CN115919929A - 一种抗氧化中药组合物及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及中药领域，公开了一种抗氧化中药组合物及其应用，该抗氧化中药组合物包括：灵芝提取物45‑90份，人参提取物30‑60份，丹参提取物55‑120份，葛根提取物35‑72份，绞股蓝提取物60‑120份，川芎提取物25‑55份。本发明根据“气为血之帅，气能行血”的宗旨，人参、灵芝、绞股蓝补气扶正，增强血行动力。丹参、葛根、川芎活血化瘀通脉。诸品同用，共奏补气扶正、益气行血、化瘀通脉之功。补中有行，补而不滞；散中有补，散不伤正；相得益彰。以上中药配伍合理，相互协同，具有显著的抗氧化功能。此外，本发明抗氧化中药组合物还可改善脑缺血、可改善脑血管舒缩功能障碍、可提升脑组织抗细胞凋亡能力。
Description
技术领域
本发明涉及中药领域，尤其涉及一种抗氧化中药组合物及其应用。
背景技术
人体的衰老是一个随年龄增长而逐渐演变的过程。人体进入中老年后，身体会出现不同程度的生理老化，加之储备力的消失，进而出现病理老化，机体各系统器官机能逐渐衰退，免疫力、抗病力下降，易导致疾病的发生。许多老年学研究者根据观察到的机体衰老的宏观与微观变化，经综合分析演绎，先后提出多种衰老学说。其中衰老的自由基学说是目前比较公认的衰老学说，也是现代自由基生物学与自由基医学的重要内容。生物体内自由基等活性氧的产生及其引起生物细胞氧化性损伤所造成的危害是衰老产生的重要原因之一。这些自由基包括氧自由基、氢自由基和过氧化氢等，它们广泛存在于机体组织中。正常情况下，参与代谢的氧大多数与氢结合生成水，然而有4～5％的氧将形成超氧阴离子，后者又可形成过氧化氢。自由基攻击细胞膜、线粒体膜中的不饱和脂肪酸，造成脂质过氧化增强，脂质过氧化产物又可分解为更多的自由基，引起自由基的连锁反应。这样，细胞膜结构的完整性受到破坏，引起脑细胞、肌肉细胞、肝细胞及亚细胞结构的广泛损伤。由此，抗氧化功能的物质可以减轻体内的脂质过氧化，提高体内抗氧化酶的活性，对增强机体抗氧化能力，延缓衰老有重要作用。
中医药延年益寿具有悠久的历史，并且疗效显著、副作用小，有鲜明的特色。目前抗氧化功能的国产保健食品共批准252个，进口保健食品共批准5个，仅约占已批准产品总量的1.5％。批准产品远未达到中老年保健的市场需求。因此，有必要不断提供抗氧化效果更好的相关产品。
发明内容
为了解决上述技术问题，本发明提供了一种抗氧化中药组合物及其应用。首先，本发明抗氧化中药组合物是根据“气为血之帅，气能行血”的宗旨，人参、灵芝、绞股蓝补气扶正，增强血行动力。丹参、葛根、川芎活血化瘀通脉。诸品同用，共奏补气扶正、益气行血、化瘀通脉之功。补中有行，补而不滞；散中有补，散不伤正；相得益彰。以上中药配伍合理，相互协同，缺一不可，针对气虚血瘀的人群，益气活血，能发挥显著的抗氧化保健功能。此外，本发明抗氧化中药组合物还具有以下功能：可改善脑缺血；可改善脑血管舒缩功能障碍；可提升脑组织抗细胞凋亡能力。
本发明的具体技术方案为：
第一方面，本发明提供了一种抗氧化中药组合物，包括以下重量份的组分：灵芝提取物45-90份，人参提取物30-60份，丹参提取物55-120份，葛根提取物35-72份，绞股蓝提取物60-120份，川芎提取物25-55份。
本发明中药组合物包括六味原料药，除了发挥各自功效外，将其组合在一起后在抗氧化方面还可起到协同增效作用，其配伍机理具体如下：
人参和丹参为君药：人参，补五脏，安精神，能大补元气，补脾益肺及生津。丹参，善治血分，能祛瘀以生新，善疗风而散结，性平和而走血。丹参虽有参名，但补血之力不足，活血之力有余。根据气为血之帅，本发明中将人参和丹参两药合用，共为君药，可补益脏腑之气，活血化瘀通脉，补气行血，相得益彰。
灵芝、葛根为臣药：灵芝能养五脏，益气血，扶正气，因此其在本发明配伍体系中能增强人参补气作用。葛根在本发明配伍体系中能增强丹参活血化瘀之功。二者相伍，亦发挥补气扶正、益气行血、化瘀通脉之功。
绞股蓝、川芎为佐药：绞股蓝能补虚，在本发明配伍体系中可增强人参、灵芝的补气扶正之功。川芎在本发明配伍体系中能增强丹参、葛根的活血化瘀通脉之功。协同发挥益气行血之功。
综上所述，本发明根据“气为血之帅，气能行血”的宗旨，人参、灵芝、绞股蓝补气扶正，增强血行动力。丹参、葛根、川芎活血化瘀通脉。诸品同用，共奏补气扶正、益气行血、化瘀通脉之功。补中有行，补而不滞；散中有补，散不伤正；相得益彰。以上中药配伍合理，相互协同，缺一不可，针对气虚血瘀的人群，益气活血，能发挥显著的抗氧化保健功能。
此外，本发明团队通过大量试验的结果显示，对本发明中药组合物的组分进行删减或采用其他功能相近的组分进行替换会在一定程度上导致抗氧化性降低，这进一步说明本发明配方作为一个整体，可起到协同增效作用。
作为优选，上述抗氧化中药组合物包括以下重量份的组分：灵芝提取物60-65份，人参提取物35-40份，丹参提取物80-85份，葛根提取物48-52份，绞股蓝提取物80-85份，川芎提取物35-40份。
第二方面，本发明提供了上述抗氧化中药组合物在制备用于降低心脏中Keap1含量、提升心脏中Nrf2和HO-1含量的试剂中的应用。
本发明团队还发现，上述抗氧化中药组合物除了具有出色的抗氧化效果外，还具有以下功能：第三方面，本发明提供了上述抗氧化中药组合物在制备用于改善脑缺血的试剂中的应用，具体是用于降低脑组织中NO含量、提升脑组织中eNOs含量。
第四方面，本发明提供了上述抗氧化中药组合物在制备用于改善脑血管舒缩功能障碍的试剂中的应用，具体是用于降低脑组织中TXB2和ET-A含量。
第五方面，本发明提供了上述抗氧化中药组合物在制备提升脑组织抗细胞凋亡能力的试剂中的应用，具体是用于提升脑组织中P13K蛋白和Akt蛋白含量、降低脑组织中Hif-1α蛋白含量。
第六方面，本发明抗氧化中药组合物的剂型包括但不限于片剂，优选地，本发明提供了一种抗氧化中药片剂，包括以下重量份的组分：灵芝提取物45-90份，人参提取物30-60份，丹参提取物55-120份，葛根提取物35-72份，绞股蓝提取物60-120份，川芎提取物25-55份，微晶纤维素6-12.5份，聚维酮K300.8-1.8份，二氧化硅0.7-1.44份，硬脂酸镁0.7-1.44份和胃溶型薄膜包衣预混剂2.1-4.4份。
作为优选，所述抗氧化中药片剂包括以下重量份的组分：灵芝提取物60-65份，人参提取物35-40份，丹参提取物80-85份，葛根提取物48-52份，绞股蓝提取物80-85份，川芎提取物35-40份，微晶纤维素8-9份，聚维酮K301.0-1.5份，二氧化硅0.8-1.2份，硬脂酸镁0.8-1.2份和胃溶型薄膜包衣预混剂2.5-3.5份。
第七方面，本发明提供了一种上述抗氧化中药片剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)过筛：灵芝提取物、人参提取物、丹参提取物、葛根提取物、绞股蓝提取物、川芎提取物、微晶纤维素、聚维酮K30、硬脂酸镁、二氧化硅分别过筛备用。
(2)混合：按配比将灵芝提取物、人参提取物、丹参提取物、葛根提取物、绞股蓝提取物、川芎提取物、微晶纤维素、聚维酮K30、二氧化硅混合均匀，得混合粉。
(3)制粒：向混合粉中加入乙醇溶液制软材，过筛制粒，干燥，过筛整粒，得颗粒。
(4)总混：向所得颗粒中加入硬脂酸镁，混合均匀，得总混颗粒。
(5)压片：将总混颗粒压制成素片。
(6)包衣：将薄膜包衣预混剂加水配制成包衣液，对所述素片进行包衣，制得片剂。
作为优选，步骤(1)中，过60-80目筛。
作为优选，步骤(2)中，混合15-30min。
作为优选，步骤(3)中，所述乙醇溶液的浓度为50-95wt％，用量为混合粉重量的20-50％，过10-30目筛制粒，50～55℃干燥至水分≤7wt％，10-30目筛整粒，得颗粒。
作为优选，步骤(4)中，混合5-15min。
作为优选，步骤(6)中，所述包衣液的浓度为10-20wt％。
与现有技术对比，本发明的有益效果是：
(1)本发明根据“气为血之帅，气能行血”的宗旨，人参、灵芝、绞股蓝补气扶正，增强血行动力。丹参、葛根、川芎活血化瘀通脉。诸品同用，共奏补气扶正、益气行血、化瘀通脉之功。补中有行，补而不滞；散中有补，散不伤正；相得益彰。以上中药配伍合理，相互协同，缺一不可，针对气虚血瘀的人群，益气活血，能发挥显著的抗氧化保健功能。
(2)本发明抗氧化中药组合物可用于改善脑缺血，具体是可降低脑组织中NO含量、提升脑组织中eNOs含量。
(3)本发明抗氧化中药组合物可改善脑血管舒缩功能障碍，具体是可降低脑组织中TXB2和ET-A含量。
(4)本发明抗氧化中药组合物可提升脑组织抗细胞凋亡能力，具体是可提升脑组织中P13K蛋白和Akt蛋白含量、降低脑组织中Hif-1α蛋白含量。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的描述。
总实施例
一种抗氧化中药组合物，包括以下重量份的组分：灵芝提取物45-90份，人参提取物30-60份，丹参提取物55-120份，葛根提取物35-72份，绞股蓝提取物60-120份，川芎提取物25-55份。
作为优选，上述抗氧化中药组合物包括以下重量份的组分：灵芝提取物60-65份，人参提取物35-40份，丹参提取物80-85份，葛根提取物48-52份，绞股蓝提取物80-85份，川芎提取物35-40份。
一种抗氧化中药片剂，包括以下重量份的组分：灵芝提取物45-90份，人参提取物30-60份，丹参提取物55-120份，葛根提取物35-72份，绞股蓝提取物60-120份，川芎提取物25-55份，微晶纤维素6-12.5份，聚维酮K300.8-1.8份，二氧化硅0.7-1.44份，硬脂酸镁0.7-1.44份和胃溶型薄膜包衣预混剂(聚乙烯醇、羟丙甲纤维素、滑石粉、焦糖色、聚乙二醇、二氧化钛、日落黄铝色淀)2.1-4.4份。
作为优选，所述抗氧化中药片剂包括以下重量份的组分：灵芝提取物60-65份，人参提取物35-40份，丹参提取物80-85份，葛根提取物48-52份，绞股蓝提取物80-85份，川芎提取物35-40份，微晶纤维素8-9份，聚维酮K301.0-1.5份，二氧化硅0.8-1.2份，硬脂酸镁0.8-1.2份和胃溶型薄膜包衣预混剂(聚乙烯醇、羟丙甲纤维素、滑石粉、焦糖色、聚乙二醇、二氧化钛、日落黄铝色淀)2.5-3.5份。
一种上述抗氧化中药片剂的制备方法，包括以下步骤：
(1)过筛：灵芝提取物、人参提取物、丹参提取物、葛根提取物、绞股蓝提取物、川芎提取物、微晶纤维素、聚维酮K30、硬脂酸镁、二氧化硅分别过60-80目筛备用。
(2)混合：按配比将灵芝提取物、人参提取物、丹参提取物、葛根提取物、绞股蓝提取物、川芎提取物、微晶纤维素、聚维酮K30、二氧化硅混合均匀15-30min，得混合粉。
(3)制粒：向混合粉中加入乙醇溶液(浓度为50-95wt％)制软材，用量为混合粉重量的20-50％，过10-30目筛制粒，50～55℃干燥至水分≤7wt％，10-30目筛整粒，得颗粒。
(4)总混：向所得颗粒中加入硬脂酸镁，混合均匀5-15min，得总混颗粒。
(5)压片：将总混颗粒压制成素片。
(6)包衣：将薄膜包衣预混剂加水配制成包衣液(浓度为10-20wt％)，对所述素片进行包衣，制得片剂(包衣片1.0g/片，包衣片重量差异±5％)。
作为优选，上述各提取物的提取方法如下：
灵芝提取物：加入8～15倍水，提取2次，每次提取1～2小时，过滤，合并2次滤液，得到药物提取液；将药物提取液在真空度-0.09～-0.07Mpa，温度60～80℃条件下进行减压浓缩，得到药材浸膏。药材浸膏在进风温度160～210℃进行喷雾干燥，得到药物提取物。
人参提取物：加入8～15倍水，提取2次，每次提取1～2小时，过滤，合并2次滤液，得到药物提取液；将药物提取液在真空度-0.09～-0.07Mpa，温度60～80℃条件下进行减压浓缩，得到药材浸膏。药材浸膏在进风温度160～210℃进行喷雾干燥，得到药物提取物。
丹参提取物：加入8～20倍水，提取2次，每次提取0.5～1.5小时，过滤，合并2次滤液，得到药物提取液；将药物提取液在真空度-0.09～-0.07Mpa，温度60～80℃条件下进行减压浓缩，得到药材浸膏。药材浸膏在进风温度160～210℃进行喷雾干燥，得到药物提取物。
葛根提取物：加入8～15倍水，提取2次，每次提取0.5～1.5小时，过滤，合并2次滤液，得到药物提取液；将药物提取液在真空度-0.09～-0.07Mpa，温度60～80℃条件下进行减压浓缩，得到药材浸膏。药材浸膏在进风温度160～210℃进行喷雾干燥，得到药物提取物。
绞股蓝提取物：加入10～20倍水，提取2次，每次提取0.5～1.5小时，过滤，合并2次滤液，得到药物提取液；将药物提取液在真空度-0.09～-0.07Mpa，温度60～80℃条件下进行减压浓缩，得到药材浸膏。药材浸膏在进风温度160～210℃进行喷雾干燥，得到药物提取物。
川芎提取物：加入8～15倍水，提取3次，每次提取0.5～1.5小时，过滤，合并3次滤液，得到药物提取液；将药物提取液在真空度-0.09～-0.07Mpa，温度60～80℃条件下进行减压浓缩，得到药材浸膏。药材浸膏在进风温度160～210℃进行喷雾干燥，得到药物提取物。
实施例1
1.配方：
2制备工艺：
2.1提取：
灵芝提取物：加入12倍水，提取2次，每次提取1.5小时，过滤，合并2次滤液，得到药物提取液；将药物提取液在真空度-0.08Mpa，温度70℃条件下进行减压浓缩，得到药材浸膏。药材浸膏在进风温度180℃进行喷雾干燥，得到灵芝提取物。
人参提取物：加入12倍水，提取2次，每次提取1.5小时，过滤，合并2次滤液，得到药物提取液；将药物提取液在真空度-0.08Mpa，温度70℃条件下进行减压浓缩，得到药材浸膏。药材浸膏在进风温度180℃进行喷雾干燥，得到人参提取物。
丹参提取物：加入14倍水，提取2次，每次提取1小时，过滤，合并2次滤液，得到药物提取液；将药物提取液在真空度-0.08Mpa，温度7℃条件下进行减压浓缩，得到药材浸膏。药材浸膏在进风温度180℃进行喷雾干燥，得到丹参提取物。
葛根提取物：加入12倍水，提取2次，每次提取1小时，过滤，合并2次滤液，得到药物提取液；将药物提取液在真空度-0.08Mpa，温度70℃条件下进行减压浓缩，得到药材浸膏。药材浸膏在进风温度180℃进行喷雾干燥，得到葛根提取物。
绞股蓝提取物：加入15倍水，提取2次，每次提取1小时，过滤，合并2次滤液，得到药物提取液；将药物提取液在真空度-0.08Mpa，温度70℃条件下进行减压浓缩，得到药材浸膏。药材浸膏在进风温度180℃进行喷雾干燥，得到绞股蓝提取物。
川芎提取物：加入12倍水，提取3次，每次提取1小时，过滤，合并3次滤液，得到药物提取液；将药物提取液在真空度-0.08Mpa，温度70℃条件下进行减压浓缩，得到药材浸膏。药材浸膏在进风温度180℃进行喷雾干燥，得到川芎提取物。
2.2过筛：灵芝提取物、人参提取物、丹参提取物、葛根提取物、绞股蓝提取物、川芎提取物、微晶纤维素、硬脂酸镁、二氧化硅分别过80目筛备用。
2.3制粒：灵芝提取物、人参提取物、丹参提取物、葛根提取物、绞股蓝提取物、川芎提取物、微晶纤维素、聚维酮K30、二氧化硅混合30分钟，混合均匀，加95％乙醇溶液制软材，用量约为配方量的50％，20目筛网制粒，55℃干燥，水分≤5％，20目筛整粒。
2.4加入硬脂酸镁，混合10分钟，压片。
2.5薄膜包衣预混剂加纯化水配制成15％的包衣液，进行包衣，包衣片1.0g/片。
3结果：
3.1含量结果：
| 指标 | 结果 |
| 总皂苷(以人参皂苷Re计)，mg/100g | 2476 |
| 丹酚酸B，mg/100g | 1510 |
| 葛根素，mg/100g | 1290 |
| 阿魏酸，mg/100g | 46.8 |
测试例
实验组：0.02g/kg，相当于人日用量0.20g/d；
实施例1以及对比例12共13组：0.20g/kg，相当于人日用量2g/d；
注：对比例1-6是为了考察将实施例1组合物中的中药提取物替换为功效相近的其他中药提取物后的效果；替换关系具体为：人参-党参、丹参-桃仁、灵芝-甘草、葛根-三七、绞股蓝-红景天、川芎-三七；对比例7-12是为了考察逐一剔除实施例1中的某一中药提取物后(用仅作为填料的麦芽糊精取代)的效果。
空白组、模型组每天灌胃生理盐水，各给药组(实验组、实施例1以及对比例1-12)分别灌胃给予相应药物，连续4周。
2结果
2.1对大鼠体质量的影响
给药4周后，结果见表1。与空白组相比，模型组大鼠体重增长显著下降；与模型组相比，维生素E组能显著提高大鼠体重，实施例1以及对比例1-12组均能提高大鼠体重，上述结果说明建模成功，给药组没有产生毒副作用。
表1：对大鼠给药后体重增长的影响(n＝8)
| 分组 | 给药第0周 | 给药第4周 | 体重增长 |
| 空白组 | 487.34 | 549.23 | 61.89 |
| 模型组 | 479.74 | 501.21 | 21.47 |
| 维生素E组 | 491.78 | 535.66 | 43.88 |
| 实施例1 | 458.51 | 487.22 | 28.71 |
| 对比例1 | 461.22 | 490.88 | 29.66 |
| 对比例2 | 463.55 | 490.42 | 26.87 |
| 对比例3 | 461.11 | 488.88 | 27.77 |
| 对比例4 | 459.22 | 489.23 | 30.01 |
| 对比例5 | 457.78 | 490.34 | 32.56 |
| 对比例6 | 462.23 | 492.11 | 29.88 |
| 对比例7 | 456.32 | 483.97 | 27.65 |
| 对比例8 | 461.36 | 488.34 | 26.98 |
| 对比例9 | 465.45 | 493.96 | 28.51 |
| 对比例10 | 462.01 | 491.64 | 29.63 |
| 对比例11 | 463.11 | 489.10 | 25.99 |
| 对比例12 | 459.77 | 489.98 | 30.21 |
2.2对大鼠血清SOD、GSH-PX、T-AOC的影响
在表2中，SOD(超氧化物歧化酶)是抗氧化的重要指标；谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)是机体内广泛存在的一种重要的过氧化物分解酶；总抗氧化能力(T-AOC)是指各种抗氧化物质和抗氧化酶等构成的总抗氧化水平。
由表2数据可知，与空白组相比，模型组大鼠血清SOD、GSH-PX含量降低，T-AOC水平降低，差异明显；与模型组相比，维生素E组、实施例1以及对比例12组均能显著升高SOD、GSH-PX含量，T-AOC水平显著提升，差异明显。进一步地，实施例1组与对比例1-12组相比，上述指标的提升最为显著，说明对本发明中药组合物进行删减或采用其他中药成分替换均会导致抗氧化性显著降低。
表2：对大鼠血清SOD、GSH-PX、T-AOC的影响(n＝8)
| 分组 | SOD | GSH-PX | T-AOC |
| 空白组 | 321.26 | 25.61 | 3.78 |
| 模型组 | 290.55 | 21.32 | 3.19 |
| 维生素E组 | 318.62 | 26.26 | 4.77 |
| 实施例1 | 398.51 | 39.89 | 5.85 |
| 对比例1 | 352.62 | 28.31 | 4.14 |
| 对比例2 | 357.33 | 29.56 | 4.21 |
| 对比例3 | 367.63 | 30.48 | 4.68 |
| 对比例4 | 365.31 | 30.31 | 4.44 |
| 对比例5 | 376.44 | 31.42 | 4.89 |
| 对比例6 | 371.12 | 33.01 | 5.05 |
| 对比例7 | 331.21 | 26.32 | 3.78 |
| 对比例8 | 334.45 | 27.01 | 3.83 |
| 对比例9 | 354.28 | 28.12 | 4.39 |
| 对比例10 | 358.78 | 28.56 | 4.26 |
| 对比例11 | 356.78 | 29.78 | 4.02 |
| 对比例12 | 357.98 | 29.44 | 3.98 |
2.3对大鼠血清MDA和PC的影响
在表3中，MDA与PC含量是反映机体抗氧化潜在能力的重要参数，可以反映机体脂质过氧化速率和强度，也能间接反映组织过氧化损伤程度。
由表3数据可知，与空白组相比，模型组大鼠血清MDA含量明显升高；与模型组相比，维生素E组、实施例1以及对比例12组均能明显降低MDA和PC含量。进一步地，实施例1组与对比例1-12组相比，上述指标的降低最为显著，说明实施例1组配方的抗氧化效果最好，同时也说明对本发明中药组合物进行删减或采用其他中药成分替换均会导致抗氧化性显著降低。
表3：对大鼠血清MDA、PC的影响(n＝8)
2.4对大鼠心脏组织SOD、GSH-PX、MDA的影响由表4数据可知，与空白组相比，模型组大鼠心脏组织SOD和GSH-PX含量显著降低，MDA含量显著提高；与模型组相比，维生素E组显著升高SOD和GSH-PX含量，MDA含量显著降低；与模型组相比，维生素E组、实施例1和对比例12组均能够显著提升SOD和GSH-PX含量，并降低MDA含量。进一步地，实施例1组与对比例1-12组相比，SOD和GSH-PX含量的提升最为显著，MDA含量降低最为显著，说明实施例1组配方的抗氧化效果最好，同时也说明对本发明中药组合物进行删减或采用其他中药成分替换均会导致抗氧化性显著降低。
表4：对大鼠心脏组织SOD、MDA、GSH-PX的影响(n＝8)
| 分组 | SOD | MDA | GSH-PX |
| 空白组 | 55.28 | 8.11 | 1699.01 |
| 模型组 | 35.50 | 15.23 | 1186.67 |
| 维生素E组 | 46.13 | 10.19 | 1467.05 |
| 实施例1 | 53.32 | 8.36 | 1752.32 |
| 对比例1 | 42.23 | 13.15 | 1432.11 |
| 对比例2 | 43.35 | 12.88 | 1409.88 |
| 对比例3 | 48.66 | 11.23 | 1589.68 |
| 对比例4 | 47.52 | 10.88 | 1574.82 |
| 对比例5 | 48.98 | 10.21 | 1601.33 |
| 对比例6 | 46.55 | 9.98 | 1568.99 |
| 对比例7 | 38.55 | 13.92 | 1368.67 |
| 对比例8 | 39.65 | 13.87 | 1389.67 |
| 对比例9 | 44.58 | 11.53 | 1588.54 |
| 对比例10 | 46.71 | 10.78 | 1541.36 |
| 对比例11 | 47.98 | 11.21 | 1601.22 |
| 对比例12 | 48.55 | 10.79 | 1546.54 |
2.5对大鼠心脏Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶的影响
在表5中，Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶含量与心脏组织的抗氧化能力呈正比例关系。
由表5数据可知，与空白组相比，模型组大鼠心脏组织内Na+-K+-ATP酶含量和Ca2+-Mg2+-ATP酶含量显著降低；与模型组相比，维生素E组、实施例1以及对比例1-12组均能提高Na+-K+-ATP酶含量和Ca2+-Mg2+-ATP酶含量，进一步地，实施例1组与对比例1-12组相比，Na+-K+-ATP酶含量和Ca2+-Mg2+-ATP酶含量的提升最为显著，说明实施例1组配方的抗氧化效果最好，同时也说明对本发明中药组合物进行删减或采用其他中药成分替换均会导致抗氧化性显著降低。
表5：对大鼠心脏Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶的影响(n＝8)
| 分组 | <![CDATA[Na<sup>+</sup>-K<sup>+</sup>-ATP酶]]> | <![CDATA[Ca<sup>2+</sup>-Mg<sup>2+</sup>-ATP酶]]> |
| 空白组 | 6.87 | 5.55 |
| 模型组 | 3.11 | 3.43 |
| 维生素E组 | 4.96 | 4.61 |
| 实施例1 | 6.27 | 6.33 |
| 对比例1 | 4.52 | 5.01 |
| 对比例2 | 4.68 | 4.89 |
| 对比例3 | 5.01 | 5.35 |
| 对比例4 | 5.23 | 5.51 |
| 对比例5 | 5.33 | 5.48 |
| 对比例6 | 5.12 | 5.33 |
| 对比例7 | 4.01 | 4.21 |
| 对比例8 | 4.21 | 4.11 |
| 对比例9 | 5.33 | 5.06 |
| 对比例10 | 5.21 | 5.33 |
| 对比例11 | 5.31 | 5.35 |
| 对比例12 | 5.11 | 5.19 |
2.6对大鼠心脏组织Keap1-Nrf2-HO-1通路相关蛋白表达量的影响
在表6中，Keap1-Nrf2-HO-1通路参与抵抗外界氧化应激反应，不仅是抵御氧化损伤的重要防御系统，也是增强机体抗氧化能力的关键信号通路。
由表6数据可知，与空白组相比，模型组大鼠心脏组织中Nrf2、HO-1表达显著减少，Keap1表达显著增加；与模型组相比，维生素E组、实施例1以及对比例1-12组均能明显抑制Keap1表达，同时显著增加Nrf2、HO-1表达；进一步地，实施例1组与对比例1-12组相比，对于Nrf2、HO-1表达的提升以及对于Keap1表达的抑制能力最为显著，说明实施例1组配方的抗氧化效果最好，同时也说明对本发明中药组合物进行删减或采用其他中药成分替换均会导致抗氧化性显著降低。
表6：对大鼠心脏Keap1-Nrf2-HO-1通路相关蛋白表达量的影响(n＝3)
2.7对大鼠脑组织NO、eNOS的影响
在表7中，NO：一氧化氮含量；eNOS：一氧化氮合酶内皮细胞型，可反应脑缺血的保护作用。NO升高，能降低神经元及微血管iNOS表达，从而减少总NO的生成量，降低缺血引起的NO毒性作用；同时增强eNOS表达，从而抑制神经细胞凋亡，发挥脑保护作用。
由表7数据可知，与空白组相比，模型组大鼠脑组织NO含量显著提升，eNOS含量明显降低；与模型组相比，维生素E组、实施例1以及对比例1-2组均能组显著降低NO含量，且明显提升eNOS含量。进一步地，实施例1组与对比例1-12组相比，对于NO含量的降低以及对于eNOS含量的提升最为显著，说明实施例1组配方对脑缺血的保护效果最好，同时也说明对本发明中药组合物进行删减或采用其他中药成分替换均会导致对脑缺血保护作用显著降低。
表7：对大鼠脑组织NO、eNOS的影响(n＝8)
| 分组 | NO(μmol/g) | eNOS(ng/mg) |
| 空白组 | 16.26 | 0.88 |
| 模型组 | 22.38 | 0.71 |
| 维生素E组 | 18.86 | 0.99 |
| 实施例1 | 15.01 | 1.26 |
| 对比例1 | 18.32 | 0.89 |
| 对比例2 | 19.20 | 0.90 |
| 对比例3 | 17.56 | 1.03 |
| 对比例4 | 17.11 | 1.05 |
| 对比例5 | 18.00 | 1.09 |
| 对比例6 | 17.59 | 1.10 |
| 对比例7 | 19.89 | 0.89 |
| 对比例8 | 18.79 | 0.90 |
| 对比例9 | 17.32 | 1.03 |
| 对比例10 | 17.11 | 1.09 |
| 对比例11 | 16.86 | 1.10 |
| 对比例12 | 17.01 | 1.03 |
2.8对大鼠脑组织TXB2、ET-1的影响
在表8中，TXB2表示血栓素B2，ET-1表示内皮素-1；指标的降低，可改善脑血管舒缩功能障碍。
由表8数据可知，与空白组相比，模型组大鼠脑组织内TXB2含量和ET-1含量均著升高；与模型组相比，维生素E组、实施例1以及对比例1-2组均能组显著降低TXB2含量和ET-1含量。进一步地，实施例1组与对比例1-12组相比，对于TXB2含量和ET-1含量的降低最为显著，说明实施例1组配方对于改善脑血管舒缩功能障碍的效果最好，同时也说明对本发明中药组合物进行删减或采用其他中药成分替换均会导致上述效果显著降低。
表8：对大鼠脑组织TXB2、ET-1的影响(n＝8)
| 分组 | TXB2(pg/mg) | ET-1(pg/mg) |
| 空白组 | 8.55 | 4.11 |
| 模型组 | 10.63 | 7.97 |
| 维生素E组 | 8.51 | 6.32 |
| 实施例1 | 7.65 | 6.03 |
| 对比例1 | 9.11 | 7.12 |
| 对比例2 | 9.02 | 7.03 |
| 对比例3 | 8.42 | 6.77 |
| 对比例4 | 8.21 | 6.65 |
| 对比例5 | 8.11 | 6.53 |
| 对比例6 | 8.30 | 6.76 |
| 对比例7 | 9.84 | 7.31 |
| 对比例8 | 9.75 | 7.25 |
| 对比例9 | 8.21 | 6.67 |
| 对比例10 | 8.31 | 6.89 |
| 对比例11 | 8.45 | 6.45 |
| 对比例12 | 8.22 | 6.76 |
2.9对大鼠脑组织PI3K、Akt、Hif-1α蛋白表达量的影响
在表9中，PI3K表示磷脂酰肌醇-3激酶，Akt表示丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶，HIF-1α表示低氧诱导因子，PI3K/Akt信号通路是经典的抗细胞凋亡通路，通过抑制HIF-1α可促进细胞抗凋亡。
由表9数据可知，与空白组相比，模型组大鼠心脏组织中PI3K、Akt表达有降低趋势，Hif-1α表达显著增加；与模型组相比，维生素E组、实施例1以及对比例1-2组均能组明显提升PI3K、Akt表达，同时抑制Hif-1α表达。进一步地，实施例1组与对比例1-12组相比，对于PI3K、Akt表达的促进能力以及对于Hif-1α表达的抑制能力最为突出，说明实施例1组配方的抗脑组织细胞凋亡效果最好，同时也说明对本发明中药组合物进行删减或采用其他中药成分替换均会导致上述抗脑组织细胞凋亡效果显著降低。
表9：对大鼠脑PI3K、Akt、Hif-1α蛋白表达量的影响(n＝3)
本发明中所用原料、设备，若无特别说明，均为本领域的常用原料、设备；本发明中所用方法，若无特别说明，均为本领域的常规方法。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例，并非对本发明作任何限制，凡是根据本发明技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、变更以及等效变换，均仍属于本发明技术方案的保护范围。
Claims (10)
1.一种抗氧化中药组合物，其特征在于包括以下重量份的组分：灵芝提取物45-90份，人参提取物30-60份，丹参提取物55-120份，葛根提取物35-72份，绞股蓝提取物60-120份，川芎提取物25-55份。
2.如权利要求1所述的一种抗氧化中药组合物，其特征在于包括以下重量份的组分：灵芝提取物60-65份，人参提取物35-40份，丹参提取物80-85份，葛根提取物48-52份，绞股蓝提取物80-85份，川芎提取物35-40份。
3.如权利要求1或2所述抗氧化中药组合物在制备用于降低心脏中Keap1含量、提升心脏中Nrf2和HO-1含量的试剂中的应用。
4.如权利要求1或2所述抗氧化中药组合物在制备用于改善脑缺血的试剂中的应用。
5.如权利要求1或2所述抗氧化中药组合物在制备用于改善脑血管舒缩功能障碍的试剂中的应用。
6.如权利要求1或2所述抗氧化中药组合物在制备用于提升脑组织抗细胞凋亡能力的试剂中的应用。
7.一种抗氧化中药片剂，其特征在于包括以下重量份的组分：灵芝提取物45-90份，人参提取物30-60份，丹参提取物55-120份，葛根提取物35-72份，绞股蓝提取物60-120份，川芎提取物25-55份，微晶纤维素6-12.5份，聚维酮K30 0.8-1.8份，二氧化硅0.7-1.44份，硬脂酸镁0.7-1.44份和胃溶型薄膜包衣预混剂2.1-4.4份。
8.如权利要求7所述的抗氧化中药片剂，其特征在于包括以下重量份的组分：灵芝提取物60-65份，人参提取物35-40份，丹参提取物80-85份，葛根提取物48-52份，绞股蓝提取物80-85份，川芎提取物35-40份，微晶纤维素8-9份，聚维酮K30 1.0-1.5份，二氧化硅0.8-1.2份，硬脂酸镁0.8-1.2份和胃溶型薄膜包衣预混剂2.5-3.5份。
9.一种如权利要求7或8所述抗氧化中药片剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）过筛：灵芝提取物、人参提取物、丹参提取物、葛根提取物、绞股蓝提取物、川芎提取物、微晶纤维素、聚维酮K30、硬脂酸镁、二氧化硅分别过筛备用；
（2）混合：按配比将灵芝提取物、人参提取物、丹参提取物、葛根提取物、绞股蓝提取物、川芎提取物、微晶纤维素、聚维酮K30、二氧化硅混合均匀，得混合粉；
（3）制粒：向混合粉中加入乙醇溶液制软材，过筛制粒，干燥，过筛整粒，得颗粒；
（4）总混：向所得颗粒中加入硬脂酸镁，混合均匀，得总混颗粒；
（5）压片：将总混颗粒压制成素片；
（6）包衣：将薄膜包衣预混剂加水配制成包衣液，对所述素片进行包衣，制得片剂。
10.如权利要求9所述的制备方法，其特征在于：
步骤（1）中，过60-80目筛；
步骤（2）中，混合15-30min；
步骤（3）中，所述乙醇溶液的浓度为50-95wt%，用量为混合粉重量的20-50%，过10-30目筛制粒，50~55℃干燥至水分≤7wt%，10-30目筛整粒，得颗粒；
步骤（4）中，混合5-15min；
步骤（6）中，所述包衣液的浓度为10-20wt%。
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| PB01 | Publication | ||
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| GR01 | Patent grant | ||
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