CN115887568A - 一种治疗脂质代谢紊乱引起肝损伤的中药组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开一种治疗脂质代谢紊乱引起肝损伤的中药组合物，由以下原料制备而成：生黄芪15‑25、山药15‑25、白术10‑20、太子参10‑20、葛根10‑20、鸡内金10‑20。该中药组合物能够针对性的治疗脂质代谢紊乱引起肝损伤，效果显著，安全可靠。

Description

一种治疗脂质代谢紊乱引起肝损伤的中药组合物及其制备方法

技术领域

本申请涉及中医药技术领域，具体涉及一种治疗脂质代谢紊乱引起肝损伤的中药组合物及其制备方法。

背景技术

脂质代谢紊乱为糖尿病、冠心病、脑卒中等多种疾病的独立危险因素。尤其肝脏是脂质代谢的核心器官，脂质代谢紊乱直接导致肝细胞脂质堆积，继而影响肝细胞功能、破坏肝细胞结构，促使结缔组织增生造成肝硬变，长期病变则可诱发肝癌。

尽管调节饮食和加强运动是降脂的有效方法，但因为社会因素和个人原因，大部分脂质代谢紊乱患者没有足够的时间通过调节饮食、增强运动来降低血脂水平，亟需一种可以有效的降脂减肥药。目前，常见的降脂药主要有他汀类药物(如阿托伐他汀钙片)、胆固醇吸收抑制剂(如依折麦布片)、贝特类药物(如苯扎贝特片)及烟酸类药物(如烟酸片)等四类药物。尽管这些降脂药具有较明显的降脂效果，但较长期服药后患者常出现肝功能损伤，腹痛、呕吐等消化道不适症状，皮肤过敏反应及胆石症等不良反应。选用多西磷脂酰胆碱、甘草酸制剂及水飞蓟素等保肝抗炎药物虽然一定保肝作用，但降脂效果不明显，并不能从病因上根治疾病。脂质代谢紊乱患者常伴有不同程度的肝功能异常，长期服用降脂药物又容易导致肝功能损伤，而肝功能损伤将进一步加剧脂质代谢异常的病情，二者互为因果，形成恶性循环。据此可知，改善肝功能损伤，降低血脂水平，减少肝脏脂质沉积是逆转病情加重的关键环节。因此，成功开发既能有效保护肝功能又能显著减少脂质堆积的药物具有十分重要的临床诊疗意义和社会经济价值。

中医学没有“脂质代谢紊乱”“高脂血症”名称，但早在《黄帝内经》已有“脂者”“油脂”“膏脂”等记载。尽管中医对膏脂有补益脾肾、疏肝理气、祛痰化浊、活血化瘀等治法，但后世医家普遍认为膏脂的形成很大程度上取决于脾的运化功能。脾为“后天之本”“气血生化之源”，与胃一同完成人体对饮食的消化和吸收过程，即“胃主受纳腐熟，脾主运化输布”，其具体过程正如《素问·经脉别论》所述:“饮入于胃，游溢精气，上输于脾，脾气散精……水精四布，五经并行。”而文中的“脾气散精”是指将饮食中的营养成分(精微物质)，有效地输送至全身并充分利用的过程。当人体缺少锻炼又摄食过多而成，必然加重脾胃功能的负担，尤其是脾的运化和散精功能长期处于超负荷状态，导致脾(气)失散精，水谷精微不得运化利用，壅滞日久成痰浊并发展为膏脂，最终产生脂质代谢紊乱的各种病症。肝脏作为人体物质能量代谢的主要场所及调节中心，充当着“脾气散精”物质流的关键枢纽。当脂质代谢紊乱，膏脂自然堆积肝脏，容易导致肝脏功能异常。由此可知，脾失散精是脂质代谢紊乱导致肝损伤的关键病机。

发明内容

本发明提供一种治疗脂质代谢紊乱引起肝损伤的中药组合物及中药制剂，该中药组合物能够针对性的治疗脂质代谢紊乱引起肝损伤，效果显著，安全可靠。

为实现上述目的，本发明的技术方案为：

治疗脂质代谢紊乱引起肝损伤的中药组合物，由以下重量份的原料制备而成：生黄芪15-25、山药15-25、白术10-20、太子参10-20、葛根10-20、鸡内金10-20。

优选的，由以下重量份的原料制备而成：生黄芪20、山药20、白术15、太子参15、葛根15、鸡内金15。

治疗脂质代谢紊乱引起肝损伤的中药组合物，其活性成分的制备方法包括以下步骤：

取全部药材，加入相当于药材总重量7-8倍量纯水，浸泡20-60min，煎煮2-3次，每次1-3h，过滤并合并煎煮液，减压浓缩成稠膏，即得。

治疗脂质代谢紊乱引起肝损伤的中药组合物，其散剂的制备方法包括以下步骤：将活性成分在60-80℃下真空干燥，粉碎，过80-120目筛，即得。

所述的浓缩的温度为60-80℃。

所述的稠膏的相对密度为1.20-1.28。

本发明还提供一种治疗脂质代谢紊乱引起肝损伤的中药制剂，应用了上述的治疗脂质代谢紊乱引起肝损伤的中药组合物与医药学上可接受的载体，制成其他不同的剂型，包括散剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、溶液剂或混悬剂。

本发明医药学上可接受的载体包括但不限于以下成分：

稀释剂：氧化锌、炉甘石、淀粉、糖粉、乳糖、糊精、微晶纤维素、无机盐、糖醇类等。

粘合剂：明胶、聚乙二醇、纤维素衍生物、豚脂、凡士林、硅油、羊毛脂、纤维素、树胶、生橡胶、铅皂、羊毛脂等。

有机溶剂：硼酸、醋酸铅、硫酸铜、硫酸锌、醋酸铝、利凡诺、呋喃西林、新霉素、高锰酸钾、乙醚、乙醇、丙酮等。

崩解剂：淀粉、羧甲基淀粉钠、纤维素衍生物、交联聚维酮等。

润滑剂：硬脂酸镁、微粉硅胶、滑石粉、聚乙二醇、三乙醇胺、月桂醇硫酸钠、硬脂酸、鲸蜡醇、聚乙二醇、单甘脂、司盘、吐温等等。

乳化剂：豚脂、凡士林、硅油、羊毛脂、聚乙二醇、纤维素等。

助溶剂：水、乙醇、甘油、丙二醇、液状石蜡、植物油、二甲基亚砜、氮卓酮等。

矫味剂：蔗糖、单糖、芳香剂等。

防腐剂：苯甲酸、山梨酸、甲酯、乙酯、丙酯等。

增塑剂：蓖麻油、松香等。

成膜材料：火棉、玉米垸、有机玻璃。

各中药制剂剂型的制备方法如下：

1、散剂：

将本发明的治疗脂质代谢紊乱引起肝损伤的中药组合物的活性成分烘干，粉碎，得散剂；

2、片剂：

将本发明的治疗脂质代谢紊乱引起肝损伤的中药组合物的活性成分烘干，粉碎，压片，即得片剂。

3、胶囊剂：

将本发明的治疗脂质代谢紊乱引起肝损伤的中药组合物的活性成分烘干，粉碎，然后填装于空心胶囊中或密封于弹性软质胶囊中，得胶囊剂；所述的构成上述空心硬质胶囊壳或弹性软质胶囊壳的材料是明胶、甘油、水以及其它的药用材料。

4、颗粒剂：

将本发明的治疗脂质代谢紊乱引起肝损伤的中药组合物的活性成分烘干，粉碎，与适宜的辅料混合造粒，即得颗粒剂；所述的辅料包括稀释剂、吸收剂、润湿剂、粘合剂、矫味剂、泡腾性辅料。

5、溶液剂或混悬剂：

将本发明的治疗脂质代谢紊乱引起肝损伤的中药组合物的活性成分溶于水、植物油或者其它药用液体溶剂，得溶液剂或混悬剂。

发明人经过多年临床经验发现，健脾化浊为“脾气散精”解除膏脂之遏制、再益气升清以恢复并助力“脾气散精”功能可有效治疗脂质代谢紊乱导致的肝损伤，可收到“治病求本”效果。由此形成了治疗脂质代谢紊乱导致肝损伤的健脾升清化浊方。该方由生黄芪、山药、白术、太子参、葛根、鸡内金组成，方中生黄芪、山药用量较重为君，取其补中益气、健脾升清之功，使脾气升发，斡旋中焦助大气升降，恢复“脾气散精”以运化精微；配伍臣药白术、太子参以增强益气健脾升清，协同增强“脾气散精”；佐以鸡内金“助脾胃强健，化饮食中糖质为津液也”，化浊以解“脾气散精”之束缚，寓化浊于升清；再予使药葛根，借其擅升津液作用以助黄芪升发脾胃清阳，使津随气升，进一步协同增强“脾气散精”。此外，山药、太子参滋养脾阴，使脾升清有源，又制约黄芪之燥性，六药合用，助“脾气散精”实现治疗脂质代谢紊乱导致肝损伤的作用。

本发明的中药组合物所用药材都是“药食同源”药材，安全性高，可以长期服用且不会伤及脾胃。

本发明的中药组合物经过实施例9的动物实验研究，表明该中药组合物可以降低脂质代谢异常大鼠体重，改善肝脏损伤、肝脏脂肪化程度，下调血脂血糖水平，有效地治疗脂质代谢紊乱导致的肝损伤。另外，实施例8的临床实验研究表明本发明组合物可以改善患者体重和血糖：与治疗前比较，治疗后患者体重、BMI、HbA1c、2hOGTT均有显著性下降。

附图说明

图1为治疗前后患者谷丙转氨酶(A)、谷草转氨酶(B)比较(注：##P<0.01)；

图2为治疗前后患者甘油三酯(A)、胆固醇(B)、高密度脂蛋白胆固醇(C)、低密度脂蛋白胆固醇(D)比较(注：#P<0.05,##P<0.01)；

图3为治疗前后患者体重(A)、BMI(B)、糖化血红蛋白(C)、空腹血糖(D)、餐后2h血糖比较，注：##P<0.01，###P<0.001，####P<0.0001；

图4为第20周末各组大鼠血清ALT、AST含量对比(A，n＝8)；第20周末各组大鼠肝脏对比(B)，注：与正常组比较，*P<0.05，**P<0.01；与模型组比较#P<0.05，##P<0.01；

图5为各组大鼠肝脏HE染色、油红O染色对比(A)；各组大鼠肝脏TG含量比较和各组大鼠肝脾CT值比值结果(n＝8)(B)，注：与正常组比较，*P<0.05，**P<0.01；与模型组比较#P<0.05，##P<0.01；

图6为给药四周内各组大鼠体重比较，注：模型组与正常组比较，*P<0.05，**P<0.01；本发明方药组与模型组比较#P<0.05，##P<0.01；

图7为第20周GTT、ITT曲线图及曲线下面积对比，注：与正常组比较，*P<0.05，**P<0.01；与模型组比较#P<0.05，##P<0.01；

图8为Micro-CT比较各组大鼠腹部脂肪含量(红色部分是脂肪标记)，注：与正常组比较，*P<0.05，**P<0.01；与模型组比较#P<0.05，##P<0.01；

图9为各组大鼠肝脏细胞电镜观察结果(红星表示线粒体)(A)；血清和肝脏组织MDA、GSH含量比较(n＝8)(B)，注：与正常组比较，*P<0.05，**P<0.01；与模型组比较#P<0.05，##P<0.01；

图10为各组大鼠肝脏线粒体生物生成指标表达情况及相对表达量(n＝6)，注：*P<0.05,**P<0.05

具体实施方式

下面通过具体实施例对本发明进行详细说明。

实施例1

治疗脂质代谢紊乱引起肝损伤的中药组合物，由以下的原料制备而成：生黄芪1.5kg、山药1.5kg、白术1kg、太子参1kg、葛根1kg、鸡内金1kg。

活性成分制备方法如下：

取全部药材，加入相当于药材总重量7倍量纯水，浸泡20min，煎煮2次，每次1h，过滤并合并煎煮液，60℃下减压浓缩成相对密度1.20的稠膏，即得。

将本实施例的中药组合物制备成散剂，其制备方法如下：将活性成分在60℃下真空干燥，粉碎，过80目筛，即得。

实施例2

治疗脂质代谢紊乱引起肝损伤的中药组合物，由以下的原料制备而成：生黄芪2.5kg、山药2.5kg、白术2kg、太子参2kg、葛根2kg、鸡内金2kg。

活性成分制备方法如下：

取全部药材，加入相当于药材总重量8倍量纯水，浸泡60min，煎煮3次，每次3h，过滤并合并煎煮液，80℃下减压浓缩成相对密度1.28的稠膏，即得。

将本实施例的中药组合物制备成散剂，其制备方法如下：将活性成分在80℃下真空干燥，粉碎，过120目筛，即得。

实施例3

治疗脂质代谢紊乱引起肝损伤的中药组合物，由以下的原料制备而成：生黄芪2kg、山药2kg、白术1.5kg、太子参1.5kg、葛根1.5kg、鸡内金1.5kg。

活性成分制备方法如下：

取全部药材，加入相当于药材总重量8倍量纯水，浸泡30min，煎煮2次，每次2h，过滤并合并煎煮液，70℃下减压浓缩成相对密度1.25的稠膏，即得。

将本实施例的中药组合物制备成散剂，其制备方法如下：将活性成分在70℃下真空干燥，粉碎，过100目筛，即得。

实施例4

治疗脂质代谢紊乱引起肝损伤的中药组合物，由以下的原料制备而成：生黄芪1.8kg、山药1.7kg、白术1.2kg、太子参1.4kg、葛根1.6kg、鸡内金2kg。

活性成分制备方法如下：

取全部药材，加入相当于药材总重量8倍量纯水，浸泡40min，煎煮2次，每次1.5h，过滤并合并煎煮液，65℃下减压浓缩成相对密度1.23的稠膏，即得。

将本实施例的中药组合物制备成片剂，制备方法包括以下步骤：

将所述的活性成分烘干，粉碎，与适量淀粉和糊精混合，过100目筛，压片，即得片剂。

实施例5

治疗脂质代谢紊乱引起肝损伤的中药组合物，由以下的原料制备而成：生黄芪2.1kg、山药2.2kg、白术1.3kg、太子参1.3kg、葛根1.3kg、鸡内金1.3kg。

活性成分制备方法如下：

取全部药材，加入相当于药材总重量7倍量纯水，浸泡25min，煎煮3次，每次2.2h，过滤并合并煎煮液，75℃下减压浓缩成相对密度1.26的稠膏，即得。

将本实施例的中药组合物制备成胶囊剂，制备方法为：

将所述的活性成分烘干，粉碎，过100目筛，然后填装于空心胶囊中，即得胶囊剂。

实施例6

治疗脂质代谢紊乱引起肝损伤的中药组合物，由以下的原料制备而成：生黄芪1.8kg、山药1.8kg、白术1.6kg、太子参1.6kg、葛根1.8kg、鸡内金1.8kg。

活性成分制备方法如下：

取全部药材，加入相当于药材总重量8倍量纯水，浸泡45min，煎煮2次，每次2.5h，过滤并合并煎煮液，68℃下减压浓缩成相对密度1.22的稠膏，即得。

将本实施例的中药组合物制备成颗粒剂，制备方法为：

将所述的活性成分与适量淀粉、糖粉混合造粒，即得颗粒剂。

实施例7

治疗脂质代谢紊乱引起肝损伤的中药组合物，由以下的原料制备而成：生黄芪2.3kg、山药2.1kg、白术1.3kg、太子参1.5kg、葛根1.7kg、鸡内金1.2kg。

活性成分制备方法如下：

取全部药材，加入相当于药材总重量7倍量纯水，浸泡27min，煎煮3次，每次1.8h，过滤并合并煎煮液，77℃下减压浓缩成相对密度1.27的稠膏，即得。

将本实施例的中药组合物制备成制成溶液剂，制备方法包括以下步骤：

将所述的活性成分与适量糖和水混合，即得溶液剂。

实施例8

临床试验总结

临床研究

1.病人来源、诊断及纳入和排除标准

1.1病人来源：2022年05月至2022年10月在东莞市中医院内分泌科门诊采集超重/肥胖、高脂血症且伴有肝功能损伤的脂质代谢紊乱患者。

1.2纳入标准：

超重或肥胖且伴有血脂异常患者：

①患者BMI>24kg/m2；

②患者血脂四项TG、TC、HDL、LDL出现明显异常者；

③患者肝功能指标ALT、AST均>40U/L；

④患者同意并签署知情同意书。

1.3排除标准

①患者有严重的心血管、脑血管、肝、肾和造血系统等原发性疾病，或精神病患者；

②患者因急性胰腺炎导致的血糖短暂升高。

③患者需要长期服用某种药物。

2.实验方法

2.1分组和药物

将符合标准的患者给予健脾升清化浊方4周。

药物组成及服用方法：生黄芪20g，山药20g，白术15g，太子参15g，葛根15g，鸡内金15g；水煎口服，每天一剂，疗程为4周；

2.2观察指标及观察时点

治疗前、治疗后统计患者的体重、BMI、FPG、2hOGTT、HbA1c、TG、TC、HDL、LDL、ALT、AST，并对治疗前后的数据进行统计分析。

2.4、统计方法

对治疗前后差值符合正态分布的计量资料采用配对t检验，数据采用表示；不符合正态分布的采用非参数检验，数据采用中位数和四分位数间距表明，P<0.05表示差异具有统计学意义。

3、结果：

从门诊部就诊病人中筛选符合条件的患者，共计10例患者(女7例，男3例)，一般资料如下：

表1一般资料(n＝10，)

结果表明方药可以改善超重或肥胖且伴有脂质代谢异常患者的肝功能，且对血脂、血糖也有一定的改善作用。

(1)如图1所示，本发明组合物可以改善患者肝功能异常：治疗前患者的AST、ALT均超过正常值范围(40U/L)，提示受试者均发生肝损伤；治疗后患者AST、ALT均有显著性下降(P<0.01)且基本恢复到正常值范围。

(2)如图2所示本发明组合物可以改善患者血脂：与治疗前比较，治疗后患者TG、TC、LDL均有显著性下降(P<0.05、P<0.05、P<0.01)，HDL无显著性变化。

(3)如图3所示，本发明组合物可以改善患者体重和血糖：与治疗前比较，治疗后患者体重、BMI、HbA1c、2hOGTT均有显著性下降(P<0.0001、P<0.01、P<0.01、P<0.001)，FPG无显著性变化。

实施例9动物实验

1、材料

1.1动物选择SPF级SD大鼠26只，雄性，体重170-200g，6-7周龄，饲养于广州中医药大学实验动物中心SPF级实验室，动物由广东省医学实验动物中心提供(动物合格证号：NO.44007200091644)，饲养于广州中医药大学实验动物中心，实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。

1.2药物健脾升清化浊方由生黄芪20g，山药20g，白术15g，太子参15g，葛根15g，鸡内金15g组成，药物购自广州中医药大学第一附属医院(批号：黄芪210503、山药210101、白术HX21L01、太子参HX21K01、葛根210101、鸡内金HX20B01)，取方药五副，加入7-8倍量纯水，浸泡30min，煮沸后煎煮2h，纱布过滤，残渣再加同剂量纯水煎煮2h，过滤，合并两次滤液，减压浓缩至1g/ml,放置于-20℃冰箱备用(浓缩完成到灌胃给药不超过2个星期)。

1.3试剂和仪器一抗：兔多克隆抗体PGC1α(Abcam，ab191838)，兔多克隆抗体NRF1(Abcam，ab175932)，兔多克隆抗体TFAM(Affinity，DF6696)；二抗：山羊抗兔IgG H&L(HRP)(Abcam，ab205718)；内参：β-actin兔单克隆抗体(Beyotime，AF5003)；Maker(Bio-Rad，161-0374)；60％高脂饲料(广东省医学实验动物中心，HF60)；倒置荧光显微镜(Olympus，IX73)；罗氏活力血糖试纸(Roche，26032334)；罗氏血糖仪活力型(Roche，Accu-Chek Active)；

2.方法

2.1动物分组与干预：将大鼠适应性喂养一周，期间自由饮水饮食，光照12h昼夜循环。一周后对大鼠进行称重，并按体重随机分为正常组(8只)、模型组(16只)，正常组给予普通饮食，模型组给予60％高脂饲料(脂肪供能60％，碳水化合物供能20％，蛋白供能20％)，16周末，以建立脂代谢紊乱致肝损伤模型，根据体重将模型组大鼠随机分为模型组、方药组(健脾升清化浊方，给药量为5g/kg)，方药组给予相应剂量药物灌胃4周时间，而模型组及正常对照组给予等量纯水灌胃4周时间，期间正常组给予普通饮食。

2.2体重、血糖的测定16周后每周测量大鼠体重1次；SD大鼠禁食(不禁水)过夜，尾尖采血，并用快速血糖仪测定大鼠空腹血糖，之后给大鼠灌服40％葡萄糖溶液(2g/kg)，120min测定大鼠血糖，即为2hOGTT。GTT为大鼠禁食过夜后灌服40％葡萄糖溶液(2g/kg)，于0、15、30、60、90、120min测定大鼠血糖；ITT为大鼠禁食6h后腹腔注射胰岛素溶液(0.75U/kg)，于0、15、30、60、90、120min测定大鼠血糖。

2.3大鼠腹部脂肪分布及肝脏线粒体观察Micro-CT测定大鼠腹部脂肪分布及肝脏、脾脏CT值，透射电镜观察大鼠肝脏线粒体。

2.4样本采集给药第4周末，大鼠禁食过夜，2％异戊巴比妥钠(50mg/kg)麻醉大鼠，腹主动脉取血，静置2h，3000转离心15min，分装保存于-80℃冰箱；取血结束后剪取部分肝脏放置于4％多聚甲醛固定液中，用于HE染色及油红O染色，剩余样本剪碎放置于-80℃冰箱备用。

2.5血清脂质的检测将保存于-80℃冰箱的血清取出，4℃复温1h，4℃、3000rpm离心15min，取上清，采用全自动生化分析仪测定大鼠血清TC、CHO、HDL-C、LDL-C的含量。

2.6HE染色及油红O染色将固定24h以上的肝脏组织从固定液取出，修剪、脱水浸蜡、包埋、切片，然后依次脱蜡、苏木素染色、伊红染色、脱水封片，并采用奥林巴斯显微镜观察染色结果；将固定于4％多聚甲醛的肝脏组织冰冻切片，经蒸馏水后，浸染于Harris苏木素或明矾苏木素中淡染1-2分钟，自来水冲洗，移入70％酒精5秒钟，苏丹Ⅲ染色，70％酒精中洗涤5-10秒钟，蒸馏水洗，将切片移于载玻片上，擦掉周围水分，甘油明胶封固。

2.7Western Blot实验-80℃冰箱取出肝脏组织，称取20mg并加入200μl提前配好的蛋白提取液(RIPA裂解液+蛋白酶抑制剂+磷酸酶抑制剂)，组织研磨仪4℃研磨至组织完全破碎，4℃、12000rpm离心5min，取上清，同样条件下再次离心5min，取上清。将制备好的样品采用BCA法测定蛋白浓度，然后按照每个样本上样蛋白量60μg、上样量20μl制备上样样品，恒压80V至样品跑过浓缩胶，调至100v至电泳结束，恒流200mA转膜90min后TBST洗三次，然后用5％脱脂奶粉封闭90min，TBST洗一次，加入特异性一抗(PGC1α、NRF1、TFAM、β-actin)4℃孵育过夜，TBST洗三遍，加入二抗常温孵育1h后TBST洗3次，ECL显色，并采用Image J分析条带，以目的蛋白的相对表达量进行统计分析。

2.8统计方法：

结果以均数±标准差(Mean±SD)表示，并采用GraphPad Prism 5统计软件进行分析，各组间差异比较用单因素方差分析(One-way ANOVA)。P<0.05表示差异具统计学意义。

结果：

3.1健脾升清化浊方显著减轻脂质代谢紊乱大鼠的肝损伤

由图4A可见，正常组肝脏颜色暗红，质地均匀紧凑；模型组大鼠肝脏脂肪堆积明显、呈米白色，质地松软，质量较重；经方药干预后大鼠肝脏颜色棕红，脂肪化程度较模型组明显改善。图4B显示，与正常组相比，模型组ALT、AST显著升高(P<0.01、P<0.05)，与模型组相比，本发明方药组ALT、AST显著降低(P<0.01)。

3.2健脾升清化浊方改善脂质代谢紊乱大鼠肝脏的病理损伤和脂质沉积

由图5可见，HE染色中正常组肝细胞排列紧密，结构完整，模型组、本发明方药组门静脉周围肝细胞小泡性脂肪变性，胞浆可见圆形脂肪空泡，但模型组脂肪空泡明显多于本发明方药组，这提示本发明方药组能够保护肝脏细胞，减少高脂饮食引起的肝脏变性和脂肪空泡。油红O染色正常组大鼠整体呈现蓝色，未发现脂质聚集，而模型组和本发明方药组都出现红色脂滴，提示模型组大鼠、本发明方药组大鼠发生脂质沉积，但根据颜色的深浅可以看出，本发明方药组大鼠的脂滴聚集明显少于模型组，这提示“健脾升清化浊方”能够降低IGT大鼠高脂饮食引起的肝脏脂质积聚。肝组织TG测定结果显示，与正常组相比，模型组大鼠肝脏TG显著升高(P<0.01)，与模型组相比，本发明方药组肝组织TG显著下降(P<0.01)；肝脾CT值比值表示肝脏脂肪化程度，比值越低脂肪化越严重，与正常组相比，模型组大鼠肝脾CT值比值显著降低(P<0.01)，与模型组相比，本发明方药组大鼠肝脾CT值比值显著升高(P<0.01)。

3.3健脾升清化浊方减少脂质代谢紊乱大鼠体重

如图6所示，造模结束时(第16周末)模型组体重显著高于正常对照组，本发明方药组大鼠和模型组大鼠平均体重接近，给药4周内，本发明方药组的平均体重增速低于模型组和正常组，第20周末，本发明方药组大鼠的平均体重显著低于模型组(P<0.05)，提示益气健脾方药可以调节高脂饮食大鼠体重。

3.4健脾升清化浊方降低脂质代谢紊乱大鼠血糖见表2。造模结束时(第16周)，与正常组相比，模型组大鼠空腹血糖显著升高(P<0.05),本发明方药组和模型组之间没有显著性差异；第20周，模型组空腹血糖仍显著高于正常组，与模型组相比，本发明方药组大鼠空腹血糖显著下降(P<0.05)。第16、18、20周，与正常组相比，模型组大鼠2hOGTT均显著升高；与模型组相比，本发明方药组第16、18周2hOGTT无显著变化，第20周末2hOGTT显著降低(P<0.05)。

表2第16、18、20周各组大鼠血糖比较(n＝8，)

注：与正常组比较，*P<0.05，**P<0.01；与模型组比较#P<0.05，##P<0.01

3.5健脾升清化浊方改善脂质代谢紊乱大鼠的葡萄糖糖耐量及胰岛素敏感性

如图7所示，与正常组相比，模型组GTT、ITT曲线下面积显著升高(P<0.05)，与模型组比较，本发明方药组GTT、ITT曲线下面显著降低。

3.6健脾升清化浊方降低脂质代谢紊乱大鼠的血脂水平

如表3所示，与正常组相比，模型组TG显著升高，本发明方药组干预后TG含量显著低于模型组(P<0.05)；另外与模型组相比，本发明方药组两种脂蛋白HDL-C、LDL-C虽然没有显著性差异，但能使大鼠的血清脂蛋白(HDL-C、LDL-C)含量恢复至接近正常组水平，这表明健脾升清化浊方具有调节高脂饮食大鼠血脂的作用。

表3 20周末三组大鼠血脂比较(n＝8，)

注：与正常组比较，*P<0.05，**P<0.01；与模型组比较#P<0.05，##P<0.01

3.7健脾升清化浊方减少脂质代谢紊乱大鼠的腹部脂肪含量

如图8所示，与正常组相比，模型组腹部脂肪分布比例显著升高(P<0.01)，与模型组相比，本发明方药组腹部脂肪分布比例显著降低(P<0.01)。

3.8健脾升清化浊方增加脂质代谢紊乱大鼠的肝脏细胞线粒体数量并改善氧化应激

如图9所示，透射电镜结果显示，模型组大鼠肝脏线粒体数量减少，健脾升清化浊方干预可以增加肝脏细胞线粒体数量；与正常组比较，模型组大鼠血清、组织MDA显著升高(P<0.01、P<0.05)，与模型组比较，本发明方药组血清、组织MDA显著降低(P<0.05)；与正常组比较，模型组大鼠组织GSH显著降低(P<0.01)，与模型组比较，本发明方药组组织GSH显著升高(P<0.01)。

3.9健脾升清化浊方增加脂质代谢紊乱大鼠的肝脏线粒体生物生成相关蛋白表达

如图10所示，给药第4周末各组大鼠肝脏线粒体生物生成指标PGC-1α、NRF1、TFAM蛋白表达情况见图10。与正常组相比，模型组大鼠肝脏PGC-1α蛋白表达量显著降低(P<0.05)，NRF1、TFAM蛋白表达量也显著降低(P<0.01)；与模型组比较，本发明方药组大鼠肝脏PGC-1α、NRF1蛋白表达量显著升高(P<0.01)，TFAM蛋白表达量也显著升高(P<0.05)。

Claims (7)

1.一种治疗脂质代谢紊乱引起肝损伤的中药组合物，其特征在于，由以下重量份的原料制备而成：生黄芪15-25、山药15-25、白术10-20、太子参10-20、葛根10-20、鸡内金10-20。

2.根据权利要求1所述的治疗脂质代谢紊乱引起肝损伤的中药组合物，其特征在于，由以下重量份的原料制备而成：生黄芪20、山药20、白术15、太子参15、葛根15、鸡内金15。

3.根据权利要求1所述的治疗脂质代谢紊乱引起肝损伤的中药组合物，其特征在于，其活性成分的制备方法包括以下步骤：

取全部药材，加入相当于药材总重量7-8倍量纯水，浸泡20-60min，煎煮2-3次，每次1-3h，过滤并合并煎煮液，减压浓缩成稠膏，即得。

4.根据权利要求3所述的治疗脂质代谢紊乱引起肝损伤的中药组合物，其特征在于，其散剂的制备方法包括以下步骤：将活性成分在60-80℃下真空干燥，粉碎，过80-120目筛，即得。

5.根据权利要求3所述的治疗脂质代谢紊乱引起肝损伤的中药组合物，其特征在于：所述的浓缩的温度为60-80℃。

6.根据权利要求3所述的治疗脂质代谢紊乱引起肝损伤的中药组合物，其特征在于：所述的稠膏的相对密度为1.20-1.28。

7.一种治疗脂质代谢紊乱引起肝损伤的中药制剂，应用了如权利要求1-6任何一项所述的治疗脂质代谢紊乱引起肝损伤的中药组合物与医药学上可接受的载体。

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