt ttgccgtcgc cgggaatcgg tggtcatgca attttgtgtt aattttggtt    2700
ggaggttttc taataggatt cccttttaat catcttggtg gttaaaaaaa aatcaaaaac    2760
ctttagtgtg ctatgtccct tcagagagca gtgtaatata acattttgtg ttgtctctaa    2820
tctattttga ggagaaagcc ggaacttttt ctcgttatct gaaaaaatct ttggctagcc    2880
ttcgcgactc gccatctccc agccgtggcg ctctctcgcc cacgcacacc atgcagctgc    2940
ttcgtcattt ccagccatat gcgtgaagac atttgaattc gtccaccact gcatcactag    3000
tctcactctc acctataata tatctgcacc caacgagcag gtaccaagca attagcaaga    3060
gaaacacaag gtcgaggtgg tgaggcatgg agctcgcctt gggggccatg accagcttgg    3120
cccctaagct tggcgacctg ctcatggaga agtatgtcgt gcagaagggc ctcaagcccg    3180
acatcgagtc tctctccagg gagcttgtga tgatgaacgc cgctctcgtc gacgcgtccc    3240
gggttccacc tgaccagctc accgaggtgg aaaagctctg ggcacgcaag gtccgggact    3300
tgtcgtatga catggaggac gccgtcgacg atttcatcct gcgtgtggct ggtggtgacg    3360
actctgccgc cgactccaaa ttcttcaaga agacccttgc catggtcaag gacgtgatgt    3420
cgatgaagaa gttcaaggat cggtgccaga tctccgacaa ggtcaaagac atcaagaaac    3480
tctccaacga gttagctgaa cttcgtgcca agtacacggt aaggggtgtg ggtgctgatc    3540
tcgccgcgag caccggcatc gacacccgtg tcatcaatct gtacaagaaa gagacagatc    3600
tcgttggtat cgaggagtca agggacaaag tcattaggat gctgtctata ggggccaaag    3660
atgaagatgc acatgagttc catcaggatc taaagatagt gtctatagtc ggggttggag    3720
gactaggtaa gactactcta gccaaaacag tgcatgacat gcttaagaag caattcgact    3780
gttgtgcttt tatttctatt ggtagaactc ctaatctgaa taggacattc gagaagatgc    3840
tattggaact cgatcgtgag tataaacaag ttgacatggc cagatgggat ctagaacaat    3900
ttataaacga actggatgaa ttcttgaagg acaagaggta cgcccatgtc attcattctc    3960
cctctagttt agttgaattt tttcattcac tagtagagcg tgggcagttt tgccatgttt    4020
atatgcatac cgatttgcca agttattcat agctgtacac tcttgtgtca attttatata    4080
tatatatata tataggtact tgatcgttgt tgatgacata tgggatgttg actcatggga    4140
agcgatcaaa tatgccttaa aggacaatag ttgtggaagt agaataatca tgactactcg    4200
caattctggg tttgtcaaga aagtagaaga ggtttataga ttaaaacctc tttctaatga    4260
aaactccaag aaactgttct acaaaagaat agagagtcag gaaggagaaa gccttgatgg    4320
tgaactctct agtaaaatca tacataaatg tggcggcata ccattggcta tcattgcaat    4380
agctagtttg ttggttgaaa gatcaagtga ggagtggtca gaagtgtacg acaagattgg    4440
tcttgggaat gaggacaata caacaaagat aatgttatac agctactatg atctgcctcc    4500
ttatctcaag ccatgtctgc tgcaactaag catatatcca gaagactgtt tcattgatac    4560
aaaagctacc atatggaagt ggataggtga aggtctagtt catattgaga aagaggaggg    4620
tagcctattt aaggttggag aaagatactt caaggagctt gtgaatagaa gcatgatcca    4680
gccgatagag aacataaatg attggtttgt agaagagttc cgtattcacg acattgtgtt    4740
tgatctcatc tgtaagttgt ccaaggatga agacttcatt agccttagcg ggcaacattc    4800
atctcaggat agtttaagaa gagagaagaa aacaggtgtg cctcgctcag actgcaagct    4860
acgtcgtctg gtcgtccgaa atcaacgtgt gcagcgcttc cctgaagaaa ccatggacat    4920
gccagaggtg ttgagatcac ttagcattat agattgtaat attgcggttg tggccccaat    4980
tgatagcttc agggtttgcc gtgtgctgtc tatagtaaac aactacgtac ccatcagcct    5040
aaagcatctg gggaagctgt tgcatctcaa gttcctagag atagtataca cgcctattga    5100
tgagctccct aaggaaattg ggcatctgag gtctcttcag acactgatat tagtccgtac    5160
tggactagac gagctgccac cggctctttg ctcgcttaca cggctcatgt gtctgatagc    5220
ctatggcttc gaaaggttgc cagctgatag gatggggaac ctaacgtccc tggaggagct    5280
acaactaaat agggtagttg gccggagtgc cacccaagac ctagtggcag agtttggcaa    5340
gctgacgagg ttgagggtgg tcagcatcac cttttcagag cagctagagg agagcttgca    5400
agaagcattg gtgcaatctc tgtccaatct gcggcgactc caggaactag agcttttgtg    5460
taaaatgcca gagcggggaa gcgatatgtg gggagactgg gagccaccaa ggcagctccg    5520
gcgcctgatt attgaaggca tcgacttctc acggcagcct cgatggatca accgctcctg    5580
cctgccacgc ctctgctcct tatatctgag ggtgcacgct cttgaagcac aggacctaga    5640
taatctagcg aggttgccag agctccagta cctccagcta tttggtctca gctttcctcc    5700
aaggtatact gttggcccag acgacttcag gaatctgagg ttctgcgaag tgggcacaac    5760
gttcgagttt cgtaagggcg ccatgccaag gcttgaagtg ctgcgatttg gagtttatgc    5820
agggtactgg agttgggaag agaatggtgt gccgttcgag cagttcccaa cgaaggatgt    5880
gatcgaagat cttcacttgg acctggataa cgtcctttta cttcagcaag taatagtcaa    5940
agtcaactgc ttaggtgcta ctgccgcaca agtggaggag gtggaggccg tggtcatgcg    6000
tgccgtggaa aatcatgcca accgtccaac cataaaaatg gatcgagtat atgaagaaaa    6060
tatcttatct gatgaaaagt gggaggctct ggtgagtctg ctaaagaaaa tatgttttct    6120
tatatatatt tatatatata tatatatata tatttatgtt tgtgcacttc aattctcagc    6180
ttcggcgaca cattgaagag gattgctgcg tgcgcacgat gaaggataaa tctaatgctt    6240
tcttcatcag ccagctgtgg ttatatcgac atcttcagga agccattatt ttcatcgact    6300
gttcgggtgc cagcatgtgt gaggtgcaga aagtggaagc agcttataga catgcagccg    6360
aggttcatcc taaccatcca agtattgaac ttatcagaac aaacaccgac ggaatggcct    6420
cctcctcatc tgaccatccc aacacagagg ttcgtcctag ctgcgtggaa aatttttcag    6480
taattaatgg aaaccttagc tttgacggta taacttacca ccaacgctta tttttcgttc    6540
ccaaactcca gcccaggaat tgatgactcg gtttgtcaga tccttcgacc cagcaccagc    6600
agcaggtacg tgtgcatgcc catgatctac actcttaaat taattttatt actctatcca    6660
gttatcacgt tccaatgcca tgtgtaagtt ttagtacctg tttatttttc gcttgcaatt    6720
gttgcatctt gaactcttgc ttctaacctc cattatttgt ctgtccactt caccaagaga    6780
cagaaaatca tagctctaac ttccatgaag cctaaacctc caaactcctt gggtctgttt    6840
agggcctccc accttgtcat gtgatacttc cttttcttgc tagttccata aaaagagatc    6900
tgattgagtc taacatctag aaattctcct cgtacaagtg atagaccccc actgtgttca    6960
taggaatgct tgacaggcag gattccatta cagtagatat ctttccagaa gatagatgtc    7020
cagactgcca agtacccaac ctcttctgag tcttgtcact gaatttcatc tgtgctttag    7080
tcactcatag gaatcttcaa atatttgata ggaaaaattt ccaccttgca acgaagaagt    7140
ttagctatcc tctctttctc ctgatcctca gccccaacaa cagaaactta acacttctca    7200
aagttgattt tcatccttga cattgcatca taacaagata aaataactct aatattgttc    7260
tggttacctt ttgagttctg taaaaaatgg ttgtatcatc atcatattgc aagtaactct    7320
gaaattaagc cctttagcgg acaacctctt ctagctctaa taaggcagat aaagcatctg    7380
tcactaagtt gaacaaaaaa gggaaaagag gatcccctgt ctgagacctt taaaacttct    7440
aaaatagtca cctctctcac cactcaaatc aataggtatc atgtcccact gaactgcctg    7500
tctggtccaa cctgtccata tattagaaaa aaaacatttt ctttgaagta cctcctccaa    7560
aaagttccaa ttcaccttat catatgccct ctaaaaaatc aagccttaaa ataattccaa    7620
aaacctttat agctcttagc tcatggagta catcttgcaa aagttgtctg gtatttgctt    7680
atcactttat ctgctgcaac tgttaacctc agattaagca tttcagtaag gatcttatag    7740
atcacattca gtaaacaaat aggcctatat tgtctagtag aggtggctgg cttgctctta    7800
ggaaatagga taataactcc atagttctag cttgcctgca ttgcatagca tttccttaac    7860
gtcaccacct atcagatgcc acaaaggctt aaattttttt actgtaaatc catcaggacc    7920
aggagcggtg ttattcttca tgtagtttct ttcttttctt ttcttttgaa acatagtttc    7980
caaatatttt ttaagctact ttggttctca tttcagttag tagacgtcaa ggtttcatac    8040
aaaagctgat ttatagatta cttgcgttga atagctaacc aactaaaatg caccacgtat    8100
gctaatcaaa ccgatttcct tatggtaccc tgataaaaag cgtgctgttt ttttagaaaa    8160
taaatgttaa catgttaagt ggtttgatag gtcctaagat gattttaagt gaaaggaact    8220
aatcaaagca gcaaaagaaa gaaatatatc atatacctgg atggtagctc atgttttaat    8280
cttgtaaaag tgcttttact aaactgaatc gttttggatt agacatgttt attggctgtt    8340
gagtttgtga tccaaattct gaagaaggcg gccaagttgg cgagcgcgga tcgttttagg    8400
gtttcacctc tataaatatc tttgtaagcc gcaggagata tctatctcaa ttgtaaatct    8460
cttgcgatct gtaaccaccc gaaaatagtg agaagttgcc tgccggcgcc cgtggttttt    8520
tccccttcac tttggagggg ttttccacgt taaatccgtg tcttctctgt gattgatcct    8580
atttgtgtcg cattcattta taacattggc caaaaaaaac cttgtatcat tactgtttgc    8640
ttgaagaaat tctgtgattg catttttcct ttacatgttt gctccatcct ttgcatttca    8700
acttatttac tatatacaca aaccaatatt tcaggtaaat gtgagttgct tcagtaccaa    8760
agagagaggt cctgttcagc aagatgatta gaagcattgg catggcttgt taattatatt    8820
tgtggttctt agtctaaaat cacattgaag agggagatgg acccaagtga tgcagttcat    8880
gtgttacctg tatctgtctc tattttataa gctgtcatat attttctcga aactatcttg    8940
tgtggatttt gtgtgaagtg tacttttagt ggcacaggcc atgtatttcc ttggaaacga    9000
ccatgagagt ttgtatatgg acttattttc cccccatttt ctttcctgag atgggctgtg    9060
tatttgcttg aaagataggg ttggtattat ctttgtattt gaactctaaa tgcttaaatg    9120
aagtgatcat cctggatgga gatatgtatg gtgtgaaccc tattctcgat gccaacgtgt    9180
gtgggatttt ggtgcgagct cctgtagctc gtctttgtta tatcgatggt gttcacaata    9240
tatgcaggtt catctaacac gaatgatgaa actatatgca ggcggtgccg gtcagcagag    9300
ggttgcctga cgcggagaag agatgcaggc tttgctggct ctggaggaat tcgaacgtgt    9360
ggcacacaca gatgtgaagc aaagatacaa tacaacaagg tcttccgtag ccagtagtag    9420
ccagtaggga agaagaagaa aaacgacccg agtttctcaa ggttgtcaag ctcaaaagtt    9480
agaaaaaggg tcaacggagc tgattccctt cacaaaagtt acgtcagcaa taaattaccc    9540
cgttcattgc gaatggggtt agttaaaaaa agggtcaaca accaaaatta gcgtgcaaga    9600
ggagaaaact atgtagtata aaatgcgcat gagatcagaa gccacattaa tgcttctgtt    9660
gttacctaac aatcagggag gaaatttctg gaagttcaac tggtaggagg tgtgcatccg    9720
aaagataaag agcacagaac aaacgatcat aatttagacg aataagataa caacaaagct    9780
tttgcaacat agtatttgga caaggggttg aggcaaggag acccgctctc tcccattctt    9840
tttaatgtga tagtggatat gcttgctatt ctgattaata gagctaaagc agatggtcaa    9900
tttgacggtc tagtgccaca tttagtagat ggagggctct ctattttgca atatgcagat    9960
gacactttgt tgttttttta taatgattta gagaaagcag caaatctgaa atcgcttctt   10020
gtagcctttg agcaagtatc cagtttgaaa attaattacc ataaaagtga gctattctgg   10080
caaggtgaaa atcataagaa gaaatacatg cttgctatat ggaatccttt gccaacctaa   10140
ggatcaaggg ggttaggtat taacaactta gatttacaaa ataaatgctt gctaagtaat   10200
tggtttttca agctagttaa tgaggatgga ctttggtaaa gtatgttgtg gaataaatac   10260
cttaagagac acaccttgtc aaaagtatcc ttcaggcggt gattctcatt tctgatcggg   10320
aattatgaaa gtgaaacatt tgttttttta acctaggatc tttcatttta ggtaatagag   10380
aacaaataag attttgggag gacgtgtggt tgggagacca accactaatg aggcaatatc   10440
cttcactata tcatattgtg agacagaaaa gtaatattgt tgcgtctatc ttgagtacga   10500
cccctcaatg tttcgtttcg taggacgttg tgggtcagaa cataactttg tggtatgatc   10560
ttgttaatcg ggtggtgctc acctcgatga gctataatag agatgtcttt aagtggaggg   10620
taacatcttc acggtgcaat caatgtatca tattctaatt aataacggtc aaatgtttaa   10680
tcacaagctg atttggaaac taaatttacc ctaaagatta aaatcttttt gtggcatttg   10740
gttaaatgga tgttctaact aaggataacc taaccaaaac aaattcgaat gggaacaaaa   10800
aatgtgggtt ttgtaataca catgagtcta tttaacattt gtgtttagaa tgtaattttg   10860
ctcgccatat gtggaggttg tttcacttct gttttggtat gagtgtaccg aggtctgttc   10920
gtcatatttt tagtacgtgg ctcaccgcta ttgatttaag aactaagcgt cttgttatta   10980
catgtgtctc agtgttttgc tggactattt ggataagtag gaatgactta gtttttaata   11040
atgtttcaag ttttacttat ctgcagggtt tagattctgg gctcagccct cagctacaaa   11100
aagttgaagc tgatggagtt ttaataaaaa atgtttgtcg tcgcctggaa taggtggtca   11160
tgtaattttg tgttaatttt ggttagaggt tttctaatag tattactttg taataatctc   11220
ggtggtttta aaaaaaatca aaatatttta gtgtgatggt gtgtgactgt cccctcatag   11280
atcagtgtaa tataacaatt tgctaacctt ttttaggaga aagcagtaac tttttctcca   11340
ttatctaaaa aaattctttg gctagccttc gcgagtcgcc gtctcccagc cgcacgctct   11400
ctcgcccacg cacacacgat tccttctcgc gctctcg                            11437
<210>  10
<211>  3129
<212>  DNA
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  10
atggagctcg ccttgggggc catgaccagc ttggccccta agcttggcga cctgctcatg      60
gagaagtatg tcgtgcagaa gggcctcaag cccgacatcg agtctctctc cagggagctt     120
gtgatgatga acgccgctct cgtcgacgcg tcccgggttc cacctgacca gctcaccgag     180
gtggaaaagc tctgggcacg caaggtccgg gacttgtcgt atgacatgga ggacgccgtc     240
gacgatttca tcctgcgtgt ggctggtggt gacgactctg ccgccgactc caaattcttc     300
aagaagaccc ttgccatggt caaggacgtg atgtcgatga agaagttcaa ggatcggtgc     360
cagatctccg acaaggtcaa agacatcaag aaactctcca acgagttagc tgaacttcgt     420
gccaagtaca cggtaagggg tgtgggtgct gatctcgccg cgagcaccgg catcgacacc     480
cgtgtcatca atctgtacaa gaaagagaca gatctcgttg gtatcgagga gtcaagggac     540
aaagtcatta ggatgctgtc tataggggcc aaagatgaag atgcacatga gttccatcag     600
gatctaaaga tagtgtctat agtcggggtt ggaggactag gtaagactac tctagccaaa     660
acagtgcatg acatgcttaa gaagcaattc gactgttgtg cttttatttc tattggtaga     720
actcctaatc tgaataggac attcgagaag atgctattgg aactcgatcg tgagtataaa     780
caagttgaca tggccagatg ggatctagaa caatttataa acgaactgga tgaattcttg     840
aaggacaaga ggtacttgat cgttgttgat gacatatggg atgttgactc atgggaagcg     900
atcaaatatg ccttaaagga caatagttgt ggaagtagaa taatcatgac tactcgcaat     960
tctgggtttg tcaagaaagt agaagaggtt tatagattaa aacctctttc taatgaaaac    1020
tccaagaaac tgttctacaa aagaatagag agtcaggaag gagaaagcct tgatggtgaa    1080
ctctctagta aaatcataca taaatgtggc ggcataccat tggctatcat tgcaatagct    1140
agtttgttgg ttgaaagatc aagtgaggag tggtcagaag tgtacgacaa gattggtctt    1200
gggaatgagg acaatacaac aaagataatg ttatacagct actatgatct gcctccttat    1260
ctcaagccat gtctgctgca actaagcata tatccagaag actgtttcat tgatacaaaa    1320
gctaccatat ggaagtggat aggtgaaggt ctagttcata ttgagaaaga ggagggtagc    1380
ctatttaagg ttggagaaag atacttcaag gagcttgtga atagaagcat gatccagccg    1440
atagagaaca taaatgattg gtttgtagaa gagttccgta ttcacgacat tgtgtttgat    1500
ctcatctgta agttgtccaa ggatgaagac ttcattagcc ttagcgggca acattcatct    1560
caggatagtt taagaagaga gaagaaaaca ggtgtgcctc gctcagactg caagctacgt    1620
cgtctggtcg tccgaaatca acgtgtgcag cgcttccctg aagaaaccat ggacatgcca    1680
gaggtgttga gatcacttag cattatagat tgtaatattg cggttgtggc cccaattgat    1740
agcttcaggg tttgccgtgt gctgtctata gtaaacaact acgtacccat cagcctaaag    1800
catctgggga agctgttgca tctcaagttc ctagagatag tatacacgcc tattgatgag    1860
ctccctaagg aaattgggca tctgaggtct cttcagacac tgatattagt ccgtactgga    1920
ctagacgagc tgccaccggc tctttgctcg cttacacggc tcatgtgtct gatagcctat    1980
ggcttcgaaa ggttgccagc tgataggatg gggaacctaa cgtccctgga ggagctacaa    2040
ctaaataggg tagttggccg gagtgccacc caagacctag tggcagagtt tggcaagctg    2100
acgaggttga gggtggtcag catcaccttt tcagagcagc tagaggagag cttgcaagaa    2160
gcattggtgc aatctctgtc caatctgcgg cgactccagg aactagagct tttgtgtaaa    2220
atgccagagc ggggaagcga tatgtgggga gactgggagc caccaaggca gctccggcgc    2280
ctgattattg aaggcatcga cttctcacgg cagcctcgat ggatcaaccg ctcctgcctg    2340
ccacgcctct gctccttata tctgagggtg cacgctcttg aagcacagga cctagataat    2400
ctagcgaggt tgccagagct ccagtacctc cagctatttg gtctcagctt tcctccaagg    2460
tatactgttg gcccagacga cttcaggaat ctgaggttct gcgaagtggg cacaacgttc    2520
gagtttcgta agggcgccat gccaaggctt gaagtgctgc gatttggagt ttatgcaggg    2580
tactggagtt gggaagagaa tggtgtgccg ttcgagcagt tcccaacgaa ggatgtgatc    2640
gaagatcttc acttggacct ggataacgtc cttttacttc agcaagtaat agtcaaagtc    2700
aactgcttag gtgctactgc cgcacaagtg gaggaggtgg aggccgtggt catgcgtgcc    2760
gtggaaaatc atgccaaccg tccaaccata aaaatggatc gagtatatga agaaaatatc    2820
ttatctgatg aaaagtggga ggctctgctt cggcgacaca ttgaagagga ttgctgcgtg    2880
cgcacgatga aggataaatc taatgctttc ttcatcagcc agctgtggtt atatcgacat    2940
cttcaggaag ccattatttt catcgactgt tcgggtgcca gcatgtgtga ggtgcagaaa    3000
gtggaagcag cttatagaca tgcagccgag gttcatccta accatccaag tattgaactt    3060
atcagaacaa acaccgacgg aatggcctcc tcctcatctg accatcccaa cacagagccc    3120
aggaattga                                                            3129
<210>  11
<211>  1042
<212>  PRT
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  11
Met Glu Leu Ala Leu Gly Ala Met Thr Ser Leu Ala Pro Lys Leu Gly
1               5                   10                  15
Asp Leu Leu Met Glu Lys Tyr Val Val Gln Lys Gly Leu Lys Pro Asp
            20                  25                  30
Ile Glu Ser Leu Ser Arg Glu Leu Val Met Met Asn Ala Ala Leu Val
        35                  40                  45
Asp Ala Ser Arg Val Pro Pro Asp Gln Leu Thr Glu Val Glu Lys Leu
    50                  55                  60
Trp Ala Arg Lys Val Arg Asp Leu Ser Tyr Asp Met Glu Asp Ala Val
65                  70                  75                  80
Asp Asp Phe Ile Leu Arg Val Ala Gly Gly Asp Asp Ser Ala Ala Asp
                85                  90                  95
Ser Lys Phe Phe Lys Lys Thr Leu Ala Met Val Lys Asp Val Met Ser
            100                 105                 110
Met Lys Lys Phe Lys Asp Arg Cys Gln Ile Ser Asp Lys Val Lys Asp
        115                 120                 125
Ile Lys Lys Leu Ser Asn Glu Leu Ala Glu Leu Arg Ala Lys Tyr Thr
    130                 135                 140
Val Arg Gly Val Gly Ala Asp Leu Ala Ala Ser Thr Gly Ile Asp Thr
145                 150                 155                 160
Arg Val Ile Asn Leu Tyr Lys Lys Glu Thr Asp Leu Val Gly Ile Glu
                165                 170                 175
Glu Ser Arg Asp Lys Val Ile Arg Met Leu Ser Ile Gly Ala Lys Asp
            180                 185                 190
Glu Asp Ala His Glu Phe His Gln Asp Leu Lys Ile Val Ser Ile Val
        195                 200                 205
Gly Val Gly Gly Leu Gly Lys Thr Thr Leu Ala Lys Thr Val His Asp
    210                 215                 220
Met Leu Lys Lys Gln Phe Asp Cys Cys Ala Phe Ile Ser Ile Gly Arg
225                 230                 235                 240
Thr Pro Asn Leu Asn Arg Thr Phe Glu Lys Met Leu Leu Glu Leu Asp
                245                 250                 255
Arg Glu Tyr Lys Gln Val Asp Met Ala Arg Trp Asp Leu Glu Gln Phe
            260                 265                 270
Ile Asn Glu Leu Asp Glu Phe Leu Lys Asp Lys Arg Tyr Leu Ile Val
        275                 280                 285
Val Asp Asp Ile Trp Asp Val Asp Ser Trp Glu Ala Ile Lys Tyr Ala
    290                 295                 300
Leu Lys Asp Asn Ser Cys Gly Ser Arg Ile Ile Met Thr Thr Arg Asn
305                 310                 315                 320
Ser Gly Phe Val Lys Lys Val Glu Glu Val Tyr Arg Leu Lys Pro Leu
                325                 330                 335
Ser Asn Glu Asn Ser Lys Lys Leu Phe Tyr Lys Arg Ile Glu Ser Gln
            340                 345                 350
Glu Gly Glu Ser Leu Asp Gly Glu Leu Ser Ser Lys Ile Ile His Lys
        355                 360                 365
Cys Gly Gly Ile Pro Leu Ala Ile Ile Ala Ile Ala Ser Leu Leu Val
    370                 375                 380
Glu Arg Ser Ser Glu Glu Trp Ser Glu Val Tyr Asp Lys Ile Gly Leu
385                 390                 395                 400
Gly Asn Glu Asp Asn Thr Thr Lys Ile Met Leu Tyr Ser Tyr Tyr Asp
                405                 410                 415
Leu Pro Pro Tyr Leu Lys Pro Cys Leu Leu Gln Leu Ser Ile Tyr Pro
            420                 425                 430
Glu Asp Cys Phe Ile Asp Thr Lys Ala Thr Ile Trp Lys Trp Ile Gly
        435                 440                 445
Glu Gly Leu Val His Ile Glu Lys Glu Glu Gly Ser Leu Phe Lys Val
    450                 455                 460
Gly Glu Arg Tyr Phe Lys Glu Leu Val Asn Arg Ser Met Ile Gln Pro
465                 470                 475                 480
Ile Glu Asn Ile Asn Asp Trp Phe Val Glu Glu Phe Arg Ile His Asp
                485                 490                 495
Ile Val Phe Asp Leu Ile Cys Lys Leu Ser Lys Asp Glu Asp Phe Ile
            500                 505                 510
Ser Leu Ser Gly Gln His Ser Ser Gln Asp Ser Leu Arg Arg Glu Lys
        515                 520                 525
Lys Thr Gly Val Pro Arg Ser Asp Cys Lys Leu Arg Arg Leu Val Val
    530                 535                 540
Arg Asn Gln Arg Val Gln Arg Phe Pro Glu Glu Thr Met Asp Met Pro
545                 550                 555                 560
Glu Val Leu Arg Ser Leu Ser Ile Ile Asp Cys Asn Ile Ala Val Val
                565                 570                 575
Ala Pro Ile Asp Ser Phe Arg Val Cys Arg Val Leu Ser Ile Val Asn
            580                 585                 590
Asn Tyr Val Pro Ile Ser Leu Lys His Leu Gly Lys Leu Leu His Leu
        595                 600                 605
Lys Phe Leu Glu Ile Val Tyr Thr Pro Ile Asp Glu Leu Pro Lys Glu
    610                 615                 620
Ile Gly His Leu Arg Ser Leu Gln Thr Leu Ile Leu Val Arg Thr Gly
625                 630                 635                 640
Leu Asp Glu Leu Pro Pro Ala Leu Cys Ser Leu Thr Arg Leu Met Cys
                645                 650                 655
Leu Ile Ala Tyr Gly Phe Glu Arg Leu Pro Ala Asp Arg Met Gly Asn
            660                 665                 670
Leu Thr Ser Leu Glu Glu Leu Gln Leu Asn Arg Val Val Gly Arg Ser
        675                 680                 685
Ala Thr Gln Asp Leu Val Ala Glu Phe Gly Lys Leu Thr Arg Leu Arg
    690                 695                 700
Val Val Ser Ile Thr Phe Ser Glu Gln Leu Glu Glu Ser Leu Gln Glu
705                 710                 715                 720
Ala Leu Val Gln Ser Leu Ser Asn Leu Arg Arg Leu Gln Glu Leu Glu
                725                 730                 735
Leu Leu Cys Lys Met Pro Glu Arg Gly Ser Asp Met Trp Gly Asp Trp
            740                 745                 750
Glu Pro Pro Arg Gln Leu Arg Arg Leu Ile Ile Glu Gly Ile Asp Phe
        755                 760                 765
Ser Arg Gln Pro Arg Trp Ile Asn Arg Ser Cys Leu Pro Arg Leu Cys
    770                 775                 780
Ser Leu Tyr Leu Arg Val His Ala Leu Glu Ala Gln Asp Leu Asp Asn
785                 790                 795                 800
Leu Ala Arg Leu Pro Glu Leu Gln Tyr Leu Gln Leu Phe Gly Leu Ser
                805                 810                 815
Phe Pro Pro Arg Tyr Thr Val Gly Pro Asp Asp Phe Arg Asn Leu Arg
            820                 825                 830
Phe Cys Glu Val Gly Thr Thr Phe Glu Phe Arg Lys Gly Ala Met Pro
        835                 840                 845
Arg Leu Glu Val Leu Arg Phe Gly Val Tyr Ala Gly Tyr Trp Ser Trp
    850                 855                 860
Glu Glu Asn Gly Val Pro Phe Glu Gln Phe Pro Thr Lys Asp Val Ile
865                 870                 875                 880
Glu Asp Leu His Leu Asp Leu Asp Asn Val Leu Leu Leu Gln Gln Val
                885                 890                 895
Ile Val Lys Val Asn Cys Leu Gly Ala Thr Ala Ala Gln Val Glu Glu
            900                 905                 910
Val Glu Ala Val Val Met Arg Ala Val Glu Asn His Ala Asn Arg Pro
        915                 920                 925
Thr Ile Lys Met Asp Arg Val Tyr Glu Glu Asn Ile Leu Ser Asp Glu
    930                 935                 940
Lys Trp Glu Ala Leu Leu Arg Arg His Ile Glu Glu Asp Cys Cys Val
945                 950                 955                 960
Arg Thr Met Lys Asp Lys Ser Asn Ala Phe Phe Ile Ser Gln Leu Trp
                965                 970                 975
Leu Tyr Arg His Leu Gln Glu Ala Ile Ile Phe Ile Asp Cys Ser Gly
            980                 985                 990
Ala Ser Met Cys Glu Val Gln Lys Val Glu Ala Ala Tyr Arg His Ala
        995                 1000                1005
Ala Glu Val His Pro Asn His Pro Ser Ile Glu Leu Ile Arg Thr
    1010                1015                1020
Asn Thr Asp Gly Met Ala Ser Ser Ser Ser Asp His Pro Asn Thr
    1025                1030                1035
Glu Pro Arg Asn
    1040
<210>  12
<211>  23
<212>  DNA
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  12
gcacgctcca ggttaatggc tgg                                              23
<210>  13
<211>  23
<212>  DNA
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  13
gcagctgaaa ttgagcctcc cgg                                              23
<210>  14
<211>  23
<212>  DNA
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  14
gattagtctc ggcatacgta cgg                                              23
<210>  15
<211>  23
<212>  DNA
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  15
ggataatggc gtacgtattg cgg                                              23
<210>  16
<211>  23
<212>  DNA
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  16
gtttcgaaca gaacgtacgc agg                                              23
<210>  17
<211>  23
<212>  DNA
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  17
ggctaggcgt gtcaccataa tgg                                              23
<210>  18
<211>  23
<212>  DNA
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  18
gaatacgaaa ctataccgcg ggg                                              23
<210>  19
<211>  23
<212>  DNA
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  19
gactacctct gggggtacgt agg                                              23
<210>  20
<211>  23
<212>  DNA
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  20
gacggggact taattatgcg tgg                                              23
<210>  21
<211>  23
<212>  DNA
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  21
gcgatccgtc acttgtatat cgg                                              23
<210>  22
