CN116106533A - 评价化妆品、化妆品原料抗紫外辐照效果的方法 - Google Patents

评价化妆品、化妆品原料抗紫外辐照效果的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN116106533A
CN116106533A CN202310102248.8A CN202310102248A CN116106533A CN 116106533 A CN116106533 A CN 116106533A CN 202310102248 A CN202310102248 A CN 202310102248A CN 116106533 A CN116106533 A CN 116106533A
Authority
CN
China
Prior art keywords
nematode
cosmetic raw
nematodes
collagen
ultraviolet irradiation
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202310102248.8A
Other languages
English (en)
Inventor
孙怀庆
郭朝万
刘涵
王宁
陈杰
肖湲
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guangzhou Meiyu Medical Laboratory Co ltd
Guangdong Marubi Biological Technology Co Ltd
Original Assignee
Guangzhou Meiyu Medical Laboratory Co ltd
Guangdong Marubi Biological Technology Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Guangzhou Meiyu Medical Laboratory Co ltd, Guangdong Marubi Biological Technology Co Ltd filed Critical Guangzhou Meiyu Medical Laboratory Co ltd
Priority to CN202310102248.8A priority Critical patent/CN116106533A/zh
Publication of CN116106533A publication Critical patent/CN116106533A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
    • G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N17/00—Investigating resistance of materials to the weather, to corrosion, or to light
    • G01N17/004—Investigating resistance of materials to the weather, to corrosion, or to light to light
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P90/00—Enabling technologies with a potential contribution to greenhouse gas [GHG] emissions mitigation
    • Y02P90/30—Computing systems specially adapted for manufacturing

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
  • Ecology (AREA)
  • Environmental & Geological Engineering (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)

Abstract

本申请涉及化妆品领域，涉及一种评价化妆品、化妆品原料抗紫外辐照效果的方法，包括：建立紫外辐照与线虫胶原蛋白变化关系的模型；向线虫培养基中加入化妆品原料，采用紫外辐照对线虫进行辐照，并检测辐照后线虫胶原蛋白含量；将胶原蛋白含量与模型比对；根据对比的结果确定化妆品原料的抗紫外辐照效果。本申请采用紫外辐照对线虫进行辐照，研究化妆品原料的抗紫外辐照效果，能够为提供具有抗紫外辐照效果的化妆品开发应用提供指导。本申请创造性地提出以胶原蛋白含量变化作为紫外辐照的抗辐射效果评价指标。采用胶原蛋白含量变化作为紫外辐照的抗辐射效果评价指标，直观可靠，准确度高。

Description

评价化妆品、化妆品原料抗紫外辐照效果的方法
技术领域
本申请涉及化妆品领域，具体而言，涉及一种评价化妆品、化妆品原料抗紫外辐照效果的方法。
背景技术
紫外线对于生物体具有一定的影响，主要是因为紫外线辐射能够使细胞中的水介质发生解离，产生自由基以及活性氧。机体中的ROS在清除和产生中相互制衡，平衡发展，但是如果ROS大量产生，就会对核酸和细胞器造成一定的损伤，细胞就会产生老化甚至病变。过量的紫外辐照最先引起损伤的是皮肤，并且也最为明显。紫外线能够诱发皮肤光老化，大量减少皮肤的胶原纤维含量，内部组织中的弹力纤维变性，严重损伤结缔组织，进而导致皮肤出现松弛、下垂、皱纹加深等。急性高剂量的紫外辐照会损害皮肤的DNA，引起皮肤细胞的调亡坏死，造成细胞失去正常的运作能力，无法自行修复、更新及再生，最后形成色素斑、黑斑、老年斑及皱纹。
各种具有抗紫外辐射功效护肤品的需求迅速增长，有效可靠的抗紫外辐射剂成为了研究者以及消费者关注的话题。
然而目前，对于化妆品的抗辐射效果的评价，直观可靠，准确度均有待提高。
发明内容
本申请实施例的目的在于提供一种评价化妆品、化妆品原料抗紫外辐照效果的方法，能够为研究抗紫外辐照化妆品提供理论基础。
第一方面，本申请提供一种评价化妆品原料抗紫外辐照效果的方法，包括：
一种评价化妆品原料抗紫外辐照效果的方法，包括：
建立紫外辐照与线虫胶原蛋白变化关系的模型；
向线虫培养基中加入化妆品原料，采用紫外辐照对线虫进行辐照，并检测辐照后线虫胶原蛋白含量；
将胶原蛋白含量与模型比对；
根据对比的结果确定化妆品原料的抗紫外辐照效果。
本申请采用紫外辐照对线虫进行辐照，研究化妆品原料的抗紫外辐照效果，能够为提供具有抗紫外辐照效果的化妆品开发应用提供指导。发明人发现，紫外辐照对于皮肤中胶原蛋白降解具有直接作用。然而，目前本领域未有采用胶原蛋白的含量变化来评价化妆品原料抗紫外强度的效果。尤其是对于紫外辐照的抗辐射效果的研究未见报道。本申请创造性地提出以胶原蛋白含量变化作为紫外辐照的抗辐射效果评价指标。采用胶原蛋白含量变化作为紫外辐照的抗辐射效果评价指标，直观可靠，准确度高。
在本申请的其他实施例中，上述采用紫外辐照对线虫进行辐照，包括：
采用剂量小于等于100mJ/cm2的紫外辐照对线虫进行辐照。
在本申请的其他实施例中，上述采用紫外辐照对线虫进行辐照，包括：
采用剂量为50mJ/cm2-100 mJ/cm2的紫外辐照对线虫进行辐照。
在本申请的其他实施例中，建立紫外辐照与线虫胶原蛋白变化关系的模型，包括：
建立吸光度与线虫胶原蛋白质量的关系满足以下公式：
y＝0.0739x+0.0283；R2＝0.9951
式中，y为吸光度；x为线虫胶原蛋白质量；R为方差。
在本申请的其他实施例中，上述向线虫培养基中加入化妆品原料，包括：
向线虫培养基中加入胶原三肽。
在本申请的其他实施例中，上述向线虫培养基中加入化妆品原料，包括：
向线虫培养基中加入浓度为1％-10％的胶原三肽。
在本申请的其他实施例中，上述向线虫培养基中加入化妆品原料，包括：
向线虫培养基中加入浓度为2％-5％的胶原三肽。
在本申请的其他实施例中，上述采用紫外辐照对线虫进行辐照后，还检测线虫的致死率。
在本申请的其他实施例中，上述紫外辐照的波长100nm～280nm。
在本申请的其他实施例中，上述向线虫培养基中加入化妆品原料，包括：
采用同期化裂解的线虫进行培养基培养，然后向培养基上加入化妆品原料。
第二方面，本申请提供一种评价化妆品抗紫外辐照效果的方法，包括前述第一方面提供的评价化妆品原料抗紫外辐照效果的方法。
附图说明
为了更清楚地说明本申请实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本申请的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
图1为本申请实施例提供的胶原三肽对紫外辐照下线虫的生存曲线的影响；
图2为本申请实施例提供的胶原三肽对紫外辐照下线虫致死率的影响；
图3为本申请实施例提供的胶原蛋白标曲；
图4为本申请实施例提供的紫外辐照对线虫胶原蛋白含量的影响；
图5为本申请实施例提供的胶原三肽对紫外辐照下线虫胶原蛋白含量的影响。
具体实施方式
为使本申请实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本申请一部分实施例，而不是全部的实施例。
因此，以下对本申请的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本申请的范围，而是仅仅表示本申请的选定实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本申请保护的范围。
本申请实施方式提供本申请提供一种评价化妆品原料抗紫外辐照效果的方法，包括：
建立紫外辐照与线虫胶原蛋白变化关系的模型；
向线虫培养基中加入化妆品原料，采用紫外辐照对线虫进行辐照，并检测辐照后线虫胶原蛋白含量；
将胶原蛋白含量与模型比对；
根据对比的结果确定化妆品原料的抗紫外辐照效果。
进一步地，在本申请一些实施方式中，评价化妆品原料抗紫外辐照效果的方法，包括：
步骤S1、制备培养基。
进一步地，在本申请一些实施方式中，上述的培养基包括基础培养基和试剂。
在本申请一些实施方式中，上述的试剂包括：磷酸钾缓冲液和M9缓冲液。
进一步地，在本申请一些实施方式中，配制磷酸钾缓冲液包括：将108.39g KH2PO4与35.69g K2HPO4混合，向混合物中加水至1L，调节pH值至6.0。
进一步地，在本申请一些实施方式中，配制M9缓冲液包括：
将6gNa2HPO4或者15.12g Na2HPO4·12H2O、3g KH2PO4、5gNaCl、0.25g MgSO4·7H2O混合后加水至1L，并于121℃灭菌15分钟，配制得到。
进一步地，在本申请一些实施方式中，上述的基础培养基包括LB液体培养基和线虫生长固体培养基(Nematode Growth Medium，NGM)。
进一步地，在本申请一些实施方式中，LB液体培养基包括：10g/L胰蛋白胨、10g/L氯化钠、5g/L酵母粉。进一步可选地，采用蒸馏水配制，采用1mol/L的氢氧化钠溶液调至pH7.0，121℃灭菌15分钟。
进一步地，在本申请一些实施方式中，配制上述的线虫生长固体培养基(NematodeGrowth Medium，NGM)包括：
将3g NaCl、17g Agar(琼脂)、2.5g TryPtone(胰蛋白胨)、0.2g Streptomycin(链霉素)、975mL蒸馏水混匀后，于121℃灭菌30分钟，80℃恒温15分钟，然后加入1mol/L的CaCl2共l mL、1mol/L的MgSO4共l mL、5mg/mL溶解于EtOH(乙醇)中的胆固醇共l mL。1mol/L的磷酸钾25mL；以及裂解液。
进一步地，在本申请一些实施方式中，上述的裂解液按照以下的方法制备：
用4mL蒸馏水溶解0.1g NaOH和1.3mL NaClO混合均匀。
需要说明的是，上述的裂解液优选现配现用。
步骤S2、线虫处理。
进一步地，在本申请一些实施方式中，向线虫培养基中加入化妆品原料，包括：
采用同期化裂解的线虫进行培养基培养，然后向培养基上加入化妆品原料。
进一步地，在本申请一些实施方式中，上述的线虫采用秀丽隐杆线虫。
进一步地，在本申请一些实施方式中，获取同期化裂解的线虫包括：
向步骤S1制得的LB液体培养基中加入菌种，培养后，接种至步骤S1制得的线虫生长固体培养基NGM，进行喂养。
对受孕的线虫进行分离，使其体内的受精卵基本发育成L4期幼虫，用于后续的辐照试验。
在本申请一些具体的实施方式中：获得L4期幼虫包括：
取OP50的菌种于LB平板划线，挑取单菌落于在10mL LB液体培养基中，37℃、200rpm，振荡培养12h，至OD600等于0.4，用于接种NGM喂养正常组线虫。
在每个NGM平板上加适量的菌液(一般直径60mm平板加100μL)，用无菌的涂布器或玻璃试管底部将菌液均匀地涂布在NGM平板上，注意菌液边缘应距离平板边缘0.5cm左右。涂布好细菌的NGM平板在室温(21-25℃)下过夜后即可使用，如果不是立即使用则应将其置于冷室或4℃冰箱中待用。
用1mL M9缓冲液冲洗孕虫生长板，重复吹打直至平板上的大部分成虫和卵都从菌苔上洗脱出来。将含孕虫的水溶液吸入2mL离心管中，加入1mL线虫裂解液。将离心管振荡几秒后静置，静置2分种振荡1次，并连续操作3次。置低速离心机上3000rpm离心60s。吸取废弃上清，保留至0.2mL虫解液。用M9缓冲液加至有虫解液的离心管刻度为2mL，振荡几秒钟。连续操作两次。离心弃上清后吸取离心管底部线虫的卵滴于涂有E.coli OP50的NGM板上。无菌区，约48h后裂解的线虫体内的受精卵基本发育成L4期幼虫，完成同步化用于试验。
步骤S3、确定紫外辐照剂量。
进一步地，在本申请一些实施方式中，采用紫外辐照对线虫进行辐照，包括：
选取适宜范围的紫外辐照剂量对线虫进行紫外辐照。
进一步地，在本申请一些实施方式中，采用紫外辐照对线虫进行辐照，包括：
对步骤S2处理后获得的L4期线虫进行培养，并采用不同剂量的紫外辐照进行辐照，观察线虫的死亡率和生长状态；筛选出能够使得线虫正常生长范围的紫外辐照剂量，作为后续化妆品原料抗紫外辐照的剂量范围。
示例性地，在本申请一些具体的实施方式中，将步骤S2处理后获得的L4期线虫挑至未涂OP50的NGM培养皿中，随机分为对照组和照射组，每组3皿，每皿120只。照射组分别用紫外交联仪(波长254nm)进行照射，照射剂量分别为50mJ/cm2、100mJ/cm2、200mJ/cm2和300mJ/cm2。照后即刻观察，发现300mJ/cm2辐照处理后的线虫全部死亡；200mJ/cm2辐照处理后的线虫死亡率约50％；100mJ/cm2和50mJ/cm2辐照处理后的线虫状态正常，可自发运动。
经过研究，本申请确认的紫外辐照剂量为采用剂量小于等于100mJ/cm2的紫外辐照对线虫进行辐照。
超过这一范围，线虫无法进行正常生长运动，对于后续研究化妆品原料抗紫外辐照物参考意义。
进一步地，在本申请一些实施方式中，采用紫外辐照对线虫进行辐照，包括：
采用剂量为50mJ/cm2-100 mJ/cm2的紫外辐照对线虫进行辐照。
示例性地，在本申请一些实施方式中，上述的紫外辐照的剂量为50mJ/cm2、60mJ/cm2、70mJ/cm2、80mJ/cm2、90mJ/cm2或者100mJ/cm2。
步骤S4、紫外辐照试验。
光老化的特征是皮肤中胶原蛋白降解。皮肤中较低剂量的紫外线辐射会影响胶原蛋白的活性。随着紫外线照射水平的增加，已经存在于细胞外基质中的胶原蛋白会分解，并且新胶原蛋白的合成也会受到阻碍。
发明人发现，紫外辐照对于皮肤中胶原蛋白降解具有直接作用。然而，目前本领域未有采用胶原蛋白的含量变化来评价化妆品原料抗紫外强度的效果。尤其是对于紫外辐照的抗辐射效果的研究未见报道。
本申请创造性地提出以胶原蛋白含量变化作为紫外辐照的抗辐射效果评价指标。
采用胶原蛋白含量变化作为紫外辐照的抗辐射效果评价指标，直观可靠，准确度高。
进一步地，在本申请的一些实施方式中，采用线虫的死亡率和线虫的胶原蛋白的含量作为指标综合考虑评价化妆品原料的抗紫外辐照效果。
在本申请一些实施方式中，建立紫外辐照与线虫致死率变化关系的模型。
采用紫外辐照对线虫进行辐照后，还检测线虫的致死率；根据致死率变化确定化妆品原料的抗紫外辐照效果。
将前述步骤S2中得到的同期化后的线虫，采用紫外辐照照射线虫，通过对线虫照射不同的时间，统计线虫的死亡率；
对喂食化妆品原料的线虫采用相同的照射时间，统计线虫的死亡率，并与未喂食化妆品原料的线虫的死亡率进行比对，以此评估化妆品原料的抗紫外辐照效果。
进一步地，在本申请一些实施方式中，建立紫外辐照与线虫胶原蛋白变化关系的模型。
进一步地，在本申请一些实施方式中，建立紫外辐照与线虫胶原蛋白变化关系的模型，包括：
建立吸光度与线虫胶原蛋白质量的关系满足以下公式：
y＝0.0739x+0.0283；R2＝0.9951
进一步地，在本申请一些实施方式中，采用紫外辐照照射线虫，通过对线虫照射不同的时间，与对应未经过紫外辐照时间的线虫进行比对；统计线虫的胶原蛋白含量的变化；
对喂食化妆品原料的线虫采用相同的照射时间，统计线虫的胶原蛋白含量，并与未喂食化妆品原料的线虫的胶原蛋白含量进行比对，以此评估化妆品原料的抗紫外辐照效果。
示例性地，在本申请一些具体的实施方式中，示例性地，在本申请一些具体的实施方式中，将前述步骤S2中得到的同期化后的线虫，在普通NGM上培养4天，转移到含/不含药物的NGM上作用2天，60～80条/板。收集各组线虫，用M9缓冲液清洗3遍后，转移至不含OP50的NGM上，用波长254nm的紫外交联仪进行紫外辐照(100mJ/cm2)。辐照后将各组线虫转移至新鲜的OP50 NGM上，继续置于20℃培养箱中，每12h记录线虫死亡数，统计致死率和胶原蛋白含量的变化。
进一步地，在本申请一些实施方式中，上述的化妆品原料包括：胶原三肽。
本申请发现，尤其是胶原三肽这种化妆品原料能够准确地采用胶原蛋白含量评价其抗紫外辐照效果。
本申请一些实施方式提供一种评价化妆品原料抗紫外辐照的方法，包括前述任一实施方式提供的评价化妆品原料抗紫外辐照的方法。
以下结合实施例对本申请的特征和性能作进一步的详细描述：
提供一种评价化妆品原料抗紫外辐照的方法，包括：
步骤1、按照表1-表3的组成配制基础培养基和试剂。
表1磷酸钾缓冲液
Figure BDA0004083806310000101
表2M9缓冲液
组成 含量
<![CDATA[Na<sub>2</sub>HPO<sub>4</sub>]]> 6g
<![CDATA[KH<sub>2</sub>PO<sub>4</sub>]]> 3g
NaCl 5g
<![CDATA[MgSO<sub>4</sub>·7H<sub>2</sub>O]]> 0.25g
水 TO 1L
表3LB液体培养基
Figure BDA0004083806310000111
步骤2、对线虫进行处理：
取OP50的菌种于LB平板划线，挑取单菌落于在10mL LB液体培养基中，37℃、200rpm，振荡培养12h，至OD600等于0.4，用于接种NGM喂养正常组线虫。
在每个NGM平板上加适量的菌液(一般直径60mm平板加100μL)，用无菌的涂布器或玻璃试管底部将菌液均匀地涂布在NGM平板上，注意菌液边缘应距离平板边缘0.5cm左右。涂布好细菌的NGM平板在室温(21-25℃)下过夜后即可使用，如果不是立即使用则应将其置于冷室或4℃冰箱中待用。
用1mL M9缓冲液冲洗孕虫生长板，重复吹打直至平板上的大部分成虫和卵都从菌苔上洗脱出来。将含孕虫的水溶液吸入2mL离心管中，加入1mL线虫裂解液。将离心管振荡几秒后静置，静置2分种振荡1次，并连续操作3次。置低速离心机上3000rpm离心60s。吸取废弃上清，保留至0.2mL虫解液。用M9缓冲液加至有虫解液的离心管刻度为2mL，振荡几秒钟。连续操作两次。离心弃上清后吸取离心管底部线虫的卵滴于涂有E.coli OP50的NGM板上。无菌区，约48h后裂解的线虫体内的受精卵基本发育成L4期幼虫，完成同步化用于试验。
步骤3、紫外辐照试验。
将L4期线虫挑至未涂OP50的NGM培养皿中，随机分为对照组和照射组，每组3皿，每皿120只。照射组分别用紫外交联仪(波长254nm)进行照射，照射剂量分别为50mJ/cm2、100mJ/cm2、200mJ/cm2和300mJ/cm2。照后即刻观察，发现300mJ/cm2辐照处理后的线虫全部死亡；200mJ/cm2辐照处理后的线虫死亡率约50％；100mJ/cm2和50mJ/cm2辐照处理后的线虫状态正常，可自发运动。
选择100mJ/cm2辐照对含/不含药物的NGM作用。(药物为化妆品原料胶原三肽)。
1、检测线虫寿命致死率。
将同期化后的线虫，在普通NGM上培养4天，转移到含/不含药物的NGM上作用2天，60～80条/板。
收集各组线虫，用M9缓冲液清洗3遍后，转移至不含OP50的NGM上，用波长254nm的紫外交联仪进行紫外辐照(100mJ/cm2)。辐照后将各组线虫转移至新鲜的OP50 NGM上，继续置于20℃培养箱中，每12h记录线虫死亡数，统计致死率，设置3个平行；紫外辐照对线虫生存情况的影响见表4。表4中空白组为未进行紫外辐照的线虫。紫外辐照组为不含药物(药物为化妆品原料胶原三肽)的NGM。
表4紫外辐照对线虫生存情况的影响
时间 空白组致死率 紫外辐照组致死率
36h 0％ 7.69％
48h 1.61％ 15.38％
60h 1.61％ 26.92％
72h 3.23％ 33.33％
84h 4.84％ 74.36％
96h 8.06％ 92.35％
108h 9.68％ 100％
从表4可以看出，成功建立紫外辐照模型。利用紫外辐照组致死率与含药物(药物为化妆品原料胶原三肽)组进行比对，评价化妆品原料的抗紫外辐照性能。
说明书附图1和附图2以及表5显示了胶原三肽对紫外辐照下线虫的生存的影响。
表5胶原三肽对紫外辐照下线虫的生存情况的影响
时间 对照组致死率 2％胶原三肽致死率
36h 7.69％ 4.62％
48h 15.38％ 12.31％
60h 26.92％ 16.92％
72h 33.33％ 23.08％
84h 74.36％ 52.31％
96h 92.35％ 75.36％
108h 100％ 92.28％
120h / 100％
从表5可以看出，2％的胶原三肽可保护线虫免受紫外辐照(100mJ/cm2)的损伤，延长辐照后线虫的寿命，具有抗紫外辐射的活性。
2、检测线虫胶原蛋白。
将同期化后的线虫，在普通NGM上培养4天，转移到含/不含药物的NGM上作用2天。收集各组线虫，用M9缓冲液清洗3遍后，转移至不含OP50的NGM上，用波长254nm的紫外交联仪进行紫外辐照(100mJ/cm2)。辐照后收集各组线虫，用无菌的PBS将平板上的线虫收集至2mL离心管中冲洗，低速离心去上清液，反复三次后定容到250μL，用高通量组织研磨仪进行破碎(70Hz，工作时间5min)，然后低温离心(4℃，12 000r/min，15min)，收集上清液于4℃放置待测。用BCA试剂盒测定线虫总蛋白，然后采用胶原蛋白测定试剂盒(sircol collagenassay kit试剂盒)测定线虫总胶原蛋白含量。测定结果见说明书附图1和图2。
从图1和图2可以看出，经100mJ/cm2紫外辐照处理后，线虫胶原蛋白水平的降低，表明线虫失去了合成胶原蛋白的能力。表明成功建立sircol collagen assay kit试剂盒测定线虫总胶原蛋白含量的方法。
利用图3和图4示出的紫外辐照对线虫胶原蛋白含量的影响结果与含药物(药物为化妆品原料胶原三肽)组进行比对，评价化妆品原料的抗紫外辐照性能。
结果见图5，图5示出了胶原三肽对紫外辐照下线虫胶原蛋白含量的影响。
从图5可以看出，经100mJ/cm2紫外辐照处理后，线虫胶原蛋白水平的降低，经2％胶原三肽处理过的线虫能提升体内胶原蛋白含量约8.25％，表明胶原三肽能在一定程度上保护线虫合成胶原蛋白的能力。
由此说明本申请的方法能够有效地用于评价化妆品原料抗紫外辐射的效果。
以上所述仅为本申请的优选实施例而已，并不用于限制本申请，对于本领域的技术人员来说，本申请可以有各种更改和变化。凡在本申请的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本申请的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种评价化妆品原料抗紫外辐照效果的方法，其特征在于，包括：
建立紫外辐照与线虫胶原蛋白变化关系的模型；
向线虫培养基中加入化妆品原料，采用紫外辐照对线虫进行辐照，并检测辐照后线虫胶原蛋白含量；
将所述胶原蛋白含量与所述模型比对；
根据所述对比的结果确定化妆品原料的抗紫外辐照效果。
2.根据权利要求1所述的评价化妆品原料抗紫外辐照效果的方法，其特征在于，所述采用紫外辐照对线虫进行辐照，包括：
采用剂量小于等于100mJ/cm2的紫外辐照对线虫进行辐照。
3.根据权利要求2所述的评价化妆品原料抗紫外辐照效果的方法，其特征在于，所述采用紫外辐照对线虫进行辐照，包括：
采用剂量为50mJ/cm2-100 mJ/cm2的紫外辐照对线虫进行辐照。
4.根据权利要求1所述的评价化妆品原料抗紫外辐照效果的方法，其特征在于，
所述建立紫外辐照与线虫胶原蛋白变化关系的模型，包括：
建立吸光度与线虫胶原蛋白质量的关系满足以下公式：
y＝0.0739x+0.0283；R2＝0.9951
式中，y为吸光度；x为线虫胶原蛋白质量；R为方差。
5.根据权利要求1所述的评价化妆品原料抗紫外辐照效果的方法，其特征在于，
所述向线虫培养基中加入化妆品原料，包括：
向所述线虫培养基中加入胶原三肽。
6.根据权利要求5所述的评价化妆品原料抗紫外辐照效果的方法，其特征在于，
所述向线虫培养基中加入化妆品原料，包括：
向所述线虫培养基中加入浓度为1％-10％的胶原三肽。
7.根据权利要求5所述的评价化妆品原料抗紫外辐照效果的方法，其特征在于，
所述向线虫培养基中加入化妆品原料，包括：
向所述线虫培养基中加入浓度为2％-5％的胶原三肽。
8.根据权利要求1-7任一项所述的评价化妆品原料抗紫外辐照效果的方法，其特征在于，还包括：
建立紫外辐照与线虫致死率变化关系的模型；
采用紫外辐照对线虫进行辐照后，还检测线虫的致死率；根据所述致死率变化确定化妆品原料的抗紫外辐照效果。
9.根据权利要求1-7任一项所述的评价化妆品原料抗紫外辐照效果的方法，其特征在于，
所述向线虫培养基中加入化妆品原料，包括：
采用同期化裂解的线虫进行培养基培养，然后向所述培养基上加入所述化妆品原料。
10.一种评价化妆品抗紫外辐照效果的方法，其特征在于，包括权利要求1-9任一项所述的评价化妆品原料抗紫外辐照效果的方法。
CN202310102248.8A 2023-02-07 2023-02-07 评价化妆品、化妆品原料抗紫外辐照效果的方法 Pending CN116106533A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202310102248.8A CN116106533A (zh) 2023-02-07 2023-02-07 评价化妆品、化妆品原料抗紫外辐照效果的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202310102248.8A CN116106533A (zh) 2023-02-07 2023-02-07 评价化妆品、化妆品原料抗紫外辐照效果的方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN116106533A true CN116106533A (zh) 2023-05-12

Family

ID=86257794

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202310102248.8A Pending CN116106533A (zh) 2023-02-07 2023-02-07 评价化妆品、化妆品原料抗紫外辐照效果的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN116106533A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116559419A (zh) * 2023-05-15 2023-08-08 广州美域医学检验有限公司 一种评价化妆品及其原料的抗羰基化功效的方法

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116559419A (zh) * 2023-05-15 2023-08-08 广州美域医学检验有限公司 一种评价化妆品及其原料的抗羰基化功效的方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Han et al. Nano-zinc oxide damages spatial cognition capability via over-enhanced long-term potentiation in hippocampus of Wistar rats
Sim et al. Oral microbial biofilm models and their application to the testing of anticariogenic agents
CN107875403A (zh) 一种基于模式生物秀丽隐杆线虫的抗衰老评价方法与应用
CN116106533A (zh) 评价化妆品、化妆品原料抗紫外辐照效果的方法
BR112015013567B1 (pt) uso de um extrato de algas
Ding et al. Function of collagen and mast cells in acupuncture points
Bateman et al. A study of macrophage-mediated initiation of fibrosis by asbestos and silica using a diffusion chamber technique.
Wang et al. [Retracted] Anti‐Inflammatory and Repairing Effects of Mesoporous Silica‐Loaded Metronidazole Composite Hydrogel on Human Dental Pulp Cells
CN110078794A (zh) 一种抗菌肽及其应用
Smorodintsev Basic mechanisms of nonspecific resistance to viruses in animals and man
CN112972490B (zh) 透明质酸在用于制备预防或治疗铁死亡相关疾病的药物中的应用
CN103961376B (zh) 一种防治皮肤瘢痕的药物组合物及其制备方法
CN108853502A (zh) 治疗抑郁症的方法和药物组合物
Hartse Phylogeny of sleep
Lee et al. An Aqueous Extract of Octopus ocellatus Meat Protects Hepatocytes Against H 2 O 2-Induced Oxidative Stress via the Regulation of Bcl-2/Bax Signaling
Hagerty Kinetic Effects of Heat Stress on Olfaction: A Thermodynamic Evaluation of Electrical Responses to Odorants in Olfactory Epithelia
Novoseletskaya et al. Effects of the DNA-containing drug derinat in rats with functional memory impairments
RU2420264C2 (ru) Препарат для местного нанесения на кожу, содержащий производное флаванона
Caldeira Effect of pulsed electric fields on cell viability and metabolism
Agarwal et al. ION CHANNELS AND NUCLEAR PORE CHANNEL GATING
CN115300604A (zh) 公主海葵多肽及其应用
Noskov et al. Na Channels from Phyla to Function
CN117860739A (zh) 褪黑激素衍生物在制备预防或治疗甲醛中毒的产品中的应用
Hachoumi The Role of Oxidative Stress in Age-related Changes to Ionic Currents Regulating Cerebral Giant Cell Excitability in the Pond Snail, Lymnaea Stagnalis
Byrne Effects of Ultrasound on Amyloid Beta 42 (Aβ42) Mediated Neurodegeneration

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination