CN116019737A - 一种易吸收牛羊皮胶原蛋白肽制备工艺及应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种易吸收牛羊皮胶原蛋白肽制备工艺及应用，属于胶原蛋白肽提取技术领域，为了去除胶原蛋白在酶解过程中产生的挥发性醛、酮等腥臭味物质，本发明提出通过加入小檗碱，催化腥臭物质与乙醇发生酯化反应，生成易挥发的酯类物质，从而达到去除肽粉腥臭味并消炎抗菌的目的；此外，为了解决胶原蛋白肽在单独使用时存在的降解速率过快、极易受到细菌污染的问题，本发明将胶原蛋白肽接枝到改性盐角草多糖分子上，形成稳定的盐角草多糖胶原蛋白肽支架，并将其应用于凝胶的制备，使凝胶结构更加蓬松，增大了凝胶与皮肤的接触面积，显著提升了凝胶的抗菌能力和机械强度。

Description

一种易吸收牛羊皮胶原蛋白肽制备工艺及应用

技术领域

本发明属于胶原蛋白肽制备技术领域，具体是指一种易吸收牛羊皮胶原蛋白肽制备工艺及应用。

背景技术

由于近年频发的环境问题以及全球人口的不断增长，可持续发展目标逐渐步入大众视野，将废弃材料再次利用不仅可以最大程度的减少浪费，还能够生产出具有高附加值的产品，如畜牧业的加工会产生牛羊皮，富含胶原蛋白肽，具有优异的生物相容性和低免疫原性，在生物医学方面具备应用的可能性。

专利CN107961189A公开了一种祛痘美白凝胶，该发明中以芹菜提取液、柠檬提取液、乳香提取液、丹参提取液、猕猴桃提取液和樱桃提取液为主要原料，能够抑菌消炎，调控油脂分泌，达到快速治疗痤疮、消除痘印的效果，缺点是祛痘印见效慢，效果不理想；专利CN102580166公开了一种医用仿生透明薄膜植入材料及其制备方法和应用，该材料是通过静电纺丝和交联得到的透明多孔薄膜，含有胶原、多糖以及治疗性物质，所载治疗性物质随着薄膜降解而缓释，但制备该材料采用的静电纺丝方法成本较高且对环境湿度、温度等要求较苛刻，同时胶原蛋白在酶解过程中容易产生腥臭味物质，稳定性差，因而其使用受到限制，因此开发新型修复凝胶有着重要的意义。

发明内容

针对上述情况，为克服现有技术的缺陷，本发明提供了一种易吸收牛羊皮胶原蛋白肽制备工艺及应用，为了去除胶原蛋白在酶解过程中产生的挥发性腥臭味物质，本发明提出通过加入小檗碱，催化腥臭物质与乙醇发生酯化反应，生成易挥发的酯类物质，从而达到去除肽粉腥臭味并消炎抗菌的目的；此外，为了解决胶原蛋白肽在单独使用时存在的降解速率过快、极易受到细菌污染的问题，本发明将胶原蛋白肽接枝到改性盐角草多糖分子上，形成稳定的盐角草多糖胶原蛋白肽支架，并将其应用于凝胶的制备，使凝胶结构更加蓬松，增大了凝胶与皮肤的接触面积，显著提升了凝胶的抗菌能力和机械强度。

为了实现上述目的，本发明提出的技术方案如下，本发明提供了一种易吸收牛羊皮胶原蛋白肽制备工艺，具体包括如下步骤：

（1）原料加入10倍体积的5%的NaC1溶液浸泡搅拌2h，清水漂洗2-3次，得到去除盐溶性非胶原成分；

（2）将所述去除盐溶性非胶原成分加入蒸馏水，放入组织捣碎机，捣碎后离心去除多余水分，加入10倍体积的2%（v/v）的乙酸溶液，再次使用组织捣碎机至混匀搅碎，得到匀浆液；

（3）所述匀浆液中加入匀浆液重量的0.1%的木瓜蛋白酶，超声处理后以4000r/min离心20min，分离上清液和沉淀，保留上清液；

（4）用截留分子量为1500Da的超滤膜，在进水压力0.1MPa下，对上清液进行超滤，得到滤液；

（5）将滤液在55°C、真空度为0.1MPa条件下减压浓缩，再真空冷冻干燥，得到牛羊皮胶原蛋白肽粉末；

（6）牛羊皮胶原蛋白肽粉末中加入100mL去离子水，水浴加热至80℃，用催化剂调节pH值至10，加入2%（v/v）乙醇反应30min，真空冷冻干燥，得到脱臭后的牛羊皮胶原蛋白肽粉末；

（7）称取10g盐角草多糖，加入1mL乙酸溶液，加入2g抗坏血酸和0.8gγ-谷维素，搅拌至充分溶解，加入60mLH₂O₂，搅拌混匀，24h后进行冷冻干燥，得到改性盐角草多糖粉末；

（8）取1gγ-谷维素盐角草多糖粉末，加入50mL无菌水，搅拌至溶解，得到改性盐角草多糖溶液；

（9）称取30g脱臭后的牛羊皮胶原蛋白肽粉末，加入到所述改性盐角草多糖溶液中，搅拌至混匀，加入转谷氨酰胺酶，5h后水浴加热至90℃，15min后冷却至室温，过滤，得到盐角草多糖胶原蛋白肽支架。

优选地，步骤（3）中，所述超声处理的条件为超声功率为390W，频率为20kHz，时间为30min。

优选地，步骤（6）中，所述催化剂为小檗碱。

优选地，步骤（7）中，所述乙酸溶液的浓度为2%（v/v）。

优选地，步骤（9）中，所述转谷氨酰胺酶的质量为4g。

此外，本发明还提供了一种易吸收牛羊皮胶原蛋白肽制备工艺制备的盐角草多糖胶原蛋白肽支架的应用，所述应用为制备胶原蛋白肽修复凝胶，所述胶原蛋白肽修复凝胶包括如下重量份的组分：卡波姆80-100份、盐角草多糖胶原蛋白肽支架10-20份、山茶籽油5-20份、冬凌草甲素1-10份、牛蒡子提取物1-15份、茶多酚1-10份、单硬脂酸甘油酯1-10份、透明质酸5-15份、促渗剂1-10份、pH调节剂5-18份。

优选地，所述胶原蛋白肽修复凝胶包括如下重量份的组分：卡波姆86-97份、盐角草多糖胶原蛋白肽支架13-20份、山茶籽油6-15份、冬凌草甲素2-8份、牛蒡子提取物1-10份、茶多酚1-9份、单硬脂酸甘油酯3-8份、透明质酸5-12份、促渗剂1-7份、pH调节剂5-15份。

所述胶原蛋白肽修复凝胶的制备方法具体包括如下步骤：

（1）将卡波姆加入无菌水中，60℃水浴加热5h，冷却至室温，搅拌均匀，得到卡波姆凝胶；

（2）将盐角草多糖胶原蛋白肽支架、山茶籽油、冬凌草甲素、牛蒡子提取物、茶多酚加入500mL无菌水中，搅拌30min，得到修复溶液；

（3）将所述修复溶液加入步骤（1）得到的卡波姆凝胶中，加入单硬脂酸甘油酯、透明质酸、促渗剂、加入pH调节剂，调节pH为6.7，置于捏合机中，于36℃下捏合5h，得到胶原蛋白肽修复凝胶。

优选地，所述pH调节剂包括三乙醇胺、柠檬酸、酒石酸中的一种或多种。

进一步地，所述pH调节剂为酒石酸。

优选地，所述促渗剂包括噻酮、聚乙二醇、聚丙二醇、聚甘油、莪术二醇中的一种或多种。

进一步地，所述促渗剂为莪术二醇。

优选地，步骤（2）中所述牛蒡子提取物的制备方法具体包括如下步骤：

（1）将牛蒡子粉碎，过100目筛，得到牛蒡子粉末；

（2）牛蒡子粉末中加入70%（v/v）的乙醇溶液，超声提取50min，采用布氏漏斗过滤三次，得到牛蒡子乙醇提取物；

（3）将牛蒡子乙醇提取物进行减压浓缩，所述减压浓缩的条件为：真空度为0.1MPa，浓缩温度为50℃，得到牛蒡子提取物。

本发明取得的有益效果如下：

（1）小檗碱催化腥臭味物质与乙醇发生酯化反应，使其生成易挥发的酯类物质，小檗碱既可做为酯化反应的催化剂，也可抑制大肠杆菌、丙酸杆菌的繁殖，改善痤疮炎症，从而达到除去肽粉腥臭味物质并消炎抗菌的目的；

（2）本发明通过H₂O₂/抗坏血酸氧化还原形成酯键，将γ-谷维素接枝至盐角草多糖分子上，得到了改性盐角草多糖，接着在转谷氨酰胺酶的催化下形成酰胺键，将胶原蛋白肽接枝到改性盐角草多糖分子上，得到了稳定的盐角草多糖胶原蛋白肽支架；

（3）盐角草多糖胶原蛋白肽支架的加入显著提升了凝胶的抗菌能力和机械强度，增大了凝胶与皮肤的接触面积，使得抗菌效果能够更好地发挥；且加入盐角草多糖胶原蛋白肽支架能够使凝胶结构更加蓬松，防止凝胶在后续冷冻储存中产生较大的冰晶而被冻裂；

（4）目前，透皮治疗系统的研制中使用较多的促渗剂都是化学合成的促渗剂，主要是烃、酮、亚砜等有机化合物，对皮肤有一定的刺激性和副作用，而我国中药的历史悠久，本发明从中药中挖掘出具有潜力的、安全、高效、天然的促渗成分莪术二醇，增加脂质双层的流动性，改变角质层类脂膜紧密结构，使皮肤出现大量腔隙，从而起到促渗作用，提高了创面的愈合时间；而透明质酸能促进皮肤对生长因子的吸收，加快修复创面损伤；各组分相互协同增效，形成具有优异的修复创面能力、抗菌能力，良好的吸湿性能的修复凝胶；同时避免了使用抗生素引发的耐药性、二重感染、过敏反应等弊端；

（5）牛羊皮中可以提取胶原蛋白肽，具有优异的生物相容性和低免疫原性，但胶原蛋白肽在单独使用时存在的降解速率过快、极易受到细菌污染等问题，因此，本研究通过绿色方法对盐角草多糖进行改性，接枝胶原蛋白肽，并将其应用至修复凝胶领域，对副产物进行了有效的二次利用，减少浪费，符合可持续发展观念。

附图说明

图1各处理制得的胶原蛋白肽修复凝胶的SEM图像；

图2脱臭前后肽粉中所检测出的腥臭味物质浓度；

图3各处理制得的胶原蛋白肽修复凝胶的抑菌率；

图4各处理对小鼠创面愈合的影响结果图。

附图用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本发明的实施例一起用于解释本发明，并不构成对本发明的限制。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例；基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域技术人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用，但不能限制本申请的内容。

下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；下述实施例中所用的试验材料及试验菌株，如无特殊说明，均为从商业渠道购买得到的。

实施例1

本发明提供了一种易吸收牛羊皮胶原蛋白肽制备工艺，具体包括如下步骤：

（1）原料加入10倍体积的5%的NaC1溶液浸泡搅拌2h，清水漂洗2-3次，得到去除盐溶性非胶原成分；

（2）将去除盐溶性非胶原成分加入蒸馏水，放入组织捣碎机，捣碎后离心去除多余水分，加入10倍体积的2%（v/v）的乙酸溶液，再次使用组织捣碎机至混匀搅碎，得到匀浆液；

（3）匀浆液中加入匀浆液重量的0.1%的木瓜蛋白酶，超声处理后以4000r/min离心20min，分离上清液和沉淀，保留上清液；

（4）用截留分子量为1500Da的超滤膜，在进水压力0.1MPa下，对上清液进行超滤，得到滤液；

（5）将滤液在55°C、真空度为0.1MPa条件下减压浓缩，再真空冷冻干燥，得到牛羊皮胶原蛋白肽粉末；

（6）牛羊皮胶原蛋白肽粉末中加入100mL去离子水，水浴加热至80℃，用催化剂调节pH值至10，加入2%乙醇反应30min，真空冷冻干燥，得到脱臭后的牛羊皮胶原蛋白肽粉末；

（7）称取10g盐角草多糖，加入1mL乙酸溶液，加入2g抗坏血酸和0.8gγ-谷维素，搅拌至充分溶解，加入60mLH₂O₂，搅拌混匀，24h后进行冷冻干燥，得到改性盐角草多糖粉末；

（8）取1gγ-谷维素盐角草多糖粉末，加入50mL无菌水，搅拌至溶解，得到改性盐角草多糖溶液；

（9）称取30g脱臭后的牛羊皮胶原蛋白肽粉末，加入到所述γ-谷维素盐角草多糖溶液中，搅拌至混匀，加入转谷氨酰胺酶，5h后水浴加热至90℃，15min后冷却至室温，过滤，得到盐角草多糖胶原蛋白肽支架。

其中，步骤（3）中，超声处理的条件为超声功率为390W，频率为20kHz，时间为30min。

其中，步骤（6）中，催化剂为小檗碱。

其中，步骤（7）中，乙酸溶液的浓度为2%（v/v）。

其中，步骤（9）中，转谷氨酰胺酶的质量为4g。

此外，本发明还提供了一种易吸收牛羊皮胶原蛋白肽制备工艺制备的牛羊皮胶原蛋白肽的应用，所述应用为制备胶原蛋白肽修复凝胶，所述胶原蛋白肽修复凝胶包括如下重量份的组分：卡波姆89份、盐角草多糖胶原蛋白肽支架16份、山茶籽油10份、冬凌草甲素7份、牛蒡子提取物5份、茶多酚3份、单硬脂酸甘油酯6份、透明质酸10份、促渗剂4份、pH调节剂9份。

胶原蛋白肽修复凝胶的制备方法具体包括如下步骤：

（1）将卡波姆加入无菌水中，60℃水浴加热5h，冷却至室温，搅拌均匀，得到卡波姆凝胶；

（2）将盐角草多糖胶原蛋白肽支架、山茶籽油、冬凌草甲素、牛蒡子提取物、茶多酚加入500mL无菌水中，搅拌30min，得到修复溶液；

（3）将修复溶液加入步骤（1）得到的卡波姆凝胶中，加入单硬脂酸甘油酯、透明质酸、促渗剂、加入pH调节剂，调节pH为6.7，置于捏合机中，于36℃下捏合5h，得到胶原蛋白肽修复凝胶。

其中，pH调节剂为酒石酸。

其中，促渗剂为莪术二醇。

其中，步骤（2）中所述牛蒡子提取物的制备方法具体包括如下步骤：

（1）将牛蒡子粉碎，过100目筛，得到牛蒡子粉末；

（2）牛蒡子粉末中加入70%（v/v）的乙醇溶液，超声提取50min，采用布氏漏斗过滤三次，得到牛蒡子乙醇提取物；

（3）将牛蒡子乙醇提取物进行减压浓缩，所述减压浓缩的条件为：真空度为0.1MPa，浓缩温度为50℃，得到牛蒡子提取物。

牛羊皮购自当地屠宰场；盐角草多糖购自兰州沃特莱斯生物技术有限公司；小檗碱购自上海士锋生物科技有限公司；冬凌草甲素购自阿拉丁试剂(上海)有限公司；转谷氨酰胺酶购自德尔塔(Delta)生物；莪术二醇、γ-谷维素、木瓜蛋白酶(10U/mg)购自上海源叶生物科技公司；其余化学试剂均为国产分析纯。

实施例2

本实施例提供一种易吸收牛羊皮胶原蛋白肽制备工艺及应用，其与实施例1的区别仅在于胶原蛋白肽修复凝胶包括如下重量份的组分：卡波姆86份、盐角草多糖胶原蛋白肽支架13份、山茶籽油6份、冬凌草甲素2份、牛蒡子提取物1份、茶多酚1份、单硬脂酸甘油酯3份、透明质酸5份、促渗剂1份、pH调节剂5份。

实施例3

本实施例提供一种易吸收牛羊皮胶原蛋白肽制备工艺及应用，其与实施例1的区别仅在于胶原蛋白肽修复凝胶包括如下重量份的组分：卡波姆97份、盐角草多糖胶原蛋白肽支架20份、山茶籽油15份、冬凌草甲素8份、牛蒡子提取物10份、茶多酚9份、单硬脂酸甘油酯8份、透明质酸12份、促渗剂7份、pH调节剂15份。

对比例1

本对比例提供一种易吸收牛羊皮胶原蛋白肽制备工艺及应用，其与实施例1的区别仅在于一种易吸收牛羊皮胶原蛋白肽制备工艺中不包括步骤（6），其余组分、组分含量与实施例1相同。

对比例2

本对比例提供一种易吸收牛羊皮胶原蛋白肽制备工艺及应用，其与实施例1的区别仅在于促渗剂为噻酮，其余组分、组分含量与实施例1相同。

对比例3

本对比例提供一种易吸收牛羊皮胶原蛋白肽制备工艺及应用，其与实施例1的区别仅在于一种易吸收牛羊皮胶原蛋白肽制备工艺中不包括步骤（6）、（7）、（8）、（9），其余组分、组分含量与实施例1相同。

实验例1

以实施例1、实施例2、对比例3制得的胶原蛋白肽修复凝胶进行试验。

图1中a、b、c分别为实施例1、实施例2、对比例3制得的胶原蛋白肽修复凝胶的SEM图像。

结果分析，用扫描电镜对各处理制备的凝胶微观结构进行了表征，如图1所示，所有的凝胶都呈现出三维网络结构，实施例1制备的凝胶与实施例2、对比例3相比具有更多的微孔，且微孔分布均匀，这种高孔隙率是由于盐角草多糖胶原蛋白肽支架的高表面积，增加了支架之间的接触以及支架与凝胶的接触，这表明将盐角草多糖胶原蛋白肽支架引入凝胶的制备中，提高了凝胶的孔隙率，有助于提升凝胶的抗菌能力和机械强度。

实验例2

脱臭前后牛羊皮胶原蛋白肽粉腥臭味物质的对比

以实施例1、对比例1、对比例3制得的牛羊皮胶原蛋白肽粉进行试验。

结果分析，如图2所示，经GC-MS测定，实施例1为脱臭后牛羊皮胶原蛋白肽粉中所检测出的腥臭味物质的浓度，各腥臭味物质浓度相较于对比例1、对比例3中未进行脱臭处理的牛羊皮胶原蛋白肽粉相差巨大，表明本发明采用小檗碱去除肽粉腥臭味物质的效果明显。

实验例3

滤纸片扩散法测各处理制得的胶原蛋白肽修复凝胶的抑菌活性

以实施例1、实施例2、实施例3、对比例1、对比例2、对比例3制得的胶原蛋白肽修复凝胶进行试验，具体包括如下步骤：

（1）将各处理制得的胶原蛋白肽修复凝胶分别用无水甲醇稀释成相同的浓度梯度，即1.88mg/mL；

（2）在超净工作台上待倒入平板中的LB培养基凝固时，向培养基中加入已备好的10⁶CFU/mL的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞杆菌、大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌4种菌悬液100μL，注入圆形平板，涂布均匀；

（3）将各处理制得的胶原蛋白肽修复凝胶均匀涂于已灭菌的圆形滤纸片（直径为0.3cm）上，以涂抹无水甲醇的灭菌滤纸片为空白对照，固定于涂布好测试菌种的平板上，每个样品3个平行，在37℃培养箱恒温培养24h；

（4）取接触面培养物作梯度稀释，取1mL稀释菌悬液于平板中，用琼脂倾注平板，混匀，待凝固后倒置于37℃恒温培养24h，计算抑菌率，公式如下：

抑菌率（%）＝（空白对照菌落总数-凝胶菌落总数）/空白对照菌落总数×100%

结果分析，如图3所示，实施例1对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果最优；实施例1对待测菌种的抑菌率最高，其抑菌效果最好；实施例2和实施例3由于改变了各组分的含量，其制得的胶原蛋白肽修复凝胶的抑菌效果较实施例1有显著降低；对比实施例1和对比例3可知，使用盐角草多糖胶原蛋白肽支架与使用牛羊皮胶原蛋白肽粉相比，所形成的凝胶抗菌性能更好，这是由于盐角草多糖胶原蛋白肽支架增大了凝胶与培养基的接触面积，从而提高凝胶的抑菌效果。

实验例4

图4中a、b、c、d分别为实施例1、对比例2、对比例3制得的胶原蛋白肽修复凝胶以及空白对照组对小鼠创面愈合的影响结果图。

以实施例1、对比例2、对比例3制得的胶原蛋白肽修复凝胶进行试验。

选取体质大小近乎一致的健康小鼠24只，随机分为4组，每组3只雌鼠，3只雄鼠，采用7%水合氯醛按0.3l/100g的剂量对大鼠进行腹腔麻醉，剃除小鼠背部毛发，用10%聚维酮碘和75%乙醇液消毒，在每只小鼠背部做4个切口，长约1cm，其中一组给予生理盐水纱布包扎治疗，作为空白对照组；其余3组采用各处理的凝胶涂抹，在第12天进行拍照。

结果分析，由图4所示，实施例1制得的胶原蛋白肽修复凝胶能在短时间内促进小鼠创面愈合，对比例2和对比例3次之；相比之下，空白对照组的创面面积仅略有减少，这是由于体内创面自然愈合所致。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。

以上对本发明及其实施方式进行了描述，这种描述没有限制性，附图中所示的也只是本发明的实施方式之一，实际的应用并不局限于此。总而言之如果本领域的普通技术人员受其启示，在不脱离本发明创造宗旨的情况下，不经创造性的设计出与该技术方案相似的方式及实施例，均应属于本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种易吸收牛羊皮胶原蛋白肽的应用，其特征在于，所述应用为制备胶原蛋白肽修复痘印凝胶，所述胶原蛋白肽修复痘印凝胶包括如下重量份的组分：卡波姆80-100份、盐角草多糖胶原蛋白肽支架10-20份、山茶籽油5-20份、冬凌草甲素1-10份、牛蒡子提取物1-15份、茶多酚1-10份、单硬脂酸甘油酯1-10份、透明质酸5-15份、促渗剂1-10份、pH调节剂5-18份，所述盐角草多糖胶原蛋白肽支架由胶原蛋白肽接枝到改性盐角草多糖分子上得到。

2.根据权利要求1所述的一种易吸收牛羊皮胶原蛋白肽的应用，其特征在于，所述胶原蛋白肽修复痘印凝胶包括如下重量份的组分：卡波姆86-97份、盐角草多糖胶原蛋白肽支架13-20份、山茶籽油6-15份、冬凌草甲素2-8份、牛蒡子提取物1-10份、茶多酚1-9份、单硬脂酸甘油酯3-8份、透明质酸5-12份、促渗剂1-7份、pH调节剂5-15份。

3.根据权利要求2所述的一种易吸收牛羊皮胶原蛋白肽的应用，其特征在于，所述胶原蛋白肽修复痘印凝胶的制备方法具体包括如下步骤：

（1）将卡波姆加入无菌水中，60℃水浴加热5h，冷却至室温，搅拌均匀，得到卡波姆凝胶；

（2）将盐角草多糖胶原蛋白肽支架、山茶籽油、冬凌草甲素、牛蒡子提取物、茶多酚加入500mL无菌水中，搅拌30min，得到修复溶液；

（3）将所述修复溶液加入步骤（1）得到的卡波姆凝胶中，加入单硬脂酸甘油酯、透明质酸、促渗剂、加入pH调节剂，调节pH为6.7，置于捏合机中，于36℃下捏合5h，得到胶原蛋白肽修复痘印凝胶。

4.根据权利要求3所述的一种易吸收牛羊皮胶原蛋白肽的应用，其特征在于：所述pH调节剂为酒石酸，所述促渗剂为莪术二醇。

5.根据权利要求4所述的一种易吸收牛羊皮胶原蛋白肽的应用，其特征在于，所述牛蒡子提取物的制备方法具体包括如下步骤：

（1）将牛蒡子粉碎，过100目筛，得到牛蒡子粉末；

（2）牛蒡子粉末中加入70%（v/v）的乙醇溶液，超声提取50min，采用布氏漏斗过滤三次，得到牛蒡子乙醇提取物；

（3）将牛蒡子乙醇提取物进行减压浓缩，所述减压浓缩的条件为：真空度为0.1MPa，浓缩温度为50℃，得到牛蒡子提取物。

6.一种根据权利要求1所述的易吸收牛羊皮胶原蛋白肽的应用中盐角草多糖胶原蛋白肽支架的制备工艺，其特征在于，所述制备工艺具体包括如下步骤：

（1）原料加入10倍体积的5%的NaC1溶液浸泡搅拌2h，清水漂洗2-3次，得到去除盐溶性非胶原成分；

（2）将所述去除盐溶性非胶原成分的原料加入蒸馏水，放入组织捣碎机，捣碎后离心去除多余水分，加入10倍体积的2%（v/v）的乙酸溶液，再次使用组织捣碎机至混匀搅碎，得到匀浆液；

（3）所述匀浆液中加入匀浆液重量的0.1%的木瓜蛋白酶，超声处理后以4000r/min离心20min，分离上清液和沉淀，保留上清液；

（4）用截留分子量为1500Da的超滤膜，在进水压力0.1MPa下，对上清液进行超滤，得到滤液；

（5）将滤液在55°C、真空度为0.1MPa条件下减压浓缩，再真空冷冻干燥，得到牛羊皮胶原蛋白肽粉末；

（6）牛羊皮胶原蛋白肽粉末中加入100mL去离子水，水浴加热至80℃，用催化剂调节pH值至10，加入2%（v/v）乙醇反应30min，真空冷冻干燥，得到脱臭后的牛羊皮胶原蛋白肽粉末；

（7）称取10g盐角草多糖，加入1mL乙酸溶液，加入2g抗坏血酸和0.8gγ-谷维素，搅拌至充分溶解，加入60mLH₂O₂，搅拌混匀，24h后进行冷冻干燥，得到改性盐角草多糖粉末；

（8）取1gγ-谷维素盐角草多糖粉末，加入50mL无菌水，搅拌至溶解，得到改性盐角草多糖溶液；

（9）称取30g脱臭后的牛羊皮胶原蛋白肽粉末，加入到所述改性盐角草多糖溶液中，搅拌至混匀，加入转谷氨酰胺酶，5h后水浴加热至90℃，15min后冷却至室温，过滤，得到盐角草多糖胶原蛋白肽支架。

7.根据权利要求6所述的一种易吸收牛羊皮胶原蛋白肽的应用中盐角草多糖胶原蛋白肽支架的制备工艺，其特征在于：步骤（3）中，所述超声处理的条件为超声功率为390W，频率为20kHz，时间为30min。

8.根据权利要求7所述的一种易吸收牛羊皮胶原蛋白肽的应用中盐角草多糖胶原蛋白肽支架的制备工艺，其特征在于：步骤（6）中，所述催化剂为小檗碱。

9.根据权利要求8所述的一种易吸收牛羊皮胶原蛋白肽的应用中盐角草多糖胶原蛋白肽支架的制备工艺，其特征在于：步骤（7）中，所述乙酸溶液的浓度为2%（v/v）。

10.根据权利要求9所述的一种易吸收牛羊皮胶原蛋白肽的应用中盐角草多糖胶原蛋白肽支架的制备工艺，其特征在于：步骤（9）中，所述转谷氨酰胺酶的质量为4g。

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