CN115895966A - 一株辅助缓解痛风的两歧双歧杆菌bl002及其应用 - Google Patents

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CN115895966A CN202211521928.5A CN202211521928A CN115895966A CN 115895966 A CN115895966 A CN 115895966A CN 202211521928 A CN202211521928 A CN 202211521928A CN 115895966 A CN115895966 A CN 115895966A
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Abstract

本发明属于微生物保藏及发酵工程技术领域，公开了一株辅助缓解痛风的两歧双歧杆菌BL002及其应用，该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期是2021年10月25日，保藏编号是CGMCC No.23664，拉丁文名称为Bifidobacterium bifidum。本发明提供的一株辅助缓解痛风的两歧双歧杆菌BL002具有突出的消化道环境耐受特性，能够同时降糖、降脂，尤其降尿酸功能显著，利用该菌株制得的保健食品及益生菌粉用于辅助缓解痛风及高尿酸血症。

Description

一株辅助缓解痛风的两歧双歧杆菌BL002及其应用
技术领域
本发明属于微生物保藏及发酵工程技术领域，涉及双歧杆菌，具体地说是一株辅助缓解痛风的两歧双歧杆菌BL002及其应用。
背景技术
双歧杆菌属细菌为革兰氏阳性菌，具有不运动、细胞呈杆状、一端有时呈分叉状及严格厌氧等特性，广泛存在于人和动物的消化道、阴道和口腔等环境中。分离所得的双歧杆菌菌株可用作益生菌，在食品、医药和饲料等方面均有应用，尤其从母乳喂养婴儿粪便中分离出的双歧杆菌，在维持正常肠道菌群平衡、抑制病原菌生长及缓解消化不良等方面作用效果突出，对于新药物、新功能食品的开发有重要意义。
目前，分离所得的双歧杆菌菌株及应用主要围绕促进肠道健康，缓解便秘、腹泻等问题。例如，公开号为CN112694992A的中国发明专利申请，公开了一株可显著缓解腹泻的两歧双歧杆菌；公开号为CN114127258A的中国发明专利申请，公开了两歧双歧杆菌菌株在治疗功能性胃肠道病症方面的应用；公开号为CN112458016B的中国发明专利申请，公开了具有乳品发酵、调节肠道菌群平衡、治疗或缓解抑郁症功效的两歧双歧杆菌菌株。但上述双歧杆菌属菌株的应用多局限于促进肠道健康领域，在降糖、降脂，尤其降尿酸方面不具有突出效果。
随着生活水平提高，高血糖、高血脂、高尿酸等疾病的发病率越来越高，伴随社会老龄化加快，筛选在这些领域有突出效果的菌株将有着广阔的应用前景。
发明内容
本发明的一个目的，是要提供一株辅助缓解痛风的两歧双歧杆菌BL002，以解决现有两歧双歧杆菌在降糖、降脂，尤其降尿酸方面不具有突出效果的问题；
本发明的另一个目的，是要提供上述两歧双歧杆菌BL002的应用。
为了实现上述目的，本发明采用的技术方案是：
一株辅助缓解痛风的两歧双歧杆菌BL002，该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期是2021年10月25日，保藏编号是CGMCC No.23664，拉丁文名称为Bifidobacterium bifidum。
其16S rDNA序列为：
GGGGGGGCGGCTACATGCAGTCGACGGGATCCATCGGGCTTTGCTTGGTGGTGAGAGTGGCGAACGGGTGAGTAATGCGTGACCGACCTGCCCCATGCTCCGGAATAGCTCCTGGAAACGGGTGGTAATGCCGGATGTTCCACATGATCGCATGTGATTGTGGGAAAGATTCTATCGGCGTGGGATGGGGTCGCGTCCTATCAGCTTGTTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCTTCGACGGGTAGCCGGCCTGAGAGGGCGACCGGCCACATTGGGACTGAGATACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGCACAATGGGCGCAAGCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGGGATGGAGGCCTTCGGGTTGTAAACCTCTTTTGTTTGGGAGCAAGCCTTCGGGTGAGTGTACCTTTCGAATAAGCGCCGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGGCGCAAGCGTTATCCGGATTTATTGGGCGTAAAGGGCTCGTAGGCGGCTCGTCGCGTCCGGTGTGAAAGTCCATCGCTTAACGGTGGATCTGCGCCGGGTACGGGCGGGCTGGAGTGCGGTAGGGGAGACTGGAATTCCCGGTGTAACGGTGGAATGTGTAGATATCGGGAAGAACACCGATGGCGAAGGCAGGTCTCTGGGCCGTCACTGACGCTGAGGAGCGAAAGCGTGGGGAGCGAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGGTGGACGCTGGATGTGGGGGCACGTTCCACGTGTTCCGTGTCGGAGCTAACGCGTTAAGCGTCCCGCCTGGGGAGTACGGCCG CAAGGCTAAAACTCAAGAAATTGACGGGGGGGCCCGCACAAGCGGCGGAGCATGCGGATTAATTCGATGCAACGCGAGAGCCTTACCTGGGGCTTGGACATGTTTCACCGGACGGAACCGCCTAGGCAGGA。
本发明还提供了辅助缓解痛风的两歧双歧杆菌的一种应用，所述两歧双歧杆菌BL002用于制备食品。
作为一种限定，所述食品为固体饮料。将辅助缓解痛风的两歧双歧杆菌用作益生菌，制冻干菌粉后用于制备固体饮料。
本发明还提供了上述辅助缓解痛风的两歧双歧杆菌在制备缓解痛风症状的益生菌粉中的应用。
由于采用了上述技术方案，本发明与现有技术相比，所取得的技术进步在于：
本发明提供的辅助缓解痛风的两歧双歧杆菌BL002，能够耐受一定程度胃酸和胆盐环境胁迫，具有突出的消化道环境耐受特性，为利用该菌株生产口服产品奠定基础；
辅助缓解痛风的两歧双歧杆菌BL002菌株能够同时降糖、降脂，尤其通过对比实验，表明相较于长双歧杆菌、短双歧杆菌及乳双歧杆菌等双歧杆菌属或其它亲源属的菌株，本发明筛得的辅助缓解痛风的两歧双歧杆菌BL002降尿酸功能更显著，利用该菌株制得的益生菌粉用于辅助缓解痛风效果也突出；
辅助缓解痛风的两歧双歧杆菌BL002菌株筛选自母乳喂养的健康婴幼儿新鲜粪便样品，用于制备益生菌产品安全性高；
本发明提供的辅助缓解痛风的两歧双歧杆菌BL002具有较高的工业应用潜力，尤其是在降尿酸方面表现出良好的效果，可应用于降尿酸功能益生菌产品制备。
附图说明
图1～图6均为本发明实施例6中临床试验证明报告图。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明作进一步详细说明，应当理解，所描述的实施例仅用于解释本发明，并不限定本发明。
实施例1辅助缓解痛风的两歧双歧杆菌BL002的筛选与鉴定
(1)菌株的分离筛选
从河北省石家庄市收集采用母乳方式喂养的健康婴幼儿的新鲜粪便，挑取粪便样品，采用双歧杆菌固体分离培养基(MRS培养基中加入200mg/L诺氟沙星、100mg/L莫匹罗星和1ml/L冰醋酸)厌氧条件下培养72h进行菌株分离，挑取单菌落，培养至菌株纯化。经过氧化氢酶实验、明胶液化实验、运动性实验、氧化酶实验、吲哚实验、硝酸盐还原实验，选择过氧化氢酶、明胶液化、氧化酶实验、吲哚和硝酸盐实验结果均为阴性的菌株，共筛选得16株菌株，分别编号为BL001、BL002、BL003、BL004、BL005、BL006、BL007、BL008、BL009、BL010、BL011、BL012、BL013、BL014、BL015和BL016。将菌株冻存于-18℃冰箱备用。
(2)菌株的鉴定
A1)形态鉴定
将上述16株菌株接种到营养琼脂平板划线培养，观察菌落边缘特征、透明度、隆起形状、光泽度、颜色、形态、大小，并进行革兰氏染色，在显微镜下观察其状态，结合革兰氏染色结果初步确认16株菌株均为双歧杆菌。
A2)体外降尿酸特性鉴定
实验方法：
将16株双歧杆菌接种至cMRS液体培养基(MRS培养基中加入0.05％半胱氨酸盐酸盐)活化一代后，按1％接种量重新接种于cMRS液体培养基中，37℃培养24h，取2mL培养液，于4℃、5000r/min离心10min，菌体使用0.85％灭菌生理盐水重复洗涤3次，将洗涤后的菌体重悬于750μL浓度为0.2g/L的尿酸-中性磷酸钾溶液(20mg尿酸，用100mL磷酸钾缓冲液溶解)中，37℃、120rpm下培养60min；将所得反应液在4℃、5000r/min离心10min，收集上清液，采用尿酸测定试剂盒进行尿酸含量测定，计算尿酸含量；
按照下列公式计算16株双歧杆菌对尿酸的降解率：
尿酸降解率(％)＝(A-B)/A×100％
式中，A为尿酸-中性磷酸钾溶液中尿酸含量；B为双歧杆菌作用后的尿酸含量，结果如表1所示：
表1尿酸降解率结果表
Figure BDA0003971418180000051
由表1可知，16株菌中BL002对尿酸降解明显作用，其他菌株对尿酸均无明显降解作用。
A3)分子鉴定
委托上海生物工程股份有限公司进行菌株BL002的分子鉴定，经测序，菌株BL002的16S rDNA序列如下：
GGGGGGGCGGCTACATGCAGTCGACGGGATCCATCGGGCTTTGCTTG
GTGGTGAGAGTGGCGAACGGGTGAGTAATGCGTGACCGACCTGCCCCAT
GCTCCGGAATAGCTCCTGGAAACGGGTGGTAATGCCGGATGTTCCACATG
ATCGCATGTGATTGTGGGAAAGATTCTATCGGCGTGGGATGGGGTCGCGT
CCTATCAGCTTGTTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCTTCGACGGGTAG
CCGGCCTGAGAGGGCGACCGGCCACATTGGGACTGAGATACGGCCCAGA
CTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGCACAATGGGCGCAAGCCT
GATGCAGCGACGCCGCGTGAGGGATGGAGGCCTTCGGGTTGTAAACCTC
TTTTGTTTGGGAGCAAGCCTTCGGGTGAGTGTACCTTTCGAATAAGCGCC
GGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGGCGCAAGCGTTAT
CCGGATTTATTGGGCGTAAAGGGCTCGTAGGCGGCTCGTCGCGTCCGGTG
TGAAAGTCCATCGCTTAACGGTGGATCTGCGCCGGGTACGGGCGGGCTGG
AGTGCGGTAGGGGAGACTGGAATTCCCGGTGTAACGGTGGAATGTGTAGA
TATCGGGAAGAACACCGATGGCGAAGGCAGGTCTCTGGGCCGTCACTGA
CGCTGAGGAGCGAAAGCGTGGGGAGCGAACAGGATTAGATACCCTGGTA
GTCCACGCCGTAAACGGTGGACGCTGGATGTGGGGGCACGTTCCACGTG
TTCCGTGTCGGAGCTAACGCGTTAAGCGTCCCGCCTGGGGAGTACGGCCG
CAAGGCTAAAACTCAAGAAATTGACGGGGGGGCCCGCACAAGCGGCGG
AGCATGCGGATTAATTCGATGCAACGCGAGAGCCTTACCTGGGGCTTGGA
CATGTTTCACCGGACGGAACCGCCTAGGCAGGA。
利用NCBI进行BLAST分析比对，根据同源性与标准菌株序列比对，确认菌株BL002为两歧双歧杆菌。
综合菌株BL002的16S rDNA序列比对结果、生理生化特性以及形态特征，鉴定该菌株为两歧双歧杆菌BL002，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期是2021年10月25日，保藏编号是CGMCCNo.23664，拉丁文名称为Bifidobacterium bifidum。
将两歧双歧杆菌BL002，命名为：辅助缓解痛风的两歧双歧杆菌BL002。
实施例2两歧双歧杆菌BL002的培养方法
取实施例1所得的两歧双歧杆菌BL002自然溶解，以100μL接种量接种到10mL灭菌的cMRS培养基中，37℃厌氧培养24h后即获得一代种子；一代种子以3％接种量接种到灭菌的cMRS培养基中，37℃厌氧培养12h后即获得二代种子；二代种子用于菌株特性研究或作为益生菌用于制备固体饮料食品。
实施例3两歧双歧杆菌BL002的消化道环境耐受特性
(一)耐胃酸特性
(11)实验方法
人工胃液制备：取10％的盐酸加去离子水稀释，分别调节pH为2.0、3.0、4.0，分别加入胃蛋白酶(终浓度为1％)，再分别用盐酸调整溶液的pH为2.0、3.0、4.0，经0.22μm的微孔滤膜过滤后备用。
双歧杆菌活化：取二代种子，以8000r/min离心10min得菌体，加入0.85％的生理盐水清洗3遍，制备成菌悬液。
取0.5mL菌悬液与4.5mL的不同pH值的人工胃液混合，于37℃培养箱中静置培养，分别于2h、4h后取样，稀释涂布平板后37℃培养48h，测定活菌数。以未经人工胃液处理的菌悬液作对照，经检测对照组活菌数为1.37×107CFU/mL。
存活率计算公式：存活率＝Na/N×100％；
式中，N为未经人工胃液处理的双歧杆菌活菌数(CFU/mL)；
Na为经过人工胃液处理的双歧杆菌活菌数(CFU/mL)。
(12)实验结果
人工胃液存活率检测结果见表2：
表2人工胃液存活率检测结果表
Figure BDA0003971418180000081
由上表可看出：随着人工胃液pH的升高，两歧双歧杆菌BL002存活率增加，在胃液pH为2.0时，存活率在5％左右；在人工胃液pH为3.0时，存活率超过50％；在人工胃液pH为4.0时，存活率在96.35％；在相同pH条件下，随着时间的延长，两歧双歧杆菌BL002的存活率略有下降。
(二)耐胆盐特性
(21)实验方法
胆盐配制：配制含胆盐浓度分别为0.1％、0.2％和0.3％的MRS培养基。
按2％的接种量将培养好的双歧杆菌二代种子分别接入含不同浓度胆盐的培养基中，37℃培养2h、4h后取样，梯度稀释，涂布MRS-L-半胱氨酸盐酸盐平板，37℃厌氧培养48h，测定活菌数。以未经胆盐处理的平板作对照，经检测对照组活菌数为1.66×106CFU/mL。存活率计算方式参照(一)中存活率计算方式。
(22)实验结果
耐胆盐存活率检测结果见表3：
表3耐胆盐存活率检测结果表
Figure BDA0003971418180000091
由表3可看出：两歧双歧杆菌BL002随着胆盐浓度的升高，两歧双歧杆菌BL002存活率降低，在胆盐浓度为0.1％时，存活率好，随着时间的延长存活率逐步升高，在4h时存活率为63.86％；在胆盐浓度为0.2％时，存活率下降为25.6％；在胆盐浓度为0.3％时，两歧双歧杆菌BL002存活率为5％左右且存活率随着时间延长而缓慢升高。
综上，本实施例的两歧双歧杆菌BL002具有良好的消化道环境耐受特性，因此可作为益生菌用于制备饼干、糕点、口服液、冲剂、饮料、液体乳或奶粉等食品或保健食品，尤其可用于制备固体饮料。
实施例4两歧双歧杆菌BL002的降糖、降脂特性
(I)对α-淀粉酶的抑制性
分别吸取发酵乳杆菌LF028上清液和菌悬液200μL，加入0.05mg/ml的α-淀粉酶100μL，混匀后于37℃保温10min；再加入0.1％淀粉溶液625μL，37℃反应15min；加入300μL浓度为1.0mol/L的HCl终止反应，然后加入200μL浓度为0.01mol/L的碘液显色；加蒸馏水定容至5mL，在波长660nm下测吸光度A，计算α-淀粉酶抑制率。
α-淀粉酶抑制率(％)＝[1-(ODA-ODB)/(ODC-ODD)]×100％
上述式中，ODA为含有样品和α-淀粉酶的吸光值；ODB为不含α-淀粉酶，只含有样品的吸光值；ODC为含有α-淀粉酶但不含样品的吸光值；ODD为既不含α-淀粉酶，也不含样品的吸光值。结果如表4：
表4对α-淀粉酶的抑制率结果表
组别 上清液 菌悬液
ODA 0.5761 0.8797
ODB 0.4123 0.0562
ODC 0.8827 0.8827
ODD 0.0548 0.0548
抑制率(％) 80.21±0.40 0.52±0.02
由表4可知：两歧双歧杆菌BL002上清液对α-淀粉酶的抑制率达到80.21％，菌悬液对α-淀粉酶的抑制率低；结果表明，两歧双歧杆菌BL002代谢产物能有效的抑制α-淀粉酶。
(II)对α-葡萄糖苷酶的抑制
分别吸取发酵乳杆菌LF028上清液和菌悬液100μL，加入20U/mL的α-葡萄糖苷酶溶液100μL，二者置于试管，混合后于37℃保温10min；每个试管再加入20mmol/L的对硝基苯酚α-D-吡喃葡萄糖苷溶液100μL，在37℃中反应20min；每个试管中均加入1mL的NaCO3(0.2mol/L)，终止反应；每个试管中均加入1mL的NaCO3(0.2mol/L)，终止反应。α-葡萄糖苷酶的抑制率计算方式参考(I)中方法，
α-葡萄糖苷酶抑制率(％)＝[1-(ODE-ODF)/(ODG-ODH]×100％
上述式中，ODE为含有样品和α-葡萄糖苷酶的吸光值；ODF为不含α-葡萄糖苷酶，只含有样品的吸光值；ODG为含有α-葡萄糖苷酶但不含样品的吸光值；ODH为既不含α-葡萄糖苷酶，也不含样品的吸光值。结果如表5：
表5对α-葡萄糖苷酶的抑制率结果表
组别 上清液 菌悬液
ODE 0.3614 0.2652
ODF 0.3292 0.2512
ODG 0.2695 0.2695
ODH 0.1534 0.1534
抑制率(％) 72.26±0.36 87.94±0.43
由表5可知：两歧双歧杆菌BL002上清液和菌悬液对α-葡萄糖苷酶的抑制率分别达到72.26％和87.94％，表明两歧双歧杆菌BL002能有效的抑制α-葡萄糖苷酶活性。
(III)甘油三酯降解能力检测
甘油三酯-MRS液体培养基制备：将甘油三酯(含量为2％)加入50mL容量瓶中，无水乙醇定容，超声波溶解30min后用0.45μm微孔滤膜过滤，吸取0.5mL上述滤液至9.5mL的液体MRS培养基中，得甘油三酯-MRS液体培养基。
甘油三酯降解率计算：将活化好的二代种子按2％的接种量接种至甘油三酯-MRS液体培养基中(活菌数为1×108CFU/mL)。37℃厌氧培养12h、24h及36h时，取培养液在6000r/min离心10min，取上清加入无水乙醇混匀，静置5min后10000r/min离心10min，取上清按甘油三酯试剂盒进行降解率测定，以未接菌的甘油三酯-MRS液体培养基作对照，根据以下公式计算：
甘油三酯降解率(％)＝(A-B)/A×100％
式中：A为未接菌时上清液的吸光值；B为接菌后上清液吸光值。
结果如表6：
表6甘油三酯降解率结果表
测定时间(h) 降解率(％)
12 55.01±4.40
24 88.23±7.43
36 92.19±8.01
由表6可知：两歧双歧杆菌BL002对甘油三酯的降解率随着时间的延长达到92.19％，表明此菌株能很好的清除甘油三酯。
实施例5两歧双歧杆菌BL002的体外降尿酸特性
一)体外尿酸降解特性
参照实施例1中“A2)体外降尿酸特性鉴定”对于尿酸降解率的计算方法，通过对比两歧双歧杆菌BL002、市售的长双歧杆菌CECT7894、市售的短双歧杆菌M-16V及市售的乳双歧杆菌Bi-07的体外尿酸降解率，验证两歧双歧杆菌BL002对于尿酸的高效降解功能。尿酸降解率结果如表7：
表7尿酸降解率结果表
Figure BDA0003971418180000131
由表7可知：两歧双歧杆菌BL002在尿酸降解中能发挥有效作用，1小时内对尿酸的降解率达到22.45％，而长双歧杆菌CECT7894、短双歧杆菌M-16V、乳双歧杆菌Bi-07在尿酸降解中未能明显表现出此方面功能。
二)体内高尿酸血症干预效果
通过构建高尿酸血症模型大鼠验证两歧双歧杆菌BL002对高尿酸血症干预效果。
实验方案：选取纯种健康3周周龄，体重60±10g的SD雄性大鼠50只，适应饲养7天后，随机分为正常组、模型组、阳性对照组、低剂量组、高剂量组，每组10只，第8天开始至动物实验结束，对模型组、阳性对照组、低剂量组和高剂量组饲喂高嘌呤定殖鼠粮，并按照体重标准腹腔注射氧嗪酸钾—羧甲基纤维素钠悬液1ml，正常组提供普通鼠粮；所有大鼠均自由饮水；持续7天后分别收集所有大鼠的尾静脉血液，采用上海臻科生物科技有限公司尿酸检测试剂盒测定血清尿酸含量，确保获得稳定高尿酸血症动物模型。
第15天开始，对模型组按照灌胃标准对每只大鼠进行灌胃生理盐水1ml；阳性对照组，按照灌胃标准对每只大鼠进行灌胃别嘌呤醇—羧甲基纤维素钠悬液治疗；低剂量组，按照灌胃标准对每只大鼠每天进行灌胃1ml的5×109CFU/mL的两歧双歧杆菌BL002进行治疗；高剂量组，按照灌胃标准对每只大鼠每天进行灌胃1ml的5×1010CFU/mL的两歧双歧杆菌BL002进行治疗；各组灌胃持续7天后收集所有大鼠的尾静脉血液，测定血清尿酸含量。结果如表8：
表8血清尿酸含量检测结果表
Figure BDA0003971418180000141
由表8可知：本实施例的两歧双歧杆菌BL002可显著改善高尿酸血症模型大鼠的血清尿酸水平，相较于模型组，低剂量组血清尿酸降低了约90.24μmol/L，高剂量组血清尿酸降低了约138.01μmol/L，高剂量组与阳性对照组血清尿酸值相差约37.68μmol/L。
实施例6两歧双歧杆菌BL002在制备缓解痛风症状的益生菌粉中的应用一、制备缓解痛风症状的益生菌粉：
取两歧双歧杆菌BL002接种于cMRS培养基中37℃厌氧培养，活化两代后，以3％接种量接种于5L含cMRS培养基发酵罐，37℃厌氧培养12h后，离心收集菌体，添加甘油保护剂，冷冻干燥，得两歧双歧杆菌BL002冻干菌粉；两歧双歧杆菌BL002冻干菌粉经活菌检测后配制成活菌数为1.5×1010/g，分装成每袋2g，即为缓解痛风症状的益生菌粉。
上述冻干菌粉还可按照现有技术的常规操作用于制备固体饮料。二、人群试服研究：
征集尿酸含量高、有痛风症状、生活饮食忌口的痛风患者，进行临床试验，检测采用两歧双歧杆菌BL002制得的缓解痛风症状的益生菌粉的效果，临床试验证明报告见图1～6；
服用方法：每次服用2g活菌数为1.5×1010/g的缓解痛风症状的益生菌粉，每日2次，饭后半小时内温水冲服，服用7天、14天后采用尿酸酶法测定血清中尿酸值变化，其结果见表9：
表9痛风患者试服调查表
Figure BDA0003971418180000151
Figure BDA0003971418180000161
Figure BDA0003971418180000171
通过上述人群试服结果可知，利用辅助缓解痛风的两歧双歧杆菌BL002制备得到的缓解痛风症状的益生菌粉，可降低尿酸水平，缓解痛风症状，服用辅助缓解痛风的两歧双歧杆菌BL002益生菌粉后，患者痛风症状得到缓解，尿酸值均有下降，饮食现状得到改善，患者心理、情绪转变很大，生活质量得到提高。
需要说明的是，上述实施例仅是本发明的较佳实施例，并非是对本发明所作的其他形式的限定，任何熟悉本专业的技术人员都可能利用上述技术内容作为启示，加以变更或改型为等同变化的等效实施例，但凡是未脱离本发明权利要求的技术实质，对以上实施例所作出的简单修改、等同变化与改型，仍属于本发明权利要求保护的范围。

Claims (5)

1.一株辅助缓解痛风的两歧双歧杆菌BL002，其特征在于，该菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址是北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期是2021年10月25日，保藏编号是CGMCC No. 23664，拉丁文名称为Bifidobacterium bifidum。
2.根据权利要求1所述的一株辅助缓解痛风的两歧双歧杆菌BL002，其特征在于，其16SrDNA序列为：
GGGGGGGCGGCTACATGCAGTCGACGGGATCCATCGGGCTTTGCTTGGTGGTGAGAGTGGCGAACGGGTGAGTAATGCGTGACCGACCTGCCCCATGCTCCGGAATAGCTCCTGGAAACGGGTGGTAATGCCGGATGTTCCACATGATCGCATGTGATTGTGGGAAAGATTCTATCGGCGTGGGATGGGGTCGCGTCCTATCAGCTTGTTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCTTCGACGGGTAGCCGGCCTGAGAGGGCGACCGGCCACATTGGGACTGAGATACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATATTGCACAATGGGCGCAAGCCTGATGCAGCGACGCCGCGTGAGGGATGGAGGCCTTCGGGTTGTAAACCTCTTTTGTTTGGGAGCAAGCCTTCGGGTGAGTGTACCTTTCGAATAAGCGCCGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGGCGCAAGCGTTATCCGGATTTATTGGGCGTAAAGGGCTCGTAGGCGGCTCGTCGCGTCCGGTGTGAAAGTCCATCGCTTAACGGTGGATCTGCGCCGGGTACGGGCGGGCTGGAGTGCGGTAGGGGAGACTGGAATTCCCGGTGTAACGGTGGAATGTGTAGATATCGGGAAGAACACCGATGGCGAAGGCAGGTCTCTGGGCCGTCACTGACGCTGAGGAGCGAAAGCGTGGGGAGCGAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGGTGGACGCTGGATGTGGGGGCACGTTCCACGTGTTCCGTGTCGGAGCTAACGCGTTAAGCGTCCCGCCTGGGGAGTACGGCCGCAAGGCTAAAACTCAAGAAATTGACGGGGGGGCCCGCACAAGCGGCGGAGCATGCGGATTAATTCGATGCAACGCGAGAGCCTTACCTGGGGCTTGGACATGTTTCACCGGACGGAACCGCCTAGGCAGGA。
3.权利要求1或2所述的一株辅助缓解痛风的两歧双歧杆菌BL002的一种应用，其特征在于，所述两歧双歧杆菌BL002用于制备食品。
4.根据权利要求3所述的一株辅助缓解痛风的两歧双歧杆菌BL002的应用，其特征在于，所述食品为固体饮料。
5.权利要求1或2所述的一株辅助缓解痛风的两歧双歧杆菌BL002在制备缓解痛风症状的益生菌粉中的应用。
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