<211>  50
<212>  DNA
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  22
aaccagcagc caaaggacaa gacaagagac acaacgaaag gaaaggaacc                 50
<210>  23
<211>  50
<212>  DNA
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  23
caactagtgg gccagatatc accagccgga aattagcaaa aatgctacgg                 50
<210>  24
<211>  12662
<212>  DNA
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  24
atttaatgag acctgtccat tccgcaggcg gcgtgcctgt ccattccact ggcaggcgat      60
gtgctacctc cgcatttaat gagacctgtc cattccgctg gcaggcagcg acctgtccat     120
cccacaggcg gcatgcatgt ccgttccatt ggcagactgc atgcccatac cgccgcgtgc     180
actacgccca tcattactcg tatgttacca aggaagctgc cactgcatgt caacactgcg     240
cgtactgcgg acaacatggg cctggagatt gcacagacgt cacctgcatt agttgctcta     300
ggtattccat tcattatgtt cctgggccca catgttgggg ctcagcaccc ttgtatgtgc     360
ctcccttgag ctataaaagg gaaggcacac aacgttacaa ggcaagctct caagtcactc     420
agacttactt agaccctcga gaagttctcc aagctctcga gtatcagcaa tactacatag     480
tggagaaggg ttttacgctc cggtggcctg aaccactcta aactcttgtg tgctctcgtg     540
ctttcatcga ccatctagca gacaggcaaa acgcttaggc cccctcctca tcttaggatt     600
tagggcgggt gcgttccgcc acccggctag agatttcctc tccgacactc acatacttcc     660
acgtcttgct cacaaatgct cgacaagacc attttgtagt gtgcaagacc tttcctagcg     720
acgaagattg aagtgattaa tcacccaatc cgagtgtcct tcaatgagtt ggcacggttc     780
aaatgcagaa ctactctctc cgaaattggt atttgctgca aagtcgcctt cgtcttcgac     840
aatcatgtta tgcattatta tgcatgcagt tattatctca gtaagacagt tgcaatccca     900
accgtacgca ggatcacgta gcaccaccca gcgtgcttga agaactccaa atgggcactc     960
aatatccttc ctgtaacttt cctacatttg tctgaaatat atcttttttt cctcataagg    1020
gtgtctaatg gctttcacaa aagttggcca gttcagatat atgccattag ctaggtaata    1080
accaaagttg tatgcatgat cgttgattat gtaatgaatg ggtggcattc gaccgcttgt    1140
catagggtca aataccggcg atcaatgtag cacgttcacg tcattgtttg ttctaggcat    1200
gccaaaaaaa agtatgccaa atctagagat cgtacgttgc gacagcctcg agtatcatgg    1260
taggtcttaa atttcgacca cagaactatc ctcgccacgc ggttggacag ttcctccact    1320
cccaatgcat gcaatctatg gaacccaaca ttcctggaaa ccccctcgac tcgctattgt    1380
gcatgatgcg tgcaatgtct gcttcattag gagttcgtag ataccaccca ctaaaatatg    1440
caattaatgc acgatagaaa tgaataaggc attccctaac ggtagactcc cctatttgaa    1500
tgtactcgtc tacgacatca gtaggtaaga tgtaagcaag gatccgcatt gctgcacata    1560
ctttttgaag tggttcgagt ccagctaggc cagtagcgtc gacccgttga gtaaagtaac    1620
tatcctgctg ttgcagtcct tccataatgc ggaggaacaa tgaactactc atgcggaacc    1680
tataaaatgt aataggtaaa gtatgaaaga cactgttaat gcaaaactta ataatacaag    1740
tatgtagttg ttaccttctg cgaaacacgt ggggtggata cacgagattt agccgaagta    1800
gtgatggtgg atgagattct ctccagcata atgatccctg tgaatcacgc ggcgggggat    1860
accggaacgt ctacacctac ggtgtgtagc cttaatggtg agggtaagaa gagtggcaag    1920
cataagtgtg ttgtcgtcac tatcactcga atcggaatca tcgtccctac gcaaagacga    1980
cacaacgtac aaagtcttgt tagcttgagt tgaggagtga gatgtgcaca caaatgggaa    2040
gagcacgtac ccatatgtat agacgagatg gagttagctt gtgttgcaag ctcgtgtctt    2100
gcactgaaag cctcatgtgt cttgctgtgt atggttgtcg catgggtgct tgcaatggaa    2160
tttggtcgaa tattcatgtc atatttcaat cgtgctgaaa tattgggtgc caacagattc    2220
ataatgcatt ggaagggagg cttgcagtgt acggttgttg cgtatgtgct tgcgaaggaa    2280
aagcttcgaa cgataatgca gatcaactat gagcatgggt atggtccaat aacatcgatg    2340
gtaattacaa aacgaaaaat aattacttcg ttgttggtaa tggtatatga tgaatacgaa    2400
tttaataaat attcaccaga aatatgtacg acacaatata tttaattatg agttttttaa    2460
aatttagaaa ttaaataata ggtaattata cgtattatgt gtcccacaat aacttataga    2520
gattatatgt ctaattgaaa aattaattca attattcaat ggatttatac gttaagaaaa    2580
taaaaattga aaaaatatgg tagttaatga tagttggatt gatatatata tattttatgc    2640
gtagaggata tataaaggaa tatatagacg gaatagttac agaaagattg aatatagtgg    2700
agtgaatttt gctgtgctac gtagtaatat ataacgcgaa aaatttaggg aaacgctgag    2760
ggctgcagat acagctggcc atgctatcaa tagattagta cttggttgcc acttgccagt    2820
agccgcactt tcctcgatat gcccaagcga gagagagaga ttcctaagtt gattcttctg    2880
tggatgaaga tgaaatctac ttctgaaatc ttgccaaccg tccaactctg tttgatctaa    2940
tttctatatc ctccggccac caagttcgtg tcaaataagc gagcacagct aggtaagtag    3000
ctgattcgaa ttccaacaaa acatctcatc ccttttagtc tcttgtgcta gatcttatgc    3060
gtctgcaacc ttgggagcta gctagccatg gagttcgcaa ctggagcgct aggcaccctt    3120
cttcccaagc tctccatgcc caagcgagcg agagagagag agattcctta gttgattctt    3180
ctgtggatga agatgaaatc tacttctgaa atcttgccac cgtccaactc tgtttgatct    3240
aatctctata tcctccggcc accaagttcg tgtcaaataa gcgagcacag ctaggtaagc    3300
agctgattcg aattccaaca aaacattgta tcccttttag gccgtgtttg ttttggcttc    3360
tggcagcttc tggtcattaa aagctgctgc aaactgtcaa acgcttagct tttcagccag    3420
tttctataaa attcgttgag gcaaaaatca tccaaaatca acataaacac ataaccggtt    3480
gagtcgttgt aataatagga atccgtcact ttctagatcc tgagtcatat gaacaacttt    3540
atcttcgttc acacgtaatc gtattgatac tcagcttctc actacagaca gattctcctc    3600
ataatcagat tttcaaaaaa actgaataga aaaaagctaa accaaacgtg ccttagtctg    3660
ttgcgctaga tctcatgcgt ctgcaacctt gggagctagc tagccatgga gttcgcaact    3720
ggagcgctag gcacccttct tctcaagctc tccatgctgc ttcatggtga gtacaacctg    3780
gagaagggcg tcagggggga catccagcgc gtcatgaaca agctcgagcg ggttcattct    3840
gtcctcggcc atgttgtcga agtgcctgtg ccactgaagc cacgtcctga tctggtcaga    3900
atgttggcac gcagcgtcag ggagctatcc tacgacatgg aggacttcgt cgacaccttc    3960
ctggtgcgtg tccaaggccc tgaacgcacc agcaaaagaa gcgccaaaat attcatgaat    4020
aagacatata tggtcgtgaa tcgccatgag atcgcccaga ccatcaagga cttcgaagag    4080
cgcgtccagc agatagatga gcgtcgtcaa aggtcattga aacacttaat ttccactttg    4140
gcttgcgtgc atatgaactt tcacctttac tgtctttctt ccattttatt tccttttctg    4200
gttctaacag gtacgatgtt gatgctatgg ttccccgtgt caaaaccttg gttgatcctc    4260
gcatatttgc tctgaagtac accaaggcca cggaccttgt cggcatggat gaggcaaggg    4320
aggaactaat cacaaggttg accaaggaag atgacacctc cactgaacaa aggcgagtct    4380
ctatcgttgg ttttggagga cttggcaaga cagcgcttgc aaaagcagtt tatgacaaac    4440
ttaaagctaa aggggaattc cattgcgcgg cctttgtgtc ggtgtctcgg tttcctcagc    4500
tcgaaaaatt cttcaaggaa ttgctttatg agcttgacga gactgagtac aaggaactta    4560
ttgacatcag caccccattg gaacttatga atctagtgca tgaattcctt cataataaga    4620
ggtacacgcg tacatgtacc acacctagtg tgcattatat gttcattcca cggaaatatc    4680
catattatag agtaatatgc ttatatatat tattgcaatt catatcttta gctatgctta    4740
cattacttct ccaattaata caataaatat aggtacctta ttgctgtcga tgacatatgg    4800
gatactgacg catgggcaat gatacaatgg gcttttcctg agaataagct aggaagcaga    4860
ataatcgcaa ctactcgcag aattgatgtt gctgagtatg taggtggttg ctatatgatg    4920
aaacctctta ctcgagagaa atcaaatata ttattctatg gacgaatatt tggctctgaa    4980
ggtaaatgtc ctcctgaact ttctgatgcg tctgagaaaa tattgaataa atgcggaggc    5040
gtgccattgg ctattattac tacatctagc ttgctggcta gtaagtcaag aaacataaaa    5100
gaatggtaca atgttgctga ttctattggt tccagaatac taaaaaacag tactgaaatg    5160
gagaatttga ggaacatact gctgcttagc tattatgatc taccagcacg attaaagaca    5220
tgtttgttat atctgagtat tttccctgaa gattgtgaga ttgggatgca tcggttaata    5280
tggaggtgga tagctgaagg ttttttcaat ggagaactag cacatgatgg gctctttaac    5340
cttggcgaat cttgtttcca cgagctcata agaagaagca tggtgcagcc agtaacactt    5400
gaaggcacgg gtcttgtata tgcttgtcgt gttcataata tgtttcatga tttgatcctc    5460
tacatgtcac acgaagaaga atttgtttct gcagtcaatg aaaagtttgg tcttctagat    5520
gttcgttctc ggcggttagc attccagaac ataacaaaag agcagtacag acttgtggaa    5580
catccacggc tggcacaatt gaggtcactt aatgccattg gatgtcctat atacgcgata    5640
cctccaattg aaagctataa attattgcgt gtactggatt tcgaaaattg tgcaggtatt    5700
gaaggccatg atcttgttca tcttgggaaa ttgcatcacc tcaagttcct tgggctaaga    5760
aacacgttta tcggtaagct gccggaagga atagggaacc tcaagtttct gcaaacattg    5820
gacctcgatg gaactggtgt ggaagaatta cctcaagcct tgcataatct tacagaattg    5880
atgtgcctaa ttgctgactg gagaacgaga gtgcccaatt ggattggtaa cctcacgtcc    5940
ctgcagcact tggtgattta tcctggtggg catgacgatg aggattctgc gagcaggttt    6000
gttaatgagc tgggaaagct gagacaacta agggtgctcc gttttttgat aaaagcacaa    6060
gatgaagggc agctgagaga tttgctagag tccctatcga atctgccaga gatcgaggct    6120
atacattttg attactatgg agtacagtta aatagaggtg ttcagttgga acctgaaggc    6180
tatgccctct ctagacatat tcgttccatg gaattgcgct ggttggagtt ctcaaggctg    6240
cctctttgga ttaatcctgg acaacttcct aacctctacc acttatggct gatggtatct    6300
gatgcggaag agcgggatct ggaaatcctt ggggggtttc cagtgcttca ctccctccac    6360
ttgttgattg tgaatactga acgtgaagat gtcatgactt gtggctgtgg tggattcaag    6420
aatttgaaat gctgcagtat aactaaaccg ctgaaatttg tacatggagc tatgcccagg    6480
cttgaagtcc tcgatttcca tttcagtgtg caactcctaa cggattcaaa ccaagaattt    6540
gattttgact ttggcttggg aaacctacat tggcttcagc aagccatcgt tcaaatcaca    6600
gcccttggtg aggaggtgga gtctgtgggg agagcacagg tggctctgcg ggatgcaata    6660
cgtacccatc ccaaccgtcc tacccttgaa ataaacttat ttgggcaaac aatacctcca    6720
gagttaccaa aggtcaggac tctttgtcat ctctctctca cctcatttcg ttgtcttgtt    6780
ttcatttgcc ttatttcact gtttcagcaa gacgacgatg gagcgaaaat tgtggagata    6840
tcaccggccg agagtagtcg tcaagctcaa gagcgggaga aaagaagcat cgatgtggcg    6900
acgaagaaag caacacgggt gccgtctttt tacacaaagt catcaattga tgagccaatg    6960
gatcagctca taaacatgct atctgtggtt gatgacgaag cctacactaa gaacataaag    7020
atactatcta ttgtaaggtc tgagggactg gggaagacta ctctggccca aaaagcattc    7080
gaagagctcc attcgcaatt tgaccgtggg gcgttcgttc tactaggcca gaatcctgac    7140
ttgaggagag tctttgctga cattctccgt ggtcttgaca agcaaaggta catagatttc    7200
ccagtggcaa tattggatct agtggacctg atctggctag tccgtaaatc gctcataaac    7260
aaaaggtatg tccaacccac tgacatgcta gtagcctagt actaccttta ttcagctata    7320
tatttgctca atatattgtc tccgttcttt ttttttattt gacgtggttg attatttttt    7380
cttcaaaatt ctaatcactc gtgtactaaa aaaaatctgt gtgttatatc catgagtgtt    7440
atttcgacac tgccggttaa accggtgagt attgatttct ctgattttgc tttgtttgac    7500
ttggttcttc ttggtgtctt cagcatttca tcccatagac ctataaacct gagaatatac    7560
atctagaaaa cattgttaat ctaagtgttg tgtgtcaatc aatcaccaaa acgaagcacc    7620
gaaatatgac ataagagacc atttttgcta cagttgttgt cagtagtagt tactactaaa    7680
tatggattat aacccttgga tactattatt tttccaggtt ctttattgta tttgatgata    7740
tatgtgatgt aaaagcatgg gaaattataa agtgcgcttt gattgaaaat aacaaccaca    7800
gtgtagttct tacgacaagt cgcaacactg gtattactga aattattggt ggcagcaagc    7860
aattacaacc tctatcagca actatctcta aaaatctact ctgcaaaagg ttatttggat    7920
cggcaggcaa gtgtccttct gaactagtaa atatatgtga caatcttgta gaagaatgtg    7980
gtggaatact atctgtgatc gacgaaactg tgacattgct tgcaagtata ccaccaacag    8040
tggagaactg ggaggcagtg tacgccagaa gaatgttgga tcggtcttat cctggtttaa    8100
ctgacagtct aaagaattgc ttactctatt ttactatgtt tcgaagagga catgagatta    8160
gtggagaaca cttaatatgt gcatggatag ctgaaggttt tgtacatggg caagaggtag    8220
cagagaccta ccttagtgat ctagtaaaaa agaaattaat cgatgcagtg gaggttgatg    8280
ctggaggaaa ggtcctcacg tgccgcatgt atgacttggt gcatgacttt atcgtctcaa    8340
aatcaattga agaacgattt gtttatattt taaatgactc ggaaggcaga gatttgtcag    8400
aagcagttca cgttcaccag cgactataca tccagggaca taataacaaa gaactagacc    8460
tgcaaattcc ttggctgccc caagtgaagt cacttgtctc ctgtggtact gcgccatcca    8520
tcttaaagtt taagggtcta catgttatgg atttaggggc ctgtgaatct ttgcaggcta    8580
gtcatctcaa gggtataaat aatgtaagtt ctttgagata tctggtcata ggaggtaagt    8640
gtatctctgg catccctaag gaaattgcga agctggaaca tttgcggaca ctagatttaa    8700
gtgcaagtgg tctaaatgaa ttgccagaat atgttttcat gataagaaaa ttggaacgcc    8760
taattgttaa tagtcagatg aagatatcat atggtattgc aaagatgtct gctttacagg    8820
agctaggcga tatcaatgtc accgacccag agttgctgaa aagtctctgt aagctaacca    8880
aattgagggt tcttagaatt tccatatggt catgggatga tagtttgaag aactatttta    8940
aacaactgtg tgacaacttg cgttcactgg ttcagtgcac ggagaacatc cagagtctct    9000
ccataatgac atgctgctcc ctggttttca tggatgattt gggtgagaat tggacccctc    9060
aatgtctcca gaagctcgag gtcggttgca gcgcatttga catattgcca agttggtttg    9120
gctcactttc tagtatctcc acgttaacaa tcgaggtcta caagctgtca caggacataa    9180
ttgatacgct cggaaggctg gctggtcttg gttctctatc cctgacatcg aaacaagtac    9240
caaaaggata ctttgtgatc ggctctgaca ggttcaataa gctacagagc ttaaagtttg    9300
tgagcaatgc aatggtagag atgtttccac gtcaacaatc aaatggcacg gaacagctca    9360
aaaggcttat gattgtgttc catgcttcac gtacacaaga tgtgaacaaa gatttctgct    9420
ttggtttgga gaacctgtct tccctagagc atgttcgtgt tgaaataatt tgtttcgatg    9480
ccagccataa catggtgaaa aacgcagaag ctgcagttca gaaagctata tctggcacaa    9540
gtatcgcaaa tctggaaata cgaagacttc aggaaaatag tatgacacag gacgaagcgg    9600
acctctgtga tgcagtacaa gagcagaata atcagaagca ccagaaaatg aagaggtact    9660
aattttccac tcctacaata caacgatgtc aaataaaatt atttctcttg tattttctta    9720
taaagttcgg cccttgagag catctccaag agaggtctta aactaggtcc tatcttcaaa    9780
tataggacat aagagtaaaa catggctttg agatggatcg atagaatctc agcagcaaca    9840
ggtaaagagt tatagtaggc cttcgttaaa tgtcgccatg gatgtgattc gcaagattct    9900
ggaggttcaa tgtctgctag agctgcttca tgcccacaac cccaatttcg aacgaactca    9960
atcttaggca acaacgatcc ctctgggatg tccgatttta ggtagtattc tttcgaattt   10020
aacgatatgc tgcagaaagg cattttagat cccacgtagc taggcgccca ggcatagccg   10080
aacagaccca aactcgcgtt cggacgctca gttatgcagt catgctaggt ctcatcactg   10140
atgatgtaat gcagaattta tgcaacgggg gactggcaac tggaaatagc acataggtct   10200
gtagaatcag atgagtagct gaaaggttaa tattctgaat ttcagagtta ttactaatat   10260
atggctattg gtgtactatt ctacctactg tcactaattg aaatgtctct tgttatacct   10320
atgtgtgatg atgtatttgt gaaacattcc atatgcccga cataaaatca ttgatattgt   10380
ttatgggatt attgttaaga tggatgtatg attattggca ttgagttgtt tcaactagcc   10440
cttcatcgct agctacattt ctcatggatg cttgtttgaa tagtacttgc aatatgcttc   10500
aactagatgg aatgctcgga tactgatatg ctactatgta ttcctatttt gcagttctat   10560
ggagtcccag gatgggtacc tcacttcttt accgaaccag gaaagtgcag atgttgttgg   10620
ctccgatagt attgtggaac cactagtgaa tgaaatgaac tcgcagacaa ttaagaggga   10680
tcaatccacg aatttcagtg aagatgagga cttaatgttg gtttctagct accttaatgt   10740
aagcaaagat tctattactg gaagggataa aaaagaaggc acattttggg aaagagtatg   10800
ggaatactat aacaagaata ggacattcga gtccgatcat agttggtcgt cattgaaaca   10860
tcgctggctt gcaattcaga aggaagtgaa tatctttcaa ggttactatg atgccataga   10920
aaggaaaaat caaagtggcc agacaagtga tgacaaggtg aatcatacat tttgtaccat   10980
tatttatact tcttaacata acatgcaact tctcacattt gtgaatcctg tgttgttttg   11040
tagcatgctg aagcagaagt agaattccga gaaaaacaag ggaaggcttt ttctgtattc   11100
catgtgtgga tgattctaag gcatgagcca aagtgggcat ttagagaatc aaagatcaaa   11160
gaccagcatg aagcaaacaa tgctaatact gatgctcctg ccaacattta tagaccacag   11220
gggaggaaag ctgagaagga aaaggctcgt gcgagaaagc atggtggatc tgatgttgat   11280
ggtgatccgt tcatcgaaga agtaaaaaat atgagggaag cacgggaaga aacagaacga   11340
gaccgaaaga cccatgatga caagttctat gagttggaaa agagtaagct tgaattggag   11400
cgagatcgac atgacaaaga gataatgcaa acagacacaa gcacaatgga tgaagaatcg   11460
aaacaatact tcaagttgat gaaacaagag attttggctc gccgtttcgg gagtagtcag   11520
ccatagttgt tagctgttgg aaacttagat agtattttgt ttttgccaga catctgttat   11580
tgataatctt gtgaactttt acatatggca cctgtcaact acttcctcct ttctaaaata   11640
ttattcgttt tagggtgtta atagattcat acaatatttg atgtatgtat tttatatatg   11700
tgtctagatt cgttgtctaa gggtcttcta gtctggcatt gcctgtacag tcataatttg   11760
agcacttcct attttgtttg gtggaaagta ctgtgatcac tttcattgcc tctgctttat   11820
tgtaccatgc taaactgggt cgattactta agtctttata aaacaactat catgaagcat   11880
catataaaca aaactgagct gatttattta agtcttgttc attgctgtag actgtaactg   11940
aatcgattct gggtatttca agaaaactgc aacttgaacg atcagaatta ctggaaaatt   12000
cttccggcaa aagaggacaa acgaattgct agaaaattta atgccttttt ctcgaatcaa   12060
cgtaacacct ttgtcccttc acgggctcct taatgcatct ggtacttctt tttagtactg   12120
ttctatactc cctctgttac aatttttttt ttgatttttt acctcaagtt tgaccagttc   12180
gacctattaa aaaacttcat aattatcgtt aatttttacg gtgatatctt tagcacataa   12240
tatactttaa gctaaagtat gactttgatt tttcatcttt ttgcaatttt ttgaataata   12300
agagctggtc aaatttaaca aaaaaaatca aacgaattat aaattaaaac gaagatagta   12360
atatatatat atataggaga aggtaatgga agcccagagc ttccattaat accgggaagt   12420
cccggccagg cagaccccac acacattttg cgggctaggt cgacgtgcgc ccgatgcgcc   12480
tgtttctggt tcgagcagat cagagcataa aatataaact aaaacaacat aaacgactac   12540
aagttttagc gtaaattggg aatctgtttc gtaacagagc gtggcggcgt gaaaatcggc   12600
catgcagagc ccgcacgcgt gttttccggg ctgggccggc gtgggcccga tgcgcctatt   12660
tc                                                                  12662
<210>  25
<211>  6102
<212>  DNA
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  25
atggagttcg caactggagc gctaggcacc cttcttctca agctctccat gctgcttcat      60
ggtgagtaca acctggagaa gggcgtcagg ggggacatcc agcgcgtcat gaacaagctc     120
gagcgggttc attctgtcct cggccatgtt gtcgaagtgc ctgtgccact gaagccacgt     180
cctgatctgg tcagaatgtt ggcacgcagc gtcagggagc tatcctacga catggaggac     240
ttcgtcgaca ccttcctggt gcgtgtccaa ggccctgaac gcaccagcaa aagaagcgcc     300
aaaatattca tgaataagac atatatggtc gtgaatcgcc atgagatcgc ccagaccatc     360
aaggacttcg aagagcgcgt ccagcagata gatgagcgtc gtcaaaggta cgatgttgat     420
gctatggttc cccgtgtcaa aaccttggtt gatcctcgca tatttgctct gaagtacacc     480
aaggccacgg accttgtcgg catggatgag gcaagggagg aactaatcac aaggttgacc     540
aaggaagatg acacctccac tgaacaaagg cgagtctcta tcgttggttt tggaggactt     600
ggcaagacag cgcttgcaaa agcagtttat gacaaactta aagctaaagg ggaattccat     660
tgcgcggcct ttgtgtcggt gtctcggttt cctcagctcg aaaaattctt caaggaattg     720
ctttatgagc ttgacgagac tgagtacaag gaacttattg acatcagcac cccattggaa     780
cttatgaatc tagtgcatga attccttcat aataagaggt accttattgc tgtcgatgac     840
atatgggata ctgacgcatg ggcaatgata caatgggctt ttcctgagaa taagctagga     900
agcagaataa tcgcaactac tcgcagaatt gatgttgctg agtatgtagg tggttgctat     960
atgatgaaac ctcttactcg agagaaatca aatatattat tctatggacg aatatttggc    1020
tctgaaggta aatgtcctcc tgaactttct gatgcgtctg agaaaatatt gaataaatgc    1080
ggaggcgtgc cattggctat tattactaca tctagcttgc tggctagtaa gtcaagaaac    1140
ataaaagaat ggtacaatgt tgctgattct attggttcca gaatactaaa aaacagtact    1200
gaaatggaga atttgaggaa catactgctg cttagctatt atgatctacc agcacgatta    1260
aagacatgtt tgttatatct gagtattttc cctgaagatt gtgagattgg gatgcatcgg    1320
ttaatatgga ggtggatagc tgaaggtttt ttcaatggag aactagcaca tgatgggctc    1380
tttaaccttg gcgaatcttg tttccacgag ctcataagaa gaagcatggt gcagccagta    1440
acacttgaag gcacgggtct tgtatatgct tgtcgtgttc ataatatgtt tcatgatttg    1500
atcctctaca tgtcacacga agaagaattt gtttctgcag tcaatgaaaa gtttggtctt    1560
ctagatgttc gttctcggcg gttagcattc cagaacataa caaaagagca gtacagactt    1620
gtggaacatc cacggctggc acaattgagg tcacttaatg ccattggatg tcctatatac    1680
gcgatacctc caattgaaag ctataaatta ttgcgtgtac tggatttcga aaattgtgca    1740
ggtattgaag gccatgatct tgttcatctt gggaaattgc atcacctcaa gttccttggg    1800
ctaagaaaca cgtttatcgg taagctgccg gaaggaatag ggaacctcaa gtttctgcaa    1860
acattggacc tcgatggaac tggtgtggaa gaattacctc aagccttgca taatcttaca    1920
gaattgatgt gcctaattgc tgactggaga acgagagtgc ccaattggat tggtaacctc    1980
acgtccctgc agcacttggt gatttatcct ggtgggcatg acgatgagga ttctgcgagc    2040
aggtttgtta atgagctggg aaagctgaga caactaaggg tgctccgttt tttgataaaa    2100
gcacaagatg aagggcagct gagagatttg ctagagtccc tatcgaatct gccagagatc    2160
gaggctatac attttgatta ctatggagta cagttaaata gaggtgttca gttggaacct    2220
gaaggctatg ccctctctag acatattcgt tccatggaat tgcgctggtt ggagttctca    2280
aggctgcctc tttggattaa tcctggacaa cttcctaacc tctaccactt atggctgatg    2340
gtatctgatg cggaagagcg ggatctggaa atccttgggg ggtttccagt gcttcactcc    2400
ctccacttgt tgattgtgaa tactgaacgt gaagatgtca tgacttgtgg ctgtggtgga    2460
ttcaagaatt tgaaatgctg cagtataact aaaccgctga aatttgtaca tggagctatg    2520
cccaggcttg aagtcctcga tttccatttc agtgtgcaac tcctaacgga ttcaaaccaa    2580
gaatttgatt ttgactttgg cttgggaaac ctacattggc ttcagcaagc catcgttcaa    2640
atcacagccc ttggtgagga ggtggagtct gtggggagag cacaggtggc tctgcgggat    2700
gcaatacgta cccatcccaa ccgtcctacc cttgaaataa acttatttgg gcaaacaata    2760
cctccagagt taccaaagca agacgacgat ggagcgaaaa ttgtggagat atcaccggcc    2820
gagagtagtc gtcaagctca agagcgggag aaaagaagca tcgatgtggc gacgaagaaa    2880
gcaacacggg tgccgtcttt ttacacaaag tcatcaattg atgagccaat ggatcagctc    2940
ataaacatgc tatctgtggt tgatgacgaa gcctacacta agaacataaa gatactatct    3000
attgtaaggt ctgagggact ggggaagact actctggccc aaaaagcatt cgaagagctc    3060
cattcgcaat ttgaccgtgg ggcgttcgtt ctactaggcc agaatcctga cttgaggaga    3120
gtctttgctg acattctccg tggtcttgac aagcaaaggt acatagattt cccagtggca    3180
atattggatc tagtggacct gatctggcta gtccgtaaat cgctcataaa caaaaggttc    3240
tttattgtat ttgatgatat atgtgatgta aaagcatggg aaattataaa gtgcgctttg    3300
attgaaaata acaaccacag tgtagttctt acgacaagtc gcaacactgg tattactgaa    3360
attattggtg gcagcaagca attacaacct ctatcagcaa ctatctctaa aaatctactc    3420
tgcaaaaggt tatttggatc ggcaggcaag tgtccttctg aactagtaaa tatatgtgac    3480
aatcttgtag aagaatgtgg tggaatacta tctgtgatcg acgaaactgt gacattgctt    3540
gcaagtatac caccaacagt ggagaactgg gaggcagtgt acgccagaag aatgttggat    3600
cggtcttatc ctggtttaac tgacagtcta aagaattgct tactctattt tactatgttt    3660
cgaagaggac atgagattag tggagaacac ttaatatgtg catggatagc tgaaggtttt    3720
gtacatgggc aagaggtagc agagacctac cttagtgatc tagtaaaaaa gaaattaatc    3780
gatgcagtgg aggttgatgc tggaggaaag gtcctcacgt gccgcatgta tgacttggtg    3840
catgacttta tcgtctcaaa atcaattgaa gaacgatttg tttatatttt aaatgactcg    3900
gaaggcagag atttgtcaga agcagttcac gttcaccagc gactatacat ccagggacat    3960
aataacaaag aactagacct gcaaattcct tggctgcccc aagtgaagtc acttgtctcc    4020
tgtggtactg cgccatccat cttaaagttt aagggtctac atgttatgga tttaggggcc    4080
tgtgaatctt tgcaggctag tcatctcaag ggtataaata atgtaagttc tttgagatat    4140
ctggtcatag gaggtaagtg tatctctggc atccctaagg aaattgcgaa gctggaacat    4200
ttgcggacac tagatttaag tgcaagtggt ctaaatgaat tgccagaata tgttttcatg    4260
ataagaaaat tggaacgcct aattgttaat agtcagatga agatatcata tggtattgca    4320
aagatgtctg ctttacagga gctaggcgat atcaatgtca ccgacccaga gttgctgaaa    4380
agtctctgta agctaaccaa attgagggtt cttagaattt ccatatggtc atgggatgat    4440
agtttgaaga actattttaa acaactgtgt gacaacttgc gttcactggt tcagtgcacg    4500
gagaacatcc agagtctctc cataatgaca tgctgctccc tggttttcat ggatgatttg    4560
ggtgagaatt ggacccctca atgtctccag aagctcgagg tcggttgcag cgcatttgac    4620
atattgccaa gttggtttgg ctcactttct agtatctcca cgttaacaat cgaggtctac    4680
aagctgtcac aggacataat tgatacgctc ggaaggctgg ctggtcttgg ttctctatcc    4740
ctgacatcga aacaagtacc aaaaggatac tttgtgatcg gctctgacag gttcaataag    4800
ctacagagct taaagtttgt gagcaatgca atggtagaga tgtttccacg tcaacaatca    4860
aatggcacgg aacagctcaa aaggcttatg attgtgttcc atgcttcacg tacacaagat    4920
gtgaacaaag atttctgctt tggtttggag aacctgtctt ccctagagca tgttcgtgtt    4980
gaaataattt gtttcgatgc cagccataac atggtgaaaa acgcagaagc tgcagttcag    5040
aaagctatat ctggcacaag tatcgcaaat ctggaaatac gaagacttca ggaaaatagt    5100
atgacacagg acgaagcgga cctctgtgat gcagtacaag agcagaataa tcagaagcac    5160
cagaaaatga agagaattta tgcaacgggg gactggcaac tggaaatagc acatagttct    5220
atggagtccc aggatgggta cctcacttct ttaccgaacc aggaaagtgc agatgttgtt    5280
ggctccgata gtattgtgga accactagtg aatgaaatga actcgcagac aattaagagg    5340
gatcaatcca cgaatttcag tgaagatgag gacttaatgt tggtttctag ctaccttaat    5400
gtaagcaaag attctattac tggaagggat aaaaaagaag gcacattttg ggaaagagta    5460
tgggaatact ataacaagaa taggacattc gagtccgatc atagttggtc gtcattgaaa    5520
catcgctggc ttgcaattca gaaggaagtg aatatctttc aaggttacta tgatgccata    5580
gaaaggaaaa atcaaagtgg ccagacaagt gatgacaagc atgctgaagc agaagtagaa    5640
ttccgagaaa aacaagggaa ggctttttct gtattccatg tgtggatgat tctaaggcat    5700
gagccaaagt gggcatttag agaatcaaag atcaaagacc agcatgaagc aaacaatgct    5760
aatactgatg ctcctgccaa catttataga ccacagggga ggaaagctga gaaggaaaag    5820
gctcgtgcga gaaagcatgg tggatctgat gttgatggtg atccgttcat cgaagaagta    5880
aaaaatatga gggaagcacg ggaagaaaca gaacgagacc gaaagaccca tgatgacaag    5940
ttctatgagt tggaaaagag taagcttgaa ttggagcgag atcgacatga caaagagata    6000
atgcaaacag acacaagcac aatggatgaa gaatcgaaac aatacttcaa gttgatgaaa    6060
caagagattt tggctcgccg tttcgggagt agtcagccat ag                       6102
<210>  26
<211>  2033
<212>  PRT
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  26
Met Glu Phe Ala Thr Gly Ala Leu Gly Thr Leu Leu Leu Lys Leu Ser
1               5                   10                  15
Met Leu Leu His Gly Glu Tyr Asn Leu Glu Lys Gly Val Arg Gly Asp
            20                  25                  30
Ile Gln Arg Val Met Asn Lys Leu Glu Arg Val His Ser Val Leu Gly
        35                  40                  45
His Val Val Glu Val Pro Val Pro Leu Lys Pro Arg Pro Asp Leu Val
    50                  55                  60
Arg Met Leu Ala Arg Ser Val Arg Glu Leu Ser Tyr Asp Met Glu Asp
65                  70                  75                  80
Phe Val Asp Thr Phe Leu Val Arg Val Gln Gly Pro Glu Arg Thr Ser
                85                  90                  95
Lys Arg Ser Ala Lys Ile Phe Met Asn Lys Thr Tyr Met Val Val Asn
            100                 105                 110
Arg His Glu Ile Ala Gln Thr Ile Lys Asp Phe Glu Glu Arg Val Gln
        115                 120                 125
Gln Ile Asp Glu Arg Arg Gln Arg Tyr Asp Val Asp Ala Met Val Pro
    130                 135                 140
Arg Val Lys Thr Leu Val Asp Pro Arg Ile Phe Ala Leu Lys Tyr Thr
145                 150                 155                 160
Lys Ala Thr Asp Leu Val Gly Met Asp Glu Ala Arg Glu Glu Leu Ile
                165                 170                 175
Thr Arg Leu Thr Lys Glu Asp Asp Thr Ser Thr Glu Gln Arg Arg Val
            180                 185                 190
Ser Ile Val Gly Phe Gly Gly Leu Gly Lys Thr Ala Leu Ala Lys Ala
        195                 200                 205
Val Tyr Asp Lys Leu Lys Ala Lys Gly Glu Phe His Cys Ala Ala Phe
    210                 215                 220
Val Ser Val Ser Arg Phe Pro Gln Leu Glu Lys Phe Phe Lys Glu Leu
225                 230                 235                 240
Leu Tyr Glu Leu Asp Glu Thr Glu Tyr Lys Glu Leu Ile Asp Ile Ser
                245                 250                 255
Thr Pro Leu Glu Leu Met Asn Leu Val His Glu Phe Leu His Asn Lys
            260                 265                 270
Arg Tyr Leu Ile Ala Val Asp Asp Ile Trp Asp Thr Asp Ala Trp Ala
        275                 280                 285
Met Ile Gln Trp Ala Phe Pro Glu Asn Lys Leu Gly Ser Arg Ile Ile
    290                 295                 300
Ala Thr Thr Arg Arg Ile Asp Val Ala Glu Tyr Val Gly Gly Cys Tyr
305                 310                 315                 320
Met Met Lys Pro Leu Thr Arg Glu Lys Ser Asn Ile Leu Phe Tyr Gly
                325                 330                 335
Arg Ile Phe Gly Ser Glu Gly Lys Cys Pro Pro Glu Leu Ser Asp Ala
            340                 345                 350
Ser Glu Lys Ile Leu Asn Lys Cys Gly Gly Val Pro Leu Ala Ile Ile
        355                 360                 365
Thr Thr Ser Ser Leu Leu Ala Ser Lys Ser Arg Asn Ile Lys Glu Trp
    370                 375                 380
Tyr Asn Val Ala Asp Ser Ile Gly Ser Arg Ile Leu Lys Asn Ser Thr
385                 390                 395                 400
Glu Met Glu Asn Leu Arg Asn Ile Leu Leu Leu Ser Tyr Tyr Asp Leu
                405                 410                 415
Pro Ala Arg Leu Lys Thr Cys Leu Leu Tyr Leu Ser Ile Phe Pro Glu
            420                 425                 430
Asp Cys Glu Ile Gly Met His Arg Leu Ile Trp Arg Trp Ile Ala Glu
        435                 440                 445
Gly Phe Phe Asn Gly Glu Leu Ala His Asp Gly Leu Phe Asn Leu Gly
    450                 455                 460
Glu Ser Cys Phe His Glu Leu Ile Arg Arg Ser Met Val Gln Pro Val
465                 470                 475                 480
Thr Leu Glu Gly Thr Gly Leu Val Tyr Ala Cys Arg Val His Asn Met
                485                 490                 495
Phe His Asp Leu Ile Leu Tyr Met Ser His Glu Glu Glu Phe Val Ser
            500                 505                 510
Ala Val Asn Glu Lys Phe Gly Leu Leu Asp Val Arg Ser Arg Arg Leu
        515                 520                 525
Ala Phe Gln Asn Ile Thr Lys Glu Gln Tyr Arg Leu Val Glu His Pro
    530                 535                 540
Arg Leu Ala Gln Leu Arg Ser Leu Asn Ala Ile Gly Cys Pro Ile Tyr
545                 550                 555                 560
Ala Ile Pro Pro Ile Glu Ser Tyr Lys Leu Leu Arg Val Leu Asp Phe
                565                 570                 575
Glu Asn Cys Ala Gly Ile Glu Gly His Asp Leu Val His Leu Gly Lys
            580                 585                 590
Leu His His Leu Lys Phe Leu Gly Leu Arg Asn Thr Phe Ile Gly Lys
        595                 600                 605
Leu Pro Glu Gly Ile Gly Asn Leu Lys Phe Leu Gln Thr Leu Asp Leu
    610                 615                 620
Asp Gly Thr Gly Val Glu Glu Leu Pro Gln Ala Leu His Asn Leu Thr
625                 630                 635                 640
Glu Leu Met Cys Leu Ile Ala Asp Trp Arg Thr Arg Val Pro Asn Trp
                645                 650                 655
Ile Gly Asn Leu Thr Ser Leu Gln His Leu Val Ile Tyr Pro Gly Gly
            660                 665                 670
His Asp Asp Glu Asp Ser Ala Ser Arg Phe Val Asn Glu Leu Gly Lys
        675                 680                 685
Leu Arg Gln Leu Arg Val Leu Arg Phe Leu Ile Lys Ala Gln Asp Glu
    690                 695                 700
Gly Gln Leu Arg Asp Leu Leu Glu Ser Leu Ser Asn Leu Pro Glu Ile
705                 710                 715                 720
Glu Ala Ile His Phe Asp Tyr Tyr Gly Val Gln Leu Asn Arg Gly Val
                725                 730                 735
Gln Leu Glu Pro Glu Gly Tyr Ala Leu Ser Arg His Ile Arg Ser Met
            740                 745                 750
Glu Leu Arg Trp Leu Glu Phe Ser Arg Leu Pro Leu Trp Ile Asn Pro
        755                 760                 765
Gly Gln Leu Pro Asn Leu Tyr His Leu Trp Leu Met Val Ser Asp Ala
    770                 775                 780
Glu Glu Arg Asp Leu Glu Ile Leu Gly Gly Phe Pro Val Leu His Ser
785                 790                 795                 800
Leu His Leu Leu Ile Val Asn Thr Glu Arg Glu Asp Val Met Thr Cys
                805                 810                 815
Gly Cys Gly Gly Phe Lys Asn Leu Lys Cys Cys Ser Ile Thr Lys Pro
            820                 825                 830
Leu Lys Phe Val His Gly Ala Met Pro Arg Leu Glu Val Leu Asp Phe
        835                 840                 845
His Phe Ser Val Gln Leu Leu Thr Asp Ser Asn Gln Glu Phe Asp Phe
    850                 855                 860
Asp Phe Gly Leu Gly Asn Leu His Trp Leu Gln Gln Ala Ile Val Gln
865                 870                 875                 880
Ile Thr Ala Leu Gly Glu Glu Val Glu Ser Val Gly Arg Ala Gln Val
                885                 890                 895
Ala Leu Arg Asp Ala Ile Arg Thr His Pro Asn Arg Pro Thr Leu Glu
            900                 905                 910
Ile Asn Leu Phe Gly Gln Thr Ile Pro Pro Glu Leu Pro Lys Gln Asp
        915                 920                 925
Asp Asp Gly Ala Lys Ile Val Glu Ile Ser Pro Ala Glu Ser Ser Arg
    930                 935                 940
Gln Ala Gln Glu Arg Glu Lys Arg Ser Ile Asp Val Ala Thr Lys Lys
945                 950                 955                 960
Ala Thr Arg Val Pro Ser Phe Tyr Thr Lys Ser Ser Ile Asp Glu Pro
                965                 970                 975
Met Asp Gln Leu Ile Asn Met Leu Ser Val Val Asp Asp Glu Ala Tyr
            980                 985                 990
Thr Lys Asn Ile Lys Ile Leu Ser Ile Val Arg Ser Glu Gly Leu Gly
        995                 1000                1005
Lys Thr Thr Leu Ala Gln Lys Ala Phe Glu Glu Leu His Ser Gln
    1010                1015                1020
Phe Asp Arg Gly Ala Phe Val Leu Leu Gly Gln Asn Pro Asp Leu
    1025                1030                1035
Arg Arg Val Phe Ala Asp Ile Leu Arg Gly Leu Asp Lys Gln Arg
    1040                1045                1050
Tyr Ile Asp Phe Pro Val Ala Ile Leu Asp Leu Val Asp Leu Ile
    1055                1060                1065
Trp Leu Val Arg Lys Ser Leu Ile Asn Lys Arg Phe Phe Ile Val
    1070                1075                1080
Phe Asp Asp Ile Cys Asp Val Lys Ala Trp Glu Ile Ile Lys Cys
    1085                1090                1095
Ala Leu Ile Glu Asn Asn Asn His Ser Val Val Leu Thr Thr Ser
    1100                1105                1110
Arg Asn Thr Gly Ile Thr Glu Ile Ile Gly Gly Ser Lys Gln Leu
    1115                1120                1125
Gln Pro Leu Ser Ala Thr Ile Ser Lys Asn Leu Leu Cys Lys Arg
    1130                1135                1140
Leu Phe Gly Ser Ala Gly Lys Cys Pro Ser Glu Leu Val Asn Ile
    1145                1150                1155
Cys Asp Asn Leu Val Glu Glu Cys Gly Gly Ile Leu Ser Val Ile
    1160                1165                1170
Asp Glu Thr Val Thr Leu Leu Ala Ser Ile Pro Pro Thr Val Glu
    1175                1180                1185
Asn Trp Glu Ala Val Tyr Ala Arg Arg Met Leu Asp Arg Ser Tyr
    1190                1195                1200
Pro Gly Leu Thr Asp Ser Leu Lys Asn Cys Leu Leu Tyr Phe Thr
    1205                1210                1215
Met Phe Arg Arg Gly His Glu Ile Ser Gly Glu His Leu Ile Cys
    1220                1225                1230
Ala Trp Ile Ala Glu Gly Phe Val His Gly Gln Glu Val Ala Glu
    1235                1240                1245
Thr Tyr Leu Ser Asp Leu Val Lys Lys Lys Leu Ile Asp Ala Val
    1250                1255                1260
Glu Val Asp Ala Gly Gly Lys Val Leu Thr Cys Arg Met Tyr Asp
    1265                1270                1275
Leu Val His Asp Phe Ile Val Ser Lys Ser Ile Glu Glu Arg Phe
    1280                1285                1290
Val Tyr Ile Leu Asn Asp Ser Glu Gly Arg Asp Leu Ser Glu Ala
    1295                1300                1305
Val His Val His Gln Arg Leu Tyr Ile Gln Gly His Asn Asn Lys
    1310                1315                1320
Glu Leu Asp Leu Gln Ile Pro Trp Leu Pro Gln Val Lys Ser Leu
    1325                1330                1335
Val Ser Cys Gly Thr Ala Pro Ser Ile Leu Lys Phe Lys Gly Leu
    1340                1345                1350
His Val Met Asp Leu Gly Ala Cys Glu Ser Leu Gln Ala Ser His
    1355                1360                1365
Leu Lys Gly Ile Asn Asn Val Ser Ser Leu Arg Tyr Leu Val Ile
    1370                1375                1380
Gly Gly Lys Cys Ile Ser Gly Ile Pro Lys Glu Ile Ala Lys Leu
    1385                1390                1395
Glu His Leu Arg Thr Leu Asp Leu Ser Ala Ser Gly Leu Asn Glu
    1400                1405                1410
Leu Pro Glu Tyr Val Phe Met Ile Arg Lys Leu Glu Arg Leu Ile
    1415                1420                1425
Val Asn Ser Gln Met Lys Ile Ser Tyr Gly Ile Ala Lys Met Ser
    1430                1435                1440
Ala Leu Gln Glu Leu Gly Asp Ile Asn Val Thr Asp Pro Glu Leu
    1445                1450                1455
Leu Lys Ser Leu Cys Lys Leu Thr Lys Leu Arg Val Leu Arg Ile
    1460                1465                1470
Ser Ile Trp Ser Trp Asp Asp Ser Leu Lys Asn Tyr Phe Lys Gln
    1475                1480                1485
Leu Cys Asp Asn Leu Arg Ser Leu Val Gln Cys Thr Glu Asn Ile
    1490                1495                1500
Gln Ser Leu Ser Ile Met Thr Cys Cys Ser Leu Val Phe Met Asp
    1505                1510                1515
Asp Leu Gly Glu Asn Trp Thr Pro Gln Cys Leu Gln Lys Leu Glu
    1520                1525                1530
Val Gly Cys Ser Ala Phe Asp Ile Leu Pro Ser Trp Phe Gly Ser
    1535                1540                1545
Leu Ser Ser Ile Ser Thr Leu Thr Ile Glu Val Tyr Lys Leu Ser
    1550                1555                1560
Gln Asp Ile Ile Asp Thr Leu Gly Arg Leu Ala Gly Leu Gly Ser
    1565                1570                1575
Leu Ser Leu Thr Ser Lys Gln Val Pro Lys Gly Tyr Phe Val Ile
    1580                1585                1590
Gly Ser Asp Arg Phe Asn Lys Leu Gln Ser Leu Lys Phe Val Ser
    1595                1600                1605
Asn Ala Met Val Glu Met Phe Pro Arg Gln Gln Ser Asn Gly Thr
    1610                1615                1620
Glu Gln Leu Lys Arg Leu Met Ile Val Phe His Ala Ser Arg Thr
    1625                1630                1635
Gln Asp Val Asn Lys Asp Phe Cys Phe Gly Leu Glu Asn Leu Ser
    1640                1645                1650
Ser Leu Glu His Val Arg Val Glu Ile Ile Cys Phe Asp Ala Ser
    1655                1660                1665
His Asn Met Val Lys Asn Ala Glu Ala Ala Val Gln Lys Ala Ile
    1670                1675                1680
Ser Gly Thr Ser Ile Ala Asn Leu Glu Ile Arg Arg Leu Gln Glu
    1685                1690                1695
Asn Ser Met Thr Gln Asp Glu Ala Asp Leu Cys Asp Ala Val Gln
    1700                1705                1710
Glu Gln Asn Asn Gln Lys His Gln Lys Met Lys Arg Ile Tyr Ala
    1715                1720                1725
Thr Gly Asp Trp Gln Leu Glu Ile Ala His Ser Ser Met Glu Ser
    1730                1735                1740
Gln Asp Gly Tyr Leu Thr Ser Leu Pro Asn Gln Glu Ser Ala Asp
    1745                1750                1755
Val Val Gly Ser Asp Ser Ile Val Glu Pro Leu Val Asn Glu Met
    1760                1765                1770
Asn Ser Gln Thr Ile Lys Arg Asp Gln Ser Thr Asn Phe Ser Glu
    1775                1780                1785
Asp Glu Asp Leu Met Leu Val Ser Ser Tyr Leu Asn Val Ser Lys
    1790                1795                1800
Asp Ser Ile Thr Gly Arg Asp Lys Lys Glu Gly Thr Phe Trp Glu
    1805                1810                1815
Arg Val Trp Glu Tyr Tyr Asn Lys Asn Arg Thr Phe Glu Ser Asp
    1820                1825                1830
His Ser Trp Ser Ser Leu Lys His Arg Trp Leu Ala Ile Gln Lys
    1835                1840                1845
Glu Val Asn Ile Phe Gln Gly Tyr Tyr Asp Ala Ile Glu Arg Lys
    1850                1855                1860
Asn Gln Ser Gly Gln Thr Ser Asp Asp Lys His Ala Glu Ala Glu
    1865                1870                1875
Val Glu Phe Arg Glu Lys Gln Gly Lys Ala Phe Ser Val Phe His
    1880                1885                1890
Val Trp Met Ile Leu Arg His Glu Pro Lys Trp Ala Phe Arg Glu
    1895                1900                1905
Ser Lys Ile Lys Asp Gln His Glu Ala Asn Asn Ala Asn Thr Asp
    1910                1915                1920
Ala Pro Ala Asn Ile Tyr Arg Pro Gln Gly Arg Lys Ala Glu Lys
    1925                1930                1935
Glu Lys Ala Arg Ala Arg Lys His Gly Gly Ser Asp Val Asp Gly
    1940                1945                1950
Asp Pro Phe Ile Glu Glu Val Lys Asn Met Arg Glu Ala Arg Glu
    1955                1960                1965
Glu Thr Glu Arg Asp Arg Lys Thr His Asp Asp Lys Phe Tyr Glu
    1970                1975                1980
Leu Glu Lys Ser Lys Leu Glu Leu Glu Arg Asp Arg His Asp Lys
    1985                1990                1995
Glu Ile Met Gln Thr Asp Thr Ser Thr Met Asp Glu Glu Ser Lys
    2000                2005                2010
Gln Tyr Phe Lys Leu Met Lys Gln Glu Ile Leu Ala Arg Arg Phe
    2015                2020                2025
Gly Ser Ser Gln Pro
    2030
<210>  27
<211>  7129
<212>  DNA
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  27
gtttttacat catgtttttg tttttttaaa tcgggatcga aaataatccg aacaaaacta      60
ataaaatcag ttatacgata acggtcgatt ctagattttc tcatccaact tttatcctta     120
taagcgagcc ttttggtccg ttagatctga attcaatggc tgcccgcatg tcgcacgtag     180
gccctatggt ttatttagtg catggtatta aaaaaacgcc aagaacatgt ttgaccgcat     240
gaaaaactct tcaccaccaa cagtgatgag caggtacgtg tacaactatg tgtactcgtt     300
tggcttcaaa gctgctcccg tagtttgttg aatttatact gaaatataca agaaggtaca     360
ggtttgaaaa caaggtgccg ggctagagtt ctggatatct cataaataat catagtccgt     420
gcagtgtgat gaataaatga ataaagtttg gcggtgctca tttaattgct caaatagcta     480
cgatcgagtg ctgtggctga cgcccatata aaaaatcgtc cataccagag atgtactcaa     540
gcatgcaccc gccagcaagg aaaaaacaat aaattaaaca actaccaatg cttcaggcat     600
catcttctca acaactcaat atttatttaa ttttttctcg agtttaatca ttgccgtgag     660
tattttgtca ttcatgaaag gattatatga gcttttgatc aactataagg gccttttagg     720
taagtggcta aattatagat tatctgtata acaccgactc cctttgtcca caagacattg     780
tcatggtaat attttgtcct aagtcaaata aacttaaggt tgactaataa atttgtccat     840
atttttctcc gaaatagtgt actgcaaaaa tatgttccag gataatctaa taatgtttat     900
ttggtaatat agatatatgt atttttttac atacatatac ataagtttag acaaaaactt     960
gaatgttttg ctcttttaaa catggaatat acaaataact acggtgattt gatacccggt    1020
gtcatcgcta gcgattttca taatggatgg tcaacctaat agtgagcgat catgcgaata    1080
aaaggccatg ttgggtggct aacaaggtgg caactaccaa tctaatcttg caaagctaat    1140
gtcaccttgt accatctgct acatggattc ccaaccctac aaagactatt tggctgtcaa    1200
gtgtcaaatg tactctccac gaatcattaa ccagacaagg actctctaag atacatctcc    1260
aagactctca aggcgttgaa atctttgatc acatgggttt tcatttctcc tgtggttgag    1320
gttgagaggt taagggagag aatgagggag gggaagatgc atgtggacag tggactccat    1380
gctggatttt gccaacgact cagtatgcat gtgagatgga tgctaaccta agtgtactat    1440
gcagtttaat aaagggcgtt tgacatgtat aattcaatca cattttatga tgatataaaa    1500
acatgaaggc actactagtg cccctttttt cattcttttt ccaaagtaaa ccaaggtagc    1560
tcaggtctac tggttaagtg agggagctga ggtttcattc tggtgaccac tagcggtgtc    1620
gacacggcgg gatggcccca cgtgggcgcc agcggtgtca gtgacggaga gctcctcaga    1680
tctgaactcc agtgggcggc gacccttcac cgcggaggtt gacccccaaa ccgccgtctc    1740
gcactctccc gcctccctat aactaatctc ctcctttcca ctccccgccg cgcgaaacca    1800
cacgcggcgg ccgcctcctc caccacgccg atggcgaccc ctcactcacc cagacccagc    1860
tgaacaactc cctccaccaa gcacacgcaa gcaggagaag gagcaggagc aggagcagga    1920
gccgagggcg gcgacagaga atagaggtag aggaaggcga tcgacgagga gctcggtctc    1980
acctgctagc ggcggcgacc atggaccgga tgctgctcga ccagctggcc ggcgaggccc    2040
tgcgggaggt gctgcacgcg gtgcagggca ccctgttctg ccgctccacc gccgagcgcc    2100
tgcgccggag cgtcgagccg ctgctgccgc tcgtccaggg cctcggcccg cacagcaccc    2160
agcgctccgc gggggagctc ggcgagctcg cggcgcgggt cagggaggcg ctcgacctgg    2220
cgcgccgcgc cgccgcgtcc ccgcgctgga acgtctaccg cgccgcgcag ctgtcgcgcc    2280
ggatggaggc ggccgaccgc ggcatcgcgc gctggctgga gcgccacgcc cccgcgcacg    2340
tcatcggcgg cgtgcgcagg ctccgcgacg aggccgacgc gcgcatcggt cgcctcgagc    2400
gccgcgtcga ggagatcgcc gccgccaccg cgcagccgcc gccccccgcc ctctccgtcc    2460
ccgtcgcgcc gccgccgcac aagggcgtgc ccatgccgat ggaggcgccg ctcgctaagc    2520
ccgccttcgt cgctatgacg aaggaggtgc cgcagcacaa gggcatggct atgtcggagc    2580
cggtgccggc gaaggcggcg cccgccaaag ccggggtgat ggccatggac atcgccgacg    2640
gacacgaaga cgcggagggg atggttggcg gcggcgtcaa ggtggccaag gaaaaggtga    2700
aggagatggt tatgagcggc ggcggcagct gggaggtggt cgggatctcc ggcatgggcg    2760
gcagcggcaa gaccacgctc gccatggagg tcttcaggga tcacaaggtc cgaggtaagc    2820
agaacatcga ccaccagatc caaaccttct tttccttcag ttctttccaa atcctgtgca    2880
aaggtcgcgt ctttcacagg aatcgtcctg tccttccctg caaaaattgc atcttcccca    2940
tgaatagtgg gtgctaaatt ctccaaattg gcggcatagc atcgtaggtg gttggtttgc    3000
gtgcgtgtcg tgcaattagg taaaggcgag gttgatgctt tcgtttttcc ccaaaccaca    3060
tgttcggtca aatttggcgc tttgaccacc agctagtgac aactgtactg ttgtgatggg    3120
gtttcagatt gcttttgtga attaccatgc ttggacttga gtaaccttat cgtgtcgtgt    3180
tcatggacca tggtggctac ttaatcttaa atcaagatac gtatctgctt aacgaaccgc    3240
acatgagact aatcaaatct atttcacata gaataaaccc aattcagatc caagtaacct    3300
gcttttttga agaaaaaaaa atctggagct gtgctaattt taggatctcc tttcagtgca    3360
aggaattggg atgacgatgt tgatttagac ctagtttagg tactctagta ttgaccataa    3420
tctatatata ttgaggtgga ttaaggtgta acttaaacta atttacaccc caatccactt    3480
taacacatgt ggattgaggt caataccaga atacccctaa tgccgcaacc cgggtttgta    3540
gctccatcat ctctgttttc caccaaaaaa ctcatagtaa acttaaattc aattgtcaca    3600
acaacatata ttcaacgatt ttaagtgact gctatcccaa accgtagctg atcttagggc    3660
atgtacagtg gagagacacc aaaacggttc tccaagcaca ggagacaact aagagactct    3720
attgtacagt ggagtgtcta taaacgtagt ctattaataa atacaaaatt aaatgtattt    3780
gtatagcatc agatcgatag aacagacgac aaattcgtac agtgggaagt gaggcgtctg    3840
ttgctacttg gtttacgagc cagaggcgtc tcttcacgga gagacggctc taagattttt    3900
ttgcaaataa ccccttaaac accttaagag cctccacatt aaacaccact gtacatgtcc    3960
ttaacttcat ggtatgcttt gtggtcaaca tggtgattat ggatctcatc aaaagcccat    4020
ggctacatat ctgctccctg tttgcaagct ctctctctcc cccacccctt ttcatgattc    4080
tgacatagtt tctttttttc tacagcctac ttcaacgaca ggatcttctt cgagacgatc    4140
tcgcagtccg cgaatctgga ggccatcaag atgaagctgt gggagcagat cagcggcaac    4200
atggtgctgg gtacatacaa ccagatccca gaatggcagc tcaagctagg accaagggac    4260
cgaggacccg tccttgtgat cctcgacgat gtttggtctc tcccgcagct tgaggagctc    4320
atcttcaagt tccctgggtg caagacccta gtcgtatcaa ggttcaagtt ccccacgctg    4380
gtgaaacaga cgtatgagat gcagctgcta gacgaggcgg cggctctgtc cgtcttctgc    4440
cgcgctgcgt tcgaccagga gtgtgttccg cagaccgccg acaagagatt ggtcaggcag    4500
gtctctgcag agtgcagagg tctccctctg gctctgaagg tcatcggcgc gtcgctgcgc    4560
gaccagcctc cgaagatttg gctcagcgcc aaaaaccggt tgtctcgagg agaggccatt    4620
tctgactgcc atgagaccaa gcttctggag aggatggcgg ccagtgtcga gtgcttgtcc    4680
gagaaggtta gggactgttt ccttgacctg ggctgcttcc cggaggacaa gaagatcccc    4740
ctcgacgtct tgatcaacat ctggatggag atccatgacc ttgatgagcc agatgctttt    4800
gccatcttgg ttgagctttc gaacaagaac cttcttaccc tcgttaacga tgcacagtac    4860
gtatcatcgg acatttatgt gcttcaaaat gttcagaact tagatatccc aataacaggt    4920
ttttctaact ctgctgttct atacgtgcag gaacaaggct ggagatctgt acagtagcta    4980
ccatgactac tcggtgacac agcacgacgt gttgagagat cttgctcttc acatgagcgg    5040
gcgtgacccg ctcaacaagc gcaggcggtt ggtgatgccg agaagggaag aaacacttcc    5100
gagggattgg cagaggaaca aggatgctcc gtttgaagct cagatagtct ccattcatac    5160
aggtatagcg ttagtagtta attgttcttc attacatttg tagatattca tcgctaacaa    5220
ctcgtcatcc aacttattta gtgcgcttat tctgaattcc tactgaaatt tccaactatt    5280
tccaaaactc caggcgaaat gaaagaatcc gactggttcc agatgagctt ccccaaggca    5340
gaagtgctga tcctcaactt cgcgtcgagc ctgtactacc tgccgccgtt catcgcgacg    5400
atgcagaacc tgaaggccct ggtgctgatc aactacggca gcagcagcag cagcgcagcc    5460
ctggacaacc tctccgcctt caccacgctg agcgggctga ggagcctgtg gctggagaag    5520
atcaggctgc cgccgctgcc caagacgacg atcccgctga ggaacctgca caagatctcg    5580
ctcgtgctct gcgagctgaa cagcagtcta agagggtcga cgatggacct gtcgacgacg    5640
ttcccgcgcc tgtccaacct gacgatcgac cactgcatag acctcaagga gctgccgccg    5700
agcgtctgcg agatcgggtc cctggagacc atctccatct ccaactgcca cgacctcacc    5760
gagctgccat acgagctggg gcggctgcgc tgcctcagca tcctccgcgt gtacgcctgc    5820
ccggcgctgt ggcggctgcc ggcgtcggtg tgcagcctga agcggctcaa gtacctggac    5880
atctcgcagt gcatcaacct gacggacctc cccgaggagc tcggccacct gacgagcctg    5940
gagaagatcg acatgcgcga gtgctcgcgc ctcaggagcc tccccaggtc gtcgtcctcg    6000
ctcaagtccc tcggacacgt cgtgtgcgac gaggagacgg cgctgctgtg gcgtgaggcc    6060
gagcaggtca tccctgacct ccgcgtgcag gtggccgagg agtgctacaa cctggactgg    6120
ctcgcggact gatgtctcgt tcctggatgg atgctgcggc gtccaaactg accttgtaca    6180
tatgtgatgt tgcttccccc caaaccgagc gtagggaaac tcatcaatcc acctgccaat    6240
tttgacgtgt tcagtcagtg ttcgtcatgc atccatccac tctttattct tgggtggcaa    6300
agcctcccct tcatccaaaa tacaaatgca cacaaaacaa ataaccacag aaaacacaac    6360
tgtacaaaag gctaaagata caacattccg atttttcagc tgcagcaatg ccagcaaaga    6420
gaggccaagc agggttctca aaatgcagga actacatagg tacacagtgg atagctgtac    6480
agtaacgaac taaggatcaa cggttagaat cagcaatggc gtcaaaacga tcaccatgca    6540
acagcttgaa caccgatcac ttcttaagct tgagctgttc gtccagagca tcagcgagta    6600
cttcttaaac atgacctgat ctacagtttc caccccaacc gttcgtggtt acgtttcaca    6660
tactatcact ccactgctcc cgatgtcgag gactcgaggt ccaggtccat gtcgtcgtca    6720
aggacgtcgt cgatgcacag aaactgggtc gtccagcggg cgccatcggc cggcactgtt    6780
gtctccgcca tgctctccga ctcctcgtag ttcactgtgc cgtcgcccat gaggtcagct    6840
gggaggttcc tgacgaacca aggatgactc tttatctcag gcatcgtcgt gattctctgc    6900
aaagagcatg cgttatggca catcgatctg aaagttctga acaatcaaag tgactgacgc    6960
tgcaaagggg aataagctag tatggcatca ttcacatctg ctgggttggc caaaaaaaaa    7020
accttcgcat tctggagata cgcgggcgta gtcaggaacc gcgtaccgaa cacccagtat    7080
attattctgc aaattggcat cggcatttag atgactagat tttggatat                7129
<210>  28
<211>  2616
<212>  DNA
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  28
atggaccgga tgctgctcga ccagctggcc ggcgaggccc tgcgggaggt gctgcacgcg      60
gtgcagggca ccctgttctg ccgctccacc gccgagcgcc tgcgccggag cgtcgagccg     120
ctgctgccgc tcgtccaggg cctcggcccg cacagcaccc agcgctccgc gggggagctc     180
ggcgagctcg cggcgcgggt cagggaggcg ctcgacctgg cgcgccgcgc cgccgcgtcc     240
ccgcgctgga acgtctaccg cgccgcgcag ctgtcgcgcc ggatggaggc ggccgaccgc     300
ggcatcgcgc gctggctgga gcgccacgcc cccgcgcacg tcatcggcgg cgtgcgcagg     360
ctccgcgacg aggccgacgc gcgcatcggt cgcctcgagc gccgcgtcga ggagatcgcc     420
gccgccaccg cgcagccgcc gccccccgcc ctctccgtcc ccgtcgcgcc gccgccgcac     480
aagggcgtgc ccatgccgat ggaggcgccg ctcgctaagc ccgccttcgt cgctatgacg     540
aaggaggtgc cgcagcacaa gggcatggct atgtcggagc cggtgccggc gaaggcggcg     600
cccgccaaag ccggggtgat ggccatggac atcgccgacg gacacgaaga cgcggagggg     660
atggttggcg gcggcgtcaa ggtggccaag gaaaaggtga aggagatggt tatgagcggc     720
ggcggcagct gggaggtggt cgggatctcc ggcatgggcg gcagcggcaa gaccacgctc     780
gccatggagg tcttcaggga tcacaaggtc cgagcctact tcaacgacag gatcttcttc     840
gagacgatct cgcagtccgc gaatctggag gccatcaaga tgaagctgtg ggagcagatc     900
agcggcaaca tggtgctggg tacatacaac cagatcccag aatggcagct caagctagga     960
ccaagggacc gaggacccgt ccttgtgatc ctcgacgatg tttggtctct cccgcagctt    1020
gaggagctca tcttcaagtt ccctgggtgc aagaccctag tcgtatcaag gttcaagttc    1080
cccacgctgg tgaaacagac gtatgagatg cagctgctag acgaggcggc ggctctgtcc    1140
gtcttctgcc gcgctgcgtt cgaccaggag tgtgttccgc agaccgccga caagagattg    1200
gtcaggcagg tctctgcaga gtgcagaggt ctccctctgg ctctgaaggt catcggcgcg    1260
tcgctgcgcg accagcctcc gaagatttgg ctcagcgcca aaaaccggtt gtctcgagga    1320
gaggccattt ctgactgcca tgagaccaag cttctggaga ggatggcggc cagtgtcgag    1380
tgcttgtccg agaaggttag ggactgtttc cttgacctgg gctgcttccc ggaggacaag    1440
aagatccccc tcgacgtctt gatcaacatc tggatggaga tccatgacct tgatgagcca    1500
gatgcttttg ccatcttggt tgagctttcg aacaagaacc ttcttaccct cgttaacgat    1560
gcacagaaca aggctggaga tctgtacagt agctaccatg actactcggt gacacagcac    1620
gacgtgttga gagatcttgc tcttcacatg agcgggcgtg acccgctcaa caagcgcagg    1680
cggttggtga tgccgagaag ggaagaaaca cttccgaggg attggcagag gaacaaggat    1740
gctccgtttg aagctcagat agtctccatt catacaggcg aaatgaaaga atccgactgg    1800
ttccagatga gcttccccaa ggcagaagtg ctgatcctca acttcgcgtc gagcctgtac    1860
tacctgccgc cgttcatcgc gacgatgcag aacctgaagg ccctggtgct gatcaactac    1920
ggcagcagca gcagcagcgc agccctggac aacctctccg ccttcaccac gctgagcggg    1980
ctgaggagcc tgtggctgga gaagatcagg ctgccgccgc tgcccaagac gacgatcccg    2040
ctgaggaacc tgcacaagat ctcgctcgtg ctctgcgagc tgaacagcag tctaagaggg    2100
tcgacgatgg acctgtcgac gacgttcccg cgcctgtcca acctgacgat cgaccactgc    2160
atagacctca aggagctgcc gccgagcgtc tgcgagatcg ggtccctgga gaccatctcc    2220
atctccaact gccacgacct caccgagctg ccatacgagc tggggcggct gcgctgcctc    2280
agcatcctcc gcgtgtacgc ctgcccggcg ctgtggcggc tgccggcgtc ggtgtgcagc    2340
ctgaagcggc tcaagtacct ggacatctcg cagtgcatca acctgacgga cctccccgag    2400
gagctcggcc acctgacgag cctggagaag atcgacatgc gcgagtgctc gcgcctcagg    2460
agcctcccca ggtcgtcgtc ctcgctcaag tccctcggac acgtcgtgtg cgacgaggag    2520
acggcgctgc tgtggcgtga ggccgagcag gtcatccctg acctccgcgt gcaggtggcc    2580
gaggagtgct acaacctgga ctggctcgcg gactga                              2616
<210>  29
<211>  871
<212>  PRT
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  29
Met Asp Arg Met Leu Leu Asp Gln Leu Ala Gly Glu Ala Leu Arg Glu
1               5                   10                  15
Val Leu His Ala Val Gln Gly Thr Leu Phe Cys Arg Ser Thr Ala Glu
            20                  25                  30
Arg Leu Arg Arg Ser Val Glu Pro Leu Leu Pro Leu Val Gln Gly Leu
        35                  40                  45
Gly Pro His Ser Thr Gln Arg Ser Ala Gly Glu Leu Gly Glu Leu Ala
    50                  55                  60
Ala Arg Val Arg Glu Ala Leu Asp Leu Ala Arg Arg Ala Ala Ala Ser
65                  70                  75                  80
Pro Arg Trp Asn Val Tyr Arg Ala Ala Gln Leu Ser Arg Arg Met Glu
                85                  90                  95
Ala Ala Asp Arg Gly Ile Ala Arg Trp Leu Glu Arg His Ala Pro Ala
            100                 105                 110
His Val Ile Gly Gly Val Arg Arg Leu Arg Asp Glu Ala Asp Ala Arg
        115                 120                 125
Ile Gly Arg Leu Glu Arg Arg Val Glu Glu Ile Ala Ala Ala Thr Ala
    130                 135                 140
Gln Pro Pro Pro Pro Ala Leu Ser Val Pro Val Ala Pro Pro Pro His
145                 150                 155                 160
Lys Gly Val Pro Met Pro Met Glu Ala Pro Leu Ala Lys Pro Ala Phe
                165                 170                 175
Val Ala Met Thr Lys Glu Val Pro Gln His Lys Gly Met Ala Met Ser
            180                 185                 190
Glu Pro Val Pro Ala Lys Ala Ala Pro Ala Lys Ala Gly Val Met Ala
        195                 200                 205
Met Asp Ile Ala Asp Gly His Glu Asp Ala Glu Gly Met Val Gly Gly
    210                 215                 220
Gly Val Lys Val Ala Lys Glu Lys Val Lys Glu Met Val Met Ser Gly
225                 230                 235                 240
Gly Gly Ser Trp Glu Val Val Gly Ile Ser Gly Met Gly Gly Ser Gly
                245                 250                 255
Lys Thr Thr Leu Ala Met Glu Val Phe Arg Asp His Lys Val Arg Ala
            260                 265                 270
Tyr Phe Asn Asp Arg Ile Phe Phe Glu Thr Ile Ser Gln Ser Ala Asn
        275                 280                 285
Leu Glu Ala Ile Lys Met Lys Leu Trp Glu Gln Ile Ser Gly Asn Met
    290                 295                 300
Val Leu Gly Thr Tyr Asn Gln Ile Pro Glu Trp Gln Leu Lys Leu Gly
305                 310                 315                 320
Pro Arg Asp Arg Gly Pro Val Leu Val Ile Leu Asp Asp Val Trp Ser
                325                 330                 335
Leu Pro Gln Leu Glu Glu Leu Ile Phe Lys Phe Pro Gly Cys Lys Thr
            340                 345                 350
Leu Val Val Ser Arg Phe Lys Phe Pro Thr Leu Val Lys Gln Thr Tyr
        355                 360                 365
Glu Met Gln Leu Leu Asp Glu Ala Ala Ala Leu Ser Val Phe Cys Arg
    370                 375                 380
Ala Ala Phe Asp Gln Glu Cys Val Pro Gln Thr Ala Asp Lys Arg Leu
385                 390                 395                 400
Val Arg Gln Val Ser Ala Glu Cys Arg Gly Leu Pro Leu Ala Leu Lys
                405                 410                 415
Val Ile Gly Ala Ser Leu Arg Asp Gln Pro Pro Lys Ile Trp Leu Ser
            420                 425                 430
Ala Lys Asn Arg Leu Ser Arg Gly Glu Ala Ile Ser Asp Cys His Glu
        435                 440                 445
Thr Lys Leu Leu Glu Arg Met Ala Ala Ser Val Glu Cys Leu Ser Glu
    450                 455                 460
Lys Val Arg Asp Cys Phe Leu Asp Leu Gly Cys Phe Pro Glu Asp Lys
465                 470                 475                 480
Lys Ile Pro Leu Asp Val Leu Ile Asn Ile Trp Met Glu Ile His Asp
                485                 490                 495
Leu Asp Glu Pro Asp Ala Phe Ala Ile Leu Val Glu Leu Ser Asn Lys
            500                 505                 510
Asn Leu Leu Thr Leu Val Asn Asp Ala Gln Asn Lys Ala Gly Asp Leu
        515                 520                 525
Tyr Ser Ser Tyr His Asp Tyr Ser Val Thr Gln His Asp Val Leu Arg
    530                 535                 540
Asp Leu Ala Leu His Met Ser Gly Arg Asp Pro Leu Asn Lys Arg Arg
545                 550                 555                 560
Arg Leu Val Met Pro Arg Arg Glu Glu Thr Leu Pro Arg Asp Trp Gln
                565                 570                 575
Arg Asn Lys Asp Ala Pro Phe Glu Ala Gln Ile Val Ser Ile His Thr
            580                 585                 590
Gly Glu Met Lys Glu Ser Asp Trp Phe Gln Met Ser Phe Pro Lys Ala
        595                 600                 605
Glu Val Leu Ile Leu Asn Phe Ala Ser Ser Leu Tyr Tyr Leu Pro Pro
    610                 615                 620
Phe Ile Ala Thr Met Gln Asn Leu Lys Ala Leu Val Leu Ile Asn Tyr
625                 630                 635                 640
Gly Ser Ser Ser Ser Ser Ala Ala Leu Asp Asn Leu Ser Ala Phe Thr
                645                 650                 655
Thr Leu Ser Gly Leu Arg Ser Leu Trp Leu Glu Lys Ile Arg Leu Pro
            660                 665                 670
Pro Leu Pro Lys Thr Thr Ile Pro Leu Arg Asn Leu His Lys Ile Ser
        675                 680                 685
Leu Val Leu Cys Glu Leu Asn Ser Ser Leu Arg Gly Ser Thr Met Asp
    690                 695                 700
Leu Ser Thr Thr Phe Pro Arg Leu Ser Asn Leu Thr Ile Asp His Cys
705                 710                 715                 720
Ile Asp Leu Lys Glu Leu Pro Pro Ser Val Cys Glu Ile Gly Ser Leu
                725                 730                 735
Glu Thr Ile Ser Ile Ser Asn Cys His Asp Leu Thr Glu Leu Pro Tyr
            740                 745                 750
Glu Leu Gly Arg Leu Arg Cys Leu Ser Ile Leu Arg Val Tyr Ala Cys
        755                 760                 765
Pro Ala Leu Trp Arg Leu Pro Ala Ser Val Cys Ser Leu Lys Arg Leu
    770                 775                 780
Lys Tyr Leu Asp Ile Ser Gln Cys Ile Asn Leu Thr Asp Leu Pro Glu
785                 790                 795                 800
Glu Leu Gly His Leu Thr Ser Leu Glu Lys Ile Asp Met Arg Glu Cys
                805                 810                 815
Ser Arg Leu Arg Ser Leu Pro Arg Ser Ser Ser Ser Leu Lys Ser Leu
            820                 825                 830
Gly His Val Val Cys Asp Glu Glu Thr Ala Leu Leu Trp Arg Glu Ala
        835                 840                 845
Glu Gln Val Ile Pro Asp Leu Arg Val Gln Val Ala Glu Glu Cys Tyr
    850                 855                 860
Asn Leu Asp Trp Leu Ala Asp
865                 870
<210>  30
<211>  2943
<212>  DNA
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  30
atggaggctg ccctgctgag cgggttcatc aaaaccatcc tgccaaggct cttctcactg      60
gtacaaggga gatacaagct gcacaagggc ctcaagagcg acatcaaatc gctggagaaa     120
gagctccata tgatcgctgt tacaatcgat gaacaaatct cgctggggag gaaggatcag     180
ggagctgtgc tgagcctctc aattgatgag ctgcatgaac tggctcacca aatcgaggac     240
tccatagatc gcttcttgta ccatgtgacc agggagcagc aagcatcctt ttttcgtcgg     300
actgtacggt cgccgaagac tctgttgtca cgtcagcggc tggctgccga ggttcagttc     360
ctgaagaaga taccggagga ggcgcaccag cgagagaaga ggtacagggt cttcgccggc     420
ctttcttcct ctacccggca cactgaatcg tcttcctgtt cgtctgtatc tgatccgcac     480
acacttaagg ccgacgtcgt cggcatcgac ggtcccaggg acgagcttgt gcagcagtta     540
accgaagagg cagagggcct aacaaagcag ctcaaggtga tctccatcgt cgggatccat     600
ggctccggca agaccgtcct tgccagagag gtatacgaga gcgacgtcgg ccggcagttc     660
agtctccggg catgggtttc tgctactgac agaggtccga gagaggtgct catggagatc     720
ctccgaaatt ttggtaggcc agtggtggat agctctagta ttgaccagct tacggtagat     780
ctcaggaaac acttgggtga gaaaagctat ttcattgtaa tcgatggcat gcaaacagat     840
cagtggagca ccattgaaac tgccttccca gaaaacaatg ttgttagcag cagagtaatt     900
gttacaacaa caatccggtc agtagctaat tcttgcagct cttctaacgg ttatgtgcac     960
aaaatgaaaa gacttagtga cgaacactca gagcaattgt ttatcaagaa agcttgccca    1020
acaaaatatt caggttatac tcgaccggaa tcaaaagaag ttctgaagaa atgtgatggt    1080
caaccacttg ctcttgttac tatgggccaa ttcttgagga aaaatggttg gcccacagga    1140
cccaactgcg aaaatgtgtg tagagatctt agacgacatc tggagcagga tgatacattg    1200
gagagaatgc gaagggtgct tatccacagc ttatctagtc ttcctagcca tgttcccaaa    1260
gcctgccttt tgtattttgg tatgtttcca tgtgatcatc ccataaagag gaagagcctg    1320
atgaggcgat ggttagcaga gggatttgta caaacacagc cttcatctag tgaaaacttc    1380
aacaccctca tagaccggaa tattattgag cccatcggca tatgtaacga tgatcaggta    1440
aagacatgca aaacatatgg catgatgcac gagttcattt tgttaatgtc cacctcccat    1500
gacttcatta ccctgctttg taataataaa gttgaacaca aatatgtgcg tcggctttct    1560
ctccatcatc atagtgctac aagtggcagt ttttcggtca tcgacttatc tcttgttaga    1620
tctctgatgg tttttgggga ggctggcaaa actattttga gtttccgaaa gtacgagcta    1680
ttgagagtct tggatcttga acaatgtacc gacttggaag atgatcacct caaagacata    1740
tgcaaccttt ttcttatgaa atatctaagc ctcggagaaa ctattagaag tcttccaaag    1800
gagatagaaa aactgaagct cttggagaca cttgacttga ggagaacaaa ggtgaaaaca    1860
ctacctatag aggtcctcct gctcccctgt ttactccatc tgtttgggaa gttccaattt    1920
tctgataaaa tcaagataac aagtgacatg cagaagtttt tcttaactgg acagagtaac    1980
ttagagacac tttcaggatt tatcacagat gggtctcaag gattgccaca gatgatgaat    2040
tacatgaatt taagaaagct taagatatgg tttgagagga gtaagagaag caccaacttc    2100
accgatcttg tgaatgctgt ccaaaagttc atccatgatg acaaagagag caatgatcca    2160
cgttctctat cacttcattt cgatgacggc actgaaaaca tcctgaactc tttgaaggct    2220
ccttgttacc ttaggtcatt gaagttaaaa gggaatttgc tggaacttcc ccagtttgtc    2280
atatcaatgc ggggtctccg ggagatatgc ctttcatcaa caaaattgac atcgggcctc    2340
cttgcaacac tcgctaactt gaaaggcttg cagcatctca agctgattgc agatgtcctt    2400
gaagatttta tcattgaagg tcaggcattc ctggggctgc tacacctatg ttttgtccta    2460
gaacgtgcca ccttaccaat aattgaagga ggagctttgc cgtacctcat ctcacttaag    2520
ctaatctgca aagatctagt tggcctcggt gacatcaaaa tcaaccgcct caaatgtctt    2580
aaggaagtca gtctagatca tagagtcgct tcggaaacaa gagaaatctg ggaaaaagct    2640
gccgagaagc atccaaaccg gccgaaagta ttgttggtca actcatctga tgaaagcgaa    2700
attaaggctg tagactgttc tgttgcttca agaccagctg tgagtgaggc taatggaact    2760
tctcccatgt cagaggttga tgtacgagag gatgacattc agatgatact taaccagggg    2820
ctctctgccg ctgctgagaa acagatgaat tgtgcagttc agccaagttc aaaagctgaa    2880
ctgaactctg atttcaataa tattagtttc ccagaggttg cgcttggttt aaccgagctg    2940
tga                                                                  2943
<210>  31
<211>  980
<212>  PRT
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  31
Met Glu Ala Ala Leu Leu Ser Gly Phe Ile Lys Thr Ile Leu Pro Arg
1               5                   10                  15
Leu Phe Ser Leu Val Gln Gly Arg Tyr Lys Leu His Lys Gly Leu Lys
            20                  25                  30
Ser Asp Ile Lys Ser Leu Glu Lys Glu Leu His Met Ile Ala Val Thr
        35                  40                  45
Ile Asp Glu Gln Ile Ser Leu Gly Arg Lys Asp Gln Gly Ala Val Leu
    50                  55                  60
Ser Leu Ser Ile Asp Glu Leu His Glu Leu Ala His Gln Ile Glu Asp
65                  70                  75                  80
Ser Ile Asp Arg Phe Leu Tyr His Val Thr Arg Glu Gln Gln Ala Ser
                85                  90                  95
Phe Phe Arg Arg Thr Val Arg Ser Pro Lys Thr Leu Leu Ser Arg Gln
            100                 105                 110
Arg Leu Ala Ala Glu Val Gln Phe Leu Lys Lys Ile Pro Glu Glu Ala
        115                 120                 125
His Gln Arg Glu Lys Arg Tyr Arg Val Phe Ala Gly Leu Ser Ser Ser
    130                 135                 140
Thr Arg His Thr Glu Ser Ser Ser Cys Ser Ser Val Ser Asp Pro His
145                 150                 155                 160
Thr Leu Lys Ala Asp Val Val Gly Ile Asp Gly Pro Arg Asp Glu Leu
                165                 170                 175
Val Gln Gln Leu Thr Glu Glu Ala Glu Gly Leu Thr Lys Gln Leu Lys
            180                 185                 190
Val Ile Ser Ile Val Gly Ile His Gly Ser Gly Lys Thr Val Leu Ala
        195                 200                 205
Arg Glu Val Tyr Glu Ser Asp Val Gly Arg Gln Phe Ser Leu Arg Ala
    210                 215                 220
Trp Val Ser Ala Thr Asp Arg Gly Pro Arg Glu Val Leu Met Glu Ile
225                 230                 235                 240
Leu Arg Asn Phe Gly Arg Pro Val Val Asp Ser Ser Ser Ile Asp Gln
                245                 250                 255
Leu Thr Val Asp Leu Arg Lys His Leu Gly Glu Lys Ser Tyr Phe Ile
            260                 265                 270
Val Ile Asp Gly Met Gln Thr Asp Gln Trp Ser Thr Ile Glu Thr Ala
        275                 280                 285
Phe Pro Glu Asn Asn Val Val Ser Ser Arg Val Ile Val Thr Thr Thr
    290                 295                 300
Ile Arg Ser Val Ala Asn Ser Cys Ser Ser Ser Asn Gly Tyr Val His
305                 310                 315                 320
Lys Met Lys Arg Leu Ser Asp Glu His Ser Glu Gln Leu Phe Ile Lys
                325                 330                 335
Lys Ala Cys Pro Thr Lys Tyr Ser Gly Tyr Thr Arg Pro Glu Ser Lys
            340                 345                 350
Glu Val Leu Lys Lys Cys Asp Gly Gln Pro Leu Ala Leu Val Thr Met
        355                 360                 365
Gly Gln Phe Leu Arg Lys Asn Gly Trp Pro Thr Gly Pro Asn Cys Glu
    370                 375                 380
Asn Val Cys Arg Asp Leu Arg Arg His Leu Glu Gln Asp Asp Thr Leu
385                 390                 395                 400
Glu Arg Met Arg Arg Val Leu Ile His Ser Leu Ser Ser Leu Pro Ser
                405                 410                 415
His Val Pro Lys Ala Cys Leu Leu Tyr Phe Gly Met Phe Pro Cys Asp
            420                 425                 430
His Pro Ile Lys Arg Lys Ser Leu Met Arg Arg Trp Leu Ala Glu Gly
        435                 440                 445
Phe Val Gln Thr Gln Pro Ser Ser Ser Glu Asn Phe Asn Thr Leu Ile
    450                 455                 460
Asp Arg Asn Ile Ile Glu Pro Ile Gly Ile Cys Asn Asp Asp Gln Val
465                 470                 475                 480
Lys Thr Cys Lys Thr Tyr Gly Met Met His Glu Phe Ile Leu Leu Met
                485                 490                 495
Ser Thr Ser His Asp Phe Ile Thr Leu Leu Cys Asn Asn Lys Val Glu
            500                 505                 510
His Lys Tyr Val Arg Arg Leu Ser Leu His His His Ser Ala Thr Ser
        515                 520                 525
Gly Ser Phe Ser Val Ile Asp Leu Ser Leu Val Arg Ser Leu Met Val
    530                 535                 540
Phe Gly Glu Ala Gly Lys Thr Ile Leu Ser Phe Arg Lys Tyr Glu Leu
545                 550                 555                 560
Leu Arg Val Leu Asp Leu Glu Gln Cys Thr Asp Leu Glu Asp Asp His
                565                 570                 575
Leu Lys Asp Ile Cys Asn Leu Phe Leu Met Lys Tyr Leu Ser Leu Gly
            580                 585                 590
Glu Thr Ile Arg Ser Leu Pro Lys Glu Ile Glu Lys Leu Lys Leu Leu
        595                 600                 605
Glu Thr Leu Asp Leu Arg Arg Thr Lys Val Lys Thr Leu Pro Ile Glu
    610                 615                 620
Val Leu Leu Leu Pro Cys Leu Leu His Leu Phe Gly Lys Phe Gln Phe
625                 630                 635                 640
Ser Asp Lys Ile Lys Ile Thr Ser Asp Met Gln Lys Phe Phe Leu Thr
                645                 650                 655
Gly Gln Ser Asn Leu Glu Thr Leu Ser Gly Phe Ile Thr Asp Gly Ser
            660                 665                 670
Gln Gly Leu Pro Gln Met Met Asn Tyr Met Asn Leu Arg Lys Leu Lys
        675                 680                 685
Ile Trp Phe Glu Arg Ser Lys Arg Ser Thr Asn Phe Thr Asp Leu Val
    690                 695                 700
Asn Ala Val Gln Lys Phe Ile His Asp Asp Lys Glu Ser Asn Asp Pro
705                 710                 715                 720
Arg Ser Leu Ser Leu His Phe Asp Asp Gly Thr Glu Asn Ile Leu Asn
                725                 730                 735
Ser Leu Lys Ala Pro Cys Tyr Leu Arg Ser Leu Lys Leu Lys Gly Asn
            740                 745                 750
Leu Leu Glu Leu Pro Gln Phe Val Ile Ser Met Arg Gly Leu Arg Glu
        755                 760                 765
Ile Cys Leu Ser Ser Thr Lys Leu Thr Ser Gly Leu Leu Ala Thr Leu
    770                 775                 780
Ala Asn Leu Lys Gly Leu Gln His Leu Lys Leu Ile Ala Asp Val Leu
785                 790                 795                 800
Glu Asp Phe Ile Ile Glu Gly Gln Ala Phe Leu Gly Leu Leu His Leu
                805                 810                 815
Cys Phe Val Leu Glu Arg Ala Thr Leu Pro Ile Ile Glu Gly Gly Ala
            820                 825                 830
Leu Pro Tyr Leu Ile Ser Leu Lys Leu Ile Cys Lys Asp Leu Val Gly
        835                 840                 845
Leu Gly Asp Ile Lys Ile Asn Arg Leu Lys Cys Leu Lys Glu Val Ser
    850                 855                 860
Leu Asp His Arg Val Ala Ser Glu Thr Arg Glu Ile Trp Glu Lys Ala
865                 870                 875                 880
Ala Glu Lys His Pro Asn Arg Pro Lys Val Leu Leu Val Asn Ser Ser
                885                 890                 895
Asp Glu Ser Glu Ile Lys Ala Val Asp Cys Ser Val Ala Ser Arg Pro
            900                 905                 910
Ala Val Ser Glu Ala Asn Gly Thr Ser Pro Met Ser Glu Val Asp Val
        915                 920                 925
Arg Glu Asp Asp Ile Gln Met Ile Leu Asn Gln Gly Leu Ser Ala Ala
    930                 935                 940
Ala Glu Lys Gln Met Asn Cys Ala Val Gln Pro Ser Ser Lys Ala Glu
945                 950                 955                 960
Leu Asn Ser Asp Phe Asn Asn Ile Ser Phe Pro Glu Val Ala Leu Gly
                965                 970                 975
Leu Thr Glu Leu
            980
<210>  32
<211>  4287
<212>  DNA
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  32
atggaggctg cagtaagttc ctccacgggg gccatgggcc ctcttctgag gaagctcgag      60
ctcctacttg ctcccgaatc ccggcttcgg aagcgagtca aggatggaat cggactcctc     120
aaggaagatc tagaagaagt aagctttccc ctcgtcgatc tatcgatgct ggaaactcct     180
agtcccaggg ctaagtgctg gatggaggag gcgcgggaac tgtcttatca tgtggaagac     240
ttcgtcgatg aattgatgct gatgctcaca gacgccggag ccaacataag ggctgtcaac     300
aggcataggg ttggtcgcgt gaagattgct ctgcttacag cgccgccgag gcgcagcggc     360
agcacaaggg tcactaagat cgctgaattg agggctctag tgtggcaggc gaccgagcgc     420
ttcgaaaggt accagcttga agattattgc tccagcccga gcgatatgaa tttgatcacc     480
cagcaccgcc gggctccggc attgtatgga gatgaggcca atcttgtcgg aatcgaggcc     540
tccaggatca aactgattga aatgcttact ggggaagccg aacagcaacc gaaagtggtt     600
ttcattgttg gacctgttgg tgttggcaag accactcttg cgaaagaaat tttcggtgaa     660
cttcgaggca aatttgagtt gcgagcattt gtacatgctt cacgaaagct tgacatgaga     720
aggcttcttg ggggcattct ttcccaagtt cagccgcacc accaactacc ctctgttgct     780
ggtacagtgc agatcctcat tgacagtatt caggaacaac ttcgagataa gaggttcttc     840
attgtaattg atggtttgtg ggaagaaaca gcatgggaca ttgtaagaga tgcttttccg     900
gagggcaata attacagtag aattgtagca actacagaaa acatgaatgt agctcttaag     960
tgttgcagtt atatgacata taacattttg aagatgaaac ctcttggcat taaagactct    1020
gcatatttat tcttcaatcg agtttttggc tctgaccaac aatgccctga tgaactgaaa    1080
gaagtttcat atggtattat aagaaaatgt tgtggtcttc cactgtccat catccatgta    1140
gctggtcttt tagcaagcat agactactca gggctatggt atcatgtaca tgaccgttta    1200
tactccattc ttaatagaag ccatacagtt gaagagattc agaaaaaaat attagacctt    1260
agttacaata gtcttcctca ttgtttgaag acatgcctgc tgtatttcaa tatgtaccca    1320
gagggttaca taatgtggaa ggttcatctg gtgaaacaat ggatagctga aggttttatc    1380
aacccagctg aaggaaaaga cagagaggag attgcagagg gctattttga ggagcttgtc    1440
agtaggggaa tggtccaacc tatgaaaatt gactacaatg gtgaggtgtt gtcgtgtaca    1500
gtgcaccata ctatatttga tctcattaat tacaattcca aggaagagga atttattgct    1560
ggaatagatt actctcaacc aataacagga cttgctacaa aggcccgtcg actgtccttc    1620
agattcagta gtgccaagta tgcaaagcaa ccaacaagaa taacaacgtc acaattgcgg    1680
tcacttggat tctttggatt cagtaagtgt atgcctccaa ttgtggaatt taagcatctc    1740
cgagttctag tccttgactt ttggggaagt catgatggac acatgagttt gaacctctca    1800
aggatttaca tattatttca actgagatat ctgaagattt ccggtgatat catggttgaa    1860
ctaccagcca agatgcaagg gctacattat ttggaaacac tagagataga tgcaagacta    1920
tctgcagttc cattggatat tgtccatctt ccaagtttgt tgcatcttag tctccgagct    1980
gcaactaagt taccagatgg gattggccac atcaaatccc taagtacgct attgtatttt    2040
gacctcagat gtaactctga agacaatata cggagcttag gacagctgac gaaccttcga    2100
catcttcatc taacctgttc tacagttctc tccagtgacc acctgaagag aaagctgata    2160
cctctagcct tttctcttgg gaaacttggc aatctcaaat ctctcaccct gactcctgat    2220
gccttaagaa caaccatttt gtttgatatc tcgagcggta tctcctctcc ttccatcttt    2280
cttcagaaac ttgagttgtt gccaccaatt tgcttctttt ccagactgcc cgcttgcttt    2340
ggtgaactgc acaaactccg cattttgaaa attgtggtga aagaactgca gggaaatgat    2400
attaacaaca ttgctggatt accttcccta gtgattttct cactgtatgt gcggacagct    2460
ctgactggaa ctgtgatctt cagcaccatg tcattcccag ctctcaagta cttcagattc    2520
acatgtggtg tgacgtgctt ggcttttcag gaaggagcca tgcacagact tcaaaggctc    2580
aagctttgtt tcaatgccca tggaggcaag aaccatagcc gagtgattga cggcattgag    2640
tacctgttaa accttcagga ggtttctgga caaattgggg tcctcccagg tggtgatgaa    2700
tccaatatga gggttgttaa gttgtcattt gaagacacca ttagaaagca tccaaggtgt    2760
cttagattca acctacaatt ggtagatttt atagaagaag aatatcctcc tttagttaag    2820
ttgcatcaga ggcagcagga tgaatatgag attgaagaga atgactccgc tgatggtaat    2880
accaaacaca ctgatggcag gtatggattc aacagattca tattcagtaa ttcttcactc    2940
gtggatctag aagcagactt tcaagcacaa agtaggagta ctagcaatga ccttcccatc    3000
ccatataaca aacagttgga ttggcgcaaa gcagtaaatc atatcaggta caagcgtctg    3060
tcgcgctcct gcctcacatt cctagtcagt aacaaactct tgggagtcga acaatcattt    3120
gctctctggg aagagagaaa tgaactgtta ggggttcatg aacatgggga cactcatcac    3180
atttcaggca tagatgaata taatgaggtt gaggatgggg tggtagcggt ggagggggag    3240
ccgaaagagt tgagaatagg agaggccttg gaggggttaa ctgaaacatc ttgtttgtcg    3300
atgacgacct tggaggggtt cactggaaca tcttccttat ccatggcgag tgatgatgac    3360
acatccaata cgaccatgga ggaaatgttc atatcaccag atcgacaact caagcggaag    3420
attaagtcat ggatgcgcgg tgcttttttg ggaagcggct ctttagggat ggtgtatgag    3480
gcgatcagcc aagagggtgt gttttttgct gtgaaggaag tatctttgct tgaccaagga    3540
agcaaagcac aacaatctat tttggcactc gagaagaaaa ttgaactcct tagtcagctt    3600
caacatgaaa atatagtgca ctattatgga actgagaagg gagagtccaa actctatatt    3660
tttgttgagc ttgtgacaca aggatctctt tcatccctct ataaaaaata taaactacaa    3720
gaatcacaag tctgttggta cacaagtcag attcttaatg gattggttta cctccataag    3780
caaaatgttg ttcatggaga tataagatgt gccaatatat tggtccatgc aaatgaatct    3840
ccaaagcttg cggattttgg attggcaaaa gagatgtcaa atattcttac gctgagatca    3900
tgcgaaagaa atgtttactg gatggcacct gagtttatta atcctaaaaa gacatttgga    3960
cctgcagctg atatatggag ccttggttgt gtcgtcttgg aaatgctaac ccgacaaata    4020
ccctatccta atgttaagtg gacaaaagct ttatacatga ttggaaaagg ggagcaacct    4080
cctatcccaa actatctgtc agaagaagcg caagatttca tttgccagtg tgtaagagtt    4140
gatccagaga cccggccttc cgcaacacag cttttggagc acccatttgt taacaggcaa    4200
tctaatcttt tgtcatcctt acgagtggat gacagactag accaaatgcc tattggtgcc    4260
atccgtaaga atgttaaaaa aacttaa                                        4287
<210>  33
<211>  1428
<212>  PRT
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  33
Met Glu Ala Ala Val Ser Ser Ser Thr Gly Ala Met Gly Pro Leu Leu
1               5                   10                  15
Arg Lys Leu Glu Leu Leu Leu Ala Pro Glu Ser Arg Leu Arg Lys Arg
            20                  25                  30
Val Lys Asp Gly Ile Gly Leu Leu Lys Glu Asp Leu Glu Glu Val Ser
        35                  40                  45
Phe Pro Leu Val Asp Leu Ser Met Leu Glu Thr Pro Ser Pro Arg Ala
    50                  55                  60
Lys Cys Trp Met Glu Glu Ala Arg Glu Leu Ser Tyr His Val Glu Asp
65                  70                  75                  80
Phe Val Asp Glu Leu Met Leu Met Leu Thr Asp Ala Gly Ala Asn Ile
                85                  90                  95
Arg Ala Val Asn Arg His Arg Val Gly Arg Val Lys Ile Ala Leu Leu
            100                 105                 110
Thr Ala Pro Pro Arg Arg Ser Gly Ser Thr Arg Val Thr Lys Ile Ala
        115                 120                 125
Glu Leu Arg Ala Leu Val Trp Gln Ala Thr Glu Arg Phe Glu Arg Tyr
    130                 135                 140
Gln Leu Glu Asp Tyr Cys Ser Ser Pro Ser Asp Met Asn Leu Ile Thr
145                 150                 155                 160
Gln His Arg Arg Ala Pro Ala Leu Tyr Gly Asp Glu Ala Asn Leu Val
                165                 170                 175
Gly Ile Glu Ala Ser Arg Ile Lys Leu Ile Glu Met Leu Thr Gly Glu
            180                 185                 190
Ala Glu Gln Gln Pro Lys Val Val Phe Ile Val Gly Pro Val Gly Val
        195                 200                 205
Gly Lys Thr Thr Leu Ala Lys Glu Ile Phe Gly Glu Leu Arg Gly Lys
    210                 215                 220
Phe Glu Leu Arg Ala Phe Val His Ala Ser Arg Lys Leu Asp Met Arg
225                 230                 235                 240
Arg Leu Leu Gly Gly Ile Leu Ser Gln Val Gln Pro His His Gln Leu
                245                 250                 255
Pro Ser Val Ala Gly Thr Val Gln Ile Leu Ile Asp Ser Ile Gln Glu
            260                 265                 270
Gln Leu Arg Asp Lys Arg Phe Phe Ile Val Ile Asp Gly Leu Trp Glu
        275                 280                 285
Glu Thr Ala Trp Asp Ile Val Arg Asp Ala Phe Pro Glu Gly Asn Asn
    290                 295                 300
Tyr Ser Arg Ile Val Ala Thr Thr Glu Asn Met Asn Val Ala Leu Lys
305                 310                 315                 320
Cys Cys Ser Tyr Met Thr Tyr Asn Ile Leu Lys Met Lys Pro Leu Gly
                325                 330                 335
Ile Lys Asp Ser Ala Tyr Leu Phe Phe Asn Arg Val Phe Gly Ser Asp
            340                 345                 350
Gln Gln Cys Pro Asp Glu Leu Lys Glu Val Ser Tyr Gly Ile Ile Arg
        355                 360                 365
Lys Cys Cys Gly Leu Pro Leu Ser Ile Ile His Val Ala Gly Leu Leu
    370                 375                 380
Ala Ser Ile Asp Tyr Ser Gly Leu Trp Tyr His Val His Asp Arg Leu
385                 390                 395                 400
Tyr Ser Ile Leu Asn Arg Ser His Thr Val Glu Glu Ile Gln Lys Lys
                405                 410                 415
Ile Leu Asp Leu Ser Tyr Asn Ser Leu Pro His Cys Leu Lys Thr Cys
            420                 425                 430
Leu Leu Tyr Phe Asn Met Tyr Pro Glu Gly Tyr Ile Met Trp Lys Val
        435                 440                 445
His Leu Val Lys Gln Trp Ile Ala Glu Gly Phe Ile Asn Pro Ala Glu
    450                 455                 460
Gly Lys Asp Arg Glu Glu Ile Ala Glu Gly Tyr Phe Glu Glu Leu Val
465                 470                 475                 480
Ser Arg Gly Met Val Gln Pro Met Lys Ile Asp Tyr Asn Gly Glu Val
                485                 490                 495
Leu Ser Cys Thr Val His His Thr Ile Phe Asp Leu Ile Asn Tyr Asn
            500                 505                 510
Ser Lys Glu Glu Glu Phe Ile Ala Gly Ile Asp Tyr Ser Gln Pro Ile
        515                 520                 525
Thr Gly Leu Ala Thr Lys Ala Arg Arg Leu Ser Phe Arg Phe Ser Ser
    530                 535                 540
Ala Lys Tyr Ala Lys Gln Pro Thr Arg Ile Thr Thr Ser Gln Leu Arg
545                 550                 555                 560
Ser Leu Gly Phe Phe Gly Phe Ser Lys Cys Met Pro Pro Ile Val Glu
                565                 570                 575
Phe Lys His Leu Arg Val Leu Val Leu Asp Phe Trp Gly Ser His Asp
            580                 585                 590
Gly His Met Ser Leu Asn Leu Ser Arg Ile Tyr Ile Leu Phe Gln Leu
        595                 600                 605
Arg Tyr Leu Lys Ile Ser Gly Asp Ile Met Val Glu Leu Pro Ala Lys
    610                 615                 620
Met Gln Gly Leu His Tyr Leu Glu Thr Leu Glu Ile Asp Ala Arg Leu
625                 630                 635                 640
Ser Ala Val Pro Leu Asp Ile Val His Leu Pro Ser Leu Leu His Leu
                645                 650                 655
Ser Leu Arg Ala Ala Thr Lys Leu Pro Asp Gly Ile Gly His Ile Lys
            660                 665                 670
Ser Leu Ser Thr Leu Leu Tyr Phe Asp Leu Arg Cys Asn Ser Glu Asp
        675                 680                 685
Asn Ile Arg Ser Leu Gly Gln Leu Thr Asn Leu Arg His Leu His Leu
    690                 695                 700
Thr Cys Ser Thr Val Leu Ser Ser Asp His Leu Lys Arg Lys Leu Ile
705                 710                 715                 720
Pro Leu Ala Phe Ser Leu Gly Lys Leu Gly Asn Leu Lys Ser Leu Thr
                725                 730                 735
Leu Thr Pro Asp Ala Leu Arg Thr Thr Ile Leu Phe Asp Ile Ser Ser
            740                 745                 750
Gly Ile Ser Ser Pro Ser Ile Phe Leu Gln Lys Leu Glu Leu Leu Pro
        755                 760                 765
Pro Ile Cys Phe Phe Ser Arg Leu Pro Ala Cys Phe Gly Glu Leu His
    770                 775                 780
Lys Leu Arg Ile Leu Lys Ile Val Val Lys Glu Leu Gln Gly Asn Asp
785                 790                 795                 800
Ile Asn Asn Ile Ala Gly Leu Pro Ser Leu Val Ile Phe Ser Leu Tyr
                805                 810                 815
Val Arg Thr Ala Leu Thr Gly Thr Val Ile Phe Ser Thr Met Ser Phe
            820                 825                 830
Pro Ala Leu Lys Tyr Phe Arg Phe Thr Cys Gly Val Thr Cys Leu Ala
        835                 840                 845
Phe Gln Glu Gly Ala Met His Arg Leu Gln Arg Leu Lys Leu Cys Phe
    850                 855                 860
Asn Ala His Gly Gly Lys Asn His Ser Arg Val Ile Asp Gly Ile Glu
865                 870                 875                 880
Tyr Leu Leu Asn Leu Gln Glu Val Ser Gly Gln Ile Gly Val Leu Pro
                885                 890                 895
Gly Gly Asp Glu Ser Asn Met Arg Val Val Lys Leu Ser Phe Glu Asp
            900                 905                 910
Thr Ile Arg Lys His Pro Arg Cys Leu Arg Phe Asn Leu Gln Leu Val
        915                 920                 925
Asp Phe Ile Glu Glu Glu Tyr Pro Pro Leu Val Lys Leu His Gln Arg
    930                 935                 940
Gln Gln Asp Glu Tyr Glu Ile Glu Glu Asn Asp Ser Ala Asp Gly Asn
945                 950                 955                 960
Thr Lys His Thr Asp Gly Arg Tyr Gly Phe Asn Arg Phe Ile Phe Ser
                965                 970                 975
Asn Ser Ser Leu Val Asp Leu Glu Ala Asp Phe Gln Ala Gln Ser Arg
            980                 985                 990
Ser Thr Ser Asn Asp Leu Pro Ile Pro Tyr Asn Lys Gln Leu Asp Trp
        995                 1000                1005
Arg Lys Ala Val Asn His Ile Arg Tyr Lys Arg Leu Ser Arg Ser
    1010                1015                1020
Cys Leu Thr Phe Leu Val Ser Asn Lys Leu Leu Gly Val Glu Gln
    1025                1030                1035
Ser Phe Ala Leu Trp Glu Glu Arg Asn Glu Leu Leu Gly Val His
    1040                1045                1050
Glu His Gly Asp Thr His His Ile Ser Gly Ile Asp Glu Tyr Asn
    1055                1060                1065
Glu Val Glu Asp Gly Val Val Ala Val Glu Gly Glu Pro Lys Glu
    1070                1075                1080
Leu Arg Ile Gly Glu Ala Leu Glu Gly Leu Thr Glu Thr Ser Cys
    1085                1090                1095
Leu Ser Met Thr Thr Leu Glu Gly Phe Thr Gly Thr Ser Ser Leu
    1100                1105                1110
Ser Met Ala Ser Asp Asp Asp Thr Ser Asn Thr Thr Met Glu Glu
    1115                1120                1125
Met Phe Ile Ser Pro Asp Arg Gln Leu Lys Arg Lys Ile Lys Ser
    1130                1135                1140
Trp Met Arg Gly Ala Phe Leu Gly Ser Gly Ser Leu Gly Met Val
    1145                1150                1155
Tyr Glu Ala Ile Ser Gln Glu Gly Val Phe Phe Ala Val Lys Glu
    1160                1165                1170
Val Ser Leu Leu Asp Gln Gly Ser Lys Ala Gln Gln Ser Ile Leu
    1175                1180                1185
Ala Leu Glu Lys Lys Ile Glu Leu Leu Ser Gln Leu Gln His Glu
    1190                1195                1200
Asn Ile Val His Tyr Tyr Gly Thr Glu Lys Gly Glu Ser Lys Leu
    1205                1210                1215
Tyr Ile Phe Val Glu Leu Val Thr Gln Gly Ser Leu Ser Ser Leu
    1220                1225                1230
Tyr Lys Lys Tyr Lys Leu Gln Glu Ser Gln Val Cys Trp Tyr Thr
    1235                1240                1245
Ser Gln Ile Leu Asn Gly Leu Val Tyr Leu His Lys Gln Asn Val
    1250                1255                1260
Val His Gly Asp Ile Arg Cys Ala Asn Ile Leu Val His Ala Asn
    1265                1270                1275
Glu Ser Pro Lys Leu Ala Asp Phe Gly Leu Ala Lys Glu Met Ser
    1280                1285                1290
Asn Ile Leu Thr Leu Arg Ser Cys Glu Arg Asn Val Tyr Trp Met
    1295                1300                1305
Ala Pro Glu Phe Ile Asn Pro Lys Lys Thr Phe Gly Pro Ala Ala
    1310                1315                1320
Asp Ile Trp Ser Leu Gly Cys Val Val Leu Glu Met Leu Thr Arg
    1325                1330                1335
Gln Ile Pro Tyr Pro Asn Val Lys Trp Thr Lys Ala Leu Tyr Met
    1340                1345                1350
Ile Gly Lys Gly Glu Gln Pro Pro Ile Pro Asn Tyr Leu Ser Glu
    1355                1360                1365
Glu Ala Gln Asp Phe Ile Cys Gln Cys Val Arg Val Asp Pro Glu
    1370                1375                1380
Thr Arg Pro Ser Ala Thr Gln Leu Leu Glu His Pro Phe Val Asn
    1385                1390                1395
Arg Gln Ser Asn Leu Leu Ser Ser Leu Arg Val Asp Asp Arg Leu
    1400                1405                1410
Asp Gln Met Pro Ile Gly Ala Ile Arg Lys Asn Val Lys Lys Thr
    1415                1420                1425
<210>  34
<211>  10808
<212>  DNA
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  34
gtcaaccccc tcaatgtttc gtttcgtagg acgttgcggg gtcataactt atctttgtag      60
tatgacctta ttaatcgggt ggtgctcact ccgctgagct ctaatagaga tgtctttaag     120
tggagggaaa catcttctgg tcagttcacg gtgcaatcaa tgtatcaggc tctgattaat     180
aacggtcaaa tgtttaatca caagctgatt tggaaactga atttacccct aaagattaaa     240
atctttttgt ggtatttggt taaagggatt attctaacta aggataacct catcaaaaga     300
aattggaatg ggaacaaaaa atgtgggttt tgtaatactg atgagtctat tcaacatttg     360
tttatagaat gtcatgttgc tcgccatatg tggaggttgt ttcacttctg ttttggtatg     420
agtgcaccga ggtctgttcg tcatattttt agtacgtgga tcaccggtat tgatttaaaa     480
actaagcgtc ttgttattac aggtgtctca gtgttttgct gggctatttg gataagtagg     540
aatgacttag tttttaataa tgtttcaagt tttacttatc tgcaggttct ttttagaggt     600
acacactggc ttagattctg ggctcagcta caaaaggatg aagctgatgg agttttaata     660
aagaatgtct gtcgtcgcct ggaatcggtg gccatgcaat tttgtgttaa ttttggttgg     720
aggttttcta ataggattgc cttgtaatca tctcactggt tttattaagt ttaaagaacc     780
tttagtgtgt tagtgtgtgg ctgtgtggag gggtatgtcc cttcattgag cagtgtgata     840
taacaatttg tgttggccct aacctctttt gaggggaaag ccggaacttt ctctccatta     900
tcaaaaaaaa tataatgact aaaatactca tttctccttt gacgtcagtt ttctaggcaa     960
gattggagta aatgttatcc tttaattctt ttagcaccca tgtgagggac tagatactaa    1020
atccaattag tatctacttt agtccatctg tttgacaaaa tagggactaa actagactaa    1080
aaaccagaaa ctaaatatta gtcagtctaa cgaaacgggg cctaattagc tatcgttcta    1140
cgcgaggatc tacgttgttt gatagatggc gcgctgctaa aaacatgacc cgtcgggcga    1200
taacttcatc cttttcaaaa gtcctgtcga gcacggcact gtgcagccta tagatgccga    1260
gataagatcg catacaagtt gacttgaccc gctgcctgga aaaagataag cttcgaacga    1320
atcatgccca cacaacacat tccgcaagat tgattgataa tcacaaagaa ccaaacgggg    1380
atttggaaat gaaaatccag ctctgctaga ccattcaatg atctgaattt tgtcaccgca    1440
ggacacaggt ggaacatcgg ccgggaatat ctctgtccgg tttcgctgag agatactcta    1500
ggattccgag gtttgacacg tcgcaacaac cttgtccaga tcaaacaacg acggtggtgc    1560
gctaatagac gaacaggatg gaagcagaaa agtgacggca agtaaatgac gagagtttga    1620
cggactcacg gtcttctctt caccggcggt caagctaagc ctagtgctgt tctgtggatg    1680
taacggtgct gtaaaagggt ttataaaccc cataggaggt cagccagctg agtatccagt    1740
ttcaagttca gagttcaatc tcacagcacc aagcaaaaag gaagcagatc aagggcagcc    1800
gagcgagcag aggtaccccg gtctctcttt ctccttccgt acataattat ccaattcagt    1860
ttgttacttg ttaagagaat tcgatagtaa gtttgtagta agcttggtca ctccttgaac    1920
tcagcgtagt actttctccg taatacgccg ccaagagatc attctttatt ttttgcaggt    1980
tgtcaattac gtgccttaat atgagtcatt ggaagcagcc gtcgaaactc gccatgcttg    2040
tagtactgct gctgctgcta tgtcatgcag tggacagagt ccactgctcg acgcatcata    2100
acaacagcca agattttcat tctctgctag agttcaagaa gggcatcacc agtgatccgc    2160
acggagtctt gagcaattgg aaccccagca tccacttctg ccattggcat ggtgtgaact    2220
gcagttccac gcgaccatat cgagtcacgg agctcaacct caccggccaa aacttggctg    2280
gccaaatcag ctcctctctt ggaaacctga ccttccttca tatccttcgt cttgccaaca    2340
atagtttcca tggtcccata cctcttctca acaaactcca aaacctgagc aaactcgttc    2400
tgggaaacaa ccttttggag gatgtttttc ctgattggat tacaaactgt tccaacttag    2460
tcagcctaca tctctatgga aaccaactca ccggtcatat tccttcaaac atagactttc    2520
taacaaaact agcatatatc atccttcaca gtaataatct cactgggttc atccctccaa    2580
ccttgggaaa catccacaca ctaatggtac ttgatatttc aaataatcaa ctaaacggaa    2640
gcattcctaa tgaagtttgg caaataaaga acatagaaat gttaaatcta gcaggaaata    2700
acctatcagg tggaatccca gatactctcc ctcacttagc ttttcttatg atattatcat    2760
tggacaccaa tatgttgggt agcacattgc catcaaacat tggtgatgtg ctccctaatc    2820
tgaaagaact atacttagga ggcaactttt ttttgggtac aattccatct tccctaggca    2880
atgcttcaaa tctagaagtc atagacctac caaacaacct tttcagtggc acaatcccaa    2940
gttcttttgg aaacctttca aagttgcaga ctctaaacct tgaggtaaac atgcttgtag    3000
caagggatag tgagggctgg caattctttg atgccctggc aaaatgtaga tatctcgtta    3060
tactttcagt gtctcataat catctacacg gacctatacc aaattcgatt gctaatctgt    3120
ccactagtct tcaacaacta ttcatgggtt ggaacaacct ttcaggaata gttcccccaa    3180
ctattggaaa acttagtggc ttaactgaat tatcactaca aaacaacaat cttacaggta    3240
ccattgagga atgggtcgga aagatgacaa atctaacaat tttaacacta caatcaaaca    3300
acttcacagg gaaaattcca ccttcaattg gcaatcttac acagttgaca aatttctctg    3360
tagctgaaaa caatttcttc gggtctgtac catctaactt gtggaatctg aaatcaatgt    3420
tgtatttaga ccttagtcat aacaatttcc aagggagcat acttgtttag tttggtaact    3480
taggactcgt ctcgctaaaa atttcatcga acaaattcat tggagaaaat cctgaaactt    3540
taggacaact tgaaaatata caaaccattc aaatggacca aaacattctc ggaaacattc    3600
cgtacacatt caaaagtcta tatagcttga gcttgctcaa tctatcccat aacaatttat    3660
ccggcctcat gccaactttt ctaagtggtc taaatctcac taaactggac ctatcctaca    3720
ataatttcca agggaaaata ccaagcattg gtctattcga taatcctgca attgtttcac    3780
tagatggcaa tccaggattg tgtggaggag acatggattt gcacatgcct ccatgccatg    3840
tcgctgcttc gagaagagta ggcagaacaa gcttattgat caaaatattg atcccaatat    3900
ttgggttcat gtcactcgta ttgctgtgta ctttttattc ctagagaaga ggacgtcaag    3960
aagagcatat agatcagagc tatcttatgg tgagcatttt gagaaagata cttataacga    4020
tttagctcaa gcaacacggg acttctcaga atccaacctg attgggagag gaagctatgg    4080
ttcggtgtat cgagggaagc tgaaggaaag caaaatggaa gtggcagtaa aggtttttga    4140
ccttgagatg agaggagcag aaagaagctt cgtgttagag tgtgaagcat tgtgaagcat    4200
tcaacaccgg aatcttcttc ccatcataac tgcttgctca acagtagata atataggaaa    4260
tgttttcaaa gctttaattt atgagttcat gcctaatggg agcctggaca catggctaca    4320
tcacaaaaaa gatgtggagg ctgcaaaaaa tcttggcttg actcagaata agcatagtgg    4380
ttgatatagc tgatgcattg gattatctgc accatgattg tggatggcca actgttcact    4440
gcgacttgaa acccaacatt atccttctag atgatgatat gaatgctctt ctgggagatt    4500
ttggaattgc acgcctctat cttgattatc agtcaaaatg ggcaggttca attagttcaa    4560
ttggtgtaaa gggaacaatt ggatatattc ctccaggtac ctatagttat tttagctcct    4620
tttttgatca tttatgtcaa tattttttat aggtagaaaa taagttataa cacaattaaa    4680
ttgttaattt gtgtgagcat tttccaattt agagtatgga gaaggtggcc atgcatcaat    4740
gtctggggat gtttatagtt ttgggattgt gttgctagag attttgacga gcaaaaggcc    4800
aacatatcct atgtttaagg atggcctgga catcattagc tttgtggaga ataactttcc    4860
cgatcaagta tttgaagtca ttgatgctca cctcctcgag gaatgcagga acccaactca    4920
aggaaatacc ttggtacaag aaaatgagat ctatcaattc ttggttgatc tgctgcaagt    4980
agcactttca tgccttcatt cgttaccatc tgaacgatca aacatgaagc aagtagctag    5040
cagaatgcat gcaatcaaaa cataacataa tgaaatcaca agtaataaga acaagggtgt    5100
tctatgaatt gtacaataac atattgttgg tacctaattt gaactaggtc taggatacct    5160
ttttggccaa agggctccac aaaggaagtg ttcggccgca tggaaaatag acatgtaaaa    5220
cagaaataag catttgtact gtaaataagt aatagatcag atggaaatat aagttaggaa    5280
gcgcttattg tgtaaggccc aaaatctgta taagaaaaaa aaaagtaaat atactactat    5340
gtataatttt gaggatttct tgatcctctt ttctttgagc aaattaaact aaaggaatta    5400
aagtagtcga atgacttcca ataacaattt tattccttta tagaatatac ctctataaac    5460
taaacacata atgataacta agaatttggt attcaagatt tatatccaaa acttaaaact    5520
aaaaggttgg agcaacaaat aaaagagaga ctttcatact acttatttcc tttaaaaact    5580
atatagcccc ttaaaatata gttgaaataa aataattcat gaggatatta tgtactccaa    5640
agtagatatg taatgaagat tacctttttt aagtgtgcat tcaaaataat gtttcctaaa    5700
taaataaata aataccaagt gaatatctca ttattgaagt atttgtcaat atatatatat    5760
ataaagaaag aaggaatgca tcatgctaga attttgaatg tgcatttaaa gcatagattc    5820
gaattcaaat gtgaaaagaa aaaaactgga atttgaaata aaaaaaacag caaatataaa    5880
agaaaaacaa ctttccccta cacctgggcc acattccctc ggccctagaa tatgacaaga    5940
ttttcgcttg agcttgtgag gagattagtt gcaacataaa cgaccctaga atatcaattc    6000
agggtttgtt gtcccatatt acatatggaa cagttgtctg acggttgatc tccattgcct    6060
cagaagatga ttgggtgaga catgtaagaa ttgtgaagac gatgcttcca ccatgtttgg    6120
atgtggttgt tcaaaagtta tctattactc atcgtgatgc tctagtcggg ttgtctccac    6180
aaatgccaaa tgcatctcgt attgaagctc ctttggtaga gcttccggaa gaagtggttg    6240
ttgtgcccga tgctcaatcg gggccgcacg agtatgggat ttctcgtcct ctttctggcg    6300
ttttgtgggg cttctaatcc ggtggtaccc ccaagagatc ccattgaccc aggatccagt    6360
tcaggatcat cctagtaagt gtctttgaca cgttgttcat atccatcgtt atttcgtttg    6420
attagacttt ttaatgtggt atttcttgat tggacccgat gcaagatctc cacaaatcga    6480
taatggtgct tatcttgatg tgcatgtatc atataatatg gacaacatat gcagggcatc    6540
caatagtgtt gatgttcaga ttgaggatga ggaggagcca tatgaggctg cacgggcctt    6600
agattctgat gatgatcgtc cggttcaaga aatgaccgag caagaaattg aactcataag    6660
acgtttgtgt cccgagcgtg accctgcagt acatgaattt agcagtctaa gtcattccac    6720
ccgtgcatat gctgaaggac gtgatgatga actgctagag gctccggata acaccgatag    6780
cattgagatt aaggtaggct tacttttcaa ggacctgcct acactgagac gatggctaca    6840
ggaatattct gtgaatcgca agaggccgtt caaggtgaga cactcgtatg cacaacgtcg    6900
ttacactgtt gtgtgcgagg tgtcgaaatg taattggagg gtatgtgcct gaaggcagaa    6960
ggaaaccgga aagtttaaaa tcaccaaaat tgtaggtcca cacacttgtg cccagataga    7020
gctgagcttt aagcatcgtc agttgacatc taccctaatt gcgaaaagga tattggggat    7080
attgaagggt cagccaaact tgaaggtgaa gtcaattatg accatgactt cggagctgtt    7140
tggttacagg atcaaatatg ggaaagcatg gagggcaaag cagcgagcat gcactacagg    7200
aaacgcataa attttcgtag gccggcctat tttcgtcggt cggcccacga aaatacaatg    7260
ttatttttgt cggccttcgt gaccgacgaa aatgtggaat attttcgtgg gccaggcaat    7320
attttcgtcg gcaggccgac gaaaatacga aagttatttt cgtcggcctc cacaccgacg    7380
aacattttgt gtattttcgt cggcctcagc ccggccgaca aaaataaacg tttaacgggc    7440
cactattttc gtcggcctca ctgaggccga cgaaaataga ggccgttaat cttccatccc    7500
ggcctcaccg caccttctct ctctcgctcg tcttaccttc tctcacccgc cctcaaccgc    7560
gccgcaccgc acgccctcgc cgcgcgcccg ccgagccgcc gcgcagccgc cgcctcccca    7620
cgccgcgccc actccgagca gccgcgccct cgtcgcgccg cgccacgccg agccgcctcc    7680
ccacgccgcg cccactccga gcagccgtcc cacgccgcgg ccccctccac cgttgccacg    7740
gtaatggttt tacttagttt atagtaatta gttagctaat ttacttgata taatgtatag    7800
attgatagct attcacttgt tagtataaat agttagctag gtatttatat gtaggatact    7860
tgtagcattt tgtttaacac attgatatca catggttagc atattgttca ttatgtagct    7920
atcgtgcagt attctgtgtt ggcaccatcg tgttgttgtt tctttgcagg ttttagaaac    7980
atcactttat agtggaggtg ctgccgattt tttttattga caatagtaat ttttgtacat    8040
aggtgttctt ccgacttgac cttctccacc gttagctgga ctcgtacata ttctcaggta    8100
tacattgttt ttgtaatttc ggttaatgcg gtcatttatt atttactata tagttattag    8160
taaataagta gttactattt attctcaggt atacattgtt ttcatactag ttatttgttt    8220
tctccaccgt ggcgtgccgt gcacgtgccg tgcgcgcggc cgtgcgcgtg ccgtcttttg    8280
aatgttattt atcttttgtt taattagcct ttgaaatgga cggtgatcgg agggtgatgt    8340
cttttgttta atctccgaga tattttttaa tgtttagagt tcagttttaa tcgttaaccg    8400
tagcgaaccg tatgcgtcac ccattcggga acggcgaacg tcacattggc ttgtgaggtt    8460
cgccgttccg gaattgtcca cgtattttgg acagcctgag agtgtaagcc gatgcttgtg    8520
atttgtgaca tgtgccttac gattgacgcg gaattttggt tgtgtaaccc agttgttctc    8580
caacacacca tgttcaggcg tgtgcttgga gagcagcggg gttatgctac cgaaatttca    8640
cggcattcgt aggctacacg tcataaatca caagcatcag cctacactct tgggtgggtt    8700
tagggccttt acctaatagg gagttcacct aagccacgga cgatcgttga tgttctttga    8760
cttttgttta gcctttgaaa tggacggtga tcggagggtg atgtatgacg ggtggagaaa    8820
ggatggggca cattcgaatg aatggatggg tgtaacaaag gcttttcttg agcacgcttt    8880
caaagatgca actggtcgtc tagtgaagtg tccttgcaat cgctgtgaga acaagtggcc    8940
tcagaagaag gaagaaatgg aggttgaaat gaacgctgag gagccggggc agcttccacg    9000
cgatgctcag gaattcttcc ggctactcgc cgcgggagaa gagagactgc acgagcacac    9060
tcagatgtca gttcttggga ctctcacaag actaatggtg ataaagtcga agcacaacat    9120
ttcaaacagt gcttacaatg acatcgtcca actgatgggc gaggttctcc cggagaatca    9180
taagttgcca aagaatatgt acttcacaaa gaagatgttg gctggtcttg ggatgacata    9240
tgagaagatc gacgtgtgtc ccaacagttg catgctattc tttgaggagg atgacaagct    9300
ggaccgttgt aagcattgtg aagcttctag atatgtcgag gtgacaaatg atgagggtga    9360
attggtagtt acgaaggtcg tagctaagca acttcgtcgg ttgcccatca ttcctcggct    9420
ttcaaggttg ttcctcaaca aggaaatagc tctgcatatg acgtggccaa agaatggtgt    9480
acgtctcatc acaaggaaat agctctgcat acaacgagcc gaagaagcat catcggatgc    9540
ggatgacttt tgattagtat gtttctttta gttaatcaat taagccatgt attccaattt    9600
tcacattatt aattttcata ttatttgttt catatactgt ggtttgacat taatttatct    9660
acagttgaac atgttcaagc ataggagatc gaggaggagt gggggcagcg cggccagcga    9720
ggacagctcg ggcagtgggc tttttcaggg cacctcacag agccgacaga ggcagcaaca    9780
acttctcgac tgtctagacg aagtgtaggg tgaggagggt gagtaggagg ctcctcagca    9840
ggatgctcat gtgcagggtg aaagtcgcct agaggggggg tgaatagggc aaaactgaaa    9900
ttcttaaaaa taatcacaac tacaagctgg gttagcgtta gaaatataat tgtgtccgcg    9960
agagagggtg caaaacaaat cgcaagcgaa taaggagaga gacacgtgga tttgttttac   10020
cgaggttcgg ttctcgcaaa cctactcccc gttgaggtgg tcacaaatac cgggtctctt   10080
tcaacccttt ccctctctca aacggtccct cggaccgagt gagcttttct tctcaatcac   10140
ttggaacaca aagttcccac aaggaccacc acaagattgg tgtctcttgc ctcaattaca   10200
agtgagtttg atcgcaatga aagaatcaaa gaaagaagaa agcaatccaa gcgcaagagc   10260
tcgaaggaac acaagcaaat ctctctcact aatcactagg gcgttgtgtg tagtttggag   10320
aggatttgat cacttgggtg tgtctagaat tgaatgctaa agctcttgta agtaattgaa   10380
gtgggaaaac ttggatgact tgaatgtggg gtggttgggg gtatttatag ccccaaccac   10440
caaactagcc gtttggtggg gctgtctgtc gcatggtgca ccggacagtc cggtgcacac   10500
cggacagtgt ccggtgcgcc agccacgtca ccaggccgtt gggttccgat cgttggagct   10560
ctgactgctg ggcccgcctg gatgtccggt ggcacaccgg acatgcactg tagagtgtcc   10620
ggtgcgccac ttcgcgtgtg cctgacttct gcgcgctctg gcgcgcattt aatgcttctg   10680
caggtgaccg ttggcgcgaa gtagtcgttg ctccgctggc tcaccggaca gtctggtgta   10740
caccggacat gtccggtgaa ttatagcgga gcaaattccc gaagttggcg agttcctgag   10800
acgctctt                                                            10808
<210>  35
<211>  3903
<212>  DNA
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  35
atgagtcatt ggaagcagcc gtcgaaactc gccatgcttg tagtactgct gctgctgcta      60
tgtcatgcag tggacagagt ccactgctcg acgcatcata acaacagcca agattttcat     120
tctctgctag agttcaagaa gggcatcacc agtgatccgc acggagtctt gagcaattgg     180
aaccccagca tccacttctg ccattggcat ggtgtgaact gcagttccac gcgaccatat     240
cgagtcacgg agctcaacct caccggccaa aacttggctg gccaaatcag ctcctctctt     300
ggaaacctga ccttccttca tatccttcgt cttgccaaca atagtttcca tggtcccata     360
cctcttctca acaaactcca aaacctgagc aaactcgttc tgggaaacaa ccttttggag     420
gatgtttttc ctgattggat tacaaactgt tccaacttag tcagcctaca tctctatgga     480
aaccaactca ccggtcatat tccttcaaac atagactttc taacaaaact agcatatatc     540
atccttcaca gtaataatct cactgggttc atccctccaa ccttgggaaa catccacaca     600
ctaatggtac ttgatatttc aaataatcaa ctaaacggaa gcattcctaa tgaagtttgg     660
caaataaaga acatagaaat gttaaatcta gcaggaaata acctatcagg tggaatccca     720
gatactctcc ctcacttagc ttttcttatg atattatcat tggacaccaa tatgttgggt     780
agcacattgc catcaaacat tggtgatgtg ctccctaatc tgaaagaact atacttagga     840
ggcaactttt ttttgggtac aattccatct tccctaggca atgcttcaaa tctagaagtc     900
atagacctac caaacaacct tttcagtggc acaatcccaa gttcttttgg aaacctttca     960
aagttgcaga ctctaaacct tgaggtaaac atgcttgtag caagggatag tgagggctgg    1020
caattctttg atgccctggc aaaatgtaga tatctcgtta tactttcagt gtctcataat    1080
catctacacg gacctatacc aaattcgatt gctaatctgt ccactagtct tcaacaacta    1140
ttcatgggtt ggaacaacct ttcaggaata gttcccccaa ctattggaaa acttagtggc    1200
ttaactgaat tatcactaca aaacaacaat cttacaggta ccattgagga atgggtcgga    1260
aagatgacaa atctaacaat tttaacacta caatcaaaca acttcacagg gaaaattcca    1320
ccttcaattg gcaatcttac acagttgaca aatttctctg tagctgaaaa caatttcttc    1380
gggtctgtac catctaactt gtggaatctg aaatcaatgt tgtatttaga ccttagtcat    1440
aacaatttcc aagggagcat acttgtttag tttggtaact taggactcgt ctcgctaaaa    1500
atttcatcga acaaattcat tggagaaaat cctgaaactt taggacaact tgaaaatata    1560
caaaccattc aaatggacca aaacattctc ggaaacattc cgtacacatt caaaagtcta    1620
tatagcttga gcttgctcaa tctatcccat aacaatttat ccggcctcat gccaactttt    1680
ctaagtggtc taaatctcac taaactggac ctatcctaca ataatttcca agggaaaata    1740
ccaagcattg gtctattcga taatcctgca attgtttcac tagatggcaa tccaggattg    1800
tgtggaggag acatggattt gcacatgcct ccatgccatg tcgctgcttc gagaagagta    1860
ggcagaacaa gcttattgat caaaatattg atcccaatat ttgggttcat gtcactcgta    1920
ttgctgtgta ctttttattc ctagagaaga ggacgtcaag aagagcatat agatcagagc    1980
tatcttatgg tgagcatttt gagaaagata cttataacga tttagctcaa gcaacacggg    2040
acttctcaga atccaacctg attgggagag gaagctatgg ttcggtgtat cgagggaagc    2100
tgaaggaaag caaaatggaa gtggcagtaa aggtttttga ccttgagatg agaggagcag    2160
aaagaagctt cgtgttagag tgtgaagcat tgtgaagcat tcaacaccgg aatcttcttc    2220
ccatcataac tgcttgctca acagtagata atataggaaa tgttttcaaa gctttaattt    2280
atgagttcat gcctaatggg agcctggaca catggctaca tcacaaaaaa gatgtggagg    2340
ctgcaaaaaa tcttggcttg actcagaata agcatagtgg ttgatatagc tgatgcattg    2400
gattatctgc accatgattg tggatggcca actgttcact gcgacttgaa acccaacatt    2460
atccttctag atgatgatat gaatgctctt ctgggagatt ttggaattgc acgcctctat    2520
cttgattatc agtcaaaatg ggcaggttca attagttcaa ttggtgtaaa gggaacaatt    2580
ggatatattc ctccaggtac ctatagttat tttagctcct tttttgatca tttatgtcaa    2640
tattttttat aggtagaaaa taagttataa cacaattaaa ttgttaattt gtgtgagcat    2700
tttccaattt agagtatgga gaaggtggcc atgcatcaat gtctggggat gtttatagtt    2760
ttgggattgt gttgctagag attttgacga gcaaaaggcc aacatatcct atgtttaagg    2820
atggcctgga catcattagc tttgtggaga ataactttcc cgatcaagta tttgaagtca    2880
ttgatgctca cctcctcgag gaatgcagga acccaactca aggaaatacc ttggtacaag    2940
aaaatgagat ctatcaattc ttggttgatc tgctgcaagt agcactttca tgccttcatt    3000
cgttaccatc tgaacgatca aacatgaagc aagtagctag cagaatgcat gcaatcaaaa    3060
cataacataa tgaaatcaca agtaataaga acaagggtgt tctatgaatt gtacaataac    3120
atattgttgg tacctaattt gaactaggtc taggatacct ttttggccaa agggctccac    3180
aaaggaagtg ttcggccgca tggaaaatag acatgtaaaa cagaaataag catttgtact    3240
gtaaataagt aatagatcag atggaaatat aagttaggaa gcgcttattg tgtaaggccc    3300
aaaatctgta taagaaaaaa aaaagtaaat atactactat gtataatttt gaggatttct    3360
tgatcctctt ttctttgagc aaattaaact aaaggaatta aagtagtcga atgacttcca    3420
ataacaattt tattccttta tagaatatac ctctataaac taaacacata atgataacta    3480
agaatttggt attcaagatt tatatccaaa acttaaaact aaaaggttgg agcaacaaat    3540
aaaagagaga ctttcatact acttatttcc tttaaaaact atatagcccc ttaaaatata    3600
gttgaaataa aataattcat gaggatatta tgtactccaa agtagatatg taatgaagat    3660
tacctttttt aagtgtgcat tcaaaataat gtttcctaaa taaataaata aataccaagt    3720
gaatatctca ttattgaagt atttgtcaat atatatatat ataaagaaag aaggaatgca    3780
tcatgctaga attttgaatg tgcatttaaa gcatagattc gaattcaaat gtgaaaagaa    3840
aaaaactgga atttgaaata aaaaaaacag caaatataaa agaaaaacaa ctttccccta    3900
cac                                                                  3903
<210>  36
<211>  1254
<212>  PRT
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  36
Met Ser His Trp Lys Gln Pro Ser Lys Leu Ala Met Leu Val Val Leu
1               5                   10                  15
Leu Leu Leu Leu Cys His Ala Val Asp Arg Val His Cys Ser Thr His
            20                  25                  30
His Asn Asn Ser Gln Asp Phe His Ser Leu Leu Glu Phe Lys Lys Gly
        35                  40                  45
Ile Thr Ser Asp Pro His Gly Val Leu Ser Asn Trp Asn Pro Ser Ile
    50                  55                  60
His Phe Cys His Trp His Gly Val Asn Cys Ser Ser Thr Arg Pro Tyr
65                  70                  75                  80
Arg Val Thr Glu Leu Asn Leu Thr Gly Gln Asn Leu Ala Gly Gln Ile
                85                  90                  95
Ser Ser Ser Leu Gly Asn Leu Thr Phe Leu His Ile Leu Arg Leu Ala
            100                 105                 110
Asn Asn Ser Phe His Gly Pro Ile Pro Leu Leu Asn Lys Leu Gln Asn
        115                 120                 125
Leu Ser Lys Leu Val Leu Gly Asn Asn Leu Leu Glu Asp Val Phe Pro
    130                 135                 140
Asp Trp Ile Thr Asn Cys Ser Asn Leu Val Ser Leu His Leu Tyr Gly
145                 150                 155                 160
Asn Gln Leu Thr Gly His Ile Pro Ser Asn Ile Asp Phe Leu Thr Lys
                165                 170                 175
Leu Ala Tyr Ile Ile Leu His Ser Asn Asn Leu Thr Gly Phe Ile Pro
            180                 185                 190
Pro Thr Leu Gly Asn Ile His Thr Leu Met Val Leu Asp Ile Ser Asn
        195                 200                 205
Asn Gln Leu Asn Gly Ser Ile Pro Asn Glu Val Trp Gln Ile Lys Asn
    210                 215                 220
Ile Glu Met Leu Asn Leu Ala Gly Asn Asn Leu Ser Gly Gly Ile Pro
225                 230                 235                 240
Asp Thr Leu Pro His Leu Ala Phe Leu Met Ile Leu Ser Leu Asp Thr
                245                 250                 255
Asn Met Leu Gly Ser Thr Leu Pro Ser Asn Ile Gly Asp Val Leu Pro
            260                 265                 270
Asn Leu Lys Glu Leu Tyr Leu Gly Gly Asn Phe Phe Leu Gly Thr Ile
        275                 280                 285
Pro Ser Ser Leu Gly Asn Ala Ser Asn Leu Glu Val Ile Asp Leu Pro
    290                 295                 300
Asn Asn Leu Phe Ser Gly Thr Ile Pro Ser Ser Phe Gly Asn Leu Ser
305                 310                 315                 320
Lys Leu Gln Thr Leu Asn Leu Glu Val Asn Met Leu Val Ala Arg Asp
                325                 330                 335
Ser Glu Gly Trp Gln Phe Phe Asp Ala Leu Ala Lys Cys Arg Tyr Leu
            340                 345                 350
Val Ile Leu Ser Val Ser His Asn His Leu His Gly Pro Ile Pro Asn
        355                 360                 365
Ser Ile Ala Asn Leu Ser Thr Ser Leu Gln Gln Leu Phe Met Gly Trp
    370                 375                 380
Asn Asn Leu Ser Gly Ile Val Pro Pro Thr Ile Gly Lys Leu Ser Gly
385                 390                 395                 400
Leu Thr Glu Leu Ser Leu Gln Asn Asn Asn Leu Thr Gly Thr Ile Glu
                405                 410                 415
Glu Trp Val Gly Lys Met Thr Asn Leu Thr Ile Leu Thr Leu Gln Ser
            420                 425                 430
Asn Asn Phe Thr Gly Lys Ile Pro Pro Ser Ile Gly Asn Leu Thr Gln
        435                 440                 445
Leu Thr Asn Phe Ser Val Ala Glu Asn Asn Phe Phe Gly Ser Val Pro
    450                 455                 460
Ser Asn Leu Trp Asn Leu Lys Ser Met Leu Tyr Leu Asp Leu Ser His
465                 470                 475                 480
Asn Asn Phe Gln Gly Ser Ile Leu Val Phe Gly Asn Leu Gly Leu Val
                485                 490                 495
Ser Leu Lys Ile Ser Ser Asn Lys Phe Ile Gly Glu Asn Pro Glu Thr
            500                 505                 510
Leu Gly Gln Leu Glu Asn Ile Gln Thr Ile Gln Met Asp Gln Asn Ile
        515                 520                 525
Leu Gly Asn Ile Pro Tyr Thr Phe Lys Ser Leu Tyr Ser Leu Ser Leu
    530                 535                 540
Leu Asn Leu Ser His Asn Asn Leu Ser Gly Leu Met Pro Thr Phe Leu
545                 550                 555                 560
Ser Gly Leu Asn Leu Thr Lys Leu Asp Leu Ser Tyr Asn Asn Phe Gln
                565                 570                 575
Gly Lys Ile Pro Ser Ile Gly Leu Phe Asp Asn Pro Ala Ile Val Ser
            580                 585                 590
Leu Asp Gly Asn Pro Gly Leu Cys Gly Gly Asp Met Asp Leu His Met
        595                 600                 605
Pro Pro Cys His Val Ala Ala Ser Arg Arg Val Gly Arg Thr Ser Leu
    610                 615                 620
Leu Ile Lys Ile Leu Ile Pro Ile Phe Gly Phe Met Ser Leu Val Leu
625                 630                 635                 640
Leu Cys Thr Phe Tyr Ser Arg Arg Gly Arg Gln Glu Glu His Ile Asp
                645                 650                 655
Gln Ser Tyr Leu Met Val Ser Ile Leu Arg Lys Ile Leu Ile Thr Ile
            660                 665                 670
Leu Lys Gln His Gly Thr Ser Gln Asn Pro Thr Leu Gly Glu Glu Ala
        675                 680                 685
Met Val Arg Cys Ile Glu Gly Ser Arg Lys Ala Lys Trp Lys Trp Gln
    690                 695                 700
Arg Phe Leu Thr Leu Arg Glu Glu Gln Lys Glu Ala Ser Cys Ser Val
705                 710                 715                 720
Lys His Cys Glu Ala Phe Asn Thr Gly Ile Phe Phe Pro Ser Leu Leu
                725                 730                 735
Ala Gln Gln Ile Ile Glu Met Phe Ser Lys Leu Phe Met Ser Ser Cys
            740                 745                 750
Leu Met Gly Ala Trp Thr His Gly Tyr Ile Thr Lys Lys Met Trp Arg
        755                 760                 765
Leu Gln Lys Ile Leu Ala Leu Arg Ile Ser Ile Val Val Asp Ile Ala
    770                 775                 780
Asp Ala Leu Asp Tyr Leu His His Asp Cys Gly Trp Pro Thr Val His
785                 790                 795                 800
Cys Asp Leu Lys Pro Asn Ile Ile Leu Leu Asp Asp Asp Met Asn Ala
                805                 810                 815
Leu Leu Gly Asp Phe Gly Ile Ala Arg Leu Tyr Leu Asp Tyr Gln Ser
            820                 825                 830
Lys Trp Ala Gly Ser Ile Ser Ser Ile Gly Val Lys Gly Thr Ile Gly
        835                 840                 845
Tyr Ile Pro Pro Gly Thr Tyr Ser Tyr Phe Ser Ser Phe Phe Asp His
    850                 855                 860
Leu Cys Gln Tyr Phe Leu Val Glu Asn Lys Leu His Asn Ile Val Asn
865                 870                 875                 880
Leu Cys Glu His Phe Pro Ile Ser Met Glu Lys Val Ala Met His Gln
                885                 890                 895
Cys Leu Gly Met Phe Ile Val Leu Gly Leu Cys Cys Arg Phe Arg Ala
            900                 905                 910
Lys Gly Gln His Ile Leu Cys Leu Arg Met Ala Trp Thr Ser Leu Ala
        915                 920                 925
Leu Trp Arg Ile Thr Phe Pro Ile Lys Tyr Leu Lys Ser Leu Met Leu
    930                 935                 940
Thr Ser Ser Arg Asn Ala Gly Thr Gln Leu Lys Glu Ile Pro Trp Tyr
945                 950                 955                 960
Lys Lys Met Arg Ser Ile Asn Ser Trp Leu Ile Cys Cys Lys His Phe
                965                 970                 975
His Ala Phe Ile Arg Tyr His Leu Asn Asp Gln Thr Ser Lys Leu Ala
            980                 985                 990
Glu Cys Met Gln Ser Lys His Asn Ile Met Lys Ser Gln Val Ile Arg
        995                 1000                1005
Thr Arg Val Phe Tyr Glu Leu Tyr Asn Asn Ile Leu Leu Val Pro
    1010                1015                1020
Asn Leu Asn Val Asp Thr Phe Leu Ala Lys Gly Leu His Lys Gly
    1025                1030                1035
Ser Val Arg Pro His Gly Lys Thr Cys Lys Thr Glu Ile Ser Ile
    1040                1045                1050
Cys Thr Val Asn Lys Ile Arg Trp Lys Tyr Lys Leu Gly Ser Ala
    1055                1060                1065
Tyr Cys Val Arg Pro Lys Ile Cys Ile Arg Lys Lys Lys Val Asn
    1070                1075                1080
Ile Leu Leu Cys Ile Ile Leu Arg Ile Ser Ser Ser Phe Leu Ala
    1085                1090                1095
Asn Thr Lys Gly Ile Lys Val Val Glu Leu Pro Ile Thr Ile Leu
    1100                1105                1110
Phe Leu Tyr Arg Ile Tyr Leu Tyr Lys Leu Asn Thr Leu Arg Ile
    1115                1120                1125
Trp Tyr Ser Arg Phe Ile Ser Lys Thr Asn Lys Val Gly Ala Thr
    1130                1135                1140
Asn Lys Arg Glu Thr Phe Ile Leu Leu Ile Ser Phe Lys Asn Tyr
    1145                1150                1155
Ile Ala Pro Asn Ile Val Glu Ile Lys Phe Met Arg Ile Leu Cys
    1160                1165                1170
Thr Pro Lys Ile Cys Asn Glu Asp Tyr Leu Phe Val Cys Ile Gln
    1175                1180                1185
Asn Asn Val Ser Ile Asn Lys Ile Pro Ser Glu Tyr Leu Ile Ile
    1190                1195                1200
Glu Val Phe Val Asn Ile Tyr Ile Tyr Lys Glu Arg Arg Asn Ala
    1205                1210                1215
Ser Cys Asn Phe Glu Cys Ala Phe Lys Ala Ile Arg Ile Gln Met
    1220                1225                1230
Lys Glu Lys Asn Trp Asn Leu Lys Lys Lys Gln Gln Ile Lys Lys
    1235                1240                1245
Asn Asn Phe Pro Leu His
    1250
<210>  37
<211>  7418
<212>  DNA
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  37
cggtgcagat ctgcgctagg gcaggaacgg ttgaagaagc gagctcgatg tcagtggtga      60
gcttcccgtt gctatcagtc tccctctagg tcggtctaga gttgaggtgg cgaattgaga     120
cgtaacctcg tgtcgagcca tcaactctca ccactctatt tatagactac gtaacaggaa     180
cccattaaac tcgtcttggg ctgaacaccc tcgattaggg tgcgaggtca tagttagccg     240
ttgggccaac tgatggagat caattctaac actacagagt gtacatacgg gtgaacccat     300
gaaccttgca gtagagaaac tgtaaggtaa ttttgtgtgg acttaaaaca ataatcatta     360
cactaatttg tgctgtgatt ccttaattgt ctggtgcctg gtgggctagg ctggaattcc     420
taaccttcac tgccccgcct acacgttgcg cactttgact acacttggaa aacagtctgc     480
tggtcctagc tgcgataaca ttgaacaggc atgagatgca aaagcttgac ctgatgccgg     540
tccgttccaa ccatcgattg ttaaaagatc ctgatggcga tacagcaaac ttgcttgacc     600
tggtgcaagt cttcgggccc tacactcggt tgagcagaga acgacacaat cctatgaatt     660
aaaattcacc accagagagt actctttatt aatttagctg aatagcttcc tgtgactcga     720
ctcgatccat cgatattgca gagaagacca ggcctcgtct gtctagctga tgtgatgaac     780
atgcatcaac cttgctttct acagtatctc ctcctcatcc tcgtgcctct gctgctgtcc     840
gcctctgctt atgatagatc aggtgagttc accttcgatg gtttctctgg caacgatcta     900
ataaccatgg atggtgcagc ttctgtcacc aatggcctct tgagcctcac tagcgggcag     960
aaggaattga gaggtcacgc tttctatgct ttccctctcg atttcacaag tgccgccgtc    1020
ccaaatagct ccgccgttct gtccttctct acaacctttg tctttgccat catcggccca    1080
tatgatgatt tgagtggcca tggtcttgcc tttgtgcttt cttccaccaa tgatttgttt    1140
actgccttgc ctagccagta cctaggcctt ctcaattcat ggaatgatgg taactcatca    1200
aatcatcttc ttgcaatcga gcttgatacc atacagagca cccagttcaa tgacatcaac    1260
gacaaccaca ttgggatcga catcaatagc ctgtcctccg ttgcctcaca cactgcaggc    1320
tactacacct ccaatggaga gtttcatccg ctgaaactta taagtagaaa accgatgcag    1380
gtgtgggtgg actatgacag caaccatatc atgctgaatg tcacaatagc accttacttc    1440
atgtcgtcca ccaaacccag caggccactg ctctcgacta tattcaatct ttcctctatt    1500
ttgccaaccg caacagtata cgctgggttt tcctccgcga ctggcacact taactgcaag    1560
cattacgttc ttggctggag cttcaagctc aacggagaag ctgcatcact caactattcc    1620
gccttatctg tcaagactat ccaagaaatc gcacaacaag ttccaactag cgatcaccca    1680
ggcagctaca aggttctgat atgcaaaatt ctcttaccga tcgttgcaat tttcgtactt    1740
gtttctgctg ttcttgttaa ggtccacctg aagaggcgat cacaagaaag ggctgaacta    1800
gactggcaga gggagtatgg gcctccgtct ttcacctaca aagaattgtt ggccgccact    1860
catggattca aggacaagat gcttcttggt agaggaggct ttgggagtgt gtacaaagga    1920
gtgatgccta tctctaagca gatagctgct attaagcgag tgtcgccgga gtcaaggcaa    1980
gggatgaggg aattcatggc cgagatcacc atcctcggtc atcttcgcca ccgcaatctg    2040
gtgcagctga ttgggtattg cagccataag caacatcttc ttttggtcta cgactacatg    2100
ccaaatggaa gccttgactg ctatttgcat actcaagatc atggcagcac caatctatgc    2160
tgggctcaaa gattccacat catcaaaggt atagcatctg gtctcttcta cctccacgag    2220
gactgggagc aggttgtcat ccaccgggac atcaagacca gcaatgtcct tctcgatagc    2280
gagatgaatg cgaggctagg tgattttggc cttgcaagat cccatgatca tggtgctgat    2340
gctcacacca cgcatgtggc aggtacgtac ggttacattg ctcccgagtt ggccaggctt    2400
ggcaaggcaa ccaaagcaac tgacatcttt gccttcggcg tgttgatgat ggaggtcacc    2460
tgtgcaatac ggccaatatg ggtgaacacc accgatgggg agcctctggc cctagcagac    2520
tgggtgcttg ctgcatggca aggtggttcc atcaccgatg ccgtcgaccc aagactggat    2580
agttatgtgg atgaggagat agagttagtc ctgaaacttg gcttgctctg ttcgcatccc    2640
tcgccaaacg cgaggccttg catgcgcctt gtcatgcagt acctgcaaag cgacacacca    2700
ctcccatcag actttcaacc gaatagttta ctgagcattg gtgtgattca agatgaaatg    2760
catgatcagc gagccatgtc atgtccatca gctgctataa ccgatctttc caaagggaga    2820
taacatcgct gtgttacttt ggcaataatc atctgcaatg tgctcttgct taggactagt    2880
ttggaagcaa gaataatgga ggagattgag agactacaat cccatactat tcaattttaa    2940
acagtgatag ctagtttgga aactacattt ttctaaggga tttctatttt cctcagggaa    3000
aataaactta tttcccttaa gaaaatataa atcccttaaa aaatgatgtt tccaaactag    3060
ccttgaggga ttctagtctc atcgatcccc tctattccag cccttagtgt tggtactgct    3120
actgcttatt tgacgtgcta ttctatggca gagtttcgat ttacttggag taatgtgtca    3180
aatcctatga cgttgtatta ctatgaacat ctttcgtctg agattatcca gctactattc    3240
ataacgtcaa tatactagat gcagtaccca aatgtactaa atgttgtaca actgtaggtc    3300
tggcctctcg gaatgctgta gaattttggt ttaatttcat gcttcctgat tattaccatg    3360
gacatctaag agcttccacg agtgagaagt ctagttgtat atgtttgatt tagcaaatta    3420
ctttttgtct ttttttaatg caataaagaa tttaaggtgt tctcattttt aatacagtaa    3480
ggaacaaaac tcgaaaaaag gggaaaaaca tcaatatata ctagtacatt attcagatca    3540
taccttgtac tagtcagaac tgccactctc tgctgaaagg gtccaagcac taaaatagcg    3600
tttgcattaa tatttcttgt ttaccttaca ctgattaatg ggcatgttta tataccaatt    3660
cacatcaatg actataatac agttgcttaa atttgattca tcaagaacct tgctaaatta    3720
ctacagtact agagtccctt tgcagcaagt ttttcgattt ggctctttga taccacttaa    3780
attcctcttc cctaagcaac tcagccaatc tattttgcaa gcaatgtttt aaatcaagct    3840
cttgagctga taaaagcact acttctgttt ttttatcaag tccatctagc ttattcaaga    3900
ttgttttctt ctctttattg caggcaccac tggtattttt agcccaacct ctcaaaaatt    3960
taaatttttc ttctctttat tgcaggcacc aagtcttctt atctttgcat gccacctctc    4020
cagaggtgta tggcccccaa ttcttgtgat cttacattct taaccatgtc atagaatcca    4080
tctcacagta atcaccctaa ttcaaattta aattgttttt taatatgatt cgagctggat    4140
tcaccaaagt ttaaaagaag gggggtatga tcagagatat ctctattaag ggctaccacc    4200
gatgataagg gatacttcta atccaattct gtggtcagta acactctatc aagtttctca    4260
tatgtaggtg tagtaaggtt attagcccaa gtaaactgcc gcccagacat ctccaactcc    4320
ttcagacaaa gaccatcaat tacgacatta aacaggaaag gccaacgatg gtcaaaattg    4380
tccttatttt ttcgctgggt tttctgagaa tattgaaatc ccccctatta aaagaggttg    4440
ggattcatga ctccctaagc agactaactc cgacaagaat tgttcttttt tatccacttg    4500
agcaggacca tagacctcta ctaaagccca cttgaagcaa tcacttttgt tgcacaaggt    4560
gaacttaaca aaaaagtcac cctcctctat ggcccctata tcaaacacgt ctaagtcaat    4620
tcccaataaa atacctcctg agcgaccttc tagctctttg caatgccaaa gaaaattctt    4680
ccctccacat agattacgca aaaatggatc ggtagacgac ttacgcaccg tctccgaaat    4740
tgtaatgaaa gacaagtttt gctctttagc caaatctgaa acaaacttat gtttcatggg    4800
gtctttgaac ccatcactat tccaaaaaat acctttcatt tgaaaccaaa gtttttttct    4860
tctacctttt cgatttgtgt tataagatac tgcagtacga gccatagaat tatgctcact    4920
gttagtatcc ataatttcct ctagaacttc actacacatg ttactaagca ataatttatt    4980
caactcatca ctttcataaa actcaatctc ttccttaact attgccctat ctgctacttc    5040
ttgttaattt tgggacagag aactagagcc acccgactga accatggact caataaagtt    5100
ttgtacaaca caagaatcat ttgtaaattt aaagcctaaa ggatgtagat tagccacaac    5160
atcatcacac gaaaaatgta aagatgaaca agagttactc ataccttcct caatagaagt    5220
attgctcctt tgagtcacat gagagcccac actagcatct ggtacatccg ccagctttgc    5280
tatctccgga gtcatgagca caaattctcc catcaagact tgcgaatctg aaaccttctt    5340
accatgactc ccatctccac ctatttttgc tccactagat tcttctctca cttgcttgtc    5400
tctcatagaa gaatcctttt gttgtggcac tggtgccata ccccctggca catttgcatc    5460
atcatctcca aaaccaaaat catccatatc catcggctcg ggcttctcct catttatatt    5520
ctcctccacc ctgaattgca gctcatacac aaagtcgcca atggccacat ccacatattg    5580
tggaatgagg tttggatcaa gaactgacac ttgtagtcga catacatcaa acttgttggt    5640
gaacttcata tcaactgcct tggtcgcacc taaaatcgaa cccaccgccc agataagaag    5700
aaattgaatc atcacagacg gtaaaccaat gaattggacc caaaccttct taagcttcgc    5760
ttttgctttt tttctgaaac acatattcct caatttttat atatgcacta tgttctgttt    5820
gcaccacccc cattccaacg tatgatcgag ttcagaacgt gacggaaaag tggtcttgaa    5880
gcaattaacc ccagtctaaa caacctccca attccattta ctagaaacca tcctctgcaa    5940
ttctgagatc acttgtgcct cagagagaac accccttgta actttaacca cagccgctgc    6000
tacctcctct ttagggtttg ttcgcttatt ttcaatccat atggattgaa gtggattgat    6060
acggattgag agagattttg acttactagg gattgaaacc ccctcaatcc atatggattg    6120
gggtagaacc gaacaagccc ttaggcttac ttttatgctc aaaaggtatg taataaaatc    6180
caagaccatc caaagcataa ccacaggtca aagcacttaa tttatccaca catgcccttt    6240
ggttagacat ctatagcagt agggttgctt accagtgcct tctttccctc ctagcttgtt    6300
tcactagctt gacatcagac cctccctgat caggtaccag aacaccttgt ggattttaga    6360
atagactcta aacaatggag gtgtgggcac agcccctgta agcgaggaat tcaagccgct    6420
gaccggcaca ggagcttttc ccagagcttg atttagcaag gcaatagcct gaacaaacat    6480
gtctgttgag ggagatgaac caagcccagc gactgccgac aagtcgacgg atttggctcc    6540
ctggagctca cctccacgct gcaggttacc acctaaaaaa gacccacttt cagaaccaaa    6600
ccccccacgg gtccctccgg cagaaccagc tccatgacca ggattgaaat tctggccacc    6660
agcatcattg tcaaaccctc ccctgttgcc gtggtagggg cgccggaaac cacatctgtt    6720
catcaatcct ggctgcccat tgttatgccc gcctcgattg cctcctgctc catcacatcc    6780
tccttcatgc cccatctgat tcctgtcgcc tgccatggtg atggcgtctg cgtacgagga    6840
aatgaaggga caaacaacgg cagtcgaacg aactatggcc tatgggagcc ctagagaaac    6900
caaccgtgct gtcagttctt gcaaacaagg aaatcagggc atatgtgggc caagctttaa    6960
gacccggtgc cgaaaagaag agtcgctagg ccctggactc acagccacag aaacctttcc    7020
acgacaactt tttgaaactc tccattaatc ctagagccag ctgagttgcg atccaccgtt    7080
ctcggtggca cattagcatt agcttgctga tattgtggcc aagatttggt tcttggagaa    7140
gcaaacttgg ctctgcttaa cgcatccccc aaagatttgg ttctacctta gcagcaaaat    7200
aataatgcag tagtataggc ttaaggcagt gttttaaaac tgggagattc aaaagatcag    7260
tggcttgccg ttgctcaaaa gaactggcgg ctcgtggagc tctttgacga tgcacggctt    7320
ttcggaacgc ggttctaggg ctctccagtg taagtgtaac ctacgcaccg caaacaataa    7380
aacacaccaa ttgaggcaaa acaatgtcga gagcgaag                            7418
<210>  38
<211>  639
<212>  PRT
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  38
Met Asn Met His Gln Pro Cys Phe Leu Gln Tyr Leu Leu Leu Ile Leu
1               5                   10                  15
Val Pro Leu Leu Leu Ser Ala Ser Ala Tyr Asp Arg Ser Gly Glu Phe
            20                  25                  30
Thr Phe Asp Gly Phe Ser Gly Asn Asp Leu Ile Thr Met Asp Gly Ala
        35                  40                  45
Ala Ser Val Thr Asn Gly Leu Leu Ser Leu Thr Ser Gly Gln Lys Glu
    50                  55                  60
Leu Arg Gly His Ala Phe Tyr Ala Phe Pro Leu Asp Phe Thr Ser Ala
65                  70                  75                  80
Ala Val Pro Asn Ser Ser Ala Val Leu Ser Phe Ser Thr Thr Phe Val
                85                  90                  95
Phe Ala Ile Ile Gly Pro Tyr Asp Asp Leu Ser Gly His Gly Leu Ala
            100                 105                 110
Phe Val Leu Ser Ser Thr Asn Asp Leu Phe Thr Ala Leu Pro Ser Gln
        115                 120                 125
Tyr Leu Gly Leu Leu Asn Ser Trp Asn Asp Gly Asn Ser Ser Asn His
    130                 135                 140
Leu Leu Ala Ile Glu Leu Asp Thr Ile Gln Ser Thr Gln Phe Asn Asp
145                 150                 155                 160
Ile Asn Asp Asn His Ile Gly Ile Asp Ile Asn Ser Leu Ser Ser Val
                165                 170                 175
Ala Ser His Thr Ala Gly Tyr Tyr Thr Ser Asn Gly Glu Phe His Pro
            180                 185                 190
Leu Lys Leu Ile Ser Arg Lys Pro Met Gln Val Trp Val Asp Tyr Asp
        195                 200                 205
Ser Asn His Ile Met Leu Asn Val Thr Ile Ala Pro Tyr Phe Met Ser
    210                 215                 220
Ser Thr Lys Pro Ser Arg Pro Leu Leu Ser Thr Ile Phe Asn Leu Ser
225                 230                 235                 240
Ser Ile Leu Pro Thr Ala Thr Val Tyr Ala Gly Phe Ser Ser Ala Thr
                245                 250                 255
Gly Thr Leu Asn Cys Lys His Tyr Val Leu Gly Trp Ser Phe Lys Leu
            260                 265                 270
Asn Gly Glu Ala Ala Ser Leu Asn Tyr Ser Ala Leu Ser Val Lys Thr
        275                 280                 285
Ile Gln Glu Ile Ala Gln Gln Val Pro Thr Ser Asp His Pro Gly Ser
    290                 295                 300
Tyr Lys Val Leu Ile Cys Lys Ile Leu Leu Pro Ile Val Ala Ile Phe
305                 310                 315                 320
Val Leu Val Ser Ala Val Leu Val Lys Val His Leu Lys Arg Arg Ser
                325                 330                 335
Gln Glu Arg Ala Glu Leu Asp Trp Gln Arg Glu Tyr Gly Pro Pro Ser
            340                 345                 350
Phe Thr Tyr Lys Glu Leu Leu Ala Ala Thr His Gly Phe Lys Asp Lys
        355                 360                 365
Met Leu Leu Gly Arg Gly Gly Phe Gly Ser Val Tyr Lys Gly Val Met
    370                 375                 380
Pro Ile Ser Lys Gln Ile Ala Ala Ile Lys Arg Val Ser Pro Glu Ser
385                 390                 395                 400
Arg Gln Gly Met Arg Glu Phe Met Ala Glu Ile Thr Ile Leu Gly His
                405                 410                 415
Leu Arg His Arg Asn Leu Val Gln Leu Ile Gly Tyr Cys Ser His Lys
            420                 425                 430
Gln His Leu Leu Leu Val Tyr Asp Tyr Met Pro Asn Gly Ser Leu Asp
        435                 440                 445
Cys Tyr Leu His Thr Gln Asp His Gly Ser Thr Asn Leu Cys Trp Ala
    450                 455                 460
Gln Arg Phe His Ile Ile Lys Gly Ile Ala Ser Gly Leu Phe Tyr Leu
465                 470                 475                 480
His Glu Asp Trp Glu Gln Val Val Ile His Arg Asp Ile Lys Thr Ser
                485                 490                 495
Asn Val Leu Leu Asp Ser Glu Met Asn Ala Arg Leu Gly Asp Phe Gly
            500                 505                 510
Leu Ala Arg Ser His Asp His Gly Ala Asp Ala His Thr Thr His Val
        515                 520                 525
Ala Gly Thr Tyr Gly Tyr Ile Ala Pro Glu Leu Ala Arg Leu Gly Lys
    530                 535                 540
Ala Thr Lys Ala Thr Asp Ile Phe Ala Phe Gly Val Leu Met Met Glu
545                 550                 555                 560
Val Thr Cys Ala Ile Arg Pro Ile Trp Val Asn Thr Thr Asp Gly Glu
                565                 570                 575
Pro Leu Ala Leu Ala Asp Trp Val Leu Ala Ala Trp Gln Gly Gly Ser
            580                 585                 590
Ile Thr Asp Ala Val Asp Pro Arg Leu Asp Ser Tyr Val Asp Glu Glu
        595                 600                 605
Ile Glu Leu Val Leu Lys Leu Gly Leu Leu Cys Ser His Pro Ser Pro
    610                 615                 620
Asn Ala Arg Pro Cys Met Arg Leu Val Met Gln Tyr Leu Pro Gln
625                 630                 635
<210>  39
<211>  4132
<212>  DNA
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  39
atggaccgga tgctgctcga ccagctggcc ggcgaggccc tgcgggaggt gctgcacgcg      60
gtgcagggca ccctgttctg ccgctccacc gccgagcgcc tgcgccggag cgtcgagccg     120
ctgctgccgc tcgtccaggg cctcggcccg cacagcaccc agcgctccgc gggggagctc     180
ggcgagctcg cggcgcgggt cagggaggcg ctcgacctgg cgcgccgcgc cgccgcgtcc     240
ccgcgctgga acgtctaccg cgccgcgcag ctgtcgcgcc ggatggaggc ggccgaccgc     300
ggcatcgcgc gctggctgga gcgccacgcc cccgcgcacg tcatcggcgg cgtgcgcagg     360
ctccgcgacg aggccgacgc gcgcatcggt cgcctcgagc gccgcgtcga ggagatcgcc     420
gccgccaccg cgcagccgcc gccccccgcc ctctccgtcc ccgtcgcgcc gccgccgcac     480
aagggcgtgc ccatgccgat ggaggcgccg ctcgctaagc ccgccttcgt cgctatgacg     540
aaggaggtgc cgcagcacaa gggcatggct atgtcggagc cggtgccggc gaaggcggcg     600
cccgccaaag ccggggtgat ggccatggac atcgccgacg gacacgaaga cgcggagggg     660
atggttggcg gcggcgtcaa ggtggccaag gaaaaggtga aggagatggt tatgagcggc     720
ggcggcagct gggaggtggt cgggatctcc ggcatgggcg gcagcggcaa gaccacgctc     780
gccatggagg tcttcaggga tcacaaggtc cgaggtaagc agaacatcga ccaccagatc     840
caaaccttct tttccttcag ttctttccaa atcctgtgca aaggtcgcgt ctttcacagg     900
aatcgtcctg tccttccctg caaaaattgc atcttcccca tgaatagtgg gtgctaaatt     960
ctccaaattg gcggcatagc atcgtaggtg gttggtttgc gtgcgtgtcg tgcaattagg    1020
taaaggcgag gttgatgctt tcgtttttcc ccaaaccaca tgttcggtca aatttggcgc    1080
tttgaccacc agctagtgac aactgtactg ttgtgatggg gtttcagatt gcttttgtga    1140
attaccatgc ttggacttga gtaaccttat cgtgtcgtgt tcatggacca tggtggctac    1200
ttaatcttaa atcaagatac gtatctgctt aacgaaccgc acatgagact aatcaaatct    1260
atttcacata gaataaaccc aattcagatc caagtaacct gcttttttga agaaaaaaaa    1320
atctggagct gtgctaattt taggatctcc tttcagtgca aggaattggg atgacgatgt    1380
tgatttagac ctagtttagg tactctagta ttgaccataa tctatatata ttgaggtgga    1440
ttaaggtgta acttaaacta atttacaccc caatccactt taacacatgt ggattgaggt    1500
caataccaga atacccctaa tgccgcaacc cgggtttgta gctccatcat ctctgttttc    1560
caccaaaaaa ctcatagtaa acttaaattc aattgtcaca acaacatata ttcaacgatt    1620
ttaagtgact gctatcccaa accgtagctg atcttagggc atgtacagtg gagagacacc    1680
aaaacggttc tccaagcaca ggagacaact aagagactct attgtacagt ggagtgtcta    1740
taaacgtagt ctattaataa atacaaaatt aaatgtattt gtatagcatc agatcgatag    1800
aacagacgac aaattcgtac agtgggaagt gaggcgtctg ttgctacttg gtttacgagc    1860
cagaggcgtc tcttcacgga gagacggctc taagattttt ttgcaaataa ccccttaaac    1920
accttaagag cctccacatt aaacaccact gtacatgtcc ttaacttcat ggtatgcttt    1980
gtggtcaaca tggtgattat ggatctcatc aaaagcccat ggctacatat ctgctccctg    2040
tttgcaagct ctctctctcc cccacccctt ttcatgattc tgacatagtt tctttttttc    2100
tacagcctac ttcaacgaca ggatcttctt cgagacgatc tcgcagtccg cgaatctgga    2160
ggccatcaag atgaagctgt gggagcagat cagcggcaac atggtgctgg gtacatacaa    2220
ccagatccca gaatggcagc tcaagctagg accaagggac cgaggacccg tccttgtgat    2280
cctcgacgat gtttggtctc tcccgcagct tgaggagctc atcttcaagt tccctgggtg    2340
caagacccta gtcgtatcaa ggttcaagtt ccccacgctg gtgaaacaga cgtatgagat    2400
gcagctgcta gacgaggcgg cggctctgtc cgtcttctgc cgcgctgcgt tcgaccagga    2460
gtgtgttccg cagaccgccg acaagagatt ggtcaggcag gtctctgcag agtgcagagg    2520
tctccctctg gctctgaagg tcatcggcgc gtcgctgcgc gaccagcctc cgaagatttg    2580
gctcagcgcc aaaaaccggt tgtctcgagg agaggccatt tctgactgcc atgagaccaa    2640
gcttctggag aggatggcgg ccagtgtcga gtgcttgtcc gagaaggtta gggactgttt    2700
ccttgacctg ggctgcttcc cggaggacaa gaagatcccc ctcgacgtct tgatcaacat    2760
ctggatggag atccatgacc ttgatgagcc agatgctttt gccatcttgg ttgagctttc    2820
gaacaagaac cttcttaccc tcgttaacga tgcacagtac gtatcatcgg acatttatgt    2880
gcttcaaaat gttcagaact tagatatccc aataacaggt ttttctaact ctgctgttct    2940
atacgtgcag gaacaaggct ggagatctgt acagtagcta ccatgactac tcggtgacac    3000
agcacgacgt gttgagagat cttgctcttc acatgagcgg gcgtgacccg ctcaacaagc    3060
gcaggcggtt ggtgatgccg agaagggaag aaacacttcc gagggattgg cagaggaaca    3120
aggatgctcc gtttgaagct cagatagtct ccattcatac aggtatagcg ttagtagtta    3180
attgttcttc attacatttg tagatattca tcgctaacaa ctcgtcatcc aacttattta    3240
gtgcgcttat tctgaattcc tactgaaatt tccaactatt tccaaaactc caggcgaaat    3300
gaaagaatcc gactggttcc agatgagctt ccccaaggca gaagtgctga tcctcaactt    3360
cgcgtcgagc ctgtactacc tgccgccgtt catcgcgacg atgcagaacc tgaaggccct    3420
ggtgctgatc aactacggca gcagcagcag cagcgcagcc ctggacaacc tctccgcctt    3480
caccacgctg agcgggctga ggagcctgtg gctggagaag atcaggctgc cgccgctgcc    3540
caagacgacg atcccgctga ggaacctgca caagatctcg ctcgtgctct gcgagctgaa    3600
cagcagtcta agagggtcga cgatggacct gtcgacgacg ttcccgcgcc tgtccaacct    3660
gacgatcgac cactgcatag acctcaagga gctgccgccg agcgtctgcg agatcgggtc    3720
cctggagacc atctccatct ccaactgcca cgacctcacc gagctgccat acgagctggg    3780
gcggctgcgc tgcctcagca tcctccgcgt gtacgcctgc ccggcgctgt ggcggctgcc    3840
ggcgtcggtg tgcagcctga agcggctcaa gtacctggac atctcgcagt gcatcaacct    3900
gacggacctc cccgaggagc tcggccacct gacgagcctg gagaagatcg acatgcgcga    3960
gtgctcgcgc ctcaggagcc tccccaggtc gtcgtcctcg ctcaagtccc tcggacacgt    4020
cgtgtgcgac gaggagacgg cgctgctgtg gcgtgaggcc gagcaggtca tccctgacct    4080
ccgcgtgcag gtggccgagg agtgctacaa cctggactgg ctcgcggact ga            4132
<210>  40
<211>  2616
<212>  DNA
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  40
atggaccgga tgctgctcga ccagctggcc ggcgaggccc tgcgggaggt gctgcacgcg      60
gtgcagggca ccctgttctg ccgctccacc gccgagcgcc tgcgccggag cgtcgagccg     120
ctgctgccgc tcgtccaggg cctcggcccg cacagcaccc agcgctccgc gggggagctc     180
ggcgagctcg cggcgcgggt cagggaggcg ctcgacctgg cgcgccgcgc cgccgcgtcc     240
ccgcgctgga acgtctaccg cgccgcgcag ctgtcgcgcc ggatggaggc ggccgaccgc     300
ggcatcgcgc gctggctgga gcgccacgcc cccgcgcacg tcatcggcgg cgtgcgcagg     360
ctccgcgacg aggccgacgc gcgcatcggt cgcctcgagc gccgcgtcga ggagatcgcc     420
gccgccaccg cgcagccgcc gccccccgcc ctctccgtcc ccgtcgcgcc gccgccgcac     480
aagggcgtgc ccatgccgat ggaggcgccg ctcgctaagc ccgccttcgt cgctatgacg     540
aaggaggtgc cgcagcacaa gggcatggct atgtcggagc cggtgccggc gaaggcggcg     600
cccgccaaag ccggggtgat ggccatggac atcgccgacg gacacgaaga cgcggagggg     660
atggttggcg gcggcgtcaa ggtggccaag gaaaaggtga aggagatggt tatgagcggc     720
ggcggcagct gggaggtggt cgggatctcc ggcatgggcg gcagcggcaa gaccacgctc     780
gccatggagg tcttcaggga tcacaaggtc cgagcctact tcaacgacag gatcttcttc     840
gagacgatct cgcagtccgc gaatctggag gccatcaaga tgaagctgtg ggagcagatc     900
agcggcaaca tggtgctggg tacatacaac cagatcccag aatggcagct caagctagga     960
ccaagggacc gaggacccgt ccttgtgatc ctcgacgatg tttggtctct cccgcagctt    1020
gaggagctca tcttcaagtt ccctgggtgc aagaccctag tcgtatcaag gttcaagttc    1080
cccacgctgg tgaaacagac gtatgagatg cagctgctag acgaggcggc ggctctgtcc    1140
gtcttctgcc gcgctgcgtt cgaccaggag tgtgttccgc agaccgccga caagagattg    1200
gtcaggcagg tctctgcaga gtgcagaggt ctccctctgg ctctgaaggt catcggcgcg    1260
tcgctgcgcg accagcctcc gaagatttgg ctcagcgcca aaaaccggtt gtctcgagga    1320
gaggccattt ctgactgcca tgagaccaag cttctggaga ggatggcggc cagtgtcgag    1380
tgcttgtccg agaaggttag ggactgtttc cttgacctgg gctgcttccc ggaggacaag    1440
aagatccccc tcgacgtctt gatcaacatc tggatggaga tccatgacct tgatgagcca    1500
gatgcttttg ccatcttggt tgagctttcg aacaagaacc ttcttaccct cgttaacgat    1560
gcacagaaca aggctggaga tctgtacagt agctaccatg actactcggt gacacagcac    1620
gacgtgttga gagatcttgc tcttcacatg agcgggcgtg acccgctcaa caagcgcagg    1680
cggttggtga tgccgagaag ggaagaaaca cttccgaggg attggcagag gaacaaggat    1740
gctccgtttg aagctcagat agtctccatt catacaggcg aaatgaaaga atccgactgg    1800
ttccagatga gcttccccaa ggcagaagtg ctgatcctca acttcgcgtc gagcctgtac    1860
tacctgccgc cgttcatcgc gacgatgcag aacctgaagg ccctggtgct gatcaactac    1920
ggcagcagca gcagcagcgc agccctggac aacctctccg ccttcaccac gctgagcggg    1980
ctgaggagcc tgtggctgga gaagatcagg ctgccgccgc tgcccaagac gacgatcccg    2040
ctgaggaacc tgcacaagat ctcgctcgtg ctctgcgagc tgaacagcag tctaagaggg    2100
tcgacgatgg acctgtcgac gacgttcccg cgcctgtcca acctgacgat cgaccactgc    2160
atagacctca aggagctgcc gccgagcgtc tgcgagatcg ggtccctgga gaccatctcc    2220
atctccaact gccacgacct caccgagctg ccatacgagc tggggcggct gcgctgcctc    2280
agcatcctcc gcgtgtacgc ctgcccggcg ctgtggcggc tgccggcgtc ggtgtgcagc    2340
ctgaagcggc tcaagtacct ggacatctcg cagtgcatca acctgacgga cctccccgag    2400
gagctcggcc acctgacgag cctggagaag atcgacatgc gcgagtgctc gcgcctcagg    2460
agcctcccca ggtcgtcgtc ctcgctcaag tccctcggac acgtcgtgtg cgacgaggag    2520
acggcgctgc tgtggcgtga ggccgagcag gtcatccctg acctccgcgt gcaggtggcc    2580
gaggagtgct acaacctgga ctggctcgcg gactga                              2616
<210>  41
<211>  871
<212>  PRT
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  41
Met Asp Arg Met Leu Leu Asp Gln Leu Ala Gly Glu Ala Leu Arg Glu
1               5                   10                  15
Val Leu His Ala Val Gln Gly Thr Leu Phe Cys Arg Ser Thr Ala Glu
            20                  25                  30
Arg Leu Arg Arg Ser Val Glu Pro Leu Leu Pro Leu Val Gln Gly Leu
        35                  40                  45
Gly Pro His Ser Thr Gln Arg Ser Ala Gly Glu Leu Gly Glu Leu Ala
    50                  55                  60
Ala Arg Val Arg Glu Ala Leu Asp Leu Ala Arg Arg Ala Ala Ala Ser
65                  70                  75                  80
Pro Arg Trp Asn Val Tyr Arg Ala Ala Gln Leu Ser Arg Arg Met Glu
                85                  90                  95
Ala Ala Asp Arg Gly Ile Ala Arg Trp Leu Glu Arg His Ala Pro Ala
            100                 105                 110
His Val Ile Gly Gly Val Arg Arg Leu Arg Asp Glu Ala Asp Ala Arg
        115                 120                 125
Ile Gly Arg Leu Glu Arg Arg Val Glu Glu Ile Ala Ala Ala Thr Ala
    130                 135                 140
Gln Pro Pro Pro Pro Ala Leu Ser Val Pro Val Ala Pro Pro Pro His
145                 150                 155                 160
Lys Gly Val Pro Met Pro Met Glu Ala Pro Leu Ala Lys Pro Ala Phe
                165                 170                 175
Val Ala Met Thr Lys Glu Val Pro Gln His Lys Gly Met Ala Met Ser
            180                 185                 190
Glu Pro Val Pro Ala Lys Ala Ala Pro Ala Lys Ala Gly Val Met Ala
        195                 200                 205
Met Asp Ile Ala Asp Gly His Glu Asp Ala Glu Gly Met Val Gly Gly
    210                 215                 220
Gly Val Lys Val Ala Lys Glu Lys Val Lys Glu Met Val Met Ser Gly
225                 230                 235                 240
Gly Gly Ser Trp Glu Val Val Gly Ile Ser Gly Met Gly Gly Ser Gly
                245                 250                 255
Lys Thr Thr Leu Ala Met Glu Val Phe Arg Asp His Lys Val Arg Ala
            260                 265                 270
Tyr Phe Asn Asp Arg Ile Phe Phe Glu Thr Ile Ser Gln Ser Ala Asn
        275                 280                 285
Leu Glu Ala Ile Lys Met Lys Leu Trp Glu Gln Ile Ser Gly Asn Met
    290                 295                 300
Val Leu Gly Thr Tyr Asn Gln Ile Pro Glu Trp Gln Leu Lys Leu Gly
305                 310                 315                 320
Pro Arg Asp Arg Gly Pro Val Leu Val Ile Leu Asp Asp Val Trp Ser
                325                 330                 335
Leu Pro Gln Leu Glu Glu Leu Ile Phe Lys Phe Pro Gly Cys Lys Thr
            340                 345                 350
Leu Val Val Ser Arg Phe Lys Phe Pro Thr Leu Val Lys Gln Thr Tyr
        355                 360                 365
Glu Met Gln Leu Leu Asp Glu Ala Ala Ala Leu Ser Val Phe Cys Arg
    370                 375                 380
Ala Ala Phe Asp Gln Glu Cys Val Pro Gln Thr Ala Asp Lys Arg Leu
385                 390                 395                 400
Val Arg Gln Val Ser Ala Glu Cys Arg Gly Leu Pro Leu Ala Leu Lys
                405                 410                 415
Val Ile Gly Ala Ser Leu Arg Asp Gln Pro Pro Lys Ile Trp Leu Ser
            420                 425                 430
Ala Lys Asn Arg Leu Ser Arg Gly Glu Ala Ile Ser Asp Cys His Glu
        435                 440                 445
Thr Lys Leu Leu Glu Arg Met Ala Ala Ser Val Glu Cys Leu Ser Glu
    450                 455                 460
Lys Val Arg Asp Cys Phe Leu Asp Leu Gly Cys Phe Pro Glu Asp Lys
465                 470                 475                 480
Lys Ile Pro Leu Asp Val Leu Ile Asn Ile Trp Met Glu Ile His Asp
                485                 490                 495
Leu Asp Glu Pro Asp Ala Phe Ala Ile Leu Val Glu Leu Ser Asn Lys
            500                 505                 510
Asn Leu Leu Thr Leu Val Asn Asp Ala Gln Asn Lys Ala Gly Asp Leu
        515                 520                 525
Tyr Ser Ser Tyr His Asp Tyr Ser Val Thr Gln His Asp Val Leu Arg
    530                 535                 540
Asp Leu Ala Leu His Met Ser Gly Arg Asp Pro Leu Asn Lys Arg Arg
545                 550                 555                 560
Arg Leu Val Met Pro Arg Arg Glu Glu Thr Leu Pro Arg Asp Trp Gln
                565                 570                 575
Arg Asn Lys Asp Ala Pro Phe Glu Ala Gln Ile Val Ser Ile His Thr
            580                 585                 590
Gly Glu Met Lys Glu Ser Asp Trp Phe Gln Met Ser Phe Pro Lys Ala
        595                 600                 605
Glu Val Leu Ile Leu Asn Phe Ala Ser Ser Leu Tyr Tyr Leu Pro Pro
    610                 615                 620
Phe Ile Ala Thr Met Gln Asn Leu Lys Ala Leu Val Leu Ile Asn Tyr
625                 630                 635                 640
Gly Ser Ser Ser Ser Ser Ala Ala Leu Asp Asn Leu Ser Ala Phe Thr
                645                 650                 655
Thr Leu Ser Gly Leu Arg Ser Leu Trp Leu Glu Lys Ile Arg Leu Pro
            660                 665                 670
Pro Leu Pro Lys Thr Thr Ile Pro Leu Arg Asn Leu His Lys Ile Ser
        675                 680                 685
Leu Val Leu Cys Glu Leu Asn Ser Ser Leu Arg Gly Ser Thr Met Asp
    690                 695                 700
Leu Ser Thr Thr Phe Pro Arg Leu Ser Asn Leu Thr Ile Asp His Cys
705                 710                 715                 720
Ile Asp Leu Lys Glu Leu Pro Pro Ser Val Cys Glu Ile Gly Ser Leu
                725                 730                 735
Glu Thr Ile Ser Ile Ser Asn Cys His Asp Leu Thr Glu Leu Pro Tyr
            740                 745                 750
Glu Leu Gly Arg Leu Arg Cys Leu Ser Ile Leu Arg Val Tyr Ala Cys
        755                 760                 765
Pro Ala Leu Trp Arg Leu Pro Ala Ser Val Cys Ser Leu Lys Arg Leu
    770                 775                 780
Lys Tyr Leu Asp Ile Ser Gln Cys Ile Asn Leu Thr Asp Leu Pro Glu
785                 790                 795                 800
Glu Leu Gly His Leu Thr Ser Leu Glu Lys Ile Asp Met Arg Glu Cys
                805                 810                 815
Ser Arg Leu Arg Ser Leu Pro Arg Ser Ser Ser Ser Leu Lys Ser Leu
            820                 825                 830
Gly His Val Val Cys Asp Glu Glu Thr Ala Leu Leu Trp Arg Glu Ala
        835                 840                 845
Glu Gln Val Ile Pro Asp Leu Arg Val Gln Val Ala Glu Glu Cys Tyr
    850                 855                 860
Asn Leu Asp Trp Leu Ala Asp
865                 870
<210>  42
<211>  3639
<212>  DNA
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  42
atggagttgg accggctgct gctcgaccag ctggctggcg aggccctacg ggagcttctg      60
cacgcggtgc agggcaccct gttctgccgc tccaccgccg agcgcctgcg ccggagcgtc     120
gagccgctgc tgccgctcgt gcagggcctc ggcccgcacg cccagcgctc cgcgggggac     180
ctcggcgagc tcgcggcgcg ggtcagggag gcgctcgacc tggcccgccg cgccgccacg     240
tccccgcgct ggaacgtcta ccgctccgcg cagctgtcgc gccggatgga ggcggccgac     300
cgcggcatcg cgcgctggct ggagcgccac gcccccgcgc acgtcatcgg caacgtgcgc     360
gggctccgcg acgagtccca cgcgcgcatc gcccgcctcg agcgccgcgt cgacgagatc     420
gccgccaccg ccgcgcagcc gccgccccca gccctctccg tccccgtcgc gccgcacaag     480
ggcgtggcca tgccgatgga ggtgccaact cacaagggca tggctatgcc gatgccggtt     540
ccggtgcagg cggtgcccgc caaggccggg gtggtggcca tggacatgga cctcaccgag     600
ggacacgaaa acgaggggat ggttggcgcc ggcgttaagg tggccaagga aaaggtgaag     660
gagatggtta tgagcggcgg cggcggctgg gaggtggtcg gtatctccgg catgggcggc     720
agcggcaaga ccacgctcgc catggagatc ttcagggatc ataaggtccg aggtaaggag     780
aacaagaacc agatcataac catcttttcc ttcagtcctt ttccaaatcg tgtgcaaagg     840
tcgcgtcttt ctcaggaatc gtcccgtcct ttcgtgcaaa aattttagct tcccatgaat     900
tgttgggtgg aaaattctcc agattggggg cgtggccgtg gcatcttgga tggttggttt     960
acgtgcgtgt cgtgcaatta ggtgaaggcg aggttgatgc tttcgctttt ccccaaacct    1020
catgcttggt caaatttggc gctttgacca gctagtggca actgtactat tgtgatgggg    1080
ttagattact tctgaattct cacaactata agtgtaccac aacatctact ttgaaattct    1140
gcttggactt gagtaacttt atcgtgttca tggttggcta gtggctgctt aatcttaaat    1200
caagatagat acctgtttaa tgaacggcac atgagactaa ctaaatctat ttcacaaaga    1260
atgaacccaa ttcagatcca actatccaag taacctgttt cttcgggggg aaaaaagaag    1320
atctggagct atcccaattt attgtcttct gctagtgcaa ggaattagga tcggtgatgt    1380
tggtttatag cagtaattaa gatagctaaa ttcagcagct tgtgttcata gctccgtcgt    1440
ctctgcttgc cacaaaaaat aaaagatcat agtaaactta aattcaatta ccacaacagc    1500
atctactggc caattcgaag tgactgctat cccagatctt agttcagtct agcttcatga    1560
ttgtctttgt gatctgatcc ctttttgcaa gctttttccc cccttcagga ttgtctttgt    1620
gattctgatt ctgacgtagt ttcttccttt ctacagccta cttcaatgat aggatcttct    1680
ttgagacgat ctcacaatcc gcaaacttgg aggccatcaa gatgaagctg tgggagcaga    1740
tcagcggcaa catggtgctc ggtgcataca accagatccc agaatggcag ctcaagttag    1800
gaccaagaga ccgagggcct gtccttgtga tccttgacga tgtttggtct ctcccacagc    1860
tcgaggagct caccttcagg ttccctgggt gcaagactct agttgtgtcg aggttcaagt    1920
tccccacgct ggtaaaacag acatacgaaa tgcagttgct agacgaggag gcggccttgt    1980
ccgtcttctg ccgtgccgct ttcgatcagg agtgtgttcc gcggactgct gacaagagat    2040
tggtcaggca ggtctctgca gagtgcaggg gccttccact ggctctgaag gttattggtg    2100
cgtcgttgcg cgaccagcct cctaagatct ggctcagcgc caagaaccgg ctgtctcgag    2160
gagaggctat ttccgactcc catgagacca agcttctaga gaggatggcg gcaagcgtcg    2220
agtgcttgtc ggagaaggtt agagactgct tccttgatct gggatgcttc ccggaggaca    2280
agaagatccc ccttgatgtc ttgatcaaca tctggatgga ggttcatgat cttgatgaac    2340
cagatgcttt cgccatcttg gttgagcttt cgaacaagaa ccttcttacc ctcgttaacg    2400
atgcacagta tgtatcgtcg gtcatttgtg tgcttcaaaa tgttctatgt cgcaaataac    2460
atggctttta aactcctttt ttgctgctct gccttcagga acaaggctgg agatttgtac    2520
agcagctacc atgactactc ggtgacacaa catgatgtgc tgagagatct tgctcttcac    2580
atgagtgggc gtgaccctct gaacaagcgt aggcggttgg tgatgccgag aaaggaagag    2640
acacttccaa gggactggca gaggaataag gatactccgt ttgaagctca gatagtttcc    2700
attcatacag gtacagtaca gctaccatta gtcatttact gaacatgatt ttgtagcttt    2760
cttccttggg gcagaatgat ctgaccaact attccgaaaa ctccaggtga aatgaaggga    2820
tctgactggt tccagatgag cttccccaag gcagaagtgc tcatcctcaa cttcgcctca    2880
agcctatact acctcccgcc gttcatcgcg tcgatgcaga acctgaaagc cctggtgctg    2940
atcaactacg gcaccagcag cgcggccctt gacaacctat ccgccttcac cacgctgaac    3000
ggcctgagga gtctctggct ggagaagatc aggctcccgc cgctgccgaa gaccaccatc    3060
ccgctgaaga acctgcacaa gatctcgctc gtcctctgcg agctgaacag cagcctgaga    3120
gggtcgacga tggacctgtc catgacattc ccgcgcctct ccaacctcac gatcgaccac    3180
tgcatagacc taaaggagct gccagcaagc atctgcgaga tcggctccct ggagaccgtc    3240
tccatctcca actgccacga cctcaccgag ctgccatacg agctgggcaa gctgcactgt    3300
ctgagcatcc tccgggtgta cgcctgcccg gcgctgtggc ggctcccggc gtcggtgtgc    3360
agcctgaaga ggctcaagta cctcgacata tcccagtgca tcaacctgac ggacctcccg    3420
gaggagctcg gccacctgac gagcctggag aagatcgaca tgcgggagtg ctctcgcctc    3480
aggagcctcc cgaggtcgtc gtcctccctc aagtccctcg gccacgtcgt gtgcgacgag    3540
gagacggcgc tgctgtggcg ggaggccgag caggtcatcc ctgacctccg ggtgcaggtg    3600
gccgaagagt gctacaactt ggactggcta gcggactga                           3639
<210>  43
<211>  2568
<212>  DNA
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  43
atggagttgg accggctgct gctcgaccag ctggctggcg aggccctacg ggagcttctg      60
cacgcggtgc agggcaccct gttctgccgc tccaccgccg agcgcctgcg ccggagcgtc     120
gagccgctgc tgccgctcgt gcagggcctc ggcccgcacg cccagcgctc cgcgggggac     180
ctcggcgagc tcgcggcgcg ggtcagggag gcgctcgacc tggcccgccg cgccgccacg     240
tccccgcgct ggaacgtcta ccgctccgcg cagctgtcgc gccggatgga ggcggccgac     300
cgcggcatcg cgcgctggct ggagcgccac gcccccgcgc acgtcatcgg caacgtgcgc     360
gggctccgcg acgagtccca cgcgcgcatc gcccgcctcg agcgccgcgt cgacgagatc     420
gccgccaccg ccgcgcagcc gccgccccca gccctctccg tccccgtcgc gccgcacaag     480
ggcgtggcca tgccgatgga ggtgccaact cacaagggca tggctatgcc gatgccggtt     540
ccggtgcagg cggtgcccgc caaggccggg gtggtggcca tggacatgga cctcaccgag     600
ggacacgaaa acgaggggat ggttggcgcc ggcgttaagg tggccaagga aaaggtgaag     660
gagatggtta tgagcggcgg cggcggctgg gaggtggtcg gtatctccgg catgggcggc     720
agcggcaaga ccacgctcgc catggagatc ttcagggatc ataaggtccg agcctacttc     780
aatgatagga tcttctttga gacgatctca caatccgcaa acttggaggc catcaagatg     840
aagctgtggg agcagatcag cggcaacatg gtgctcggtg catacaacca gatcccagaa     900
tggcagctca agttaggacc aagagaccga gggcctgtcc ttgtgatcct tgacgatgtt     960
tggtctctcc cacagctcga ggagctcacc ttcaggttcc ctgggtgcaa gactctagtt    1020
gtgtcgaggt tcaagttccc cacgctggta aaacagacat acgaaatgca gttgctagac    1080
gaggaggcgg ccttgtccgt cttctgccgt gccgctttcg atcaggagtg tgttccgcgg    1140
actgctgaca agagattggt caggcaggtc tctgcagagt gcaggggcct tccactggct    1200
ctgaaggtta ttggtgcgtc gttgcgcgac cagcctccta agatctggct cagcgccaag    1260
aaccggctgt ctcgaggaga ggctatttcc gactcccatg agaccaagct tctagagagg    1320
atggcggcaa gcgtcgagtg cttgtcggag aaggttagag actgcttcct tgatctggga    1380
tgcttcccgg aggacaagaa gatccccctt gatgtcttga tcaacatctg gatggaggtt    1440
catgatcttg atgaaccaga tgctttcgcc atcttggttg agctttcgaa caagaacctt    1500
cttaccctcg ttaacgatgc acagaacaag gctggagatt tgtacagcag ctaccatgac    1560
tactcggtga cacaacatga tgtgctgaga gatcttgctc ttcacatgag tgggcgtgac    1620
cctctgaaca agcgtaggcg gttggtgatg ccgagaaagg aagagacact tccaagggac    1680
tggcagagga ataaggatac tccgtttgaa gctcagatag tttccattca tacaggtgaa    1740
atgaagggat ctgactggtt ccagatgagc ttccccaagg cagaagtgct catcctcaac    1800
ttcgcctcaa gcctatacta cctcccgccg ttcatcgcgt cgatgcagaa cctgaaagcc    1860
ctggtgctga tcaactacgg caccagcagc gcggcccttg acaacctatc cgccttcacc    1920
acgctgaacg gcctgaggag tctctggctg gagaagatca ggctcccgcc gctgccgaag    1980
accaccatcc cgctgaagaa cctgcacaag atctcgctcg tcctctgcga gctgaacagc    2040
agcctgagag ggtcgacgat ggacctgtcc atgacattcc cgcgcctctc caacctcacg    2100
atcgaccact gcatagacct aaaggagctg ccagcaagca tctgcgagat cggctccctg    2160
gagaccgtct ccatctccaa ctgccacgac ctcaccgagc tgccatacga gctgggcaag    2220
ctgcactgtc tgagcatcct ccgggtgtac gcctgcccgg cgctgtggcg gctcccggcg    2280
tcggtgtgca gcctgaagag gctcaagtac ctcgacatat cccagtgcat caacctgacg    2340
gacctcccgg aggagctcgg ccacctgacg agcctggaga agatcgacat gcgggagtgc    2400
tctcgcctca ggagcctccc gaggtcgtcg tcctccctca agtccctcgg ccacgtcgtg    2460
tgcgacgagg agacggcgct gctgtggcgg gaggccgagc aggtcatccc tgacctccgg    2520
gtgcaggtgg ccgaagagtg ctacaacttg gactggctag cggactga                 2568
<210>  44
<211>  855
<212>  PRT
<213>  玉米（Zea mays）
<400>  44
Met Glu Leu Asp Arg Leu Leu Leu Asp Gln Leu Ala Gly Glu Ala Leu
1               5                   10                  15
Arg Glu Leu Leu His Ala Val Gln Gly Thr Leu Phe Cys Arg Ser Thr
            20                  25                  30
Ala Glu Arg Leu Arg Arg Ser Val Glu Pro Leu Leu Pro Leu Val Gln
        35                  40                  45
Gly Leu Gly Pro His Ala Gln Arg Ser Ala Gly Asp Leu Gly Glu Leu
    50                  55                  60
Ala Ala Arg Val Arg Glu Ala Leu Asp Leu Ala Arg Arg Ala Ala Thr
65                  70                  75                  80
Ser Pro Arg Trp Asn Val Tyr Arg Ser Ala Gln Leu Ser Arg Arg Met
                85                  90                  95
Glu Ala Ala Asp Arg Gly Ile Ala Arg Trp Leu Glu Arg His Ala Pro
            100                 105                 110
Ala His Val Ile Gly Asn Val Arg Gly Leu Arg Asp Glu Ser His Ala
        115                 120                 125
Arg Ile Ala Arg Leu Glu Arg Arg Val Asp Glu Ile Ala Ala Thr Ala
    130                 135                 140
Ala Gln Pro Pro Pro Pro Ala Leu Ser Val Pro Val Ala Pro His Lys
145                 150                 155                 160
Gly Val Ala Met Pro Met Glu Val Pro Thr His Lys Gly Met Ala Met
                165                 170                 175
Pro Met Pro Val Pro Val Gln Ala Val Pro Ala Lys Ala Gly Val Val
            180                 185                 190
Ala Met Asp Met Asp Leu Thr Glu Gly His Glu Asn Glu Gly Met Val
        195                 200                 205
Gly Ala Gly Val Lys Val Ala Lys Glu Lys Val Lys Glu Met Val Met
    210                 215                 220
Ser Gly Gly Gly Gly Trp Glu Val Val Gly Ile Ser Gly Met Gly Gly
225                 230                 235                 240
Ser Gly Lys Thr Thr Leu Ala Met Glu Ile Phe Arg Asp His Lys Val
                245                 250                 255
Arg Ala Tyr Phe Asn Asp Arg Ile Phe Phe Glu Thr Ile Ser Gln Ser
            260                 265                 270
Ala Asn Leu Glu Ala Ile Lys Met Lys Leu Trp Glu Gln Ile Ser Gly
        275                 280                 285
Asn Met Val Leu Gly Ala Tyr Asn Gln Ile Pro Glu Trp Gln Leu Lys
    290                 295                 300
Leu Gly Pro Arg Asp Arg Gly Pro Val Leu Val Ile Leu Asp Asp Val
305                 310                 315                 320
Trp Ser Leu Pro Gln Leu Glu Glu Leu Thr Phe Arg Phe Pro Gly Cys
                325                 330                 335
Lys Thr Leu Val Val Ser Arg Phe Lys Phe Pro Thr Leu Val Lys Gln
            340                 345                 350
Thr Tyr Glu Met Gln Leu Leu Asp Glu Glu Ala Ala Leu Ser Val Phe
        355                 360                 365
Cys Arg Ala Ala Phe Asp Gln Glu Cys Val Pro Arg Thr Ala Asp Lys
    370                 375                 380
Arg Leu Val Arg Gln Val Ser Ala Glu Cys Arg Gly Leu Pro Leu Ala
385                 390                 395                 400
Leu Lys Val Ile Gly Ala Ser Leu Arg Asp Gln Pro Pro Lys Ile Trp
                405                 410                 415
Leu Ser Ala Lys Asn Arg Leu Ser Arg Gly Glu Ala Ile Ser Asp Ser
            420                 425                 430
His Glu Thr Lys Leu Leu Glu Arg Met Ala Ala Ser Val Glu Cys Leu
        435                 440                 445
Ser Glu Lys Val Arg Asp Cys Phe Leu Asp Leu Gly Cys Phe Pro Glu
    450                 455                 460
Asp Lys Lys Ile Pro Leu Asp Val Leu Ile Asn Ile Trp Met Glu Val
465                 470                 475                 480
His Asp Leu Asp Glu Pro Asp Ala Phe Ala Ile Leu Val Glu Leu Ser
                485                 490                 495
Asn Lys Asn Leu Leu Thr Leu Val Asn Asp Ala Gln Asn Lys Ala Gly
            500                 505                 510
Asp Leu Tyr Ser Ser Tyr His Asp Tyr Ser Val Thr Gln His Asp Val
        515                 520                 525
Leu Arg Asp Leu Ala Leu His Met Ser Gly Arg Asp Pro Leu Asn Lys
    530                 535                 540
Arg Arg Arg Leu Val Met Pro Arg Lys Glu Glu Thr Leu Pro Arg Asp
545                 550                 555                 560
Trp Gln Arg Asn Lys Asp Thr Pro Phe Glu Ala Gln Ile Val Ser Ile
                565                 570                 575
His Thr Gly Glu Met Lys Gly Ser Asp Trp Phe Gln Met Ser Phe Pro
            580                 585                 590
Lys Ala Glu Val Leu Ile Leu Asn Phe Ala Ser Ser Leu Tyr Tyr Leu
        595                 600                 605
Pro Pro Phe Ile Ala Ser Met Gln Asn Leu Lys Ala Leu Val Leu Ile
    610                 615                 620
Asn Tyr Gly Thr Ser Ser Ala Ala Leu Asp Asn Leu Ser Ala Phe Thr
625                 630                 635                 640
Thr Leu Asn Gly Leu Arg Ser Leu Trp Leu Glu Lys Ile Arg Leu Pro
                645                 650                 655
Pro Leu Pro Lys Thr Thr Ile Pro Leu Lys Asn Leu His Lys Ile Ser
            660                 665                 670
Leu Val Leu Cys Glu Leu Asn Ser Ser Leu Arg Gly Ser Thr Met Asp
        675                 680                 685
Leu Ser Met Thr Phe Pro Arg Leu Ser Asn Leu Thr Ile Asp His Cys
    690                 695                 700
Ile Asp Leu Lys Glu Leu Pro Ala Ser Ile Cys Glu Ile Gly Ser Leu
705                 710                 715                 720
Glu Thr Val Ser Ile Ser Asn Cys His Asp Leu Thr Glu Leu Pro Tyr
                725                 730                 735
Glu Leu Gly Lys Leu His Cys Leu Ser Ile Leu Arg Val Tyr Ala Cys
            740                 745                 750
Pro Ala Leu Trp Arg Leu Pro Ala Ser Val Cys Ser Leu Lys Arg Leu
        755                 760                 765
Lys Tyr Leu Asp Ile Ser Gln Cys Ile Asn Leu Thr Asp Leu Pro Glu
    770                 775                 780
Glu Leu Gly His Leu Thr Ser Leu Glu Lys Ile Asp Met Arg Glu Cys
785                 790                 795                 800
Ser Arg Leu Arg Ser Leu Pro Arg Ser Ser Ser Ser Leu Lys Ser Leu
                805                 810                 815
Gly His Val Val Cys Asp Glu Glu Thr Ala Leu Leu Trp Arg Glu Ala
            820                 825                 830
Glu Gln Val Ile Pro Asp Leu Arg Val Gln Val Ala Glu Glu Cys Tyr
        835                 840                 845
Asn Leu Asp Trp Leu Ala Asp
    850                 855

Claims (61)

1.一种在作物植物细胞中产生包含多个种内多核苷酸序列的异源基因组基因座的方法，所述方法包括将两个或更多个种内多核苷酸序列引入所述植物细胞中预定的异源基因组基因座，其中
(a)引入步骤不会导致对所述植物来说不是天然的转基因或外源多核苷酸的整合；
(b)所述种内多核苷酸赋予所述植物一种或多种农艺学特征；
(c)在所述种内多核苷酸整合至所述异源基因组基因座之前，所述种内多核苷酸中的至少一个或多个来自不同的染色体，或者与所述异源基因组基因座相比，所述种内多核苷酸不位于与其天然配置相同的染色体中；并且
(d)所述引入步骤包括不是传统育种的至少一种定点基因组修饰。
2.如权利要求1所述的方法，其中所述基因组基因座与包含一种或多种转基因性状的基因组基因座相邻，所述转基因性状包含不是来自相同植物物种的多个多核苷酸。
3.如权利要求2所述的方法，其中所述转基因性状包含赋予对一种或多种昆虫的抗性的一种或多种性状。
4.如权利要求2所述的方法，其中所述转基因性状包含除草剂耐受性状。
5.如权利要求1所述的方法，其中所述基因组基因座由约1至约5cM或作物植物物种的等效物理染色体图谱距离的染色体区定义。
6.如权利要求5所述的方法，其中所述染色体区为约10Kb至约50Mb。
7.如权利要求1所述的方法，其中所述多核苷酸序列包含基因的至少两个等位基因。
8.如权利要求1所述的方法，其中所述植物为玉米、大豆、卡诺拉油菜或棉花植物。
9.一种在优良作物植物基因组中产生疾病超级基因座以提高所述优良作物植物中的性状渗入效率的方法，所述方法包括通过以下的工程化来在所述作物植物染色体的预定基因组基因座处引入多种抗病性状：(a)插入两个或更多个抗病基因、(b)通过靶向染色体工程化来基因组易位一个或多个抗病基因、(c)通过靶向基因组修饰在所述基因组基因座处复制一个或多个抗病基因、(d)通过引入一个或多个插入来修饰所述基因组基因座、(e)缺失或取代所述基因组中的核苷酸、或上述的组合。
10.如权利要求9所述的方法，其中所述疾病超级基因座与转基因性状存在连锁不平衡。
11.如权利要求10所述的方法，其中所述转基因性状选自由昆虫抗性、除草剂耐受性和农艺学性状组成的组。
12.如权利要求10所述的方法，其中所述转基因性状为先前存在的商业性状。
13.如权利要求9所述的方法，其中通过减少至少50％回交或减少至少两代或三代回交来提高所述性状渗入效率。
14.如权利要求9所述的方法，其中所述植物为玉米、大豆、卡诺拉油菜或棉花植物。
15.一种用于获得具有经修饰的基因组基因座的植物细胞的方法，所述经修饰的基因组基因座包含至少两个异源多核苷酸序列或至少两种性状，所述至少两个异源多核苷酸序列赋予对至少一种植物疾病的增强的抗病性，所述至少两种性状通过两种不同的作用模式导致对至少一种疾病的抗性，其中所述至少两个多核苷酸序列与相应的基因组基因座异源并且来自相同的植物物种，所述方法包括：
a.在植物细胞的基因组基因座的至少一个靶位点处引入位点特异性修饰；
b.将赋予增强的抗病性的至少两个多核苷酸序列引入所述靶位点；以及
c.获得具有基因组基因座的植物细胞，所述基因组基因座包含赋予增强的抗病性的至少两个多核苷酸序列。
16.如权利要求15所述的方法，其中所述至少一个靶位点包含选自表2的靶位点。
17.如权利要求15所述的方法，其中所述两个异源多核苷酸中的至少一个进一步包含位点特异性修饰。
18.如权利要求17所述的方法，其中所述位点特异性修饰是遗传修饰或表观遗传修饰。
19.如权利要求15所述的方法，其中所述多核苷酸序列编码赋予增强的抗病性的多肽序列。
20.如权利要求19所述的方法，其中所述多核苷酸序列编码赋予增强的抗病性的多肽序列，其中所述多肽序列与选自由以下组成的组的多肽序列具有至少90％同一性：RppK(SEQ ID NO：11)、Htl(SEQ ID NO：8)、NLB18(SEQ ID NO：3或5)、NLR01(SEQ IDNo：29)、NLR02(SEQ ID No：26)、RCG1(SEQ ID No：31)、和RCG1b(SEQ ID No：33)。
21.如权利要求19所述的方法，其中所述多核苷酸序列编码赋予增强的抗病性的多肽序列，其中所述多肽序列与选自由以下组成的组的多肽序列具有至少90％同一性：PRR03(SEQ ID No：36)、PRR01(SEQ ID No：38)、NLR01(SEQ ID No：41)、和NLR04(SEQ ID No：44)。
22.如权利要求15所述的方法，其中所述至少两个多核苷酸序列包含非编码RNA或dsRNA。
23.如权利要求15所述的方法，其中所述植物为玉米、大豆、卡诺拉油菜或棉花植物。
24.一种用于获得具有经修饰的基因组基因座的植物细胞的方法，所述经修饰的基因组基因座包含至少两个多核苷酸序列或至少两种性状，所述至少两个多核苷酸序列赋予对至少一种植物疾病的增强的抗病性，所述至少两种性状通过两种不同的作用模式导致对至少一种疾病的抗性，其中所述至少两个多核苷酸序列与相应的基因组基因座异源，所述方法包括：
a.在植物细胞的基因组基因座的一个或多个靶位点处引入双链断链或位点特异性修饰；
b.引入赋予增强的抗病性的至少两个多核苷酸序列；以及
c.获得具有基因组基因座的植物细胞，所述基因组基因座包含赋予增强的抗病性的至少两个多核苷酸序列。
25.如权利要求24所的方法，其中所述至少一个靶位点包含选自表2的靶位点。
26.如权利要求24所述的方法，其中所述多核苷酸序列编码赋予增强的抗病性的多肽序列。
27.如权利要求26所述的方法，其中所述多肽序列与选自由以下组成的组的多肽序列具有至少90％同一性：RppK(SEQ ID NO：11)、Htl(SEQ ID NO：8)、NLB18(SEQ ID NO：3或5)、NLR01(SEQ ID No：29)、NLR02(SEQ ID No：26)、RCG1(SEQ ID No：31)、和RCG1b(SEQ ID No：33)。
28.如权利要求26所述的方法，其中所述多肽序列与选自由以下组成的组的多肽序列具有至少90％同一性：PRR03(SEQ ID No：36)、PRR01(SEQ ID No：38)、NLR01(SEQ ID No：41)、和NLR04(SEQ ID No：44)。
29.如权利要求24所述的方法，其中所述植物为玉米、大豆、卡诺拉油菜或棉花植物。
30.一种包含经修饰的基因组基因座的玉米植物，所述基因座包含至少第一经修饰的靶位点和第二经修饰的靶位点，其中所述第一经修饰的靶位点包含赋予对第一植物疾病的增强的抗病性的第一多核苷酸序列，并且其中所述第二经修饰的靶位点包含赋予对所述第一植物疾病或第二植物疾病的增强的抗病性的第二多核苷酸序列，其中所述第一多核苷酸序列和所述第二多核苷酸序列与所述经修饰的基因组基因座异源并且存在于小于约1cM的基因组窗口内。
31.如权利要求30所述的植物，其中所述植物包含选自多肽、非编码RNA或dsRNA的第一或第二多核苷酸序列。
32.如权利要求31所述的植物，其中所述多肽与选自由以下组成的组的序列具有至少90％序列同一性：RppK(SEQ ID NO：11)、Ht1(SEQ ID NO：8)、NLB18(SEQ ID NO：3或5)、NLR01(SEQ ID No：29)、NLR02(SEQ ID No：26)、RCG1(SEQ ID No：31)、和RCG1b(SEQ ID No：33)。
33.如权利要求31所述的植物，其中所述多肽与选自由以下组成的组的序列具有至少90％序列同一性：PRR03(SEQ ID No：36)、PRR01(SEQ ID No：38)、NLR01(SEQ ID No：41)、和NLR04(SEQ ID No：44)。
34.如权利要求30所述的方法，其中所述植物为玉米、大豆、卡诺拉油菜或棉花植物。
35.一种用于获得具有经修饰的基因组基因座的植物细胞的方法，所述经修饰的基因组基因座包含至少两个多核苷酸序列或至少两种性状，所述至少两个多核苷酸序列赋予对至少一种植物疾病的增强的抗病性，所述至少两种性状通过两种不同的作用模式导致对至少一种疾病的抗性，其中所述至少两个多核苷酸序列与相应的基因组基因座异源，其中所述基因组基因座位于1号染色体的远端区。
36.如权利要求35所述的方法，其中所述基因组基因座位于端粒区。
37.一种在植物的单个基因座处育种转基因和天然疾病性状的方法，所述方法包括：
a.在植物的单个基因座处插入赋予对第一植物疾病的增强的抗病性的第一异源多核苷酸序列和赋予对所述第一植物疾病或第二植物疾病的增强的抗病性的第二异源多核苷酸序列；
b.在所述单个基因座处插入至少一个编码杀昆虫多肽、农艺学性状多肽或除草剂抗性多肽的异源多核苷酸序列；
c.将具有所述单个基因座的植物与不同的植物杂交；以及
d.获得包含所述单个基因座的子代植物；并且
其中与在多于一个的基因座处具有性状的植物相比，所述单个基因座允许较少的回交。
38.如权利要求37所述的方法，其中所述不同的植物包含第二基因座，所述第二基因座包含至少一个编码杀昆虫多肽或除草剂抗性多肽的异源多核苷酸序列。
39.如权利要求37所述的方法，其中所述植物为玉米、大豆、卡诺拉油菜或棉花植物。
40.一种经修饰的植物，其包含第一异源多核苷酸、和第二异源多核苷酸和第三异源多核苷酸，所述第一异源多核苷酸编码赋予对第一植物疾病的增强的抗病性的第一多肽，所述第二异源多核苷酸编码赋予对第二植物疾病的增强的抗病性的第二多肽；所述第三异源多核苷酸编码杀昆虫多肽或除草剂抗性多肽；其中，所述第一异源多核苷酸、第二异源多核苷酸和第三异源多核苷酸位于植物的单个基因座处。
41.如权利要求40所述的经修饰的植物，其中所述单个基因座包含约1cM、5cM或10cM。
42.如权利要求40所述的方法，其中所述植物为玉米、大豆、卡诺拉油菜或棉花植物。
43.一种将多个抗病基因座渗入或正向育种至优良种质的方法，其中将来自不同供体植物的两个或更多个异源多核苷酸插入优良品系并开发纯合抗性品系的时间段更短。
44.如权利要求43所述的方法，所述方法进一步包括改善具有多种抗病性的农艺学性状，并减少育种的产量累赘。
45.如权利要求43所述的方法，其中所述植物为玉米、大豆、卡诺拉油菜或棉花植物。
46.如权利要求1所述的方法，其中所述多核苷酸序列包含相同基因的至少两个拷贝。
47.如权利要求1所述的方法，其中所述基因组基因座世代稳定。
48.如权利要求1所述的方法，其中所述两个或更多个种内多核苷酸序列是遗传连锁的。
49.一种经修饰的作物植物，其包含堆叠在单个基因组基因座中的至少两个、至少三个或至少四个性状基因，其中单个基因座中的性状堆叠件允许提高育种效率，并且其中所述性状堆叠件包含通过基因组修饰引入的至少两种或更多种非转基因天然性状，所述天然性状包含来自相同作物植物的多核苷酸。
50.如权利要求49所述的植物，其中所述性状基因是天然性状。
51.如权利要求49所述的植物，其中所述性状基因选自由除草剂耐受性、昆虫抗性、产量性状或抗病性组成的组。
52.如权利要求49所述的方法，其中所述植物为玉米、大豆、卡诺拉油菜或棉花植物。
53.一种用于获得具有经修饰的基因组基因座的植物细胞的方法，所述经修饰的基因组基因座包含至少两个多核苷酸序列，其中所述至少两个多核苷酸序列与相应的基因组基因座异源，所述方法包括：
a.在植物细胞的基因组基因座的至少一个靶位点处引入位点特异性修饰；
b.将至少两个异源多核苷酸序列引入所述靶位点；以及
c.获得具有包含至少两个异源多核苷酸序列的基因组基因座的所述植物细胞。
54.如权利要求53所述的方法，其中所述两个异源多核苷酸序列中的至少一个包含赋予针对至少一种植物疾病的增强的抗病性的多核苷酸序列。
55.如权利要求53所述的方法，其中所述植物为玉米、大豆、卡诺拉油菜或棉花植物。
56.如权利要求53所述的方法，其中所述植物为单子叶植物或双子叶植物。
57.如权利要求53所述的方法，其中所述植物为玉蜀黍植物，并且其中所述至少两个多核苷酸序列选自由以下组成的组：NLB18、Htl、RppK、PRR03、NLR01、NLR02、RCG1、RCG1b、PRR03、PRR01、NLR01和NLR04。
58.一种经修饰的植物，其包含选自由NLB18、Ht1和RppK组成的组的至少三种抗病基因，其中所述至少三种抗病基因位于同一基因组基因座。
59.如权利要求58所述的方法，其中所述植物为玉蜀黍植物。
60.如权利要求58所述的经修饰的植物，其中所述植物进一步包含PRR03。
61.如权利要求58所述的经修饰的植物，其中所述植物进一步包含选自以下的至少一种基因：NLR01、NLR02、RCG1、RCG1b、PRR03、PRR01、NLR01和NLR04。
CN202180057080.2A 2020-08-18 2021-08-17 多种抗病基因及其基因组堆叠件 Pending CN116134143A (zh)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US202063067090P 2020-08-18 2020-08-18
US63/067090 2020-08-18
US202163154960P 2021-03-01 2021-03-01
US63/154960 2021-03-01
PCT/US2021/046227 WO2022040134A1 (en) 2020-08-18 2021-08-17 Multiple disease resistance genes and genomic stacks thereof

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN116134143A true CN116134143A (zh) 2023-05-16

Family

ID=77726530

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202180057080.2A Pending CN116134143A (zh) 2020-08-18 2021-08-17 多种抗病基因及其基因组堆叠件
CN202280054862.5A Pending CN117812999A (zh) 2020-08-18 2022-06-08 鉴定、选择和产生炭疽茎腐病抗性作物的方法
CN202280054858.9A Pending CN117998982A (zh) 2020-08-18 2022-08-16 用于灰叶斑病抗性的组合物和方法

Family Applications After (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202280054862.5A Pending CN117812999A (zh) 2020-08-18 2022-06-08 鉴定、选择和产生炭疽茎腐病抗性作物的方法
CN202280054858.9A Pending CN117998982A (zh) 2020-08-18 2022-08-16 用于灰叶斑病抗性的组合物和方法

Country Status (7)

Country Link
US (2) US20220056470A1 (zh)
EP (3) EP4200425A1 (zh)
CN (3) CN116134143A (zh)
BR (1) BR112023002885A2 (zh)
CA (3) CA3186862A1 (zh)
MX (1) MX2023001762A (zh)
WO (3) WO2022040134A1 (zh)

Family Cites Families (34)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6162967A (en) 1994-01-26 2000-12-19 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Positional cloning of soybean cyst nematode resistance genes
US7767882B2 (en) 2004-08-06 2010-08-03 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Genetic loci associated with Fusarium solani tolerance in soybean
US8367899B2 (en) * 2007-12-31 2013-02-05 E I Du Pont De Neumours And Company Gray leaf spot tolerant maize and methods of production
MX347392B (es) 2010-11-05 2017-04-25 Agrigenetics Inc Marcadores de soya ligados a resistencia al nematodo del quiste de la soya.
EA201391373A1 (ru) 2011-03-23 2014-07-30 Пайонир Хай-Бред Интернэшнл, Инк. Способы получения сложного локуса трансгенных признаков
WO2013025773A2 (en) 2011-08-16 2013-02-21 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Molecular markers associated with soybean root-knot nematode tolerance and methods of their use
GEP20217251B (en) 2012-05-25 2021-04-26 Charpentier Emmanuelle De Emanuel Methods and compositions for rna-directed target dna modification and for rna-directed modulation of transcription
US20130337442A1 (en) 2012-06-15 2013-12-19 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Genetic loci associated with soybean cyst nematode resistance and methods of use
CN103805595A (zh) * 2012-11-13 2014-05-21 南京大学 高通量克隆植物抗病基因的方法
AU2013359262C1 (en) 2012-12-12 2021-05-13 Massachusetts Institute Of Technology CRISPR-Cas component systems, methods and compositions for sequence manipulation
US9493843B2 (en) 2012-12-20 2016-11-15 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Genetic loci associated with Phytophthora tolerance in soybean and methods of use
GB201223097D0 (en) * 2012-12-20 2013-02-06 Max Planck Gesellschaft Stable transformation of a population and a method of biocontainment using haploinsufficiency and underdominance principles
US20140178866A1 (en) 2012-12-21 2014-06-26 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Genetic loci associated with soybean cyst nematode resistance and methods of use
US9464330B2 (en) 2012-12-21 2016-10-11 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Genetic loci associated with soybean cyst nematode resistance and methods of use
BR102014005635B1 (pt) 2013-03-12 2022-04-19 Dow Agrosciences Llc Método para identificação de pelo menos um determinante de resistência à phytophthora em uma planta de soja
BR112015023134B1 (pt) 2013-03-15 2023-10-17 Pioneer Hi-Bred International, Inc Método para identificar uma planta de soja ou um germoplasma de soja que exibe resistência aprimorada à mancha foliar olho-de-rã
US20160201072A1 (en) 2013-08-22 2016-07-14 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Genome modification using guide polynucleotide/cas endonuclease systems and methods of use
BR102014027438B1 (pt) * 2013-11-04 2022-09-27 Dow Agrosciences Llc Molécula de ácido nucleico recombinante e método de produção de uma célula vegetal transgênica
BR112017000482A2 (pt) 2014-07-11 2017-11-07 Du Pont métodos para produzir uma planta mutante e para gerar uma planta, planta, semente, rna, métodos para produzir uma célula, para duplicar um fragmento gênico, para substituir uma primeira sequência promotora, para inserir um elemento regulador em uma sequência de nucleotídeos e para inserir um íntron em uma sequência de nucleotídeos, planta de milho e célula vegetal
US10513711B2 (en) 2014-08-13 2019-12-24 Dupont Us Holding, Llc Genetic targeting in non-conventional yeast using an RNA-guided endonuclease
CA2956487A1 (en) 2014-09-12 2016-03-17 E. I. Du Pont De Nemours And Company Generation of site-specific-integration sites for complex trait loci in corn and soybean, and methods of use
DK3215611T3 (da) 2014-11-06 2019-11-25 Du Pont Peptid-medieret indgivelse af rna-guidet endonuklease i celler
EP3302031A4 (en) 2015-06-03 2018-11-14 Dow AgroSciences LLC Genetic locus associated with phytophthora root and stem rot in soybean
US20160355840A1 (en) * 2015-06-03 2016-12-08 E I Du Pont De Nemours And Company Methods of identifying and selecting maize plants with resistance to anthracnose stalk rot
US9894857B2 (en) 2015-07-31 2018-02-20 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Loci associated with charcoal rot drought complex tolerance in soybean
BR112018007796A2 (pt) 2015-11-06 2018-10-30 Du Pont plantas de soja, partes de plantas de soja ou sementes de soja, método para selecionar uma célula de soja, métodos de seleção de uma célula de soja e de produção de um locus e molécula de ácido nucleico
WO2017106447A1 (en) 2015-12-18 2017-06-22 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Genetic loci associated with reproductive growth phenotypes in soybean and methods of use
WO2017136204A1 (en) 2016-02-05 2017-08-10 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Genetic loci associated with brown stem rot resistance in soybean and methods of use
US12012605B2 (en) * 2016-10-13 2024-06-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Generating northern leaf blight resistant maize
US20200199609A1 (en) 2017-09-14 2020-06-25 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Compositions and methods for stature modification in plants
WO2019074841A1 (en) * 2017-10-09 2019-04-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. TYPE I-E CRISPR-CAS SYSTEMS FOR EUCARYOTE GENOME EDITION
BR112020024837A2 (pt) 2018-06-06 2021-03-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. métodos de identificação, seleção e produção de safras resistentes à ferrugem polissora
CN113166744A (zh) 2018-12-14 2021-07-23 先锋国际良种公司 用于基因组编辑的新颖crispr-cas系统
CN111197056B (zh) * 2020-01-09 2022-07-22 中国科学院华南植物园 棉花基因叠加目标系的建立及其应用

Also Published As

Publication number Publication date
EP4387436A1 (en) 2024-06-26
CN117998982A (zh) 2024-05-07
MX2023001762A (es) 2023-02-22
EP4387435A1 (en) 2024-06-26
WO2022040134A1 (en) 2022-02-24
CA3186862A1 (en) 2022-02-24
CA3228155A1 (en) 2023-02-23
CN117812999A (zh) 2024-04-02
US20230295650A1 (en) 2023-09-21
US20220056470A1 (en) 2022-02-24
WO2023023419A1 (en) 2023-02-23
BR112023002885A2 (pt) 2023-03-21
EP4200425A1 (en) 2023-06-28
CA3228149A1 (en) 2023-02-23
WO2023023499A1 (en) 2023-02-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN107304428B (zh) 小麦育性恢复基因及其应用
CN113631722B (zh) 鉴定、选择和生产南方玉米锈病抗性作物的方法
CN110295246B (zh) 与对非生物胁迫的响应相关联的基因座
WO2021143587A1 (en) Methods of identifying, selecting, and producing disease resistant crops
US20210324398A1 (en) Edited nac genes in plants
US20230054527A1 (en) Enhanced disease resistance of maize to northern corn leaf blight by a qtl on chromosome 4
CN116390644A (zh) 通过基因组编辑产生具有改进的转基因基因座的植物
CN112911926A (zh) 基因组编辑的精细作图和因果基因鉴定
US20210340557A1 (en) Beet necrotic yellow vein virus (bnyvv)-resistance modifying gene
JP2023538571A (ja) 植物の抵抗性遺伝子およびその同定手段
CN116782762A (zh) 植物单倍体诱导
CN111154767B (zh) 根长调控基因logl5及相应的构建体和其应用
CN112351680A (zh) 具有改进的消化率和标记物单倍型的植物
EP3571925A1 (en) Artificial marker allele
US20230024164A1 (en) Compositions and genome editing methods for improving grain yield in plants
US20220243287A1 (en) Drought tolerance in corn
CN112980839B (zh) 创制水稻高直链淀粉型新种质的方法及其应用
CN116134143A (zh) 多种抗病基因及其基因组堆叠件
CN110959043A (zh) 利用bcs1l基因和向导rna/cas核酸内切酶系统改良植物农艺性状的方法
CN115216488B (zh) 创制水稻大长粒型新种质或大长粒型矮杆新种质的方法及其应用
CN113999871B (zh) 创制矮杆直立株型的水稻种质的方法及其应用
WO2024124509A1 (en) Maize plants comprising resistance to southern leaf blight and compositions and methods for selecting and producing the same
AU2022434057A1 (en) Reduced height maize
CN115216488A (zh) 创制水稻大长粒型新种质或大长粒型矮杆新种质的方法及其应用
WO2023164453A2 (en) Multiple disease resistance genes and genomic stacks thereof

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination