CN115955980A - 电荷可变接头 - Google Patents

电荷可变接头 Download PDF

Info

Publication number
CN115955980A
CN115955980A CN202180040752.9A CN202180040752A CN115955980A CN 115955980 A CN115955980 A CN 115955980A CN 202180040752 A CN202180040752 A CN 202180040752A CN 115955980 A CN115955980 A CN 115955980A
Authority
CN
China
Prior art keywords
group
adc compound
adc
subscript
antibody
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202180040752.9A
Other languages
English (en)
Inventor
克里斯托弗·斯科特·诺伊曼
乔舒亚·亨特
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Sijin Co
Original Assignee
Sijin Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sijin Co filed Critical Sijin Co
Publication of CN115955980A publication Critical patent/CN115955980A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6883—Polymer-drug antibody conjugates, e.g. mitomycin-dextran-Ab; DNA-polylysine-antibody complex or conjugate used for therapy
    • A61K47/6885—Polymer-drug antibody conjugates, e.g. mitomycin-dextran-Ab; DNA-polylysine-antibody complex or conjugate used for therapy the conjugate or the polymer being a starburst, a dendrimer, a cascade
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4545—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pipamperone, anabasine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A61K47/545—Heterocyclic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A61K47/68031—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being an auristatin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A61K47/6807—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug or compound being a sugar, nucleoside, nucleotide, nucleic acid, e.g. RNA antisense
    • A61K47/6809—Antibiotics, e.g. antitumor antibiotics anthracyclins, adriamycin, doxorubicin or daunomycin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A61K47/6811—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being a protein or peptide, e.g. transferrin or bleomycin
    • A61K47/6817—Toxins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6849—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a receptor, a cell surface antigen or a cell surface determinant
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6889—Conjugates wherein the antibody being the modifying agent and wherein the linker, binder or spacer confers particular properties to the conjugates, e.g. peptidic enzyme-labile linkers or acid-labile linkers, providing for an acid-labile immuno conjugate wherein the drug may be released from its antibody conjugated part in an acidic, e.g. tumoural or environment
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Macromolecular Compounds Obtained By Forming Nitrogen-Containing Linkages In General (AREA)
  • Luminescent Compositions (AREA)

Abstract

本公开尤其提供了具有电荷可变化学接头的ADC，所述ADC用于治疗各种疾病，诸如癌症和自身免疫病症。

Description

电荷可变接头
背景技术
抗体-药物缀合物(ADC)将单克隆抗体的肿瘤靶向特异性与细胞毒性弹头的有效细胞杀伤活性相结合。部分地由于ADC最近的临床成功，人们对设计新的ADC型式产生了浓厚的兴趣，所述临床成功包括在复发性霍奇金淋巴瘤和间变性大细胞淋巴瘤中的维布妥昔单抗(brentuximab vedotin,
Figure BDA0003983088010000011
)和在HER2-阳性转移性乳腺癌中的恩美曲妥珠单抗(ado-trastuzumab mertansine,
Figure BDA0003983088010000012
)的批准。
递送药物的绝对量部分地受到抗原表达水平、ADC的内化率和缀合至抗体的药物分子的数量(药物-抗体比率或“DAR”)限制。这些限制有助于观察到高效细胞毒性分子通常用于构建活性ADC，因为越适度效能的有效负载往往会显示出越有限的活性。增加递送至细胞的药物的量的一种途径是增加缀合物的DAR；然而，该方法通常会导致半衰期缩短和体内功效降低。许多这种较高负载的ADC的快速清除通常归因于较差的生物物理特性，但缺乏对这些特性的具体鉴定。在较高负载的缀合物(诸如具有导致ADC聚集的疏水性药物的那些)方面的最近进展依赖于具有异质结构和药物负载的基于亲水性聚合物的体系，以避免聚集和相关问题。
发明内容
一些实施方案提供了式(I)的抗体-药物缀合物(ADC)化合物：
Ab–{(S*-L1)–[(M)x-(L2-D)y]}p (I)
其中：
Ab为抗体；
每个S*为来自所述抗体的半胱氨酸残基的硫原子、来自所述抗体的赖氨酸残基的∈-氮原子、或三唑部分，并且
每个L1为任选地被PEG2至PEG72范围内的PEG单元取代的第一接头；
其中S*-L1选自由式A-K组成的组：
Figure BDA0003983088010000021
其中：
每个LA为任选地被1-3个独立选择的Ra取代的C1-10亚烷基，或任选地被1-3个独立选择的Rb取代的2-24元杂亚烷基；
每个环B为任选地被1-3个独立选择的Rc取代并且进一步任选地稠合至1-2个环的8-12元杂环基，所述环各自独立地选自由C6-10芳基和5-6元杂芳基组成的组；
每个Ra、Rb和Rc独立地选自由以下项组成的组：C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、卤素、-OH、＝O、-NRdRe、-C(O)NRdRe、-C(O)(C1-6烷基)、-(C1-6亚烷基)-NRdRe和-C(O)O(C1-6烷基)；
每个Rd和Re独立地为氢或C1-3烷基；或者Rd和Re与两者所连接的氮原子一起形成5-6元杂环基；
L2为任选地被选自PEG2至PEG20的PEG单元取代的任选的第二接头；
每个M为多效物(multiplexer)；
下标x为0、1、2、3或4；
下标y为2x；
每个D为药物单元；
其中L1以及当L2不存在时的每个(M)x-(D)y或当L2存在时的每个(M)x-(L2-D)y在生理pH下具有净零电荷；
下标p为2至10范围内的整数；并且
D与Ab的比率为8:1至64:1。
一些实施方案提供了一种包含如本文所述的ADC或其药学上可接受的盐的组合物。
一些实施方案提供了一种治疗有需要的受试者的癌症的方法，该方法包括向受试者施用治疗有效量的如本文所述的ADC或其药学上可接受的盐，或如本文所述的包含如本文所述的ADC或其药学上可接受的盐的组合物。
一些实施方案提供了一种治疗有需要的受试者的自身免疫病症的方法，该方法包括向受试者施用治疗有效量的如本文所述的ADC或其药学上可接受的盐，或如本文所述的包含如本文所述的ADC或其药学上可接受的盐的组合物。
附图说明
图1提供了hAC10ec及其与MC1或MC3的缀合物(DAR＝10、20或38.5)的HIC色谱图(280nm处)。
图2示意性地示出了MC2和N-乙基马来酰亚胺在抗体的半胱氨酸残基上的顺序反应。L0＝23152的抗体(cAC10)与MC2反应以形成抗体-双效物化合物(预期质量：23,476；观测质量：23,475)。然后用TCEP还原抗体-双效物化合物的MC2双效物的二硫键，随后使还原的抗体-双效物化合物与N-乙基马来酰亚胺(NEM)(2当量)反应以形成抗体-双效物-NEM化合物(预期质量23,723；观测质量23,725)。
图3提供了澳瑞他汀ADC(DAR＝16)的尺寸排阻色谱图。图3A提供了ADC cAC10-MC2(8)-MC4(16)的尺寸排阻色谱图(保留时间：约6.6分钟)。图3B提供了ADC cAC10-MC2(8)-MC5(16)的尺寸排阻色谱图(保留时间：约6.6分钟)。
图4A提供了与MC2和MC4经历顺序反应的还原的cAC10抗体的PLRP色谱图(轻链的保留时间：约1.29分钟；重链的保留时间：约1.97分钟)。图4B提供了来自已经历与一个单位的MC2的反应完整抗体的抗体(cAC10)轻链的质谱(预期值：25,737；观测值：25,737)。图4C提供了来自连接至MC2(1)-MC4(2)的完整抗体的抗体(cAC10)轻链的质谱(预期值：28,072；观测值：28,072)。图4D提供了来自连接至MC2(3)-MC4(6)的完整抗体的抗体(cAC10)重链的质谱(预期值：63,364；观测值：63,364)。
图5A提供了与MC2和MC5经历顺序反应的还原的cAC10抗体的PLRP色谱图(轻链的保留时间：约0.33分钟；重链的保留时间：约1.0分钟)。图5B提供了连接至MC2(1)-MC5(2)的抗体(cAC10)轻链的质谱(预期值：26,244；观测值：26,244)。图5C提供了连接至MC2(3)-MC5(6)的抗体(cAC10)重链的质谱数据(预期值：57,880；观测值：57,879)。
图6示意性地示出了用于制备包含一个或多个多效物部分的ADC的示例性方法。在该方法中，单个抗体被还原并与MC2反应。在具有经工程改造的两个半胱氨酸残基的单克隆抗体(ECmAb)中，总共具有10个Cys残基(八个天然的和两个经工程改造的)，每个半胱氨酸的硫醇基团与MC2单元反应。然后使每个MC2单元(在二硫化物还原之后)与两个附加的MC2单元反应。L2-D部分在其二硫键还原后与末端MC2单元的缀合形成DAR＝40的ADC。这些ADC具有通式Ab-MC2(10)-MC2(20)-(L2-D)(40)。
图7提供了具有不同DAR(DAR＝0、10、20和38.5)的与MC1或MC3的hAC10缀合物的HIC色谱图。
图8提供了具有不同DAR(DAR＝10、20和38.5)的cAc10ec-MC1ADC对霍奇金淋巴瘤细胞系L540cy的体外细胞毒性。
图9提供了非结合IgG1抗体与NAMPT抑制剂缀合的DAR16缀合物的大鼠药代动力学数据，其中每种缀合物在L2-D部分中具有不同的电荷。将具有L2-D＝MC9(中性)或MC8(两性离子)的ADC与具有L2-D＝MC7(带负电荷)和MC10(带正电荷)的ADC进行比较。
图10提供了在具有L540cy细胞的体内异种移植模型中分别具有通式cAC10-MC6(8)-(L2-D)(16)或IgG1-MC6(8)-(L2-D)(16)的与NAMPT抑制剂的cAC10或非结合IgG1缀合物的功效，其中L2-D为MC7、MC8、MC9或MC10。
图11提供了在使用抗体归一化给药和药物归一化给药的体内异种移植物模型中Ab3(ec)-MC6(10)-MC9(20)和Ab3(ec)-MC7(10)ADC对KG1-22细胞的功效(平均肿瘤数据)。
具体实施方式
预期具有带净电荷的接头的ADC将会由于其较大的亲水性而具有优异的生物物理特性相比之下，已出人意料地发现，在较高负载的ADC中的接头上具有净电荷可能对其生物物理特性具有深远的负面影响。例如，具有带净零电荷的药物接头的ADC优于其中接头具有净正电荷或净负电荷的比较ADC。
因此，本文提供了具有电荷可变接头和一定范围的药物-抗体比率(DAR)的式(I)的ADC，包括具有高DAR(例如，DAR>8)的ADC。传统的高DAR ADC表现出降低的效能并且/或者需要基于异质聚合物的体系以避免聚集(和伴随的效能损失)。在一些实施方案中，与用传统的高负载ADC通常观察到的相比，本文所述的ADC表现出更有利的生物物理特性。在一些实施方案中，与具有带净电荷的接头的高DAR ADC相比，本文所述的ADC具有更有利的生物物理特性。在一些实施方案中，与具有带净电荷的接头的高DAR ADC相比，本文所述的ADC具有改善的体内功效。ADC的体内功效很大程度上取决于它们的药代动力学和其有效负载的效能。式(I)的ADC具有电荷可变接头，使得ADC的药物接头部分在生理pH下是两性离子的或中性的(即，具有净零电荷)。在一些实施方案中，式(I)的ADC相对于具有带净正电荷或净负电荷的药物-接头部分的传统高负载ADC或比较ADC表现出延长的半衰期。该方法可以使得能够调节ADC的半衰期并且使用效能较低的化合物(例如，细胞毒性较小的化合物)作为ADC的药物单元来表现出治疗癌症所需的功效，与缀合至细胞毒性较大的化合物的那些相比，所述效能较低的化合物通常需要较高的DAR。
定义
除非另外定义，否则本文使用的所有技术术语和科学术语具有与本公开所属领域的普通技术人员通常所理解的相同的含义。本文描述了用于本申请的方法和材料；另外，在本公开的一些方面，还使用了本领域已知的合适的方法和材料。所述材料、方法和示例仅是说明性的而不是旨在限制。本文提及的所有出版物、专利申请、专利、序列、数据库条目和其他参考文献均全文以引用方式并入。在发生冲突的情况下，以本说明书(包括定义)为准。当在本文中使用商品名时，除非上下文另有说明，否则商品名包括该商品名产品的产品配方、通用药物和活性药物成分。
如本文所用的术语“一个”、“一种”或“该”不仅包括具有一个要素的方面，而且还包括具有多于一个要素的方面。例如，除非上下文另有明确说明，否则单数形式“一个”、“一种”和“该”包括复数指代物。因此，例如，提及“一个接头”包括提及一个或多个此类接头，并且提及“该细胞”包括提及多个此类细胞。
当提及数值或数值范围时，术语“约”意指所提及的数值或数值范围是例如在实验波动和/或统计实验误差内的近似值，并且因此该数值或数值范围可以变化至所述数值或数值范围的±10％。相对于包含如本文所述的ADC分布的ADC组合物，组合物中与抗体缀合的药物单元的平均数量可以是整数或非整数，特别是当抗体将被部分负载时。因此，在平均药物负载值之前叙述的术语“约”旨在涵盖ADC组合物内药物负载的预期变化。
术语“抑制(inhibit)”或“抑制(inhibition of)”意指减少可测量的量，或完全防止(例如，100％抑制)。
术语“治疗有效量”是指能够有效治疗哺乳动物的疾病或病症的ADC或其盐(如本文所述)的量。就癌症而言，治疗有效量的ADC提供一种或多种以下生物学效应：癌细胞数量的减少；肿瘤大小的减小；抑制癌细胞浸润到外周器官中；抑制肿瘤转移；在一定程度上抑制肿瘤生长；和/或在一定程度上缓解与癌症相关的一种或多种症状。对于癌症疗法，在一些方面，功效通过评估疾病进展时间(TTP)和/或测定反应率(RR)来测量。
除非上下文另有说明或暗示，术语“基本”或“基本上”是指混合物或样品的大部分，即群体的>50％，通常大于50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％。
术语“细胞内裂解的”和“细胞内裂解”是指在细胞内发生的代谢过程或反应，其中细胞机制作用于ADC或其片段，以从ADC或它的其他降解产物细胞内释放游离药物。因此，由该代谢过程或反应得到的部分是细胞内代谢物。
术语“细胞毒活性”是指药物或ADC或ADC的细胞内代谢物的细胞杀伤作用。细胞毒活性通常由IC50值表示，该值是一半细胞在暴露于细胞毒性剂时存活的每单位体积的浓度(摩尔或质量)。
术语“细胞抑制活性”是指细胞抑制剂或具有细胞抑制剂作为其药物单元(D)的ADC或其细胞内代谢物的细胞杀伤作用以外的抗增殖作用，其中代谢物是细胞抑制剂。
如本文所用的术语“细胞毒性剂”是指具有细胞毒活性的物质，如本文所定义。该术语旨在包括化疗剂和毒素诸如细菌、真菌、植物或动物来源的小分子毒素或酶活性毒素，包括其合成类似物和衍生物。
如本文所用的术语“细胞抑制剂”是指具有如本文所定义的细胞抑制活性的物质。细胞抑制剂包括例如酶抑制剂。
术语“癌症”和“癌的”是指或描述哺乳动物中通常以不受调节的细胞生长为特征的生理状况或病症。“肿瘤”包括多种癌细胞。
本文的“自身免疫病症”是由受试者自身的组织或蛋白质引起并针对受试者自身的组织或蛋白质的疾病或病症。
如本文所用的“受试者”是指施用如本文所述的ADC的个体。“受试者”的示例包括但不限于哺乳动物，诸如人、大鼠、小鼠、豚鼠、非人灵长类动物、猪、山羊、牛、马、狗、猫、鸟和家禽。通常，受试者是大鼠、小鼠、狗、非人灵长类动物或人。在一些方面，受试者是人。
除非上下文另有说明或暗示，否则术语“治疗(treat)”或“治疗(treatment)”是指预防复发的治疗性治疗和预防性措施，其中目的是抑制不期望的生理变化或病症，诸如癌症的发展或扩散。出于本公开的目的，有益的或期望的临床结果包括但不限于症状的减轻、疾病程度的减小、疾病状态的稳定(即，不恶化)、疾病进展的延迟或减缓、疾病状态的改善或减轻、以及可检测或不可检测的缓解(部分或全部)。在一些方面，“治疗”还意指与未接受治疗的预期存活相比延长存活。
在癌症的上下文中，术语“治疗”包括以下任一项或全部：抑制肿瘤细胞、癌细胞或肿瘤的生长；抑制肿瘤细胞或癌细胞的复制，减轻总体肿瘤负荷或减少癌细胞的数量，以及改善与疾病相关的一种或多种症状。
在自身免疫病症的上下文中，术语“治疗”包括以下任一项或全部：抑制与自身免疫病症状态相关的细胞(包括但不限于产生自身免疫抗体的细胞)的复制，减轻自身免疫抗体负荷以及改善自身免疫病症的一种或多种症状。
如本文所用，术语“盐”是指化合物诸如药物单元(D)、接头(诸如本文所述的那些)或ADC的有机或无机盐。在一些方面，化合物含有至少一个氨基基团，因此，酸加成盐可形成有氨基基团。示例性盐包括但不限于硫酸盐、三氟乙酸盐、柠檬酸盐、乙酸盐、草酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、硝酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、酸式磷酸盐、异烟酸盐、乳酸盐、水杨酸盐、酸式柠檬酸盐、酒石酸盐、油酸盐、鞣酸盐、泛酸盐、酒石酸氢盐、抗坏血酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、龙胆酸盐、富马酸盐、葡糖酸盐、葡糖醛酸盐、蔗糖酸盐、甲酸盐、苯甲酸盐、谷氨酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐和双羟萘酸盐(即，1,1'-亚甲基-双-(2-羟基-3-萘甲酸盐))。盐可涉及包含另一分子诸如乙酸根离子、琥珀酸根离子或其他抗衡离子。抗衡离子可以是稳定母体化合物上的电荷的任何有机或无机部分。此外，盐在其结构中具有一个或多于一个带电原子。在存在多个带电原子作为盐的一部分的情况下，有时存在多个抗衡离子。因此，盐可具有一个或多个带电原子和/或一个或多个抗衡离子。“药学上可接受的盐”是如本文所述的适于向受试者施用的盐，并且在一些方面包括如P.H.Stahl和C.G.Wermuth编辑，Handbook of Pharmaceutical Salts:Properties,Selection andUse,Weinheim/Zürich:Wiley-VCH/VHCA,2002所述的盐，该文献的列表具体地以引用方式并入本文。
术语“烷基”是指具有指定碳原子数的直链或支链饱和烃(例如，“C1-C4烷基”、“C1-C6烷基”、“C1-C8烷基”或“C1-C10”烷基分别具有1至4个、至6个、1至8个或1至10个碳原子)并且通过从母体烷烃去除一个氢原子而得到。代表性直链“C1-C8烷基”基团包括但不限于甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基、正己基、正庚基和正辛基；而支链C1-C8烷基包括但不限于异丙基、仲丁基、异丁基、叔丁基、异戊基和2-甲基丁基。
术语“亚烷基”是指具有指定碳原子数(例如，C1-C6亚烷基具有1至6个碳原子)并且具有通过从母体烷烃的相同或两个不同碳原子去除两个氢原子而得到的两个单价中心的二价饱和支链或直链烃。亚烷基基团可以被1-6个氟基团取代，例如在碳主链上(如-CHF-或-CF2-)或在直链或支链亚烷基的末端碳上(诸如–CHF2或–CF3)。亚烷基基团包括但不限于：亚甲基(-CH2-)、亚乙基(-CH2CH2-)、正亚丙基(-CH2CH2CH2-)、正亚丙基(-CH2CH2CH2-)、正亚丁基(-CH2CH2CH2CH2-)、二氟亚甲基(-CF2-)、四氟亚乙基(-CF2CF2-)等。
术语“杂烷基”是指具有指定总原子数和至少一个(例如，1至15个)选自由O、N、Si和S组成的组的杂原子的完全或部分饱和的稳定直链或支链烃。杂烷基基团的碳和杂原子可以被氧化(例如，以形成酮、N-氧化物、砜等)，并且氮原子可以被季铵化。杂原子可以位于杂烷基基团的任何内部位置处和/或杂烷基基团的任何末端(包括支链杂烷基基团的末端)处，和/或杂烷基基团与分子的其余部分连接的位置处。杂烷基基团可以被1-6个氟基团取代，例如在碳主链上(如-CHF-或-CF2-)或在直链或支链杂烷基的末端碳上(诸如–CHF2或–CF3)。杂烷基基团的示例包括但不限于-CH2-CH2-O-CH3、-CH2-CH2-NH-CH3、-CH2-CH2-N(CH3)2、-C(＝O)-NH-CH2-CH2-NH-CH3、-C(＝O)-N(CH3)-CH2-CH2-N(CH3)2、-C(＝O)-NH-CH2-CH2-NH-C(＝O)-CH2-CH3、-C(＝O)-N(CH3)-CH2-CH2-N(CH3)-C(＝O)-CH2-CH3、-O-CH2-CH2-CH2-NH(CH3)、-O-CH2-CH2-CH2-N(CH3)2、-O-CH2-CH2-CH2-NH-C(＝O)-CH2-CH3、-O-CH2-CH2-CH2-N(CH3)-C(＝O)-CH2-CH3、-CH2-CH2-CH2-NH(CH3)、-O-CH2-CH2-CH2-N(CH3)2、-CH2-CH2-CH2-NH-C(＝O)-CH2-CH3、-CH2-CH2-CH2-N(CH3)-C(＝O)-CH2-CH3、-CH2-S-CH2-CH3、-CH2-CH2-S(O)-CH3、-NH-CH2-CH2-NH-C(＝O)-CH2-CH3、-CH2-CH2-S(O)2-CH3、-CH2-CH2-O-CF3和-Si(CH3)3。至多两个杂原子可以是连续的，诸如-CH2-NH-OCH3和–CH2-O-Si(CH3)3。末端聚乙二醇(PEG)部分是一类杂烷基基团。
术语“杂亚烷基”是指衍生自杂烷基(如本文所定义)的未取代的二价直链或支链基团。杂亚烷基基团的示例包括但不限于-CH2-CH2-O-CH2-、-CH2-CH2-O-CF2-、-CH2-CH2-NH-CH2-、-C(＝O)-NH-CH2-CH2-NH-CH2--C(＝O)-N(CH3)-CH2-CH2-N(CH3)-CH2-、-C(＝O)-NH-CH2-CH2-NH-C(＝O)-CH2-CH2-、-C(＝O)-N(CH3)-CH2-CH2-N(CH3)-C(＝O)-CH2-CH2-、-O-CH2-CH2-CH2-NH-CH2-、-O-CH2-CH2-CH2-N(CH3)-CH2-、-O-CH2-CH2-CH2-NH-C(＝O)-CH2-CH2-、-O-CH2-CH2-CH2-N(CH3)-C(＝O)-CH2-CH2-、-CH2-CH2-CH2-NH-CH2-、-CH2-CH2-CH2-N(CH3)-CH2-、-CH2-CH2-CH2-NH-C(＝O)-CH2-CH2-、-CH2-CH2-CH2-N(CH3)-C(＝O)-CH2-CH2-、-CH2-CH2-NH-C(＝O)-、-CH2-CH2-N(CH3)-CH2-、-CH2-CH2-N+(CH3)2-、-NH-CH2-CH2(NH2)-CH2-和-NH-CH2-CH2(NHCH3)-CH2-。二价聚乙二醇(PEG)部分是一类杂亚烷基基团。
术语“烷氧基”是指经由氧原子连接至分子的如本文所定义的烷基基团。例如，烷氧基基团包括但不限于甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基和正己氧基。
术语“卤代烷基”是指具有指定碳原子数的直链或支链饱和烃(例如，“C1-C4烷基”、“C1-C6烷基”、“C1-C8烷基”或“C1-C10”烷基分别具有1至4个、至6个、1至8个或1至10个碳原子)，其中烷基基团的至少一个氢原子被卤素(例如，氟、氯、溴或碘)替代。当未指明碳原子数时，卤代烷基基团具有1至6个碳原子。代表性C1-6卤代烷基包括但不限于二氟甲基、三氟甲基、2,2,2-三氟乙基和1-氯异丙基。
术语“卤代烷氧基”是指经由氧原子连接至分子的如本文所定义的卤代烷基基团。例如，卤代烷氧基基团包括但不限于二氟甲氧基、三氟甲氧基、2,2,2-三氟乙氧基和1,1,1-三氟2-甲基丙氧基。
术语“芳基”是指通过从母体芳族环系的单个碳原子上去除一个氢原子而得到的6-10个碳原子的单价碳环芳族烃基。芳基基团包括但不限于苯基、萘基、蒽基、联苯基等。
术语“杂环基”是指饱和或部分不饱和环或多缩合环系，包括桥环、稠环和螺环体系。杂环可通过环系中的原子总数来描述，例如3-10元杂环具有3至10个总环原子。该术语包括单个饱和或部分不饱和环(例如，3、4、5、6或7元环)，其在环中具有约1至6个碳原子和约1至3个选自由氧、氮和硫组成的组的杂原子。该环可以被一个或多个(例如，1、2或3个)氧代基团取代，并且硫和氮原子也可以其氧化形式存在。此类环包括但不限于氮杂环丁烷基、四氢呋喃基和哌啶基。术语“杂环”还包括多个稠合环系(例如，包含2、3或4个环的环系)，其中单个杂环(如上文所定义)可与一个或多个杂环(例如，十氢萘啶基)、碳环(例如，十氢喹啉基)或芳基缩合。当化合价要求允许时，多缩合环体系的环可经由稠合、螺环或桥键彼此连接。应当理解，多缩合环体系(如上文针对杂环所定义)的连接点可以在多缩合环体系的任何位置处，包括环的杂环、芳基和碳环部分。还应当理解，杂环或杂环多缩合环体系的连接点可以在杂环或杂环多缩合环体系的任何合适的原子处，包括碳原子和杂原子(例如，氮)。示例性杂环包括但不限于氮杂环丙烯基、氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、高哌啶基、吗啉基、硫代吗啉基、哌嗪基、四氢呋喃基、二氢噁唑基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、1,2,3,4-四氢喹啉基、苯并噁嗪基、二氢噁唑基、苯并二氢吡喃基、1,2-二氢吡啶基、2,3-二氢苯并呋喃基、1,3-苯并二氧杂环戊烷基和1,4-苯并二氧杂环己烷基。
术语“杂芳基”是指在单个环内或在稠环体系内具有至少一个选自由O、N和S组成的组的杂原子的芳族烃环体系。环或环体系在共轭π体系中具有4n+2个电子，其中对共轭π体系有贡献的所有原子位于同一平面中。在一些实施方案中，杂芳基基团具有总共5-10个环原子和1、2或3个杂原子(称为“5-10元杂芳基”)。杂芳基基团包括但不限于咪唑、三唑、噻吩、呋喃、吡咯、苯并咪唑、吡唑、吡嗪、吡啶、嘧啶和吲哚。
如本文所用，术语“游离药物”是指不共价连接至抗体的生物活性物质。因此，游离药物是指在从ADC裂解后就存在的化合物。释放机制可经由ADC中的可裂解接头或经由ADC的细胞内转化或代谢实现。在一些方面，游离药物将被质子化并且/或者可作为带电部分存在。游离药物是能够发挥期望生物效应的药理学活性物质。在一些实施方案中，药理学活性物质是单独的母体药物。在一些实施方案中，药理学活性物质是与ADC的组分或残余(例如，接头、琥珀酰亚胺、水解琥珀酰亚胺和/或未经历后续细胞内代谢的抗体的组分)键合的母体药物。
示例性游离药物化合物具有细胞毒性、细胞抑制、免疫抑制、免疫刺激或免疫调节药物。在一些实施方案中，D是微管蛋白干扰剂、DNA小沟结合剂、DNA损伤剂或DNA复制抑制剂。
如本文所用，术语“药物单元”是指缀合至如本文所述的ADC中的抗体的游离药物。
如本文所用，术语“亲水性药物”是指具有1.0或更小的logP值的如本文所定义的药物单元或游离药物。示例性亲水性药物包括但不限于抗叶酸剂、核苷和NAMPT抑制剂。
如本文所用，“净零电荷”是指在生理pH下不具有净电荷的化合物或化合物的特定部分。例如，在本文所述的式(I)的化合物中，式(I)的L2和/或L1–[(M)x-(D)y]部分可具有净零电荷。具有净零电荷的化合物或化合物的部分包括具有两种或更多种带电物质的那些，其中两个或更多个电荷的总和为零(诸如两性离子化合物)。
如本文所用，“生理pH”是指约7.3至约7.5的pH，或7.3至7.5的pH。
抗体-药物缀合物(ADC)及其中间体
第一代ADC含有传统上用于癌症化疗的高毒性有效负载，诸如多柔比星、微管抑制剂和DNA损伤剂。参见Diamantis和Banerji，Br.J.Cancer，第114卷，第362–367页(2016)。这些早期ADC是高毒性的并且通常具有较差的生理化学特性，据估计仅1％-2％的有效负载到达靶细胞。参见Beck等人，Nat.Rev.Drug Discov.，第16卷，第315-337页(2017)。第二代ADC诸如恩美曲妥珠单抗
Figure BDA0003983088010000141
也提供了细胞毒性有效负载，并且含有促进有效负载在靶细胞处或附近释放的改进的接头。尽管有这些改进，但在ADC的设计中仍然存在复杂的问题。
抗体与有效负载之间的接头控制药物向靶标的释放，从而控制药物向靶标的递送。参见Gerber等人，Nat.Prod.Rep.，第30卷，第625-639页(2013)。过早的药物释放可通过杀死健康细胞而引起严重的脱靶毒性。实际上，接头必须足够稳定以存活直至抗体与靶标结合，但足够不稳定以便释放药物(无论是通过直接酶促作用，还是通过酶促裂解和水解的组合)。然而，接头也可影响ADC的溶解性、聚集和清除，从而影响它们的分布。参见Jain等人，Pharm.Res.，第32卷，第3526-3540页(2015)。这些问题导致在许多ADC中观察到的高患者间波动和分布模式，妨碍正确剂量的施用。参见Krop等人，Breast Cancer Res.，第18卷，第34页(2016)。
此外，较高的DAR通常导致较大的体外效能，但通常以较差的体内药代动力学特性为代价。参见Hamblett等人，Clin.Cancer Res.，第10卷，第7063-7070页(2004)；另请参见Sun等人，Bioconj.Chem.，第28卷，第1371-1381页(2017)。实际上，当制备DAR为2、4和8的其他方面相同的ADC时，ADC的清除率在DAR增大时增加。参见例如Hamblett等人(2004)，同上。
本申请部分地基于以下令人惊讶的发现：调节抗体与药物之间的接头的电荷可对ADC的药代动力学特性具有显著影响。具体地，不带电荷或具有净零电荷的接头(例如，两性离子接头)提供了获得具有一定范围的DAR的ADC的途径。在一些实施方案中，本文提供的ADC表现出体外效能以及改善的药代动力学特性。
一些实施方案提供了式(I)的抗体药物缀合物(ADC)化合物：
Ab–{(S*-L1)–[(M)x-(L2-D)y]}p (I)
其中Ab为抗体；
每个S*为来自所述抗体的半胱氨酸残基的硫原子、来自所述抗体的赖氨酸残基的∈-氮原子、或三唑部分，并且
每个L1为任选地被PEG2至PEG72范围内的PEG单元取代的第一接头，
其中S*-L1选自由式A-K组成的组：
Figure BDA0003983088010000161
其中：
每个LA为任选地被1-3个独立选择的Ra取代的C1-10亚烷基，或任选地被1-3个独立选择的Rb取代的2-24元杂亚烷基；
每个环B为任选地被1-3个独立选择的Rc取代并且进一步任选地稠合至1-2个环的8-12元杂环基，所述环各自独立地选自由C6-10芳基和5-6元杂芳基组成的组；
每个Ra、Rb和Rc独立地选自由以下项组成的组：C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、卤素、-OH、＝O、-NRdRe、-(C1-6亚烷基)-NRdRe、-C(O)NRdRe、-C(O)(C1-6烷基)和-C(O)O(C1-6烷基)；
每个Rd和Re独立地为氢或C1-3烷基；或者Rd和Re与两者所连接的氮原子一起形成5-6元杂环基；
L2为任选地被PEG2至PEG72范围内的PEG单元取代的任选的第二接头；
每个M为多效物；
下标x为0、1、2、3或4；
下标y为2x；
每个D为药物单元；
其中每个L2-D在生理pH下具有净零电荷；或者其中L1以及当L2不存在时的每个(M)x-(D)y或当L2存在时的每个(M)x-(L2-D)y在生理pH下具有净零电荷；
下标p为2至10范围内的整数；并且
其中D与Ab的比率为8:1至64:1。
在一些实施方案中，每个S*为来自抗体的半胱氨酸残基的硫原子。在一些实施方案中，半胱氨酸残基是天然半胱氨酸残基、经工程改造的半胱氨酸残基或它们的组合。在一些实施方案中，每个半胱氨酸残基来自还原的链间二硫键。在一些实施方案中，每个半胱氨酸残基是经工程改造的半胱氨酸残基。在一些实施方案中，每个半胱氨酸残基是天然半胱氨酸残基。在一些实施方案中，一个或多个S*为来自经工程改造的半胱氨酸残基的硫原子；并且任何其余的S*为来自天然半胱氨酸残基的硫原子。在一些实施方案中，1、2、3或4个S*为来自经工程改造的半胱氨酸残基的硫原子；并且任何其余的S*为来自天然半胱氨酸残基的硫原子。
在一些实施方案中，每个S*为来自抗体的赖氨酸残基的∈-氮原子。在一些实施方案中，赖氨酸残基是天然赖氨酸残基、经工程改造的赖氨酸残基或它们的组合。在一些实施方案中，每个赖氨酸残基是经工程改造的赖氨酸残基。在一些实施方案中，每个赖氨酸残基是天然赖氨酸残基。在一些实施方案中，一个或多个S*为来自经工程改造的赖氨酸残基的∈-氮原子；并且任何其余的S*为来自天然赖氨酸残基的∈-氮原子。在一些实施方案中，1、2、3或4个S*为来自经工程改造的赖氨酸残基的∈-氮原子；并且任何其余的S*为来自天然赖氨酸残基的∈-氮原子。
在一些实施方案中，每个S*为三唑部分。在一些实施方案中，当S*为三唑部分时，该三唑部分通过叠氮化物基团与炔烃基团之间的叠氮化物-炔烃极性环加成反应(“点击化学”)形成，如本文所述。并入叠氮化物或炔烃前体以进行环加成(得到作为三唑部分的S*)的方法通过修饰抗体的一个或多个氨基酸残基来进行。
在一些实施方案中，L1终止于具有足够应变的炔烃官能团的组分，所述炔烃官能团对带有合适的叠氮化物官能团的经修饰的抗体具有反应性。这两个官能团之间的偶极环加成得到三唑。在一些实施方案中，使用Diels-Alder型化学反应(4+2环加成，反电子需求)将具有末端1,2,4,5-四嗪的L1共价连接至带有合适的反式环辛烯官能团的经修饰的抗体。为了说明，在a)和b)中分别示出了点击反应和Diels-Alder(4+2环加成)反应的一般描述。本领域的技术人员将会知道，多种修改是可能的，包括但不限于改变反应性组分的取代模式，切换每个反应性组分所连接的部分(Ab或L1)。
a)
Figure BDA0003983088010000181
b)
Figure BDA0003983088010000182
在一些实施方案中，S*-L1具有式A：
Figure BDA0003983088010000183
在一些实施方案中，S*-L1具有式B：
Figure BDA0003983088010000184
在一些实施方案中，S*-L1具有式C：
Figure BDA0003983088010000191
在一些实施方案中，S*-L1具有式D：
Figure BDA0003983088010000192
在一些实施方案中，S*-L1具有式E：
Figure BDA0003983088010000193
在一些实施方案中，S*-L1具有式F：
Figure BDA0003983088010000194
在一些实施方案中，S*-L1具有式G：
Figure BDA0003983088010000195
在一些实施方案中，S*-L1具有式H：
Figure BDA0003983088010000196
在一些实施方案中，S*-L1具有式I：
Figure BDA0003983088010000197
在一些实施方案中，S*-L1具有式J：
Figure BDA0003983088010000198
在一些实施方案中，S*-L1具有式K：
Figure BDA0003983088010000199
在一些实施方案中，当每个S*为来自抗体的赖氨酸残基的∈-氮原子时，S*-L1选自由式E1-K1组成的组：
Figure BDA0003983088010000201
在一些实施方案中，L1是未取代的。在一些实施方案中，L1被PEG2至PEG72范围内的PEG单元取代，例如PEG2、PEG4、PEG6、PEG8、PEG10、PEG12、PEG16、PEG20、PEG24、PEG36或PEG72。
在一些实施方案中，LA为任选地被1-3个独立选择的Ra取代的C1-10亚烷基。在一些实施方案中，LA为任选地被1-3个独立选择的Ra取代的C1-8亚烷基。在一些实施方案中，LA为任选地被1-3个独立选择的Ra取代的C1-6亚烷基。在一些实施方案中，LA为任选地被1-3个独立选择的Ra取代的C1-4亚烷基。
在一些实施方案中，LA是未取代的。在一些实施方案中，LA被一个Ra取代。在一些实施方案中，LA被两个Ra取代。在一些实施方案中，LA被三个Ra取代。
在一些实施方案中，LA与其0、1、2或3个Ra一起在生理pH下不带电荷。在一些实施方案中，LA与其0、1、2或3个Ra一起在生理pH下带中性电荷。在一些实施方案中，LA被2个Ra取代；其中一个Ra带正电荷，并且另一个Ra带负电荷。
在一些实施方案中，每个Ra选自由以下项组成的组：C1-6烷氧基、卤素、-OH、-(C1-6亚烷基)-NRdRe、-C(O)NRdRe和-C(O)(C1-6烷基)。在一些实施方案中，Ra之一为NRdRe，并且其余的Ra不为-NRdRe。在一些实施方案中，Ra之一为-(C1-6亚烷基)-NRdRe，并且其余的Ra不为-(C1-6亚烷基)-NRdRe。在一些实施方案中，Ra之一为NRdRe，并且其余的Ra选自由以下项组成的组：C1-6烷氧基、卤素、-OH、-C(O)NRdRe和-C(O)(C1-6烷基)。在一些实施方案中，Ra之一为-(C1-6亚烷基)-NRdRe，并且其余的Ra选自由以下项组成的组：C1-6烷氧基、卤素、-OH、-C(O)NRdRe和-C(O)(C1-6烷基)。
在一些实施方案中，LA为
Figure BDA0003983088010000211
其中LA1为键或任选地被Ra取代的C1-5亚烷基；下标n1为1-4；并且下标n2为0-4。在一些实施方案中，下标n1为1。在一些实施方案中，下标n1为2。在一些实施方案中，下标n1为3。在一些实施方案中，下标n1为4。在一些实施方案中，下标n2为0。在一些实施方案中，下标n2为1。在一些实施方案中，下标n2为2。在一些实施方案中，下标n2为3。在一些实施方案中，下标n2为4。
在一些实施方案中，LA1为键。在一些实施方案中，LA1为C1-5亚烷基。在一些实施方案中，LA1是未取代的。在一些实施方案中，LA1被一个Ra取代。
在一些实施方案中，LA为
Figure BDA0003983088010000212
其中下标n1为1或2；并且下标n2为0、1或2。在一些实施方案中，下标n1为1。在一些实施方案中，下标n1为2。在一些实施方案中，下标n2为0。在一些实施方案中，下标n2为1。在一些实施方案中，下标n2为2。在一些实施方案中，下标n1为1并且下标n2为0。在一些实施方案中，下标n1为1并且下标n2为1。在一些实施方案中，下标n1为1并且下标n2为2。在一些实施方案中，下标n1为2并且下标n2为0。在一些实施方案中，下标n1为2，并且下标n2为1。在一些实施方案中，下标n1为2并且下标n2为2。
在一些实施方案中，LA为未取代的C1-10亚烷基，诸如亚甲基、亚乙基、亚丙基、正亚丁基、仲亚丁基、亚戊基或亚己基。
在一些实施方案中，LA为任选地被1-3个独立选择的Rb取代并且任选地进一步被PEG2至PEG24范围内的PEG单元取代的2-24元杂亚烷基。在一些实施方案中，LA为任选地被1-3个独立选择的Rb取代并且任选地进一步被PEG2至PEG24范围内的PEG单元取代的2-12元杂亚烷基。在一些实施方案中，LA为任选地被1-3个独立选择的Rb取代并且任选地进一步被PEG2至PEG24范围内的PEG单元取代的在生理pH下不具有带电杂原子的2-24元杂亚烷基。在一些实施方案中，LA是未取代的。在一些实施方案中，在式A和式D中，Rb不为-NRdRe。在一些实施方案中，在式B和式C中，仅一个Rb为-NRdRe。
在一些实施方案中，当LA被PEG单元取代时，LA的杂亚烷基是被PEG单元取代的位点。
在一些实施方案中，LA被1-3个独立选择的Rb取代，如本文所述。在一些实施方案中，LA被一个Rb取代，如本文所述。在一些实施方案中，LA被两个独立选择的Rb取代，如本文所述。在一些实施方案中，LA被三个独立选择的Rb取代，如本文所述。
在一些实施方案中，LA被1个Rb取代，该Rb是PEG2至PEG24范围内的PEG单元。
在一些实施方案中，LA被1-3个独立选择的如本文所述的Rb取代，其中一个Rb是PEG8至PEG24范围内的PEG单元。
在一些实施方案中，每个Rb选自由以下项组成的组：C1-6烷氧基、卤素、-OH、-(C1-6亚烷基)-NRdRe、-C(O)NRdRe和-C(O)(C1-6烷基)。在一些实施方案中，Rb之一为NRdRe，并且其余的Rb不为-NRdRe。在一些实施方案中，Rb之一为-(C1-6亚烷基)-NRdRe，并且其余的Rb不为-(C1-6亚烷基)-NRdRe。在一些实施方案中，Rb之一为NRdRe，并且其余的Rb选自由以下项组成的组：C1-6烷氧基、卤素、-OH、-C(O)NRdRe和-C(O)(C1-6烷基)。在一些实施方案中，Rb之一为-(C1-6亚烷基)-NRdRe，并且其余的Rb选自由以下项组成的组：C1-6烷氧基、卤素、-OH、-C(O)NRdRe和-C(O)(C1-6烷基)。
在一些实施方案中，LA为
Figure BDA0003983088010000231
其中LA2为任选地被1个Rb取代的2-19元杂亚烷基；下标n1为1-4；下标n2为0-3；并且LA2进一步任选地被PEG2至PEG24范围内的PEG单元取代。在一些实施方案中，Rd为氢。在一些实施方案中，Rd为C1-3烷基。在一些实施方案中，Rd为甲基。
在一些实施方案中，LA为
Figure BDA0003983088010000232
在一些实施方案中，LA为
Figure BDA0003983088010000233
在一些实施方案中，LA2为任选地被Ra取代并且进一步任选地被PEG2至PEG24范围内的PEG单元取代的2-12元杂亚烷基。在一些实施方案中，下标n1为1。在一些实施方案中，下标n1为2。在一些实施方案中，下标n1为3。在一些实施方案中，下标n1为4。在一些实施方案中，下标n2为0。在一些实施方案中，下标n2为1。在一些实施方案中，下标n2为2。在一些实施方案中，下标n2为3。
在一些实施方案中，LA2是未取代的。在一些实施方案中，LA2被1个Ra取代，如本文所述。在一些实施方案中，LA2被PEG8至PEG24范围内的PEG单元取代。在一些实施方案中，LA2被1个Ra取代，如本文所述被PEG8至PEG24范围内的PEG单元取代。在一些实施方案中，LA为被–(CH2)NH2或–(CH2CH2)NH2取代的C1-C10亚烷基。在一些实施方案中，LA为被–(CH2)NH2或–(CH2CH2)NH2取代的C1-C6亚烷基。在一些实施方案中，LA为被氧代(C＝O)取代；并且被–(CH2)NH2和–(CH2CH2)NH2中的一者取代的C1-C10亚烷基。在一些实施方案中，LA为被氧代(C＝O)取代；并且被–(CH2)NH2和–(CH2CH2)NH2中的一者取代的C1-C6亚烷基。在一些实施方案中，LA为被–(CH2)NH2或–(CH2CH2)NH2取代的2-24元杂亚烷基。在一些实施方案中，LA为被–(CH2)NH2或–(CH2CH2)NH2取代的4-12元杂亚烷基。
在一些实施方案中，LA为
Figure BDA0003983088010000241
其中下标n3为1-5。在一些实施方案中，下标n3为1。在一些实施方案中，下标n3为2。在一些实施方案中，下标n3为3。在一些实施方案中，下标n3为4。在一些实施方案中，下标n3为5。
在一些实施方案中，每个Ra独立地选自由以下项组成的组：C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、卤素、-OH、＝O、-C(O)NRdRe、-C(O)(C1-6烷基)、-(C1-6亚烷基)-NRdRe和-C(O)O(C1-6烷基)。在一些实施方案中，Ra之一为-NRdRe，并且另一个Ra独立地选自由以下项组成的组：C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤素、-OH、＝O、-C(O)(C1-6烷基)和-C(O)O(C1-6烷基)。
在一些实施方案中，Ra之一为C1-6卤代烷基。在一些实施方案中，Ra之一为C1-6烷氧基。在一些实施方案中，Ra之一为C1-6卤代烷氧基。在一些实施方案中，Ra之一为卤素。在一些实施方案中，Ra之一为-OH。在一些实施方案中，Ra之一为＝O。在一些实施方案中，Ra之一为C(O)NRdRe。在一些实施方案中，Ra之一为-C(O)(C1-6烷基)。在一些实施方案中，Ra之一为-C(O)O(C1-6烷基)。在一些实施方案中，一个Ra为–NRdRe。在一些实施方案中，一个Ra为-(C1-6亚烷基)-NRdRe。
在一些实施方案中，每个Rb独立地选自由以下项组成的组：C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、卤素、-OH、＝O、-C(O)NRdRe、-C(O)(C1-6烷基)、-(C1-6亚烷基)-NRdRe和-C(O)O(C1-6烷基)。在一些实施方案中，一个Rb为NRdRe，并且另一个Rb独立地选自由以下项组成的组：C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、卤素、-OH、＝O、-C(O)NRdRe、-C(O)(C1-6烷基)和-C(O)O(C1-6烷基)。在一些实施方案中，Rb之一为C1-6卤代烷基。在一些实施方案中，Rb之一为C1-6烷氧基。在一些实施方案中，Rb之一为C1-6卤代烷氧基。在一些实施方案中，Rb之一为卤素。在一些实施方案中，Rb之一为-OH。在一些实施方案中，Rb之一为＝O。在一些实施方案中，Rb之一为C(O)NRdRe。在一些实施方案中，Rb之一为-C(O)(C1-6烷基)。在一些实施方案中，Rb之一为-C(O)O(C1-6烷基)。在一些实施方案中，一个Rb为–NRdRe。在一些实施方案中，一个Rb为-(C1-6亚烷基)-NRdRe。
在式A和D的一些实施方案中，2-24元杂亚烷基任选地被1-2个独立选择的Rb取代，所述Rb在生理pH下不带电荷。在式A和D的一些实施方案中，2-24元杂亚烷基任选地被2个Rb取代；其中一个Rb带正电荷，并且另一个Rb带负电荷。
在一些实施方案中，Rd和Re独立地选自氢和C1-C3烷基。在一些实施方案中，Rd和Re是相同的。在一些实施方案中，Rd和Re是不同的。在一些实施方案中，Rd和Re中的一者为氢，并且Rd和Re中的另一者为C1-C3烷基。在一些实施方案中，Rd和Re均为氢。在一些实施方案中，Rd和Re独立地为C1-C3烷基。在一些实施方案中，Rd和Re均为甲基。在一些实施方案中，Rd和Re与两者所连接的氮原子一起形成5-6元杂环基。
在一些实施方案中，式A-K中的任一者的杂亚烷基基团在生理pH下不带电荷。
在一些实施方案中，环B为未稠合的8-12元杂环基。在一些实施方案中，环B为未稠合的8-10元杂环基。在一些实施方案中，环B为未稠合的8元杂环基环。在一些实施方案中，环B在环中含有一个碳-碳双键和一个氮原子。在一些实施方案中，环B为(Z)-1,2,3,4,7,8-六氢吖辛因。
在一些实施方案中，环B为稠合至C6-10芳基或5-6元杂芳基环的8-12元杂环基。在一些实施方案中，环B为稠合至两个C6-10芳基环或两个5-6元杂芳基环的8-12元杂环基。在一些实施方案中，环B为稠合至C6-10芳基或5-6元杂芳基环的8-10元杂环基。在一些实施方案中，环B为稠合至两个C6-10芳基环或两个5-6元杂芳基环的8-10元杂环基。在一些实施方案中，环B稠合至一个或两个C6-10芳基环。在一些实施方案中，环B稠合至一个或两个5-6元杂芳基环。在一些实施方案中，环B为稠合至一个或两个苯环的8-12元杂环基。在一些实施方案中，环B为稠合至一个或两个苯环的8-10元杂环基。在一些实施方案中，环B为稠合至一个或两个苯环的8元杂环基。在一些实施方案中，环B在环中具有一个氮原子。在一些实施方案中，环B在生理pH下不具有带电的环杂原子。
在一些实施方案中，环B是未取代的。在一些实施方案中，环B被1-3个独立选择的Rc取代。在一些实施方案中，环B被一个Rc取代。在一些实施方案中，环B被两个独立选择的Rc取代。在一些实施方案中，环B被三个独立选择的Rc取代。
在一些实施方案中，环B在生理pH下不带电荷。
在一些实施方案中，每个Rc独立地选自由以下项组成的组：C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、卤素、-OH、＝O、-C(O)NRdRe、-C(O)(C1-6烷基)、-C(O)O(C1-6烷基)。在一些实施方案中，每个Rc为C1-6烷基。在一些实施方案中，一个或两个Rc为C1-6卤代烷基。在一些实施方案中，1-3个Rc独立地为C1-6烷氧基。在一些实施方案中，Rc之一为C1-6卤代烷氧基。在一些实施方案中，每个Rc独立地为卤素。在一些实施方案中，1-3个Rc为-OH。在一些实施方案中，Rc之一为＝O。在一些实施方案中，Rc之一为C(O)NRdRe。在一些实施方案中，Rc之一为-C(O)(C1-6烷基)。在一些实施方案中，Rc之一为-C(O)O(C1-6烷基)。
在一些实施方案中，每个Ra、Rb和Rc独立地选自由以下项组成的组：C1-6烷基、C1-6卤代烷氧基、C1-6烷氧基、卤素、-OH、-NRdRe、-(C1-6亚烷基)-NRdRe、-C(O)NRdRe和-C(O)(C1-6烷基)。在一些实施方案中，每个Ra、Rb和Rc独立地选自由以下项组成的组：C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤素、-(C1-6亚烷基)-NRdRe、-OH和-NRdRe。在一些实施方案中，Ra、Rb和Rc在式A和D中不作为-(C1-6亚烷基)-NRdRe或-NRdRe存在(例如，使得L1在生理pH下保持不带电)。在一些实施方案中，Ra或Rb在式B和C中为-NRdRe(例如，使得去质子化形式的羧酸和-NRdRe在生理pH下为质子化形式)。在一些实施方案中，Ra或Rb在式B和C中为-(C1-6亚烷基)-NRdRe(例如，使得去质子化形式的羧酸和-(C1-6亚烷基)-NRdRe在生理pH下为质子化形式)。
在一些实施方案中，环B为：
Figure BDA0003983088010000271
在一些实施方案中，S*-L1选自由式A1、A2、A3、B1、B2、B3、C1、C2和C3组成的组：
Figure BDA0003983088010000281
其中Rd为氢或C1-3烷基，并且下标n1为1或2；下标n2为0、1或2。
在一些实施方案中，S*-L1为
Figure BDA0003983088010000282
在一些实施方案中，S*-L1为
Figure BDA0003983088010000283
在一些实施方案中，S*-L1为
Figure BDA0003983088010000284
在一些实施方案中，S*-L1为
Figure BDA0003983088010000285
在一些实施方案中，S*-L1为
Figure BDA0003983088010000286
在一些实施方案中，S*-L1为
Figure BDA0003983088010000291
在一些实施方案中，S*-L1为
Figure BDA0003983088010000292
在一些实施方案中，S*-L1为
Figure BDA0003983088010000293
在一些实施方案中，S*-L1为
Figure BDA0003983088010000294
在S*-L1的一些实施方案中，下标n1为1或2，或者下标n2为0、1或2；并且S*为来自抗体的半胱氨酸残基的硫原子。在一些实施方案中，下标n1为1。在一些实施方案中，下标n2为1。在一些实施方案中，下标n2为2。在一些实施方案中，下标n1为2。
在一些实施方案中，S*-L1为
Figure BDA0003983088010000295
在一些实施方案中，S*-L1为
Figure BDA0003983088010000296
在一些实施方案中，S*-L1为
Figure BDA0003983088010000297
在一些实施方案中，S*-L1为
Figure BDA0003983088010000298
在一些实施方案中，S*-L1为
Figure BDA0003983088010000301
在一些实施方案中，S*-L1为
Figure BDA0003983088010000302
在一些实施方案中，S*-L1为
Figure BDA0003983088010000303
在一些实施方案中，S*-L1为
Figure BDA0003983088010000304
在一些实施方案中，S*-L1为
Figure BDA0003983088010000305
在S*-L1的一些实施方案中，下标n1为1或2，或者下标n2为0、1或2；并且S*为来自抗体的赖氨酸残基的∈-氮原子。在一些实施方案中，下标n1为1。在一些实施方案中，下标n2为1。在一些实施方案中，下标n2为2。在一些实施方案中，下标n1为2。
在一些实施方案中，Rd为氢或C1-3烷基。在一些实施方案中，Rd为氢。在一些实施方案中，Rd为C1-3烷基。在一些实施方案中，Rd为甲基。
在一些实施方案中，*S-L1为：
Figure BDA0003983088010000306
在一些实施方案中，*S-L1为
Figure BDA0003983088010000311
在一些实施方案中，*S-L1为
Figure BDA0003983088010000312
在一些实施方案中，*S-L1为
Figure BDA0003983088010000313
在一些实施方案中，S*-L1为：
Figure BDA0003983088010000314
Figure BDA0003983088010000315
在一些实施方案中，S*-L1为：
Figure BDA0003983088010000316
在一些实施方案中，S*-L1为：
Figure BDA0003983088010000317
在一些实施方案中，S*-L1为：
Figure BDA0003983088010000318
在一些实施方案中，S*-L1为：
Figure BDA0003983088010000319
在一些实施方案中，S*-L1为：
Figure BDA00039830880100003110
在一些实施方案中，S*-L1为：
Figure BDA0003983088010000321
在一些实施方案中，S*-L1为：
Figure BDA0003983088010000322
在一些实施方案中，S*-L1为：
Figure BDA0003983088010000323
在一些实施方案中，S*-L1为：
Figure BDA0003983088010000324
在一些实施方案中，S*-L1为：
Figure BDA0003983088010000325
在一些实施方案中，S*-L1为：
Figure BDA0003983088010000326
在一些实施方案中，S*-L1为：
Figure BDA0003983088010000327
在一些实施方案中，S*-L1为：
Figure BDA0003983088010000328
在一些实施方案中，S*-L1为：
Figure BDA0003983088010000331
在一些实施方案中，*S-L1选自由以下项组成的组：
Figure BDA0003983088010000332
。
在一些实施方案中，*S-L1为
Figure BDA0003983088010000333
在一些实施方案中，*S-L1为
Figure BDA0003983088010000334
在一些实施方案中，*S-L1为
Figure BDA0003983088010000335
在一些实施方案中，*S-L1为
Figure BDA0003983088010000341
在一些实施方案中，*S-L1为
Figure BDA0003983088010000342
在一些实施方案中，*S-L1为
Figure BDA0003983088010000343
在一些实施方案中，*S-L1包含RP，其中RP通过在生理条件下使氮原子保持为不带电荷的形式的官能团(诸如由-C(＝O)-组成的官能团)连接至氮原子，其中羰基碳原子键合至该氮原子。在一些实施方案中，*S-L1包含RP，其中RP经由酰胺键连接至氮原子。
在一些实施方案中，S*为来自抗体的半胱氨酸残基的硫原子。在一些实施方案中，S*为来自抗体的赖氨酸残基的∈-氮原子。
在一些实施方案中，Rp为-C(＝O)-(C1-3亚烷基)-，或者为PEG2至PEG72范围内的PEG单元。在一些实施方案中，Rp为-C(＝O)-(C1-3亚烷基)-，或者为PEG8至PEG24或PEG12至PEG36范围内的PEG单元，其通过PEG单元的羰基官能团的碳原子共价连接至氮原子。在一些实施方案中，PEG单元的乙二醇链通过-C(＝O)-(C1-3亚烷基)-基团连接至氮原子。
在一些实施方案中，*S-L1为：
Figure BDA0003983088010000351
在一些实施方案中，S*为三唑部分。
在一些实施方案中，*S-L1为：
Figure BDA0003983088010000352
在一些实施方案中，下标x为0。在一些实施方案中，下标x为1、2、3或4。在一些实施方案中，下标x为1。在一些实施方案中，下标x为2。在一些实施方案中，下标x为3。在一些实施方案中，下标x为4。
本文所述的ADC中的多效物(M)用作支化组分(例如，三官能连接基团)。例如，当下标x＝1时，初始多效物提供与第一接头(L1)的共价连接以及与两个第二接头(L2)基团(当存在时)的共价连接。又如，当下标x＝2时，初始多效物提供与L1的共价连接以及与两个后续多效物(M)基团的共价连接，所述两个后续多效物(M)基团中的每一者共价连接至两个L2基团(当存在时)。在一些实施方案中，多效物含有单一官能团诸如单一叔胺，该单一官能团提供与L1的共价连接以及与两个L2基团(当存在时)的共价连接。在一些实施方案中，多效物含有两个或三个提供与L1和两个L2基团(当存在时)的共价连接的官能团。例如，在一些实施方案中，第一官能团诸如硫醇、羟基、胺或另一亲核基团提供与L1的共价连接，而与L2基团(当存在时)中任一者或两者的共价连接由第二官能团诸如硫醇、羟基、胺或另一亲核基团提供。在其中多效物含有两个或更多个用于共价连接至L1和每个L2的官能团的实施方案中，所述两个或更多个官能团通过C1-8亚烷基或2-8元杂亚烷基连接。在一些实施方案中，存在任一个或两个L2。
在一些实施方案中，多效物由以下结构表示：
Figure BDA0003983088010000361
其中，右边的波浪线指示与两个L2基团的共价连接，左边的波浪线指示与L1的共价连接。在一些实施方案中，与氮原子的共价连接使得这些氮原子在生理pH下不带电荷。
在一些实施方案中，多效物是硫醇多效物，其中硫醇多效物在单个位点处共价连接(如“a”所示)，是闭环的或开环的以形成两个硫醇(b)，所述两个硫醇充当接头或药物-接头部分的两个进一步连接的位点(如在“c”中)。硫醇多效物的示例包括但不限于以下所示的结构。
Figure BDA0003983088010000371
在一些实施方案中，与氮原子相邻的波浪线表示通过在生理pH下不带电荷的官能团与ADC共价连接的位点。在一些实施方案中，官能团包括-C(＝O)-，其中碳原子键合至与波浪线相邻的氮原子(即，在上述“a”位置处)。
在一些实施方案中，硫醇多效物基于具有五元、六元、七元或八元碳环的可商购获得的组分，其中两个相邻环顶点被形成硫的1,2-二硫杂环戊烷、1,2-二硫杂环己烷、1,2-二硫杂环庚烷和1,2-二硫杂环辛烷替代。五元环和六元环通常将在环外具有适用于本文所述的合成化学的官能团。在一些实施方案中，较大的七元环和八元环具有适用于本文所述的合成化学的环外官能团，并且在其他实施方案中，另一环顶点被例如氮(胺)替代，所述氮有时充当所提供的连接化学中的官能团。
硫醇多效物(呈二硫化物形式)的其他示例包括：
Figure BDA0003983088010000372
Figure BDA0003983088010000381
以二硫化物形式存在于上述硫醇多效物中的官能团都是亲核基团；然而，本领域的技术人员将认识到，在不脱离本公开的范围的情况下，可以改变用于共价连接L1、L2或后续多效物基团的亲核基团的选择。
呈二硫化物形式的硫醇多效物的其他非限制性示例包括以下：
Figure BDA0003983088010000382
Figure BDA0003983088010000391
存在于如本文所述的某些硫醇多效物中的羧酸基团可被活化以将亲核基团共价连接至L1、L2或后续多效物基团；然而，本领域的技术人员将认识到，在不脱离本公开的范围的情况下，可以改变用于该后续共价连接的亲核基团的选择。因此，显而易见的是，亲核基团或亲电子基团的选择取决于提供与L1和L2中的多效物的共价连接的官能团的化学特性。
在一些实施方案中，M具有式Ma的结构：
Figure BDA0003983088010000392
其中波浪线表示Ma与L1的共价连接；
每个*表示Ma与-L2-D的共价连接；
Y1选自由以下项组成的组：键、-S-、-O-和-NH-；
Y2选自由以下项组成的组：-CH-和-N-；
LB不存在或者为任选地被选自由以下项组成的组的基团中断的C1-6亚烷基：-O-、-C(＝O)NH-、-NHC(＝O)-、-C(＝O)O-、-O(C＝O)-、-NH-和-N(C1-3烷基)-；
X1和X2各自独立地为-S-、-O-或-NH-；并且
下标m1和m2各自独立地为1-4。
在一些实施方案中，当Y1为-NH-或者Y2、X1或X2为-N-时，连接至M的氮原子的键是通过在生理pH下使该原子保持为不带电荷的形式的官能团实现的，所述官能团包括由-C(＝O)-组成的官能团，其中羰基碳原子键合至该氮原子。在一些实施方案中，当Y1为-NH-或者Y2、X1或X2为-N-时，连接至M的氮原子的键是经由酰胺键实现的。
在一些实施方案中，Y1为键。在一些实施方案中，Y1为-S-。在一些实施方案中，Y1为-O-。在一些实施方案中，Y1为-NH-。在一些实施方案中，Y2为-CH-。在一些实施方案中，Y2为-N-。在一些实施方案中，X1和X2均为-NH-。
在一些实施方案中，LB存在或不存在，Y1为键，并且Y2为-CH-。在一些实施方案中，LB存在或不存在，Y1为键，并且Y2为-N-。在一些实施方案中，LB存在或不存在，Y1为-S-，并且Y2为-CH-。在一些实施方案中，LB存在，Y1为-S-，并且Y2为-N-。在一些实施方案中，LB存在或不存在，Y1为-O-，并且Y2为-CH-。在一些实施方案中，LB存在，Y1为-O-，并且Y2为-N-。在一些实施方案中，LB存在或不存在，Y1为-NH-，并且Y2为-CH-。在一些实施方案中，LB存在，Y1为-NH-，并且Y2为-N-。
在一些实施方案中，X1为-S-。在一些实施方案中，X1为-O-。在一些实施方案中，X1为-NH-。在一些实施方案中，X2为-S-。在一些实施方案中，X2为-O-。在一些实施方案中，X2为-NH-。在一些实施方案中，X1和X2是相同的。在一些实施方案中，X1和X2是不同的。
在一些实施方案中，下标m1为1。在一些实施方案中，下标m1为2。在一些实施方案中，下标m1为3。在一些实施方案中，下标m1为4。在一些实施方案中，下标m2为1。在一些实施方案中，下标m2为2。在一些实施方案中，下标m2为3。在一些实施方案中，下标m2为4。在一些实施方案中，下标m1和m2相等。在一些实施方案中，下标m1和m2相等并且在2-4的范围内。在一些实施方案中，下标m1和m2各自为2。
在一些实施方案中，Y1为-NH-；LB存在；Y2为CH；并且X1和X2各自为-S-。在一些实施方案中，Y1为键；LB不存在；Y2为N；并且X1和X2各自为-S-。在一些实施方案中，Y1为键；LB不存在；Y2为-N-；并且X1和X2各自为-NH-。
在一些实施方案中，LB不存在。在一些实施方案中，当LB存在时，LB为任选地被选自由以下项组成的组的基团中断的C1-6亚烷基：-O-、-C(＝O)NH-、-NHC(＝O)-、-C(＝O)O-、-O(C＝O)-、-NH-和-N(C1-3烷基)-。在一些实施方案中，当LB存在时，LB为任选地被-NH-或-N(C1-3烷基)-中断的C1-6亚烷基。在一些实施方案中，Ma被能够在生理pH下去质子化的官能团中断，使得Ma的净电荷在如此中断时保持为零。在一些实施方案中，LB为C1-6亚烷基、C1-4亚烷基或C1-2亚烷基。在一些实施方案中，LB为被选自由以下项组成的组的基团中断的C1-6亚烷基：-O-、-C(＝O)NH-、-NHC(＝O)-、-C(＝O)O-、-O(C＝O)-、-NH-和-N(C1-3烷基)-。在一些实施方案中，LB为被-NH-或-N(C1-3烷基)-中断的C1-6亚烷基，其中LB经由能够在生理pH下去质子化的官能团连接，使得LB的净电荷为零。在一些实施方案中，LB的C1-6亚烷基被-O-中断。在一些实施方案中，LB的C1-6亚烷基被-NH-中断。在一些实施方案中，LB被-N(C1-3烷基)-中断。在一些实施方案中，LB的C1-6亚烷基被-C(＝O)NH-中断。在一些实施方案中，LB的C1-6亚烷基被-NHC(＝O)-中断。在一些实施方案中，LB的C1-6亚烷基被-C(＝O)O-中断。在一些实施方案中，LB的C1-6亚烷基被-O(C＝O)-中断。
在一些实施方案中，M选自由以下项组成的组：
Figure BDA0003983088010000421
其中波浪线表示M与L1的共价连接；并且
其中每个*表示M与-(L2-D)的共价连接。
在一些实施方案中，M为
Figure BDA0003983088010000422
在一些实施方案中，M为
Figure BDA0003983088010000423
本文所公开的多效物中连接至氮原子的波浪线表示式(I)内通过官能团共价连接的位点，所述官能团在生理pH下使这些原子保持为不带电荷的形式并且包括由-C(＝O)-组成的官能团，其中羰基碳原子键合至该氮原子。
在一些实施方案中，在L1连接至Ab并且M连接至L2(或D，当L2不存在时)之前，L1-M包含
Figure BDA0003983088010000424
Figure BDA0003983088010000431
在一些实施方案中，下标x为2-4；并且
(M)x为–M1-(M2)x-1，其中M1和每个M2为独立选择的多效物，如本文所述。在一些实施方案中，下标x为2；并且(M)x为–M1-M2。在一些实施方案中，下标x为3；并且(M)x为–M1-(M2)2。
在一些实施方案中，M1具有式M1a的结构：
Figure BDA0003983088010000441
其中波浪线表示M1a与L1的共价连接；
每个*表示如本文所定义的M1a与M2或M2a的共价连接；
Y1选自由以下项组成的组：键、-S-、-O-和-NH-；
Y2选自由以下项组成的组：-CH-和-N-；
LB不存在或者为任选地被选自由以下项组成的组的基团中断的C1-6亚烷基：-O-、-C(＝O)NH-、-NHC(＝O)-、-C(＝O)O-、-O(C＝O)-、-NH-和-N(C1-3烷基)-；
X1和X2各自独立地为-S-、-O-或-NH-；并且
m1和m2各自独立地为1-4。
在一些实施方案中，当Y1、X1或X2为-NH-或者Y2为-N-时，连接至M1a的氮原子的键是通过在生理条件下使该原子保持为不带电荷的形式的官能团实现的，所述官能团包括由-C(＝O)-组成的官能团，其中羰基碳原子键合至该氮原子。在一些实施方案中，当Y1、X1或X2为-NH-或者Y2为-N-时，连接至M1a的氮原子的键是经由酰胺键实现的。
在一些实施方案中，Y1为键。在一些实施方案中，Y1为-S-。在一些实施方案中，Y1为-O-。在一些实施方案中，Y1为-NH-。在一些实施方案中，Y2为-CH-。在一些实施方案中，Y2为-N-。X1和X2各自独立地为-S-、-O-或-NH-。在一些实施方案中，X1和X2均为-NH-。
在一些实施方案中，LB存在或不存在，Y1为键，并且Y2为-CH-。在一些实施方案中，LB存在或不存在，Y1为键，并且Y2为-N-。在一些实施方案中，LB存在或不存在，Y1为-S-，并且Y2为-CH-。在一些实施方案中，LB存在，Y1为-S-，并且Y2为-N-。在一些实施方案中，LB存在或不存在，Y1为-O-，并且Y2为-CH-。在一些实施方案中，LB存在，Y1为-O-，并且Y2为-N-。在一些实施方案中，LB存在或不存在，Y1为-NH-，并且Y2为-CH-。在一些实施方案中，LB存在，Y1为-NH-，并且Y2为-N-。
在一些实施方案中，X1为-S-。在一些实施方案中，X1为-O-。在一些实施方案中，X1为-NH-。在一些实施方案中，X2为-S-。在一些实施方案中，X2为-O-。在一些实施方案中，X2为-NH-。在一些实施方案中，X1和X2是相同的。在一些实施方案中，X1和X2是不同的。
在一些实施方案中，下标m1为1。在一些实施方案中，下标m1为2。在一些实施方案中，下标m1为3。在一些实施方案中，下标m1为4。在一些实施方案中，下标m2为1。在一些实施方案中，下标m2为2。在一些实施方案中，下标m2为3。在一些实施方案中，下标m2为4。在一些实施方案中，下标m1和m2相等并且在2-4的范围内。在一些实施方案中，下标m1和m2各自为2。
在一些实施方案中，Y1为-NH-；LB存在；Y2为CH；并且X1和X2各自为-S-。在一些实施方案中，Y1为键；LB不存在；Y2为-N-；并且X1和X2各自为-S-。在一些实施方案中，Y1为键；LB不存在；Y2为-N-；并且X1和X2各自为-NH-。
在一些实施方案中，LB不存在。在一些实施方案中，当LB存在时，LB为任选地被选自由以下项组成的组的基团中断的C1-6亚烷基：-O-、-C(＝O)NH-、-NHC(＝O)-、-C(＝O)O-、-O(C＝O)-、-NH-和-N(C1-3烷基)-。在一些实施方案中，M1a被能够在生理pH下去质子化的官能团中断，使得Ma的净电荷在如此中断时保持为零。在一些实施方案中，LB为C1-6亚烷基、C1-4亚烷基或C1-2亚烷基。在一些实施方案中，LB为被选自由以下项组成的组的基团中断的C1-6亚烷基：-O-、-C(＝O)NH-、-NHC(＝O)-、-C(＝O)O-、-O(C＝O)-、-NH-和-N(C1-3烷基)-。在一些实施方案中，LB为被-NH-或-N(C1-3烷基)-中断的C1-6亚烷基，其中LB经由能够在生理pH下去质子化的官能团连接，使得LB的净电荷为零。在一些实施方案中，LB被-O-中断。在一些实施方案中，LB被-NH-中断。在一些实施方案中，LB被-N(C1-3烷基)-中断。在一些实施方案中，LB被-C(＝O)NH-中断。在一些实施方案中，LB被-NHC(＝O)-中断。在一些实施方案中，LB被-C(＝O)O-中断。在一些实施方案中，LB被-O(C＝O)-中断。
在一些实施方案中，M1选自由以下项组成的组：
Figure BDA0003983088010000461
其中波浪线表示M1与L1的共价连接；并且
其中每个*表示M1与M2的共价连接。
在一些实施方案中，M1为
Figure BDA0003983088010000462
在一些实施方案中，M1为
Figure BDA0003983088010000463
在M1的一些实施方案中，来自式(I)内的M1的氮原子的每个共价连接位点是通过在生理pH下使氮原子保持为不带电荷的形式的官能团实现的，所述官能团包括由-C(＝O)-组成的官能团，其中羰基碳原子键合至该氮原子。
在一些实施方案中，每个M2独立地具有M2a的结构：
Figure BDA0003983088010000471
其中波浪线表示M2a与M1/M1a或与另一个M2/M2a的共价连接；
每个*表示M2a与L2-D或另一个M2/M2a的共价连接；
Y1为键、-S-、-O-或-NH-；
Y2为-CH-或-N-；
Y3为提供M1/M1a与M2a的LC(当存在时)或Y1(当LC不存在时)的共价连接的任选基团；
LB不存在或者为任选地被选自由以下项组成的组的基团中断的C1-6亚烷基：-O-、-C(＝O)NH-、-NHC(＝O)-、-C(＝O)O-、-O(C＝O)-、-NH-和-N(C1-3烷基)-；
X1和X2各自独立地为-S-、-O-或-NH-；
LC为C1-10亚烷基或C2-10杂亚烷基，其中任一者任选地被1-3个取代基取代，所述取代基各自独立地选自-NRdRe、-(C1-6亚烷基)-NRdRe、-CO2H和氧代基；并且
下标m1和m2各自独立地为1-4。
在一些实施方案中，当下标x为2(即，存在两个多效物M1/M1a和M2/M2a)时，波浪线表示M2/M2a与M1/M1a的共价连接。在一些实施方案中，当下标x为3(即，存在三个多效物)时，波浪键表示M2/M2a与M1/M1a的共价连接或第一M2/M2a与第二M2/M2a的共价连接。
在M2a的一些实施方案中，Y1为键。在M2a的一些实施方案中，Y1为-S-。在M2a的一些实施方案中，Y1为-O-。在M2a的一些实施方案中，Y1为-NH-。在M2a的一些实施方案中，Y2为-CH-。在一些实施方案中，Y2为-N-。在一些实施方案中，当M2a在生理pH下带电时，则M2a具有净偶数个过量的正电荷或负电荷。在一些实施方案中，当M2a在生理pH下带电时，M2a具有净奇数个过量的正电荷或负电荷。
在一些实施方案中，LB存在或不存在，Y1为键，并且Y2为-CH-。在一些实施方案中，LB存在或不存在，Y1为键，并且Y2为-N-。在一些实施方案中，LB存在或不存在，Y1为-S-，并且Y2为-CH-。在一些实施方案中，LB存在，Y1为-S-，并且Y2为-N-。在一些实施方案中，LB存在或不存在，Y1为-O-，并且Y2为-CH-。在一些实施方案中，LB存在，Y1为-O-，并且Y2为-N-。在一些实施方案中，LB存在或不存在，Y1为-NH-，并且Y2为-CH-。在一些实施方案中，LB存在，Y1为-NH-，并且Y2为-N-。
在一些实施方案中，X1为-S-。在一些实施方案中，X1为-O-。在M2a的一些实施方案中，X1为-NH-。在M2a的一些实施方案中，X2为-S-。在M2a的一些实施方案中，X2为-O-。在M2a的一些实施方案中，X2为-NH-。在M2a的一些实施方案中，X1和X2是相同的。在M2a的一些实施方案中，X1和X2是不同的。
在一些实施方案中，下标m1为1。在一些实施方案中，下标m1为2。在一些实施方案中，m1为3。在一些实施方案中，下标m1为4。在一些实施方案中，m2为1。在一些实施方案中，下标m2为2。在一些实施方案中，下标m2为3。在一些实施方案中，下标m2为4。
在一些实施方案中，LB不存在。在一些实施方案中，LB为被选自由以下项组成的组的基团中断的C1-6亚烷基：-O-、-C(＝O)NH-、-NHC(＝O)-、-C(＝O)O-、-O(C＝O)-、-NH-和-N(C1-3烷基)-。在一些实施方案中，LB为被-NH-或-N(C1-3烷基)-中断的C1-6亚烷基，其中LB经由能够在生理pH下去质子化的官能团连接，使得LB的净电荷为零。在M2a的一些实施方案中，LB以C1-6亚烷基、C1-4亚烷基或C1-2亚烷基存在。在一些实施方案中，LB为被选自由以下项组成的组的基团中断的C1-6亚烷基：-O-、-C(＝O)NH-、-NHC(＝O)-、-C(＝O)O-、-O(C＝O)-、-NH-和-N(C1-3烷基)-。在一些实施方案中，LB为被-NH-或-N(C1-3烷基)-中断的C1-6亚烷基，其中LB经由能够在生理pH下去质子化的官能团连接，使得LB的净电荷为零。在一些实施方案中，LB的C1-6亚烷基被-O-中断。在一些实施方案中，LB的C1-6亚烷基被-NH-中断。在一些实施方案中，LB的C1-6亚烷基被-N(C1-3烷基)-中断。在一些实施方案中，LB的C1-6亚烷基被-C(＝O)NH-中断。在一些实施方案中，LB被-NHC(＝O)-中断。在一些实施方案中，LB的C1-6亚烷基被-C(＝O)O-中断。在一些实施方案中，LB的C1-6亚烷基被-O(C＝O)-中断。
在一些实施方案中，LC为C1-10亚烷基或C2-10杂亚烷基，它们各自被-(C1-6亚烷基)-NRdRe取代。在一些实施方案中，LC为C1-10亚烷基或C2-10杂亚烷基，它们各自被-(C1-3亚烷基)-NRdRe取代。在一些实施方案中，Rd和Re均为氢。
在一些实施方案中，Y3以羰基基团(-C(＝O-))、琥珀酰亚胺或水解琥珀酰亚胺存在。
在一些实施方案中，Y3为-C(＝O)-。在一些实施方案中，Y3为琥珀酰亚胺。在一些实施方案中，Y3为水解琥珀酰亚胺。
在一些实施方案中，Y3选自由以下项组成的组：
Figure BDA0003983088010000491
其中*表示与LC的共价连接；并且波浪线表示与M1/M1a或另一个M2/M2a的共价连接。
在一些实施方案中，Y3-LC选自由以下项组成的组：
Figure BDA0003983088010000501
其中*表示与Y1的共价连接；并且波浪线表示与M1或另一个M2的共价连接。
在一些实施方案中，Y3-LC选自由以下项组成的组：
Figure BDA0003983088010000502
其中氨基基团由酸不稳定性保护基团保护。示例性酸不稳定性保护基团包括但不限于叔丁氧基羰基(Boc)、三苯基甲基(三苯甲基)和亚苄基。
在一些实施方案中，Y1为键；LB不存在；Y2为-N-；并且X1和X2各自为-NH-。在一些实施方案中，当Y1、X1或X2为-NH-或者Y2为-N-时，连接至M2a的氮原子的键是通过在生理pH下使该原子保持为不带电荷的形式的官能团实现的，所述官能团包括由-C(＝O)-组成的官能团，其中羰基碳原子键合至该氮原子。在一些实施方案中，当Y1、X1或X2为-NH-或者Y2为-N-时，连接至M2a的氮原子的键是经由酰胺键实现的。
在一些实施方案中，M2选自由以下项组成的组：
Figure BDA0003983088010000511
其中每个*表示与L2-D或另一个M2/M2a的共价连接；并且波浪键表示与M1/M1a或另一个M2/M2a的共价连接。例如，当L2不存在时，每个*表示与D的共价连接。当下标x为2(即，存在两个多效物M1/M1a和M2/M2a)时，波浪键表示与M1/M1a的共价连接。
在一些实施方案中，M2选自由以下项组成的组：
Figure BDA0003983088010000512
并且在一些实施方案中，M2选自由以下项组成的组：
Figure BDA0003983088010000521
其中-CH2NH2部分的氮原子由酸不稳定性保护基团保护；并且
其中每个*表示与L2-D或另一个M2/M2a的共价连接；并且波浪键表示与M1/M1a或另一个M2/M2a的共价连接。例如，当L2不存在时，每个*表示与D的共价连接。当下标x为2(即，存在两个多效物M1/M1a和M2/M2a)时，波浪键表示与M1/M1a的共价连接。
在一些实施方案中，下标x为2；并且(M)x为：
Figure BDA0003983088010000522
其中每个*表示与L2-D的共价连接；波浪线表示与L1的共价连接；并且每个琥珀酰亚胺环任选地被水解。当L2不存在时，每个*表示与D的共价连接。
在一些实施方案中，当(M)x包含-CH2NH2时，该部分的氮原子被质子化并且琥珀酰亚胺环在生理pH下呈水解形式。在一些实施方案中，(M)x包含-CH2NH2。在一些实施方案中，(M)x包含-CH2NPG1PG2，其中PG1为酸不稳定性氮保护基团并且PG2为氢；或者PG1和PG2一起形成酸不稳定性氮保护基团。在一些实施方案中，一个琥珀酰亚胺环被水解，而另一个琥珀酰亚胺环未被水解。
在一些实施方案中，下标x为3；并且(M)x为：
Figure BDA0003983088010000531
其中每个*表示与L2-D的共价连接；并且每个琥珀酰亚胺环任选地如先前针对Mx所述水解，其中下标x为2。当L2不存在时，每个*表示与D的共价连接。
在一些实施方案中，包含-CH2NH2和琥珀酰亚胺环的(M)x的每个M具有呈水解形式的琥珀酰亚胺环。在一些实施方案中，没有琥珀酰亚胺环为水解形式。例如，当Mx存在时，其中每个M包含琥珀酰亚胺环和-CH2NH2部分，该部分具有由酸不稳定性保护基团保护的其氮原子。在一些实施方案中，一个琥珀酰亚胺环被水解，而其他琥珀酰亚胺环未被水解。在一些实施方案中，两个琥珀酰亚胺环被水解，而其他琥珀酰亚胺环未被水解。在一些实施方案中，三个琥珀酰亚胺环被水解，而另一个琥珀酰亚胺环未被水解。
在一些实施方案中，x为0，并且多效物(M)不存在。
在一些实施方案中，L2具有式–(Q)q-(A)a-(W)w-(Y)y，其中：
Q为琥珀酰亚胺或水解琥珀酰亚胺；
下标q为0或1；
A为任选地被1-3个Ra1取代的C2-20亚烷基；或任选地被1-3个Rb1取代的2至40元杂亚烷基；
每个Ra1独立地选自由以下项组成的组：C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、卤素、-OH、＝O、-NRd1Re1、-(C1-6亚烷基)-NRd1Re1、-C(＝O)NRd1Re1-C(＝O)(C1-6烷基)和-C(＝O)O(C1-6烷基)；
每个Rb1独立地选自由以下项组成的组：C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、卤素、-OH、-NRd1Re1、-(C1-6亚烷基)-NRd1Re1、-C(＝O)NRd1Re1、-C(＝O)(C1-6烷基)和-C(＝O)O(C1-6烷基)；
每个Rd1和Re1独立地为氢或C1-3烷基；
下标a为0或1；
W为具有1-12个氨基酸的肽可裂解单元，或者W为具有以下结构的葡糖苷酸单元：
Figure BDA0003983088010000541
其中Su为糖部分；
-OA-表示糖苷键的氧原子；
每个Rg独立地为H、卤素、-CN或-NO2；
下标w为0或1；
W1选自由以下项组成的组：-O-、-NH-、-N(C1-6烷基)-、–[N(C1-6烷基)2]+-和-OC(＝O)-；
波浪线表示与A、Q或L1的共价连接；并且
*表示与Y或D的共价连接；
下标w为0或1；
下标y为0或1；
Y为自降解或非自降解部分；并且
其中每个L2-D在生理pH下具有净零电荷。
如本文所用的“糖部分”是指单价单糖基团，例如吡喃糖或呋喃糖。糖部分可包含半缩醛或羧酸(来自侧基–CH2OH基团的氧化)。在一些实施方案中，糖部分呈β-D构象。在一些实施方案中，糖部分为葡萄糖、葡糖醛酸或甘露糖基团。
在一些实施方案中，L2在生理pH下具有净零电荷。在一些实施方案中，D在生理pH下具有净零电荷。在一些实施方案中，L2在生理pH下不带电荷。在一些实施方案中，D在生理pH下不带电荷。在一些实施方案中，D在生理pH下带中性电荷。
在一些实施方案中，-OA-表示糖苷键的氧原子。在一些实施方案中，糖苷键提供β-葡糖醛酸酶或α-甘露糖苷酶裂解位点。在一些实施方案中，β-葡糖醛酸酶或α-甘露糖苷酶裂解位点能够被人溶酶体β-葡糖醛酸酶或人溶酶体α-甘露糖苷酶裂解。
在一些实施方案中，下标q为0。在一些实施方案中，下标q为1。
在一些实施方案中，Q为琥珀酰亚胺。在一些实施方案中，Q为水解琥珀酰亚胺。应当理解，水解琥珀酰亚胺可以两种区域异构形式存在。以下针对作为琥珀酰亚胺的Q举例说明了这些形式，其中表示来自该水解的区域异构体的结构为式Q’和Q”；其中波浪线a指示与抗体的共价连接点，并且波浪线b指示与A的共价连接点。
Figure BDA0003983088010000551
在一些实施方案中，Q’为
Figure BDA0003983088010000561
在一些实施方案中，Q’为
Figure BDA0003983088010000562
在一些实施方案中，Q”为
Figure BDA0003983088010000563
在一些实施方案中，Q”为
Figure BDA0003983088010000564
在一些实施方案中，下标a为1。在一些实施方案中，下标x≥1；并且下标a为1。在一些实施方案中，下标a为0。
在一些实施方案中，下标q为0，并且下标a为0。
在一些实施方案中，A为任选地被1-3个Ra1取代的C2-20亚烷基。在一些实施方案中，A为任选地被1-3个Ra1取代的C2-10亚烷基。在一些实施方案中，A为任选地被1-3个Ra1取代的C4-10亚烷基。在一些实施方案中，A为被一个Ra1取代的C2-20亚烷基。在一些实施方案中，A为被一个Ra1取代的C2-10亚烷基。在一些实施方案中，A为被一个Ra1取代的C2-10亚烷基。
在一些实施方案中，每个Ra1独立地选自由以下项组成的组：C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、卤素、-OH、＝O、-NRd1Re1、-C(＝O)NRd1Re1、-C(＝O)(C1-6烷基)和-C(＝O)O(C1-6烷基)。在一些实施方案中，每个Ra1为C1-6烷基。在一些实施方案中，每个Ra1为C1-6卤代烷基。在一些实施方案中，每个Ra1为C1-6烷氧基。在一些实施方案中，每个Ra1为C1-6卤代烷氧基。在一些实施方案中，每个Ra1为卤素。在一些实施方案中，每个Ra1为-OH。在一些实施方案中，每个Ra1为＝O。在一些实施方案中，每个Ra1为-NRd1Re1。在一些实施方案中，每个Ra1为-(C1-6亚烷基)-NRd1Re1。在一些实施方案中，每个Ra1为-C(＝O)NRd1Re1。在一些实施方案中，每个Ra1为-C(＝O)(C1-6烷基)。在一些实施方案中，每个Ra1为-C(＝O)O(C1-6烷基)。在一些实施方案中，一个Ra1为–NRd1Re1。在一些实施方案中，一个Ra1为-(C1-6亚烷基)-NRd1Re1。在一些实施方案中，一个Ra1为-(C1-2亚烷基)-NRd1Re1。在一些实施方案中，A为被1或2个各自为＝O的Ra1取代的C2-20亚烷基。
在一些实施方案中，Rd1和Re1独立地为氢或C1-3烷基。在一些实施方案中，Rd1和Re1中的一者为氢，并且Rd1和Re1中的另一者为C1-3烷基。在一些实施方案中，Rd1和Re1均为氢或C1-3烷基。在一些实施方案中，Rd1和Re1均为C1-3烷基。在一些实施方案中，Rd1和Re1均为甲基。
在一些实施方案中，A为C2-20亚烷基。在一些实施方案中，A为C2-10亚烷基。在一些实施方案中，A为C2-10亚烷基。在一些实施方案中，A为C2-6亚烷基。在一些实施方案中，A为C4-10亚烷基。
在一些实施方案中，A为任选地被1-3个Rb1取代的2至40元杂亚烷基。在一些实施方案中，A为任选地被1-3个Rb1取代的2至20元杂亚烷基。在一些实施方案中，A为任选地被1-3个Rb1取代的2至12元杂亚烷基。在一些实施方案中，A为任选地被1-3个Rb1取代的4至12元杂亚烷基。在一些实施方案中，A为任选地被1-3个Rb1取代的4至8元杂亚烷基。在一些实施方案中，A为被一个Rb1取代的2至40元杂亚烷基。在一些实施方案中，A为被一个Rb1取代的2至20元杂亚烷基。在一些实施方案中，A为被一个Rb1取代的2至12元杂亚烷基。在一些实施方案中，A为被一个Rb1取代的4至12元杂亚烷基。在一些实施方案中，A为被一个Rb1取代的4至8元杂亚烷基。
在一些实施方案中，每个Rb1独立地选自由以下项组成的组：
C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、卤素、-OH、-NRd1Re1、-(C1-6亚烷基)-NRd1Re1、-C(＝O)NRd1Re1、-C(＝O)(C1-6烷基)和-C(＝O)O(C1-6烷基)。在一些实施方案中，每个Rb1为C1-6烷基。在一些实施方案中，每个Rb1为C1-6卤代烷基。在一些实施方案中，每个Rb1为C1-6烷氧基。在一些实施方案中，每个Rb1为C1-6卤代烷氧基。在一些实施方案中，每个Rb1为卤素。在一些实施方案中，每个Rb1为-OH。在一些实施方案中，每个Rb1为-NRd1Re1。在一些实施方案中，每个Rb1为-(C1-6亚烷基)-NRd1Re1。在一些实施方案中，每个Rb1为C(＝O)NRd1Re1。在一些实施方案中，每个Rb1为-C(＝O)(C1-6烷基)。在一些实施方案中，每个Rb1为-C(＝O)O(C1-6烷基)。在一些实施方案中，一个Rb1为–NRd1Re1。在一些实施方案中，一个Rb1为-(C1-6亚烷基)-NRd1Re1。在一些实施方案中，一个Rb1为-(C1-2亚烷基)-NRd1Re1。
在一些实施方案中，Rd1和Re1独立地为氢或C1-3烷基。在一些实施方案中，Rd1和Re1中的一者为氢，并且Rd1和Re1中的另一者为C1-3烷基。在一些实施方案中，Rd1和Re1均为氢或C1-3烷基。在一些实施方案中，Rd1和Re1均为C1-3烷基。在一些实施方案中，Rd1和Re1均为甲基。
在一些实施方案中，Q-A选自由Ai、Aii或Aiii组成的组：
Figure BDA0003983088010000581
在一些实施方案中，Q为Q1。在一些实施方案中，Q1选自由以下项组成的组：
Figure BDA0003983088010000582
在一些实施方案中，Q-A具有式Aiv：
Figure BDA0003983088010000583
其中与Q1相邻的波浪线表示与(M)x的共价连接；
下标a1为1-4；下标a2为0-3；下标a3为0或1；
LD为C1-6亚烷基；
A3为-NH-(C1-10亚烷基)-C(＝O)-或-NH-(2-20元杂亚烷基)-C(＝O)-，其中C1-6亚烷基任选地被1-3个独立选择的Ra取代，并且2-20元杂亚烷基任选地被1-3个独立选择的Rb取代；并且
其中A3进一步任选地被选自PEG2至PEG72的PEG单元取代。
在一些实施方案中，Q1具有以下结构：
Figure BDA0003983088010000591
在一些实施方案中，A3进一步任选地被PEG12至PEG32或PEG8至PEG24取代。
在一些实施方案中，下标a3为0。在一些实施方案中，下标a3为1。
在一些实施方案中，A3为-NH-(C1-10亚烷基)-C(＝O)-。
在一些实施方案中，A3为–NH-(CH2CH2)-C(＝O)-。
在一些实施方案中，A3为-NH-(2-20元杂亚烷基)-C(＝O)-，其中2-20元杂亚烷基任选地被1-3个独立选择的Rb取代。
在一些实施方案中，A3具有式Av
Figure BDA0003983088010000592
其中Rp包含聚乙二醇链。在一些实施方案中，Rp经由-(C1-6亚烷基)C(＝O)-基团的羰基碳原子共价连接至氮原子，其中聚乙二醇链和-(C1-6亚烷基)C(＝O)-基团形成PEG2至PEG72范围内的PEG单元(例如，PEG12或PEG24)。
在一些实施方案中，W为单个氨基酸。在一些实施方案中，W为单个天然氨基酸。在一些实施方案中，W为包含2-12个氨基酸的肽，其中每个氨基酸独立地为天然或非天然氨基酸。在一些实施方案中，每个氨基酸独立地为天然氨基酸。在一些实施方案中，W为二肽。在一些实施方案中，W为三肽。在一些实施方案中，W为四肽。在一些实施方案中，W为五肽。在一些实施方案中，W为六肽。在一些实施方案中，W为7、8、9、10、11或12个氨基酸。在一些实施方案中，W的每个氨基酸独立地选自由以下项组成的组：缬氨酸、丙氨酸、β-丙氨酸、甘氨酸、赖氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、精氨酸和瓜氨酸。在一些实施方案中，W的每个氨基酸独立地选自由以下项组成的组：缬氨酸、丙氨酸、β-丙氨酸、甘氨酸、赖氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、天冬氨酸、丝氨酸、谷氨酸、高丝氨酸甲醚、天冬氨酸甲酯、N,N-二甲基赖氨酸、精氨酸、缬氨酸-丙氨酸、缬氨酸-瓜氨酸、苯丙氨酸-赖氨酸和瓜氨酸。在一些实施方案中，W为天冬氨酸。在一些实施方案中，W为赖氨酸。在一些实施方案中，W为甘氨酸。在一些实施方案中，W为丙氨酸。在一些实施方案中，W为天冬氨酸甲酯。在一些实施方案中，W为N,N-二甲基赖氨酸。在一些实施方案中，W为高丝氨酸甲醚。在一些实施方案中，W为丝氨酸。在一些实施方案中，W为缬氨酸-丙氨酸。
在一些实施方案中，W为1-12个氨基酸，并且W与Y或W与D之间的键能够被肿瘤相关蛋白酶酶促裂解。在一些实施方案中，W为氨基酸或二肽；并且W与D之间或W与Y之间的键能够被肿瘤相关蛋白酶酶促裂解。在一些实施方案中，肿瘤相关蛋白酶是溶酶体蛋白酶，诸如组织蛋白酶。在一些实施方案中，肿瘤相关蛋白酶是组织蛋白酶B。
在一些实施方案中，W为具有式Wi、Wii或Wiii的结构的葡糖苷酸单元：
Figure BDA0003983088010000611
其中Su为糖部分；
-OA-表示糖苷键的氧原子；
每个Rg独立地为氢、卤素、-CN或-NO2；
W1选自由以下项组成的组：键、-O-、-C(＝O)-、S(O)0-2-、-NH-、-N(C1-6烷基)-、–[N(C1-6烷基)2]+-、-OC(＝O)-、--NHC(＝O)-、-C(＝O)O-和-C(＝O)NH-；
波浪线表示与A、Q或L1的共价连接；并且
*表示与Y或D的共价连接。
在一些实施方案中，-OA-表示糖苷键的氧原子。在一些实施方案中，糖苷键提供β-葡糖醛酸酶或α-甘露糖苷酶裂解位点。在一些实施方案中，β-葡糖醛酸酶或α-甘露糖苷酶裂解位点能够被人溶酶体β-葡糖醛酸酶或人溶酶体α-甘露糖苷酶裂解。
在一些实施方案中，OA-Su在生理pH下具有零净电荷。在一些实施方案中，OA-Su在生理pH下不带电荷。在一些实施方案中，OA-Su为甘露糖。在一些实施方案中，OA-Su为
Figure BDA0003983088010000612
在一些实施方案中，式Wi、Wii或Wii中的OA-Su的Su包含羧酸酯部分。在一些实施方案中，OA-Su为葡糖醛酸部分。在一些实施方案中，OA-Su为
Figure BDA0003983088010000621
在一些实施方案中，每个Rg为氢。在一些实施方案中，一个Rg为氢，并且其余的Rg独立地为卤素、-CN或-NO2。在一些实施方案中，两个Rg为氢，并且其余的Rg为卤素、-CN或-NO2。
在一些实施方案中，W1为键。在一些实施方案中，W1为-O-。在一些实施方案中，W1为-C(＝O)-。在一些实施方案中，W1为-NH-。在一些实施方案中，W1为-N(C1-6烷基)-。在一些实施方案中，W1为–[N(C1-6烷基)2]+。
在一些实施方案中，W1为-OC(＝O)-；并且OA-Su带中性电荷。在一些实施方案中，W1为键；D通过在生理pH下形成铵阳离子的氮原子缀合至W；并且OA-Su的Su为具有羧酸酯取代基的糖部分。
在一些实施方案中，W为具有以下结构的Wi：
Figure BDA0003983088010000622
在一些实施方案中，W为分别具有
Figure BDA0003983088010000623
的结构的Wii或Wi。在一些实施方案中，W为具有以下结构的Wii：
Figure BDA0003983088010000624
在一些实施方案中，W为具有以下结构的Wi：
Figure BDA0003983088010000631
在一些实施方案中，下标w为1，并且下标a为0。
在一些实施方案中，W1为键。在一些实施方案中，W1为-O(C＝O)-。
在一些实施方案中，W为肽可裂解单元，并且下标y为0。在一些实施方案中，W为肽可裂解单元，并且下标y为1。在一些实施方案中，W为肽可裂解单元，并且下标y为1。在一些实施方案中，W为肽可裂解单元，并且下标y为0。
非自降解部分是需要酶裂解的部分，并且其中部分或全部基团在从ADC裂解后保持键合至药物。非自降解部分的示例包括但不限于：-甘氨酸-；以及-甘氨酸-甘氨酸-。在一些实施方案中，其中Y为-甘氨酸-或-甘氨酸-甘氨酸-，L2-D例如经由肿瘤细胞相关蛋白酶、癌细胞相关蛋白酶或淋巴细胞相关蛋白酶经历酶促裂解，以提供游离药物形式的甘氨酸-药物单元或甘氨酸-甘氨酸-药物单元片段。在一些实施方案中，在靶细胞内发生独立的水解或蛋白水解反应，从而进一步裂解甘氨酸-药物或甘氨酸-甘氨酸-药物单元，以游离药物形式释放母体药物。
在一些实施方案中，其中Y为任选地被一个或多个卤素、氰基或硝基基团取代的对氨基苄醇(PAB)，Y例如经由肿瘤细胞相关蛋白酶、癌细胞相关蛋白酶或淋巴细胞相关蛋白酶经历酶促裂解，从而释放PAB-药物单元片段，所述片段进一步经历PAB的1,6-消除以释放游离药物。在一些实施方案中，如本文所述的非自降解部分的酶促裂解直接释放游离药物，无需任何进一步的水解或蛋白水解步骤。
自降解部分是不需要任何额外的水解步骤来释放游离药物形式的D的部分。例如，如先前所述的对氨基苄醇(PAB)部分的亚苯基部分经由PAB基团的氨基氮原子共价连接至—Ww—，并且经由碳酸酯、氨基甲酸酯或醚基团共价连接至-D。参见例如Told等人，2002,J.Org.Chem.67:1866-1872。
自降解部分的示例包括但不限于对氨基苄醇(PAB)部分，其亚苯基在其余的芳族碳原子处未被取代或者被一个或多个C1-3烷氧基、卤素、氰基或硝基基团取代。在一些实施方案中，当下标w为1并且W为肽可裂解单元时，PAB部分的亚苯基任选地被一个C1-3烷氧基基团取代。
自降解基团的其他示例包括但不限于与PAB部分电子相似的芳族化合物，诸如2-氨基咪唑-5-甲醇衍生物(参见例如Hay等人，1999,Bioorg.Med.Chem.Lett.9:2237)、邻或对氨基苄基缩醛、取代和未取代的4-氨基丁酸酰胺(参见例如Rodrigues等人，1995,Chemistry Biology2:223)、适当取代的双环[2.2.1]和双环[2.2.2]环系(参见例如Storm等人，1972,J.Amer.Chem.Soc.94:5815)、2-氨基苯基丙酸酰胺(参见例如Amsberry等人，1990,J.Org.Chem.55:5867)、在甘氨酸的α-位被取代的含胺药物的消除(参见例如Kingsbury等人，1984,J.Med.Chem.27:1447)、以及诸如
Figure BDA0003983088010000641
的基团，其中*表示与D的共价连接，并且与
Figure BDA0003983088010000642
相邻的氮与W形成氨基甲酸酯。
在一些实施方案中，Y为任选地被糖部分取代的对氨基苄氧基-羰基(PABC)基团。在一些实施方案中，Y为-甘氨酸-或-甘氨酸-甘氨酸-。在一些实施方案中，Y为支链双(羟甲基)苯乙烯(BHMS)单元，其能够并入(和释放)多个药物单元。
在L2-D的一些实施方案中，下标w为1，并且–(Q)q-(A)a-(W)w-(Y)y包含可释放的接头，该可释放的接头在ADC被内化到靶细胞中后提供游离药物的释放。在一些实施方案中，下标w为1，并且–(Q)q-(A)a-(W)w-(Y)y为可释放的接头，该可释放的接头提供游离药物在靶细胞附近的释放。可释放的接头具有合适的识别位点，诸如肽裂解位点、糖裂解位点或二硫化物裂解位点。在一些实施方案中，每个可释放的接头是二肽。在一些实施方案中，每个可释放的接头独立地包含琥珀酰亚胺基-己酰基(mc)、琥珀酰亚胺基-己酰基-缬氨酸-瓜氨酸(sc-vc)、琥珀酰亚胺基-己酰基-缬氨酸-瓜氨酸-对氨基苄氧基羰基(sc-vc-PABC)、SDPr-vc(其中“S”是指琥珀酰亚胺基)、-丙酰基-缬氨酸-瓜氨酸-、Val-Cit-、-Phe-Lys-或-Val-Ala-。
在一些实施方案中，每个可释放的接头独立地选自Val-Cit-、-Phe-Lys-和-Val-Ala-。在一些实施方案中，每个可释放的接头独立地选自琥珀酰亚胺基-己酰基(mc)、琥珀酰亚胺基-己酰基-缬氨酸-瓜氨酸(sc-vc)、琥珀酰亚胺基-己酰基-缬氨酸-瓜氨酸-对氨基苄氧基羰基(sc-vc-PABC)、SDPr-vc(其中“S”是指琥珀酰亚胺基)和-丙酰基-缬氨酸-瓜氨酸-。
在一些实施方案中，–(Q)q-(A)a-(W)w-(Y)y-为不可释放的接头，其中药物单元在ADC被内化到靶细胞中并降解后释放，从而释放游离药物。
在一些实施方案中，–(Q)q-(A)a-(W)w-(Y)y为可释放的接头，其中下标y为1；并且Y为
Figure BDA0003983088010000651
其中波浪线表示与W或A的共价连接；并且*表示与D的共价连接。
在一些实施方案中，下标a为1；下标w为1；并且Q-A-W为
Figure BDA0003983088010000661
Figure BDA0003983088010000662
在一些实施方案中，Q-A-W为
Figure BDA0003983088010000663
在一些实施方案中，Q-A-W为
Figure BDA0003983088010000664
在一些实施方案中，Q-A-W为
Figure BDA0003983088010000665
在一些实施方案中，Rp为PEG2至PEG72范围内的PEG单元(例如，PEG12或PEG24)。在一些实施方案中，该PEG单元包含-(C1-6亚烷基)C(＝O)-基团，其中-(C1-6亚烷基)C(＝O)-基团的羰基碳原子共价连接至被Rp取代的氮原子。
在一些实施方案中，W为肽可裂解单元或葡糖苷酸单元，A不包含被PEG单元取代的RP。在一些实施方案中，L2被PEG2、PEG4、PEG6、PEG8、PEG10、PEG12、PEG16、PEG20和PEG24范围内的PEG单元取代。在一些实施方案中，W为肽可裂解单元或葡糖苷酸单元，A被PEG2至PEG72例如PEG12至PEG32或PEG8至PEG24范围内的PEG单元取代。在一些实施方案中，L2被选自PEG2、PEG4、PEG6、PEG8、PEG10、PEG12、PEG16、PEG20和PEG24的PEG单元取代。
在回顾本公开和其中提供的示例后，本领域的技术人员将认识到，本文所述的ADC及其中间体的可操作性不取决于任何一个接头(L1或L2)的确切结构，并且在不脱离本公开的范围的情况下，本文未明确描述的另外的结构特征能够并入一个或多个接头(L1或L2)中。
另外，本领域的技术人员还将理解，至抗体的特异性连接化学例如可改变产生产物的合成步骤。具体地，当通过硫醇反应性基团与抗体上的硫醇基团的硫原子连接时，与抗体的该连接将在还原环状硫醇多路复用部分(M)之前进行，以避免接头(L1和L2)中的硫醇与上述硫醇反应性基团之间的不期望的反应或脱靶反应。
药物单元
在一些实施方案中，D是缀合至药物接头化合物或抗体-药物缀合物的药物单元。在一些实施方案中，D是游离药物(来自对应的药物单元)或其药学上可接受的盐，并且可用于过度增生性疾病和病症的药物治疗。本节中的取代基名称(R1、R2、R3等)仅指本申请中所述的药物单元和对应的游离药物。这些名称不适用于具有如本文所述的不同取代基名称的接头(作为独立化合物或作为ADC的组分)或接头中间体化合物。
在一些实施方案中，D是细胞毒性、细胞抑制、免疫抑制、免疫刺激或免疫调节药物。在一些实施方案中，D是微管蛋白干扰剂、DNA小沟结合剂、DNA损伤剂或DNA复制抑制剂。
可用种类的细胞毒性剂、细胞抑制剂、免疫抑制剂、免疫刺激剂或免疫调节剂包括例如抗微管蛋白剂(其也可称为微管蛋白干扰剂)、DNA小沟结合剂、DNA复制抑制剂、DNA损伤剂、烷化剂、抗生素、抗叶酸剂、抗代谢物、化疗增敏剂、Toll样受体(TLR)激动剂、干扰素基因刺激因子(STING)激动剂、视黄酸诱导基因I(RIG-I)激动剂、拓扑异构酶抑制剂(包括拓扑异构酶I和II抑制剂)、长春花生物碱、澳瑞他汀、喜树碱、烯二炔、lexitropsins、蒽环类药物、紫杉烷等。可用种类的细胞毒性剂的具体示例包括例如DNA小沟结合剂(烯二炔和lexitropsins)、DNA烷化剂和微管蛋白抑制剂。示例性试剂包括例如蒽环类药物、澳瑞他汀(例如，澳瑞他汀T、澳瑞他汀E、AFP、单甲基澳瑞他汀F(MMAF)、亲脂性单甲基澳瑞他汀F、单甲基澳瑞他汀E(MMAE))、喜树碱、CC-1065类似物、卡奇霉素、尾海兔素10的类似物、倍癌霉素、依托泊苷、美登素和美登素生物碱、美法仑、甲氨蝶呤、丝裂霉素C、紫杉烷(例如，紫杉醇和多烯紫杉醇)、烟酰胺磷酸核糖转移酶抑制剂(NAMPTi)、微管溶素M、苯二氮
Figure BDA0003983088010000681
类和含苯二氮
Figure BDA0003983088010000682
类的药物(例如，吡咯并[1,4]-苯二氮
Figure BDA0003983088010000683
类(PBD)、吲哚苯二氮
Figure BDA0003983088010000684
类、根瘤菌素、岩沙海葵毒素和噁唑烷酮苯二氮
Figure BDA0003983088010000685
类)和长春花生物碱。选择的含苯二氮
Figure BDA0003983088010000686
的药物在WO 2010/091150、WO 2012/112708、WO2007/085930和WO 2011/023883中有所描述。
特别有用种类的细胞毒性剂包括例如DNA小沟结合剂、DNA烷化剂、微管蛋白干扰剂、蒽环类药物和拓扑异构酶II抑制剂。其他特别有用的细胞毒性剂包括例如澳瑞他汀(例如，澳瑞他汀T、澳瑞他汀E、AFP、单甲基澳瑞他汀F(MMAF)、单甲基澳瑞他汀F的亲脂性类似物、单甲基澳瑞他汀E(MMAE))和喜树碱(例如，喜树碱、伊立替康和拓扑替康)。
细胞毒性剂可以是化疗剂，诸如多柔比星、紫杉醇、美法仑、长春花生物碱、甲氨蝶呤、丝裂霉素C或依托泊苷。该试剂也可以是CC-1065类似物、卡奇霉素、美登素、尾海兔素10的类似物、根瘤菌素或岩沙海葵毒素。
细胞毒性剂也可以是澳瑞他汀。澳瑞他汀可以是澳瑞他汀E衍生物，所述衍生物是例如在澳瑞他汀E与酮酸之间形成的酯。例如，澳瑞他汀E可以与对乙酰基苯甲酸或苯甲酰戊酸反应以分别产生AEB和AEVB。其他典型的澳瑞他汀包括澳瑞他汀T、AFP、MMAF和MMAE。各种澳瑞他汀的合成和结构在例如US 2005-0238649和US2006-0074008中有所描述。
细胞毒性剂可以是DNA小沟结合剂(参见例如美国专利号6,130,237)。例如，小沟结合剂可以是CBI化合物或烯二炔(例如，卡奇霉素)。
细胞毒性剂或细胞抑制剂可以是抗微管蛋白剂。抗微管蛋白剂的示例包括紫杉烷(例如，
Figure BDA0003983088010000691
(紫杉醇)、
Figure BDA0003983088010000692
(多烯紫杉醇))、T67(Tularik)、长春花生物碱(例如，长春新碱、长春花碱、长春地辛和长春瑞滨)和澳瑞他汀(例如，澳瑞他汀E、AFP、MMAF、MMAE、AEB、AEVB)。其他合适的抗微管蛋白剂包括例如浆果赤霉素衍生物、紫杉烷类似物(例如，埃博霉素A和B)、诺考达唑、秋水仙素和秋水仙胺、雌莫司汀、大环内酯、西马多丁、美登素生物碱、考布他汀、圆皮海绵内酯和eleuthrobin。
细胞毒性剂可以是美登素或美登素生物碱、另一组抗微管蛋白剂(例如，DM1、DM2、DM3、DM4)。例如，美登素生物碱可以是美登素或含美登素的药物接头诸如DM-1或DM-4(ImmunoGen,Inc.；另请参见Chari等人，1992,Cancer Res.)。
在一些实施方案中，D是微管蛋白干扰剂。在一些实施方案中，D是澳瑞他汀或微管溶素。在一些实施方案中，D是澳瑞他汀。在一些实施方案中，D是微管溶素。
在一些实施方案中，D是TLR激动剂。示例性TLR激动剂包括但不限于TLR1激动剂、TLR2激动剂、TLR3激动剂、TLR4激动剂、TLR5激动剂、TLR6激动剂、TLR7激动剂、TLR8激动剂、TLR7/8激动剂、TLR9激动剂或TLR10激动剂。
在一些实施方案中，D是STING激动剂。示例性STING激动剂包括但不限于环状二核苷酸(CDN)和非核苷酸STING激动剂。
抗体-药物缀合物或药物接头化合物的澳瑞他汀药物单元通过缀合物或药物接头化合物的接头单元与澳瑞他汀游离药物的仲胺的共价连接而并入澳瑞他汀药物，所述澳瑞他汀游离药物具有如下的DE或DF的结构：
Figure BDA0003983088010000701
其中剑标指示提供氨基甲酸酯官能团的氮原子的共价连接位点，其中该官能团的-OC(＝O)-是在将作为-D的澳瑞他汀药物化合物并入抗体-药物缀合物的任一种药物接头部分或并入如本文所述的任一种药物接头化合物时的YZ’，使得对于任一种类型的化合物，下标y为2；并且RZ10和RZ11中的一者为氢并且另一者为C1-C8烷基；RZ12为氢、C1-C8烷基、C3-C8碳环基、C6-C24芳基、-XZ1-C6-C24芳基、-XZ1-(C3-C8碳环基)、C3-C8杂环基或-XZ1-(C3-C8杂环基)；RZ13为氢、C1-C8烷基、C3-C8碳环基、C6-C24芳基、-XZ1-C6-C24芳基、-XZ1-(C3-C8碳环基)、C3-C8杂环基和-XZ1-(C3-C8杂环基)；RZ14为氢或甲基，或者RZ13和RZ14与它们所连接的碳合在一起构成螺C3-C8碳环；RZ15为氢或C1-C8烷基；RZ16为氢、C1-C8烷基、C3-C8碳环基、C6-C24芳基、-C6-C24-XZ1-芳基、-XZ1-(C3-C8碳环基)、C3-C8杂环基和-XZ1-(C3-C8杂环基)；RZ17独立地为氢、-OH、C1-C8烷基、C3-C8碳环基和O-(C1-C8烷基)；RZ18为氢或任选取代的C1-C8烷基；RZ19为-C(RZ19A)2-C(RZ19A)2-C6-C24芳基、-C(RZ19A)2-C(R19A)2-(C3-C8杂环基)或-C(RZ19A)2-C(RZ19A)2-(C3-C8碳环基)，其中C6-C24芳基和C3-C8杂环基是任选取代的；RZ19A独立地为氢、任选取代的C1-C8烷基、-OH或任选取代的–O-C1-C8烷基；RZ20为氢或任选取代的C1-C20烷基、任选取代的C6-C24芳基或任选取代的C3-C8杂环基、或-(RZ47O)mz-R48、或-(R47O)mz-CH(R49)2；RZ21为任选取代的-C1-C8亚烷基-(C6-C24芳基)或任选取代的-C1-C8亚烷基-(C5-C24杂芳基)、或C1-C8羟基烷基、或任选取代的C3-C8杂环基；ZZ为O、S、NH或NRZ46；RZ46为任选取代的C1-C8烷基；下标mz为1-1000范围内的整数；RZ47为C2-C8烷基；RZ48为氢或C1-C8烷基；RZ49独立地为-COOH、-(CH2)nz-N(RZ50)2、-(CH2)nz-SO3H或-(CH2)nz-SO3-C1-C8烷基；RZ50独立地为C1-C8烷基或-(CH2)nz-COOH；下标nz为0至6范围内的整数；并且XZ1为C1-C10亚烷基。
在一些实施方案中，澳瑞他汀药物化合物具有式DE-1、式DE-2或式DF-1的结构：
Figure BDA0003983088010000711
其中式DE-1或式DE-2中的ArZ为C6-C10芳基或C5-C10杂芳基，并且在式DF-1中，ZZ为-O-或-NH-；RZ20为氢或任选取代的C1-C6烷基、任选取代的C6-C10芳基或任选取代的C5-C10杂芳基；并且RZ21为任选取代的C1-C6烷基、任选取代的-C1-C6亚烷基-(C6-C10芳基)或任选取代的-C1-C6亚烷基-(C5-C10杂芳基)。
在式DE、DF、DE-1、DE-2或DF-1的一些实施方案中，RZ10和RZ11中的一者为氢并且另一者为甲基。
在式DE-1或DE-2的一些实施方案中，Ar为苯基或2-吡啶基。
在式DF-1的一些实施方案中，RZ21为XZ1-S-RZ21a或XZ1-ArZ，其中XZ1为C1-C6亚烷基，RZ21a为C1-C4烷基并且ArZ为苯基或C5-C6杂芳基并且/或者–ZZ-为-O-并且RZ20为C1-C4烷基或者ZZ为-NH-并且RZ20为苯基或C5-C6杂芳基。
在一些实施方案中，澳瑞他汀药物化合物具有式DF/E-3的结构：
Figure BDA0003983088010000721
其中RZ10和RZ11中的一者为氢并且另一者为甲基；RZ13为异丙基或–CH2-CH(CH3)2；并且RZ19B为–CH(CH3)-CH(OH)-Ph、–CH(CO2H)-CH(OH)-CH3、–CH(CO2H)-CH2Ph、-CH(CH2Ph)-2-噻唑基、-CH(CH2Ph)-2-吡啶基、-CH(CH2-p-Cl-Ph)、-CH(CO2Me)-CH2Ph、-CH(CO2Me)-CH2CH2SCH3、-CH(CH2CH2SCH3)C(＝O)NH-喹啉-3-基、-CH(CH2Ph)C(＝O)NH-p-Cl-Ph，或者RZ19B具有
Figure BDA0003983088010000722
的结构，其中波浪线指示与澳瑞他汀化合物的其余部分的共价连接。
在一些实施方案中，并入-D中的澳瑞他汀药物化合物是单甲基澳瑞他汀E(MMAE)或单甲基澳瑞他汀F(MMAF)。
在一些实施方案中，缀合在抗体-药物缀合物或药物接头化合物内的游离药物是含胺微管溶素化合物，其中胺的氮原子是与抗体-药物缀合物或药物接头化合物的接头单元的共价连接位点，并且含胺微管溶素化合物具有式DG或DH的结构：
Figure BDA0003983088010000723
Figure BDA0003983088010000731
其中剑标表示药物接头化合物或抗体-药物缀合物中的药物单元与接头单元的共价连接点，其中如此示出的氮原子变为季铵化的，并且圆圈表示5元或6元氮杂芳基，其中该杂芳基的所示的所需取代基彼此呈1,3-或间位关系，并且在其余位置处具有任选的取代；RZ2为XZA-RZ2A，其中XZA为-O-、-S-、-N(RZ2B)-、-CH2-、-(C＝O)N(RZ2B)-或-O(C＝O)N(RZ2B)-，其中RZ2B为氢或任选取代的烷基，RZ2A为氢、任选取代的烷基、任选取代的芳基或-C(＝O)RZC，其中RC为氢、任选取代的烷基或任选取代的芳基，或者RZ2为O-连接的取代基；RZ3为氢或任选取代的烷基；RZ4、RZ4A、RZ4B、RZ5和RZ6为独立选择的任选取代的烷基，一个RZ7为氢或任选取代的烷基，另一个RZ7为任选取代的芳基烷基或任选取代的杂芳基烷基，并且mZ为0或1。在其他实施方案中，季铵化药物是由结构DG表示的微管溶素，其中一个RZ7为氢或任选取代的烷基，另一个RZ7为独立选择的任选取代的烷基，并且下标mz’为0或1，其中其他可变基团如先前所定义。在一些实施方案中，一个RZ7为氢或任选取代的低级烷基，另一个RZ7为独立选择的任选取代的C1-C6烷基，并且下标mz’为1，其中其他可变基团如先前所定义。
在一些实施方案中，RZ2为XZA-RZ2A，其中XZA为-O-、-S-、-N(RZ2B)-、-CH2-或-O(C＝O)N(RZ2B)-，其中RZ2B为氢或任选取代的烷基，RZ2A为氢、任选取代的烷基、任选取代的芳基或-C(＝O)RZC，其中RZC为氢、任选取代的烷基或任选取代的芳基，或者RZ2为O-连接的取代基。
在一些实施方案中，RZ2为XZA-RZ2A，其中XZA为-O-、-S-、-N(RZ2B)-或-(C＝O)N(RZ2B)-，其中RZ2A和RZ2B独立地为氢或任选取代的烷基，或者RZ2为O-连接的取代基。
在一些实施方案中，DG或DH中的-N(RZ7)(RZ7)被-N(RZ7)-CH(RZ10)(CH2RZ11)替代，以定义式DH’和DG’的微管溶素化合物：
Figure BDA0003983088010000741
其中剑标表示药物接头化合物或抗体-药物缀合物中与接头单元的共价连接点，其中如此示出的氮原子变为季铵化的；RZ10为被-CO2H或其酯取代的C1-C6烷基，并且RZ7为氢或独立地选自RZ10的C1-C6烷基，或者RZ7和RZ10与它们所连接的原子一起定义5或6元杂环；并且RZ11为芳基或5元或6元杂芳基，其任选地被一个或多个独立地选自由卤素、低级烷基、-OH和-O-C1-C6烷基组成的组的取代基取代；并且其余可变基团如针对DG和DH所定义。在一些实施方案中，RZ11被一个或两个选自由卤素、低级烷基、-OH和-O-C1-C6烷基组成的组的取代基取代。在一些实施方案中，RZ11被一个选自由卤素、低级烷基、-OH和-O-C1-C6烷基组成的组的取代基取代。在一些实施方案中，卤素为F。在一些实施方案中，-O-C1-C6烷基为-OCH3。在一些实施方案中，低级烷基为-CH3。
在其他实施方案中，DG或DH中的-N(RZ7)(RZ7)中的一个RZ7为氢或C1-C6烷基，并且另一个RZ7为独立选择的任选地被-CO2H或其酯取代或被任选取代的苯基取代的C1-C6烷基。
在结构DG和DH的一些实施方案中，一个RZ7为氢，并且另一个RZ7为具有以下结构的任选取代的芳基烷基：
Figure BDA0003983088010000742
其中RZ7B为氢或O-连接的取代基，并且RZ8A为氢或低级烷基；并且其中波浪线指示与DG或DH的其余部分的连接点。在一些实施方案中，RZ7B为对位的氢或-OH。在一些实施方案中，RZ8A为甲基。
在结构DG或DH的一些实施方案中，一个RZ7为氢，并且另一个RZ7为具有以下结构的任选取代的芳基烷基：
Figure BDA0003983088010000751
其中RZ7B为-H或-OH；并且其中波浪线指示与DG或DH的其余部分的连接点。
在结构DG和DH的一些实施方案中，一个RZ7为氢或低级烷基，并且另一个RZ7为具有以下结构之一的任选取代的芳基烷基：
Figure BDA0003983088010000752
其中ZZ为任选取代的亚烷基或任选取代的亚烯基，RZ7B为氢或O-连接的取代基，RZ8A为氢或低级烷基，并且下标nz为0、1或2；并且其中波浪线指示与DG或DH的其余部分的连接点。在一些实施方案中，下标nz为0或1。在结构DG和DH的其他实施方案中，-N(RZ7)(RZ7)为-NH(C1-C6烷基)，其中C1-C6烷基任选地被-CO2H或其酯取代或被任选取代的苯基取代。在一些实施方案中，-N(RZ7)(RZ7)选自由以下项组成的组：-NH(CH3)、-CH2CH2Ph、-CH2-CO2H、-CH2CH2CO2H和-CH2CH2CH2CO2H。在一些实施方案中，一个RZ7为氢或甲基，并且另一个RZ7为具有以下结构的任选取代的芳基烷基：
Figure BDA0003983088010000761
并且其中ZZ为任选取代的亚烷基或任选取代的亚烯基，RZ7B为对位的氢或-OH，RZ8A为氢或甲基，并且下标nz为0、1或2。
在结构DG’和DH’的一些实施方案中，RZ7和RZ10与它们所连接的原子一起定义任选取代的5元或6元杂环，其中–N(RZ7)-CH(RZ10)(CH2RZ11)具有以下结构：
Figure BDA0003983088010000762
其中波浪线指示与DG’或DH’的其余部分的连接点。
在一些实施方案中，微管溶素化合物由下式表示，其中当此类化合物作为季铵化药物单元(D+)并入ADC中时，所示的氮
Figure BDA0003983088010000764
是季铵化位点：
Figure BDA0003983088010000763
其中剑标表示药物接头化合物或抗体-药物缀合物中药物单元与接头单元的连接点，其中如此示出的氮原子变为季铵化的，并且圆圈表示5元或6元氮-杂芳基，其中该杂芳基的所示的所需取代基彼此呈1,3-或间位关系，并且在其余位置处具有任选的取代；RZ2A为氢或任选取代的烷基，或者RZ2A与其所连接的氧原子一起定义O-连接的取代基；RZ3为氢或任选取代的烷基；RZ4、RZ4A、RZ4B、RZ5和RZ6为独立选择的任选取代的烷基；RZ7A为任选取代的芳基或任选取代的杂芳基，RZ8A为氢或任选取代的烷基，并且下标mz’为0或1。
在结构DG、DG-1、DH或DH-1的一些实施方案中，RZ4为甲基，或者RZ4A和RZ4B为甲基。在结构DG’或DH’的其他实施方案中，RZ4为甲基，或者RZ4A和RZ4B为甲基。在其他实施方案中，RZ7A为任选取代的苯基。在一些实施方案中，RZ8A为呈(S)-构型的甲基。在其他实施方案中，RZ2A与其所连接的氧原子一起定义除-OH之外的O-连接的取代基。在一些实施方案中，RZ2A与其所连接的氧原子一起定义酯、醚或O-连接的氨基甲酸酯。在一些实施方案中，圆圈表示5元氮-杂亚芳基。在一些实施方案中，圆圈表示二价噁唑或噻唑部分。在一些实施方案中，RZ4为甲基，或者RZ4A和RZ4B为甲基。在一些实施方案中，RZ7为任选取代的芳基烷基，其中芳基为苯基，并且RZ7A为任选取代的苯基。
在DG、DG’、DG-1、DH、DH’或DH-1的其他实施方案中，圆圈表示5元氮杂亚芳基。在一些实施方案中，5元杂亚芳基由结构
Figure BDA0003983088010000771
表示，其中XZB为O、S或N-RZB，其中RZB为氢或低级烷基。在一些实施方案中，季铵化药物是由结构DG、DG’或DG-1表示的微管溶素，其中m为1。在一些实施方案中，微管溶素由结构DG表示，其中m为1，并且圆圈表示任选取代的二价噻唑部分。
在一些实施方案中，微管溶素化合物由下式表示，其中当此类化合物作为季铵化药物单元(D+)并入ADC中时，所示的氮原子
Figure BDA0003983088010000773
是季铵化位点：
Figure BDA0003983088010000772
Figure BDA0003983088010000781
其中RZ2A与其所连接的氧原子一起定义O-连接的取代基，RZ3为低级烷基或-CH2OC(＝O)RZ3A，其中RZ3A为任选取代的低级烷基，并且RZ7B为氢或O-连接的取代基。在一些实施方案中，RZ2A与其所连接的氧原子一起定义酯、醚或O-连接的氨基甲酸酯。在一些实施方案中，RZ7B为对位的O-连接的取代基。在一些实施方案中，RZ3为甲基，或者RZ3A为甲基、乙基、丙基、异丙基、异丁基或-CH2C＝(CH3)2。在一些实施方案中，RZ2A为甲基、乙基、丙基(即，-ORZ2A为醚)，或者为-C(＝O)RZ2B(即，-ORZ2A为酯)，其中RZ2B为低级烷基。在一些实施方案中，RZ2B为甲基(即，-ORZ2A为乙酸酯)。
在一些实施方案中，并入抗体-药物缀合物或药物接头化合物中的微管溶素化合物具有下式之一的结构：
Figure BDA0003983088010000782
其中RZ7B为氢或-OH，RZ3为低级烷基，并且RZ2B和RZ2C独立地为氢或低级烷基。在一些实施方案中，RZ3为甲基或乙基。在结构DG、DG-1、DG-2、DG-3、DG-4、DG-5、DH、DH-1和DH-2中的任一者的一些实施方案中，RZ3为甲基或为-CH2OC(＝O)RZ3A，其中RZ3A为任选取代的烷基。在结构DG’和DH’中的任一者的一些实施方案中，RZ3为甲基或为-CH2OC(＝O)RZ3A，其中RZ3A为任选取代的烷基。在这些结构中的任一者的一些实施方案中，RZ3为-C(RZ3A)(RZ3A)C(＝O)-XZC，其中XZC为–ORZ3B或–N(RZ3C)(RZ3C)，其中每个RZ3A、RZ3B和RZ3C独立地为氢、任选取代的烷基或任选取代的环烷基。在一些实施方案中，R3为–C(RZ3A)(RZ3A)C(＝O)-N(RZ3C)(RZ3C)，其中每个RZ3A为氢，一个RZ3C为氢，并且另一个RZ3C为正丁基或异丙基。
在结构DG、DG’、DG-1、DG-2、DG-3、DG-4、DG-5、DH、DH’、DH-1和DH-2中的任一者的一些实施方案中，RZ3为乙基或丙基。
在结构DG-1、DG-2、DG-3、DG-4、DG-5、DG-6、DH-1和DH-2中的任一者的一些实施方案中，噻唑核杂环
Figure BDA0003983088010000791
被
Figure BDA0003983088010000792
替代。
在结构DG、DG-1、DG-2、DG-3、DG-4、DG-5、DH、DH-1、DH-2、DH-3和DH-4中的任一者的一些实施方案中，RZ3为甲基或为-CH2OC(＝O)RZ3A，其中RZ3A为任选取代的烷基。在这些结构中的任一者的一些实施方案中，RZ3为-C(RZ3A)(RZ3A)C(＝O)-XZC，其中XZC为–OR3B或–N(R3C)(R3C)，其中每个R3A、R3B和R3C独立地为氢、任选取代的烷基或任选取代的环烷基。在一些实施方案中，RZ3为–C(RZ3A)(RZ3A)C(＝O)-N(RZ3C)(RZ3C)，其中每个RZ3A为氢，一个RZ3C为氢，并且另一个RZ3C为任选取代的烷基或任选取代的环烷基。在一些实施方案中，RZ3为–C(RZ3A)(RZ3A)C(＝O)-N(RZ3C)(RZ3C)，其中每个RZ3A为氢，一个RZ3C为氢，并且另一个RZ3C为正丁基或异丙基。
在结构DG-3、DG-4、DG-5、DH-3和DH-4中的任一者的一些实施方案中，噻唑核杂环
Figure BDA0003983088010000801
被
Figure BDA0003983088010000802
替代。
在一些实施方案中，微管溶素具有结构DG-3或DG-4，其中m为1，RZ3为任选取代的甲基、乙基或丙基。在一些实施方案中，RZ3为未取代的甲基、乙基或丙基。
在一些实施方案中，微管溶素化合物具有结构DG-3，其中下标mz’为1，RZ3为甲基、乙基或丙基，-OC(O)RZ2B为任选取代的-O-C(O)H、O-C(O)-C1-C6烷基或–OC2-C6烯基。在一些实施方案中，-OC(O)RZ2B为-OC(O)CH3、-OC(O)CH2CH3、-OC(O)CH(CH3)2、-OC(O)C(CH3)3或-OC(O)CH＝CH2。
在一些实施方案中，微管溶素化合物具有结构DG-4，其中下标mz’为1，RZ3为甲基、乙基或丙基，并且-OCH2RZ2B为–OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH2CH3或-OCH2OCH3。
在一些实施方案中，微管溶素化合物具有结构DG-3，其中下标mz’为1，RZ3为甲基、乙基或丙基，-OC(O)RZ2B为任选取代的-O-C(O)H、O-C(O)-C1-C6烷基或–OC2-C6烯基。在一些实施方案中，-OC(O)RZ2B为-OC(O)CH3、-OC(O)CH2CH3、-OC(O)CH(CH3)2、-OC(O)C(CH3)3或-OC(O)CH＝CH2。
在一些实施方案中，微管溶素化合物具有结构DG-4，其中下标mz’为1，RZ3为甲基、乙基或丙基，并且-OCH2RZ2B为–OCH3、-OCH2CH3、-OCH2CH2CH3或-OCH2OCH3。
在一些实施方案中，微管溶素具有以下结构：
Figure BDA0003983088010000811
其中RZ2B为–CH3、-CH2CH3、-CH2CH2CH3、-CH(CH3)2、-CH2CH(CH3)2、-CH2C(CH3)3，并且当此类化合物作为季铵化药物单元(D+)并入ADC或药物接头化合物中时，所示的氮原子
Figure BDA0003983088010000812
是季铵化位点。
在一些实施方案中，微管溶素具有以下结构：
Figure BDA0003983088010000813
其中RZ2B为氢、甲基或-OCH3(即，-OCH2RZ2B为甲基、乙基、甲氧基甲基醚取代基)。
在一些实施方案中，作为D+并入ADC中的微管溶素是天然存在的微管溶素，包括微管溶素A、微管溶素B、微管溶素C、微管溶素D、微管溶素E、微管溶素F、微管溶素G、微管溶素H、微管溶素I、微管溶素U、微管溶素V、微管溶素W、微管溶素X或微管溶素Z，其结构由以下结构和可变基团定义给出，其中当此类化合物作为季铵化药物单元(D+)并入ADC或药物接头化合物中时，所示的氮原子
Figure BDA0003983088010000823
是季铵化位点：
Figure BDA0003983088010000821
表1.一些天然存在的微管溶素
Figure BDA0003983088010000822
在结构DG-6的一些实施方案中，作为季铵化药物单元并入ADC或药物接头化合物中的微管溶素化合物是微管溶素M，其中RZ3为-CH3，RZ2为C(＝O)CH3，并且RZ7B为氢。
在一些实施方案中，D并入DNA损伤剂的结构。在一些实施方案中，D并入DNA复制抑制剂的结构。在一些实施方案中，D并入喜树碱的结构。在一些实施方案中，喜树碱化合物具有选自由以下项组成的组的式：
Figure BDA0003983088010000831
其中RZB选自由以下项组成的组：H、C1-C8烷基、C1-C8卤代烷基、C3-C8环烷基、(C3-C8环烷基)-C1-C4烷基、苯基和苯基-C1-C4烷基；
RZC选自由C1-C6烷基和C3-C6环烷基组成的组；并且
每个RZF和RZF’独立地选自由以下项组成的组：-H、C1-C8烷基、C1-C8羟烷基、C1-C8氨基烷基、(C1-C4烷基氨基)-C1-C8烷基-、N,N-(C1-C4羟烷基)(C1-C4烷基)氨基-C1-C8烷基-、N,N-二(C1-C4烷基)氨基-C1-C8烷基-、N-(C1-C4羟烷基)-C1-C8氨基烷基、C1-C8烷基-C(O)-、C1-C8羟烷基-C(O)-、C1-C8氨基烷基-C(O)-、C3-C10环烷基、(C3-C10环烷基)-C1-C4烷基-、C3-C10杂环烷基、(C3-C10杂环烷基)-C1-C4烷基-、苯基、苯基-C1-C4烷基-、二苯基-C1-C4烷基-、杂芳基和杂芳基-C1-C4烷基-，或者
RZF和RZF’与各自连接的氮原子组合以形成具有0至3个取代基的5元、6元或7元环，所述取代基选自由以下项组成的组：卤素、C1-C4烷基、-OH、-OC1-C4烷基、-NH2、-NH-C1-C4烷基、-N(C1-C4烷基)2；并且
其中RZB、RZC、RZF和RZF’的环烷基、杂环烷基、苯基和杂芳基部分被0至3个取代基取代，所述取代基选自由以下项组成的组：卤素、C1-C4烷基、-OH、-OC1-C4烷基、-NH2、-NHC1-C4烷基和-N(C1-C4烷基)2。
在一些实施方案中，其结构作为药物单元并入ADC或药物接头化合物中的喜树碱化合物具有式CPT1，其结构为：
Figure BDA0003983088010000841
其中剑标表示药物接头化合物或抗体-药物缀合物中药物单元与接头单元的连接点。
在一些实施方案中，其结构作为药物单元并入ADC或药物接头化合物中的喜树碱化合物具有式CPT2，其结构为：
Figure BDA0003983088010000842
其中剑标表示药物接头化合物或抗体-药物缀合物中药物单元与接头单元的连接点。
在一些实施方案中，其结构作为药物单元并入ADC或药物接头化合物中的喜树碱化合物具有式CPT3，其结构为：
Figure BDA0003983088010000851
其中剑标表示药物接头化合物或抗体-药物缀合物中药物单元与接头单元的连接点。
在一些实施方案中，其结构作为药物单元并入ADC或药物接头化合物中的喜树碱化合物具有式CPT4，其结构为：
Figure BDA0003983088010000852
其中当式CPT4化合物呈药物接头化合物或抗体-药物缀合物中的药物单元的形式时，剑标表示药物单元与接头单元的共价连接点。在一些实施方案中，D并入依喜替康的结构。
在一些实施方案中，其结构作为药物单元并入ADC或药物接头化合物中的喜树碱化合物具有式CPT5，其结构为：
Figure BDA0003983088010000853
其中当式CPT5化合物呈药物接头化合物或抗体-药物缀合物中的药物单元的形式时，剑标表示与接头单元的连接点。
在一些实施方案中，其结构作为药物单元并入ADC或药物接头化合物中的喜树碱化合物具有式CPT6，其结构为：
Figure BDA0003983088010000861
其中当式CPT6化合物呈药物接头化合物或抗体-药物缀合物中的药物单元的形式时，剑标表示与接头单元的连接点。在一些实施方案中，CPT6具有以下结构：
Figure BDA0003983088010000862
其中当式CPT6化合物呈药物接头化合物或抗体-药物缀合物中的药物单元的形式时，剑标表示与接头单元的连接点。
在一些实施方案中，其结构作为药物单元并入ADC或药物接头化合物中的喜树碱化合物具有式CPT7，其结构为：
Figure BDA0003983088010000863
其中当式CPT7化合物呈药物单元的形式时，剑标表示药物接头化合物或抗体-药物缀合物中与接头单元的连接点。
在一些实施方案中，其结构作为药物单元并入ADC或药物接头化合物中的喜树碱化合物具有下式：
Figure BDA0003983088010000871
其中RZ11之一为正丁基并且RZ12-RZ14中的一者为-NH2并且另一者为氢，或者RZ12为-NH2并且RZ13和RZ14一起为-OCHO-。
在一些实施方案中，RZB选自由C3-C8环烷基、(C3-C8环烷基)-C1-C4烷基、苯基和苯基-C1-C4烷基组成的组，并且其中RZB的环烷基和苯基部分被0至3个取代基取代，所述取代基选自卤素、C1-C4烷基、OH、-O-C1-C4烷基、NH2、-NH-C1-C4烷基和-N(C1-C4烷基)2。在一些实施方案中，RZB选自由H、C1-C8烷基和C1-C8卤代烷基组成的组。在一些实施方案中，RZB为H、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、1-乙基丙基或己基。在一些实施方案中，RZB为氯甲基或溴甲基。在一些实施方案中，RZB为苯基或卤素取代的苯基。在一些实施方案中，RZB为苯基或氟苯基。
在一些实施方案中，RZC为C1-C6烷基。在一些实施方案中，RZC为甲基。在一些实施方案中，RZC为C3-C6环烷基。
在一些实施方案中，RZF和RZF'均为H。在一些实施方案中，RZF和RZF'中的至少一者选自由以下项组成的组：C1-C8烷基、C1-C8羟烷基、C1-C8氨基烷基、(C1-C4烷基氨基)-C1-C8烷基-、N,N-(C1-C4羟烷基)(C1-C4烷基)氨基-C1-C8烷基-、N,N-二(C1-C4烷基)氨基-C1-C8烷基-、N-(C1-C4羟烷基)-C1-C8氨基烷基、C1-C8烷基-C(O)-、C1-C8羟烷基-C(O)-、C1-C8氨基烷基-C(O)-、C3-C10环烷基、(C3-C10环烷基)-C1-C4烷基-、C3-C10杂环烷基、(C3-C10杂环烷基)-C1-C4烷基-、苯基、苯基-C1-C4烷基-、二苯基-C1-C4烷基-、杂芳基和杂芳基-C1-C4烷基-。在一些实施方案中，RZF和RZF'中的一者为H并且另一者选自由以下项组成的组：C1-C8烷基、C1-C8羟烷基、C1-C8氨基烷基、(C1-C4烷基氨基)-C1-C8烷基-、N,N-(C1-C4羟烷基)(C1-C4烷基)氨基-C1-C8烷基-、N,N-二(C1-C4烷基)氨基-C1-C8烷基-、N-(C1-C4羟烷基)-C1-C8氨基烷基、C1-C8烷基-C(O)-、C1-C8羟烷基-C(O)-、C1-C8氨基烷基-C(O)-、C3-C10环烷基、(C3-C10环烷基)-C1-C4烷基-、C3-C10杂环烷基、(C3-C10杂环烷基)-C1-C4烷基-、苯基、苯基-C1-C4烷基-、二苯基-C1-C4烷基-、杂芳基和杂芳基-C1-C4烷基-。在一些实施方案中，RZF和RZF'中的一者选自由以下项组成的组：C1-C8烷基、C1-C8羟烷基、C1-C8氨基烷基、(C1-C4烷基氨基)-C1-C8烷基-、N,N-(C1-C4羟烷基)(C1-C4烷基)氨基-C1-C8烷基-、N,N-二(C1-C4烷基)氨基-C1-C8烷基-、N-(C1-C4羟烷基)-C1-C8氨基烷基、C1-C8烷基-C(O)-、C1-C8羟烷基-C(O)-、C1-C8氨基烷基-C(O)-、C3-C10环烷基、(C3-C10环烷基)-C1-C4烷基-、C3-C10杂环烷基、(C3-C10杂环烷基)-C1-C4烷基-、苯基、苯基-C1-C4烷基-、二苯基-C1-C4烷基-、杂芳基和杂芳基-C1-C4烷基-，并且另一者选自由以下项组成的组：H、C1-C8烷基、C1-C8羟烷基、C1-C8氨基烷基、(C1-C4烷基氨基)-C1-C8烷基-、N,N-(C1-C4羟烷基)(C1-C4烷基)氨基-C1-C8烷基-、N,N-二(C1-C4烷基)氨基-C1-C8烷基-、N-(C1-C4羟烷基)-C1-C8氨基烷基、C1-C8烷基-C(O)-、C1-C8羟烷基-C(O)-、C1-C8氨基烷基-C(O)-、C3-C10环烷基、(C3-C10环烷基)-C1-C4烷基-、C3-C10杂环烷基、(C3-C10杂环烷基)-C1-C4烷基-、苯基、苯基-C1-C4烷基-、二苯基-C1-C4烷基-、杂芳基和杂芳基-C1-C4烷基-。在一些实施方案中，RZF和RZF'均独立地选自由以下项组成的组：C1-C8烷基、C1-C8羟烷基、C1-C8氨基烷基、(C1-C4烷基氨基)-C1-C8烷基-、N,N-(C1-C4羟烷基)(C1-C4烷基)氨基-C1-C8烷基-、N,N-二(C1-C4烷基)氨基-C1-C8烷基-、N-(C1-C4羟烷基)-C1-C8氨基烷基、C1-C8烷基-C(O)-、C1-C8羟烷基-C(O)-、C1-C8氨基烷基-C(O)-、C3-C10环烷基、(C3-C10环烷基)-C1-C4烷基-、C3-C10杂环烷基、(C3-C10杂环烷基)-C1-C4烷基-、苯基、苯基-C1-C4烷基-、二苯基-C1-C4烷基-、杂芳基和杂芳基-C1-C4烷基-。
在一些实施方案中，RZF或RZF’的环烷基、杂环烷基、苯基和杂芳基部分被0至3个取代基取代，所述取代基选自由以下项组成的组：卤素、C1-C4烷基、-OH、-OC1-C4烷基、-NH2、-NHC1-C4烷基和-N(C1-C4烷基)2。
在一些实施方案中，RZF和RZF’与各自连接的氮原子组合以形成具有0至3个取代基的5元、6元或7元环，所述取代基选自由以下项组成的组：卤素、C1-C4烷基、-OH、-OC1-C4烷基、-NH2、-NHC1-C4烷基和-N(C1-C4烷基)2。
在一些实施方案中，D并入AMDCPT的结构：
Figure BDA0003983088010000891
在一些实施方案中，D并入依喜替康的结构：
Figure BDA0003983088010000892
在一些实施方案中，D并入伊立替康的结构：
Figure BDA0003983088010000901
在一些实施方案中，抗体-药物缀合物或药物接头化合物的喜树碱药物单元通过缀合物或药物接头化合物的接头单元与喜树碱游离药物的胺或羟基的共价连接而并入喜树碱药物，所述喜树碱游离药物具有如下的D1a或D1b的结构：
Figure BDA0003983088010000902
或其盐，其中剑标指示D与药物接头部分的共价连接位点，
RZb1选自由任选地被-ORZa、-ORZa、-NHRZa和-SRZa取代的H、卤素、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、C1-C6烯基、(C6-C12芳基)-C1-C6烯基-组成的组，或者与RZb2或RZb5和居间原子组合以形成5元或6元碳环或杂环；
RZb2选自由H、卤素、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、-ORZa、-NHRZa和-SRZa组成的组，或者与RZb1或RZb3和居间原子组合以形成5元或6元碳环或杂环；
RZb3选自由H、卤素、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、-ORZa、-NHRZa和-SRZa组成的组，或者与RZb2或RZb4和居间原子组合以形成5元或6元碳环或杂环；
RZb4选自由H或卤素组成的组，或者与RZb3和居间原子组合以形成5元或6元碳环或杂环；
每个RZb5和RZb5’独立地选自由以下项组成的组：H、C1-C8烷基、C1-C8羟烷基、C1-C8氨基烷基、(C1-C4烷基氨基)-C1-C8烷基-、N,N-(C1-C4羟烷基)(C1-C4烷基)氨基-C1-C8烷基-、N,N-二(C1-C4烷基)氨基-C1-C8烷基-、N-(C1-C4羟烷基)-C1-C8氨基烷基-、C1-C8烷基-C(O)-、C1-C8羟烷基-C(O)-、C1-C8氨基烷基-C(O)-、C3-C10环烷基、(C3-C10环烷基)-C1-C4烷基-、C3-C10杂环烷基、(C3-C10杂环烷基)-C1-C4烷基-、苯基、苯基-C1-C4烷基-、二苯基-C1-C4烷基-、杂芳基和杂芳基-C1-C4烷基-、C1-C6烷氧基-C(O)-C1-C8氨基烷基-、C1-C6烷氧基-C(O)-N-(C1-C4烷基)氨基-C1-C8烷基-、C1-C6烷氧基-C(O)-(C3-C10杂环烷基)-、C1-C6烷氧基-C(O)-(C3-C10杂环烷基)-C1-C8烷基-、C1-C4烷基-SO2-C1-C8烷基-、NH2-SO2-C1-C8烷基-、(C3-C10杂环烷基)-C1-C4羟烷基-、C1-C6烷氧基-C(O)-(C3-C10杂环烷基)-C1-C8烷基-、苯基-C(O)-、苯基-SO2-和C1-C8羟烷基-C3-C10杂环烷基-，或者
RZb5和RZb5’与它们所连接的氮原子组合以形成具有0至3个取代基的5元、6元或7元环，所述取代基独立地选自由以下项组成的组：卤素、C1-C4烷基、-OH、-OC1-C4烷基、-NH2、-NH-C1-C4烷基、-N(C1-C4烷基)2、C1-C6烷氧基-C(O)-NH-、C1-C6烷氧基-C(O)-C1-C8氨基烷基-和C1-C8氨基烷基；或者
RZb5’为H，并且RZb5与RZb1和居间原子组合以形成5元或6元碳环或杂环；
其中RZb1、RZb2、RZb3、RZb4、RZb5和RZb5’的环烷基、碳环、杂环烷基、杂环、苯基和杂芳基部分被0至3个取代基取代，所述取代基独立地选自由以下项组成的组：卤素、C1-C4烷基、-OH、-OC1-C4烷基、-NH2、-NHC1-C4烷基和-N(C1-C4烷基)2；并且
每个RZa独立地选自由H、C1-C6烷基和C1-C6卤代烷基组成的组。
在式D1a或式D1b的一些实施方案中，RZb1、RZb2、RZb3和RZb4各自为氢。
在式D1a或式D1b的一些实施方案中，RZb1、RZb2和RZb4为氢，并且RZ3为卤素。在一些实施方案中，Rb3为氟。
在式D1a或式D1b的一些实施方案中，RZb2、RZb3和RZb4为氢，并且RZ3为卤素。在一些实施方案中，RZb1为氟。
在式D1a或式D1b的一些实施方案中，RZb2和RZb4为氢，并且RZb1和RZb3均为卤素。在一些实施方案中，RZb1和RZb3均为氟。
在式D1a或式D1b的一些实施方案中，RZb1、RZb3和RZb4为氢，并且RZb2为C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、卤素、-ORZa或–SRZa。在一些实施方案中，RZb2为C1-C6烷基或卤素。在一些实施方案中，RZb2为C1-C6烷基。在一些实施方案中，RZb2为甲基。在一些实施方案中，RZb2为C1-C6烷氧基。在一些实施方案中，RZb2为甲氧基。在一些实施方案中，RZb2为卤素。在一些实施方案中，RZb2为氟。在一些实施方案中，RZb2为氯。在一些实施方案中，RZb2为溴。在一些实施方案中，RZb2为C1-C6卤代烷基。在一些实施方案中，RZb2为三氟甲基。在一些实施方案中，RZb2为C1-C6卤代烷硫基。在一些实施方案中，RZb2为三氟甲硫基。在一些实施方案中，RZb2为羟基。
在式D1a或式D1b的一些实施方案中，RZb1和RZb4为氢，RZb2为C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、卤素、-ORZa或–SRZa；并且RZb3为C1-C6烷基或卤素。在一些实施方案中，RZb2为C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、卤素或羟基，并且RZb3为C1-C6烷基或卤素。在一些实施方案中，RZb2为C1-C6烷基。在一些实施方案中，RZb2为甲基。在一些实施方案中，RZb2为C1-C6烷氧基。在一些实施方案中，Rb2为卤素。在一些实施方案中，RZb2为氟。在一些实施方案中，RZb2为甲氧基。在一些实施方案中，RZb2为羟基。在一些实施方案中，RZb3为C1-C6烷基。在一些实施方案中，RZb3为甲基。在一些实施方案中，RZb3为卤素。在一些实施方案中，RZb3为氟。在一些实施方案中，RZb2为C1-C6烷基，并且RZb3为卤素。在一些实施方案中，RZb2为甲基，并且RZb3为氟。在一些实施方案中，RZb2为C1-C6烷氧基，并且RZb3为卤素。在一些实施方案中，RZb2为甲氧基，并且RZb3为氟。在一些实施方案中，RZb2和RZb3为卤素。在一些实施方案中，RZb2和RZb3均为氟。在一些实施方案中，RZb2为卤素，并且RZb3为C1-C6烷基。在一些实施方案中，RZb2为氟，并且RZb3为甲基。在一些实施方案中，RZb2为羟基，并且RZb3为卤素。在一些实施方案中，RZb2为羟基，并且RZb3为氟。
在式D1a或式D1b的一些实施方案中，RZb2为C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、卤素、-ORZa或–SRZa；RZb1和RZb3均独立地选自由任选地被-ORZa或–ORZa取代的C1-C6烷基、卤素、C1-C6烯基、(C6-C12芳基)-C1-C6烯基组成的组；并且RZb4为氢。在一些实施方案中，RZb1为C1-C6烷基。在一些实施方案中，RZb1为甲基。在一些实施方案中，RZb1为卤素。在一些实施方案中，RZb1为氟。在一些实施方案中，RZb1为氯。在一些实施方案中，RZb1为溴。在一些实施方案中，RZb1为任选地被-ORZa取代的(C6-C12芳基)-C1-C6烯基-。在一些实施方案中，RZb1为4-甲氧基苯乙烯基。在一些实施方案中，RZb1为C1-C6烯基。在一些实施方案中，RZb1为乙烯基。在一些实施方案中，RZb1为1-甲基乙烯基。在一些实施方案中，RZb1为1-甲基乙烯基。在一些实施方案中，RZb2为C1-C6烷基。在一些实施方案中，RZb2为甲基。在一些实施方案中，RZb2为C1-C6烷氧基。在一些实施方案中，RZb2为甲氧基。在一些实施方案中，RZb2为羟基。在一些实施方案中，RZb3为C1-C6烷基。在一些实施方案中，RZb3为甲基。在一些实施方案中，RZb3为乙基。在一些实施方案中，RZb3为C1-C6烷氧基。在一些实施方案中，RZb3为甲氧基。在一些实施方案中，RZb3为卤素。在一些实施方案中，RZb3为氟。在一些实施方案中，RZb3为氯。在一些实施方案中，RZb3为溴。在一些实施方案中，RZb2为C1-C6烷基，并且RZb1和RZb3为卤素。在一些实施方案中，RZb2为甲基，并且RZb1和RZb3均为氟。在一些实施方案中，RZb2为甲基，RZb1为氟，并且RZb3为溴。在一些实施方案中，RZb2为甲基，RZb1为溴，并且RZb3为氟。在一些实施方案中，RZb2为甲基，RZb1为氯，并且RZb3为氟。在一些实施方案中，RZb2为甲基，RZb1为氟，并且RZb3为氯。在一些实施方案中，RZb2为C1-C6烷氧基，并且RZb1和RZb3为卤素。在一些实施方案中，RZb2为甲氧基，并且RZb1和Rb3均为氟。在一些实施方案中，RZb2为甲氧基，RZb1为溴，并且RZb3为氟。在一些实施方案中，RZb2为甲氧基，RZb1为氟，并且RZb3为溴。在一些实施方案中，RZb2为羟基，并且RZb1和RZb3为卤素。在一些实施方案中，RZb2为羟基，并且RZb1和Rb3均为氟。在一些实施方案中，RZb1为卤素，并且RZb2和RZb3均为C1-C6烷基。在一些实施方案中，RZb1为氟，并且RZb2和RZb3均为甲基。在一些实施方案中，RZb1为氟，RZb2为甲基，并且RZb3为乙基。在一些实施方案中，RZb1和RZb2均为C1-C6烷基，并且RZb3为卤素。在一些实施方案中，RZb1和RZb2均为甲基，并且RZb3为氟。
在式D1a或式D1b的一些实施方案中，RZb1与RZb2和居间原子组合以形成5元或6元碳环或杂环。在一些实施方案中，药物具有如下的式D1a/b-I、式D1a/b-II或式D1a/b-III的结构：
Figure BDA0003983088010000941
在式D1a或式D1b的一些实施方案中，RZb2与RZb3和居间原子组合以形成5元或6元碳环或杂环；其中一个或多个氢任选地被氘替代。在一些实施方案中，药物具有如下的式D1a/b-IV、D1a/b-V、D1a/b-VI、D1a/b-VII、D1a/b-VIII或D1a/b-IX的结构：
Figure BDA0003983088010000951
在式D1的一些实施方案中，RZb5和RZb5’均为H。在一些实施方案中，RZb5为C1-C6烷基(例如，甲基、乙基)，并且RZb5’为H。
在式D1a或式D1b的一些实施方案中，RZb1与RZb5和居间原子组合以形成5元或6元碳环或杂环。在一些实施方案中，药物具有如下的式D1a/b-X的结构：
Figure BDA0003983088010000952
在一些实施方案中，D并入DNA小沟结合剂的结构。在一些实施方案中，D并入具有以下结构的吡咯并苯二氮
Figure BDA0003983088010000953
(PBD)化合物的结构：
Figure BDA0003983088010000961
在一些实施方案中，D是并入作为DNA小沟结合剂的药物PBD二聚体的PBD药物单元，并且具有式X的一般结构：
Figure BDA0003983088010000962
或其盐，其中：虚线表示互变异构双键；RZ2”具有式XI：
Figure BDA0003983088010000963
其中波浪线表示与式X结构的其余部分的共价连接位点；ArZ为任选取代的C5-7亚芳基；XZa来自用于缀合至接头单元的反应性或可活化基团，其中XZa选自包括以下项的组：-O-、-S-、-C(O)O-、-C(O)-、-NHC(O)-和-N(RZN)-，其中RZN为H或C1-C4烷基，以及(C2H4O)mzCH3，其中下标mz为1、2或3；以及以下任一种情况：
QZ1为单键；并且QZ2为单键或-ZZ-(CH2)nz-，其中ZZ选自由单键、O、S和NH组成的组；并且下标nz为1、2或3，或者(ii)QZ1为-CH＝CH-，并且QZ2为单键；并且
RZ2’为任选取代的C1-C4烷基或C5-10芳基基团，其任选地被一个或多个选自由卤基、硝基、氰基、C1-C6醚、C1-C7烷基、C3-C7杂环基和双氧基-C1-C3亚烷基组成的组的取代基取代，具体地被一个此类取代基取代，其中虚线指示与RZ2’的单键，或者RZ2’为任选取代的C1-C4亚烯基，其中虚线指示与RZ2’的双键；RZ6”和RZ9”独立地选自由H、RZ、OH、ORZ、SH、SRZ、NH2、NHRZ、NRZRZ’、硝基、Me3Sn和卤基组成的组；RZ7”选自由H、RZ、OH、ORZ、SH、SRZ、NH2、NHRZ、NRZRZ’、硝基、Me3Sn和卤基组成的组；并且RZ和RZ’独立地选自由任选取代的C1-C12烷基、任选取代的C3-C20杂环基和任选取代的C5-C20芳基组成的组；以下任一种情况：
RZ10”为H，并且RZ11”为OH或ORZA，其中RZA为C1-C4烷基，(b)RZ10”和RZ11”在与它们所键合的氮原子与碳原子之间形成氮-碳双键，或者(c)RZ10”为H并且RZ11”为SOzMZ，其中下标z为2或3，并且MZ为单价药学上可接受的阳离子，或者(d)RZ10’、RZ11’和RZ10”各自为H并且RZ11”为SOzMZ，或者RZ10’和RZ11’各自为H并且RZ10”和RZ11”在与它们所键合的氮原子与碳原子之间形成氮-碳双键，或者RZ10”、RZ11”和RZ10’各自为H并且RZ11’为SOzMZ，或者RZ10”和RZ11”各自为H并且RZ10’和RZ11’在与它们所键合的氮原子与碳原子之间形成氮-碳双键；其中下标z为2或3，并且MZ为单价药学上可接受的阳离子；并且
RZ″为C3-12亚烷基，其碳链任选地被一个或多个杂原子、具体地被O、S或NRZN2(其中RZN2为H或C1-C4烷基)中的一者和/或被芳环、具体地苯或吡啶中的一者中断；YZ和YZ’选自由O、S和NH组成的组；RZ6’、RZ7’、RZ9’分别选自与RZ6”、RZ7”和RZ9”相同的基团，并且RZ10’和RZ11’分别与RZ10”和RZ11”相同，其中如果RZ11”和RZ11’为SOzMZ，则每个MZ为单价药学上可接受的阳离子或一起表示二价药学上可接受的阳离子。
在一些实施方案中，并入作为DNA小沟结合剂的PBD二聚体的PBD药物单元具有式XI或XII的一般结构：
Figure BDA0003983088010000971
或其盐，其中：虚线指示互变异构双键；Q具有式XIV：
Figure BDA0003983088010000981
其中波浪线表示在任一取向上与YZ’和YZ的共价连接位点；Ar为被XZa取代的C5-7亚芳基基团并且以其他方式任选地被取代，其中XZa来自用于缀合至接头单元的可活化基团，其中XZa选自由以下项组成的组：-O-、-S-、-C(O)O-、-C(O)-、-NHC(O)-和–N(RZN)-，其中RZN为H或C1-C4烷基，以及(C2H4O)mzCH3，其中下标m为1、2或3；以及以下任一种情况：
QZ1为单键；并且QZ2为单键或-(CH2)nz-，其中下标nz为1、2或3，或者(ii)QZ1为-CH＝CH-，并且QZ2为单键或-CH＝CH-；并且
RZ2’为任选取代的C1-C4烷基或C5-10芳基基团，其任选地被一个或多个选自由卤基、硝基、氰基、C1-C6醚、C1-C7烷基、C3-C7杂环基和双氧基-C1-C3亚烷基的取代基取代，具体地被一个此类取代基取代，其中虚线指示与RZ2’的单键，或者RZ2’为任选取代的C1-C4亚烯基，其中虚线指示与RZ2’的双键；并且
RZ2”为任选取代的C1-C4烷基或C5-10芳基基团，其任选地被一个或多个选自由卤基、硝基、氰基、C1-C6醚、C1-C7烷基、C3-C7杂环基和双氧基-C1-C3亚烷基组成的组的取代基取代，具体地被一个此类取代基取代；RZ6”和RZ9”独立地选自由H、RZ、OH、ORZ、SH、SRZ、NH2、NHRZ、NRZRZ’、硝基、Me3Sn和卤基组成的组；RZ7”选自由H、RZ、OH、OR、SH、SRZ、NH2、NHRZ、NRZRZ’、硝基、Me3Sn和卤基组成的组；并且RZ和RZ’独立地选自由任选取代的C1-C12烷基、任选取代的C3-C20杂环基和任选取代的C5-C20芳基组成的组；以及以下任一种情况：
RZ10”为H，并且RZ11”为OH或ORZA，其中RZA为C1-C4烷基，或者(b)RZ10”和RZ11”在与它们所键合的氮原子与碳原子之间形成氮-碳双键，或者(c)RZ10”为H并且RZ11”为SOzMZ，其中下标z为2或3，并且MZ为单价药学上可接受的阳离子，或者(d)RZ10’、RZ11’和RZ10”各自为H并且RZ11”为SOzMZ，或者RZ10’和RZ11’各自为H并且RZ10”和RZ11”在与它们所键合的氮原子与碳原子之间形成氮-碳双键，或者RZ10”、RZ11”和RZ10’各自为H并且RZ11’为SOzMZ，或者RZ10”和RZ11”各自为H并且RZ10’和RZ11’在与它们所键合的氮原子与碳原子之间形成氮-碳双键；其中下标z为2或3，并且MZ为单价药学上可接受的阳离子；并且
YZ和YZ’选自由O、S和NH组成的组；RZ”表示一个或多个任选的取代基；并且RZ6’、RZ7’、RZ9’分别选自与RZ6”、RZ7”和RZ9”相同的基团，并且RZ10’和RZ11’分别与RZ10”和RZ11”相同，其中如果RZ11”和RZ11’为SOzMZ，则每个MZ为单价药学上可接受的阳离子或一起表示二价药学上可接受的阳离子。
在一些实施方案中，PBD二聚体具有式X、式XII或式XIII的一般结构，其中一个RZ7”选自由H、OH和ORZ组成的组，其中RZ如先前针对每个式所定义，或者为C1-4烷氧基基团，具体地RZ7”为–OCH3。在一些实施方案中，YZ和YZ’为O，RZ9”为H，或者RZ6”选自由H和卤基组成的组。
在一些实施方案中，PBD二聚体具有式X的一般结构，其中ArZ为亚苯基；XZa选自由-O-、-S-和-NH-组成的组；并且QZ1为单键，并且在式XII的一些实施方案中，ArZ为亚苯基，XZ选自由-O-、-S-和-NH-组成的组，QZ1为-CH2-，并且QZ2为-CH2-。
在一些实施方案中，PBD二聚体具有式X的一般结构，其中XZa为NH。在一些实施方案中，PBD药物单元具有式X，其中QZ1为单键，并且QZ2为单键。
在一些实施方案中，PBD二聚体具有式X、式XII或式XIII的一般结构，其中RZ2’为任选取代的C5-7芳基基团，使得虚线指示与RZ2’的单键，并且取代基当存在时独立地选自由卤基、硝基、氰基、C1-7烷氧基、C5-20芳氧基、C3-20杂环氧基、C1-7烷基、C3-7杂环基和双氧基-C1-3亚烷基组成的组，其中C1-7烷氧基基团任选地被氨基基团取代，并且如果C3-7杂环基为C6含氮杂环基基团，则其任选地被C1-4烷基基团取代。
在一些实施方案中，PBD二聚体具有式X、式XI或式XII的一般结构，其中ArZ为任选取代的苯基，其在被取代时具有一至三个此类取代基。
在一些实施方案中，PBD二聚体具有式X、式XI或式XII的一般结构，其中RZ10”和RZ11”形成氮-碳双键并且/或者RZ6’、RZ7’、RZ9’和YZ’分别与RZ6”、RZ7”、RZ9”和YZ相同。
在一些实施方案中，PBD药物单元具有以下结构：
Figure BDA0003983088010001001
Figure BDA0003983088010001011
或其盐，其中剑标表示药物接头化合物或抗体-药物缀合物中药物单元与接头单元的连接点。
在一些实施方案中，PBD药物单元具有以下结构：
Figure BDA0003983088010001012
或其盐，其中剑标表示药物接头化合物或抗体-药物缀合物中药物单元与接头单元的连接点。
在一些实施方案中，药物单元并入蒽环类化合物的结构。不受理论束缚，这些化合物的细胞毒性在一定程度上也可能是由于拓扑异构酶抑制引起的。在这些实施方案的一些中，蒽环类化合物具有Minotti,G.等人，“Anthracyclins:molecular advances andpharmacologic developments in antitumor activity and cardiotoxicity”PharmacolRev.(2004)56(2):185-229中公开的结构。在一些实施方案中，蒽环类化合物是多柔比星、伊达比星、柔红霉素、多柔比星丙基噁唑啉(DPO)、吗啉代多柔比星或氰基吗啉代多柔比星。
在一些实施方案中，药物单元(D)来自细胞抑制剂。在一些实施方案中，D来自具有1nM至100nM范围内的细胞抑制活性的化合物。在一些实施方案中，药物单元(D)来自细胞毒性剂。在一些实施方案中，D来自细胞毒性活性的IC50值在1nM至100nM范围内的细胞毒性剂。存在若干种用于确定ADC是否对细胞系发挥细胞抑制或细胞毒性作用的方法。在用于确定ADC是否对细胞系发挥细胞抑制或细胞毒性作用的一个示例中，使用胸苷掺入测定。例如，将96孔板的密度为5,000个细胞/孔的细胞培养72小时时段，并在72小时时段的最后8小时期间暴露于0.5μCi的3H-胸苷，并且在存在和不存在ADC的情况下测量3H-胸苷向培养物的细胞中的掺入。如果与在相同条件下培养但未与ADC接触的相同细胞系的细胞相比，培养物的细胞具有减少的3H-胸苷掺入，则ADC对细胞系具有细胞抑制或细胞毒性作用。
又如，为了确定ADC是否对细胞系发挥细胞抑制或细胞毒性作用，通过确定细胞中染料诸如中性红、台盼蓝或ALAMARTM蓝的摄取量来测量细胞活力(参见例如Page等人，1993,Intl.J.of Oncology 3:473-476)。在这种测定中，将细胞在含有染料的培养基中温育，洗涤细胞，并且通过分光光度法测量剩余染料，以反映染料的细胞摄取。蛋白结合染料磺酰罗丹明B(SRB)可用于测量细胞毒性(Skehan等人，1990,J.Nat’lCancer Inst.82:1107-12)。优选的ADC包括在细胞系上具有小于1000ng/mL、例如小于500ng/mL、小于100ng/ml或小于50ng/mL或甚至小于10ng/mL的IC50值(定义为给出50％细胞杀伤率的mAB浓度)的那些。
在一些实施方案中，D来自细胞毒性剂或细胞抑制剂，所述细胞毒性剂或细胞抑制剂具有预期不会在体外提供其中DAR为8的足够活性的ADC的细胞效能。
在一些实施方案中，D来自亲水性细胞毒性剂或细胞抑制剂(即，D具有cLogP≤1)。在一些实施方案中，D来自疏水性细胞毒性剂或细胞抑制剂(即，D具有cLogP>1)。在一些实施方案中，D来自cLogP为约-3至约3，例如约-3、约-2.5、约-2、约-1.5、约-1、约-0.5、约0、约0.5、约1、约1.5、约2、约2.5、约3或其间的任何值的细胞毒性剂或细胞抑制剂。在一些实施方案中，D来自cLogP为约-3至约1，例如约-3、约-2.5、约-2、约-1.5、约-1、约-0.5、约0、约0.5、约1或其间的任何值的细胞毒性剂或细胞抑制剂。在一些实施方案中，D来自cLogP为约-1至约1，例如约-1、约-0.75、约-0.5、约-0.25、约0、约0.25、约0.5、约0.75、约1或其间的任何值的细胞毒性剂或细胞抑制剂。在一些实施方案中，D来自cLogP为约0至约1，例如约0、约0.1、约0.2、约0.3、约0.4、约0.5、约0.6、约0.7、约0.8、约0.9、约1或其间的任何值的细胞毒性剂或细胞抑制剂。在一些实施方案中，D来自cLogP为约1至约6，例如约1、约1.5、约2、约2.5、约3、约3.5、约4、约4.5、约5、约5.5、约6或其间的任何值的细胞毒性剂或细胞抑制剂。在一些实施方案中，D来自cLogP为约3至约6，例如约3、约3.5、约4、约4.5、约5、约5.5、约6或其间的任何值的细胞毒性剂或细胞抑制剂。
在一些实施方案中，D来自极性表面积为约
Figure BDA0003983088010001031
至约
Figure BDA0003983088010001032
例如约
Figure BDA0003983088010001033
约
Figure BDA0003983088010001034
约
Figure BDA0003983088010001035
约
Figure BDA0003983088010001036
约
Figure BDA0003983088010001037
约
Figure BDA0003983088010001038
约
Figure BDA0003983088010001039
约
Figure BDA00039830880100010310
或其间的任何值的细胞毒性剂或细胞抑制剂。在一些实施方案中，D来自极性表面积为约
Figure BDA00039830880100010311
至约
Figure BDA00039830880100010312
例如约
Figure BDA00039830880100010313
约
Figure BDA00039830880100010314
约
Figure BDA00039830880100010315
约
Figure BDA00039830880100010316
约
Figure BDA00039830880100010317
或其间的任何值的细胞毒性剂或细胞抑制剂。在一些实施方案中，D来自极性表面积为约
Figure BDA00039830880100010318
至约
Figure BDA00039830880100010319
例如约
Figure BDA00039830880100010320
约
Figure BDA00039830880100010321
约
Figure BDA00039830880100010322
约
Figure BDA00039830880100010323
约
Figure BDA00039830880100010324
或其间的任何值的细胞毒性剂或细胞抑制剂。在一些实施方案中，D来自极性表面积为约
Figure BDA00039830880100010325
至约
Figure BDA00039830880100010326
例如约
Figure BDA00039830880100010327
约
Figure BDA00039830880100010328
约
Figure BDA00039830880100010329
约
Figure BDA00039830880100010330
约
Figure BDA00039830880100010331
或其间的任何值的细胞毒性剂或细胞抑制剂。在一些实施方案中，D来自极性表面积为约
Figure BDA00039830880100010332
至约
Figure BDA00039830880100010333
例如约
Figure BDA00039830880100010334
约
Figure BDA00039830880100010335
约
Figure BDA00039830880100010336
或其间的任何值的细胞毒性剂或细胞抑制剂。
在一些实施方案中，D来自DNA复制抑制剂诸如吉西他滨，或微管蛋白干扰剂诸如MMAE或MMAF。在一些实施方案中，D来自吉西他滨。在一些实施方案中，D来自MMAE。在一些实施方案中，D来自MMAF。在一些实施方案中，D来自ATP产生的抑制剂，诸如NAMPT抑制剂。
在一些实施方案中，D来自具有下式的NAMPT抑制剂：
Figure BDA0003983088010001041
其中D在aa或bb氮原子处共价连接至L2。
药物-接头化合物
在一些实施方案中，D具有与L1(当M和L2均不存在时)、与M(当L2不存在时)或与L2形成键的原子。在一些实施方案中，与L1、M或L2形成键的来自D的原子为氮原子。在一些实施方案中，与L1、M或L2形成键的来自D的原子为在形成键时季铵化的氮原子。在一些实施方案中，与L1、M或L2形成键的来自D的原子为来自硫醇基团的硫原子。在一些实施方案中，与L1、M或L2形成键的来自D的原子为来自羟基基团的氧原子。在一些实施方案中，羟基基团存在于游离药物中。在一些实施方案中，羟基基团通过还原游离药物中存在的羰基基团来产生。在一些实施方案中，与L1、M或L2形成键的来自D的原子为连接至羟基基团的碳原子，所述羟基基团在形成键之前为游离药物中的羰基基团。在一些实施方案中，D经由羧酸基团与L1、M或L2形成键。
在一些实施方案中，D包含在生理pH下带负电荷的官能团，例如羧酸或磷酸酯。在一些实施方案中，D包含在生理pH下带正电荷的官能团，例如胺。在一些实施方案中，当D在生理pH下包含带负电荷的官能团时，L1(当M和L2均不存在时)、M(当L2不存在时)或L2(当存在时)包含在生理pH下带正电荷的官能团。在一些实施方案中，当D在生理pH下包含带正电荷的官能团时，L1(当M和L2均不存在时)、M(当L2不存在时)或L2(当存在时)包含在生理pH下带负电荷的官能团。在一些实施方案中，D在生理pH下不带电荷。在一些实施方案中，D在生理pH下具有零净电荷。在一些实施方案中，当D在生理pH下不带电荷或具有零净电荷时，L1(当M和L2均不存在时)、M(当L2不存在时)或L2(当存在时)在生理pH下不带电荷或具有零净电荷。
在一些实施方案中，每个L2-D在生理pH下不带电荷或具有净零电荷。在一些实施方案中，每个L2-D在生理pH下不具有带电物质(即，不带电荷)。在一些实施方案中，每个L2-D在生理pH下是两性离子的。在一些实施方案中，每个L2-D包含羧酸酯和含铵部分。在一些实施方案中，含铵部分是含季铵部分。在一些实施方案中，含季铵部分是吡啶鎓。在一些实施方案中，L2是阴离子的；并且D是阳离子的。在一些实施方案中，L2包含含羧酸酯部分；并且D包含含铵部分。
在一些实施方案中，每个L1-(M)x-(D)y(当L2不存在时)在生理pH下不具有带电物质。在一些实施方案中，每个L1-(M)x-(D)y(当L2不存在时)在生理pH下是两性离子的。在一些实施方案中，每个L1-(M)x-(D)y(当L2不存在时)包含羧酸酯和含铵部分。在一些实施方案中，含铵部分是含季铵部分。在一些实施方案中，季铵部分是吡啶鎓。在一些实施方案中，L1-(M)x是阴离子的；并且D是阳离子的。在一些实施方案中，L1-(M)x包含含羧酸酯部分；并且D包含含铵部分。
在一些实施方案中，每个L1-D(当M和L2不存在时)在生理pH下不具有带电物质。在一些实施方案中，每个L1-D(当M和L2不存在时)在生理pH下是两性离子的。在一些实施方案中，每个L1-D(当M和L2不存在时)包含羧酸酯和含铵部分。在一些实施方案中，铵部分是季铵部分。在一些实施方案中，含季铵部分是吡啶鎓。在一些实施方案中，L1是阴离子的；并且D是阳离子的。在一些实施方案中，L1包含含羧酸酯部分；并且D包含含铵部分。
用于将药物连接至接头的一般程序是本领域已知的。参见例如美国专利号8,163,888、7,659,241、7,498,298，美国公布号US20110256157和国际申请号WO2011023883和WO2005112919，其中每一篇以引用方式并入本文，特别是关于前述一般程序。
在一些实施方案中，D在生理pH下具有+1的电荷；并且L2选自由以下项组成的组：
Figure BDA0003983088010001061
其中dd是与D的共价连接点；并且Rg1为卤素、-CN或-NO2。
在一些实施方案中，D在生理pH下不带电荷；并且L2选自由以下项组成的组：
Figure BDA0003983088010001062
其中dd是与D的共价连接点；并且Rg1为卤素、-CN或-NO2。
在一些实施方案中，L2选自由以下项组成的组：
Figure BDA0003983088010001071
其中Rg1为卤素、-CN或-NO2；D*为作为D部分的一部分的阳离子；dd表示与D的其余部分的共价连接点；并且D(包括D*在内)在生理pH下具有+1的电荷。
在一些实施方案中，D*为吡啶鎓。例如，D*可以是
Figure BDA0003983088010001072
在一些其他实施方案中，D*为
Figure BDA0003983088010001073
其中每个Rd1独立地为C1-6烷基。
在一些实施方案中，L2选自由以下项组成的组：
Figure BDA0003983088010001074
其中Rg1为卤素、-CN或-NO2；D*为作为D部分的一部分的阳离子；dd表示与D的其余部分的共价连接点；并且D(包括D*在内)在生理pH下是两性离子的。
在本文所述的ADC的一些实施方案中，D与Ab的比率为8:1至64:1。在一些实施方案中，D与Ab的比率为8:1至16:1。在一些实施方案中，D与Ab的比率为8:1至32:1。在一些实施方案中，D与Ab的比率为16:1至64:1。在一些实施方案中，D与Ab的比率为16:1至32:1。在一些实施方案中，D与Ab的比率为32:1至64:1。在一些实施方案中，D与Ab的比率为8:1。在一些实施方案中，D与Ab的比率为16:1。在一些实施方案中，D与Ab的比率为32:1。在一些实施方案中，D与Ab的比率为64:1。
在本文所述的ADC的一些实施方案中，D与Ab的比率为8:1；下标y为4；并且下标p为2。在一些实施方案中，D与Ab的比率为8:1；下标y为2；并且下标p为4。在一些实施方案中，D与Ab的比率为16:1；下标y为8；并且下标p为2。在一些实施方案中，D与Ab的比率为16:1；下标y为4；并且下标p为4。在一些实施方案中，D与Ab的比率为16:1；下标y为2；并且下标p为8。
聚乙二醇(PEG)单位
多分散PEG、单分散PEG和离散PEG可用于制备本文所述的ADC及其中间体。多分散PEG是大小和分子量的非均匀混合物，而单分散PEG通常从非均匀混合物中纯化，因此提供单一链长度和分子量。离散PEG以逐步方式合成，而非经由聚合方法合成。离散PEG提供具有限定和指定链长度的单个分子。PEG单元的-CH2CH2O-亚基的数量在例如2至72、8至24或12至24的范围内，分别称为PEG2至PEG72、PEG8至PEG24和PEG12至PEG24。
本文提供的PEG也称为PEG单元，其包含一个或多个聚乙二醇链。聚乙二醇链例如以直链、支链或星形构型连接在一起。通常，PEG单元的至少一个聚乙二醇链在一端衍生化以共价连接至ADC的组分(例如，L)上的适当位点。ADC的示例性连接是通过非条件性可裂解键或经由条件性可裂解键实现的。示例性连接是经由酰胺键、醚键、酯键、腙键、肟键、二硫键、肽键或三唑键实现的。
一般来讲，构成PEG单元的至少一个聚乙二醇链被官能化以提供与ADC的共价连接。作为PEG单元前体的含聚乙二醇的化合物的官能化包括例如经由胺、硫醇、NHS酯、马来酰亚胺、炔烃、叠氮化物、羰基或其他官能团实现的。在一些实施方案中，PEG单元还包含非PEG材料(即，不包含–CH2CH2O-的材料)，其提供与ADC的偶联或在构建含聚乙二醇的化合物或PEG时促进两个或更多个聚乙二醇链的偶联。
在一些实施方案中，通过非条件性可裂解键连接至ADC。在一些实施方案中，与ADC的连接不是经由酯键、腙键、肟键或二硫键实现的。在一些实施方案中，与ADC的连接不是经由腙键实现的。如果如本文所述的具有不带电荷或净零电荷药物-接头部分的高DAR ADC仍然表现出一种或多种不令人满意的生物物理特性，则添加PEG单元可以改善这些一种或多种特性。例如，如本文和WO 2015/057699(其公开内容全文以引用方式并入)所述的支链PEG单元。
条件性可裂解键是指当在血浆中循环时基本上对裂解不敏感但在细胞内或肿瘤内环境中对裂解敏感的键。非条件性可裂解键是在施用ADC的受试者中在任何生物学相关环境中基本上对裂解不敏感的键。如本文和WO 2007/011968(其公开内容全文以引用方式并入)所述的腙的化学水解、二硫键的还原以及葡糖苷酸单元的肽键或糖苷键的酶促裂解是条件性可裂解键的示例。
在一些实施方案中，PEG单元在L1、M和/或L2处直接连接至ADC。在一些实施方案中，PEG单元的另一个末端(或多个末端)是游离的且非栓系的(即，未共价连接)，并且在一些实施方案中，采取甲氧基、羧酸、醇或其他合适的官能团的形式。甲氧基、羧酸、醇或其他合适的官能团充当PEG单元的末端聚乙二醇亚基的帽。所谓非栓系意指PEG单元在该非栓系位点将不共价连接至药物单元、抗体或药物单元和/或抗体的连接组分。这种排列允许足够长度的PEG单元相对于缀合形式的药物(即，作为药物单元(D))呈现平行取向。不受理论的束缚，据信该取向在游离药物具有不足亲水性的那些情况下掩蔽缀合药物的疏水性，从而有利于由不带电荷或具有净零电荷的药物接头部分内的多效物提供的较高负载，如本文所述。在一些实施方案中，PEG单元中的每个聚乙二醇链可以独立地选择，例如为相同或不同的化学部分(例如，具有不同分子量或数目的-CH2CH2O-亚基的聚乙二醇链)。具有多个聚乙二醇链的PEG单元在单个连接位点处连接至ADC。本领域的技术人员将会理解，除了包含重复的聚乙二醇亚基之外，PEG单元还可含有非PEG材料(例如，以促进多个聚乙二醇链彼此偶联或促进与ADC偶联)。非PEG材料是指PEG单元中不是重复的–CH2CH2O-亚基的一部分的原子。在一些实施方案中，PEG单元包含经由非PEG元件彼此连接的两个单体聚乙二醇链。在本文提供的其他实施方案中，PEG单元包含连接至中心核的两个线性聚乙二醇链，所述中心核连接至ADC(即，PEG单元本身是支链的)。
本领域的技术人员可利用多种PEG连接方法：例如，Goodson等人，(1990)Bio/Technology 8:343(PEGylation of interleukin-2at its glycosylation site aftersite-directed mutagenesis)；EP 0 401 384(coupling PEG to G-CSF)；Malik等人，(1992)Exp.Hematol.20:1028-1035(PEGylation of GM-CSF using tresyl chloride)；ACT公布号WO 90/12874(PEGylation of erythropoietin containing a recombinantlyintroduced cysteine residue using a cysteine-specific mPEG derivative)；美国专利号5,757,078(PEGylation of EPO peptides)；美国专利号5,672,662(Poly(ethyleneglycol)and related polymers monosubstituted with propionic or butanoic acidsand functional derivatives thereof for biotechnical applications)；美国专利号6,077,939(PEGylation of an N-terminal.alpha.-carbon of a peptide)；Veronese等人，(1985)Appl.Biochem.Bioechnol 11:141-142(PEGylation of an N-terminalα-carbon of a peptide with PEG-nitrophenylcarbonate("PEG-NPC")or PEG-trichlorophenylcarbonate)；以及Veronese(2001)Biomaterials22:405-417(Reviewarticle on peptide and protein PEGylation)。
在一些实施方案中，PEG单元可经由含聚乙二醇的化合物和氨基酸残基的反应性基团共价键合至氨基酸残基。氨基酸残基的反应性基团包括对活化的PEG分子具有反应性的那些(例如，游离氨基或羧基基团)。例如，N端氨基酸残基和赖氨酸(K)残基具有游离氨基基团；并且C端氨基酸残基具有游离羧基基团。硫醇基团(例如，如存在于半胱氨酸残基上)也可用作与PEG形成共价连接的反应性基团。此外，已经描述了用于在多肽的C端处特异性引入活化基团(例如，酰肼、醛和芳族氨基基团)的酶辅助方法(参见Schwarz等人，(1990)Methods Enzymol.184:160；Rose等人，(1991)Bioconjugate Chem.2:154；以及Gaertner等人，(1994)J.Biol.Chem.269:7224)。
在一些实施方案中，含聚乙二醇的化合物使用具有不同反应性部分的甲氧基化PEG(“mPEG”)与氨基基团形成共价连接。此类反应性部分的非限制性示例包括琥珀酰亚胺基琥珀酸酯(SS)、琥珀酰亚胺基碳酸酯(SC)、mPEG-亚氨酸酯、对硝基苯基碳酸酯(NPC)、琥珀酰亚胺基丙酸酯(SPA)和氰尿酰氯。此类mPEG的非限制性示例包括mPEG-琥珀酰亚胺基琥珀酸酯(mPEG-SS)、mPEG2-琥珀酰亚胺基琥珀酸酯(mPEG2-SS)；mPEG-琥珀酰亚胺基碳酸酯(mPEG-SC)、mPEG2-琥珀酰亚胺基碳酸酯(mPEG2-SC)；mPEG-亚氨酸酯、mPEG-对硝基苯基碳酸酯(mPEG-NPC)、mPEG-亚氨酸酯；mPEG2-对硝基苯基碳酸酯(mPEG2-NPC)；mPEG-琥珀酰亚胺基丙酸酯(mPEG-SPA)；mPEG2-琥珀酰亚胺基丙酸酯(mPEG--SPA)；mPEG-N-羟基-琥珀酰亚胺(mPEG-NHS)；mPEG2-N-羟基-琥珀酰亚胺(mPEG2--NHS)；mPEG-氰尿酰氯；mPEG2-氰尿酰氯；mPEG2-赖氨醇-NPC和mPEG2-lys-NHS。
在一些实施方案中，ADC中PEG单元的存在能够对所得ADC的药代动力学具有两种潜在影响。一种影响是由于药物单元(诸如包含疏水性游离药物的药物单元)的暴露的疏水性元件诱导的非特异性相互作用的减少而引起的清除率的降低(以及随之而来的暴露增加)。第二个影响是有时由于ADC的分子量增大引起的体积和分布率的降低。增加聚乙二醇亚基的数目也会增大缀合物的流体动力学半径，通常导致降低的扩散性。继而，降低的扩散性通常会降低ADC渗透到肿瘤中的能力(Schmidt和Wittrup，Mol Cancer Ther 2009；8:2861-2871)。由于这两种竞争性药代动力学效应，可能需要使用PEG单元，其足够大以降低ADC清除率，从而增加血浆暴露，但不会大到使其扩散性大大减小到干扰ADC到达预期靶细胞群体的能力的程度。有关用于为特定疏水性药物-接头部分选择PEG单元的最佳大小的方法，参见例如美国公布号2016/0310612的实施例1、18和21，该美国公布以引用方式并入本文。
在一些实施方案中，PEG单元包含一个或多个线性聚乙二醇链，所述线性聚乙二醇链各自具有至少2个亚基、至少3个亚基、至少4个亚基、至少5个亚基、至少6个亚基、至少7个亚基、至少8个亚基、至少9个亚基、至少10个亚基、至少11个亚基、至少12个亚基、至少13个亚基、至少14个亚基、至少15个亚基、至少16个亚基、至少17个亚基、至少18个亚基、至少19个亚基、至少20个亚基、至少21个亚基、至少22个亚基、至少23个亚基或至少24个亚基。在一些实施方案中，PEG包含总共至少8个亚基、至少10个亚基或至少12个亚基。在一些此类实施方案中，PEG包含不超过总共约72个亚基。在一些此类实施方案中，PEG包含不超过总共约36个亚基。在一些实施方案中，PEG包含约8个至约24个亚基(称为PEG8至PEG24)。
在一些实施方案中，PEG单元包含总共2至72、2至60、2至48、2至36或2至24个亚基，3至72、3至60、3至48、3至36或3至24个亚基，4至72、8至60、4至48、4至36或4至24个亚基，5至72、5至60、5至48、5至36或5至24个亚基，6至72、6至60、6至48、6至36或6至24个亚基，7至72、7至60、7至48、7至36或7至24个亚基，8至72、8至60、8至48、8至36或8至24个亚基，9至72、9至60、9至48、9至36或9至24个亚基，10至72、10至60、10至48、10至36或10至24个亚基，11至72、11至60、11至48、11至36或11至24个亚基，12至72、12至60、12至48、12至36或12至24个亚基，13至72、13至60、13至48、13至36或13至24个亚基，14至72、14至60、14至48、14至36或14至24个亚基，15至72、15至60、15至48、15至36或15至24个亚基，16至72、16至60、16至48、16至36或16至24个亚基，17至72、17至60、17至48、17至36或17至24个亚基，18至72、18至60、18至48、18至36或18至24个亚基，19至72、19至60、19至48、19至36或19至24个亚基，20至72、20至60、20至48、20至36或20至24个亚基，21至72、21至60、21至48、21至36或21至24个亚基，22至72、22至60、22至48、22至36或22至24个亚基，23至72、23至60、23至48、23至36或23至24个亚基，或者24至72、24至60、24至48、24至36或24个亚基。在一些实施方案中，PEG单元包含总共2至24个亚基、2至16个亚基、2至12个亚基、2至8个亚基或2至6个亚基的组合。
可用于本文提供的任一实施方案中的例示性线性PEG如下：
Figure BDA0003983088010001141
其中波浪线指示与ADC的连接位点；每个下标b独立地选自由2至12组成的组；并且每个下标c独立地选自由1至72、8至72、10至72、12至72、6至24或8至24组成的组。在一些实施方案中，每个下标b为2至6。在一些实施方案中，每个下标c为约2、约4、约8、约12或约24。
如本文所述，PEG单元可被选择为使得其提高所得ADC的清除率，但不显著影响ADC渗透到肿瘤中的能力。在其中药物单元和ADC的集合接头/多效物缀合物具有与马来酰亚胺基衍生的葡糖苷酸MMAE药物单元相当的SlogP值的实施方案中，PEG单元具有约8个亚基至约24个亚基。在实施方案中，PEG单元具有约12个亚基。在其中药物单元和ADC的集合接头/多效物缀合物的SlogP值大于马来酰亚胺基衍生的葡糖苷酸MMAE药物单元的SlogP值的实施方案中，有时需要具有更多亚基的PEG单元。
在一些实施方案中，PEG单元为约300道尔顿至约5千道尔顿；约300道尔顿至约4千道尔顿；约300道尔顿至约3千道尔顿；约300道尔顿至约2千道尔顿；约300道尔顿至约1千道尔顿；或其间的任何值。在一些实施方案中，PEG具有至少8、10或12个亚基。在一些实施方案中，PEG单元是PEG2至PEG72，例如PEG2、PEG4、PEG8、PEG10、PEG12、PEG16、PEG20、PEG24、PEG28、PEG32、PEG36、PEG48或PEG72。
在一些实施方案中，除ADC的PEG化之外，ADC中不存在其他PEG亚基(即，没有PEG亚基作为本文提供的缀合物和接头的任何其他组分的一部分存在)。在一些实施方案中，除PEG之外，ADC中存在不超过8个、不超过7个、不超过6个、不超过5个、不超过4个、不超过3个、不超过2个或不超过1个其他聚乙二醇(-CH2CH2O-)亚基(即，在本文提供的ADC的其他组分中不超过8、7、6、5、4、3、2或1个其他聚乙二醇亚基)。
应当理解，当提及PEG单元的聚乙二醇亚基时，并且根据上下文，亚基的数目可表示平均数，例如当提及ADC群体和/或使用多分散PEG时。
抗体
如本文所用的术语“抗体”涵盖完整单克隆抗体、多克隆抗体、单特异性抗体、多特异性抗体(例如，双特异性抗体)，包括完整抗体和抗原结合抗体片段，以及其还原形式，其中一个或多个链间二硫键被破坏，其表现出期望的生物活性，并且前提条件是抗原结合抗体片段具有用于期望数目的连接基团诸如接头(L)的所需数目的连接位点，如本文所述。在一些方面，接头经由琥珀酰亚胺或水解琥珀酰亚胺连接至抗体，所述琥珀酰亚胺或水解琥珀酰亚胺连接至还原的链间二硫键的半胱氨酸残基和/或通过基因工程引入的半胱氨酸残基的硫原子。抗体的天然形式是四聚体，并且由两对相同的免疫球蛋白链组成，每一对具有一条轻链和一条重链。在每一对中，轻链可变区和重链可变区(VL和VH)一起主要负责结合至抗原。轻链可变区和重链可变区由被三个高变区中断的骨架区组成，所述高变区也称为“互补决定区”或“CDR”。轻链和重链还含有可被免疫系统识别并与其相互作用的恒定区。(参见例如Janeway等人，2001,Immuno.Biology，第5版，Garland Publishing,New York)。抗体包括其任何同种型(例如，IgG、IgE、IgM、IgD和IgA)或亚类(例如，IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1和IgA2)。抗体可来源于任何合适的物种。在一些方面，抗体是人或鼠来源的，并且在一些方面，抗体是人、人源化或嵌合抗体。抗体可被岩藻糖基化至不同程度或无岩藻糖基化。
“完整抗体”是包含适用于抗体类别的抗原结合可变区以及轻链恒定结构域(CL)和重链恒定结构域CH1、CH2、CH3和CH4的抗体。恒定结构域是天然序列恒定结构域(例如，人天然序列恒定结构域)或其氨基酸序列变体。
“抗体片段”构成完整抗体的一部分，包括其抗原结合区或可变区。本公开的抗体片段包含至少一个半胱氨酸残基(天然的或经工程改造的)和/或至少一个赖氨酸残基(天然的或经工程改造的)，其提供接头和/或接头-药物化合物的连接位点。在一些实施方案中，抗体片段包括Fab、Fab′或F(ab′)2。
如本文所用，术语“经工程改造的半胱氨酸残基”或“eCys残基”是指并入抗体中的半胱氨酸氨基酸或其衍生物。在这些方面，一个或多个eCys残基可并入抗体中，并且通常，eCys残基被并入抗体的重链或轻链中。一般来讲，eCys残基向抗体中的并入通过用半胱氨酸或其衍生物诱变亲本抗体的核酸序列以编码一个或多个氨基酸残基来进行。合适的突变包括用半胱氨酸或其衍生物置换抗体的轻链或重链中的期望残基，在抗体的轻链或重链中的期望位置处并入另外的半胱氨酸或其衍生物，以及将另外的半胱氨酸或其衍生物添加到氨基酸的期望重链或轻链的N端和/或C端。另外的信息可见于美国专利号9,000,130中，该专利的内容全文并入本文。半胱氨酸(Cys)的衍生物包括但不限于β-2-Cys、β-3-Cys、同型半胱氨酸和N-甲基半胱氨酸。
在一些实施方案中，本公开的抗体包括具有一个或多个经工程改造的半胱氨酸(eCys)残基的那些。在一些实施方案中，一个或多个eCys残基是半胱氨酸的衍生物，例如β-2-Cys、β-3-Cys、同型半胱氨酸或N-甲基-Cys。
在一些实施方案中，本公开的抗体包括具有一个或多个经工程改造的赖氨酸(eLys)残基的那些。在一些实施方案中，一个或多个天然赖氨酸和/或eLys残基在与药物-接头中间体缀合之前被活化(以形成ADC，如本文所述)。在一些实施方案中，活化包括使抗体与包含琥珀酰亚胺基酯和选自由以下项组成的组的官能团的化合物接触：马来酰亚胺基、吡啶基二硫化物和碘乙酰胺基。
“抗原”是抗体特异性结合的实体。
术语“特异性结合”和“特异性地结合”意指抗体或其抗体片段将以选择性方式与其对应的靶抗原结合，而不与多种其他抗原结合。通常，抗体或抗体片段以至少约1x10-7M，例如10-8M至10-9M、10-10M、10-11M或10-12M的亲和力结合，并且以比其结合除预定抗原或密切相关抗原以外的非特异性抗原(例如，BSA、酪蛋白)的亲和力大至少两倍的亲和力结合至预定抗原。
如本文所用的术语“氨基酸”是指天然的和非天然的、以及蛋白氨基酸。示例性氨基酸包括但不限于丙氨酸、精氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺、组氨酸、甘氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、苯丙氨酸、赖氨酸、亮氨酸、丝氨酸、酪氨酸、苏氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、色氨酸、缬氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸、鸟氨酸、β-丙氨酸、瓜氨酸、丝氨酸甲醚、天冬氨酸甲酯、谷氨酸甲酯、高丝氨酸甲醚和N,N-二甲基赖氨酸。
在一些实施方案中，抗体是多克隆抗体。在一些实施方案中，抗体是单克隆抗体。在一些实施方案中，抗体是嵌合的。在一些实施方案中，抗体是人源化的。在一些实施方案中，抗体是抗原结合片段。
如本文所用的术语“单克隆抗体”是指从基本上同质的抗体群体获得的抗体，即，构成该群体的各个抗体是相同的，除了可能以少量存在的可能的天然发生的突变。单克隆抗体具有高度特异性(针对单一抗原位点)。修饰语“单克隆”指示从基本上同源的抗体群体获得的抗体的特征，并且不应解释为需要通过任何特定方法产生所述抗体。
可用的多克隆抗体是来源于免疫动物血清的抗体分子的异质群体。可用的单克隆抗体是针对特定抗原决定簇(例如，癌症或免疫细胞抗原、蛋白质、肽、碳水化合物、化学物质、核酸或其片段)的同质抗体群体。针对感兴趣的抗原的单克隆抗体(mAb)可通过使用本领域已知的任何技术制备，所述技术通过培养中的连续细胞系制备抗体分子。
可用的单克隆抗体包括但不限于人单克隆抗体、人源化单克隆抗体或嵌合人-小鼠(或其他物种)单克隆抗体。抗体包括全长抗体及其抗原结合片段。人单克隆抗体可通过本领域已知的多种技术中的任一种制备。参见例如Teng等人，1983,Proc.Natl.Acad.Sci.USA.80:7308-7312；Kozbor等人，1983,Immunology Today 4:72-79；以及Olsson等人，1982,Meth.Enzymol.92:3-16。
在一些实施方案中，抗体包括特异性结合至靶细胞(例如，癌细胞抗原)的抗体或结合至癌细胞或基质的其他抗体的功能活性片段、衍生物或类似物。就这一点而言，“功能活性”意指该片段、衍生物或类似物能够特异性结合至靶细胞。为了确定哪些CDR序列结合抗原，通常通过本领域已知的任何结合测定方法(例如，Biacore测定)将含有CDR序列的合成肽用于与抗原的结合测定。参见例如Kabat等人，1991,Sequences of Proteins ofImmunological Interest，第5版，NIH,Bethesda,Md；以及Kabat等人，1980,J.Immunology125(3):961-969。
另外，通常使用标准重组DNA技术获得的包含人和非人部分的重组抗体诸如嵌合和人源化单克隆抗体是有用的抗体。嵌合抗体是其中不同部分来源于不同动物物种的分子，诸如具有来源于鼠单克隆的可变区和来源于人免疫球蛋白的恒定区的那些抗体。参见例如美国专利号4,816,567和美国专利号4,816,397，所述专利各自全文以引用方式并入本文。人源化抗体是来自非人物种的抗体分子，其具有一个或多个来自非人物种的CDR和来自人免疫球蛋白分子的骨架区。参见例如美国专利号5,585,089，该专利全文以引用方式并入本文。此类嵌合和人源化单克隆抗体可通过本领域已知的重组DNA技术制备，例如使用以下文献中描述的方法：国际公布号WO 87/02671；欧洲公布号0 184 187；欧洲公布号0171496；欧洲公布号0173494；国际公布号WO 86/01533；美国专利号4,816,567；欧洲公布号012023；Berter等人，1988,Science240:1041-1043；Liu等人，1987,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 84:3439-3443；Liu等人，1987,J.Immunol.139:3521-3526；Sun等人，1987,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 84:214-218；Nishimura等人，1987,Cancer.Res.47:999-1005；Wood等人，1985,Nature 314:446-449；以及Shaw等人，1988,J.Natl.Cancer Inst.80:1553-1559；Morrison,1985,Science229:1202-1207；Oi等人，1986,BioTechniques 4:214；美国专利号5,225,539；Jones等人，1986,Nature 321:522-525；Verhoeyan等人，1988,Science 239:1534；以及Beidler等人，1988,J.Immunol.141:4053-4060；其中每一篇全文以引用方式并入本文。
在一些实施方案中，抗体是完全人抗体。在一些实施方案中，使用不能表达内源免疫球蛋白重链和轻链基因但能够表达人重链和轻链基因的转基因小鼠制备抗体。
在一些实施方案中，抗体是那些完整的或完全还原的抗体。术语“完全还原的”意指其中所有四个链间二硫键已被还原以提供能够连接至接头(L1)的八个硫醇的抗体。
与抗体的连接可经由来自天然的和/或经工程改造的半胱氨酸残基的硫醚键，或来自经工程改造以参与与对应接头中间体的环加成反应(诸如点击反应)的氨基酸残基的硫醚键而实现，如本文所述。在一些实施方案中，抗体是那些完整的或完全还原的抗体，或者是带有经工程改造的半胱氨酸基团的抗体，所述经工程改造的半胱氨酸基团用能够参与例如点击化学或其他环加成反应(例如，Diels-Alder反应或其他[3+2]或[4+2]环加成)以连接如本文所述的ADC的其他组分的官能团修饰。参见例如Agard等人，J.Am.Chem.Soc.第126卷，第15046-15047页(2004)；Laughlin等人，Science，第320卷，第664-667页(2008)；Beatty等人，ChemBioChem，第11卷，第2092-2095页(2010)；以及Van Geel等人，Bioconjug.Chem.第26卷，第2233-2242页(2015)。
特异性结合至癌症或免疫细胞抗原的抗体可商购获得，或者通过本领域技术人员已知的任何方法制备，诸如化学合成或重组表达技术。编码特异性结合至癌症或免疫细胞抗原的抗体的核苷酸序列可例如从GenBank数据库或类似数据库、文献出版物或者通过常规克隆和测序获得。
在一些实施方案中，抗体可用于治疗癌症(例如，FDA和/或EMA批准的抗体)。特异性结合至癌症或免疫细胞抗原的抗体可商购获得，或者通过本领域技术人员已知的任何方法，诸如重组表达技术产生。编码特异性结合至癌症或免疫细胞抗原的抗体的核苷酸序列可例如从GenBank数据库或类似数据库、文献出版物或者通过常规克隆和测序获得。
在一些实施方案中，抗体可特异性结合至淋巴细胞上表达的受体或受体复合物。受体或受体复合物可包含免疫球蛋白基因超家族成员、TNF受体超家族成员、整联蛋白、细胞因子受体、趋化因子受体、主要组织相容性蛋白、凝集素或补体控制蛋白或其他免疫细胞表达的表面受体。
在一些实施方案中，抗体可特异性结合至癌细胞抗原。在一些实施方案中，抗体可特异性结合至免疫细胞抗原。应当理解，ADC中的抗体组分是残基形式的抗体，使得本文所述ADC结构中的“Ab”并入抗体的结构。
可用于治疗癌症的抗体和特异性结合至肿瘤相关抗原的抗体的非限制性示例公开于Franke,A.E.、Sievers,E.L.和Scheinberg,D.A.，“Cell surface receptor-targetedtherapy of acute myeloid leukemia:areview”Cancer Biother Radiopharm.2000,15,459-76；Murray,J.L.,“Monoclonal antibody treatment of solid tumors:a coming ofage”Semin Oncol.2000,27,64-70；Breitling,F.和Dubel,S.，Recombinant Antibodies,John Wiley,and Sons,New York,1998中，所述文献中的每一篇全文据此以引用方式并入。
在一些实施方案中，用于治疗自身免疫病症的抗体根据本文所述的组合物和方法使用。在不可商购获得或通过本领域技术人员已知的任何方法例如化学合成或重组表达技术获得的情况下，对负责产生自身免疫抗体的细胞的抗原具有免疫特异性的抗体是可获得的。
在一些实施方案中，抗体靶向在活化淋巴细胞上表达的受体或受体复合物。受体或受体复合物可包含免疫球蛋白基因超家族成员、TNF受体超家族成员、整联蛋白、细胞因子受体、趋化因子受体、主要组织相容性蛋白、凝集素或补体控制蛋白。
可用于治疗癌症的抗体和结合至肿瘤相关抗原的内化抗体的示例公开于Franke,A.E.、Sievers,E.L.和Scheinberg,D.A.，“Cell surface receptor-targeted therapy ofacute myeloid leukemia:a review”Cancer Biother Radiopharm.2000,15,459-76；Murray,J.L.,“Monoclonal antibody treatment of solid tumors:a coming of age”Semin Oncol.2000,27,64-70；Breitling,F.和Dubel,S.，Recombinant Antibodies,JohnWiley,and Sons,New York,1998中，其中每一篇全文据此以引用方式并入。
下面提供了示例性抗原。结合所示抗原的示例性抗体示于括号中。
在一些实施方案中，抗原是肿瘤相关抗原。在一些实施方案中，肿瘤相关抗原是跨膜蛋白。例如，以下抗原是跨膜蛋白：ANTXR1、BAFF-R、CA9(示例性抗体包括吉妥昔单抗(girentuximab))、CD147(示例性抗体包括加维莫单抗(gavilimomab)和美妥珠单抗(metuzumab))、CD19、CD20(示例性抗体包括divozilimab和替伊莫单抗(tiuxetan))、CD274(也称为PD-L1)(示例性抗体包括阿得贝利单抗(adebrelimab)、阿替利珠单抗(atezolizumab)、garivulimab、德瓦鲁单抗和阿维鲁单抗)、CD30(示例性抗体包括伊妥木单抗(iratumumab)和本妥昔单抗(brentuximab))、CD33(示例性抗体包括林妥珠单抗(lintuzumab))、CD352、CD45(示例性抗体包括艾妥单抗(apamistamab))、CD47(示例性抗体包括莱特利单抗(letaplimab)和莫洛利单抗(magrolimab))、CLPTM1L、DPP4、EGFR、ERVMER34-1、FASL、FSHR、FZD5、FZD8、GUCY2C(示例性抗体包括英度妥单抗(indusatumab))、IFNAR1(示例性抗体包括法拉莫单抗(faralimomab))、IFNAR2、LMP2、MLANA、SIT1、TLR2/4/1(示例性抗体包括托拉利单抗(tomaralimab))、TM4SF5、TMEM132A、TMEM40、UPK1B、VEGF和VEFGR2(示例性抗体包括金妥昔单抗(gentuximab))。
在一些实施方案中，肿瘤相关抗原是跨膜转运蛋白。例如，以下抗原是跨膜转运蛋白：ASCT2(示例性抗体包括伊达妥单抗(idactamab))、MFSD13A、Mincle、NOX1、SLC10A2、SLC12A2、SLC17A2、SLC38A1、SLC39A5、SLC39A6(也称为LIV1)(示例性抗体包括拉妥珠单抗(ladiratuzumab))、SLC44A4、SLC6A15、SLC6A6、SLC7A11和SLC7A5。
在一些实施方案中，肿瘤相关抗原是跨膜或膜相关糖蛋白。例如，以下抗原是跨膜或膜相关糖蛋白：CA-125、CA19-9、CAMPATH-1(示例性抗体包括阿仑单抗)、癌胚抗原(示例性抗体包括阿西莫单抗(arcitumomab)、瑟妥珠单抗(cergutuzumab)、阿姆白介素(amunaleukin)和拉贝珠单抗(labetuzumab))、CD112、CD155、CD24、CD247、CD37(示例性抗体包括利洛托单抗(lilotomab))、CD38(示例性抗体包括菲泽妥单抗(felzartamab))、CD3D、CD3E(示例性抗体包括福雷芦单抗(foralumab)和替利组单抗(teplizumab))、CD3G、CD96、CDCP1、CDH17、CDH3、CDH6、CEACAM1、CEACAM6、CLDN1、CLDN16、CLDN18.1(示例性抗体包括佐妥昔单抗(zolbetuximab))、CLDN18.2(示例性抗体包括佐妥昔单抗)、CLDN19、CLDN2、CLEC12A(示例性抗体包括特迪妥单抗(tepoditamab))、DPEP1、DPEP3、DSG2、内皮唾酸蛋白(示例性抗体包括昂妥昔珠单抗(ontuxizumab))、ENPP1、EPCAM(示例性抗体包括阿德木单抗(adecatumumab))、FN、FN1、Gp100、GPA33、gpNMB(示例性抗体包括格巴妥木单抗(glembatumumab))、ICAM1、L1CAM、LAMP1、MELTF(也称为CD228)、NCAM1、Nectin-4(示例性抗体包括恩诺单抗(enfortumab))、PDPN、PMSA、PROM1、PSCA、PSMA、Siglecs1-16、SIRPa、SIRPg、TACSTD2、TAG-72、腱生蛋白、组织因子(也称为TF)(示例性抗体包括替索单抗(tisotumab))和ULBP1/2/3/4/5/6。
在一些实施方案中，肿瘤相关抗原是跨膜或膜相关受体激酶。例如，以下抗原是跨膜或膜相关受体激酶：ALK、Axl(示例性抗体包括替卫妥单抗(tilvestamab))、BMPR2、DCLK1、DDR1、EPHA受体、EPHA2、ERBB2(也称为HER2)(示例性抗体包括曲妥单抗、贝伐单抗(bevacizumab)、帕妥珠单抗(pertuzumab)和玛格妥昔单抗(margetuximab))、ERBB3、FLT3、PDGFR-B(示例性抗体包括利努苏单抗(rinucumab))、PTK7(示例性抗体包括考非妥珠单抗(cofetuzumab))、RET、ROR1(示例性抗体包括西妥珠单抗(cirmtuzumab))、ROR2、ROS1和Tie3。
在一些实施方案中，肿瘤相关抗原是膜相关或膜定位蛋白。例如，以下抗原是膜相关或膜定位蛋白：ALPP、ALPPL2、ANXA1、FOLR1(示例性抗体包括法妥组单抗(farletuzumab))、IL13Ra2、IL1RAP(示例性抗体包括尼达利单抗(nidanilimab))、NT5E、OX40、Ras突变体、RGS5、RhoC、SLAMF7(示例性抗体包括埃罗妥珠单抗(elotuzumab))和VSIR。
在一些实施方案中，肿瘤相关抗原是跨膜G蛋白偶联受体(GPCR)。例如，以下抗原是GPCR：CALCR、CD97、GPR87和KISS1R。
在一些实施方案中，肿瘤相关抗原是细胞表面相关或细胞表面受体。例如，以下抗原是细胞表面相关和/或细胞表面受体：B7-DC、BCMA、CD137、CD 244、CD3(示例性抗体包括奥昔组单抗(otelixizumab)和维西珠单抗(visilizumab))、CD48、CD5(示例性抗体包括阿佐莫单抗(zolimomab aritox))、CD70(示例性抗体包括古妥珠单抗(cusatuzumab)和沃瑟妥珠单抗(vorsetuzumab))、CD74(示例性抗体包括米拉珠单抗(milatuzumab))、CD79A、CD-262(示例性抗体包括替加组单抗(tigatuzumab))、DR4(示例性抗体包括马帕木单抗(mapatumumab))、FAS、FGFR1、FGFR2(示例性抗体包括阿普卢妥单抗(aprutumab))、FGFR3(示例性抗体包括沃凡妥单抗(vofatamab))、FGFR4、GITR(示例性抗体包括拉格芙利单抗(ragifilimab))、Gpc3(示例性抗体包括拉格芙利单抗(ragifilimab))、HAVCR2、HLA-E、HLA-F、HLA-G、LAG-3(示例性抗体包括安沙利单抗(encelimab))、LY6G6D、LY9、MICA、MICB、MSLN、MUC1、MUC5AC、NY-ESO-1、OY-TES1、PVRIG、Sialyl-Thomsen-Nouveau抗原、精子蛋白17、TNFRSF12和uPAR。
在一些实施方案中，肿瘤相关抗原是趋化因子受体或细胞因子受体。例如，以下抗原是趋化因子受体或细胞因子受体：CD115(示例性抗体包括艾克利单抗(axatilimab)、卡比利珠单抗(cabiralizumab)和依米妥珠单抗(emactuzumab))、CD123、CXCR 4(示例性抗体包括乌洛鲁单抗(ulocuplumab))、IL-21R和IL-5R(示例性抗体包括贝那利珠单抗(benralizumab))。
在一些实施方案中，肿瘤相关抗原是共刺激的表面表达的蛋白质。例如，以下抗原是共刺激的表面表达的蛋白质：B7-H3(示例性抗体包括依诺妥珠单抗(enoblituzumab)和奥博妥单抗(omburtamab))、B7-H4，B7-H6和B7-H7。
在一些实施方案中，肿瘤相关抗原是转录因子或DNA结合蛋白。例如，以下抗原是转录因子：ETV6-AML、MYCN、PAX3、PAX5和WT1。以下蛋白质是DNA结合蛋白：BORIS。
在一些实施方案中，肿瘤相关抗原是整合膜蛋白。例如，以下抗原是整合膜蛋白：SLITRK6(示例性抗体包括斯妥尤单抗(sirtratumab))、UPK2和UPK3B。
在一些实施方案中，肿瘤相关抗原是整联蛋白。例如，以下抗原是整联蛋白抗原：αvβ6、ITGAV(示例性抗体包括阿比妥珠单抗(abituzumab))、ITGB6和ITGB8。
在一些实施方案中，肿瘤相关抗原是糖脂。例如，以下是糖脂抗原：FucGM1、GD2(示例性抗体包括地努妥昔单抗(dinutuximab))、GD3(示例性抗体包括米妥莫单抗(mitumomab))、GloboH、GM2和GM3(示例性抗体包括雷妥莫单抗(racotumomab))。
在一些实施方案中，肿瘤相关抗原是细胞表面激素受体。例如，以下抗原是细胞表面激素受体：AMHR2和雄激素受体。
在一些实施方案中，肿瘤相关抗原是跨膜或膜相关蛋白酶。例如，以下抗原是跨膜或膜相关蛋白酶：ADAM12、ADAM9、TMPRSS11D和金属蛋白酶。
在一些实施方案中，肿瘤相关抗原在患有癌症的个体中异常表达。例如，以下抗原可在患有癌症的个体中异常表达：AFP、AGR2、AKAP-4、ARTN、BCR-ABL、C5补体、CCNB1、CSPG4、CYP1B1、De2-7 EGFR、EGF、Fas相关抗原1、FBP、G250、GAGE、HAS3、HPV E6 E7、hTERT、IDO1、LCK、Legumain、LYPD1、MAD-CT-1、MAD-CT-2、MAGEA3、MAGEA4、MAGEC2、MerTk、ML-IAP、NA17、NY-BR-1、p53、p53突变体、PAP、PLAVI、聚唾液酸、PR1、PSA、肉瘤易位断点、SART3、sLe、SSX2、存活素、Tn、TRAIL、TRAIL1、TRP-2和XAGE1。
在一些实施方案中，抗原是免疫细胞相关抗原。在一些实施方案中，免疫细胞相关抗原是跨膜蛋白。例如，以下抗原是跨膜蛋白：BAFF-R、CD163、CD19、CD20(示例性抗体包括利妥昔单抗(rituximab)、奥美珠单抗(ocrelizumab)、divozilimab；替伊莫单抗(ibritumomab tiuxetan))、CD25(示例性抗体包括巴利昔单抗(basiliximab))、CD274(也称为PD-L1)(示例性抗体包括阿得贝利单抗、阿替利珠单抗、garivulimab、德瓦鲁单抗和阿维鲁单抗)、CD30(示例性抗体包括伊妥木单抗和本妥昔单抗)、CD33(示例性抗体包括林妥珠单抗)、CD352、CD45(示例性抗体包括艾妥单抗)、CD47(示例性抗体包括莱特利单抗和莫洛利单抗)、CTLA4(示例性抗体包括伊匹单抗(ipilimumab))、FASL、IFNAR1(示例性抗体包括法拉莫单抗)、IFNAR2、LAYN、LILRB2、LILRB4、PD-1(示例性抗体包括伊匹单抗、纳武单抗、派姆单抗、巴替利单抗(balstilimab)、布格利单抗(budigalimab)、杰诺单抗(geptanolimab)、特瑞普利单抗(toripalimab)和匹地利珠单抗(pidilizumabsf))、SIT1和TLR2/4/1(示例性抗体包括托拉利单抗)。
在一些实施方案中，免疫细胞相关抗原是跨膜转运蛋白。例如，Mincle是跨膜转运蛋白。
在一些实施方案中，免疫细胞相关抗原是跨膜或膜相关糖蛋白。例如，以下抗原是跨膜或膜相关糖蛋白：CD112、CD155、CD24、CD247、CD28、CD30L、CD37(示例性抗体包括利洛托单抗)、CD38(示例性抗体包括菲泽妥单抗)、CD3D、CD3E(示例性抗体包括福雷芦单抗和替利组单抗)、CD3G、CD44、CLEC12A(示例性抗体包括特迪妥单抗)、DCIR、DCSIGN、Dectin 1、Dectin 2、ICAM1、LAMP1、Siglecs 1-16、SIRPa、SIRPg和ULBP1/2/3/4/5/6。
在一些实施方案中，免疫细胞相关抗原是跨膜或膜相关受体激酶。例如，以下抗原是跨膜或膜相关受体激酶：Axl(示例性抗体包括替卫妥单抗)和FLT3。
在一些实施方案中，免疫细胞相关抗原是膜相关或膜定位蛋白。例如，以下抗原是膜相关或膜定位蛋白：CD83、IL1RAP(示例性抗体包括尼达利单抗)、OX40、SLAMF7(示例性抗体包括埃罗妥珠单抗)和VSIR。
在一些实施方案中，免疫细胞相关抗原是跨膜G蛋白偶联受体(GPCR)。例如，以下抗原是GPCR：CCR4(示例性抗体包括莫格利珠单抗(mogamulizumab)-kpkc)、CCR8和CD97。
在一些实施方案中，免疫细胞相关抗原是细胞表面相关或细胞表面受体。例如，以下抗原是细胞表面相关和/或细胞表面受体：B7-DC、BCMA、CD137、CD2(示例性抗体包括西利珠单抗(siplizumab))、CD 244、CD27(示例性抗体包括伐立鲁单抗(varlilumab))、CD278(示例性抗体包括菲阿迪利单抗(feladilimab)和伏派利单抗(vopratelimab))、CD3(示例性抗体包括奥昔组单抗和维西珠单抗)、CD40(示例性抗体包括达西组单抗(dacetuzumab)和卢卡木单抗(lucatumumab))、CD48、CD5(示例性抗体包括阿佐莫单抗)、CD70(示例性抗体包括古妥珠单抗和沃瑟妥珠单抗)、CD74(示例性抗体包括米拉珠单抗)、CD79A、CD-262(示例性抗体包括替加组单抗)、DR4(示例性抗体包括马帕木单抗)、GITR(示例性抗体包括拉格芙利单抗)、HAVCR2、HLA-DR、HLA-E、HLA-F、HLA-G、LAG-3(示例性抗体包括安沙利单抗)、MICA、MICB、MRC1、PVRIG、Sialyl-Thomsen-Nouveau抗原、TIGIT(示例性抗体包括艾替利单抗(etigilimab))、Trem2和uPAR。
在一些实施方案中，免疫细胞相关抗原是趋化因子受体或细胞因子受体。例如，以下抗原是趋化因子受体或细胞因子受体：CD115(示例性抗体包括艾克利单抗、卡比利珠单抗和依米妥珠单抗)、CD123、CXCR4(示例性抗体包括乌洛鲁单抗)、IL-21R和IL-5R(示例性抗体包括贝那利珠单抗)。
在一些实施方案中，免疫细胞相关抗原是共刺激的表面表达的蛋白质。例如，以下抗原是共刺激的表面表达的蛋白质：B7-H 3(示例性抗体包括依诺妥珠单抗和奥博妥单抗)、B7-H4、B7-H6和B7-H7。
在一些实施方案中，免疫细胞相关抗原是外周膜蛋白。例如，以下抗原是外周膜蛋白：B7-1(示例性抗体包括加利昔单抗(galiximab))和B7-2。
在一些实施方案中，免疫细胞相关抗原在患有癌症的个体中异常表达。例如，以下抗原可在患有癌症的个体中异常表达：C5补体、IDO1、LCK、MerTk和Tyrol。
在一些实施方案中，抗原是基质细胞相关抗原。在一些实施方案中，基质细胞相关抗原是跨膜或膜相关蛋白。例如，以下抗原是跨膜或膜相关蛋白：FAP(示例性抗体包括西罗珠单抗(sibrotuzumab))、IFNAR1(示例性抗体包括法拉莫单抗)和IFNAR2。
在一些实施方案中，抗原是CD30。在一些实施方案中，抗体是结合至CD30的抗体或抗原结合片段，诸如国际专利公布号WO 02/43661中所述。在一些实施方案中，抗CD30抗体是cAC10，其在国际专利公布号WO 02/43661中有所描述。cAC10也称为本妥昔单抗。在一些实施方案中，抗CD30抗体包含cAC10的CDR。在一些实施方案中，CDR如Kabat编号方案所定义。在一些实施方案中，CDR如Chothia编号方案所定义。在一些实施方案中，CDR如IMGT编号方案所定义。在一些实施方案中，CDR如AbM编号方案所定义。在一些实施方案中，抗CD30抗体包含分别包含SEQ ID NO:1、2、3、4、5和6的氨基酸序列的CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3。在一些实施方案中，抗CD30抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区含有与SEQ ID NO:7的氨基酸序列具有至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区含有与SEQ ID NO:8的氨基酸序列具有至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗CD30抗体包含含有SEQ ID NO:9或SEQ ID NO:10的氨基酸序列的重链和含有SEQ ID NO:11的氨基酸序列的轻链。
在一些实施方案中，抗原是CD70。在一些实施方案中，抗体是结合至CD70的抗体或抗原结合片段，诸如国际专利公布号WO2006/113909中所述。在一些实施方案中，抗体是h1F6抗CD70抗体，其在国际专利公布号WO 2006/113909中有所描述。h1F6也称为沃瑟妥珠单抗。在一些实施方案中，抗CD70抗体包含含有SEQ ID NO:12的三个CDR的重链可变区和含有SEQ ID NO:13的三个CDR的轻链可变区。在一些实施方案中，CDR如Kabat编号方案所定义。在一些实施方案中，CDR如Chothia编号方案所定义。在一些实施方案中，CDR如IMGT编号方案所定义。在一些实施方案中，CDR如AbM编号方案所定义。在一些实施方案中，抗CD70抗体包含重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区含有与SEQ ID NO:12的氨基酸序列具有至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％同一性的氨基酸序列，所述轻链可变区含有与SEQ ID NO:13的氨基酸序列具有至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗CD30抗体包含含有SEQID NO:14的氨基酸序列的重链和含有SEQ ID NO:15的氨基酸序列的轻链。
在一些实施方案中，抗原是白介素-1受体辅助蛋白(IL1RAP)。IL1RAP是IL1受体(IL1R1)的共受体，并且是白介素-1(IL1)信号传导所需的。IL1涉及对某些化疗方案的抗性。IL1RAP在各种实体瘤中、在癌细胞和肿瘤微环境中过度表达，但在正常细胞中具有低表达。IL1RAP也在造血干细胞和祖细胞中过度表达，使其成为靶向慢性髓性白血病(CML)的候选物。IL1RAP还被证明在急性髓性白血病(AML)中过度表达。结合至IL1RAP的抗体可以阻断从IL-1和IL-33到细胞中的信号转导，并且允许NK细胞识别肿瘤细胞并随后通过抗体依赖性细胞毒性(ADCC)杀死。
在一些实施方案中，抗原是ASCT2。ASCT2也称为SLC1A5。ASCT2是普遍表达的宽特异性钠依赖性中性氨基酸交换剂。ASCT2参与谷氨酰胺转运。ASCT2在不同癌症中过度表达并且与不良预后密切相关。下调ASCT2已被证明能抑制细胞内谷氨酰胺水平和下游谷氨酰胺代谢，包括谷胱甘肽产生。由于其在许多癌症中的高表达，ASCT2是潜在的治疗靶标。这些作用减弱头颈鳞状细胞癌(HNSCC)中的生长和增殖，增加细胞凋亡和自噬，并且增加氧化应激和mTORC1通路抑制。另外，沉默ASCT2改善了HNSCC中对西妥昔单抗的应答。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至TROP2。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:16、17、18、19、20和21的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:22的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:23的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是赛妥珠单抗(sacituzumab)。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:24、25、26、27、28和29的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:30的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:31的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是达托单抗(datopotamab)。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至MICA。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:32、33、34、35、36和37的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:38的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:39的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是h1D5v11 hIgG1K。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:40、41、42、43、44和45的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:46的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:47的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是MICA.36hIgG1K G236A。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:48、49、50、51、52和53的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:54的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:55的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是h3F9 H1L3hIgG1K。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:56、57、58、59、60和61的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:62的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:63的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是CM33322 Ab28 hIgG1K。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至CD24。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:64、65、66、67、68和69的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:70的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:71的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是SWA11。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至ITGav。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:72、73、74、75、76和77的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:78的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:79的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是英妥木单抗(intetumumab)。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:80、81、82、83、84和85的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:86的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:87的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是阿比妥珠单抗。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至gpA33。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:88、89、90、91、92和93的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:94的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:95的氨基酸序列的轻链可变区。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至IL1Rap。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:96、97、98、99、100和101的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:102的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:103的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是尼达利单抗。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至EpCAM。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:104、105、106、017、108和109的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:110的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:111的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是阿德木单抗。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:112、113、114、115、116和117的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:118的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ IDNO:119的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是Ep157305。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:120、121、122、123、124和125的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:126的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:127的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是Ep3-171。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:128、129、130、131、132和133的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:134的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:135的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是Ep3622w94。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:136、137、138、139、140和141的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQID NO:142的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ IDNO:143的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是EpING1。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:144、145、146、147、148和149的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:150的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:151的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是EpAb2-6。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至CD352。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:152、153、154、155、156和157的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:158的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:159的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是h20F3。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至CS1。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:160、161、162、163、164和165的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:166的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:167的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是埃罗妥珠单抗。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至CD38。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:168、169、170、171、172和173的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:174的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:175的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是达雷木单抗(daratumumab)。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至CD25。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:176、177、178、179、180和181的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:182的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:183的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是达利珠单抗(daclizumab)。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至ADAM9。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:184、185、186、187、188和189的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:190的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:191的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是chMAbA9-A。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:192、193、194、195、196和197的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:198的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ IDNO:199的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是hMAbA9-A。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至CD59。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:200、201、202、203、204和205的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:206的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:207的氨基酸序列的轻链可变区。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至CD25。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是Clone123。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至CD229。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是h8A10。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至CD19。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:208、209、210、211、212和213的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:214的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:215的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是地宁妥珠单抗(denintuzumab)，其也称为hBU12。参见WO2009052431。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至CD70。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:216、217、218、219、220和221的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:222的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:223的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是沃瑟妥珠单抗。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至B7H4。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:224、225、226、227、228和229的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:230的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:231的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是米佐妥单抗(mirzotamab)。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至CD138。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:232、233、234、235、236和237的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:238的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:239的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是英达妥昔单抗(indatuxumab)。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至CD166。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:240、241、242、243、244和245的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:246的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:247的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是普罗妥单抗(praluzatamab)。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至CD51。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:248、249、250、251、252和253的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:254的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:255的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是英妥木单抗。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至CD56。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:256、257、258、259、260和261的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:262的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:263的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是洛沃妥珠单抗(lorvotuzumab)。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至CD74。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:264、265、266、267、268和269的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:270的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:271的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是米拉珠单抗。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至CEACAM5。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:272、273、274、275、276和277的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:278的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:279的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是拉贝珠单抗。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至CanAg。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:280、281、282、283、284和285的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:286的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:287的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体为坎妥珠单抗(cantuzumab)。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至DLL-3。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:288、289、290、291、292和293的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:294的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:295的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是洛伐妥珠单抗(rovalpituzumab)。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至DPEP-3。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:296、297、298、299、300和301的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:302的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:303的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是他林妥单抗(tamrintamab)。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至EGFR。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:304、305、306、307、308和309的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:310的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:311的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是拉妥昔单抗(laprituximab)。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:312、313、314、315、316和317的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:318的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:319的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是罗妥昔珠单抗(losatuxizumab)。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:320、321、322、323、324和325的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:326的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ IDNO:327的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是思诺妥单抗(serclutamab)。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:328、329、330、331、332和333的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:334的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ IDNO:335的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是西妥昔单抗(cetuximab)。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至FRa。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:336、337、338、339、340和341的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:342的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:343的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是米妥昔单抗(mirvetuximab)。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:344、345、346、347、348和349的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:350的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:351的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是法妥组单抗。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至MUC-1。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:352、353、354、355、356和357的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:358的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:359的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是伽妥珠单抗(gatipotuzumab)。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至间皮素。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:360、361、362、363、364和365的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:366的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:367的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是阿奈妥单抗(anetumab)。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至ROR-1。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:368、369、370、371、372和373的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:374的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:375的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是泽罗妥单抗(zilovertamab)。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至ASCT2。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至B7H4。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:376、377、378、379、380和381的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:382的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:383的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是20502。参见WO2019040780。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至B7-H3。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:384、385、386、387、388和389的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:390的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:391的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是chAb-A(BRCA84D)。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:392、393、394、395、396和397的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:398的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ IDNO:399的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是hAb-B。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:400、401、402、403、404和405的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:406的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:407的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是hAb-C。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:408、409、410、411、412和413的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:414的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:415的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是hAb-D。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:416、417、418、419、420和421的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ IDNO:422的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:423的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是chM30。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:424、425、426、427、428和429的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:430的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:431的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是hM30-H1-L4。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:432、433、434、435、436和437的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:438的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:439的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是AbV_huAb18-v4。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:440、441、442、443、444和445的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:446的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ IDNO:447的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是AbV_huAb3-v6。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:448、449、450、451、452和453的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:454的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:455的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是AbV_huAb3-v2.6。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:456、457、458、459、460和461的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:462的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:463的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是AbV_huAb13-v1-CR。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ IDNO:464、465、466、467、468和469的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:470的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:471的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是8H9-6m。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:472的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ IDNO:473的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是m8517。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:474、475、476、477、478和479的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:480的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:481的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是TPP-5706。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:482的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:483的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是TPP-6642。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:484的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:485的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是TPP-6850。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至CDCP1。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是10D7。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至HER3。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:486的氨基酸序列的重链和含有SEQ IDNO:487的氨基酸序列的轻链。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是帕曲妥单抗(patritumab)。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:488的氨基酸序列的重链和含有SEQ ID NO:489的氨基酸序列的轻链。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是瑟瑞妥单抗(seribantumab)。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:490的氨基酸序列的重链和含有SEQ ID NO:491的氨基酸序列的轻链。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是依更妥单抗(elgemtumab)。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:492的氨基酸序列的重链和含有SEQ ID NO:493的氨基酸序列的轻链。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是鲁妥珠单抗(elgemtumab)。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至RON。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是Zt/g4。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至封闭蛋白(claudin)-2。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至HLA-G。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至PTK7。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:494、495、496、497、498和499的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:500的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:501的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是PTK7单抗1。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:502、503、504、505、506和507的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:508的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ IDNO:509的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是PTK7单抗2。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:510、511、512、513、514和515的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:516的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:517的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是PTK7单抗3。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至LIV1。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:518、519、520、521、522和523的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:524的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:525的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是拉妥珠单抗，其也称为hLIV22和hglg。参见WO2012078668。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至avb6。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:526、527、528、529、530和531的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:532的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:533的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是h2A2。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:534、535、536、537、538和539的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:540的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQID NO:541的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是h15H3。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至CD48。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:542、543、544、545、546和547的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:548的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:549的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是hMEM102。参见WO2016149535。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至PD-L1。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:550、551、552、553、554和555的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:556的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:557的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是SG-559-01LALA mAb。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至IGF-1R。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:558、559、560、561、562和563的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:564的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:565的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是西妥木单抗(cixutumumab)。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至封闭蛋白-18.2。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:566、567、568、569、570和571的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:572的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQID NO:573的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是佐妥昔单抗(175D10)。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:574、575、576、577、578和579的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:580的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:581的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是163E12。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至Nectin-4。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:582、583、584、585、586和587的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:588的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:589的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是恩诺单抗。参见WO 2012047724。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至SLTRK6。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:590、591、592、593、594和595的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:596的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:597的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是斯妥尤单抗。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至CD228。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:598、599、600、601、602和603的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:604的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:605的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是hL49。参见WO 2020/163225。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至CD142(组织因子；TF)。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:606、607、608、609、610和611的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:612的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:613的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是替索单抗。参见WO2010/066803。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至STn。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:614、615、616、617、618和619的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:620的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:621的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是h2G12。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至CD20。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:622、623、624、625、626和627的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:628的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:629的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是利妥昔单抗。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至HER2。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:630、631、632、633、634和635的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:636的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:637的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是曲妥单抗。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至FLT3。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至CD46。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至GloboH。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至AG7。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至间皮素。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至FCRH5。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至ETBR。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至Tim-1。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至SLC44A4。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至ENPP3。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至CD37。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至CA9。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至Notch3。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至EphA2。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至TRFC。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至PSMA。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至LRRC15。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至5T4。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至CD79b。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:638、639、640、641、642和643的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:644的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:645的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是泊洛妥珠单抗(polatuzumab)。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至NaPi2B。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:646、647、648、649、650和651的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:652的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:653的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是利法妥珠单抗(lifastuzumab)。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至Muc16。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:654、655、656、657、658和659的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:660的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:661的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是索非妥珠单抗(sofituzumab)。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至STEAP1。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:662、663、664、665、666和667的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:668的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:669的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是万多妥珠单抗(vandortuzumab)。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至BCMA。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:670、671、672、673、674和675的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:676的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:677的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是贝兰妥单抗(belantamab)。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至c-Met。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:678、679、680、681、682和683的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:684的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:685的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是特立妥珠单抗(telisotuzumab)。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至EGFR。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:686、687、688、689、690和691的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:692的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:693的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是迪妥昔珠单抗(depatuxizumab)。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至SLAMF7。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:694、695、696、697、698和699的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:700的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:701的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是阿妥昔珠单抗(azintuxizumab)。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至SLITRK6。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:702、703、704、705、706和707的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:708的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:709的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是斯妥尤单抗(sirtratumab)。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至C4.4a。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:710、711、712、713、714和715的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:716的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:717的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是鲁帕妥单抗(lupartumab)。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至GCC。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:718、719、720、721、722和723的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:724的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:725的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是英度妥单抗。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至Axl。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:726、727、728、729、730和731的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:732的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:733的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是恩泊妥单抗(enapotamab)。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至gpNMB。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:734、735、736、737、738和739的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:740的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:741的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是格巴妥木单抗。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至催乳素受体。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:742、743、744、745、746和747的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:748的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ IDNO:749的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是洛林妥单抗(rolinsatamab)。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至FGFR2。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:750、751、752、753、754和755的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:756的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:757的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是阿普卢妥单抗。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至CDCP1。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:758、759、760、761、762和763的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:764的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:765的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是人源化CUB4#135HC4-H。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:766、767、768、769、770和771的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:772的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:773的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是CUB4。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:774、775、776、777、778、779的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:780的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:781的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是CP13E10-WT。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:782、783、784、785、786和787的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ IDNO:788的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:789的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是CP13E10-54HCv13-89LCv1。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至ASCT2。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:790的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQID NO:791的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是KM8094a。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:792的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:793的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是KM8094b。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:794、795、796、797、798和799的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:800的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:801的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是KM4018。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至CD123。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:802、803、804、805、806和807的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:808的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:809的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是h7G3。参见WO 2016201065。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至GPC3。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:810、811、812、813、814和815的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:816的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:817的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是hGPC3-1。参见WO 2019161174。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至B6A。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:818、819、820、821、822和823的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:824的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:825的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是h2A2。参见PCT/US20/63390。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:826、827、828、829、830和831的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:832的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:833的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是h15H3。参见WO 2013/123152。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至PD-L1。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:834、835、836、837、838和839的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:840的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:841的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是SG-559-01。参见PCT/US2020/054037。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至TIGIT。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:842、843、844、845、846和847的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:848的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:849的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是Clone 13(也称为ADI-23674或mAb13)。参见WO 2020041541。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至STN。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQID NO:850、851、852、853、854和855的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:856的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:857的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是2G12-2B2。参见WO 2017083582。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至CD33。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:858、859、860、861、862和863的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:864的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:865的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是h2H12。参见WO2013173496。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至NTBA(也称为CD352)。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:866、867、868、869、870和871的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:872的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:873的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是h20F3 HDLD。参见WO 2017004330。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至BCMA。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:874、875、876、877、878和879的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:880的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:881的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是SEA-BCMA(也称为hSG16.17)。参见WO 2017/143069。
在一些实施方案中，本文提供的抗体-药物缀合物结合至组织因子(也称为TF)。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3，它们分别含有SEQ ID NO:882、883、884、885、886和887的氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体包含含有SEQ ID NO:888的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:889的氨基酸序列的轻链可变区。在一些实施方案中，抗体药物缀合物的抗体是替索单抗。参见WO 2010/066803和US 9,150,658。
序列表
Figure BDA0003983088010001591
Figure BDA0003983088010001601
Figure BDA0003983088010001611
Figure BDA0003983088010001621
Figure BDA0003983088010001631
Figure BDA0003983088010001641
Figure BDA0003983088010001651
Figure BDA0003983088010001661
Figure BDA0003983088010001671
Figure BDA0003983088010001681
Figure BDA0003983088010001691
Figure BDA0003983088010001701
Figure BDA0003983088010001711
Figure BDA0003983088010001721
Figure BDA0003983088010001731
Figure BDA0003983088010001741
Figure BDA0003983088010001751
Figure BDA0003983088010001761
Figure BDA0003983088010001771
Figure BDA0003983088010001781
Figure BDA0003983088010001791
Figure BDA0003983088010001801
Figure BDA0003983088010001811
Figure BDA0003983088010001821
Figure BDA0003983088010001831
Figure BDA0003983088010001841
Figure BDA0003983088010001851
Figure BDA0003983088010001861
Figure BDA0003983088010001871
Figure BDA0003983088010001881
Figure BDA0003983088010001891
Figure BDA0003983088010001901
Figure BDA0003983088010001911
Figure BDA0003983088010001921
Figure BDA0003983088010001931
Figure BDA0003983088010001941
Figure BDA0003983088010001951
Figure BDA0003983088010001961
Figure BDA0003983088010001971
Figure BDA0003983088010001981
Figure BDA0003983088010001991
Figure BDA0003983088010002001
Figure BDA0003983088010002011
Figure BDA0003983088010002021
Figure BDA0003983088010002031
使用方法
在一些实施方案中，本文所述的ADC(例如式(I)或其药学上可接受的盐)用于将药物递送至靶细胞。不受理论的束缚，在一些实施方案中，ADC与靶细胞表面上的抗原缔合，然后ADC通过受体介导的胞吞作用被摄入靶细胞内。一旦在细胞内，药物单元作为游离药物释放，并且将诱导其生物效应(诸如细胞毒性或细胞抑制效应，如本文所定义)。在一些实施方案中，药物单元从靶细胞外部的ADC裂解，并且游离药物随后穿透细胞。
一些实施方案提供了一种治疗有需要的受试者的癌症的方法，该方法包括向受试者施用治疗有效量的式(I)或其药学上可接受的盐。
一些实施方案提供了一种治疗有需要的受试者的癌症的方法，该方法包括在向受试者施用另一种抗癌剂(例如，免疫疗法，诸如纳武单抗或派姆单抗)之前、期间或之后，向受试者施用治疗有效量的式(I)或其药学上可接受的盐。
一些实施方案提供了一种用于逆转或预防对抗癌剂的获得性抗性的方法，该方法包括向处于发展或具有对抗癌剂的获得性抗性的风险的受试者施用治疗有效量的式(I)或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，向受试者施用一定剂量的抗癌剂(例如，与向受试者施用一定剂量的式(I)或其药学上可接受的盐基本上同时)。
一些实施方案提供了一种在受试者中延迟和/或预防对抗癌剂有抗性的癌症的发展的方法，该方法包括在施用治疗有效量的抗癌剂之前、期间或之后，向受试者施用治疗有效量的式(I)或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，本文所述的ADC可用于抑制肿瘤细胞或癌细胞的增殖，从而引起肿瘤或癌细胞中的细胞凋亡，并且/或者用于治疗有需要的受试者的癌症。因此，ADC可用于在多种环境中治疗癌症。ADC可用于将药物(例如细胞毒性或细胞抑制药物)递送至肿瘤细胞或癌细胞。不受理论的束缚，在一些实施方案中，ADC的抗体与癌细胞或肿瘤细胞相关抗原结合或缔合，并且ADC可通过受体介导的胞吞作用或其他内化机制在肿瘤细胞或癌细胞内被摄取(内化)。抗原可以附着于肿瘤细胞或癌细胞，或者可以是与肿瘤细胞或癌细胞缔合的细胞外基质蛋白。一旦进入细胞内，经由可裂解机制，药物在细胞内释放。在一些实施方案中，药物单元在肿瘤细胞或癌细胞外部从ADC裂解，并且游离药物随后穿透细胞。
在一些实施方案中，抗体结合至肿瘤细胞或癌细胞。在一些实施方案中，抗体结合至肿瘤细胞或癌细胞表面上的肿瘤细胞或癌细胞抗原。在一些实施方案中，抗体结合至肿瘤细胞或癌细胞抗原，所述抗原是与肿瘤细胞或癌细胞缔合的细胞外基质蛋白。
本文所述的ADC的抗体对特定肿瘤细胞或癌细胞的特异性对于确定能最有效治疗的那些肿瘤或癌症可能是重要的。例如，在一些实施方案中，靶向存在于造血癌细胞上的癌细胞抗原的ADC治疗血液系统恶性肿瘤。在一些实施方案中，靶向存在于实体瘤的异常细胞上的癌细胞抗原的ADC治疗此类实体瘤。在一些实施方案中，ADC针对造血系统癌症诸如淋巴瘤(霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤)和白血病和实体瘤的异常细胞。
在一些实施方案中，通过施用ADC治疗或抑制癌症，包括但不限于肿瘤、转移或以特征在于不受控制的细胞生长的异常细胞为特征的其他疾病或病症。
在一些实施方案中，受试者先前已经历癌症治疗。在一些实施方案中，先前治疗是外科手术、放射疗法、一种或多种抗癌剂的施用、或任何前述的组合。
在一些实施方案中，癌症选自由以下项组成的组：腺癌、肾上腺皮质癌、肾上腺神经母细胞瘤、肛门鳞状细胞癌、阑尾腺癌、膀胱尿道上皮癌、胆管腺癌、膀胱癌、膀胱尿道上皮癌、骨脊索瘤、慢性淋巴细胞性骨髓性白血病、非淋巴细胞性急性髓细胞性骨髓性白血病、骨髓淋巴增殖性疾病、骨髓多发性骨髓瘤、骨肉瘤、脑星形细胞瘤、脑胶质母细胞瘤、脑髓母细胞瘤、脑膜瘤、脑少突神经胶质瘤、乳腺腺样囊性癌、乳腺癌、乳腺原位导管癌、乳腺浸润性导管癌、乳腺浸润性小叶癌、乳腺化生性癌、宫颈神经内分泌癌、宫颈鳞状细胞癌、结肠腺癌、结肠类癌、十二指肠腺癌、子宫内膜样瘤、食管腺癌、食道和胃癌、眼内黑色素瘤、眼内鳞状细胞癌、眼泪管癌、输卵管浆液性癌、胆囊腺癌、胆囊血管球瘤、食管胃结合部腺癌、头颈部腺样囊性癌、头颈癌、头颈神经母细胞瘤、头颈鳞状细胞癌、肾嫌色细胞癌、肾髓质癌、肾细胞癌、肾乳头状癌、肾肉瘤样癌、肾尿路上皮癌、肾癌、淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、肝胆管细胞癌、肝细胞癌、肝癌、肺腺癌、肺腺鳞癌、肺非典型类癌、肺癌肉瘤、肺大细胞神经内分泌癌、肺非小细胞肺癌、肺肉瘤、肺肉瘤样癌、肺小细胞癌、肺小细胞未分化癌、肺鳞状细胞癌、上呼吸消化道鳞状细胞癌、上呼吸消化道癌、淋巴结弥漫性大B细胞淋巴瘤、淋巴结滤泡性淋巴瘤、淋巴结纵隔B细胞淋巴瘤、淋巴结浆母细胞性肺腺癌淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、鼻咽和鼻旁窦未分化癌、卵巢癌、卵巢癌肉瘤、卵巢透明细胞癌、卵巢上皮癌、卵巢颗粒细胞瘤、卵巢浆液性癌、胰腺癌、胰腺导管腺癌、胰腺神经内分泌癌、腹膜间皮瘤、腹膜浆液性癌、胎盘绒毛膜癌、胸膜间皮瘤、前列腺腺泡性腺癌、前列腺癌、直肠腺癌、直肠鳞状细胞癌、皮肤附属器癌、皮肤基底细胞癌、皮肤黑色素瘤、皮肤梅克尔细胞癌、皮肤鳞状细胞癌、小肠腺癌、小肠胃肠道间质瘤(GIST)、大肠/结肠癌、大肠腺癌、软组织血管肉瘤、软组织尤文肉瘤、软组织血管内皮瘤、软组织炎性肌纤维母细胞瘤、软组织平滑肌肉瘤、软组织脂肪肉瘤、软组织神经母细胞瘤、软组织副神经节瘤、软组织血管周上皮样细胞瘤、软组织肉瘤、软组织滑膜肉瘤、胃腺癌、弥漫型胃腺癌、肠型胃腺癌、肠型胃腺癌、胃平滑肌肉瘤、胸腺癌、淋巴细胞性胸腺瘤、甲状腺乳头状癌、未知原发性腺癌、未知原发性癌、未知原发性恶性肿瘤、淋巴样肿瘤、未知原发性黑色素瘤、未知原发性肉瘤样癌、未知原发性鳞状细胞癌、未知未分化神经内分泌癌、未知原发性未分化小细胞癌、子宫癌肉瘤、子宫内膜腺癌、子宫内膜样子宫内膜腺癌、乳头状浆液性子宫内膜腺癌和子宫平滑肌肉瘤。
在一些实施方案中，同时向受试者施用一种或多种具有式(I)的另外的抗癌剂或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，受试者同时接受放射疗法以及式(I)或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，在施用式(I)或其药学上可接受的盐之后，向受试者施用一种或多种另外的抗癌剂。在一些实施方案中，在施用式(I)或其药学上可接受的盐之后，受试者接受放射疗法。
在一些实施方案中，例如由于不可接受的或不可忍受的副作用，或者其中先前疗法毒性过大，受试者已中止先前疗法。
一些实施方案提供了一种治疗有需要的受试者的自身免疫病症的方法，该方法包括向受试者施用治疗有效量的式(I)或其药学上可接受的盐。
一些实施方案提供了一种治疗有需要的受试者的自身免疫病症的方法，该方法包括在施用另外的治疗剂(例如，甲氨蝶呤、阿达木单抗(adalimumab)或利妥昔单抗)之前、期间或之后，向受试者施用治疗有效量的式(I)或其药学上可接受的盐。
一些实施方案提供了一种改善有需要的受试者的自身免疫病症的一种或多种症状的方法，该方法包括向受试者施用治疗有效量的式(I)或其药学上可接受的盐。
一些实施方案提供了一种改善有需要的受试者的自身免疫病症的一种或多种症状的方法，该方法包括在向受试者施用另外的治疗剂(例如，甲氨蝶呤、阿达木单抗或利妥昔单抗)之前、期间或之后，向受试者施用治疗有效量的式(I)或其药学上可接受的盐。
一些实施方案提供了一种在有需要的受试者中降低自身免疫病症突发的发生率的方法，该方法包括向受试者施用治疗有效量的式(I)或其药学上可接受的盐。
一些实施方案提供了一种在有需要的受试者中降低自身免疫病症突发的发生率的方法，该方法包括在施用另外的治疗剂(例如，甲氨蝶呤、阿达木单抗或利妥昔单抗)之前、期间或之后，向受试者施用治疗有效量的式(I)或其药学上可接受的盐。
“突发”是指病症的症状突然发作或症状严重程度突然增加。例如，通常用NSAID治疗的轻度关节疼痛的突发可导致使人衰弱的关节疼痛，即使使用NSAID也无法正常运动。
在一些实施方案中，ADC的抗体结合至自身免疫抗原。在一些实施方案中，抗原位于涉及自身免疫病症的细胞的表面上。在一些实施方案中，抗体结合至位于细胞表面上的自身免疫抗原。在一些实施方案中，抗体结合至与自身免疫病症状态相关的活化淋巴细胞。在一些实施方案中，ADC杀伤产生与特定自身免疫病症相关的自身免疫抗体的细胞或抑制其增殖。
在一些实施方案中，同时向受试者施用一种或多种具有式(I)的另外的治疗剂或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，一种或多种另外的治疗剂是已知治疗和/或改善自身免疫病症的症状的化合物(例如，被FDA或EMA批准用于治疗自身免疫病症的化合物)。
在一些实施方案中，自身免疫病症包括但不限于Th2淋巴细胞相关病症(例如，特应性皮炎、特应性哮喘、鼻结膜炎、过敏性鼻炎、Omenn综合征、系统性硬化症和移植物抗宿主疾病)；Th1淋巴细胞相关病症(例如，类风湿性关节炎、多发性硬化症、银屑病、Sjorgren综合征、桥本氏甲状腺炎、格雷夫斯病、原发性胆汁性肝硬化、韦格纳肉芽肿和结核病)；以及活化B淋巴细胞相关病症(例如，系统性红斑狼疮、Goodpasture综合征、类风湿性关节炎和I型糖尿病)。
在一些实施方案中，自身免疫病症的一种或多种症状包括但不限于关节疼痛、关节肿胀、皮疹、瘙痒、发烧、疲劳、贫血、腹泻、干眼、口干、脱发和肌肉疼痛。
组合物和施用方法
本公开提供了包含本文所述的ADC和药学上可接受的载体的药物组合物。优选的施用途径是肠胃外。肠胃外施用包括皮下注射、静脉内、肌内、胸骨内注射或输注技术。在一些实施方案中，肠胃外施用组合物。在这些实施方案之一中，静脉内施用缀合物。施用通常通过任何便利途径实现，例如通过输注或团注。
ADC的药物组合物被配制成使得其在向受试者施用组合物时是生物可利用的。在一些实施方案中，组合物将是一个或多个可注射剂量单位的形式。
用于制备药物组合物的材料在所用量下可以是无毒的。对于本领域普通技术人员显而易见的是，药物组合物中活性成分的最佳剂量将取决于多种因素。相关因素包括但不限于动物的类型(例如，人)、化合物的具体形式、施用方式和所用的组合物。
在一些实施方案中，ADC组合物是固体，例如作为冻干粉末，其适于在施用前复原为液体制剂。在一些实施方案中，ADC组合物是液体组合物，诸如溶液或悬浮液。液体组合物或悬浮液可用于通过注射递送，并且冻干固体适于使用适于注射的稀释剂重构为液体或悬浮液。在通过注射施用的组合物中，通常包含表面活性剂、防腐剂、润湿剂、分散剂、悬浮剂、缓冲剂、稳定剂和等渗剂中的一种或多种。
在一些实施方案中，液体组合物无论是溶液、悬浮液或其他类似形式，其还可包含以下中的一种或多种：无菌稀释剂，诸如注射用水、盐水溶液，优选生理盐水、林格氏溶液、等渗氯化钠；固定油，诸如可用作溶剂或悬浮介质的合成的甘油一酯或甘油二酯、聚乙二醇、甘油、环糊精、丙二醇或其他溶剂；抗菌剂，诸如苯甲醇或对羟基苯甲酸甲酯；抗氧化剂，诸如抗坏血酸或亚硫酸氢钠；螯合剂，诸如乙二胺四乙酸；缓冲剂，诸如氨基酸、乙酸盐、柠檬酸盐或磷酸盐；洗涤剂，诸如非离子表面活性剂、多元醇；以及用于调节张力的剂，诸如氯化钠或葡萄糖。肠胃外组合物通常封装在由玻璃、塑料或其他材料制成的安瓿、一次性注射器或多剂量小瓶中。生理盐水是示例性佐剂。可注射组合物优选地是无菌的液体组合物。
能够有效治疗特定病症或病况的ADC的量将取决于病症或病况的性质，这通常通过标准临床技术确定。此外，有时使用体外和/或体内测定来帮助确定最佳剂量范围。在组合物中使用的精确剂量还将取决于肠胃外施用途径和疾病或病症的严重性，并且应根据医师的判断和每个受试者的情况来决定。
在一些实施方案中，组合物包含有效量的ADC，使得将获得合适的剂量。通常，该量为按组合物的重量计至少约0.01％的ADC。
在一些实施方案中，施用于受试者的ADC的组合物剂量为约0.01mg/kg至约100mg/kg、约1至约100mg/kg、或约0.1至约25mg/kg受试者体重。在一些实施方案中，施用于受试者的剂量为约0.01mg/kg至约15mg/kg受试者体重。在一些实施方案中，施用于受试者的剂量为约0.1mg/kg至约15mg/kg受试者体重。在一些实施方案中，施用于受试者的剂量为约0.1mg/kg至约20mg/kg受试者体重。在一些实施方案中，施用的剂量为约0.1mg/kg至约5mg/kg或约0.1mg/kg至约10mg/kg受试者体重。在一些实施方案中，施用的剂量为约1mg/kg至约15mg/kg受试者体重。在一些实施方案中，施用的剂量为约1mg/kg至约10mg/kg受试者体重。在一些实施方案中，治疗周期内，施用的剂量为约0.1至约4mg/kg、约0.1至约3.2mg/kg、或约0.1至约2.7mg/kg的受试者体重。
术语“载体”是指与化合物一起施用的稀释剂、佐剂或赋形剂。此类药物载体是液体。当静脉内施用化合物时，水是示例性载体。盐水溶液和葡萄糖水溶液和甘油溶液也可用作可注射溶液的液体载体。合适的药物载体还包括甘油、丙二醇或乙醇。如果需要，在一些实施方案中本发明的组合物还将含有少量的润湿剂或乳化剂和/或pH缓冲剂。
在一些实施方案中，ADC根据常规程序配制为适于静脉内施用于动物、具体地人的药物组合物。通常，用于静脉内施用的载体或媒介物是无菌等渗缓冲水溶液。在一些实施方案中，组合物还包含局部麻醉剂诸如利多卡因，以减轻注射部位处的疼痛。在一些实施方案中，ADC和制剂的其余部分以单位剂型单独地或混合在一起提供，例如，作为指示活性剂的量的密封容器诸如安瓿或小袋中的冻干粉末或无水浓缩物。当ADC通过输注施用时，其有时例如用含有无菌药物级水或盐水的输注瓶分配。当通过注射施用缀合物时，通常提供无菌注射用水或盐水的安瓿，以便在施用前混合各成分。
药物组合物通常被配制为无菌的、基本上等渗的并且完全符合美国食品药品监督管理局的所有良好生产规范(GMP)规定。
实施例
一般信息
使用所有可商购获得的无水溶剂，无需进一步纯化。在Biotage Isolera One快速纯化系统(Charlotte,NC)上进行硅胶色谱法。在与配备有Acquity UPLC BEH C18 2.1x50mm,1.7μm反相柱的Waters Acquity H-Class Ultra Performance LC连接的WatersXevo G2 ToF质谱仪上进行UPLC-MS。酸性流动相(0.1％甲酸)由3％乙腈/97％水至100％乙腈的梯度组成(流速＝0.7mL/min)。在配置有Waters 2998PDA检测器的Waters 2545溶剂输送系统上进行制备型HPLC。将产物经C12Phenomenex Synergi反相柱(10.0-50mm直径x250mm长度，4μm，
Figure BDA0003983088010002111
Figure BDA0003983088010002112
)纯化，用0.1％三氟乙酸的水溶液(溶剂A)和0.1％三氟乙酸的乙腈溶液(溶剂B)洗脱。纯化方法通常包括溶剂A至溶剂B的线性梯度，从5％水性溶剂B渐变至95％溶剂B；流速根据柱直径而变化。在Varian Mercury 400MHz光谱仪上收集NMR光谱数据。偶合常数(J)以赫兹报告。
产物纯化：利用Biotage Isolera One快速纯化系统(Charlotte,NC)通过快速柱色谱法纯化产物。在与Waters Acquity UPLC系统连接的Waters单四极杆检测器质谱仪上进行超高效液相色谱-质谱法(UPLC-MS)。在配置有Waters 2998PDA检测器的Waters 2454二元梯度模块溶剂输送系统上进行制备型高效液相色谱法(HPLC)。除非另外指明，否则产物用Phenomenex Max-RP 4μm Synergi
Figure BDA0003983088010002113
250mm反相柱的适当直径的柱纯化，用0.05％三氟乙酸水溶液和0.05％三氟乙酸乙腈溶液洗脱。使用所有可商购获得的无水溶剂，无需进一步纯化。起始材料、试剂和溶剂购自商业供应商(Sigma Aldrich和/或FischerScientific)。
分析型LCMS方法
方法A：在配备有C18柱(Phenomenex Luna，2.1x 50mm，1.6μm)的Waters AcquityH Class UPLC上进行色谱法。溶剂A包含0.05％甲酸的水溶液。溶剂B包含0.05％甲酸的乙腈溶液。流速为0.7ml/min，并且用以下梯度进行洗脱：0至1.21min，3％至60％溶剂B；1.21至1.43min，60％至95％溶剂B；1.43至1.79min，95％至3％溶剂B。在Waters Xevo G2 TOF上通过正离子模式的电喷雾电离进行质量检测。
方法B：在配备有C8柱(Phenomenex Kinetex，2.1x 50mm，1.7μm)的WatersAcquity H Class UPLC上进行色谱法。溶剂A包含0.05％甲酸的水溶液。溶剂B包含0.05％甲酸的乙腈溶液。流速为0.7ml/min，并且用以下梯度进行洗脱：0至1.21min，3％至60％溶剂B；1.21至1.43min，60％至95％溶剂B；1.43至1.79min，95％至3％溶剂B。在Waters XevoG2 TOF上通过正离子模式的电喷雾电离进行质量检测。
方法C：在配备有C18柱(Phenomenex Luna，2.1x 50mm，1.6μm)的Waters AcquityH Class UPLC上进行色谱法。溶剂A包含0.05％甲酸的水溶液。溶剂B包含0.05％甲酸的乙腈溶液。流速为0.6ml/min，并且用以下梯度进行洗脱：0至1.10min，3％至60％溶剂B；1.10至1.50min，60％至97％溶剂B；1.50min至2.50min，97％溶剂B；2.50min至2.60min，97％至3％溶剂B。在Waters Xevo G2 TOF上通过正离子模式的电喷雾电离进行质量检测。
方法D：在配备有C18柱(Phenomenex Luna，2.1x 50mm，1.6μm)的Waters AcquityH Class UPLC上进行色谱法。溶剂A包含0.05％甲酸的水溶液。溶剂B包含0.05％甲酸的乙腈溶液。流速为0.7ml/min，并且用以下梯度进行洗脱：0至1.21min，3％至60％溶剂B；1.21至1.43min，60％至97％溶剂B；1.43min至4.00min，97％至3％溶剂B。在Waters Xevo G2TOF上通过正离子模式的电喷雾电离进行质量检测。
方法E：在配备有C18柱(Phenomenex Luna，2.1x 50mm，1.6μm)的Waters AcquityUPLC上进行色谱法。溶剂A包含0.1％甲酸的水溶液。溶剂B包含0.1％甲酸的乙腈溶液。流速为0.5ml/min，并且用以下梯度进行洗脱：0至1.70min，3％至60％溶剂B；1.70至1.2.00min，60％至95％溶剂B；2.00min至2.50min，97％至3％溶剂B。在Waters Acquity SQ上通过正离子模式的电喷雾电离进行质量检测。
CORTECS C18一般方法：
色谱柱-Waters CORTECS C18 1.6μm，2.1x 50mm，反相柱
溶剂A-0.1％甲酸的水溶液
溶剂B-含0.1％甲酸的乙腈
时间(min) 流速(mL/min) A％ B％ 梯度
初始 0.6 97 3
1.70 0.6 40 60 线性
2.00 0.6 5 95 线性
2.50 0.6 5 95 线性
2.80 0.6 97 3 线性
3.00 0.6 97 3 线性
CORTECS C18疏水性方法：
色谱柱-Waters CORTECS C18 1.6μm，2.1x 50mm，反相柱
溶剂A-0.1％甲酸的水溶液
溶剂B-含0.1％甲酸的乙腈
时间(min) 流速(mL/min) A％ B％ 梯度
初始 0.6 97 3
1.50 0.6 5 95 线性
2.40 0.6 5 95 线性
2.50 0.6 97 3 线性
2.80 0.6 97 3 线性
CORTECS C18亲水性方法：
色谱柱-Waters CORTECS C18 1.6μm，2.1x 50mm，反相柱
溶剂A-0.1％甲酸的水溶液
溶剂B-含0.1％甲酸的乙腈
时间(min) 流速(mL/min) A％ B％ 梯度
初始 0.6 97 3
1.70 0.6 67 33 线性
2.00 0.6 5 95 线性
2.50 0.6 97 3 线性
2.80 0.6 97 3 线性
实施例2：MC 1(葡糖苷酸-吉西他滨缀合物)的合成
Figure BDA0003983088010002141
步骤1：
Figure BDA0003983088010002142
在10mL无水吡啶中溶解782.6mg吉西他滨(2.973mmol)。在5分钟内向该溶液中添加1.89mL三甲基甲硅烷基氯(TMSCl)(14.9mmol)，同时连续并剧烈搅拌15分钟。向反应物中添加961.5mg芴甲氧羰酰氯(Fmoc-Cl)(3.717mmol)，其中反应物在30分钟内从黄色变为无色，并且在反应过程中持续存在白色沉淀。为了水解三甲基甲硅烷基(TMS)基团和过量的氯甲酸酯，添加2.0mL H2O，并且将反应物搅拌2小时。将反应混合物用100mL EtOAc稀释，并且用100mL 1M盐酸(HCl)洗涤3次，用硫酸镁(MgSO4)干燥。此时，将反应物过滤并真空浓缩。通过快速色谱法纯化粗产物，100G KP-Sil 50-100％ EtOAc的己烷溶液。Rf(产物)＝1:2己烷:EtOAc中0.15。
将含有期望产物的级分真空浓缩，得到呈白色固体的产物(1.169g，2.407mmol，80.9％)。Rt＝1.71min，CORTECS C18一般方法UPLC(如上文结合实施例1所述)。C24H22F2N3O6的MS(m/z)[M+H]+计算值为486.45，实测值为486.12。
步骤2：
Figure BDA0003983088010002151
制备185mg接头(L-1)(0.206mmol)溶解于2mL二氯甲烷(DCM)中的溶液。向该溶液中添加185mg多聚甲醛(6.18mmol)，然后添加1.0mL TMSCl。将反应物搅拌10分钟，此时通过将2μL等分试样稀释到98μL MeOH中并通过UPLC-MS观察甲醇加合物，从而观察完全转化。将反应物用注射式过滤器过滤，用1mL DCM冲洗，并在浓缩时添加2mL甲苯以共沸最终混合物。将洗脱液真空浓缩，得到呈无色固体的活化接头。
将Fmoc-吉西他滨(步骤1)与甲苯共沸，并在使用前在高真空下干燥。然后将100mgFmoc-吉西他滨(0.206mmol)悬浮于2mL无水性DCM中，并且添加71.8μL DIPEA(0.412mmol)。将活化接头溶解于2mL无水DCM中，并以10mL/小时的速率滴加到搅拌的反应物中。将反应物搅拌45分钟，此时观察到完全转化。将反应物用0.1mL MeOH淬灭，过滤，并将洗脱液真空浓缩，得到无色固体，其无需纯化即可用于下一步骤(182mg，0.130mmol，粗品，63％)。Rt＝1.56min CORTECS C18疏水性方法UPLC。C67H69F2N6O23S的MS(m/z)[M+H]+计算值为1395.41，实测值为1395.40。
步骤3：
Figure BDA0003983088010002161
在2mL THF:MeOH 1:1溶液中溶解182mg步骤2产物(0.130mmol)。用冰/水浴冷却反应物。此后，添加31.2mg LiOH(1.30mmol)，并将反应物搅拌30分钟。通过UPLC-MS观察向乙酸盐去保护产物的转化(如实施例1中所述)，向反应混合物中添加1mL H2O，并将反应物搅拌60分钟。通过UPLC-MS观察完全转化(如实施例1中所述)。将反应物用30μL AcOH淬灭，真空浓缩，并通过制备型HPLC纯化，所述制备型HPLC使用21.2x 250mm Max-RP柱，用5-35-95％ MeCN甲醇的H2O 0.05％ TFA溶液的梯度洗脱。将含有期望化合物的级分真空浓缩，得到呈无色固体的期望化合物(65.1mg，0.0803mmol，62％)。Rt＝0.82min CORTECS C18亲水性方法UPLC。C30H41 F2N6O16S的MS(m/z)[M+H]+计算值为811.23，实测值为811.04。
步骤4：吉西他滨和接头和N-琥珀酰亚胺基3-马来酰亚胺丙酸酯：
Figure BDA0003983088010002162
在0.5mL无水DMF溶液中溶解65.1mg步骤3产物(0.0803mmol)。向反应物中添加26.5μL DIPEA(0.160mmol)，然后添加23.5mg N-琥珀酰亚胺基3-马来酰亚胺丙酸酯(0.0883mmol，购自TCI America，产品号S0427)。将反应物搅拌15分钟。在UPLC-MS后观察到完全转化。将反应物用0.020mL AcOH淬灭，并通过制备型HPLC纯化，所述制备型HPLC用H2O0.05％TFA中的5-35-95％ MeCN在21.2x 250mm Max-RP上洗脱。将含有期望产物的级分冻干，得到呈无色粉末的期望化合物(41.2mg，0.0428mmol，53.3％)。Rt＝1.29min CORTECSC18亲水性方法UPLC。C37H46 F2N7O19S的MS(m/z)[M+H]+计算值为962.25，实测值为962.06。
实施例3：受保护的双联试剂(S)-N，N'-(((2-(3-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)丙酰氨基)丁烷-1,4-二基)双(硫烷二基))双(亚甲基))二乙酰胺(MC2二乙酰胺)的合成
Figure BDA0003983088010002171
向小瓶中加入200mg(S)-2-氨基丁烷-1,4-二硫醇盐酸盐(1.15mmol)和308mg N-(羟甲基)乙酰胺(3.45mmol)，并悬浮于0.6mL水中。将悬浮液在冰水浴中冷却并滴加0.2mL盐酸(11.7M，2.34mmol)。将反应物缓慢升温至室温。搅拌过夜后，将反应物在45℃浓缩，得到呈澄清半固体的中间体(S)-N,N'-(((2-氨基丁烷-1,4-二基)双(硫烷二基))双(亚甲基))二乙酰胺盐酸盐，其无需进一步纯化即可使用。分析型UPLC-MS：tr＝0.57min，m/z(ES+)计算值280.1(M+H)+，实测值280.0。
在小瓶中合并：滴加溶解于2.5mL DMF和0.51mL DIPEA(2.94mmol)中的232mg中间体(S)-N,N'-(((2-氨基丁烷-1,4-二基)双(硫烷二基))双(亚甲基))二乙酰胺盐酸盐(0.73mmol)和391mg 2,5-二氧代吡咯烷-1-基3-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)丙酸酯(1.47mmol)。在室温下搅拌2小时后，将反应物用0.25mL乙酸淬灭，用甲醇稀释，通过制备型HPLC纯化(如上文结合实施例1所述)，并冻干至干燥，从而得到(S)-N,N'-(((2-(3-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)丙酰氨基)丁烷-1,4-二基)双(硫烷二基))双(亚甲基))二乙酰胺(42mg，13.3％)。分析型UPLC：tr＝0.89min，m/z(ES+)计算值431.1(M+H)+，实测值431.1；计算值453.1(M+Na)+，实测值453.0。
实施例4：MC9的合成
Figure BDA0003983088010002181
步骤1：(2R,3R,4S,5S)-2-(乙酰氧基甲基)-6-溴四氢-2H-吡喃-3,4,5-三基三乙酸酯(化合物5)：将(2R,3S,4S,5R,6R)-6-(乙酰氧基甲基)四氢-2H-吡喃-2,3,4,5-四基四乙酸酯(2.55g，6.53mmol)溶解于11.5mL CH2Cl2中并在冰浴中冷却至0℃。滴加33％ HBr在4.3mL乙酸中的溶液，在0℃下搅拌30min，并使其缓慢升温至室温过夜。通过TLC(条件：30％EtOAc/己烷，用KMnO4染色)确定反应完成。将粗反应混合物用CH2Cl2稀释，并用水、饱和NaHCO3溶液、水和盐水各洗涤一次，然后经Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩，从而得到化合物5(2.68g，6.52mmol，100％)。1H NMR(CDCl3,400MHz):δ2.01(s,3H),2.08(s,3H),2.10(s,3H),2.18(s,3H),4.13(dd,J＝12.5Hz,2.2Hz,1H),4.18-4.26(m,1H),4.33(dd,J＝12.5Hz,4.8Hz,1H),5.33-5.41(m,1H),5.44(dd,J＝3.5Hz,1.6Hz,1H),5.70(dd,J＝10.3Hz,3.3Hz,1H),6.33(dd,J＝1.7Hz,0.8Hz,1H)。
Figure BDA0003983088010002191
步骤2：(2R,3R,4S,5S,6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(4-甲酰基-2-硝基苯氧基)四氢-2H-吡喃-3,4,5-三基三乙酸酯(化合物6)：将化合物5(3.227g，7.85mmol)溶解于10mL乙腈中并添加氧化银(7.82g，33.74mmol)。将溶解于55mL乙腈中的4-甲酰基-2-硝基苯酚(1.312g，7.85mmol)分批添加到反应混合物中。2小时后通过TLC(条件：5％ MeOH/DCM，用KMnO4染色)确定反应完成，将溶液通过含乙酸乙酯的硅藻土过滤，并将滤液真空浓缩，从而得到化合物6(3.643g，7.32mmol，93％)。LCMS方法A：tr＝1.31min；m/z＝520.2[M+Na]+。
Figure BDA0003983088010002192
步骤3：(2R,3R,4S,5S,6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(4-(羟甲基)-2-硝基苯氧基)四氢-2H-吡喃-3,4,5-三基三乙酸酯(化合物7)：将化合物6(3.245g，6.52mmol)悬浮于60mL1:1:1THF:MeOH:AcOH中，并在冰浴中冷却至0℃。在2小时内分批添加硼氢化钠(740mg，19.56mmol)。完成后，将反应混合物用甲醇稀释，通过硅藻土过滤，并真空浓缩。将粗残余物在DCM与饱和NaHCO3溶液之间分配，将水层用DCM萃取两次，并且将合并的有机层用盐水洗涤一次，经Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩，从而得到化合物7(3.09g，6.19mmol，95％)。LCMS方法A：tr＝1.14min；m/z＝522.2[M+Na]+。
Figure BDA0003983088010002201
步骤4：(2R,3R,4S,5S,6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(2-氨基-4-(羟甲基)苯氧基)四氢-2H-吡喃-3,4,5-三基三乙酸酯(化合物8)：将化合物7(1.376g，2.76mmol)溶于40mL甲醇中，并在冰浴中冷却至0℃。依次添加锌粉(1.80g，27.55mmol)和氯化铵(1.474g，27.55mmol)。将反应物在冰上搅拌15min。然后移除冰浴，并在室温下继续搅拌2小时。将反应物通过含甲醇的硅藻土过滤，并将滤液真空浓缩。将粗残余物再悬浮于乙酸乙酯中，并且用饱和NaHCO3溶液洗涤两次，用盐水洗涤一次。将合并的水层用乙酸乙酯萃取三次，将合并的有机层经硫酸钠干燥并真空浓缩。通过硅胶色谱法，使用10％至100％乙酸乙酯的二氯甲烷溶液的梯度纯化粗产物，从而得到410mg化合物8(0.87mmol，32％)。LCMS方法B：tr＝0.85min；m/z＝470.2[M+H]+。
Figure BDA0003983088010002202
步骤5：(2R,3S,4S,5R,6R)-2-(2-(3-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)丙酰氨基)-4-(羟甲基)苯氧基)-6-(乙酰氧基甲基)四氢-2H-吡喃-3,4,5-三基三乙酸酯(化合物9)：向151mg化合物8(0.32mmol)于5mL二氯甲烷中的溶液中添加110mg 3-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)丙酸(0.35mmol)，同时添加0.2mL DMF以帮助溶解，并添加87.5mg EEDQ(0.35mmol)，并且将反应物在室温下搅拌过夜。将反应混合物真空浓缩，并将粗产物通过硅胶色谱法纯化，所述硅胶色谱法使用0至3％甲醇的二氯甲烷溶液的梯度，从而得到化合物9(214mg，0.28mmol，87％)。LCMS方法A：tr＝1.43min；m/z＝763.3[M+H]+。
Figure BDA0003983088010002211
步骤6：(2R,3S,4S,5R,6R)-2-(2-(3-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)丙酰氨基)-4-(((4-硝基苯甲酰基)氧基)甲基)苯氧基)-6-(乙酰氧基甲基)四氢-2H-吡喃-3,4,5-三基三乙酸酯(化合物10)：向化合物9(258mg，0.34mmol)在3mL DMF中的溶液中添加88.6μLDIEA(0.51mmol)和双(4-硝基苯基)碳酸酯(206mg，0.68mmol)，并将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物在水与乙酸乙酯之间分配，并将有机层用盐水洗涤三次，经MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶色谱法纯化粗产物，所述硅胶色谱法使用10％至70％乙酸乙酯的己烷溶液的梯度，从而得到208mg化合物10(0.22mmol，65％)。LCMS方法A：tr＝1.61min；m/z＝928.4[M+H]+。
Figure BDA0003983088010002212
步骤7：(2R,3S,4S,5R,6R)-2-(2-(3-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)丙酰氨基)-4-((((3-(4-(4-((E)-3-(吡啶-3-基)丙烯酰氨基)丁基)哌啶-1-羰基)苯基)氨基甲酰基)氧基)甲基)苯氧基)-6-(乙酰氧基甲基)四氢-2H-吡喃-3,4,5-三基三乙酸酯(化合物11)：将(E)-N-(4-(1-(3-氨基苯甲酰基)哌啶-4-基)丁基)-3-(吡啶-3-基)丙烯酰胺(581mg，0.916mmol)和934mg化合物10(1.01mmol)溶解于106mL DMF和2.1mL吡啶中。添加12.5mg HOAt(0.092mmol)作为DMF中的溶液，并将反应物在室温下搅拌过夜。将反应物倒入EtOAc中，并且将有机层用水洗涤2次，经MgSO4干燥，并真空浓缩。将粗产物通过硅胶色谱法纯化，所述硅胶色谱法使用0至10％甲醇的二氯甲烷溶液的梯度，从而得到850mg化合物11(0.711mmol，78％)。LCMS方法C：tr＝1.84min；m/z＝1195.8[M+H]+。
Figure BDA0003983088010002221
步骤8：3-(3-氨基丙酰氨基)-4-(((2R,3S,4S,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)苄基(3-(4-(4-((E)-3-(吡啶-3-基)丙烯酰氨基)丁基)哌啶-1-羰基)苯基)氨基甲酸酯(化合物12)：将383mg化合物11(0.293mmol)溶解于6mL THF和6mLMeOH中并在冰上冷却。缓慢添加5.9mL LiOH的溶液(0.5M，2.93mmol)。30分钟后，将反应物从冰中取出并使其升温至室温。4小时后，将反应物用167.5μL乙酸(2.93mmol)淬灭并真空浓缩。将粗残余物溶于DMSO中，过滤，并通过制备型HPLC纯化，从而得到230mg呈TFA盐的化合物12(0.223mmol，76％)。LCMS方法D：tr＝0.79min；m/z＝805.4[M+H]+。
Figure BDA0003983088010002222
步骤9：3-(3-((S)-3-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)丙酰氨基)丙酰氨基)-4-(((2R,3S,4S,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)苄基(3-(4-(4-((E)-3-(吡啶-3-基)丙烯酰氨基)丁基)哌啶-1-羰基)苯基)氨基甲酸酯(化合物13)：将化合物12(334mg，0.324mmol)溶解于3.5mL DMF和0.17mLDIPEA(0.971mmol)中，然后添加148mg 2,5-二氧代吡咯烷-1-基(2S)-3-[(叔丁氧基羰基)氨基]-2-(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)丙酸酯(0.388mmol)。3小时后，将反应物用DMSO稀释，并通过制备型HPLC纯化，从而得到呈TFA盐的化合物13(299mg，0.253mmol，78％)。LCMS方法C：tr＝1.32min；m/z＝1071.7[M+H]+。
Figure BDA0003983088010002231
步骤10：3-(3-((S)-3-氨基-2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)丙酰氨基)丙酰氨基)-4-(((2R,3S,4S,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)苄基(3-(4-(4-((E)-3-(吡啶-3-基)丙烯酰氨基)丁基)哌啶-1-羰基)苯基)氨基甲酸酯(化合物14--MC9)：将化合物13(299mg，0.253mmol)用在15mL DCM中的20％ TFA处理2小时。真空去除溶剂，并且将残余物溶解于50/50CH3CN/H2O中，通过制备型HPLC纯化，从而得到呈TFA盐的化合物14(201mg，0.168mmol，66％)。LCMS方法C：tr＝1.10min；m/z＝971.6[M+H]+。
实施例5：MC10的合成
Figure BDA0003983088010002232
步骤1：(2R,3S,4S,5R,6R)-2-(2-(3-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)丙酰氨基)-4-(溴甲基)苯氧基)-6-(乙酰氧基甲基)四氢-2H-吡喃-3,4,5-三基三乙酸酯(化合物10)：在0℃下将化合物10的苯甲醇类似物(200mg，0.262mmol)和103mg PPh3(0.393mmol)溶解于8mL DCM中。在相同温度下分两份添加N-溴代琥珀酰亚胺(70mg，0.393mmol)。然后移除冰浴并使反应物缓慢升温至室温。4小时后，去除溶剂，通过快速柱色谱法纯化粗反应混合物，从而得到化合物10(154mg，0.187mmol，71.0％)。LCMS方法E：tr＝2.31min；m/z＝825.04[M+1]+。
Figure BDA0003983088010002241
步骤2：1-(3-(3-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)丙酰氨基)-4-(((2R,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-三乙酰氧基-6-(乙酰氧基甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)苄基)-3-((E)-3-((4-(1-(3-((叔丁氧基羰基)氨基)苯甲酰基)哌啶-4-基)丁基)氨基)-3-氧代丙-1-烯-1-基)吡啶-1-鎓(化合物11)：将化合物10(109.3mg，0.132mmol)和(E)-(3-(4-(4-(3-(吡啶-3-基)丙烯酰氨基)丁基)哌啶-1-羰基)苯基)氨基甲酸叔丁酯(51.6mg，0.102mmol)溶解于无水800μL DMF中，并加热至55℃保持2小时。将反应物冷却至室温，用DMSO和水稀释，通过制备型HPLC纯化，从而得到108.2mg化合物11(0.079mmol，77.8％)。LCMS方法E：tr＝2.00min；m/z＝1251.40[M]+。
Figure BDA0003983088010002242
步骤3：1-(3-(3-氨基丙酰氨基)-4-(((2R,3S,4S,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)苄基)-3-((E)-3-((4-(1-(3-((叔丁氧基羰基)氨基)苯甲酰基)哌啶-4-基)丁基)氨基)-3-氧代丙-1-烯-1-基)吡啶-1-鎓2,2,2-三氟乙酸酯(化合物12)：将化合物11(508mg，0.037mmol)溶解于1.8mL MeOH和THF的1:1混合物中。将溶液在冰上冷却，然后添加LiOH溶液(1.86mL，0.2M，0.372mmol)。将反应物在冰上搅拌30min，然后升温至室温。3小时后，将反应物用20μL乙酸酸化，然后用DMSO/水稀释，并通过制备型HPLC纯化，从而得到20.6mg化合物12(0.019mmol，50.8％)。LCMS方法E：tr＝0.84min；m/z＝861.39[M]+。
Figure BDA0003983088010002251
步骤4：1-(3-(3-((S)-3-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)丙酰氨基)丙酰氨基)-4-(((2R,3S,4S,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)苄基)-3-((E)-3-((4-(1-(3-((叔丁氧基羰基)氨基)苯甲酰基)哌啶-4-基)丁基)氨基)-3-氧代丙-1-烯-1-基)吡啶-1-鎓2,2,2-三氟乙酸酯(化合物13)：将化合物12(10.2mg，0.011mmol)溶解于300μL无水DMF中，然后添加9.3μL DIPEA。然后添加在100μL无水DMF中的6.12mg 2,5-二氧代吡咯烷-1-基(S)-3-((叔丁氧基羰基)氨基)-2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)丙酸酯(0.016mmol)。将反应混合物在室温下搅拌30min。30min后，将反应物用HOAc(10μL)酸化，用DMSO/水稀释，并通过制备型HPLC纯化，从而得到化合物13(10.3mg，0.008mmol，77.5％)。LCMS方法E：tr＝1.58min；m/z＝1127.79[M]+。
Figure BDA0003983088010002261
步骤5：1-(3-(3-((S)-3-氨基-2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1H-吡咯-1-基)丙酰氨基)丙酰氨基)-4-(((2R,3S,4S,5S,6R)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)苄基)-3-((E)-3-((4-(1-(3-氨基苯甲酰基)哌啶-4-基)丁基)氨基)-3-氧代丙-1-烯-1-基)吡啶-1-鎓2,2,2-三氟乙酸酯(化合物14MC10)：将10.3mg化合物13(0.008mmol)悬浮于240μL DCM中，并添加60μL TFA。添加TFA后，反应混合物变得均匀。将反应物在室温下搅拌4小时。4小时后，真空去除溶剂，并且将粗产物用DMSO/水稀释，通过制备型HPLC纯化，从而得到化合物14(MC10)(5.4mg，0.004mmol，51.3％)。LCMS方法E：tr＝1.45min；m/z＝927.46[M]+。
实施例6：hAC10ec与MC1或MC3的缀合物的疏水性相互作用色谱(HIC)
用HIC(280nm)测量疏水性相互作用。HIC的结果示于图1中。未缀合的hAC10ec(第一峰)的保留时间为约4分钟。hAC10ec-MC1(10)(第二峰)的保留时间为约4.5分钟。hAC10ec-MC1(20)(第三峰)的保留时间为约5.3分钟。hAC10ec-MC1(38.5)(第四峰)的保留时间为约6.0分钟。hAC10ec-MC3(38.4)(第五峰)的保留时间为约11.8分钟。
实施例7：与MC2和N-乙基马来酰亚胺(NEM)的缀合
图2示出了抗体与双效物MC2和N-乙基马来酰亚胺缀合的示例性实施方案和对应的光谱数据。
参见图2，具有L0＝23152的抗体(cAC10)与双效物MC2缀合以形成抗体-双效物缀合物(参见下文)(预期质量：23476；观测质量：23475)。
Figure BDA0003983088010002271
然后用TCEP还原抗体-双效物缀合物，接着与N-乙基马来酰亚胺(NEM)缀合以形成抗体-双效物-NEM缀合物(参见下文)(预期质量23723；观测质量23725)。
Figure BDA0003983088010002272
实施例8：缀合IgG1-MC6(8)以产生MC7/-MC8/-MC9/-MC10(PEG在双效物上)的16-负载ADC的实验程序
步骤1：将1.16mL PBS中的15mg完全还原的抗体IgG1与MC6(13.3mM DMSO溶液；1.45当量支架/反应性硫醇)在PBS中在室温下缀合2小时。通过PLRP-MS分析证实反应完成。将反应混合物通过尺寸排阻色谱法纯化，用PBS洗脱。浓缩所得溶液，从而得到11.8mg/ml的抗体-支架缀合物。使用pH 8的1M磷酸钾缓冲液将溶液调节至pH 8。使用TCEP(2当量/二硫化物)还原支架二硫化物，在37℃下温育75min。通过将分析等分试样与过量的N-乙酰基马来酰亚胺反应，然后进行PLRP-MS分析来验证完全还原。将完成的反应物通过尺寸排阻色谱法纯化，用PBS+2mM EDTA洗脱。将洗脱液浓缩至15.6mg/mL，并储存在-20℃下，直至进一步使用。
步骤2：将3mg完全还原的抗体-支架缀合物与指定药物接头(10mM DMSO溶液；1.25-1.45当量药物接头/反应性硫醇)在PBS中在室温下缀合2小时。通过PLRP-MS分析证实反应完成。将反应物通过尺寸排阻色谱法纯化，用PBS洗脱。将洗脱液稀释至4ml，然后浓缩至约1ml。再次重复该稀释/浓缩程序，然后最终浓缩至约300μl。使用DC蛋白质测定(Bio-Rad)来测定所得ADC的浓度。通过PLRP-MS证实最终缀合物的特性，并通过分析性SEC确定高分子量物质的存在。
实施例9：抗体-药物缀合物的实验分析数据
Lexp和Hexp分别是抗体轻链和重链的预测质量，不包括缀合后硫代琥珀酰亚胺部分的水解。Lobs和Hobs是通过PLRP-MS分析测定的观测到的主要物质的质量；指出了另外的水(来自分析前的硫代琥珀酰亚胺水解)的量。HMW％表示通过分析尺寸排阻色谱法测定的高分子量物质的百分比。
Figure BDA0003983088010002281
Figure BDA0003983088010002291
实施例10：澳瑞他汀与cAC10的缀合物及其缀合物中间体的分析表征
具有式cAC10-MC2(8)-MC4(16)的16-负载澳瑞他汀ADC的尺寸排阻色谱示于图3(A)中(保留时间：约6.6分钟)。具有式cAC10-MC2(8)-MC5(16)的16-负载澳瑞他汀ADC的尺寸排阻色谱数据示于图3(B)中(保留时间：约6.6分钟)。
与MC4的双效物缀合物(Ab-MC2(8)-MC4(16))的色谱和质谱数据。
Figure BDA0003983088010002292
图4(A)示出了cAC10与MC2和MC4的缀合物的PLRP色谱图(轻链的保留时间：约1.29分钟；重链的保留时间：约1.97分钟)。质谱数据表明，每条轻链缀合2当量MC4，并且每条重链缀合6当量MC4。因此，据发现，抗体总共与16当量MC4缀合。
图4(B)示出了与一个单位的MC2缀合的抗体(cAC10)轻链的质谱(预期值：25,737；观测值：25,737)。
图4(C)示出了与MC2(1)-MC4(2)缀合的抗体(cAC10)轻链的质谱(预期值：28,072；观测值：28,072)。
图4(D)示出了与MC2(3)-MC4(6)缀合的抗体(cAC10)重链的质谱(预期值：63,364；观测值：63,364)。观察到多重峰可归因于重链的G0、G1和G2低聚糖形式。
与MC5的双效物缀合物(Ab-MC2(8)-MC5(16))的色谱和质谱数据。
Figure BDA0003983088010002301
图5(A)示出了cAC10与MC2和MC5的缀合物的PLRP色谱图(轻链的保留时间：约0.33分钟；重链的保留时间：约1.0分钟)。质谱数据表明，每条轻链缀合2当量MC4，并且每条重链缀合6当量MC5。因此，据发现，抗体总共与16当量MC5缀合。
图5(B)示出了与MC2(1)-MC5(2)缀合的抗体(cAC10)轻链的质谱(预期值：26,244；观测值：26,244)。
图5(C)示出了与MC2(3)-MC5(6)缀合的抗体(cAC10)重链的质谱数据(预期值：57,880；观测值：57,879)。观察到多重峰可归因于重链的G0、G1和G2低聚糖形式。
实施例11：包含一个或多个多效物的树枝状ADC的制备
图6示意性地示出了用于制备包含一个或多个多效物部分的树枝状ADC的方法。单个Ab可被还原并与双效物MC2缀合。在具有10个半胱氨酸部分的经还原半胱氨酸工程改造的单克隆抗体(ECmAb)中，每个半胱氨酸的硫醇基团可缀合至MC2单元。每个MC2单元然后可进一步缀合至两个MC2单元。因此，L2-D部分与末端MC2单元的缀合允许形成具有DAR＝40的ADC。这些ADC具有通式Ab-MC2(10)-MC2(20)-(L2-D)40。
实施例12：亲水性树枝状ADC的表征
图7是具有不同DAR(DAR＝0、10、20和38.5)的hAC10与药物部分(MC1或MC3)的缀合物的疏水性相互作用色谱(HIC)色谱图。用280nm HIC测量疏水性相互作用。裸hAC10ec(第一峰)的保留时间为约4分钟。hAC10ec-MC1(10)(第二峰)的保留时间为约4.5分钟。hAC10ec-MC1(20)(第三峰)的保留时间为约5.3分钟。hAC10ec-MC1(38.5)(第四峰)的保留时间为约6.0分钟。hAC10ec-MC3(38.4)(第五峰)的保留时间为约11.8分钟。商业药物接头vcMMAE DAR(4)的保留时间为约7分钟。
实施例13：基于双效物的吉西他滨ADC对L540cy细胞的细胞毒性
图8示出了具有不同DAR值的cAc10ec-MC1 ADC对霍奇金淋巴瘤细胞系L540cy的体外细胞毒性。hAC10ec-MC1(38.5)的IC50值为313ng/mL(圆形)，hAC10ec-MC1(20)的IC50值为501ng/mL(正方形)，并且hAC10ec-MC1(10)的IC50值>10k(三角形)。
实施例14：IgG1-MC6(8)-MC7(16)/-MC8(16)/-MC9(16)/-MC10(16)和IgG1-MC2(8)-MC8(16)的大鼠药代动力学数据
图9示出了抗体IgG1与NAMPT抑制剂的DAR16缀合物的大鼠药代动力学数据，所述缀合物在L2-D单元处具有不同电荷。与具有净负电荷或正电荷的那些(其被快速清除)相比，具有中性或两性离子L2-D单元的构建体显示出延长的半衰期。通过将具有L2-D＝MC9(中性，具有正方形的虚线)或MC8(两性离子，具有圆形的实线)的ADC与具有L2-D＝MC7(带负电荷，具有三角形的实线)和MC10(带正电荷，具有菱形的虚线)的那些进行比较，可以看到结果。
实施例15：cAC10-MC6(8)-(L2-D)(16)的异种移植物功效数据
图10示出了具有通式cAC10-MC6(8)-(L2-D)(16)的含NAMPT抑制剂的cAC10和IgG1缀合物对L540cy-161细胞的异种移植物功效，其中L2-D为MC7、MC8、MC9或MC10。将未治疗的植入后平均肿瘤体积(即，0mg/kg(*标记，实线))与用cAC10-MC6(8)-MC8(16)1mg/kg(空心菱形，短划线)、cAC10-MC6(8)-MC7(16)1mg/kg(实心圆形，虚线)、cAC10-MC6(8)-MC9(16)1mg/kg(空心圆形，实线)、cAC10-MC6(8)-MC10(16)1mg/kg(X标记，长划线)和IgG-MC6(8)-MC8(16)1mg/kg(空心三角形，短划线)治疗后的平均肿瘤体积进行比较。
实施例16：Ab3(ec)-MC6(10)-MC9(20)与Ab3(ec)-MC7(10)(KG-1异种移植物模型)的异种移植物功效数据
图11示出了Ab3(ec)-MC6(10)-MC9(20)和Ab3(ec)-MC7(10)ADC对KG-1细胞的异种移植物功效。使用抗体和药物归一化给药体内比较10-负载和20-负载ADC(平均肿瘤数据)。将未治疗的KG-1细胞0mg/kg的平均肿瘤体积(空心菱形，实线)与用Ab3(ec)-MC7(10)10mg/kg(空心三角形，虚线)、Ab3(ec)-MC6(10)-MC9-(20)10mg/kg(空心正方形，长虚线)和Ab3(ec)-MC6(10)-MC9(20)5mg/kg(空心圆形，短虚线)治疗后的平均肿瘤体积进行比较。给药方案为q7dx2。
实施例17：高负载ADC的NAD-Glo测定的实验数据
实验数据来自根据制造商说明书的Nad-Glo(Promega)测定。
表1A：cAC10高负载ADC的体外数据
Figure BDA0003983088010002331
实施例18：高负载ADC的CTG测定的实验数据
实验数据来自根据制造商说明书的CTG测定(Promega)。
表1B
Figure BDA0003983088010002332
实施例19：高负载ADC针对急性髓性白血病(AML)细胞系的Nad-Glo测定的实验数据
表2：各种ADC针对AML细胞系的体外数据
Figure BDA0003983088010002333
实施例20：高负载ADC针对多发性骨髓瘤(MM)细胞系的Nad-Glo测定的实验数据
表3：各种ADC针对MM细胞系的体外数据
Figure BDA0003983088010002334
Figure BDA0003983088010002341
前述实施例中所述的化学实体具有以下结构：
Figure BDA0003983088010002342
Figure BDA0003983088010002351
Figure BDA0003983088010002361

Claims (128)

1.一种式(I)的抗体-药物缀合物(ADC)化合物：
Ab–{(S*-L1)–[(M)x-(L2-D)y]}p (I)
其中：
Ab为抗体；
每个S*为来自所述抗体的半胱氨酸残基的硫原子、来自所述抗体的赖氨酸残基的∈-氮原子、或三唑部分，并且
每个L1为任选地被PEG2至PEG72范围内的PEG单元取代的第一接头；
其中S*-L1选自由式A-K组成的组：
Figure FDA0003983087000000011
其中：
每个LA为任选地被1-3个独立选择的Ra取代的C1-10亚烷基，或任选地被1-3个独立选择的Rb取代的2-24元杂亚烷基；
每个环B为任选地被1-3个独立选择的Rc取代并且进一步任选地稠合至1-2个环的8-12元杂环基，所述环各自独立地选自由C6-10芳基和5-6元杂芳基组成的组；
每个Ra、Rb和Rc独立地选自由以下项组成的组：C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、卤素、-OH、＝O、-NRdRe、-C(O)NRdRe、-C(O)(C1-6烷基)、-(C1-6亚烷基)-NRdRe和-C(O)O(C1-6烷基)；
每个Rd和Re独立地为氢或C1-3烷基；或者Rd和Re与两者所连接的氮原子一起形成5-6元杂环基；
L2为任选地被选自PEG2至PEG20的PEG单元取代的任选的第二接头；
每个M为多效物；
下标x为0、1、2、3或4；
下标y为2x；
每个D为药物单元；
其中L1以及当L2不存在时的每个(M)x-(D)y或当L2存在时的每个(M)x-(L2-D)y在生理pH下具有净零电荷；
下标p为2至10范围内的整数；并且
D与Ab的比率为8:1至64:1。
2.如权利要求1所述的ADC化合物，其中每个S*为来自所述抗体的半胱氨酸残基的硫原子。
3.如权利要求1或2所述的ADC化合物，其中所述半胱氨酸残基是天然半胱氨酸残基。
4.如权利要求1或2所述的ADC化合物，其中所述半胱氨酸残基来自还原的链间二硫键，或来自经工程改造的半胱氨酸残基，或它们的组合。
5.如权利要求1或2所述的ADC化合物，其中所述半胱氨酸残基是经工程改造的半胱氨酸残基。
6.如权利要求1或2所述的ADC化合物，其中一个或多个S*为来自一个或多个经工程改造的半胱氨酸残基的硫原子；并且每个其余的S*为来自天然半胱氨酸残基的硫原子。
7.如权利要求1所述的ADC化合物，其中每个S*为来自所述抗体的赖氨酸残基的∈-氮原子。
8.如权利要求1或7所述的ADC化合物，其中所述赖氨酸残基是天然赖氨酸残基。
9.如权利要求1或7所述的ADC化合物，其中所述赖氨酸残基是经工程改造的赖氨酸残基。
10.如权利要求1或7所述的ADC化合物，其中一个或多个S*为来自所述抗体的一个或多个经工程改造的赖氨酸残基的∈-氮原子；并且每个其余的S*为来自所述抗体的天然赖氨酸残基的∈-氮原子。
11.如权利要求1所述的ADC化合物，其中式D的每个S*为三唑部分。
12.如权利要求1至11中任一项所述的ADC化合物，其中LA被PEG2至PEG36范围内的PEG单元取代。
13.如权利要求1至6中任一项所述的ADC化合物，其中S*-L1为：
Figure FDA0003983087000000041
其中LA为C1-10亚烷基或2-10元杂亚烷基，其分别任选地被1个Ra或1个Rb取代，并且任选地被PEG8至PEG24或PEG12至PEG32范围内的PEG单元取代。
14.如权利要求1至6中任一项所述的ADC化合物，其中S*-L1为：
Figure FDA0003983087000000042
其中LA为C2-10亚烷基或2-10元杂亚烷基，它们中任一者未被取代或被1个Ra取代，其中Ra为-NRdRe。
15.如权利要求1至6中任一项所述的ADC化合物，其中S*-L1为：
Figure FDA0003983087000000043
其中LA为C2-10亚烷基或2-10元杂亚烷基；它们各自任选地分别被1个Ra或1个Rb取代。
16.如权利要求1或11所述的ADC化合物，其中S*-L1为：
Figure FDA0003983087000000044
其中LA为C1-10亚烷基或2-10元杂亚烷基；它们各自任选地分别被1-2个Ra或1-2个Rb取代，前提条件是一个Rb为＝O并且如此取代的所述2-10元杂亚烷基的碳原子共价连接至环B的氮原子；
其中环B未被取代或被1-2个Rc取代，并且任选地稠合至1-2个环，所述环各自独立地选自由C6-10芳基和5-6元杂芳基组成的组。
17.如权利要求1至16中任一项所述的ADC化合物，其中LA为
Figure FDA0003983087000000051
其中LA1为键或任选地被1个Ra取代的C1-4亚烷基；下标n1为1-4；并且下标n2为0-4。
18.如权利要求1至17中任一项所述的ADC化合物，其中Ra和Rb为-(C1-6亚烷基)-NRdRe。
19.如权利要求1至18中任一项所述的ADC化合物，其中Rd和Re各自为氢或各自为甲基。
20.如权利要求19所述的ADC化合物，其中LA为
Figure FDA0003983087000000052
Figure FDA0003983087000000053
其中下标n1为1或2；并且下标n2为0、1或2。
21.如权利要求1至20中任一项所述的ADC化合物，其中LA为
Figure FDA0003983087000000054
其中LA2为C2-10亚烷基；下标n1为1或2；下标n2为0或1；并且LA2进一步任选地被PEG12至PEG32范围内的PEG单元取代。
22.如权利要求1至21中任一项所述的ADC化合物，其中LA进一步任选地被PEG8至PEG32范围内的PEG单元取代。
23.如权利要求1至16和22中任一项所述的ADC化合物，其中LA为
Figure FDA0003983087000000055
其中下标n3为1-5。
24.如权利要求1、7和16至23中任一项所述的ADC化合物，其中环B是未取代的、未稠合的8-12元杂环基环。
25.如权利要求1、7和16至23中任一项所述的ADC化合物，其中环B是稠合至C6-10芳基或5-6元杂芳基环的未取代的8-12元杂环基。
26.如权利要求1、7和16至23中任一项所述的ADC化合物，其中环B是稠合至两个C6-10芳基环或两个5-6元杂芳基环的未取代的8-12元杂环基。
27.如权利要求1、7和16至23中任一项所述的ADC化合物，其中环B是被1个Rc取代的未稠合的8-12元杂环基。
28.如权利要求1、7和16至23中任一项所述的ADC化合物，其中环B是被1个Rc取代并且稠合至C6-10芳基或5-6元杂芳基环的8-12元杂环基。
29.如权利要求1、7和16至23中任一项所述的ADC化合物，其中环B是未取代的8-12元杂环基并且稠合至两个C6-10芳基环或两个5-6元杂芳基环。
30.如权利要求1、7和16至23中任一项所述的ADC化合物，其中环B为：
Figure FDA0003983087000000061
31.如权利要求1至6中任一项所述的ADC化合物，其中S*-L1选自由以下项组成的组：
Figure FDA0003983087000000071
其中下标n1为1或2；并且下标n2为0、1或2；并且S*为来自所述抗体的半胱氨酸残基的硫原子。
32.如权利要求31所述的ADC化合物，其中*S-L选自由以下项组成的组：
Figure FDA0003983087000000072
其中S*为来自所述抗体的半胱氨酸残基的硫原子。
33.如权利要求1至6中任一项所述的ADC化合物，其中S*-L：
Figure FDA0003983087000000073
其中S*为来自所述抗体的半胱氨酸残基的硫原子。
34.如权利要求1至6中任一项所述的ADC化合物，其中*S-L1选自由以下项组成的组：
Figure FDA0003983087000000081
其中Rp为PEG8-PEG24范围内的PEG单元，其中所述PEG单元包含-(C1-3亚烷基)C(＝O)-基团，其羰基碳原子提供Rp与氮原子的共价连接；并且S*为来自所述抗体的半胱氨酸残基的硫原子。
35.如权利要求34所述的ADC化合物，其中*S-L1选自由以下项组成的组：
Figure FDA0003983087000000082
36.如权利要求1或7所述的ADC化合物，其中*S-L1为：
Figure FDA0003983087000000083
37.如权利要求1至36中任一项所述的ADC化合物，其中下标x为1。
38.如权利要求1或37所述的ADC化合物，其中M为：
Figure FDA0003983087000000091
其中波浪线表示M与L1的共价连接；
每个*表示M与-L2-D的共价连接；
Y1选自由以下项组成的组：键、-S-、-O-和-NH-；
Y2选自由以下项组成的组：CH和N；
LB不存在或者为任选地被选自由以下项组成的组的基团中断的C1-6亚烷基：-O-、-NH-、-N(C1-3烷基)-、-C(＝O)NH-、-NHC(＝O)-、-C(＝O)O-和-O(C＝O)-；
X1和X2各自独立地为-S-、-O-或-NH-；并且
下标m1和m2各自独立地为1-4。
39.如权利要求1或37至38中任一项所述的ADC化合物，其中Y1为-NH-；LB存在；Y2为CH；并且X1和X2各自为-S-。
40.如权利要求1或37至38中任一项所述的ADC化合物，其中Y1为键；LB不存在；Y2为N；并且X1和X2各自为-S-。
41.如权利要求1或37至38中任一项所述的ADC化合物，其中M选自由以下项组成的组：
Figure FDA0003983087000000101
其中波浪线表示M与L1的共价连接；并且
其中每个*表示M与-(L2-D)的共价连接。
42.如权利要求1至36中任一项所述的ADC化合物，其中M为
Figure FDA0003983087000000102
43.如权利要求1至36中任一项所述的ADC化合物，其中下标x为2-4；并且(M)x为–M1-(M2)x-1，其中M1和每个M2为独立选择的多效物。
44.如权利要求43所述的ADC化合物，其中下标x为2；并且(M)x为–M1-M2。
45.如权利要求43所述的ADC化合物，其中下标x为3；并且(M)x为–M1-(M2)2。
46.如权利要求3至45中任一项所述的ADC化合物，其中M1为：
Figure FDA0003983087000000111
其中波浪线表示M与L1的共价连接；
每个*表示M1与M2的共价连接；
Y1选自由以下项组成的组：键、-S-、-O-和-NH-；
Y2选自由以下项组成的组：CH和N；
LB不存在或者为任选地被选自由以下项组成的组的基团中断的C1-6亚烷基：-O-、-NH-、-N(C1-3烷基)-、-C(＝O)NH-、-NHC(＝O)-、-C(＝O)O-和-O(C＝O)-；
X1和X2各自独立地为-S-、-O-或-NH-；并且
下标m1和m2各自独立地为1-4。
47.如权利要求46所述的ADC化合物，其中Y1为-NH-；LB存在；Y2为CH；并且X1和X2各自为-S-。
48.如权利要求46所述的ADC化合物，其中Y1为键；LB不存在；Y2为N；并且X1和X2各自为-S-。
49.如权利要求46所述的ADC化合物，其中Y1为键；LB不存在；Y2为N；并且X1和X2各自为-NH。
50.如权利要求46所述的ADC化合物，其中M1选自由以下项组成的组：
Figure FDA0003983087000000121
其中波浪线表示M与L1的共价连接；并且
其中每个*表示M与-(L2-D)的共价连接。
51.如权利要求46所述的ADC化合物，其中M1为
Figure FDA0003983087000000122
52.如权利要求46所述的ADC化合物，其中M1为
Figure FDA0003983087000000123
53.如权利要求43至52中任一项所述的ADC化合物，其中每个M2独立地为：
Figure FDA0003983087000000124
其中波浪线表示M2与M1或与另一个M2的共价连接；
每个*表示M2与L2-D或另一个M2的共价连接；
Y1为键、-S-、-O-或-NH-；
Y2为CH或N；
Y3为提供M1与M2的LC(当存在时)或Y1(当LC不存在时)的共价连接的任选基团；
LB不存在或者为任选地被选自由以下项组成的组的基团中断的C1-6亚烷基：-O-、-NH-、-N(C1-3烷基)-、-C(＝O)NH-、-NHC(＝O)-、-C(＝O)O-和-O(C＝O)-；
X1和X2各自独立地为-S-、-O-或-NH-；
LC为任选地被1-3个取代基取代的C1-10亚烷基，所述取代基各自独立地选自-(C1-6亚烷基)-NRdRe、NRdRe和氧代基；并且
下标m1和m2各自独立地为1-4。
54.如权利要求53所述的ADC化合物，其中Y3为-C(＝O)-。
55.如权利要求53所述的ADC化合物，其中Y3选自由以下项组成的组：
Figure FDA0003983087000000131
其中*表示与LC的共价连接；并且波浪线表示与M1或另一个M2的共价连接。
56.如权利要求53所述的ADC化合物，其中Y3-LC选自由以下项组成的组：
Figure FDA0003983087000000132
其中*表示与Y1的共价连接；并且波浪线表示与M1或另一个M2的共价连接。
57.如权利要求53至56中任一项所述的ADC化合物，其中Y1为-NH-；LB存在；Y2为CH；并且X1和X2各自为-S-。
58.如权利要求53至56中任一项所述的ADC化合物，其中Y1为键；LB不存在；Y2为N；并且X1和X2各自为-NH。
59.如权利要求43至52中任一项所述的ADC化合物，其中M2选自由以下项组成的组：
Figure FDA0003983087000000141
其中每个*表示与L2-D或另一个M2的共价连接；并且波浪键表示与M1或另一个M2的共价连接。
60.如权利要求43至52中任一项所述的ADC化合物，其中M2选自由以下项组成的组：
Figure FDA0003983087000000142
其中每个*表示与L2-D或另一个M2的共价连接；并且波浪键表示与M1或另一个M2的共价连接。
61.如权利要求43至52中任一项所述的ADC化合物，其中下标x为2；并且(M)x为：
Figure FDA0003983087000000151
其中每个*表示与L2-D的共价连接；波浪线表示与L1的共价连接；并且每个琥珀酰亚胺环为水解形式。
62.如权利要求1至36中任一项所述的ADC化合物，其中下标x为3；并且(M)x为：
Figure FDA0003983087000000152
其中每个*表示与L2-D的共价连接；并且每个琥珀酰亚胺环为水解形式。
63.如权利要求1至36中任一项所述的ADC化合物，其中下标x为0。
64.如权利要求1至63中任一项所述的ADC化合物，其中L2被PEG2至PEG36范围内的PEG单元取代。
65.如权利要求1至63中任一项所述的ADC化合物，其中L2未被PEG单元取代。
66.如权利要求1至63中任一项所述的ADC化合物，其中L2具有式–(Q)q-(A)a-(W)w-(Y)y，其中：
A为任选地被1-3个Ra1取代的C2-20亚烷基；或任选地被1-3个Rb1取代的2至40元杂亚烷基；
每个Ra1独立地选自由以下项组成的组：C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、卤素、-OH、＝O、-NRd1Re1、-(C1-6亚烷基)-NRd1Re1、-C(＝O)NRd1Re1、-C(＝O)(C1-6烷基)和-C(＝O)O(C1-6烷基)；
每个Rb1独立地选自由以下项组成的组：C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、卤素、-OH、-NRd1Re1、-(C1-6亚烷基)-NRd1Re1、-C(＝O)NRd1Re1、-C(＝O)(C1-6烷基)和-C(＝O)O(C1-6烷基)；
每个Rd1和Re1独立地为氢或C1-3烷基；
Q为琥珀酰亚胺或水解琥珀酰亚胺；
下标q为0或1；
下标a为0或1；
下标w为0或1；
其中当下标w为1时，则W为1-12个氨基酸或具有以下结构：
Figure FDA0003983087000000161
其中Su为糖部分；
-OA-表示糖苷键的氧原子；
每个Rg独立地为氢、卤素、-CN或-NO2；
W1选自由以下项组成的组：键、-O-、-NH-、-N(C1-6烷基)-、-[N(C1-6烷基)2]+-和-OC(＝O)-；
波浪线表示与A、Q或L1的共价连接；并且
*表示与Y或D的共价连接；
y为0或1；并且
Y为自降解或非自降解部分；并且y为0或1。
67.如权利要求1至66中任一项所述的ADC化合物，其中每个L2-D不带电荷。
68.如权利要求1至66中任一项所述的ADC化合物，其中每个L2-D具有净零电荷。
69.如权利要求66至68中任一项所述的ADC化合物，其中Q-A选自由以下项组成的组：
Figure FDA0003983087000000171
其中Q1选自由以下项组成的组：
Figure FDA0003983087000000172
其中与Q1相邻的波浪线表示与(M)x的共价连接；
下标a1为1-4；
下标a2为0-3；
下标a3为0或1；
LD为C1-6亚烷基；
A3为-NH-(C1-10亚烷基)-C(＝O)-或-NH-(2-20元杂亚烷基)-C(＝O)-，其中所述C1-6亚烷基任选地被1-3个独立选择的Ra取代，并且所述2-20元杂亚烷基任选地被1-3个独立选择的Rb取代；并且
其中A3进一步任选地被选自PEG8至PEG24的PEG单元取代。
70.如权利要求69所述的ADC化合物，其中下标a3为1。
71.如权利要求68至70中任一项所述的ADC化合物，其中A3为-NH-(C1-10亚烷基)-C(＝O)-。
72.如权利要求68至70中任一项所述的ADC化合物，其中A3为–NH-(CH2CH2)-C(＝O)-。
73.如权利要求68至70中任一项所述的ADC化合物，其中A3为-NH-(2-20元杂亚烷基)-C(＝O)-，其中所述2-20元杂亚烷基任选地被1-3个独立选择的Rb取代；并且
其中A3进一步任选地被选自PEG8至PEG24的PEG单元取代。
74.如权利要求69所述的ADC化合物，其中A3为
Figure FDA0003983087000000181
其中Rp选自PEG2至PEG24。
75.如权利要求74所述的ADC化合物，其中Rp为PEG12。
76.如权利要求74所述的ADC化合物，其中所述PEG单元Rp包含-(C1-6亚烷基)C(＝O)-基团，其羰基碳原子提供RP与氮原子的共价连接。
77.如权利要求66至76中任一项所述的ADC化合物，其中W为2至12个氨基酸，所述氨基酸独立地选自天然氨基酸和非天然氨基酸。
78.如权利要求77所述的ADC化合物，其中W为二肽。
79.如权利要求66至78中任一项所述的ADC化合物，其中W与D或Y之间的键能够被肿瘤相关蛋白酶酶促裂解。
80.如权利要求79所述的ADC化合物，其中所述肿瘤相关蛋白酶是组织蛋白酶。
81.如权利要求66至76中任一项所述的ADC化合物，其中W具有以下结构：
Figure FDA0003983087000000191
其中Su为糖部分；
-OA-表示糖苷键的氧原子；
每个Rg独立地为氢、卤素、-CN或-NO2；
W1选自由以下项组成的组：键、-O-、-C(＝O)-、-S(O)0-2-、-NH-、-N(C1-6烷基)-、–[N(C1-6烷基)2]+-、-OC(＝O)-、-NHC(＝O)-、-C(＝O)O-和-C(＝O)NH-；
波浪线表示与A、Q或L1的共价连接；并且
*表示与Y或D的共价连接。
82.如权利要求66至75和81中任一项所述的ADC化合物，其中OA-Su在生理pH下带中性电荷。
83.如权利要求66至75和81至82中任一项所述的ADC化合物，其中OA-Su的Su为甘露糖。
84.如权利要求66至75和81中任一项所述的ADC化合物，其中OA-Su为
Figure FDA0003983087000000201
85.如权利要求66至75和81中任一项所述的ADC化合物，其中OA-Su的Su包含羧酸酯部分。
86.如权利要求66至75、81和85中任一项所述的ADC化合物，其中OA-Su的Su为葡糖醛酸。
87.如权利要求77所述的ADC化合物，其中OA-Su为
Figure FDA0003983087000000202
88.如权利要求66至75和81中任一项所述的ADC化合物，其中W为
Figure FDA0003983087000000203
89.如权利要求66至75和81中任一项所述的ADC化合物，其中W为
Figure FDA0003983087000000204
90.如权利要求66至89中任一项所述的ADC化合物，其中W1为键。
91.如权利要求66至89中任一项所述的ADC化合物，其中W1为-O(C＝O)-。
92.如权利要求66至91中任一项所述的ADC化合物，其中下标y为0。
93.如权利要求66至91所述的ADC化合物，其中下标y为1；并且Y为
Figure FDA0003983087000000211
其中波浪线表示与W或A的共价连接；并且
*表示与D的共价连接。
94.如权利要求66至68中任一项所述的ADC化合物，其中Q-A为
Figure FDA0003983087000000212
Figure FDA0003983087000000213
其中Rp为PEG8至PEG24。
95.如权利要求94所述的ADC化合物，其中Rp为PEG12。
96.如权利要求94或95所述的ADC化合物，其中所述PEG单元Rp包含-(C1-6亚烷基)C(＝O)-基团，其羰基碳原子提供RP与氮原子的共价连接。
97.如权利要求66至76、81和92至96中任一项所述的ADC化合物，其中W具有以下结构：
Figure FDA0003983087000000221
其中Su为糖部分；
-OA-表示糖苷键的氧原子；
每个Rg独立地为氢、卤素、-CN或-NO2；
W1选自由以下项组成的组：键、-O-、-C(＝O)-、-S(O)0-2-、-NH-、-N(C1-6烷基)-和–[N(C1-6烷基)2]+-；
波浪线表示与A、Q或L1的共价连接；并且
*表示与Y或D的共价连接。
98.如权利要求66、81和96中任一项所述的ADC化合物，其中每个Rg为氢，或者一个Rg为卤素、-CN或-NO2并且每个其余的Rg为氢。
99.如权利要求97所述的ADC化合物，其中W1为-OC(＝O)-；并且OA-Su带中性电荷。
100.如权利要求97所述的ADC化合物，其中W1为键；D通过在生理pH下形成铵阳离子的氮原子缀合至W；并且OA-Su包含羧酸酯。
101.如权利要求1至100中任一项所述的ADC化合物，其中D为亲水性药物单元。
102.如权利要求1至101中任一项所述的ADC化合物，其中D来自细胞毒性剂。
103.如权利要求1至100中任一项所述的ADC化合物，其中D来自吉西他滨、MMAE或MMAF。
104.如权利要求1至100中任一项所述的ADC化合物，其中D来自NAMPT抑制剂。
105.如权利要求1至100和104中任一项所述的ADC化合物，其中D具有下式：
Figure FDA0003983087000000231
其中D在aa或bb位置处共价连接至L2。
106.如权利要求1至105中任一项所述的ADC化合物，其中每个L2-D在生理pH下具有零净电荷。
107.如权利要求1至106中任一项所述的ADC化合物，其中每个L2-D在生理pH下不具有带电物质。
108.如权利要求1至105中任一项所述的ADC化合物，其中每个L2-D在生理pH下是两性离子的。
109.如权利要求1至106和108所述的ADC化合物，其中每个L2-D包含羧酸酯和铵。
110.如权利要求109所述的ADC化合物，其中所述铵是季铵。
111.如权利要求110所述的ADC化合物，其中所述季铵是吡啶鎓。
112.如权利要求1至106中任一项所述的ADC化合物，其中L2是阴离子的；并且D是阳离子的。
113.如权利要求1至106和108至109中任一项所述的ADC化合物，其中L2包含羧酸酯；并且D包含铵。
114.如权利要求1至113中任一项所述的ADC化合物，其中D与Ab的比率为8:1。
115.如权利要求1至113中任一项所述的ADC化合物，其中D与Ab的比率为16:1至64:1。
116.如权利要求1至113中任一项所述的ADC化合物，其中D与Ab的比率为16:1至32:1。
117.如权利要求1至113中任一项所述的ADC化合物，其中D与Ab的比率为16:1。
118.如权利要求1至113中任一项所述的ADC，其中D与Ab的比率为8:1；(L2-D)y的下标y为4；并且下标p为2。
119.如权利要求1至113中任一项所述的ADC，其中D与Ab的比率为8:1；(L2-D)y的y为2；并且下标p为4。
120.如权利要求1至113中任一项所述的ADC，其中D与Ab的比率为16:1；(L2-D)y的y为8；并且下标p为2。
121.如权利要求1至113中任一项所述的ADC，其中D与Ab的比率为16:1；(L2-D)y的y为4；并且下标p为4。
122.如权利要求1至113中任一项所述的ADC，其中D与Ab的比率为16:1；(L2-D)y的y为2；并且下标p为8。
123.如权利要求1至122中任一项所述的ADC，其中(M)x-(L2-D)y的每种情况下的总电荷数在生理pH下为偶数。
124.如权利要求1至123中任一项所述的ADC，其中(M)x-(L2-D)y的每种情况下的总电荷数在生理pH下为≥2(x+2y)。
125.如权利要求1至124中任一项所述的ADC，其中(M)x-(L2-D)y的每种情况下的总电荷数在生理pH下为2(x+2y)。
126.一种组合物，所述组合物包含权利要求1至125中任一项所述的ADC或其药学上可接受的盐。
127.一种治疗有需要的受试者的癌症的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的权利要求1至125中任一项所述的ADC、或其药学上可接受的盐、或权利要求126所述的组合物。
128.一种治疗有需要的受试者的自身免疫病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的权利要求1至125中任一项所述的ADC、或其药学上可接受的盐、或权利要求126所述的组合物。
CN202180040752.9A 2020-04-10 2021-04-09 电荷可变接头 Pending CN115955980A (zh)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US202063008551P 2020-04-10 2020-04-10
US63/008,551 2020-04-10
US202063016219P 2020-04-27 2020-04-27
US63/016,219 2020-04-27
PCT/US2021/026718 WO2021207701A1 (en) 2020-04-10 2021-04-09 Charge variant linkers

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN115955980A true CN115955980A (zh) 2023-04-11

Family

ID=75770008

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202180040752.9A Pending CN115955980A (zh) 2020-04-10 2021-04-09 电荷可变接头

Country Status (12)

Country Link
US (1) US20230173093A1 (zh)
EP (1) EP4132588A1 (zh)
JP (1) JP2023520930A (zh)
KR (1) KR20230008723A (zh)
CN (1) CN115955980A (zh)
AU (1) AU2021251875A1 (zh)
BR (1) BR112022020332A2 (zh)
CA (1) CA3176248A1 (zh)
IL (1) IL297167A (zh)
MX (1) MX2022012621A (zh)
TW (1) TW202203978A (zh)
WO (1) WO2021207701A1 (zh)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109843327B (zh) 2016-07-07 2022-05-13 小利兰·斯坦福大学托管委员会 抗体佐剂缀合物
KR20220004634A (ko) 2019-03-15 2022-01-11 볼트 바이오테라퓨틱스 인코퍼레이티드 Her2를 표적으로 하는 면역접합체
US20240067640A1 (en) 2022-03-11 2024-02-29 Firefly Bio, Inc. Phenyl maleimide linker agents
WO2023215740A1 (en) * 2022-05-06 2023-11-09 Seagen Inc. Immunomodulatory antibody-drug conjugates
WO2023239803A1 (en) * 2022-06-08 2023-12-14 Angiex, Inc. Anti-tm4sf1 antibody-drug conjugates comprising cleavable linkers and methods of using same
CN115784954A (zh) * 2022-07-15 2023-03-14 温州奥洋科技有限公司 一种不含肼结构的脂溶性金属离子钝化剂兼三聚乙二硫醇二甲醚的结构及其合成路线
CN115745854A (zh) * 2022-07-15 2023-03-07 浙江奥洋新材料有限公司 一种不含肼结构的脂溶性金属离子钝化剂三聚乙二硫醇二苄醚的结构及其合成路线

Family Cites Families (50)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB2036891B (en) 1978-12-05 1983-05-05 Windsor Smith C Change speed gear
GB8308235D0 (en) 1983-03-25 1983-05-05 Celltech Ltd Polypeptides
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
JPS6147500A (ja) 1984-08-15 1986-03-07 Res Dev Corp Of Japan キメラモノクロ−ナル抗体及びその製造法
EP0173494A3 (en) 1984-08-27 1987-11-25 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Chimeric receptors by dna splicing and expression
GB8422238D0 (en) 1984-09-03 1984-10-10 Neuberger M S Chimeric proteins
JPS61134325A (ja) 1984-12-04 1986-06-21 Teijin Ltd ハイブリツド抗体遺伝子の発現方法
WO1987002671A1 (en) 1985-11-01 1987-05-07 International Genetic Engineering, Inc. Modular assembly of antibody genes, antibodies prepared thereby and use
US5225539A (en) 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
ATE135370T1 (de) 1988-12-22 1996-03-15 Kirin Amgen Inc Chemisch modifizierte granulocytenkolonie erregender faktor
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
US5166322A (en) 1989-04-21 1992-11-24 Genetics Institute Cysteine added variants of interleukin-3 and chemical modifications thereof
JP2763020B2 (ja) 1995-04-27 1998-06-11 日本電気株式会社 半導体パッケージ及び半導体装置
US5672662A (en) 1995-07-07 1997-09-30 Shearwater Polymers, Inc. Poly(ethylene glycol) and related polymers monosubstituted with propionic or butanoic acids and functional derivatives thereof for biotechnical applications
AU3908597A (en) 1996-08-02 1998-02-25 Ortho-Mcneil Pharmaceutical, Inc. Polypeptides having a single covalently bound n-terminal water-soluble polymer
US6130237A (en) 1996-09-12 2000-10-10 Cancer Research Campaign Technology Limited Condensed N-aclyindoles as antitumor agents
US7090843B1 (en) 2000-11-28 2006-08-15 Seattle Genetics, Inc. Recombinant anti-CD30 antibodies and uses thereof
HUE027549T2 (hu) 2002-07-31 2016-10-28 Seattle Genetics Inc Hatóanyagot tartalmazó konjugátumok és alkalmazásuk rák, autoimmun betegség vagy fertõzéses betegség kezelésére
US8088387B2 (en) 2003-10-10 2012-01-03 Immunogen Inc. Method of targeting specific cell populations using cell-binding agent maytansinoid conjugates linked via a non-cleavable linker, said conjugates, and methods of making said conjugates
DK2489364T3 (en) 2003-11-06 2015-03-02 Seattle Genetics Inc Monomethylvaline compounds conjugated to antibodies
NZ550934A (en) 2004-05-19 2010-05-28 Medarex Inc Chemical linkers and conjugates thereof
CA2605507C (en) 2005-04-19 2016-06-28 Seattle Genetics, Inc. Humanized anti-cd70 binding agents and uses thereof
HUE035853T2 (en) 2005-07-18 2018-05-28 Seattle Genetics Inc Beta-glucuronide-linker-drug conjugates
RS52060B (en) 2006-01-25 2012-04-30 Sanofi CYTOTOXIC AGENTS CONTAINING NEW TOMAIMYCIN DERIVATIVES
US8367065B2 (en) * 2006-09-15 2013-02-05 Enzon Pharmaceuticals, Inc. Targeted polymeric prodrugs containing multifunctional linkers
DK2211904T3 (en) 2007-10-19 2016-10-24 Seattle Genetics Inc Cd19-binding agents and uses thereof
CA2721980C (en) * 2008-04-21 2017-01-03 The Regents Of The University Of California Selective high-affinity poly dentate ligands and methods of making such
UA109633C2 (uk) 2008-12-09 2015-09-25 Антитіло людини проти тканинного фактора
MX2011008328A (es) 2009-02-05 2011-11-04 Immunogen Inc Derivados novedosos de benzodiacepina.
FR2949469A1 (fr) 2009-08-25 2011-03-04 Sanofi Aventis Derives anticancereux, leur preparation et leur application en therapeutique
EP2528625B1 (en) 2010-04-15 2013-07-10 Spirogen Sàrl Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
CA2799540A1 (en) 2010-06-08 2011-12-15 Genentech, Inc. Cysteine engineered antibodies and conjugates
IL290591B2 (en) 2010-09-29 2024-08-01 Seagen Inc Antibody drug preparations (ADC) that bind to 191P4D12 proteins
JP5689979B2 (ja) 2010-12-06 2015-03-25 アーノン，マイルズ ゲーム・システム及び同一物を運用する方法
DK2675479T3 (en) 2011-02-15 2016-04-11 Immunogen Inc cytotoxic benzodiazepine
JP6273214B2 (ja) 2012-02-17 2018-01-31 シアトル ジェネティックス， インコーポレイテッド がんを処置するためのインテグリンαｖβ６に対する抗体およびその使用
US20130309223A1 (en) 2012-05-18 2013-11-21 Seattle Genetics, Inc. CD33 Antibodies And Use Of Same To Treat Cancer
SG11201600954XA (en) 2013-10-15 2016-03-30 Seattle Genetics Inc Pegylated drug-linkers for improved ligand-drug conjugate pharmacokinetics
KR102430829B1 (ko) * 2014-04-25 2022-08-09 리나트 뉴로사이언스 코프. 약물이 고도로 로딩된 항체-약물 접합체
CA2976740A1 (en) 2015-03-18 2016-09-22 Seattle Genetics, Inc. Cd48 antibodies and conjugates thereof
TW201709932A (zh) 2015-06-12 2017-03-16 西雅圖遺傳學公司 Ｃｄ１２３抗體及其共軛物
FI3316909T3 (fi) 2015-06-30 2023-09-07 Seagen Inc NTB-A-vasta-aineita ja liittyviä koostumuksia ja menetelmiä
EP3373969A4 (en) 2015-11-12 2019-08-14 Siamab Therapeutics, Inc. GLYCANINTERAGING COMPOUNDS AND METHOD OF USE
SG11201806261XA (en) 2016-02-17 2018-09-27 Seattle Genetics Inc Bcma antibodies and use of same to treat cancer and immunological disorders
BR112019022445A2 (pt) * 2017-04-27 2020-05-12 Seattle Genetics, Inc. Composição de conjugado ligante-fármaco, formulação, método para inibir a multiplicação de uma célula tumoral ou célula cancerosa ou causar apoptose em uma célula tumoral ou cancerosa, e, composto de conector de fármaco
CN111094352A (zh) 2017-08-25 2020-05-01 戊瑞治疗有限公司 B7-h4抗体及其使用方法
AR114112A1 (es) 2018-02-15 2020-07-22 Seattle Genetics Inc Anticuerpos de glipicano 3 y conjugados de los mismos
CN112638944A (zh) 2018-08-23 2021-04-09 西进公司 抗tigit抗体
WO2020132655A1 (en) * 2018-12-21 2020-06-25 Seattle Genetics, Inc. Adcs with thiol multiplex linkers
AU2020219732A1 (en) 2019-02-05 2021-08-05 Seagen Inc. Anti-CD228 antibodies and antibody-drug conjugates

Also Published As

Publication number Publication date
BR112022020332A2 (pt) 2022-12-13
US20230173093A1 (en) 2023-06-08
EP4132588A1 (en) 2023-02-15
MX2022012621A (es) 2023-01-18
CA3176248A1 (en) 2021-10-14
IL297167A (en) 2022-12-01
WO2021207701A1 (en) 2021-10-14
TW202203978A (zh) 2022-02-01
AU2021251875A1 (en) 2022-11-03
JP2023520930A (ja) 2023-05-22
KR20230008723A (ko) 2023-01-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN115955980A (zh) 电荷可变接头
CN111936169A (zh) 喜树碱肽缀合物
CN112512592A (zh) 喜树碱缀合物
JP6892826B2 (ja) Ｃｄ４８抗体及びその複合体
CN110167355A (zh) 多药抗体药物偶联物
CN110582505B (zh) 吡咯并苯并二氮杂*缀合物
KR20170054430A (ko) 세포-결합제 및 세포독성 약물을 포함하는 콘주게이트
US20230381321A1 (en) Camptothecin conjugates
CN110483639A (zh) 靶向axl的抗体及抗体-药物偶联物及其制备方法和用途
CN115551552A (zh) 喜树碱衍生物及其缀合物
JP2022547434A (ja) 標的化デンドリマー複合体
US20240261422A1 (en) Anthracycline antibody conjugates
CN116847886A (zh) 免疫刺激化合物及缀合物
CN113543812A (zh) 具有巯基多重接头的adc
WO2022228493A1 (zh) 抗体偶联药物的制备方法及应用
EP4321522A1 (en) Cytotoxic compounds and conjugates thereof
WO2024030577A1 (en) Immunostimulatory anti-pd-l1-drug conjugates

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: DE

Ref document number: 40091718

Country of ref document: HK