CN104024831B - 用于阻止衍射图样的流式细胞仪系统和方法 - Google Patents
用于阻止衍射图样的流式细胞仪系统和方法 Download PDFInfo
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Abstract
提供了具有中间角度散射检测能力的流式细胞仪系统。在一些方面,提供了包括中间角度散射(IAS)光检测器的系统,所述IAS光检测器被定位成测量从流式细胞仪发射的中间角度散射。所述系统还包括掩模,所述掩模被安置在所述IAS光检测器的一部分上且被定位在所述流动室和所述IAS光检测器之间以至少覆盖所述IAS光检测器的中心部分,从而阻止在所述检测器观察到衍射图样。在一些实例中,所述衍射图样由照射所述样品的扁平光束轮廓产生。也提供了用于配置流式细胞仪以阻止由以下产生的衍射图样的方法:(1)照射流式细胞仪液体样品的扁平激光束轮廓,或(2)流式细胞仪中鞘液和液体样品之间不匹配的折射指数。
Description
相关申请的交叉参考
本申请请求2011年12月29日提交的美国临时专利申请序列号61/581,462的优先权,所述申请的公开内容以引用的方式全部并入本文。
背景技术
提供一种流式细胞仪系统。所述系统包括使水动力聚焦的液体样品流过询问区域的流动室;被定位成用光束照射询问区域的光源;和安置于光源和流动室之间的光束成型光学器件。光束成型光学器件操纵光束并创建在询问区域照射液体样品的水平扁平光束轮廓。系统包括被定位成当照射液体样品时测量从液体样品发射的中间角度散射的中间角度散射(IAS)光检测器。系统还包括掩模,所述掩模被水平安置成在IAS光检测器的一部分上,在流动室和IAS光检测器之间,并至少覆盖IAS光检测器的中心部分,从而阻止由照射液体样品的扁平光束轮廓产生的水平衍射图样。
发明概要
本公开一般提供一种流式细胞仪系统,所述流式细胞仪系统包括使水动力聚焦的液体样品流过询问区域的流动室;被定位成用光束照射询问区域的光源;安置于光源和流动室之间的多个光束成型光学器件,其中光束成型光学器件操纵光束并创建在询问区域照射液体样品的水平扁平光束轮廓;被定位成当照射液体样品时测量从液体样品发射的中间角度散射的中间角度散射(IAS)光检测器;和掩模,所述掩模被水平安置成在IAS光检测器的一部分上并被定位在流动室和IAS光检测器之间以至少覆盖IAS光检测器的中心部分,从而阻止由照射液体样品的扁平光束轮廓产生的水平衍射图样。
在一些实施方案中,光源是激光。
在一些实施方案中,流式细胞仪还包括用于汲取用以水动力聚焦液体样品的鞘液的鞘液源。
在一些实施方案中,鞘液是水。
在一些实施方案中,掩模选自由以下组成的组:带、阻塞棒和光刻阻塞。
在一些实施方案中,IAS光检测器包括两个同心检测器环。
在一些实施方案中,第一检测器环测量约2-7度之间的中间角度散射。
在一些实施方案中,第二检测器环测量约7-11度之间的中间角度散射。
在一些实施方案中,两个同心检测器环包括第一同心检测器环和第二同心检测器环,且IAS光检测器包括同心安置在第一和第二同心检测器环中的中心检测器环。
在一些实施方案中,第一同心检测器环具有大约4mm的内径和大约7.6mm的外径,且第二同心检测器环具有大约9.6mm的内径和大约13mm的外径。
在一些实施方案中,掩模是阻塞棒。
在一些实施方案中,阻塞棒是有孔镜,所述有孔镜被定位成允许测量通过阻塞棒中的中心孔的轴向光损耗并把中间角度散射从流动室重定向到IAS光检测器。
在一些实施方案中,本公开提供一种流式细胞仪系统,所述流式细胞仪系统包括使水动力聚焦的液体样品流过询问区域的流动室;用于汲取用以水动力聚焦液体样品的鞘液的鞘液源,其中鞘液是水;被定位成用光束照射询问区域的光源;安置于光源和流动室之间的多个光束成型光学器件,其中光束成型光学器件操纵光束;被定位成当照射液体样品时测量从液体样品发射的中间角度散射的中间角度散射(IAS)光检测器;和掩模,所述掩模被安置成在IAS光检测器的一部分上并被定位在流动室和IAS光检测器之间以至少覆盖IAS光检测器的中心部分,从而阻止当照射液体样品时由鞘液产生的衍射图样。
在一些实施方案中,光源是激光。
在一些实施方案中,多个光束成型光学器件创建在询问区域照射液体样品的水平扁平光束轮廓。
在一些实施方案中,掩模是带、阻塞棒,或光刻阻塞。
在一些实施方案中,IAS光检测器包括两个同心检测器环。
在一些实施方案中,第一检测器环测量约2-7度之间的中间角度散射。
在一些实施方案中,第二检测器环测量约7-11度之间的中间角度散射。
在一些实施方案中,两个同心检测器环包括第一同心检测器环和第二同心检测器环,且IAS光检测器包括同心安置在第一和第二同心检测器环中的中心检测器环。
在一些实施方案中,第一同心检测器环具有大约4mm的内径和大约7.6mm的外径,且第二同心检测器环具有大约9.6mm的内径和大约13mm的外径。
在一些实施方案中,掩模是阻塞棒。在一些实施方案中,阻塞棒是有孔镜,所述有孔镜被定位成允许测量通过阻塞棒中的中心孔的轴向光损耗并把中间角度散射从流动室重定向到IAS光检测器。
在一些实施方案中,本公开提供一种用于阻止由照射流式细胞仪液体样品的扁平激光束轮廓或流式细胞仪中鞘液和液体样品之间不匹配的折射指数产生的衍射图样的系统,所述系统包括被定位成当照射液体样品时测量从液体样品发射的中间角度散射的中间角度散射(IAS)光检测器;和掩模,所述掩模安置成在IAS光检测器的一部分上并至少覆盖IAS光检测器的中心部分,从而阻止衍射图样。
在一些实施方案中,掩模被水平安置在IAS光检测器上。在一些实施方案中,掩模是带、阻塞棒,或光刻阻塞。
在一些实施方案中,IAS光检测器还包括两个同心检测器环。在一些实施方案中,第一检测器环测量约2-7度之间的中间角度散射。在一些实施方案中,第二检测器环测量约7-11度之间的中间角度散射。在一些实施方案中,两个同心检测器环包括第一同心检测器环和第二同心检测器环,且IAS光检测器包括同心安置在第一和第二同心检测器环中的中心检测器环。在一些实施方案中,第一同心检测器环具有大约4mm的内径和大约7.6mm的外径,且第二同心检测器环具有大约9.6mm的内径和大约13mm的外径。
在一些实施方案中,掩模是阻塞棒。在一些实施方案中,阻塞棒是有孔镜,所述有孔镜被定位成允许测量通过阻塞棒中的中心孔的轴向光损耗并把中间角度散射重定向到IAS光检测器。
在一些实施方案中,本公开提供一种用于配置流式细胞仪以阻止由照射流式细胞仪液体样品的扁平激光束轮廓或流式细胞仪中鞘液和液体样品之间不匹配的折射指数产生的衍射图样的方法,所述方法包括:把掩模设置在中间角度散射(IAS)光检测器的一部分上,所述IAS光检测器被定位成当照射液体样品时测量从液体样品发射的中间角度散射,其中掩模至少覆盖IAS光检测器的中心部分,从而阻止衍射图样。
附图说明
并入本文的附图构成本说明书的一部分。与本书面描述一起,附图进一步用于解释所提供的系统和方法的原理并使相关领域技术人员能够制造和使用所提供的系统和方法。在附图中,相同的标号表示相同或功能相似的元件。
图1示出根据一个实施方案的流式细胞仪系统的系统框图。
图2示出根据一个实施方案的垂直和水平方向上的散射光信号的图。
图3示出根据一个实施方案的安置在IAS检测器上的掩模的图。
图4示出根据一个实施方案的带槽的检测器。
具体实施方式
在描述本公开的实施方案之前,应理解,本公开并不限于所述特定实施方案,因为所述实施方案当然可变化。也应理解,本文使用的术语仅用于描述特定实施方案的目的,而不旨在进行限制,因为本公开的实施方案的范围仅由所附权利要求来限定。
本公开一般涉及血液学仪器和检测流式细胞仪中的前向散射。在某些实施方案中,所提供的流式细胞仪系统通常包括:使水动力聚焦的液体样品流过询问区域的流动室;被定位成用光束照射询问区域的光源;和安置于光源和流动室之间的光束成型光学器件。光束成型光学器件操纵光束并创建在询问区域照射液体样品的水平扁平光束轮廓。系统可包括被定位成当照射液体样品时测量从液体样品发射的中间角度散射的中间角度散射(IAS)光检测器。例如液体样品和鞘液之间的折射指数的差异的因素可在IAS检测器产生衍射图样或波纹。平顶光束轮廓(本文也称为“扁平光束轮廓”)也可在IAS检测器创建衍射图样。衍射图样污染散射信号并提供不准确的中间角度散射测量。因此,系统还可包括掩模,所述掩模被水平安置在IAS光检测器的一部分上(across a portion of the IAS lightdetector),在流动室和IAS光检测器之间,并至少覆盖IAS光检测器的中心部分,从而阻止由照射液体样品的扁平光束轮廓产生的水平衍射图样。
本公开包括关于“水平”平顶光束轮廓的实施方案和描述—例如,其中“水平”光束轮廓是平顶轮廓且“垂直”光束轮廓是高斯曲线。应理解,术语“水平”和“垂直”通常用以提供相对轴方向并有助于理解。应理解,本公开的基本概念和原理也适用于其它实施方案,其中“垂直”光束轮廓是平顶轮廓且“水平”光束轮廓是高斯曲线。
图1示出根据一个实施方案的流式细胞仪系统的系统框图。系统100包括:光源101、光束成型光学器件102、聚焦透镜103、流动室104、透镜105、反射镜106、轴向光损失(ALL)检测器107,和IAS检测器108。光源101例如可为激光,并提供进入光束成型光学器件102的激光束,光束成型光学器件102被设置于光源101和流动室104之间。激光束由光束成型光学器件102操纵以提供成形的光束,然后被聚焦透镜103聚焦以命中流动室104的询问区域109。在其它实施方案中,并不包括聚焦透镜103,且光束成型光学器件102单独提供适当成形的光束轮廓到询问区域109上。
在一个实施方案中,光束成型光学器件102操纵光束以创建在询问区域109照射液体样品的水平平顶光束轮廓。光束成型光学器件102例如可包括被配置以在与询问区域109的交叉点产生平顶光束轮廓的透镜的组合。光束成型光学器件102例如可创建具有形状为高斯曲线的垂直光束轮廓和形状为相对扁平轮廓的水平光束轮廓的光束。例如,在一个实施方案中,光束成型光学器件102可包括彼此垂直偏移的圆柱形透镜和非圆柱形透镜,使得产生水平平顶光束轮廓。在另一实施方案中,水平平顶轮廓由光束成型光学器件产生,所述光束成型光学器件包括创建期望轮廓的狭缝/阻塞。水平平顶光束轮廓例如在某些应用中可能是期望的,以提供更宽的流体流。
透镜105和反射镜106被提供在ALL检测器107和IAS检测器108之间。在示出的实施方案中,反射镜106被设置或另外成形(例如,中心具有孔或洞以在ALL检测器107进行轴向光损失检测),以垂直于IAS检测器107反射IAS光,IAS检测器107被定位成接收反射光。应理解,在其它实施方案中,不存在反射镜106且IAS检测器被设置为靠近ALL检测器107(即,并不垂直设置)。
样品流体在流体鞘中被水动力聚焦(例如,注入流体鞘的中心)通过流动室104中的询问区域109。例如,鞘液源可汲取用以水动力聚焦液体样品的鞘液。在一个实施方案中,鞘液是水。来自光束成型光学器件102的聚焦光束以询问区域109为目标并在询问区域109照射液体样品。当感兴趣的样品细胞或粒子拦截光源时,光被散射。散射光进入透镜105并被反射镜106(例如,有孔镜)反射,且被IAS检测器108接收。因此,IAS检测器108可用以当照射液体样品时测量从液体样品发射的中间角度散射。未被感兴趣的细胞或粒子拦截的光通过透镜105到达ALL检测器107。ALL检测器107例如可用以测量轴向光损失。
IAS检测器108用以检测并测量中间角度散射。在一个实施方案中,IAS检测器108包括用以检测中间角度散射的单个检测器。在另一实施方案中,IAS检测器108被分段且包括用作检测各种散射角度的检测端子的多个检测器。散射光的示例性范围是1度到15度,或缩小到2-10度,或3-7度。例如,IAS检测器108可包括多于一个同心安置的检测器环。应理解,在其它实施方案中,多个检测器中的一个或多个检测器可具有环以外的形状。
在一个实施方案中,IAS检测器包括两个同心检测器环。例如,第一同心检测器环可测量2-7度之间的中间角度散射。例如,第二同心检测器环可测量7-11度之间的中间角度散射。应理解,在其它实施方案中,角度范围可变化。
也应理解,也可实施另外的检测器。例如,在一个实施方案中,IAS检测器108包括同心安置在两个或三个同心检测器环(例如上述两个检测器环)的中心中的中心检测器。在一个实施方案中,中心检测器也是同心检测器环。应理解,在其它实施方案中,中心检测器可具有环以外的形状。例如,中心检测器可为圆形、方形、矩形,或其它规则或不规则形状,且可优选为足够大以在流动室中无细胞的情况下容纳整个束斑。在一个实施方案中,中心同心检测器环测量大约2-5度之间的中间角度散射,另一同心检测器环测量大约5-7度之间的中间角度散射,且又一同心检测器环测量大约7-11度之间的中间角度散射。
应理解,在一些实施方案中,检测器的角度范围可重叠。例如,中心同心检测器环可测量大约2-6度之间的中间角度散射,第二同心检测器环可测量大约5-7度之间的中间角度散射,且第三同心检测器环可测量大约6-11度之间的中间角度散射。
在一个实施方案中,图1示出的系统包括掩模110,掩模110被安置成在IAS光检测器108的一部分上,在流动室104和IAS检测器108之间。掩模110被定位在流动室104和IAS光检测器108之间并至少覆盖IAS检测器的中心部分,从而阻止衍射图样。
图2示出根据一个实施方案的垂直和水平方向上的散射光信号的图。在检测器108垂直方向上的散射信号181是高斯曲线且示出为在IAS检测器108的右侧。在检测器108水平方向上的散射信号182示出为在IAS检测器108的底部。水平平顶光束轮廓产生的检测器108处的水平散射信号182被损坏/变形,且包括信号中的水平衍射(或波纹)190。
衍射图样(或波纹)190例如可由鞘液和液体样品之间不匹配的折射指数产生。因此,本公开中提供的系统和方法允许鞘液和液体样品之间存在折射指数的差异,而不会用水平衍射图样损坏中间角度散射的测量。这样,水可用作鞘液,尽管其折射指数与样品流体有差异。样品流体例如可包括血液,血液具有与水不同的折射指数。例如,血液可包括各种细胞,例如红血细胞、白血细胞等,和检测到的其它粒子。在一些实例中,例如,血液可用另一种液体(例如水或稀释剂)来稀释,但仍具有与鞘液的足够的折射指数差异,所述鞘液在散射光的强度轮廓中创建衍射或波纹。
衍射图样也可由光束的扁平光束轮廓产生。例如,光束成型光学器件可包括被配置以在与询问区域的交叉点产生水平平顶光束轮廓的透镜的组合(例如,一个圆柱形透镜和一个非圆柱形透镜)。用以形成扁平光束轮廓的透镜可在IAS检测器处的散射信号中创建水平衍射图样。在一些实例中,平顶光束轮廓可由被设置于激光和询问区域之间的狭缝形成,使得只有光通过狭缝。在所述情况下,衍射图样也从狭缝照明创建且存在于IAS检测器处的散射信号中。
在一个实施方案中,如图3示出,掩模110被水平安置在IAS检测器108的一部分上,从而阻止由水平平顶光束轮廓和鞘液和液体样品之间不匹配的折射指数产生的水平衍射图样。例如,掩模110可被成形为大约矩形,其中纵向轴线水平延伸。
在一个实施方案中,掩模110被安置在IAS检测器108上。应理解,在其它实施方案中,掩模110可不必被安置在IAS检测器上,但足够靠近IAS检测器以准确地阻止预期角度范围的散射光。
掩模110可为足以阻止光被IAS检测器108检测到的任何类型的材料。在一个实施方案中,掩模110是带。在另一实施方案中,掩模110是阻塞棒。阻塞棒可由阻止光的任何各种材料(例如聚合物材料)制成。在又一实施方案中,掩模110是光刻阻塞。在一些实例中,掩模110由反射光并且阻止光的材料制成——例如,镜像或反射材料。
在掩模110被安置在IAS检测器108上的实施方案中,应理解,掩模不应由导电材料制成,以致掩模110将使IAS检测器108的各种检测器短路。
在一个实施方案中,掩模110是呈有孔镜形式的阻塞棒,所述有孔镜被定位成允许测量通过阻塞棒中的中心孔的轴向光损耗,并把中间角度散射从流动室104重定向到IAS检测器108。
在一个实施方案中,阻塞棒被结合有孔镜来实施,所述有孔镜被定位成允许测量通过中心孔的轴向光损耗并重定向中间角度散射。阻塞棒被设置为紧挨有孔镜,在有孔镜和IAS检测器之间,使得反射的中间角度散射的一部分被阻止在IAS检测器的一部分上(例如,在IAS检测器的同心环水平方向上)。
在一个实施方案中,阻塞棒呈带槽镜的形式,所述带槽镜包括反射材料以反射中间角度散射,然而,被开槽以包括没有反射材料的情况,以便不将水平衍射反射到IAS检测器。例如,镜可被成形为具有槽形式的孔或切口,所述孔或切口不在与存在水平衍射的位置相对应的检测器的一部分上反射光。孔或切口可呈矩形槽的形式,例如,延伸穿过通常圆形的镜面(或者通常圆形的镜面的两侧),因此反射中间角度散射,而不在IAS检测器的水平部分(对应于存在水平衍射的位置)上反射光。
图3示出根据一个实施方案的安置在IAS检测器上的掩模的图。如图所示,掩模110被安置在IAS检测器108上。IAS检测器108包括三个同心安置的检测器环201、202和203。在示出的实施方案中,第一同心检测器环201的外径小于4mm;第二同心检测器环的内径和外径分别为大约4mm和7.6mm;且第三同心检测器环的内径和外径分别为大约9.6mm和13mm。
掩模110被水平安置在IAS检测器108的所有三个同心检测器环201、202和203的部分上。这样,水平衍射图样被掩模110阻止而不被三个同心检测器环201、202和203中的任一个检测到。掩模110的尺寸可变化,但应被适当地调整大小以充分阻止水平衍射图样。在一个实施方案中,掩模的宽度约为2mm。在另一实施方案中,掩模的宽度范围是l-5mm。
在本发明的一些方面,提供被成形并被调整大小以接收不包括水平衍射的中间散射范围的IAS检测器。例如,IAS检测器可为带槽的检测器或包括彼此间隔开的两个部分。图4示出根据一个实施方案的带槽的检测器。IAS检测器108被开槽以包括由槽或间隙180隔开的第一半圆形的一半108a和第二半圆形的一半108b。示出的槽或间隙180被在IAS检测器108的中心上水平成形并被调整大小。在IAS检测器108垂直方向上的散射信号181是示出为在IAS检测器108右侧的高斯曲线,且在IAS检测器108水平方向上的散射信号182示出为在IAS检测器108的底部。水平散射信号182被损坏并包括在信号中示出为波纹的水平衍射190。图4的IAS检测器108的配置(其中因为水平衍射落入IAS检测器108的槽180中,所以未检测到水平衍射)因此避免/忽略在IAS检测器108检测水平变形的散射信号。
流式细胞仪系统100可包括未示出的其它光学组件。例如,系统可包括用于检测荧光、偏振侧向散射,和/或去极化侧向散射的透镜和检测器。图1主要示出用于展示前向散射和中间角度散射的组件,且因此不应当被解释为限制性的。
以下段落提供了本公开的系统和方法的另外的示例性实施方案。
如上文所述,在本公开的一些方面中,提供流式细胞仪系统。系统包括使水动力聚焦的液体样品流过询问区域的流动室;被定位成用光束照射询问区域的光源;和安置于光源和流动室之间的光束成型光学器件。光束成型光学器件操纵光束并创建在询问区域照射液体样品的水平扁平光束轮廓。系统包括被定位成当照射液体样品时测量从液体样品发射的中间角度散射的中间角度散射(IAS)光检测器,且还包括掩模,所述掩模被水平安置在IAS光检测器的一部分上,在流动室和IAS光检测器之间,并至少覆盖IAS光检测器的中心部分,从而阻止由照射液体样品的扁平光束轮廓产生的水平衍射图样。
在一个实施方案中,其中光源是激光。在一个实施方案中,系统包括用于汲取用以水动力聚焦液体样品的鞘液的鞘液源。在一些实例中,鞘液是水。在一个实施方案中,掩模选自由以下组成的组:带、阻塞棒和光刻阻塞。在一个实施方案中,掩模是阻塞棒。在一个实施方案中,阻塞棒是有孔镜,所述有孔镜被定位成允许测量通过阻塞棒中的中心孔的轴向光损耗并把中间角度散射从流动室重定向到IAS光检测器。
在一个实施方案中,IAS光检测器还包括两个同心检测器环。在一些实例中,第一检测器环测量约2-7度之间的中间角度散射。在一些实例中,第二检测器环测量约7-11度之间的中间角度散射。
在一个实施方案中,两个同心检测器环包括第一同心检测器环和第二同心检测器环,且IAS光检测器还包括同心安置在第一和第二同心检测器环中的中心检测器环。在一些实例中,第一同心检测器环具有大约4mm的内径和大约7.6mm的外径,且其中第二同心检测器环具有大约9.6mm的内径和大约13mm的外径。
如上文所述,在本公开的一些方面中,提供流式细胞仪系统。系统包括使水动力聚焦的液体样品流过询问区域的流动室;用于汲取用以水动力聚焦液体样品的鞘液的鞘液源;被定位成用光束照射询问区域的光源;和安置于光源和流动室之间的光束成型光学器件。鞘液是水,且光束成型光学器件操纵光束。另外,系统包括被定位成当照射液体样品时测量从液体样品发射的中间角度散射的中间角度散射(IAS)光检测器。此外,系统包括掩模,所述掩模被安置在IAS光检测器的一部分上,在流动室和IAS光检测器之间,并至少覆盖IAS光检测器的中心部分,从而阻止当照射液体样品时由鞘液产生的衍射图样。
在一个实施方案中,光源是激光。在一个实施方案中,光束成型光学器件创建在询问区域照射液体样品的水平扁平光束轮廓。在一个实施方案中,掩模选自由以下组成的组:带、阻塞棒和光刻阻塞。在一个实施方案中,掩模是阻塞棒。在一个实施方案中,阻塞棒是有孔镜,所述有孔镜被定位成允许测量通过阻塞棒中的中心孔的轴向光损耗并把中间角度散射从流动室重定向到IAS光检测器。
在一个实施方案中,IAS光检测器还包括两个同心检测器环。在一些实例中,第一检测器环测量约2-7度之间的中间角度散射。在一些实例中,第二检测器环测量约7-11度之间的中间角度散射。
在一个实施方案中,两个同心检测器环包括第一同心检测器环和第二同心检测器环,且IAS光检测器还包括同心安置在第一和第二同心检测器环中的中心检测器环。在一些实例中,第一同心检测器环具有大约4mm的内径和大约7.6mm的外径,且其中第二同心检测器环具有大约9.6mm的内径和大约13mm的外径。
如上文所述,在本公开的一些方面中,提供了用于阻止由以下产生的衍射图样的系统:(1)照射流式细胞仪液体样品的扁平激光束轮廓或(2)流式细胞仪中鞘液和液体样品之间不匹配的折射指数。系统包括被定位成当照射液体样品时测量从液体样品发射的中间角度散射的中间角度散射(IAS)光检测器,和掩模,所述掩模被安置在IAS光检测器的一部分上并至少覆盖IAS光检测器的中心部分,从而阻止衍射图样。
在一个实施方案中,掩模被水平安置在IAS光检测器上。在一个实施方案中,掩模选自由以下组成的组:带、阻塞棒和光刻阻塞。在一个实施方案中,掩模是阻塞棒。在一个实施方案中,阻塞棒是有孔镜,所述有孔镜被定位成允许测量通过阻塞棒中的中心孔的轴向光损耗并把中间角度散射从流动室重定向到IAS光检测器。
在一个实施方案中,IAS光检测器还包括两个同心检测器环。在一些实例中,第一检测器环测量约2-7度之间的中间角度散射。在一些实例中,第二检测器环测量约7-11度之间的中间角度散射。
在一个实施方案中,两个同心检测器环包括第一同心检测器环和第二同心检测器环,且IAS光检测器还包括同心安置在第一和第二同心检测器环中的中心检测器环。在一些实例中,第一同心检测器环具有大约4mm的内径和大约7.6mm的外径,且其中第二同心检测器环具有大约9.6mm的内径和大约13mm的外径。
在一个实施方案中,提供了流式细胞仪,所述流式细胞仪具有使水动力聚焦的液体样品流过询问区域的流动室;用于汲取用以水动力聚焦液体样品的鞘液的鞘液源;被定位成用光束照射询问区域的光源;和安置于光源和流动室之间的光束成型光学器件。鞘液是水,且光束成型光学器件操纵光束。另外,系统包括被定位成当照射液体样品时测量从液体样品发射的中间角度散射的中间角度散射(IAS)光检测器。此外,系统包括掩模,所述掩模被安置在IAS光检测器的一部分上,在流动室和IAS光检测器之间,并至少覆盖IAS光检测器的中心部分,从而阻止当照射液体样品时由鞘液产生的衍射图样。
在另一实施方案中,提供了用于阻止由以下产生的衍射图样的系统:(1)照射流式细胞仪液体样品的扁平激光束轮廓或(2)流式细胞仪中鞘液和液体样品之间不匹配的折射指数。系统包括被定位成当照射液体样品时测量从液体样品发射的中间角度散射的中间角度散射(IAS)光检测器;和掩模,所述掩模被安置在IAS光检测器的一部分上并至少覆盖IAS光检测器的中心部分,从而阻止衍射图样。
如上文所述,在本公开的一些方面中,提供了用于配置流式细胞仪以阻止由以下产生的衍射图样的方法:(1)照射流式细胞仪液体样品的扁平激光束轮廓,或(2)流式细胞仪中鞘液和液体样品之间不匹配的折射指数。方法包括:把掩模设置在中间角度散射(IAS)光检测器的一部分上,所述IAS光检测器被定位成当照射液体样品时测量从液体样品发射的中间角度散射。掩模至少覆盖IAS光检测器的中心部分,从而阻止衍射图样。
在又一实施方案中,提供了用于配置流式细胞仪以阻止由以下产生的衍射图样的方法:(1)照射流式细胞仪液体样品的扁平激光束轮廓,或(2)流式细胞仪中鞘液和液体样品之间不匹配的折射指数。方法包括:把掩模设置在中间角度散射(IAS)光检测器的一部分上,所述IAS光检测器被定位成当照射液体样品时测量从液体样品发射的中间角度散射。掩模至少覆盖IAS光检测器的中心部分,从而阻止衍射图样。
相关领域技术人员将显而易见本公开范围内的其它实施方案和修改。本公开所针对的本领域技术人员在阅览本说明书之后将易于理解本公开的实施方案可适用的各种修改、流程以及众多结构。本公开的各种方面和特征可能已关于理解、看法、理论、基本假设和/或操作或前瞻性实例进行解释或描述,但应理解,本公开并不受限于任何特定的理解、看法、理论、基本假设和/或操作或前瞻性实例。
应理解,上文介绍的一些技术可由软件和/或固件编程或配置的可编程电路来实施,或者所述技术可完全由专用“硬连线”电路来实施,或由所述形式的组合来实施。所述专用电路(若存在)例如可呈一个或多个专用集成电路(ASICS)、可编程逻辑器件(PLD)、现场可编程门阵列(FPGA)等的形式。
实施本文介绍的技术的软件或固件可被存储在机器可读存储介质上,且可由一个或多个通用或专用的可编程微处理器执行。本文使用的术语“机器可读介质”包括可存储机器可访问形式的信息的任何机制(机器例如可为计算机、网络设备、蜂窝电话、个人数字助理(PDA)、制造工具、具有一个或多个处理器的任何设备等)。例如,机器可访问介质包括可记录/不可记录介质(例如,只读储存器(ROM);随机存取储存器(RAM);磁盘存储介质;光存储介质;闪存设备等)等。
提出以上实例以向本领域普通技术人员提供怎样制造并使用本发明的实施方案的完整的公开内容和描述,且非旨在限制发明人认为是其发明的范围,也不旨在表示以下实验是所有执行的实验或只是执行的实验。已努力确保所用数字(例如,数量、温度等)的准确性,但一些实验误差和偏差应予以考虑。除非另有说明,否则份数是重量份数,分子量是重量平均分子量,温度是摄氏度,且压力是大气压或接近大气压。
在提供数值范围的情况下,应理解,除非上下文另有明确说明,否则也具体公开在所述范围的上限和下限之间的每个居间值(至下限单位的十分之一)。本公开中包括所述范围中的任何所述值或居间值和所述范围中的任何其它所述值或居间值之间的每个更小的范围。这些较小范围的上限和下限可被独立地包括在范围内或被排除在范围之外,且其中上限和下限中任一个、无任何一个或两者被包括在较小范围中的每个范围也被包括在本公开中,受限于所述范围中任何具体排除的限制。在所述范围包括上限和下限中一者或两者的情况下,不包括这些包括的上限和下限中一者或两者的范围也被包括在本公开中。
在本公开的描述中,应理解,单数形式的词语包含其复数对应物,而复数形式的词语包含其单数对应物,除非另外隐含或明确地理解或说明。另外,应理解,对于本文所述的任何给定组件,列出作为所述组件的任何可能的候选物或替代物可通常单独使用或彼此组合使用,除非另外隐含或明确地理解或说明。另外,应理解,所述候选物或替代物的任何列表仅是说明性的,而非限制性的,除非另外隐含或明确地理解或说明。
下文描述了各种术语以有助于理解本公开。应理解,这些各种术语的对应描述适用于这些各种术语的对应的语言或语法变体或形式。也应理解,本公开不限于用于描述特定实施方案的本文使用的术语或其描述。本文所讨论的公开案仅为在申请的申请日之前公开而提供。本文中任何内容不应被理解为承认本公开的实施方案无权由于在先发明而先于所述公开案。另外,所提供的公开案的日期可能与可能需要单独确认的实际的公开日期不同。
Claims (35)
1.一种流式细胞仪系统,其包括:
流动室,其使水动力聚焦的液体样品流过询问区域;
光源,其被定位成用光束照射所述询问区域;
多个光束成型光学器件,其被安置于所述光源和所述流动室之间,其中所述光束成型光学器件操纵所述光束并创建在所述询问区域照射所述液体样品的水平扁平光束轮廓;
中间角度散射光检测器,其被定位成当照射所述液体样品时测量从所述液体样品发射的中间角度散射;和
掩模,其被水平安置在所述中间角度散射光检测器的一部分上且被定位于所述流动室和所述中间角度散射光检测器之间以至少覆盖所述中间角度散射光检测器的中心部分,从而阻止由照射所述液体样品的所述扁平光束轮廓产生的水平衍射图样,同时允许中间角度散射被所述中间角度散射光检测器检测到,其中,所述掩模包括中心孔,其被定位成允许测量通过所述中心孔的一个或多个轴向光损失。
2.如权利要求1所述的流式细胞仪,其中所述光源是激光。
3.如前述权利要求中任一项所述的流式细胞仪,其还包括用于汲取鞘液的鞘液源,所述鞘液用以水动力聚焦所述液体样品。
4.如权利要求3所述的流式细胞仪,其中所述鞘液是水。
5.如权利要求1或2所述的流式细胞仪,其中所述掩模为包括塞孔的阻塞棒。
6.如权利要求1或2所述的流式细胞仪,其中所述中间角度散射光检测器包括多于一个同心安置的检测器环。
7.如权利要求6所述的流式细胞仪,其中第一检测器环测量2-7度的中间角度散射。
8.如权利要求7所述的流式细胞仪,其中第二检测器环测量7-11度之间的中间角度散射。
9.如权利要求6所述的流式细胞仪,包括第一同心检测器环和第二同心检测器环,其中所述中间角度散射光检测器还包括同心安置在所述第一和第二同心检测器环中的中心检测器环。
10.如权利要求9所述的流式细胞仪,其中所述第一同心检测器环具有大约4mm的内径和大约7.6mm的外径,且其中所述第二同心检测器环具有大约9.6mm的内径和大约13mm的外径。
11.如权利要求1所述的流式细胞仪,包括单个中间角度散射光检测器。
12.如权利要求5所述的流式细胞仪,其中所述阻塞棒是有孔镜,所述有孔镜被定位成允许测量通过所述阻塞物中的中心孔的轴向光损耗并把中间角度散射从所述流动室重定向到所述中间角度散射光检测器。
13.一种流式细胞仪系统,其包括:
流动室,其使水动力聚焦的液体样品流过询问区域;
鞘液源,其用于汲取用以水动力聚焦所述液体样品的鞘液,其中所述鞘液是水;
光源,其被定位成用光束照射所述询问区域;
多个光束成型光学器件,其被安置于所述光源和所述流动室之间,其中所述光束成型光学器件操纵所述光束;
中间角度散射光检测器,其被定位成当照射所述液体样品时测量从所述液体样品发射的中间角度散射;和
掩模,其被安置在所述中间角度散射光检测器的一部分上且被定位在所述流动室和所述中间角度散射光检测器之间以至少覆盖所述中间角度散射光检测器的中心部分,从而阻止当照射所述液体样品时由所述鞘液产生的衍射图样,同时允许中间角度散射被所述中间角度散射光检测器检测到,其中,所述掩模包括中心孔,其被定位成允许测量通过所述中心孔的一个或多个轴向光损失。
14.如权利要求13所述的流式细胞仪,其中所述光源是激光。
15.如权利要求13-14中任一项所述的流式细胞仪,其中所述多个光束成型光学器件创建在所述询问区域照射所述液体样品的水平扁平光束轮廓。
16.如权利要求13或14所述的流式细胞仪,其中所述掩模为包括塞孔的阻塞棒。
17.如权利要求13或14所述的流式细胞仪,其中所述中间角度散射光检测器包括多于一个同心安置的检测器环。
18.如权利要求17所述的流式细胞仪,其中第一检测器环测量2-7度之间的中间角度散射。
19.如权利要求18所述的流式细胞仪,其中第二检测器环测量7-11度之间的中间角度散射。
20.如权利要求17所述的流式细胞仪,包括第一同心检测器环和第二同心检测器环,其中所述中间角度散射光检测器还包括同心安置在所述第一和第二同心检测器环中的中心检测器环。
21.如权利要求20所述的流式细胞仪,其中所述第一同心检测器环具有大约4mm的内径和大约7.6mm的外径,且其中所述第二同心检测器环具有大约9.6mm的内径和大约13mm的外径。
22.如权利要求13所述的流式细胞仪,包括单个中间角度散射光检测器。
23.如权利要求16所述的流式细胞仪,其中所述阻塞棒是有孔镜,所述有孔镜被定位成允许测量通过所述阻塞物中的中心孔的轴向光损耗并把中间角度散射从所述流动室重定向到所述中间角度散射光检测器。
24.一种用于阻止由以下产生的衍射图样的系统:(1)照射流式细胞仪液体样品的扁平激光束轮廓,或(2)流式细胞仪中鞘液和液体样品之间不匹配的折射指数,所述系统包括:
中间角度散射光检测器,其被定位成当照射所述液体样品时测量从所述液体样品发射的中间角度散射;和
掩模,其被安置在所述中间角度散射光检测器的一部分上并至少覆盖所述中间角度散射光检测器的中心部分,从而阻止衍射图样,同时允许中间角度散射被所述中间角度散射光检测器检测到,其中,所述掩模包括中心孔,其被定位成允许测量通过所述中心孔的一个或多个轴向光损失。
25.如权利要求24所述的系统,其中所述掩模被水平安置在所述中间角度散射光检测器上。
26.如权利要求24-25中任一项所述的系统,其中所述掩模为包括塞孔的阻塞棒。
27.如权利要求24或25所述的系统,其中所述中间角度散射光检测器包括多于一个同心安置的检测器环。
28.如权利要求27所述的系统,其中第一检测器环测量2-7度之间的中间角度散射。
29.如权利要求28所述的系统,其中第二检测器环测量7-11度之间的中间角度散射。
30.如权利要求27所述的系统,包括第一同心检测器环和第二同心检测器环,且其中所述中间角度散射光检测器还包括同心安置在所述第一和第二同心检测器环中的中心检测器环。
31.如权利要求30所述的系统,其中所述第一同心检测器环具有大约4mm的内径和大约7.6mm的外径,且其中所述第二同心检测器环具有大约9.6mm的内径和大约13mm的外径。
32.如权利要求24所述的系统,包括单个中间角度散射光检测器。
33.如权利要求26所述的系统,其中所述阻塞棒是有孔镜,所述有孔镜被定位成允许测量通过所述阻塞物中的中心孔的轴向光损耗并把中间角度散射重定向到所述中间角度散射光检测器。
34.一种用于配置流式细胞仪以阻止由以下产生的衍射图样的方法:(1)照射流式细胞仪液体样品的扁平激光束轮廓,或(2)流式细胞仪中鞘液和液体样品之间不匹配的折射指数,所述方法包括:
把掩模定位成在中间角度散射光检测器的一部分上,所述中间角度散射光检测器被定位成当照射所述液体样品时测量从所述液体样品发射的中间角度散射,其中所述掩模至少覆盖所述中间角度散射光检测器的中心部分,从而阻止衍射图样,同时允许中间角度散射被所述中间角度散射光检测器检测到,并且,所述掩模包括中心孔,其被定位成允许测量通过所述中心孔的一个或多个轴向光损失。
35.如权利要求34所述的方法,其中所述流式细胞仪包括单个中间角度散射光检测器。
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