CN115737757A - 一种中药-益生菌组合物及其在二型糖尿病治疗中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种治疗二型糖尿病的组合物，属于食品、保健品以及生物医药技术领域（包括特医食品），所述组合物包括中药和益生菌。所述中药‑益生菌组合物按照重量计算由以下组份组成：黄芪12‑20份、蘑菇粉15‑20份、苦荞15‑20份、玉米须8‑15份、南瓜籽8‑15份、茯苓6‑12份、白术2‑10份、淮山药2‑10份、葛根2‑8份、长双歧杆菌1‑3份和约氏乳杆菌1‑3份。本发明对二型糖尿病有显著的治疗效果，能够有效降低二型糖尿病患者的体重和空腹高血糖；加速机体血清葡萄糖代谢；降低血清中糖化血红蛋白水平；缓解胰岛素抵抗；降低血清中总胆固醇水平；恢复糖代谢和脂代谢异常；减少血清中炎性因子IL‑1β的表达；对肝脏和胰腺组织的损伤有一定的改善作用。本发明所涉及的中药和益生菌具备良好的安全性和生物相容性，无毒副作用，制备工艺简单、稳定，可操作性强，适合工业化生产，在治疗二型糖尿病中具有广阔的应用前景。

Description

一种中药-益生菌组合物及其在二型糖尿病治疗中的应用

技术领域

本发明涉及一种治疗二型糖尿病的中药-益生菌组合物，其属于生物医药技术领域。

背景技术

糖尿病是以血糖水平增高为特征的内分泌性疾病，具有高发病率和死亡率，通常伴有蛋白质、脂肪等代谢异常，引起各种组织及内脏的病理改变，导致心血管疾病、肾病等并发症。糖尿病的主要类型：由于胰岛β细胞破坏造成的胰岛素绝对缺乏导致的一型糖尿病；主要由胰岛素抵抗和胰岛素分泌不足引起的二型糖尿病以及特殊人群糖尿病，如儿童糖尿病、中老年糖尿病等。其中二型糖尿病占所有糖尿病确诊病例的约90%到95%。二型糖尿病的危险因素包括较高年龄、肥胖、糖尿病家族史、妊娠糖尿病病史、葡萄糖耐受性变弱、运动不足。过去20年中，全球有超过3亿人受到二型糖尿病的影响。糖尿病造成的慢性炎症被认为是慢性肾病的主要原因。同时在二型糖尿病患者中，78.51%的人存在血脂异常、脂代谢异常，其与二型糖尿病大血管病变的发生发展密切相关。

该病不仅会造成肠道菌群失调，对肝脏、酸碱平衡和心血管系统等产生严重危害，而且能引发多种并发症，甚至导致失明、截肢残疾、肾衰竭尿毒症等。当前，尽管目前有多种多样的二型糖尿病治疗药物，但是疗效好、副作用小的新型糖尿病治疗药物的开发仍是一项艰巨的任务。因此，为解决此类问题，我们提出一种治疗二型糖尿病的中药-益生菌组合物。

发明内容

本发明的目的是提供一种中药-益生菌组合物，所述组合物能够用于二型糖尿病的治疗。本发明的组合物的原料为食品级原料，用于治疗二型糖尿病没有毒副作用。

本发明提供了一种用于治疗二型糖尿病的中药-益生菌组合物，包括以下原料：黄芪、蘑菇粉、苦荞、玉米须、南瓜籽、茯苓、白术、淮山药、葛根、长双歧杆菌和约氏乳杆菌。

优选的，所述组合物包括以下重量份的原料：黄芪12-20份、蘑菇粉15-20份、苦荞15-20份、玉米须8-15份、南瓜籽8-15份、茯苓6-12份、白术2-10份、淮山药2-10份、葛根2-8份、长双歧杆菌1-3份和约氏乳杆菌1-3份。

优选的，所述长双歧杆菌和约氏乳杆菌的有效活菌数比为1:1。

优选的，所述益生菌中长双歧杆菌的有效活菌数大于等于1×1011 CFU/g；所述益生菌中约氏乳杆菌的有效活菌数大于等于1×1011 CFU/g。

本发明还提供了上述方案所述的组合物在制备功能性食品或保健品中的应用。

所述功能性食品或保健品的功效包括以下功效中的一种或几种：降低空腹血糖、减轻体重、调节糖代谢、调节脂代谢、抗炎、抗氧化、降低血压、抗疲劳、抗衰老。

本发明还提供了上述方案所述的组合物在制备预防和/或治疗二型糖尿病的药品中的应用。

优选的，所述治疗二型糖尿病包括以下1-10）中的一种或几种：

1）降低空腹血糖；

2）减轻体重；

3）缓解肝脏组织损伤；

4）缓解胰腺组织损伤；

5）降低血清中糖化血红蛋白水平；

6）减少血清中炎症因子的表达；

7）缓解机体胰岛素抵抗；

8）调节机体糖代谢异常；

9）调节机体脂代谢异常；

10）改善肠道菌群。

优选的，所述药品的剂型包括口服制剂。

优选的，所述口服制剂包括粉剂、颗粒剂或片剂。

本发明提供了一种治疗二型糖尿病的组合物，包括中药和益生菌；所述中药有黄芪、蘑菇粉、苦荞、玉米须、南瓜籽、茯苓、白术、淮山药和葛根；所述益生菌包括长双歧杆菌和约氏乳杆菌。本发明能够有效减轻二型糖尿病患者的体重，降低空腹血糖、加速机体血清葡萄糖代谢、降低血清中糖化血红蛋白水平；缓解胰岛素抵抗、降低血清中总胆固醇水平、调节糖代谢和脂代谢异常、减少血清中炎性因子IL-1β的表达、改善肝脏和胰腺组织的损伤，从而发挥治疗二型糖尿病的作用。本发明的中药和益生菌均为食品级原料，具备良好的安全性和生物相容性，无毒副作用，在治疗二型糖尿病中具有广阔的应用前景。

附图说明

图1：中药-益生菌组合物对二型糖尿病小鼠体重的影响。

图2：中药-益生菌组合物对二型糖尿病小鼠空腹血糖的影响。

图3：中药-益生菌组合物对二型糖尿病小鼠口服糖耐量的影响。

图4：中药-益生菌组合物对二型糖尿病小鼠糖化血红蛋白水平的影响。

图5：中药-益生菌组合物对二型糖尿病小鼠血清胰岛素水平的影响。

图6：中药-益生菌组合物对二型糖尿病小鼠血清丙酮酸激酶水平的影响。

图7：中药-益生菌组合物对二型糖尿病小鼠血清总胆固醇水平的影响。

图8：中药-益生菌组合物对二型糖尿病小鼠血清炎症因子IL-1β水平的影响。

图9：不同组别小鼠胰腺组织H&E染色。

图10：不同组别小鼠肝脏组织H&E染色。

图1-7中，数据采用均值±SD表示，^# P＜0.05, ^## P＜0.01 and ^### P＜0.001,versus 空白组. *P＜0.05, **P＜0.01 and ***P＜0.001, versus 模型组。

具体实施方式

下述实施例中涉及的二型糖尿病小鼠为6-8周龄雄性SPF级db/db小鼠，购买自江苏集萃药康生物科技股份有限公司；空白对照小鼠为同周龄雄性m/m+小鼠，购买自江苏集萃药康生物科技股份有限公司。下述实施例中涉及的ELISA试剂盒购自泉州市睿信生物科技有限公司；下述实施例中涉及的盐酸二甲双胍购自北京京丰制药集团有限公司；下述实施例中涉及的葡萄糖购自国药集团化学试剂有限公司；下述实施例中涉及的TCHO检测试剂盒购自南京建成生物科技有限公司；下述实施例中涉及的H&E染色试剂盒购自泉州市睿信生物科技有限公司。

实施例1：中药-益生菌组合物的制备的保存

在本发明中，所述组合物优选的采用以下方法制备得到：将所述中药和益生菌按比例混合，得到组合物；所述组合物优选为80目筛网的筛下组分；所述组合物的保存温度优选为-80℃。本发明对所述中药或益生菌的来源没有特殊限制，采用本领域常规来源即可。

实施例2：动物实验设计

db/db小鼠，适用性喂养1周后，根据小鼠体重，随机分为5组，分别为模型组、阳性药物组、组合物高剂量给药组、组合物中剂量给药组和组合物低剂量给药组，每组小鼠5只；另取5只同周龄m/m+小鼠作为空白组。小鼠每天9:00-10:00灌胃给药，连续给药8周。灌胃期间，将小鼠饲喂于23±1℃，湿度为50-60%环境，给予自然光照，昼夜均分（照明时间：7:00-19:00），保持食水新鲜。

空白组：连续8周每天灌胃5.0 mL/kg生理盐水。

模型组：连续8周每天灌胃5.0 mL/kg生理盐水。

阳性药物组：连续8周每天灌胃130 mg/kg盐酸二甲双胍。

组合物高剂量给药组：连续8周每天灌胃2.6 g/kg的中药-益生菌组合物。

组合物中剂量给药组：连续8周每天灌胃1.3 g/kg的中药-益生菌组合物。

组合物低剂量给药组：连续8周每天灌胃0.65 g/kg的中药-益生菌组合物。

表1 动物实验设计

8周给药结束后，小鼠禁食不禁水8h后，麻醉状态下用无菌管收集小鼠血液，室温血液自然凝固10-20分钟，2-8℃条件离心20分钟左右（3000转/分）收集小鼠血清，-80℃保存备用。CO2安乐死小鼠后快速摘取心脏、肝脏、胰腺、脾脏组织，称重后，采用4%多聚甲醛固定。下面结合附图对本发明作更进一步的说明。

实施例3：中药-益生菌组合物对db/db小鼠糖尿病病症的影响

肥胖是导致糖尿病发生的重要原因，在我国成年糖尿病患者中，肥胖与糖尿病联系非常紧密，我们每周用电子天平检测小鼠体重并记录。

利用三诺生物传感股份有限公司生产的安稳血糖仪，每两周检测小鼠空腹血糖并记录。

给药8周结束后，小鼠禁食不禁水12 h（20:00 - 8:00），测定小鼠空腹血糖值，立即灌胃2.0 g/kg葡萄糖溶液，检测小鼠灌胃后0.5 h、1.0 h、 2.0 h、4.0 h 的血糖值，计算血糖曲线下面积(AUC):

AUC=(0 h血糖值+0.5 h血糖值)×0.25+(0.5 h血糖值+1.0 h血糖值)×0.25+(1.0 h血糖值+2.0 h血糖值)×0.5。

由图1所示与空白组小鼠相比，模型组小鼠体重增长显著（P<0.001），治疗8周后，与模型组相比, 阳性药物组及组合物治疗组小鼠体重均有不同程度的降低。其中组合物中剂量组和高剂量组在第八周与模型组相比体重显著降低（P<0.01）。

由图2所示与空白组小鼠相比，模型组小鼠空腹血糖持续处于高水平（P<0.001），其血糖值为空白小鼠两倍以上。给药5周后，与模型组小鼠相比，治疗组小鼠血糖水平均有不同程度的降低。给药8周后，阳性药物组小鼠血糖值极显著降低（P<0.001），组合物高剂量和中剂量组小鼠也有显著的血糖降低（P<0.05）。

由图3所示, AUC结果进一步证明，与模型组相比，组合物高中剂量给药8周均会有效降低小鼠灌胃葡萄糖后的血糖值（P<0.01），显著加速小鼠血清葡萄糖代谢。

实施例4：中药-益生菌组合物对db/db小鼠血清糖化血红蛋白水平的影响

糖化血红蛋白是机体血液中血糖与血红蛋白结合的产物。血糖与血红蛋白结合生成糖化血红蛋白是不可逆反应，与血糖浓度成正比，其浓度可以保持120天左右。因此，血液中糖化血红蛋白水平可以反映患者8-12周内的血糖控制情况。由图4可以看出，与空白组小鼠相比，模型组db/db小鼠糖化血红蛋白水平显著升高(P<0.001)，证明db/db小鼠持续处于高血糖状态。组合物给药8周后，与模型组相比，小鼠血清中糖化血红蛋白水平发生极显著降低（P<0.001）。

实施例5：中药-益生菌组合物对db/db小鼠血清胰岛素水平的影响

如图5所示，与正常小鼠相比，模型组db/db小鼠血清胰岛素水平显著升高(P<0.001)，表现为高胰岛素血症。与模型组相比，组合物高剂量或中剂量给药8周后，小鼠血清胰岛素水平显著降低（P<0.01），低剂量组合物给药8周后小鼠血清胰岛素水平同样显著降低（P<0.05）。表明组合物对二型糖尿病导致的胰岛素抵抗有一定的治疗效果。

实施例6：中药-益生菌组合物对db/db小鼠糖代谢的影响

丙酮酸激酶是糖酵解过程中主要的限速酶之一,催化磷酸烯醇式丙酮酸生成ATP,在糖代谢过程中起重要作用。如图6所示，与正常小鼠相比，db/db小鼠血清丙酮酸激酶水平显著下降（P<0.001），机体糖酵解过程受到严重抑制。与模型组小鼠相比，组合物给药8周后小鼠血清丙酮酸激酶水平显著升高（P<0.05）。说明组合物可以在一定程度上恢复二型糖尿病小鼠的糖代谢异常。

实施例7：中药-益生菌组合物对db/db小鼠脂代谢的影响

血脂是机体血清中脂质的统称，近年来，随着人们生活水平的提高，膳食结构发生明显变化，高血糖、高血压、高血脂成为目前临床中常见的病理现象。总胆固醇水平可以有效反映机体的血脂情况。由图7可以看出，与空白组小鼠相比，模型组db/db小鼠血清中总胆固醇水平显著升高（P<0.001），小鼠机体脂代谢紊乱。各治疗组给药8周后血清中总胆固醇水平均显著降低（P<0.01），说明组合物对降血脂有一定的效果。

实施例8：中药-益生菌组合物对db/db小鼠血清炎症因子的影响

采用ELISA试剂盒检测血清中促炎因子IL-1β的水平，具体操作步骤按说明书进行。如图8所示，模型组小鼠血清中炎症因子IL-1β与正常小鼠相比显著升高（P<0.05）。与模型组相比，组合物高剂量或中剂量给药均可以显著降低血清炎症因子IL-1β的水平（P<0.05）。

实施例9：中药-益生菌组合物对db/db小鼠脏器病理学的影响

采用石蜡组织切片及H&E染色技术观察小鼠胰腺组织的病理学情况，结果如图9所示。胰腺β细胞分泌胰岛素，调节机体血糖平衡，胰腺细胞功能障碍或细胞损伤是糖尿病发生的主要原因。由图9可以看出，正常小鼠胰腺组织腺泡细胞包膜完整，胰岛为圆形或卵圆形结构，边界清晰，且胰岛团内细胞较多，细胞质丰富。与正常小鼠相比，模型组db/db小鼠胰岛团内细胞坏死明显，胰岛结构杂乱，组合物给药8周后，小鼠胰岛细胞出现再生现象，细胞排列朝整齐方向发展，胞质较为丰富，胰岛形态有变好趋势。

采用石蜡组织切片及H&E染色技术观察小鼠肝脏组织的病理学情况，结果如图10所示。正常小鼠肝脏结构完整，肝细胞大小均一，无气球、玻璃样变，间质无水肿，未见炎症细胞浸润。与正常组小鼠相比，模型组小鼠肝细胞内可见大量糖原颗粒和脂肪空泡，肝索结构不规则，细胞间质水肿，出现炎细胞浸润。小鼠给药组合物8周后，肝脏结构具有明显改善，脂肪空泡及糖原颗粒均有减少，肝细胞结构逐渐完整，炎症细胞浸润减少。

以上所述为本发明的优选实施方式，对本研究领域其他相关人员，在不脱离本发明的理论和范围内，可以做出一些改进与修饰，本发明的保护范围以权利要求书的范围为准。

Claims (8)

1.一种用于治疗二型糖尿病的中药-益生菌组合物，根据权利要求所述的组合物，其特征在于，所述组合物包括以下原料：黄芪、蘑菇粉、苦荞、玉米须、南瓜籽、茯苓、白术、淮山药、葛根、长双歧杆菌和约氏乳杆菌。

2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述组合物包括以下重量份的原料：黄芪12-20份、蘑菇粉15-20份、苦荞15-20份、玉米须8-15份、南瓜籽8-15份、茯苓6-12份、白术2-10份、淮山药2-10份、葛根2-8份、长双歧杆菌1-3份和约氏乳杆菌1-3份。

3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述长双歧杆菌和约氏乳杆菌的有效活菌数比为1:1。

4.根据权利要求1或3所述的组合物，其特征在于，所述益生菌中长双歧杆菌的有效活菌数大于等于1×1011 CFU/g；所述益生菌中约氏乳杆菌的有效活菌数大于等于1×1011CFU/g。

5.根据权利要求1-4的任意一项所述的组合物在制备功能性食品或保健品中的应用；所述功能性食品或保健品的功效包括以下功效中的一种或几种：降低空腹血糖、减轻体重、降低血压、调节新陈代谢、抗炎、抗氧化、抗疲劳、抗衰老。

6.根据权利要求1-4的任意一项所述的组合物在制备预防和/或治疗二型糖尿病的产品中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述治疗二型糖尿病包括以下1-10）中的一种或几种：

1）降低空腹血糖；

2）减轻体重；

3）缓解肝脏组织损伤；

4）缓解胰腺组织损伤；

5）降低血清中糖化血红蛋白水平；

6）减少血清中炎症因子的表达；

7）缓解机体胰岛素抵抗；

8）调节机体糖代谢异常；

9）调节机体脂代谢异常；

10）改善肠道菌群。

8.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述功能性食品或保健品的剂型包括口服制剂。

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