CN115917292B - 流式细胞仪及其激光光学组件 - Google Patents

流式细胞仪及其激光光学组件 Download PDF

Info

Publication number
CN115917292B
CN115917292B CN202180043403.2A CN202180043403A CN115917292B CN 115917292 B CN115917292 B CN 115917292B CN 202180043403 A CN202180043403 A CN 202180043403A CN 115917292 B CN115917292 B CN 115917292B
Authority
CN
China
Prior art keywords
flow
degrees
laser beam
qwp
optical axis
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202180043403.2A
Other languages
English (en)
Other versions
CN115917292A (zh
Inventor
加兰·克里斯蒂安·密申纳
米歇尔·瑞安·沐恩
斯盆塞·富兰克林·麦克尔韦恩
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Idexx Laboratories Inc
Original Assignee
Idexx Laboratories Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Idexx Laboratories Inc filed Critical Idexx Laboratories Inc
Publication of CN115917292A publication Critical patent/CN115917292A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN115917292B publication Critical patent/CN115917292B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
    • G01N15/10—Investigating individual particles
    • G01N15/14—Optical investigation techniques, e.g. flow cytometry
    • G01N15/1434—Optical arrangements
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
    • G01N15/10—Investigating individual particles
    • G01N15/14—Optical investigation techniques, e.g. flow cytometry
    • G01N15/1434—Optical arrangements
    • G01N15/1436—Optical arrangements the optical arrangement forming an integrated apparatus with the sample container, e.g. a flow cell
    • G—PHYSICS
    • G02—OPTICS
    • G02B—OPTICAL ELEMENTS, SYSTEMS OR APPARATUS
    • G02B19/00—Condensers, e.g. light collectors or similar non-imaging optics
    • G02B19/0033—Condensers, e.g. light collectors or similar non-imaging optics characterised by the use
    • G02B19/0047—Condensers, e.g. light collectors or similar non-imaging optics characterised by the use for use with a light source
    • G02B19/0052—Condensers, e.g. light collectors or similar non-imaging optics characterised by the use for use with a light source the light source comprising a laser diode
    • G—PHYSICS
    • G02—OPTICS
    • G02B—OPTICAL ELEMENTS, SYSTEMS OR APPARATUS
    • G02B27/00—Optical systems or apparatus not provided for by any of the groups G02B1/00 - G02B26/00, G02B30/00
    • G02B27/09—Beam shaping, e.g. changing the cross-sectional area, not otherwise provided for
    • G02B27/0916—Adapting the beam shape of a semiconductor light source such as a laser diode or an LED, e.g. for efficiently coupling into optical fibers
    • G—PHYSICS
    • G02—OPTICS
    • G02B—OPTICAL ELEMENTS, SYSTEMS OR APPARATUS
    • G02B5/00—Optical elements other than lenses
    • G02B5/30—Polarising elements
    • G02B5/3083—Birefringent or phase retarding elements
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
    • G01N15/01—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials specially adapted for biological cells, e.g. blood cells
    • G01N2015/016—White blood cells
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
    • G01N15/10—Investigating individual particles
    • G01N2015/1006—Investigating individual particles for cytology
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
    • G01N15/10—Investigating individual particles
    • G01N15/14—Optical investigation techniques, e.g. flow cytometry
    • G01N15/1434—Optical arrangements
    • G01N2015/144—Imaging characterised by its optical setup

Landscapes

  • Physics & Mathematics (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

一种血液分析器的流式细胞仪，包括横向电(TE)激光二极管、流动室、四分之一波片(QWP)、多个透镜和侧向散射检测器。TE激光二极管被配置为沿着光轴输出激光束，并且具有从大约16度到大约25度的快轴半峰全宽(FWHM)发散度。QWP沿着光轴设置在TE激光二极管和流动室之间，并被配置成圆偏振激光束。多个透镜设置在TE激光二极管和流动室之间，并且被配置成将激光束聚焦在流动室处。

Description

流式细胞仪及其激光光学组件
相关申请的交叉引用
本申请要求于2020年6月17日提交的美国临时申请No.63/040,035的优先权，其全部内容作为引用在此并入。
技术领域
本公开涉及流式细胞测量(flow cytometry)，并且更具体地涉及流式细胞仪(flow cytometer)和用于流式细胞仪(例如血液学的或血液分析器的流式细胞仪)的激光光学组件。
背景技术
流式细胞仪通常需要激光束穿过相对窄的样品芯流，使得流过样品芯流的颗粒被激光束照射，并根据颗粒的折射率、尺寸、形状和其他性质吸收和散射激光。对于每个颗粒，被吸收的和被散射的光强度都被测量。所述吸收和散射测量用于识别和量化颗粒类型和颗粒特性。最近，飞行时间(TOF)测量已经被附加地或替代地用来确定颗粒类型和/或特性。
在流式细胞仪中，重要的是保持光束的平行于芯流流动的良好质量的高斯空间强度分布。在这种情况下，当粒子流过该分布时，所检测的散射光也将具有高斯强度分布，在时间上，所检测到的散射信号随着粒子流入光束的高斯强度分布而增大、当粒子位于光束的空间强度最大值处最大化、然后随着粒子流出光束的高斯强度分布而减小。
分布强度波瓣，例如在高斯峰上的肩峰或接近高斯峰的相对小的峰，是不期望的，因为当大颗粒流过光束时，它们可能被误认为是小颗粒。虽然可以通过忽略高斯峰任一侧的小峰或肩峰来减轻波瓣的影响，但是这不是最优的解决方案，因为可能丢失与波瓣同时出现的有意义的信息。
一些流式细胞仪中的另一个关注点是将高斯强度分布的宽度设置成，使得针对一些或所有粒子类型所测量的TOF都可以用作可靠的粒子分辨器。如果宽度太大，则对于较小的颗粒会损失分辨率。
发明内容
本公开提供了一种流式细胞仪及其激光光学组件，所述流式细胞仪：消除分布强度波瓣或将波瓣降低到小的或可忽略的强度，例如，主高斯峰的强度的至多7％；提供良好的飞行时间(TOF)能力；能够检测这样的光，所述光被以相对低的前向角(相对于激光束的光轴)和相对高的侧角(相对于激光束的光轴)散射，所述相对低的前向角例如是小于或等于30度，所述相对高的侧角例如是50度至120度；并且对于去偏振(depolarized)和偏振散射光都提供了对正向散射和侧向散射的良好灵敏度。
下面详细描述本公开的上述和其它方面和特征。在相容的程度上，本文详述的任何方面和特征可以与本文详述的任何其它方面和特征一起使用或不与本文详述的任何其它方面和特征一起使用，而不管这些方面和特征是否在下文中一起或单独地被描述。
根据本公开的方面提供了一种血液分析器的流式细胞仪，其包括横向电(TE)激光二极管、流动室、四分之一波片(QWP)、多个透镜和侧向散射检测器。TE激光二极管被配置为沿着光轴输出激光束。激光束具有从大约16度到大约25度的快轴半峰全宽(FWHM)发散度。QWP沿着光轴设置在TE激光二极管和流动室之间，并被配置成当激光束穿过其中时使其圆偏振。所述多个透镜设置在TE激光二极管和流动室之间。所述多个透镜协作以将激光束聚焦在流动室处。所述侧向散射检测器被配置成在相对于光轴成约50度至约120度的角度处检测来自所述流动室的侧向散射光。
在本公开的一个方面，提供了至少一个前向散射检测器。在一些方面，提供至少两个前向散射检测器，例如，一个或更多个高角度前向散射检测器(FSH)和低角度前向散射检测器(FSL)。可以附加地或替代地提供消光传感器(extinction sensor)。至少一个前向散射检测器，例如一个或更多个FSH，可被配置成检测来自流动室的、相对于光轴成小于约30度的角度的前向散射光。在这样的方面，至少一个前向散射检测器可以被配置成检测来自流动室的、相对于光轴成从约11.5度至约15.5度的角度的前向散射光。附加地或替代地，至少一个前向散射检测器，例如FSL，可被配置成检测来自流动室的、相对于光轴成从约2.0度到约2.4度的角度的前向散射光。
在本发明的另一个方面，相对于激光束形心的、顶点在芯流的中心的侧向散射检测角以78度为中心，以提供强的侧向散射信号。例如，通过相对于光轴对向延跨大约67度到大约89度的圆形透镜孔径，散射强度是可检测的。最大孔径宽度可以出现在约78度。附加地或替代地，来自流动室的侧向散射光强度可由相对于光轴位于约50度至约120度的角度范围内的侧向散射检测器检测。这可以例如通过采用高数值孔径(numerical aperture)检测器而不采用任何收集或聚焦透镜来实现，例如在美国专利No.6,618,143中详细描述的那样，该专利的全部内容通过引用在此并入。
在本发明的又一方面，QWP相对于TE激光二极管定位成，使得激光束在QWP上的形心入射角等于或小于约7度。
在本公开的又一方面，QWP的双折射轴相对于激光束的偏振轴绕光轴旋转±45度，从而右旋或左旋地圆偏振激光束。
在本公开的又一方面，多个透镜包括设置在激光二极管和QWP之间的准直透镜以及设置在QWP和流动室之间的物镜。在这些方面，多个透镜还可包括设置在准直透镜和物镜之间的正柱面透镜和负柱面透镜。
在本公开的另一方面，在流动室的芯流处的激光束在平行于芯流的流动方向的方向上限定约6.7μm至约9μm的光束束腰1/e2直径，和/或在垂直于流动室的流动方向的方向上限定约140μm至约210μm的光束1/e2直径。
在本公开的另一方面，TE激光二极管被配置成输出至少10mW的功率。附加地或替代地，TE激光二极管被配置成输出至少20mW的功率。
根据本公开提供的一种检测网织红细胞和粒细胞的方法，包括：使具有网织红细胞或粒细胞中的至少一种的血液样本与鞘液一起流过流动室；从横向电(TE)激光二极管沿着光轴发射激光束，所述激光束具有从约16度到约25度的快轴半峰全宽(FWHM)发散度；使所述激光束穿过沿着光轴设置在TE激光二极管与流动室之间的四分之一波片(QWP)，以在激光束穿过四分之一波片时使激光束圆偏振；使激光束穿过设置在TE激光二极管和流动室之间的多个透镜，以将激光束聚焦在流动室处；以及在相对于光轴从约50度到约120度的角度处检测来自流动室的侧向散射光。
在本公开的一个方面，所述方法还包括检测来自流动室的、相对于光轴成小于约30度的角度的前向散射光。在这样的方面中，可以在相对于光轴从大约11.5度到大约15.5度的角度处检测来自流动室的前向散射光。可以使用至少一个前向散射检测器，例如，一个或更多个高角度前向散射检测器(FSH)，以用于在上述角度进行检测。替代地或附加地，可以提供低角度前向散射检测器(FSL)，用于检测以较低角度散射的光，例如，相对于光轴从大约2.0度到大约2.4度的角度散射的光。附加地或替代地，可以提供消光传感器。
在本发明的另一个方面，相对于激光束形心的侧向散射检测角以78度为中心，以提供强的侧向散射信号。在一些方面中，通过相对于光轴对向延跨大约67度到大约89度的圆形透镜孔径，散射强度是可检测的。附加地或替代地，来自流动室的侧向散射光强度由在相对于光轴从约50度至约120度的角度范围内的侧向散射检测器检测。这可以例如通过采用高数值孔径检测器而不采用任何收集或聚焦透镜来实现。
在本发明的又一方面，穿过QWP的激光束限定了激光束在QWP上的形心入射角，该形心入射角等于或小于约7度。
在本发明的又一方面，穿过QWP的激光束被QWP右旋或左旋地圆偏振。
在本公开的又一方面，多个透镜包括准直透镜，该准直透镜被定位成使得激光束在QWP之前穿过准直透镜。在这些方面，多个透镜还可包括物镜，该物镜被定位成使得激光束在QWP之后穿过物镜。
在本公开的另一方面，在流动室处的激光束在平行于流动方向的方向上限定约6.7m至约9m的光束束腰1/e2直径和/或在垂直于流动方向的方向上限定约140m至约210m的光束1/e2直径。
在本公开的又一方面，用于发射激光束的TE激光二极管的功率输出至少为10mW；在其它方面，为至少20mW。
附图说明
本文参照附图描述了本公开的流式细胞仪及其激光光学组件的各个方面和特征，其中，相同的附图标记标识相似或相同的元件。
图1是包括根据本公开提供的流式细胞仪的激光光学器件、流动室和传感器的模块的透视图；
图2是图1的模块的纵向剖视图；
图3是图1的模块的激光光学组件的局部透视剖视图；以及
图4是表格，该表格示出了在所选择的物镜焦距处，光束发散度和聚焦光束直径的1/e2束腰之间的关系；以及
图5是表格，该表格示出了对于所选择的具有特定焦距和通光孔径(clearaperture)直径的准直透镜，在透镜通光孔径处的光束发散度和相对光束强度之间关系。
具体实施方式
转到图1和图2，本公开提供了一种流式细胞仪(例如血液学的或血液分析器的流式细胞仪)，其包括由激光光学器件、流动室和传感器组成的模块，所述模块总体上由附图标记10表示。模块10通常包括安装平台100、固定到安装平台100的激光光学组件200、固定到安装平台100并相对于激光光学组件200可操作地定位的流动室组件300、以及固定到安装平台100并相对于激光光学组件200和流动室组件300可操作地定位以用于前向和侧向散射检测的传感器组件400。模块10的在此未明确详述或抵触的(contradicted)附加特征可以在标题为“流式细胞仪、其激光光学组件及其组装方法”并且公开号为No.2019/0302391的2019年3月28日提交的美国专利申请中找到，该专利申请的全部内容通过引用并入本文。
尽管未示出，除了模块10之外，流式细胞仪可以包括例如封装流式细胞仪的内部可操作部件的外壳、被配置为对模块10进行控制并处理从其接收的测试结果的电子模块、被配置为接收待测试的样品的样品接收模块、被配置为将样品和鞘液泵送到流动室组件300中的泵模块、被配置为使得能够在测试之后安全收集样品和鞘液(sheath fluid)的废物模块、以及用于从用户接收输入信息并向用户显示信息的用户接口模块。替代地或附加地，还可以设想与本公开的流式细胞仪的模块10一起使用的任何其它合适的模块、部件和/或特征。
如上所述，模块10的安装平台100能够例如使用螺栓和/或任何其它合适的紧固结构将激光光学组件200、流动室组件300和传感器组件400进行安装，以保持这些组件200-400相对于彼此和安装平台100的相对位置。
下面更详细地描述激光光学组件200。
继续参照图1和图2，流动室组件300包括：耦接到喷嘴320的输入部310，其由外壳330限定，用于将样品流体输送到喷嘴320并将鞘液输送到输入部310；流动室340，其连接在喷嘴320的下游以从其接收样品和鞘液；以及输出端350，其设置在流动室340的下游以在测试之后将样品和鞘液引导到合适的收集储器。流动室组件300的位于孔120内，所述孔120通过安装平台100限定，并且通过使用多个螺栓或以任何其它合适的方式所述外壳330被固定到安装平台100，以保持流动室340和激光光学组件200的圆柱形物镜296之间的规定距离。
传感器组件400包括前向散射子组件410和侧向散射子组件420。前向散射子组件410包括板412和传感器阵列414，该传感器阵列包括消光(extinction)传感器、前向散射低角度(forward scatter low angle，FSL)传感器和一个或更多个前向散射高角度(FSH)传感器，例如两个FSH传感器。模块10的配置，更具体地说，下面详细描述的其激光光学组件200的配置，使前向散射子组件410的传感器阵列414能够检测来自流动室340的相对低角度的前向散射光，所述低角度例如为相对于激光束的光轴小于或等于约30度。在实施例中，前向光散射在在相对于激光束的光轴在大约11.5度到大约15.5度的范围内的角度处使用一个或更多个FSH传感器来检测，并且在大约2.0度到大约2.4度的范围内的角度处使用FSL传感器来检测。FSL传感器处的前向散射强度与血细胞的大小大致成比例。
侧向散射子组件420包括透镜座422、支撑在透镜座422内的透镜424、以及侧向散射传感器阵列(未示出)。模块10的配置，更具体地说，其激光光学组件200的配置，也如下面详细描述的，使得侧向散射子组件420的侧向散射传感器阵列(未示出)能够在相对于激光束的光轴成约50度至约120度的角度(在一些实施例中)处检测来自流动室340的侧向散射光；而在其它实施例中，相对于激光束的光轴从大约65度到大约91度。侧向散射光的最大灵敏度可以在相对于光轴大约78度处。在附加的或替代的实施例中，散射强度可通过圆形透镜孔径(circular lens aperture)来检测，圆形透镜孔径相对于光轴对向延跨(subtending)大约67度到89度的角度。最大孔径宽度可以出现在约78度，从而与相同孔径被等距放置但其最大宽度出现在更大角度例如90度的情况相比，其提供了对侧向散射光的更大灵敏度。侧向散射强度与血细胞的折射率和内部复杂性大致成比例。
参照图1-图3，激光光学组件200包括夹持子组件210、准直子组件230和多个透镜子组件270、280、290。夹持子组件210包括基板212，该基板沿其相对侧限定至少一对支脚214，该支脚包括穿过其限定的孔，以使激光光学组件200能够牢固地螺栓连接到安装平台100。基板212还限定了在支脚214之间沿着基板212延伸的大致圆柱形的筒218。筒218限定沿筒218的长度对齐的第一、第二、第三和第四腔219、221、223和225。腔219、221、223和225被配置成在其中分别接纳准直子组件230和透镜子组件270、280、290。夹持子组件210还包括盖板220、222、224、226，这些盖板被配置成牢固地螺栓连接到基板212上，以将准直子组件230和透镜子组件270、280、290分别相对于彼此封闭和固定在腔219、221、223和225内。
特别是参照图2和图3，准直子组件230包括支撑盘232、支撑毂234、插入件236和弹簧垫圈237，它们被构造成可操作地彼此接合并且将准直子组件230的准直透镜238相对于准直子组件230的激光二极管240保持在适当位置。
激光二极管240是横向电(transverse electric，TE)激光二极管，因此，发射的激光的偏振轴垂直于快轴(fast axis)或更发散的轴。在实施例中，快轴或更发散的轴具有从大约16度到大约25度的半峰全宽(full width at halfmaximum，FWHM)发散度；在其它实施例中，发散度为约20度至约23度；在另一些实施例中，发散度为约21度至约22度。
注意，使用横向电(TE)激光二极管代替横向磁(TM)激光二极管，因为TM激光二极管通常具有较大的快轴发散度。这些较大的发散度可能引起若干问题。首先，光束削波(beam clipping)的可能性更大，结果，波瓣(lobes)更大。此外，还存在两种其他代价：其要么需要更大焦距的物镜，这使得激光模块更长并且更难以使得对温度变化不敏感；要么，例如对于较大的白细胞，必须接受沿着光轴的较小的实际或表观芯流移动不灵敏范围和对飞行时间的较低灵敏度。
然而，使用没有补偿的TE激光二极管具有对偏振的侧向散射检测来说灵敏度差的缺点。对偏振的侧向散射的良好灵敏度对于识别网织红细胞和粒细胞尤其相关。如下面详细描述的，四分之一波片277与激光光学组件200的其它配置特征的使用弥补了TE激光二极管240的这个缺点，使得模块10(如下面详细描述的)提供了对偏振的侧散射光的良好灵敏度。
在实施例中，激光二极管240包括至少约10mW的功率，在其它实施例中，至少约20mW，且在另外的实施例中，至少约40mW。也可以考虑从10mW到40mW的功率或从20mW到40mW的功率。激光二极管240包括合适的电连接器，其能够将其连接到电源和控制电子设备(未示出)。在实施例中，激光二极管240可以被配置为发射具有在大约630-665nm范围内的波长的红光；在其它实施例中，波长在约635-650nm范围内；在其它实施例中，激光二极管240具有约640nm的标称波长。在实施例中，激光二极管240是可从日本东京的USHIO OPTOSEMICONCTORS获得的HL6363MG-A激光二极管。
继续参照图2和图3，激光二极管240被配置成固定在支撑盘232内。支撑盘232被构造成固定(例如螺栓连接)到支撑毂234，该支撑毂以螺纹接合的方式将插入件236接纳在其中。准直透镜238设置在支撑毂234内，并通过支撑盘232与支撑毂234之间以及插入件236与支撑毂234之间的接合而保持在插入件236与支撑盘232之间的固定位置。弹簧垫圈237定位在插入件236和支撑盘232之间，以保持其间的张力，从而消除各种固定的部件之间的游隙。
准直子组件230的各种部件的上述详细接合固定了准直透镜238和激光二极管240相对于彼此的水平、垂直和轴向对准，使得从激光二极管240发射的光束被良好地准直并且指向与支撑毂234同轴的方向。通过将准直子组件230的支撑毂234安置在夹持子组件210的基板212的筒218的第一腔219内、将盖板220定位在支撑毂234周围、并且例如通过螺栓在支撑毂234的任一侧上将盖板220与基板212接合，来将准直子组件230组装到夹持子组件210上。
仍然参照图2和图3，如上所述，激光光学组件200包括三个透镜子组件270、280、290。每个透镜子组件270、280、290分别包括透镜支架272、282、292，透镜支架分别限定透镜凹穴274、284、294，所述透镜凹穴被配置成将相应的透镜276、286、296固定地保持在其中。
透镜子组件270的透镜支架272还包括将四分之一波片(QWP)277固定地保持在其中的附加的透镜凹穴275。如图2所示，附加的透镜凹穴275可通过限定在透镜支架272内的扩大的端部开口278进入，以使QWP277能够纵向插入凹穴275，和/或，如图3所示，通过限定在透镜支架272内的狭槽279进入，以使QWP 277能够横向插入凹穴275。也可以考虑用于将QWP 277安置在凹穴275内的其它构造。作为附加的透镜凹穴275的替代，QWP 277可以与透镜276一起安装在透镜凹穴274内。QWP 277可位于透镜276的与准直透镜238相反的一侧上，或可位于透镜276的准直透镜侧上。作为另一替代，QWP 277可设置在准直子组件230内，并定位在准直透镜238的与透镜276相同的一侧(并因此定位在与激光二极管240相反的一侧)。在上述任何一种结构中，激光光学组件200可以被构造成使得激光束在QWP 277上的形心入射角(centroid angle of incidence)等于或小于约7度。
透镜276被配置为正柱面透镜(positive cylindrical lens)，并且作为透镜子组件270的一部分，被配置为位于基板212的筒218的第二腔221内，并且经由第二盖板222固定在其中，使得正柱面透镜276被定位成最靠近准直透镜238。第二盖板222还将QWP 277固定在基板212的筒218的第二腔221内，位于正柱面透镜276的与准直透镜238相比的相对侧(或在任何其它合适的位置，例如上面提到的那些位置)。
QWP 277是双折射QWP，在所示配置中，其位于底板212的筒218的第二腔221内，并经由第二盖板222连同正柱面透镜276一起固定在其中。QWP 277定向成使得其双折射轴相对于激光束的(TE)偏振轴围绕激光束轴旋转±45度。QWP 277使得，与被偏振为平行于所限定的快轴(其垂直于慢轴)的光束相比，垂直于QWP 277的平坦的、平行的面穿过QWP 277且被偏振为平行于所限定的慢轴激光束能够大约1/4波长更慢地穿过该板，从而提供光束的圆偏振。根据QWP 277的慢轴和快轴的位置，从QWP 277射出的光束将是右旋或左旋圆偏振的。可以使用右旋或左旋偏振。
在一些构造中，QWP 277和透镜276结合在一起，例如，QWP 277结合到透镜276的平面表面，并且被定位成保持QWP 277的双折射轴相对于激光束的(TE)偏振轴的上述详细取向。在这种结构中，QWP 277的双折射轴被设置为与透镜276的圆柱轴成约±45度。QWP 277和透镜276之间的对准可以通过使用测量和/或基准来实现和保持，所述测量和/或基准确保QWP的慢轴和快轴被定向成与平凸正柱面透镜276的曲率轴(axis of curvature)成±45度的角度。
透镜286被配置为负柱面透镜(negative cylindrical lens)，并且作为透镜子组件280的一部分，被配置为定位在基板212的筒218的第三腔223内，并且经由第三盖板224固定在其中，使得负柱面透镜286被定位为在其相对于准直子组件230的相反侧上与正柱面透镜276相邻。透镜296被配置为柱面物镜(cylindrical objective lens)，并且作为透镜子组件290的一部分，被配置为定位在基板212的筒218的第四腔225内，并且经由第四盖板226固定在其中，使得柱面物镜296在其相对于正柱面透镜276的相反侧上定位在负柱面透镜286旁边。
在组装期间，一旦准直子组件230被安装，透镜子组件290接着被插入到腔225中，被旋转地调整，并且经由盖板226被固定以在压缩下相对于基板212将透镜子组件290固定在适当位置，使得透镜子组件290被安装在距准直透镜238近似等于透镜296和准直透镜238的焦距的总和的距离处。在透镜子组件290的安装过程中，进行验证以确保光束束腰1/e2直径被最小化并且在约6.7μm至约9μm内(在与芯流将流动通过流动室340的方向平行的方向上)。
在透镜子组件290的组装和检验之后，透镜子组件270被插入到腔221中，被旋转地调节，并且通过盖板222被固定，以在压缩下相对于基板212将透镜子组件270固定就位。透镜子组件270的正柱面透镜276被旋转地对准，使得其屈光度轴线(axis of dioptricpower)垂直于柱面物镜296的屈光度轴线，这通过再次确认在平行于芯流流动方向上的约6.7μm至约9μm的光束束腰1/e2直径被保持而被验证。如上所述，QWP 277被排列成使得其双折射轴相对于激光束的(TE)偏振轴关于激光束轴旋转±45度。这可以与透镜276的对准分开或一起完成。在透镜276和QWP 277在被安装到腔221之前就相对于彼此固定的配置中，选择它们之间的相对定向，以使它们能够彼此对准，从而实现上述对准。透镜276到QWP 277的适当定向可以在两个部件被结合在一起时被实现。在这种情况下，如上所述的透镜276的对准足以正确地定向QWP。
接着，透镜子组件280被插入到腔223中，其被旋转地和/或轴向地调整，并且经由盖板224固定，以在压缩下相对于基板212将透镜子组件280固定就位，使得负柱面透镜286的屈光度轴线垂直于柱面物镜296的屈光度轴线并且平行于正柱面透镜276的屈光度轴线。这通过再次确认在平行于芯流流动方向的约6.7μm至约9μm的光束束腰1/e2直径得到保持而得到证实。负柱面透镜286的轴向间隔被调整，以便在实施例中在垂直于芯流流过流动室340的方向上实现约140μm至约210μm的光束1/e2宽度。尽管上面详细描述了一种组装方法，但是也可以考虑以类似或不同顺序的其它合适的组装方法。
先前通过引用并入本文的美国专利申请公开文献No.2019/0302391详细描述了在垂直于芯流流动和激光束的光轴的方向上将光束1/e2宽度(beam 1/e2 width)设置为大约200μm(或从大约190μm至大约210μm)。该宽度允许芯流实际上或明显地在大约±15μm的范围内移位(沿与光束宽度被测量相同的方向)，使得，与激光束集中在芯流上的情况相比，散射信号的衰减不超过约5％。这种布置至少在流动室基本上没有缺陷的情况下是有利的。更具体地说，这种布置至少在流动室的垂直于芯流流动的轮廓是矩形并且基本上没有突出、凹坑、凸起缺陷和/或类似情况时是有利的，因为这些缺陷可以将光折射和/或散射到散射检测器。
为了减轻流动室缺陷的影响，在一些方面，垂直于芯流流动和激光束的光轴的方向上的光束1/e2宽度可以是从约140μm到大约160μm；在其它方面，从大约145μm到约155μm；在另一些方面，大约150μm。光束宽度约为150μm与约200μm的光束宽度相比，降低流动室的侧壁处的光束强度，例如，以约5x的量级。光束宽度约为150μm(或在上述范围内)最小化或消除了来自流动室的边缘和/或侧壁的间歇散射或折射，这种散射或折射可能干扰小颗粒检测。然而，代价(tradeoff)是，随着光束宽度减小，对真实的或表观的芯流移动的敏感度增加，使得5％最大信号减小的水平真实或表观芯流偏移范围下降到±12μm。在±15μm，信号减少被预期增加到8％。
根据流动室的构造和精度、待测试的样品、结果处理算法、总体系统配置和/或其它因素，考虑到上述代价，在垂直于芯流流动和激光束光轴的方向上的光束1/e2宽度可能是从约140μm到大约210μm，或更具体地，在以上所述的任何范围内或任何其它合适的范围内。例如，如果精确地形成流动室而没有任何缺陷，则140μm到大约210μm范围内的光束宽度将不会导致来自流动室的边缘和/或侧壁的散射或折射。然而，向流动室的内部角部添加或形成圆形部、带状部(fillets)或其它不规则特征可显著增加来自较宽光束宽度的散射或折射。如上详细所述，更窄的光束宽度，例如，从大约140μm到大约160μm或大约150μm可以用于减轻这种杂散光。
关于模块10的操作，一般参照图1-图3，激光二极管240产生沿光轴的激光束。从激光二极管240发射的激光束穿过准直透镜238、正柱面透镜276、QWP 277、负柱面透镜286和柱面物镜296并投射到流动室340中，使得入射到流动室340中的芯流的中心上的激光束在平行于流动室的流动方向的方向上限定约6.7μm至约9μm的第一光束束腰1/e2直径(beamwaist 1/e2 diameter)，并在垂直于流动室的流动方向的方向上限定约140μm至约210μm(或其它合适的范围，例如上面详述的那些)的第二光束1/e2直径。
入射到流动室340的芯流内的颗粒上的激光束被散射：向前到前向散射子组件410并且侧向到侧向散射子组件420。如上所述，在例如小于或等于约30度的角度处，或更具体地，在约11.5度至约15.5度(对于FSH传感器)和/或约2.0度至约2.4度(对于FSL传感器)的范围内的角度处，检测来自流动室340的前向散射光。消光传感器提供与光损失(到颗粒的吸收或散射)的量成比例的响应。如上所述，在实施例中，侧向散射光在相对于光轴从约50度到约120度的角度处，或者更具体地，在从约65度到约91度的角度处被检测，和/或其中散射强度是通过圆形透镜孔径(其相对于光轴对向延跨(subtending)约67度到约89度)可检测的。侧向散射光的最大灵敏度可以在大约78度处。
此外，所述TE激光二极管240、和QWP 277的存在确保了全范围的线性偏振与进行散射的发色团中可能的电偶极转换(electric dipole transition)相互作用，例如，在染色的网织红细胞和有核白细胞中未染色(或染色)的核酸材料中存在的那样。这些偶极子(dipoles)中的一些偶极子，即使对于偏振被保持的(polarization-preserved)散射，也将具有基本上竖直的偏振(平行于芯流流动方向)。从这些偶极子可以获得可测量的侧向散射强度。
完全偏振散射是来自流动室340的、在散射光束中保持了入射激光束的偏振的散射。另一方面，完全去偏振的散射是来自流动室340的、散射光束的偏振是随机的散射。为了能够检测完全去偏振的侧向散射，照射流动室340的激光束的偏振无关紧要；不管输入偏振如何，侧向散射信号都是相同的。然而，对于部分或完全偏振散射的检测，重要的是散射偏振的主要(substantial)分量平行于通过流动室340的流动方向，因为仅有具有可测量的竖直偏振强度的侧向散射强度是可以被检测的。
TE激光二极管240发射激光的横波，该横波被偏振成垂直于通过流动室340的流动方向。然而，保持输入光束(其被偏振为垂直于通过流动室340的流动方向，如TE激光二极管240在没有QWP 277的情况下会产生的那样)的偏振的侧向散射强度必然为零，这意味着完全偏振散射的检测是不可能的。因此，QWP 277用于将平行于通过流动室340的流动方向的偏振分量引入源自TE激光二极管240的激光束。这样，可以测量部分或完全偏振的侧向散射的强度。通过提供更大的光束辐照度(例如功率)和/或更大的平行偏振分量(例如，如QWP277对于给定辐照度提供的那样)，部分或完全偏振的侧向散射信号的幅度被增加。
参照图4，以表格形式示出了在所选物镜焦距处的光束发散度和聚焦光束直径的1/e2束腰(focused beam diametric 1/e2 waist)之间的关系。聚焦束直径的1/e2束腰，ω0(以微米为单位)，由以下等式确定：
其利用以下参数：λ＝0.64μm(红色激光二极管)；M2＝1.3(激光二极管光学器件的典型值)；θFWHM＝换算成弧度的半峰全宽(FWHM)光束发散度，所述转换从被以度表示的光束发散度FWHM打头的行(rows)开始；fco11＝准直透镜的焦距；并且fobj＝物镜的焦距。0.85因子将FWHM转换为在1/e2最大光束强度(而不是1/2最大光束强度)处的半宽。对于图4所示的表格，准直透镜的焦距假定为5.5mm，其可以是准直透镜238(图2和图3)的焦距。然而，通过将表格条目乘以所使用的焦距的比率(5.5mm与期望的不同焦距的比率)，可以针对准直透镜的不同焦距修改表格条目。类似地，对于不同的物镜焦距，给定列中的表格条目可以乘以期望的不同焦距与表格表头值(例如第四列中提供的37mm)的比率。与提供所需的光束宽度范围相关的发散度是平行于通过流动室的流动方向的发散度。
继续参照图4，该表格示出了对于低的光束FWHM发散度，例如小于约10度，对于任何优选的物镜焦距而言，光束将是不期望地宽。在这些情况下，准确测量较小血细胞的飞行时间即使不是不可能的，也是受到损害的。类似地，光束发散得越多，提供足够大直径的束腰以避免对芯流移动的过灵敏性所需的物镜焦距就越大。图4的表格中的无阴影单元表示适当的参数组，例如光束发散度和物镜焦距，以及进而用于在激光光学组件200(图1-图3)中实现的适当的透镜和激光二极管配置，尽管实现同样结果的其它适当参数和部件也被考虑了。
参照图5，在准直透镜的、用于如图4的θFWHM的限制通光孔径(limiting clearaperture)处的相对(相对于假定的中心光束强度最大值)光束强度被表示为光束发散度、孔径直径和准直透镜焦距的函数。条目通过以下等式被确定：
其中，孔径直径由变量a表示，并且其中，1.7因子将FWHM转换为在1/e2最大光束强度处的全宽度。
对于列出的fcoll和孔径直径值，多个透镜(例如，可从美国佛罗里达州奥兰多的LightPath获得的透镜)的削波强度(clipping intensities)被考虑。为了避免光束的削波，选择具有相对大的数值孔径的透镜。如图5所示，即使是标准的、相对高数值孔径的透镜，如果光束是高度发散的，也将使激光束被削波。这种削波在高于约25度的FWHM发散度时将是显著的(表现为小波瓣将开始出现在聚焦在芯流上的光束横截面中)。在30度以上，削波甚至更严重，并且波瓣的强度通常相应地增加。
图5的表格中的无阴影单元表示适当的参数组，例如光束发散度、孔径直径和准直透镜的焦距，以及从而用于在激光光学组件200(图1-图3)中实现的适当的透镜和激光二极管配置，但是实现同样结果的其它适当参数和部件也被考虑。一起考虑图4和图5的合适的参数组(例如，无阴影的单元)，可以实现用于激光光学组件200(图1-3)的合适的透镜和激光二极管配置，其中：分布强度波瓣被消除或将波瓣降低到小的或可忽略的强度，例如，主高斯峰的强度的至多7％；提供良好的TOF能力；使得能够检测以相对低的前向角和相对高的侧向角散射的光；并且对于去偏振和偏振散射光都提供了对正向散射和侧向散射的良好灵敏度。
应当理解，本文中对任何具体数值的引用涵盖考虑本领域中通常接受的材料和制造公差和/或本领域中通常接受的测量设备的误差容限的值范围。
根据上文并参照各个附图，本领域技术人员将理解，还可以对本公开进行某些修改而不偏离本公开的范围。尽管在附图中示出了本公开的若干实施例，但是并不意图将本公开限制于此，因为本公开意图的范围与本领域所允许的范围一样宽，并且说明书同样地可被阅读。因此，上述说明不应被解释为限制，而仅仅是作为特定实施例的范例。本领域技术人员可以预见在所附权利要求的范围和精神内的其它修改。

Claims (28)

1.一种血液分析器的流式细胞仪，包括：
横向电(TE)激光二极管，所述横向电(TE)激光二极管被配置成沿着光轴输出激光束，所述激光束具有从约16度到约25度的快轴半峰全宽(FWHM)发散度；
流动室；
四分之一波片(QWP)，所述四分之一波片沿着所述光轴设置在所述TE激光二极管和所述流动室之间，所述QWP被配置成当所述激光束穿过所述QWP时使所述激光束圆偏振；
多个透镜，其设置在所述TE激光二极管和所述流动室之间，所述多个透镜协作以将所述激光束聚焦在所述流动室处；以及
侧向散射检测器，所述侧向散射检测器被配置成在相对于所述光轴成约50度至约120度的角度处检测来自所述流动室的侧向散射光。
2.根据权利要求1所述的流式细胞仪，还包括至少一个前向散射检测器，所述至少一个前向散射检测器被配置为在相对于所述光轴成小于约30度的角度处检测来自所述流动室的前向散射光。
3.根据权利要求2所述的流式细胞仪，其中，所述至少一个前向散射检测器被配置为在相对于所述光轴成约11.5度至约15.5度的角度处检测来自所述流动室的前向散射光。
4.根据权利要求2所述的流式细胞仪，其中，所述至少一个前向散射检测器被配置为在相对于所述光轴成从约2.0度至约2.4度的角度处检测来自所述流动室的前向散射光。
5.根据权利要求1所述的流式细胞仪，其中，从所述流动室所检测到的侧向散射光强度被相对于所述光轴在约67度至约89度的角度处的所述侧向散射检测器检测。
6.根据权利要求1所述的流式细胞仪，其中，所述侧向散射检测器相对于所述光轴约78度处对中。
7.根据权利要求1所述的流式细胞仪，其中，所述QWP相对于所述TE激光二极管定位成，使得所述激光束在所述QWP上的形心入射角等于或小于约7度。
8.根据权利要求1所述的流式细胞仪，其中，所述QWP的双折射轴围绕所述光轴被相对于所述激光束的偏振轴旋转±45度，从而使所述激光束右旋或左旋地圆偏振。
9.根据权利要求1所述的流式细胞仪，其中，所述多个透镜包括设置在所述激光二极管和所述QWP之间的准直透镜以及设置在所述QWP和所述流动室之间的物镜。
10.根据权利要求9所述的流式细胞仪，其中，所述多个透镜还包括设置在所述准直透镜和所述物镜之间的正柱面透镜和负柱面透镜。
11.根据权利要求1所述的流式细胞仪，其中，在所述流动室内的芯流处，所述激光束在平行于所述芯流的流动方向的方向上限定了约6.7μm至约9μm的光束束腰1/e2直径。
12.根据权利要求11所述的流式细胞仪，其中，在所述流动室内的所述芯流处，所述激光束在垂直于所述芯流的流动方向的方向上限定了约140μm至约210μm的光束1/e2直径。
13.根据权利要求1所述的流式细胞仪，其中，所述TE激光二极管被配置成输出至少10mW的功率。
14.根据权利要求1所述的流式细胞仪，其中，所述TE激光二极管被配置成输出至少20mW的功率。
15.一种检测网织红细胞和粒细胞的方法，包括：
使具有网织红细胞或粒细胞中的至少一种的血液样品与鞘液一起流动通过流动室；
从横向电(TE)激光二极管沿着光轴发射激光束，所述激光束具有从约16度到约25度的快轴半峰全宽(FWHM)发散度；
使所述激光束穿过沿着所述光轴设置在所述TE激光二极管与所述流动室之间的四分之一波片(QWP)，以在所述激光束穿过所述四分之一波片时使所述激光束圆偏振；
使所述激光束穿过设置在所述TE激光二极管和所述流动室之间的多个透镜，以将所述激光束聚焦在所述流动室处；以及
在相对于所述光轴成约50度至约120度的角度处检测来自所述流动室的侧向散射光。
16.根据权利要求15所述的方法，还包括至少在相对于所述光轴成小于约30度的角度处检测来自所述流动室的散射光。
17.根据权利要求16所述的方法，其中，来自所述流动室的散射光至少在相对于所述光轴成大约11.5度至大约15.5度的角度处被检测。
18.根据权利要求16所述的方法，其中，来自所述流动室的散射光至少在相对于所述光轴约2.0度至约2.4度的角度处被检测。
19.根据权利要求15所述的方法，其中，从所述流动室所检测到的侧向散射光强度是在相对于所述光轴成从约67度至约89度的角度处检测到的。
20.根据权利要求15所述的方法，其中，所述侧向散射光强度的最大灵敏度被设置在相对于所述光轴约78度处。
21.根据权利要求15所述的方法，其中，所述QWP相对于所述TE激光二极管被定位成，使得所述激光束在所述QWP上的形心入射角等于或小于约7度。
22.根据权利要求15所述的方法，其中，穿过所述QWP的激光束被所述QWP右旋或左旋地圆偏振。
23.根据权利要求15所述的方法，其中，所述多个透镜包括准直透镜，并且其中，所述激光束在所述QWP之前穿过所述准直透镜。
24.根据权利要求23所述的方法，其中，所述多个透镜还包括物镜，并且其中，所述激光束在所述QWP之后穿过所述物镜。
25.根据权利要求15所述的方法，其中，在所述流动室的芯流处，所述激光束在平行于流动的方向上限定了约6.7μm至约9μm的光束束腰1/e2直径。
26.根据权利要求25所述的方法，其中，在所述流动室的芯流处，所述激光束在垂直于流动的方向上限定了大约140μm至大约210μm的光束1/e2直径。
27.根据权利要求15所述的方法，其中，用于发射所述激光束的所述TE激光二极管的功率输出是至少10mW。
28.根据权利要求15所述的方法，其中，用于发射所述激光束的所述TE激光二极管的功率输出是至少20mW。
CN202180043403.2A 2020-06-17 2021-06-15 流式细胞仪及其激光光学组件 Active CN115917292B (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US202063040035P 2020-06-17 2020-06-17
US63/040,035 2020-06-17
PCT/US2021/037417 WO2021257553A1 (en) 2020-06-17 2021-06-15 Flow cytometer and laser optics assembly thereof

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN115917292A CN115917292A (zh) 2023-04-04
CN115917292B true CN115917292B (zh) 2023-08-25

Family

ID=77022183

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202180043403.2A Active CN115917292B (zh) 2020-06-17 2021-06-15 流式细胞仪及其激光光学组件

Country Status (8)

Country Link
US (3) US11543342B2 (zh)
EP (1) EP4168773B1 (zh)
JP (2) JP2023526690A (zh)
KR (1) KR102547788B1 (zh)
CN (1) CN115917292B (zh)
AU (1) AU2021293085A1 (zh)
CA (1) CA3182847A1 (zh)
WO (1) WO2021257553A1 (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10914913B2 (en) * 2018-03-30 2021-02-09 Idexx Laboratories, Inc. Flow cytometer, laser optics assembly thereof, and methods of assembling the same

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6859277B2 (en) * 2002-08-27 2005-02-22 Particle Measuring Systems, Inc. Particle counter with strip laser diode
CN111133291A (zh) * 2017-09-21 2020-05-08 法国比特集团 用于落射荧光测量的光学流式细胞仪

Family Cites Families (91)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4013368A (en) 1972-09-20 1977-03-22 Akro-Medic Engineering, Inc. Sample cartridge for use in apparatus for evaluation of biological fluid
US3925018A (en) 1973-06-08 1975-12-09 Technicon Instr Method and apparatus for quantitative analysis utilizing particulate reagent material
US4043669A (en) 1976-05-28 1977-08-23 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Air Force Light scattering test apparatus
US4284412A (en) 1979-07-13 1981-08-18 Ortho Diagnostics, Inc. Method and apparatus for automated identification and enumeration of specified blood cell subclasses
US4250394A (en) 1979-07-19 1981-02-10 Akzona Incorporated Apparatus for determining immunochemical substances
US4818103A (en) 1981-05-15 1989-04-04 Ratcom Flow cytometry
US4565448A (en) 1983-03-11 1986-01-21 E. I. Du Pont De Nemours And Company Particle counting apparatus
US4606636A (en) 1983-10-25 1986-08-19 Universite De Saint-Etienne Optical apparatus for identifying the individual multiparametric properties of particles or bodies in a continuous flow
US4665553A (en) 1984-05-01 1987-05-12 Ortho Diagnostics Systems Inc. Methods and apparatus for analysis of particles and cells
US5093234A (en) 1984-12-24 1992-03-03 Caribbean Microparticles Corporation Method of aligning, compensating, and calibrating a flow cytometer for analysis of samples, and microbead standards kit therefor
NL8601000A (nl) 1986-04-21 1987-11-16 Jan Greve T H Twente Afdeling Het gebruik van gepolariseerd licht in stromingscytometrie.
US5179026A (en) 1986-11-27 1993-01-12 Toa Medical Electronics Co., Ltd. Method of classifying leukocytes by flow cytometry and reagents used in the method
KR970007077B1 (ko) 1987-03-13 1997-05-02 코울터 일렉트로닉스 인커퍼레이티드 광산란 기술을 이용한 다중-부분식별 분석 방법
US5155044A (en) 1987-03-13 1992-10-13 Coulter Electronics, Inc. Lysing reagent system for isolation, identification and/or analysis of leukocytes from whole blood samples
US5408307A (en) 1988-07-11 1995-04-18 Omron Tateisi Electronics Co. Cell analyzer
CA2016699C (en) 1989-05-15 2003-11-18 Paul N. Marshall Lytic agents and uses thereof
US4954715A (en) 1989-06-26 1990-09-04 Zoeld Tibor Method and apparatus for an optimized multiparameter flow-through particle and cell analyzer
JPH03140840A (ja) * 1989-10-26 1991-06-14 Hitachi Ltd 流動細胞分析装置
IE76732B1 (en) 1990-08-07 1997-11-05 Becton Dickinson Co One step test for absolute counts
DE4109118C2 (de) 1991-03-20 1995-04-06 Lange Gmbh Dr Bruno Verfahren zum automatischen Auswerten eines Probeninhaltsstoffes einer Wasserprobe
JP3048260B2 (ja) 1991-07-29 2000-06-05 シスメックス株式会社 白血球分類計数用試料調製方法
JP3067849B2 (ja) 1991-07-29 2000-07-24 シスメックス株式会社 白血球分類計数用試料調製方法
JP3014553B2 (ja) 1991-10-21 2000-02-28 三星電子株式会社 光記録テープの記録及び／又は再生装置
US5284771A (en) 1991-12-05 1994-02-08 Miles Inc. Reagent compositions and their use in sphering cells
US5350695A (en) 1991-12-05 1994-09-27 Miles Inc. Methods for the identification and characterization of reticulocytes in whole blood
US5360739A (en) 1991-12-05 1994-11-01 Miles Inc. Methods for the identification and characterization of reticulocytes in whole blood
US5451525A (en) 1992-02-14 1995-09-19 Coulter Corporation Method and materials for determining particle count in a flow cytometer
US5558998A (en) 1992-02-25 1996-09-24 The Regents Of The Univ. Of California DNA fragment sizing and sorting by laser-induced fluorescence
JP2804873B2 (ja) 1992-12-17 1998-09-30 三菱電機株式会社 微粒子分析装置および微粒子分析方法
US5728351A (en) 1993-01-21 1998-03-17 Cdc Technologies, Inc. Apparatus for making a plurality of reagent mixtures and analyzing particle distributions of the reagent mixtures
US5467189A (en) 1993-01-22 1995-11-14 Venturedyne, Ltd. Improved particle sensor and method for assaying a particle
US5585246A (en) 1993-02-17 1996-12-17 Biometric Imaging, Inc. Method for preparing a sample in a scan capillary for immunofluorescent interrogation
ATE236397T1 (de) 1993-05-14 2003-04-15 Coulter Int Corp Retikulozyt bestimmungsverfahren und geraet, das lichtstreuungstechniken verwendet
AU8123594A (en) 1993-10-22 1995-05-08 Abbott Laboratories Reaction tube and method of use to minimize contamination
US5475487A (en) 1994-04-20 1995-12-12 The Regents Of The University Of California Aqueous carrier waveguide in a flow cytometer
DE69527465T2 (de) 1994-04-21 2003-05-08 Hitachi Ltd Überwachungsverfahren einer Färbelösung für Partikelanalysen und Kalibrierungsverfahren von Partikelanalysen
US5540494A (en) 1994-06-03 1996-07-30 Purvis, Jr.; Norman B. Method and apparatus for determining absolute particle size, surface area and volume normalized fluorescence using forward angle light scatter intensity in flow cytometry
US5656499A (en) 1994-08-01 1997-08-12 Abbott Laboratories Method for performing automated hematology and cytometry analysis
US5631165A (en) 1994-08-01 1997-05-20 Abbott Laboratories Method for performing automated hematology and cytometry analysis
JP3375203B2 (ja) 1994-08-08 2003-02-10 シスメックス株式会社 細胞分析装置
EP0708334B1 (en) 1994-10-20 2001-05-23 Sysmex Corporation Reagent and method for analyzing solid components in urine
JP3324050B2 (ja) 1994-10-31 2002-09-17 日本光電工業株式会社 白血球分類用試薬および白血球分類方法
US5691204A (en) 1995-04-21 1997-11-25 Abbott Laboratories Compositions and methods for the rapid analysis of reticulocytes
US5650847A (en) 1995-06-14 1997-07-22 Erkki Soini Method and device for determination of parameters of individual microparticles
US5733784A (en) 1995-11-20 1998-03-31 Abbott Laboratories Reagent system and method for the differentiation and identification of reticulocytes
US5872627A (en) 1996-07-30 1999-02-16 Bayer Corporation Method and apparatus for detecting scattered light in an analytical instrument
US5858667A (en) 1996-09-06 1999-01-12 Litron Laboratories Method for the enumeration of micronucleated erythrocyte populations with a single laser flow cytometer
US5850411A (en) * 1996-09-17 1998-12-15 Sdl, Inc Transverse electric (TE) polarization mode AlGaInP/GaAs red laser diodes, especially with self-pulsating operation
US5798827A (en) 1996-11-26 1998-08-25 Coulter International Corp. Apparatus and method for determination of individual red blood cell shape
DE19700648A1 (de) 1997-01-10 1998-07-23 Basf Ag Verfahren und Vorrichtung zur Bestimmung der Größenverteilung von verschiedenartigen Partikeln in einer Probe
US6074879A (en) 1997-06-23 2000-06-13 Bayer Corporation Synthetic polymer particles for use as standards and calibrators in flow cytometry
US6410337B1 (en) 1997-09-18 2002-06-25 Helena Laboratories Corporation Method of platlet function analysis using platelet count
US5874310A (en) 1997-11-21 1999-02-23 Coulter International Corp. Method for differentiation of nucleated red blood cells
US5917584A (en) 1997-11-21 1999-06-29 Coulter International Corp. Method for differentiation of nucleated red blood cells
US5874311A (en) 1997-11-21 1999-02-23 Coulter International Corp. Method for differentiation of reticulocytes in blood
US6261519B1 (en) 1998-07-20 2001-07-17 Lifescan, Inc. Medical diagnostic device with enough-sample indicator
US6067157A (en) 1998-10-09 2000-05-23 University Of Washington Dual large angle light scattering detection
US6271035B1 (en) 1998-10-20 2001-08-07 Coulter International Corp. Methods and compositions for rapid staining of nucleic acids in whole cells
JP2000214070A (ja) 1999-01-21 2000-08-04 Sysmex Corp シ―スフロ―セルとそれを用いた血液分析装置
US6228652B1 (en) 1999-02-16 2001-05-08 Coulter International Corp. Method and apparatus for analyzing cells in a whole blood sample
US6232125B1 (en) 1999-08-09 2001-05-15 Coulter International Corp. Method and apparatus for differentiating and enumerating leukocytes
US6478452B1 (en) 2000-01-19 2002-11-12 Coherent, Inc. Diode-laser line-illuminating system
US6618143B2 (en) 2000-02-18 2003-09-09 Idexx Laboratories, Inc. High numerical aperture flow cytometer and method of using same
US6320656B1 (en) 2000-02-18 2001-11-20 Idexx Laboratories, Inc. High numerical aperture flow cytometer and method of using same
US7215425B2 (en) 2000-08-02 2007-05-08 Honeywell International Inc. Optical alignment for flow cytometry
US6784981B1 (en) 2000-06-02 2004-08-31 Idexx Laboratories, Inc. Flow cytometry-based hematology system
KR100385166B1 (ko) * 2000-10-09 2003-05-22 삼성테크윈 주식회사 레이저 다이오드를 채용한 광학계
EP1245944B1 (en) * 2001-03-29 2007-02-14 Sysmex Corporation Flow cytometer
US7053783B2 (en) 2002-12-18 2006-05-30 Biovigilant Systems, Inc. Pathogen detector system and method
EP2884258B1 (en) * 2004-07-27 2016-10-12 Beckman Coulter, Inc. Enhancing flow cytometry discrimination with computer-implemented geometric transformation
US7340957B2 (en) * 2004-07-29 2008-03-11 Los Alamos National Security, Llc Ultrasonic analyte concentration and application in flow cytometry
US7110192B2 (en) 2005-01-12 2006-09-19 Dako Denmark A/S System and method for a composite lens for a flow cytometer
US7113266B1 (en) * 2005-03-30 2006-09-26 Beckman Coulter, Inc. Flow cytometer for differentiating small particles in suspension
US20060256335A1 (en) * 2005-05-13 2006-11-16 Becton, Dickinson And Company Optical beam-shaper
CN101000306B (zh) 2006-01-09 2010-11-17 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 细胞分析仪
CN101153868B (zh) 2006-09-30 2012-05-30 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 流式细胞分析仪
CN101236150B (zh) 2007-02-02 2012-09-05 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司 用于基于流式细胞术的仪器的光电传感器及其照射单元
US7787197B2 (en) 2007-09-14 2010-08-31 Becton, Dickinson And Company Beam-adjusting optics
US7782459B2 (en) 2007-09-24 2010-08-24 Process Metrix Laser-based apparatus and method for measuring agglomerate concentration and mean agglomerate size
US7800742B2 (en) 2007-10-03 2010-09-21 Sysmex Corporation Cell analyzer and cell analyzing method
US8619370B2 (en) 2010-05-03 2013-12-31 Bio-Rad Laboratories, Inc. Optical combiner for combining multiple laser beams in a flow cytometer
US8366298B2 (en) 2010-08-24 2013-02-05 Idexx Laboratories, Inc. Laser diode mounting system
CN104024831B (zh) * 2011-12-29 2017-03-29 雅培制药有限公司 用于阻止衍射图样的流式细胞仪系统和方法
CN104969055B (zh) 2013-03-14 2018-10-12 雅培实验室 流式细胞仪系统的光束成形光学器件及其相关方法
US9372143B2 (en) * 2013-05-15 2016-06-21 Captl Llc Scanning image flow cytometer
JP6225085B2 (ja) * 2013-08-30 2017-11-01 シスメックス株式会社 検体分析方法および検体分析装置
JP6352713B2 (ja) 2014-07-22 2018-07-04 シスメックス株式会社 フローサイトメータ、粒子分析装置およびフローサイトメトリー法
US10234395B2 (en) * 2014-09-12 2019-03-19 Seagate Technology Llc Raman apparatus and methods
US10036698B2 (en) * 2015-06-19 2018-07-31 Captl Llc Time-sequential cytometry
CN106707449B (zh) 2017-01-18 2023-02-28 重庆博奥新景医学科技有限公司 一种用于光学镜头组装的辅助装置及其方法
US10914913B2 (en) * 2018-03-30 2021-02-09 Idexx Laboratories, Inc. Flow cytometer, laser optics assembly thereof, and methods of assembling the same

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6859277B2 (en) * 2002-08-27 2005-02-22 Particle Measuring Systems, Inc. Particle counter with strip laser diode
CN111133291A (zh) * 2017-09-21 2020-05-08 法国比特集团 用于落射荧光测量的光学流式细胞仪

Also Published As

Publication number Publication date
US20230124317A1 (en) 2023-04-20
KR102547788B1 (ko) 2023-06-26
CN115917292A (zh) 2023-04-04
BR112022025798A2 (pt) 2023-01-10
US20240159650A1 (en) 2024-05-16
JP2023526690A (ja) 2023-06-22
US20210396646A1 (en) 2021-12-23
AU2021293085A1 (en) 2023-02-16
EP4168773B1 (en) 2024-07-17
WO2021257553A1 (en) 2021-12-23
KR20230038484A (ko) 2023-03-20
EP4168773A1 (en) 2023-04-26
CA3182847A1 (en) 2021-12-23
JP2024056763A (ja) 2024-04-23
US11879828B2 (en) 2024-01-23
US11543342B2 (en) 2023-01-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US7800751B1 (en) Dense pattern multiple pass cells
US20240159650A1 (en) Flow cytometer and laser optics assembly thereof
CN201083677Y (zh) 气溶胶颗粒光学检测系统
US8705030B2 (en) Optical sample detection system and sample analysis device
CN108918498A (zh) 一种实现线聚焦激发的拉曼探头
US11662542B2 (en) Flow cytometer, laser optics assembly thereof, and methods of assembling the same
CN106019608B (zh) 一种类高斯平顶光束激光系统
US10788411B2 (en) Flow cytometry with dual laser beams
CN105675581B (zh) 一种自由空间气体拉曼散射收集装置
US20190369406A1 (en) Backscatter reductant anamorphic beam sampler
CN208270405U (zh) 一种光纤光程池
CN109470638A (zh) 激光气体检测装置
CN218767558U (zh) 一种基于ld的单分子检测免疫分析仪的共聚焦光学系统
CN116399832A (zh) 用于分析血细胞的光学检测系统及血细胞分析仪
CN116642665A (zh) 一种光源平分装置及其检测仪器
CN118090698A (zh) 一种腔增强拉曼光谱收集的多气体检测方法及装置

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant